CN112043749A - 黄花倒水莲提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了黄花倒水莲提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。动物试验结果表明:黄花倒水莲提取物包括水提取物和乙醇提取物能够改善溃疡性结肠炎小鼠动物模型的体重、饮食量以及脾脏和胸腺系数、降低疾病活动指数(DAI)、增加结肠长度,表明黄花倒水莲提取物对溃疡性结肠炎具有治疗作用。
Description
技术领域
本发明属于涉及黄花倒水莲提取物的一种制药新用途,尤其是在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的用途,属于制药领域。
背景技术
黄花倒水莲(Polygala fallax Hemsl.)为远志科远志属落叶灌木植物的根,又名假黄花远志、黄花参、倒吊黄等,生长于山谷林下水旁荫湿处,主要产于湖南、江西,福建、贵州、广西桂北等地区。本品味甘微苦,性平微温,具有补气血、健脾利湿、活血散瘀的功效,可用于产后或病后体虚、劳倦乏力、脾虚水肿、月经不调、子宫脱垂、腰腿疼痛、跌打损伤、急慢性肝炎等。黄花倒水莲为壮、瑶、苗族等少数名族的常用药,也被作为草药中的“党参”、“黄芪”来使用,为少数民族药食两用药材。近年来黄花倒水莲的药用价值被逐渐重视。
溃疡性结肠炎(Ulcerative Colitis,UC)是一种以腹痛、腹泻、黏液脓血便等为主要症状的主要累及结肠、直肠的慢性非特异性炎症性疾病。属于中医“泄泻”“痢疾”“肠澼”等范畴,早在《黄帝内经》就有“肠澼便血”、“肠澼下白沫”、“食饮不节,起居不时,久为……肠澼”的论述。溃疡性结肠炎与肠道菌群改变、黏膜免疫屏障功能降低、上皮细胞的自身免疫反应等有关,常反复发作,严重影响患者的生活质量,且溃疡性结肠炎有癌变的高风险,被世界卫生组织列为现代难治病之一。溃疡性结肠炎的基础治疗方式主要为5-氨基水杨酸类药物的口服或直肠给药,其次是免疫抑制剂、糖皮质激素、抗生素、整合素单克隆抗体、抗肿瘤坏死因子á、益生菌、以及Omega-3脂肪酸等,并可通过结肠切除术治疗。但长期药物治疗会引起显著的不良反应,如肝肾毒性、骨髓抑制、急性胰腺炎、诱发恶性肿瘤等。目前的当务之急是找到能有效控制病情,且药物不良反应少,患者依从性高的治疗方式。
黄花倒水莲作为药食两用药材,已在民间广泛应用,食用历史悠久、自然资源丰富,无副作用报道。现代药理研究表明,具有良好的抗氧化、抗衰老、抗病毒、抗肿瘤及调脂等作用。现有技术中未见黄花倒水莲在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种黄花倒水莲提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的新用途。
动物试验结果表明:黄花倒水莲提取物(包括水提取物和乙醇提取物)能够改善溃疡性结肠炎小鼠动物模型的体重、饮食量以及脾脏和胸腺系数、降低疾病活动指数(DAI)、增加结肠长度,表明黄花倒水莲提取物对溃疡性结肠炎具有治疗作用。
试验结果还表明:黄花倒水莲醇提取物对溃疡性结肠炎的治疗活性高于水提取物,其中60%乙醇提取物的活性相对更高。另外,醇提取物脱脂后的正丁醇部位由于进一步富集了活性成分和减少了杂质,因此与纯化前的提取物相比具有更好的疗效、更少的副作用和更低的服用剂量。
综上,黄花倒水莲提取物在治疗溃疡性结肠炎方面具有很好的应用前景。
附图说明
图1是实施例3中测量各组动物结肠长度的实物照片,从左到右依次为正常组、模型组、高剂量组、中剂量组、低剂量组。
具体实施方式
下面通过具体实施例对本发明进行详细说明。
实施例1黄花倒水莲提取物的制备
取黄花倒水莲药材1000g,加8倍水煎煮2次,每次1.5小时,过滤,合并煎煮液并浓缩成稠膏,减压干燥,粉碎后得到黄花倒水莲水提取物。
取黄花倒水莲药材1000g,分别加入8倍重量的20%、40%、60%、80%(体积)乙醇回流提取,提取次数为2次,每次回流提取的时间是1.5小时,过滤,合并回流液并浓缩成稠膏,减压干燥,粉碎后得到黄花倒水莲不同浓度的乙醇提取物。
实施例2功效验证
1.实验材料与试剂
1.1实验材料
6-8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠70只。
1.2实验试剂
葡聚糖硫酸钠(DSS,M0910A,大连美伦生物技术有限公司),隐血试剂盒(C027-1-1,南京建成生物工程研究所)。
