CN112063554B - 一种生物防治菌Pantoea jilinensis D25及其应用 - Google Patents

一种生物防治菌Pantoea jilinensis D25及其应用 Download PDF

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Abstract

一株生物防治菌Pantoea jilinensis D25及其在制备植物病原菌防治剂方面的应用，属于农业微生物学技术领域。该菌株已于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏日期为2020年6月29日，保藏编号为CCTCC NO：M2020245，分类命名为Pantoea jilinensis D25。实验表明其菌株或其发酵物滤液可有效抑制番茄灰霉病菌的生长。实验结果表明，D25菌株发酵液对番茄灰霉病抑制率为80.6％；D25菌株发酵液对番茄灰霉病的预防试验中，防治效果为79.16％；D25菌株发酵液对番茄灰霉病的治疗65.79％。从而可有效防治番茄灰霉病。与目前使用化学合成农药防治相比,由于其来自于自然环境,具有高效、低毒、不污染环境和不易产生抗药性等优点,具有广阔的应用前景和良好的实际应用之价值。

Description

一种生物防治菌Pantoea jilinensis D25及其应用
技术领域
本发明属于农业微生物学技术领域，具体涉及一株生物防治菌Pantoeajilinensis D25及其在制备植物病原菌防治剂方面的应用。
背景技术
番茄灰霉病是由半知菌亚门的灰葡萄孢菌(Botrytis cinerea)引起的一种重要的世界性番茄病害。发病严重时造成减产减收，甚至绝收。该病害在我国各地普遍发生，且呈上升趋势，已成为番茄生产和储藏中的主要限制因素。
长期以来，防治番茄灰霉病的方法主要是大量施用化学农药和选育抗病品种，但是灰霉病菌繁殖快、变异度大等特点使得化学药剂极易产生抗药性，加之品种的抗病程度不高、人们对抗药性及食品安全问题的认识提高等，使得利用生物防控防治灰霉病菌的方法越来越受到关注。微生物农药与化学农药相比，具有选择性强、无污染、不易产生抗药性、不破坏生态环境等特点，现已成为研究热点。
泛菌属(Pantoea spp.)具有分布广泛、抗逆性强、易于培养等优良特征。因此，生物防治泛菌属及其制剂在植物病害绿色防控中具有广阔的应用前景。现有研究报道泛菌属可提高水稻植株的抗病能力，可用来防治植物的病害等。
目前，用于防治番茄灰霉病的泛菌属鲜有报道。因此，本发明为寻找新的菌株用于番茄灰霉病的防治提供了较大的理论基础。
发明内容
本发明的目的在于提供了一株生物防治菌Pantoea jilinensis D25，其保藏编号为CCTCC NO：M2020245，分类命名：吉林泛菌D25(Pantoea jilinensis D25)。
本发明的另一个目的在于提供了上述生物防治菌Pantoea jilinensis D25在制备植物病原菌防治剂方面的应用，特别是在制备番茄灰霉病(Botrytis cinerea)防治剂方面的应用。
为了达到上述目的，本发明采取以下技术措施：
本发明的Pantoea jilinensis D25分离自吉林省长春市番茄根际土壤，该菌株已送至中国典型培养物保藏中心保藏，保藏日期为2020年6月29日，保藏编号为CCTCC NO：M2020245，分类命名为Pantoea jilinensis D25，地址：中国湖北省武汉市武汉大学(430072)。菌落特性：菌落呈黄色、圆形、表面光滑、湿润、凸起、不透明(图1)。
Pantoea jilinensis D25的应用，包括利用该菌株制备的植物病原菌防治剂，所述的植物病原菌包括但不限于：番茄灰霉病(Botrytis cinerea)、玉米大斑病(Exserohilum turcicum)、甘薯黑斑病(Ceratocystis fimbriata)、大豆疫霉病(Phytophthora sojae Kaufmann&Gerdemann)、大豆夹秆枯萎病(Phomopsis sojae)、玉米小斑病(Bipolaris maydis)、棉花枯萎病(Fusarium oxysporum)。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：利用本发明提供的Pantoea jilinensisD25可有效抑制番茄上重要病原菌生长，且抑制效果较好。避免化学防治对环境和作物安全的潜在不良影响。
附图说明
图1为D25菌株菌落特点示意图(LB，30℃，16h)；
