CN112138153A - 一种重组带状疱疹疫苗组合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种重组带状疱疹疫苗组合物及其用途。本发明提供的新型疫苗组合物，相较其他抗原及佐剂的组合，具有更有益的免疫效果。

Description

一种重组带状疱疹疫苗组合物及其用途
技术领域
本发明属于生物医药领域，具体而言，本发明涉及一种重组带状疱疹疫苗组合物和用途。
背景技术
水痘带状疱疹病毒（varicella zoster virus，VZV）是八种人类疱疹病毒之一，也叫做3型人疱疹病毒。水痘-带状疱疹病毒遍布全球，具有很强的传染性，迄今只发现一种血清型，在自然界VZV仅感染人类。既可引发水痘，也可引发带状疱疹（herpes zoster，HZ），水痘通常见于儿童期，带状疱症则在成年以后才会发病。在原发感染水痘后，病毒可潜伏在宿主的神经节中，随着年龄增长、免疫功能受损或免疫抑制，VZV可以被重新激活并引发带状疱疹。带状疱疹临床表现为单侧性水泡样皮疹，明显的特征是仅局限于单一皮肤节段，通常伴神经根性疼痛。患者可有明显疼痛和不适，症状可持续数周或数月，在重症患者中甚至可持续数年，导致生活质量下降，极少数情况下带状疱疹也可无皮疹出现。约25%患带状疱疹的人会发生并发症，并且随着年龄的增长而增加。最常见的严重并发症是带状疱疹后神经痛（post-herpetic neuralgia, PHN ），即疱疹急性期后仍持续存在的疼痛，在带状疱疹患者中发生率为10%-30%，疼痛可持续数月甚至数年，严重影响患者生活质量。影响带状疱疹发病的危险因素有年龄、免疫功能缺陷、性别以及其他潜在因素。
大多数原发的VZV感染发生在童年，然后VZV潜伏在神经节中，成年后VZV可以被再激活。研究表明，约99%的40岁及以上的美国人有感染过VZV的血清学证据；90%的20-29岁的欧洲人抗VZV血清反应为阳性；在南美洲、澳大利亚和亚洲的一些国家，原发性VZV感染可能会发生得晚一些，但90%的40岁以上人群会出现VZV血清阳性反应。因此在全球范围内，绝大多数成年人都有发生带状疱疹及其相关并发症的危险。全球带状疱疹的发病率为（3~5）/1000人年，亚太地区为(3~10)/1000人年，并逐年递增2.5％~5.0％，住院率(2~25)/10万人年，死亡率(0.017~0.465)/10万人年，复发率1％~6%。目前我国属于高程度老年化状态，HZ带来的社会经济负担也在逐年加重，对个体而言，HZ给患者尤其是老年患者生活质量带来了巨大的负面影响。据国家统计局公布的数据估计2017年40岁以上人口约6.5亿，若按照HZ发病率为2.5/1000人年保守估计我国每年新发HZ约160万例。
由于药物治疗只能缓解症状，接种疫苗是预防HZ及其并发症的最佳策略。目前全球仅有2款HZ疫苗上市销售（HZ减毒活疫苗Zostavax和HZ亚单位疫苗Shingrix）。默沙东的Zostavax为减毒活疫苗，所含病毒株与水痘疫苗所用的VZV Oka株相同，该疫苗配方所采用的最低效力为19400 PFU，于2006年获得FDA批准上市，迄今已在60多个国家获准可在50岁以上人群中皮下接种1剂。葛兰素史克开发的Shingrix是一种基于重组gE蛋白辅以新型佐剂AS01B的亚单位疫苗，三期临床试验数据显示该亚单位疫苗在老年人中有着优于Zostavax的免疫原性和有效性，并于2017年获FDA批准上市，适用于50岁及以上人群，需接种2剂。目前Shingrix已被条件性批准在中国上市，但国内在研疫苗均为减毒活疫苗，其保护效力和免疫持久性会低于Shingrix，而Shingrix因产能等问题全球缺货，因此国内急需一种自主研发的亚单位疫苗帮助减少由带状疱疹及其并发症引起的疾病负担。