1.3实验药物
实施例1制备的黄花倒水莲水和不同浓度的乙醇提取物。
2.实验方法
2.1溃疡性结肠炎实验动物模型的建立与治疗
6-8周龄SPF级C57BL/6雄性小鼠共70只,购回后适应性喂养3天,随机分为7组,每组10只,分别为正常对照组,DSS模型组(3%),黄花倒水莲水和不同浓度乙醇提取物组(15g/kg/d,按药材计)。正常对照组小鼠始终饮用一般蒸馏水,另六组用DSS与蒸馏水配成浓度3%浓度让小鼠自由引用6d,然后饮用普通水3d,从第1d开始,各提取物组每天分别用相应药物灌胃,于第10d处死各组小鼠。
2.2实验动物体重变化
从造模之日起,每日早晨定期测定各组小鼠体重,并做记录。
2.3观察及记录实验动物疾病状况
自建立溃疡性结肠炎实验动物模型起,每日连续观察并记录小鼠生存状况、测量体重以及疾病活动指数(DAI),直至造模结束,根据文献报道,疾病活动指数=(体重下降程度+大便稠度+便血程度)/3,其中体重下降程度得分标准为:0=体重不变;1=体重下降1-5%;2=体重下降5-10%;3=体重下降10-15%;4=体重下降大于15%。大便稠度得分标准为:0=成形大便;2=不黏附于肛门的糊状、半成型便;4=黏附于肛门的不成形便。便血得分标准为:0=无便血;1=隐血弱阳;2=隐血阳性;3=隐血强阳;4=显性出血。
2.4结肠长度测定
处死小鼠后取出肛门至盲肠末端的整个结肠和直肠段,观察各组小鼠结肠的大体变化、测量整个结肠长度并拍照。
3.实验结果
3.1小鼠体重、饮水量及脏器系数的影响
与空白组相比,DSS模型组小鼠体重、饮食量、脾脏和胸腺系数等明显下降,而黄花倒水莲各提取物组与模型组相比,体重、饮食量以及脾脏和胸腺系数明显增高。
3.2小鼠DAI指数的影响
表1黄花倒水莲提取物对小鼠DAI指数的影响
从以上结果可知,动物服用DSS后DAI指数显著升高,表明造模成功,而给予黄花倒水莲提取物后,各试验组的DAI指数与模型组相比均有所减低,从降低程度上看,60%乙醇提取物效果最好,水提取物效果最差。
3.3黄花倒水莲对结肠长度的变化
与正常组相比,DSS组结肠明显缩短,说明造模成功。与DSS组相比,各给药组结肠长度均有所增加,证明黄花倒水莲提取物对DSS导致的溃疡性结肠炎具有治疗作用,其中,40%和80%乙醇提取物与模型组相比具有显著差异(P<0.05),60%乙醇提取物与模型组相比具有极显著差异(P<0.01)。
表2黄花倒水莲对溃疡性结肠炎小鼠结肠长度的影响(n=10)
分组 | 结肠长度(cm) |
正常组 | 6.2±0.5 |
模型组 | 3.6±0.6 |
水提取物组 | 3.9±0.9 |
20%乙醇提取物组 | 4.4±0.5 |
40%乙醇提取物组 | 4.8±0.7* |
60%乙醇提取物组 | 5.1±0.4** |
80%乙醇提取物组 | 4.6±0.5* |
注:与模型组相比,*P<0.05,**<0.01。
实施例3
取黄花倒水莲药材100g,加入8倍重量的60%(体积)乙醇回流提取2次,过滤,合并回流液并浓缩成稠膏,然后向稠膏中加入石油醚萃取三次进行脱脂,弃去石油醚相,剩下的溶液再用水饱和正丁醇萃取三次,回收有机溶剂,浓缩,干燥,得黄花倒水莲乙醇提取物脱脂后的正丁醇部位。
按照实施例2的方法对正丁醇部位进行药效试验,将试验药物分为高、中、低三个剂量组(10、5、2.5g/kg/d,生药浓度计)。结果见表3和图1。
表3纯化后的黄花倒水莲提取物对小鼠DAI指数的影响
从以上结果可以看出,经纯化后的黄花倒水莲提取物能进一步降低动物模型的DAI指数并增加结肠长度,由于纯化后富集了活性成分和减少了杂质,因此与纯化前的提取物相比不仅具有更好的疗效,而且还有利于降低副作用和服用剂量。
Claims (5)
1.黄花倒水莲提取物在制备治疗溃疡性结肠炎药物中的应用。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述提取物是黄花倒水莲的乙醇提取物。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于:所述乙醇是50-70%乙醇。
4.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述提取物是黄花倒水莲乙醇提取物脱脂后的正丁醇部位。
5.一种治疗溃疡性结肠炎的药物,其特征在于:该药物的活性成分中含有权利要求1-4中任何一项所述的黄花倒水莲提取物。
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