图2为D25菌株扫描电镜图(LB，30℃，16h；图2A为多个D25菌株的扫描电镜图；图2B为单个D25菌株的扫描电镜图)；
图3为D25菌株系统发育树(基于16S rDNA序列)；
图4为D25菌株的生长曲线(LB，30℃，32h)；
图5为D25菌株与番茄灰霉病的对峙培养示意图(PDA，25℃,7d)；
图6为D25菌株与多种病原菌的对峙培养示意图(PDA，25℃,7d；AB表示甘薯黑斑病、CD表示大豆夹秆枯萎病、EF表示大豆疫霉病、GH表示玉米小斑病、IJ表示棉花枯萎病、KL表示玉米大斑病；其中ACEGIK为对照组、BDFHJL为处理组)；
图7为不同浓度D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用曲线(PDA，25℃,7d)；
图8为不同浓度D25菌株对番茄灰霉病菌丝生长量的抑制作用曲线(PDA，25℃,7d)；
图9为D25菌株对番茄灰霉病菌丝形态的影响结果照片(PDA，25℃,2d；A：正常生长下，番茄灰霉病菌丝生长的形态。B：利用D25菌株处理后的番茄灰霉病菌丝生长的形态)；
图10为不同浓度D25菌株对番茄灰霉病孢子产生量的抑制作用曲线(PDA，25℃,7d)；
图11为D25菌株在不同温度下对番茄灰霉病的抑制作用曲线(PDA，25℃,7d)；
图12为D25菌株在不同pH下对番茄灰霉病的抑制作用曲线(PDA，25℃,7d)；
具体实施方式
为了更好地解释本发明，以下结合具体实施例进一步阐明本发明的主要内容，但本发明的内容不仅仅局限于以下实施例。本发明实施例所涉及的技术方案，如未特别说明，均为本领域常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。
实施例1：Pantoea jilinensis D25(D25菌株)的分离鉴定及生物学特性分析
一、菌株的分离及其生物学特性分析
从吉林农业大学试验站采集的番茄根际土壤样品，将10g土壤样品，放入盛有90mL无菌水的三角瓶中置于30℃、150r·min-1摇床上震荡30min，使之充分混匀。将样品静置10min后，吸取1mL上清液，用无菌水将其逐级稀释(为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7梯度浓度的悬浮液，每个浓度梯度悬浮液吸取100μL滴到NA固体培养基中央，用涂布器涂匀，使NA固体培养基充分吸收，每个梯度重复3次，平板倒置于30℃恒温培养箱培养2天。挑取形态不同的细菌菌落经LB固体培养基划线、纯化后编号保存。将纯化的细菌进行对峙实验，并筛选出一株对番茄灰霉病具有较高抑制作用的菌株，将其命名为Pantoea jilinensisD25。
所述NA固体培养基为：牛肉膏30.0g、蛋白胨50.0g、氯化钠30.0g、琼脂20.0g、蒸馏水1000mL。
所述的LB固体培养基为：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化钠10g、琼脂粉20g、蒸馏水1000mL。
二、菌株的形态学特征
(1)菌落特征
菌株D25培养16h，菌落呈黄色、圆形、表面光滑、湿润、凸起、不透明。(图1)
(2)扫描电镜观察结果
该菌株电镜观察为表面不光滑，杆状细菌。(图2)
三、生理生化特征分析
参考《微生物学实验》(沈萍，范秀容，李广武.微生物学实验(第三版).北京：高等教育出版社，1999.)和《常见细菌系统鉴定手册》(东秀珠，蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册.北京：科学出版社，2011.)测定D25菌株的生理生化特征。
测定结果显示，该菌株革兰氏、甲基红反应、精氨酸双水解反应、明胶液化反应、H2S反应呈阴性，氧化酶、接触酶、V-P、尿酶反应均呈阳性、能够利用柠檬酸盐和硝酸盐，可产生吲哚。
四、菌株D25的分类属性鉴定
采用通用引物聚合酶链反应(PCR)扩增16S rDNA基因，引物为27F(5‘-AGAGTTGATCCTGCTCAG-3’)，1492R(5‘-GTTACCTTTACGACTT-3’)。50μL扩增体系：Premix taq25μL，模版(克雷白氏菌DNA)500ng，1492R、27F各10μL，用无菌水补足50μL。PCR循环参数为：95℃预加热5min，95℃变性30s，56℃退火30s，72℃延伸1.5min，72℃下延伸10min，用1％琼脂糖凝胶电泳和EasyPure凝胶进行纯化。提取试剂盒(转基因生物技术有限公司，北京，中国)，然后由生工生物技术有限公司进行测序。(中国上海)。PCR产物用V-gene核酸纯化试剂盒(TIANGEN)纯化回收16S rDNA片段，将DNA洗脱至收集管中，4℃冷藏。将测序结果委托上海生工工程有限公司完成。测序结果用Blast软件Genbank中的16S rDNA序列进行同源性比较。获得D25菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示，该菌株的16S rDNA序列已经提交到GenBank数据库，并构建生物防治菌的系统发育树，确定D25为泛菌属的新种，并命名为Pantoea jilinensis D25(图3)。