VZV特异性的免疫反应对减少带状疱疹发病率和带状疱疹后神经痛至关重要，葛兰素史克开发的Shingrix是一种基于新型佐剂AS01B的亚单位疫苗，已被证实可有效预防带状疱疹及其神经痛，该新型佐剂在此疫苗中起到了关键作用。因此，选择合适的佐剂来开发一种疫苗，从而提高目标人群中的细胞免疫和体液免疫反应，可有效预防带状疱疹。葛兰素史克的AS01B佐剂系统包含脂质体、MPL和QS-21，能引起很强的细胞免疫反应，但目前MPL和QS-21受来源限制生产规模有限，并且在国内规模化生产条件不成熟，无法满足后续临床使用需求。而CpG ODN可通过化学合成大规模生产，易于质控。 CpG ODN是Toll样受体9（toll-like receptor 9，TLR9）的激动剂，可以刺激表达TLR9的细胞并激活下游天然免疫反应通路，一方面诱导I型干扰素和炎症因子表达，另一方面使浆细胞样树突状细胞成熟，从而增强体液免疫和细胞免疫反应。铝佐剂是迄今为止使用最为广泛的人用疫苗佐剂，与其他佐剂组成的联合佐剂也有着广泛的应用，已完成临床二期试验的乙肝和疟疾预防性疫苗中均使用了铝佐剂和CpG 7909的联合佐剂。
尽管现有技术中已经开发了一些针对VZV的疫苗，然而还存在VZV蛋白表达效率低下，表达获得的蛋白活性低，免疫效果不理想等问题。因此，本领域还有必要开发改进的VZV疫苗产品。且从策略上来说，总是需要具有改进的免疫原性的新组合物或疫苗，例如从佐剂或制剂组合方面进行尝试和改进以提高免疫应答。
发明内容
本发明的一方面在于提供一种重组带状疱疹预防性疫苗，该疫苗中包含针对水痘带状疱疹病毒（VZV）的抗原。更具体地，上述抗原可为VZV病毒的gE蛋白。
本发明所述之VZV为双链DNA病毒，仅有一个血清型，基因组全长约125000 bp，编码71个基因， 最终表达67个不同的蛋白质，包括7种糖蛋白（Glycoprotein, gpI～gpVI），分别命名为gE、gB、gH、gI、gC、gK和gL，其中糖蛋白E（Glycoprotein E，gE蛋白）是VZV主要的表面结构蛋白以及最重要的中和抗原，具有较高的保守性。具体来说，VZV-gE糖蛋白由0RF68编码，有623个氨基酸组成，为I型跨膜糖蛋白。gE糖蛋白在病毒和感染细胞表面表达最为丰富，并兼有T、B细胞表位，所以针对VZV-gE的研究最为广泛，期望其成为新一代的亚单位水痘或带状疱疹疫苗中的抗原。
现有的VZV gE蛋白的研究可知，野生型VZV gE的蛋白分子包括有四个区域，即信号肽、胞外区、跨膜区和胞内区，而VZV gE的3个抗原决定簇均分布在胞外区(例如可参考文献Grose C. Glycoproteins encoded by varicella-zoster virus :biosynthesis,phosphorylation, and intracellular trafficking. Annu Rev Microbil. 1990,44 :59-80.)。在NCBI 数据库中，已有许多现有的gE蛋白序列（例如Sequence ID为Q9J3M8.1、AQT34120.1、AGY33616.1、AEW88548.1的氨基酸序列）可供本领域技术人员进行选择。本发明的发明人从NCBI上共检索到25条VZV gE蛋白的全长序列，分别来源于不同的病毒株，氨基酸序列分析和比对结果显示：其中7个病毒株的蛋白序列完全一致（AAK19946.1，AHB80298.1，Q9J3M8.1，ABE67176.1，AGL51024.1，AFO85645.1，ABF22079.1），且各位点保守性最高。故而这些序列均可以作为gE抗原蛋白的理想选择基础。
同时，考虑到疏水性跨膜区域对外源蛋白质表达的影响等因素，针对gE蛋白的改造手段也是成熟的，例如，为了提高蛋白的表达水平，一般将去除跨膜区（疏水区）和胞内区（例如专利CN102517302A）。同时，在利用载体细胞（宿主细胞）内的翻译机构翻译突变体蛋白前体并转移至细胞膜分泌到细胞外时，信号肽区域通常会被信号肽酶切断（例如专利CN102548578A，CN102711812B，以及文献GSK引用的文献）。作为本领域的常规技术手段，跨膜区、胞内区及信号肽均可通过相关应用软件进行预测，如可利用SignalP (http://www.cbs.dtu.dk/services/SignalP/)对蛋白质是否有信号肽进行预测分析，利用TMHMMServer V.2.0 软件预测蛋白的跨膜区域，利用PSORT软件则可确定分泌型信号肽的准确性以及该信号肽切割位点是否可被识别并切割。