该菌株已送至中国典型培养物保藏中心保藏，保藏编号为CCTCC NO：M2020245，分类命名：Pantoea jilinensis D25，地址：中国武汉，武汉大学。在本发明中，将Pantoeajilinensis D25简写为D25菌株。
实施例2：D25菌株纯化、发酵培养以及生长曲线的绘制
(1)菌株活化：将4℃冰箱保存的D25菌株斜面用无菌的接种针挑取菌落，接种于LB固体培养基上，30℃恒温箱中培养16h。
(2)菌株培养：将步骤(1)中培养16h的D25菌株转接至新鲜的LB固体培养基上，30℃恒温箱中培养16h。
(3)菌株发酵：用接种环将步骤(2)中的D25菌株接种于LB液体培养基中，150rpm、30℃振荡培养至对数期(OD600＝0.5)，获得种子液。吸取0.5mL的种子液转入含有100mL LB液体培养基的三角瓶中，150rpm、30℃振荡培养3天，7000rpm，离心5min，将离心得到的菌体用无菌水调至浓度为1×108cfu/mL，制得发酵液。用于以下实施例。
所述的LB液体培养基为：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化钠10g、蒸馏水1000mL。
所述的LB固体培养基为：胰蛋白胨10g、酵母浸粉5g、氯化钠10g、琼脂粉20g、蒸馏水1000mL。
(4)生长曲线的绘制
将4℃保存的D25菌株，用接种环挑取菌株D25接种于含有100mL LB液体培养基的三角瓶中，30℃、150rpm下培养至对数期(OD600＝0.5)，制备种子液。吸取0.5mL种子液转接于100mL的LB液体培养基中，每隔两小时测定菌液的OD600值，连续测定34h，绘制生长曲线(图4)。
实施例3：D25菌株抑菌谱的测定
将D25菌株制备成1×108cfu/mL菌液，按照100mL PDA固体培养基中加入0.5mL的比例制备含菌液的PDA固体培养基，待PDA固体培养基凝固后，将培养基中央分别接种直径为5mm的番茄灰霉病(Botrytis cinerea)、玉米大斑病(Exserohilum turcicum)、甘薯黑斑病(Ceratocystis fimbriata)、大豆疫霉病(Phytophthora sojae Kaufmann&Gerdemann)、大豆夹秆枯萎病(Phomopsis sojae)、玉米小斑病(Bipolaris maydis)、棉花枯萎病(Fusarium oxysporum)的病原菌饼。以不含菌液的PDA固体培养基中央接种直径为5mm的上述病原菌饼为对照。在28℃培养7天，观察抑菌情况，计算抑制率。每个处理重复3次，实验重复两次。
所述的PDA固体培养基为：葡萄糖20g、琼脂粉20g、马铃薯200g、蒸馏水1000mL。
抑制率(％)＝(对照组的菌落直径-处理组的菌落直径)/对照组的菌落直径×100。
7天后，测定对照组与处理组的菌落直径。可以得出，D25菌株对多种病原菌均有明显的抑制作用。图5为D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用，计算其抑制率为80.6％。图6为D25菌株对多种病原菌的抑制作用，其中，A与B为甘薯黑斑病(Ceratocystis fimbriata)。A为对照组，B为处理组，D25菌株对其抑制率为72.1％；C与D为大豆夹秆枯萎病(Phomopsissojae)，C为对照组，D为处理组，D25菌株对其抑制率为59.7％。E与F为大豆疫霉病(Phytophthora sojae Kaufmann&Gerdemann)，E为对照组，F为处理组，D25菌株对其抑制率为78.4％。G与H为玉米小斑病(Bipolaris maydis)，G为对照组，H为处理组，D25菌株对其抑制率为69.2％。I与J为棉花枯萎病(Fusarium oxysporum)，I为对照组，J为处理组，D25菌株对其抑制率为74.8％。K与L为玉米大斑病(Exserohilum turcicum)，K为对照组，L为处理组，D25菌株对其抑制率为54.8％。
实施例4：D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用
用接种环挑取D25菌株单菌落，接种于100mL的LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养至对数期(OD600＝0.5)，制备种子液。吸取0.5mL种子液转接于100mL LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养16h，离心，弃上清液，用无菌水洗菌3次，获得菌体，将菌液的浓度调为1×104cfu/mL、1×105cfu/mL、1×106cfu/mL、1×107cfu/mL、1×108cfu/mL，备用。按照100mLPDA固体培养基中添加0.5mL菌液的比例，制备含有生物防治菌发酵液的PDA固体培养基，将生长良好的5mm的病原菌菌饼接种于PDA固体培养基的中央，同时设置空白对照，28℃培养7天，观察抑菌情况，计算抑制率。处理重复3次，实验进行两次。
抑制率(％)＝(对照组菌落直径-处理组菌落直径)/对照组菌落直径×100
7天后，测定对照组与处理组的菌落直径。如图7所示，随着菌液浓度的升高，番茄灰霉病的菌落直径不断下降。当菌液浓度为1×104cfu/mL时，抑制率为39.2％；当菌液浓度为1×105cfu/mL时，抑制率为53.7％；当菌液浓度为1×106cfu/mL时，抑制率为64.8％；当菌液浓度为1×107cfu/mL时，抑制率为72.1％；在菌液浓度为1×108cfu/mL时，抑制为80.6％。
实施例5：D25菌株对番茄灰霉病菌丝生长量的抑制作用
用接种环挑取D25菌株单菌落，接种于100mL的LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养至对数期(OD600＝0.5)，制备种子液。吸取0.5mL种子液转接于100mL LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养16h，离心，弃上清液，用无菌水洗菌3次，获得菌体，将菌液的浓度调为1×104cfu/mL、1×105cfu/mL、1×106cfu/mL、1×107cfu/mL、1×108cfu/mL，备用。按照100mLPDA固体培养基中添加0.5mL菌液的比例，制备含有生物防治菌发酵液的PDA固体培养基，将生长良好的5mm的病原菌菌饼接种于PDA固体培养基的中央，同时设置空白对照，28℃培养7天，将菌丝用无菌的刀片刮下，称重，计算抑制率。处理重复3次，实验进行两次。
抑制率(％)＝(对照组菌丝的重量-处理组菌丝的重量)/对照组菌丝的重量×100
7天后，测定对照组与处理组的菌丝重量。如图8所示，随着菌液浓度的升高，番茄灰霉病菌丝重量不断下降。当菌液浓度为1×104cfu/mL时，抑制率为30.8％；当菌液浓度为1×105cfu/mL时，抑制率为48％；当菌液浓度为1×106cfu/mL时，抑制率为53.8％；当菌液浓度为1×107cfu/mL时，抑制率为69.2％；在菌液浓度为1×108cfu/mL时，抑制为84.6％。
实施例6：D25菌株对番茄灰霉病菌丝形态的影响
用接种环挑取D25菌株单菌落，接种于100mL的LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养至对数期(OD600＝0.5)，制备种子液。吸取0.5mL种子液转接于100mL LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养16h，离心，弃上清液，用无菌水洗菌3次，获得菌体，将菌液的浓度调为1×108cfu/mL，备用。按照100mL PDA固体培养基中添加0.5mL菌液的比例，制备含有生物防治菌发酵液的PDA固体培养基，将生长良好的5mm的病原菌菌饼接种于PDA固体培养基的中央，同时设置空白对照，28℃培养2天，将菌饼取下，放置于光学显微镜下进行观察，观察菌丝形态上的变化。处理重复三次，实验进行两次。
在低倍镜下，就可以观察到处理组和对照组的菌丝有明显的差异。处理组的菌丝有向上生长的趋势，向四周生长的趋势较小，菌丝较短，且密集(图9A)。而对照组的菌丝，向四周生长的趋势较为明显，菌丝较长，菌丝分布的较稀疏(图9B)。
实施例7：D25菌株对番茄灰霉病孢子产生量的抑制作用