为了开发本发明的目的，在本发明的实施例中，使用在NCBI上ID= Q9J3M8.1的作为基础，并截短C端77个氨基酸（去除开跨膜区和胞内区），作为模型抗原（N端1-30个氨基酸为信号肽）。
利用现代分子生物的常规技术手段可轻易地获得上述抗原，典型的方法包括：在CHO细胞中表达上述gE蛋白的方法，包括下述步骤：
(1) 将本发明的gE基因克隆入表达载体中；
(2) 将步骤(1)所得的表达载体转化至CHO细胞中；
(3) 通过迷你细胞群的筛选和单克隆筛选，获得稳定表达gE蛋白的细胞株；
(4) 使用步骤(3)所得的细胞株进行表达，获得VZV gE蛋白。
将上述获得的蛋白，经常规的处理方式，例如疏水层析、阴离子交换层析、羟基磷灰石层析、超滤和纳滤后可获得纯度为95%以上的抗原蛋白。
需要说明的是，使用CHO细胞株稳定表达VZV gE重组蛋白的方法是本领域众所周知的方法，具体可参照《分子克隆试验指南》及其他一些文献，例如Haumont M, 等人，VirusResearch 40 (1996) ，199-204 ，Purification, characterization andimmunogenicity of recombinant varicella-zoster virus glycoprotein gE secretedby Chinese hamster ovary cells。本领域技术人员也可以选择例如大肠杆菌、毕赤酵母等在内的其他表达方式获得gE蛋白（例如可参考专利CN108315344A或CN107022559A中关于gE蛋白制备的进一步介绍）。
在优选的实施方式中，所述疫苗组合物进一步包含药学上可接受的载体。在一个优选的实施方式中，所述药学上可接受的载体为铝佐剂联合CpG ODN佐剂。本发明的发明人惊讶地发现，上述两种佐剂和gE蛋白的联合将显示出令人惊奇的高免疫活性。从而使得本发明的疫苗组合物成为新一代的水痘带状疱疹疫苗。
本发明所述之铝佐剂是目前在疫苗中应用最为广泛的一类佐剂，有着80多年的应用历史和数百亿人次的使用记录，一度也是被美国食品和药品监督管理局（FDA)批准用于人类疫苗的唯一佐剂。目前已经有非常多将铝佐剂用于疫苗的研究，比较系统的研究可见于例如《Vaccine Design: The Subunit and Adjuvant Approach》一书（ISBN:0-306-44867-X）中的例如第八章《铝化合物及钙化合物的佐剂特性》以及第九章《铝佐剂的结构及特性》，或者《Vaccine Adjuvants: Preparation Methods and Research Protocols》一书（ISBN: 1-59259-083-7）中的例如第四章《铝化合物作为疫苗佐剂的使用》。目前已有一些商业化的铝佐剂可供使用于疫苗中，包括但不限于Alhydrogel®（氢氧化铝）以及Adju-Phos®（磷酸铝）。前述研究中也已经说明了如何制备铝佐剂的制备方式，本领域技术人员可根据需要制备所需的铝佐剂应用于疫苗制剂中。
CpG ODN佐剂为一类已知具有佐剂特性的免疫刺激性寡肽，能激活B细胞、NK、DC树突状等细胞，诱导释放IL-12、IFN-γ，从而诱导强Th1型应答和细胞免疫。该种佐剂也是本领域技术人员所熟知的，已经在现有技术，例如国际申请已经在例如WO 96/02555、WO 99/33488 中描述过。目前已有一些商业化的CpG ODN佐剂，例如CpG 7909(Coley公司)或CpG1018(Dynavax公司)。当然，本领域技术人员也可以根据需要设计人工合成序列。
本发明所提供的疫苗制剂的具体制备方式可参考例如《Vaccine Design: TheSubunit and Adjuvant Approach》一书（ISBN:0-306-44867-X）。作为最常规的方式之一，本发明所提供的制备方法为将本发明前述之抗原蛋白与前述药学上可接受的载体相混合。作为更具体的举例，在优选的一个实施例中，gE蛋白应最好吸附至铝佐剂上。同时，CpG ODN佐剂也最好吸附在铝佐剂上。