用接种环挑取D25菌株单菌落，接种于100mL的LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养至对数期(OD600＝0.5)，制备种子液。吸取0.5mL种子液转接于100mL LB液体培养基中，30℃、150rpm下培养16h，离心，弃上清液，用无菌水洗菌3次，获得菌体，将菌液的浓度调为1×104cfu/mL、1×105cfu/mL、1×106cfu/mL、1×107cfu/mL、1×108cfu/mL，备用。按照100mLPDA固体培养基中添加0.5mL菌液的比例，制备含有生物防治菌发酵液的PDA固体培养基，将生长良好的5mm的病原菌菌饼接种于PDA固体培养基的中央，同时设置空白对照，28℃培养5天，用无菌水将孢子冲下，利用血球计数板确定孢子的数量，计算抑制率。
抑制率(％)＝(对照组孢子的数目-处理组孢子的数目)/对照组孢子的数目×100
随着D25菌株浓度的增加，对番茄灰霉病孢子的产生量，也具有较大的影响。如图10所示，随着菌液浓度的升高，抑制作用增大，当菌液浓度为1×104cfu/mL时，抑制率为36％；当菌液浓度为1×105cfu/mL时，抑制率为48％；当菌液浓度为1×106cfu/mL时，抑制率为56％；当菌液浓度为1×107cfu/mL时，抑制率为64％；在菌液浓度为1×108cfu/mL时，番茄灰霉病孢子的数目仅为75840个，此时的抑制率为76％。
实施例8：D25菌株在不同温度下对番茄灰霉病的抑制作用
用接种环挑取D25菌株单菌落，接种于在100mL LB液体培养基中，过夜培养16h，将菌液的浓度调整为1.0×108cfu/mL，吸取菌液0.5mL，加入100mL PDA固体培养基中，从而制备含有D25菌株的PDA固体培养基。在活化好的番茄灰霉病菌的培养物边缘打菌饼，将菌饼置于PDA固体培养基中央，同时做空白对照，将其分别在20℃、25℃、30℃、35℃、40℃下培养7天，观察抑菌情况，计算D25菌株对番茄灰霉病的抑制率。每个处理重复三次。
抑制率(％)＝(对照组菌落直径-处理组菌落直径)/对照组菌落直径×100
7天后，测定对照组与处理组的菌落直径。如图11所示，随着温度的升高，D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用呈现先上升后下降的趋势，当温度为25℃时，D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用达到最大，抑制率为81.4％。
实施例9：D25菌株在不同pH下对番茄灰霉病的抑制作用
用接种环挑取D25菌株单菌落，接种于100mL LB液体培养基中，过夜培养16h，将菌液浓度调整为1.0×108cfu/mL，吸取菌液0.5mL，加入到pH分别为2、3、4、5、6、7、8、9、10的100mL PDA固体培养基中，从而制备含有D25菌株的PDA固体培养基。在活化好的番茄灰霉病菌的培养物边缘打菌饼，将菌饼置于PDA固体培养基中央，同时做空白对照，将其在28℃培养7天，观察抑菌情况，计算D25菌株对番茄灰霉病的抑制率。每个处理重复三次。
抑制率(％)＝(对照组菌落直径-处理组菌落直径)/对照组菌落直径×100
7天后，测定对照组与处理组的菌落直径。由图12所示，随着pH的升高，D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用呈现先上升后下降的趋势，当pH为6时，D25菌株对番茄灰霉病的抑制作用达到最大，抑制率为80.3％。
实施例10：D25菌株发酵液对番茄灰霉病的盆栽预防效果
采用叶面喷雾的方法，以番茄灰霉病菌(Botrytis cinerea)为供试病原菌，测定该菌株对番茄灰霉病菌的预防效果和治疗效果。每处理12株，重复3次。
D25菌株发酵液的制备：将-80℃冰箱中超低温冷冻保存的菌株D25取出，接种在LB固体培养基上，30℃活化培养24h。用接种环挑取菌株菌落，接入100mL(250mL三角瓶)的LB培养液中，30℃，150r/min振荡培养16h，制备D25菌株发酵液，调整D25菌株发酵液的最终浓度为1×108cfu/mL。
番茄灰霉病菌孢子悬浮液的制备：在培养7天的番茄灰霉病的PDA固体培养基中，加入适量吐温80的蒸馏水，轻轻振荡30min，将菌悬液倒出，用血球计数板将分生孢子浓度调整为106个/mL，备用。
预防效果的测定方法：将D25菌株发酵液喷于植株体，以叶片上布满药液且不滴水为度。处理后24h喷接种番茄灰霉病菌孢子悬浮液于各处理植株，于25℃下保湿，同时设置对照试验，处理后第7天调查发病情况，按农药田间药效实验准则的标准进行病害分级，并计算病情指数和防治效果。
分级标准：
0级：无病症；
1级：接种点出现轻微的病斑且不扩展，病斑面积占叶片总面积的10％以下；
2级：病斑面积占叶片总面积的20％以下；
3级：坏死斑面积占叶片总面积的30％以下，接种点黄化面积占叶片总面积的50％以下；