关于疫苗制剂剂量选择的一般原则，每一剂疫苗的量应能够在受接种者体内引起免疫保护性反应同时没有显著的毒副作用。一般而言，不同抗原蛋白的剂量均略有不同，可通过观察抗体滴度和受试者的其他反应来确定某一特定疫苗的最适剂量。本发明所提供的疫苗制剂，其抗原蛋白的含量约在10-100μg之间，更优选地在50-100μg之间，铝佐剂的含量约在100-600μg之间，更优选地，该含量在225-600μg之间，CpG ODN佐剂的含量约50-1200μg之间，更有选地，在300-900μg之间。
在本发明的第二方面，在于提供前述疫苗组合物的用途，用于预防或治疗带状疱疹病毒感染相关疾病或病症。
本发明的第三方面，在于提供一种试剂盒，该试剂盒中包含疫苗给予装置，包括但不限制于针头装置，液体喷射装置，粉末装置和喷雾装置。装置的选择主要基于不同的给药方式，常见的给药方式包括肌肉注射、腹膜内注射、皮内注射或皮下注射，或口腔/ 消化道、呼吸道和泌尿生殖道粘膜给药。本发明的疫苗常见的可通过肌肉注射的方式，常见的给予装置则是针头装置。常见地，可以单剂给药，其组分也可以同时或不同时联合施用。
本发明的发明人惊讶地发现，上述两种佐剂和gE蛋白的联合将显示出令人惊奇的高免疫活性。从而使得本发明的疫苗组合物成为新一代的水痘带状疱疹疫苗。
本发明的其它方面由于本文的公开内容，对本领域的技术人员而言是显而易见的。
具体实施方式
实施例1：含有VZV gE抗原蛋白的疫苗组合物的制备
为了研究本发明所提供的疫苗组合物之技术效果。本发明的发明人制成了以下多种疫苗组合物制剂（0.5ml/剂），每种组合物均含有VZV gE蛋白、铝佐剂以及CpG ODN佐剂。具体配制方法为：先将gE抗原原液吸附到铝佐剂（磷酸铝佐剂）上，制备成不同比例的gE抗原/铝佐剂（w/w）比例的吸附样品（此处的铝佐剂含量实质铝元素的含量）；然后向该gE抗原/铝吸附样品中加入不同浓度的CpG ODN样品（CpG 7909）。上述制剂充分混合后，如果不立即施用，则储存于4℃，具体比例如下：
表1
编号 gE（μg） 铝佐剂（μg） CpG ODN佐剂（μg） 体积(μl)
1 10 600 300 500
2 10 600 600 500
3 10 600 900 500
4 10 600 1200 500
5 50 600 300 500
6 50 600 600 500
7 50 600 900 500
8 50 600 1200 500
9 100 600 300 500
10 100 600 600 500
11 100 600 900 500
12 100 600 1200 500
13 0 600 1200 500
14 10 225 600 500
15 50 225 600 500
16 100 225 600 500
实施例2：
针对获得实施例1中待评价的重组带状疱疹疫苗组合物。发明人以C57BL/6小鼠为动物模型开展了免疫原性研究。以gE蛋白为抗原，以铝佐剂和CpG ODN为佐剂研究通过本发明提供的疫苗组合物之免疫原性。选择6-8周龄C57BL/6小鼠随机分组，每组10只小鼠，肌肉注射用gE蛋白联合佐剂制备的疫苗，设置疫苗组和佐剂组，0、3周免疫，第5周采血取脾脏。采用ELISA法检测血清中的抗VZV gE蛋白的结合抗体滴度即total IgG，采用ELISPOT法检测脾细胞中的细胞免疫水平，主要为IFN-γ的表达。同时，需要说明的是，除上述16组试验外，本申请的发明还进行过相同配比的平行试验，用于验证CpG ODN中1018与VZV gE蛋白、铝佐剂组成疫苗组合物后的效果，其他参数及试验步骤均不变。最终获得的数据显示，其IgG(GMT) 值与使用CpG 7909时基本相同，其IFN-γ值略低于CpG 1018，但无明显差距，例如对应组3，当CpG ODN为CpG 7909时，IFN-γ值=24，对应组4，为30，对应组9-11，为120、125、102。
免疫原性的评价方法为本领域的行规技术手段，作为举例，更具体的操作方式如下：
1、重组带状疱疹疫苗的动物实验
选择6~8周龄C57BL/6小鼠随机分组，每组10只。腹腔注射不同剂量的疫苗（表1），注射体积为0.05ml；0、3周免疫，第5周取血取脾脏，分离血清进行ELISA检测结合抗体滴度，分离脾淋巴细胞进行ELISPOT分析。
2、结合抗体滴度检测
取小鼠第二次免疫后2周血清，检测抗gE蛋白的结合抗体滴度。
(1) 抗原gE原液用PBS稀释至1μg/ml，ELISA板每孔加入100μl稀释好的原液。4℃过夜。洗板机清洗。
(2) 用PBS配置5%脱脂奶，ELISA板每孔加入100μl脱脂奶。37℃保温2小时。洗板机清洗。
(3) PBS配置2%脱脂奶，将待测血清梯度稀释，ELISA板每孔加入稀释血清100 μl，37℃保温1 小时。洗板机清洗。
(4) 用PBS配置的2%脱脂奶将羊抗鼠按1:10000比例稀释，ELISA板每孔加入100μl脱脂奶稀释的二抗。37℃保温1 小时。洗板机清洗。
(5) 按显色缓冲液9 ml，TMB 1ml，3% H2O2 10μl的比例配制显色液。ELISA板每孔加入100μl显色液。37℃保温10min。ELISA板每孔加入50μl终止液。
(6 ) 450nm/620nm读数。
3、细胞免疫检测
小鼠第二次免疫后2周，每组小鼠取脾，分离淋巴细胞。通过ELISPOT测定小鼠脾淋巴细胞（n=2）表达IFN-γ的水平。
(1) 包被ELISPOT板（无菌操作，取脾脏前一天进行）
35%的酒精润湿ELISPOT板，按15µl/孔的量加入96孔ELISPOT板中，保留时间不超过1分钟。加入200µl/孔无菌水洗板5次。取150µl的 IFN-γ包被抗体，加入10mlPBS中，混匀，0.2μm滤膜过滤。取包被抗体稀释液，100µl/孔加入96孔ELISPOT板中，4℃过夜。
(2) ELISPOT板封闭（无菌操作）
弃掉包被抗体，加入200µl/孔无菌PBS洗板5次。按200µl/孔的量将1640完全培养基（含10% FBS）加入到96孔ELISPOT板中，室温封闭30分钟以上。弃去液体，在灭菌的纱布上尽量扣干水分，以免下步加入培养基时产生气泡。
(3)淋巴细胞准备（无菌操作）
处死小鼠，浸泡于75%乙醇中。在超净台中取出小鼠脾脏。在35mm培养皿中放入一块儿烧过的200目铜网，加入1ml淋巴细胞分离液，用1ml注射器的推杆研磨。把悬有脾细胞的分离液经烧过的200目铜网过滤后，转移到15ml离心管中，加入淋巴细胞分离液至4ml，液面上覆盖0.5ml的RPMI1640基础培养基。室温、800g、升降速3、离心30分钟。吸出淋巴细胞层，再加入10ml RPMI1640基础培养基，洗涤，室温、250g、离心10分钟。弃去上清液，加入2mlRPMI1640完全培养基重悬细胞，计数。
(4) 加样（无菌操作）
加细胞：根据细胞计数结果用完全培养基稀释细胞至6×106/ml，同时mAb CD28-A稀释1000倍加入到细胞悬液中。100µl/孔加入ELISPOT板内。阳性对照：加入ConA刺激物1µl，刺激浓度为5µg/ml。待测样品：加入用无血清培养基进行稀释的刺激物gE蛋白肽库，终浓度2µg/ml；阴性对照：不加ConA刺激物，也不加刺激物短肽。37℃ 5%CO2培养24小时，期间不可移动培养板以免造成细胞位置的变动进而ELISPOT斑点的变模糊。
(5)斑点检测
弃掉细胞悬液，加入200µl/孔无菌PBS洗板5次。取50μl生物素标记检测抗体加入到10ml稀释液（PBS+0.1%BSA）中，混匀，0.2μm滤膜过滤。每孔加入100μl，37℃ 孵育2小时。弃掉生物素标记检测抗体稀释液，加入200µl/孔无菌PBS洗板5次。用稀释液（PBS+0.1%BSA）稀释抗体，取50μl加稀释液10ml，混匀，0.2μm滤膜过滤。每孔加入100μl，37℃ 孵育1小时。从此步骤开始避光操作。弃掉抗体稀释液，加入200µl/孔无菌PBS洗板5次。按50µl/孔的量加入Fluorescence enhancer-II到96孔ELISPOT板中，37℃ 孵育15分钟。弃掉板内液体，将板倒扣在吸水纸上，拍干细小的水珠。取下保护层，放在电热恒温培养箱中，37℃避光将膜烘干。将ELISPOT 板置于CTL-ImmunoSpot® S5 VersC CnClyzer酶联斑点图像自动分析仪内，调节好合适的参数，进行斑点计数。
具体结果如下表2所示：
表2 抗原、铝佐剂和CpG ODN佐剂配比研究结果汇总
编号 Ge(μg) 铝佐剂(μg) CpG ODN佐剂(μg) 注射体积(μl) IgG(GMT) IFN-γ（每百万个脾细胞中阳性细胞个数