4级：坏死斑面积占叶片总面积的30％-60％；
5级：坏死斑面积占叶片总面积的60％以上。
病情指数＝∑(各级病叶数×病级数)/(调查总叶数×最高病级数)×100
防治效果＝(对照病情指数-处理病情指数)/对照病情指数×100％
治疗效果的测定：先将番茄灰霉病菌孢子悬浮液喷于接种番茄植株，于25℃下保湿24h后，将D25菌株发酵液喷于处理植株，同时设置对照试验，喷雾处理后第7天调查发病情况并计算病情指数和防治效果。
处理7天后，调查病情指数和防治效果。可以得出，在预防试验中，防治效果可达到79.16％。在治疗试验中，防治效果可达到65.76％。所以，D25菌株可以较好的防治番茄灰霉病。
表1：D25菌株对番茄灰霉病的预防和防治效果试验数据
Figure BDA0002666261870000091
注：表中数据为平均数±标准差。
<110> 吉林农业大学
<120> 一种生物防治菌Pantoea jilinensis D25及其应用
<160> 1
<210> SEQ ID NO.1
<211> 802
<212> DNA
<213> Pantoea jilinensis D25 16S rRNA
<220> 1
<221>rRNA
<400> 1
AACAATCGGC TTACGGCGTG GACTACCAGG GTATCTAATC CTGTTTGCTC CCCACGCTTT 60
CGCACCTGAG CGTCAGTCTT TGTCCAGGGG GCCGCCTTCG CCACCGGTAT TCCTCCAGAT 120
CTCTACGCAT TTCACCGCTA CACCTGGAAT TCTACCCCCC TCTACAAGAC TCAAGCCTGC 180
CAGTTTCAAA TGCAGTTCCC AGGTTAAGCC CGGGGATTTC ACATCTGACT TAACAGACCG 240
CCTGCGTGCG CTTTACGCCC AGTAATTCCG ATTAACGCTT GCACCCTCCG TATTACCGCG 300
GCTGCTGGCA CGGAGTTAGC CGGTGCTTCT TCTGCGGGTA ACGTCAATCG ATGCGGTTAT 360
TAACCACATC GCCTTCCTCC CCGCTGAAAG TACTTTACAA CCCGAAGGCC TTCTTCATAC 420
ACGCGGCATG GCTGCATCAG GCTTGCGCCC ATTGTGCAAT ATTCCCCACT GCTGCCTCCC 480
GTAGGAGTCT GGACCGTGTC TCAGTTCCAG TGTGGCTGGT CATCCTCTCA GACCAGCTAG 540
GGATCGTCGC CTAGGTGGGC CATTACCCCG CCTACTAGCT AATCCCATCT GGGTTCATCC 600
GATAGTGAGA GGCCCGAAGG TCCCCCTCTT TGGTCTTGCG ACGTTATGCG GTATTAGCCA 660
CCGTTTCCAG TGGTTATCCC CCTCTATCGG GCAGATCCCC AGACATTACT CACCCGTCCG 720
CCACTCGTCA CCCAAGAGCA AGCTCTCTGT GCTACCGTCC GACTTGCATG TGTTAGGCCT 780
GCCGCCAGCG TTCAATCTGA GC 802
核苷酸或氨基酸序列表

Claims (3)

1.一株生物防治菌Pantoea jilinensis D25，该菌株已于中国典型培养物保藏中心保藏，保藏日期为2020年6月29日，保藏编号为CCTCC NO：M2020245，分类命名为Pantoea jilinensis D25。
2.权利要求1所述的一株生物防治菌Pantoea jilinensis D25在制备植物病原菌防治剂方面的应用。
3.如权利要求1所述的一株生物防治菌Pantoea jilinensis D25在制备植物病原菌防治剂方面的应用，其特征在于：植物病原菌为番茄灰霉病(Botrytis cinerea)、玉米大斑病(Exserohilum turcicum)、甘薯黑斑病(Ceratocystis fimbriata)、大豆疫霉病(Phytophthora sojae Kaufmann&Gerdemann)、大豆夹秆枯萎病(Phomopsis sojae)、玉米小斑病(Bipolaris maydis)或棉花枯萎病(Fusarium oxysporum)。
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