1 10 600 300 50 1:4095000 73
2 10 600 600 50 1:1236000 43
3 10 600 900 50 1:2297000 72
4 10 600 1200 50 1:2178000 54
5 50 600 300 50 1:2702000 128
6 50 600 600 50 1:2169000 139
7 50 600 900 50 1:2862000 86
8 50 600 1200 50 1:2345000 91
9 100 600 300 50 1:4000000 157
10 100 600 600 50 1:2297000 175
11 100 600 900 50 1:2862000 183
12 100 600 1200 50 1:3194000 121
13 0 600 1200 50 1:100 3
14 10 225 600 50 1:1888000 61
15 50 225 600 50 1:2551000 100
16 100 225 600 50 1:1764000 152
表3 抗原、铝佐剂和CpG1018配比研究结果汇总
编号 gE(μg) 铝佐剂(μg) CpG 1018佐剂(μg) 注射体积(μl) IgG (GMT) IFN-γ（每百万个脾细胞中阳性细胞个数
1 10 600 300 50 1:1888000 80
2 10 600 900 50 1:2551000 24
3 10 600 1200 50 1:1764000 30
4 100 600 300 50 1:4095000 120
5 100 600 900 50 1:2491000 125
6 100 600 1200 50 1:1037000 102
7 0 600 1200 50 1:100 6
从表2-3中可知，根据本发明所提供的特定组分及比例制备而得的疫苗组合物，具有良好的免疫活性，尤其是当gE蛋白的含量在50-100μg之间，铝佐剂的含量在225-600μg之间，CpG ODN佐剂的含量在300-900μg之间时，其具有优异的细胞免疫效果，可作为新一代疫苗组合物。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (10)

1.一种重组带状疱疹疫苗组合物，其特征在于，所述重组带状疱疹疫苗组合物包含VZV病毒的gE蛋白。
2.如权利要求1所述的疫苗组合物，其特征在于，所述疫苗组合物进一步包含药学上可接受的载体。
3.如权利要求2所述的疫苗组合物，其特征在于，所述药学上可接受的载体为铝佐剂联合CpG佐剂。
4.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述gE蛋白的含量在10-100μg之间，更优选地在50-100μg之间。
5.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述铝佐剂的含量约在100-600μg之间，更优选地，在225-600μg之间。
6.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述CpG佐剂的含量约50-1200μg之间，更有选地，在300-900μg之间。
7.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述gE蛋白的含量在10-100μg之间，所述铝佐剂的含量约在100-600μg之间，所述CpG佐剂的含量约50-1200μg之间。
8.如权利要求3所述的疫苗组合物，其特征在于，所述gE蛋白的含量在50-100μg之间，所述铝佐剂的含量约在225-600μg之间，所述CpG佐剂的含量约300-900μg之间。
9.如以上任一权利要求所述的疫苗组合物在用于预防带状疱疹病毒感染相关疾病中的用途。
10.一种试剂盒，其包含如以上任一权利要求所述的疫苗组合物，其特征在于，所述试剂盒包含疫苗给予装置，所述给予装置包括针头装置，液体喷射装置，粉末装置和喷雾装置。
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