CN112034078A - 卡马西平的检测方法 - Google Patents

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Abstract

本发明提供了卡马西平的检测方法，包括：制备至少三种浓度的标准溶液，其中，标准溶液为具有卡马西平和内标物的溶液；利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每种标准溶液，获得每种标准溶液对应的第一检测结果；根据各个第一检测结果、标准溶液中的卡马西平和内标物的浓度，拟合卡马西平的标准曲线方程；对待处理样品进行预处理，得到第一上清液；向第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；利用液相色谱质谱联用仪在检测条件下检测待测样品，获得待测样品的第二检测结果；基于标准曲线方程和第二检测结果，得到待测样品中卡马西平的浓度。本方案能够缩短样品检测时间。

Description

卡马西平的检测方法
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域，特别涉及卡马西平的检测方法。
背景技术
卡马西平可以依赖性地阻滞各种可兴奋细胞膜的Na+通道，故能明显抑制异常高频放电的发生和扩散；还可以抑制T-型钙通道，增强中枢的去甲肾上腺素能神经的活性，以及促进抗利尿激素的分泌或提高效应器对抗利尿激素的敏感性。
目前，检测样品中卡马西平含量通常采用的方法为高效液相色谱法。而高效液相色谱法检测卡马西平通常需要对待测样品进行较复杂的前处理，耗费时间较多，从而导致样品检测时间较长。
发明内容
本发明提供了卡马西平的检测方法，能够缩短样品检测时间。
为了解决上述问题，本发明实施例提供了卡马西平的检测方法，包括：
制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有卡马西平和内标物的溶液；
利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的卡马西平和内标物的浓度，拟合卡马西平的标准曲线方程；对待处理样品进行预处理，得到第一上清液；向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；利用液相色谱质谱联用仪在所述检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中卡马西平的浓度。
具体地，为了降低卡马西平的标准曲线方程的计算难度，同时，为了降低标准溶液的制备难度，各种浓度的标准溶液中的内标物的量相同。
需要说明的是，第一上清液为血清或血浆。
具体地，可以通过下述步骤制备标准溶液：
(1)标准工作液的配制
精确称取卡马西平标准品置于容量瓶，用稀释液进行溶解，并定容于容量瓶的标线，得到标准储备液，用稀释液进行稀释，得到至少三种不同浓度的卡马西平标准工作液，并于-80℃保存，有效期12个月。
(2)内标工作液的配制
将内标物溶于稀释液中，得到标准内标储备液，并于-80℃保存，有效期12个月。移去适量标准内标储备液，用稀释液进行稀释得到内标工作液，并于-80℃保存，有效期12个月。
(3)标准溶液的标定
移取步骤(1)中的至少三种标准工作液和步骤(2)中的内标工作液以及稀释液，并置于离心管中制成至少三种混合溶液，将上述混合溶液分别在转速1000-2000rpm下涡旋混匀30s-1min后，得到至少三种标准溶液。
优选地，所述检测条件中的液相条件包括：当洗脱流动相的有机相为甲醇溶液、水相为蒸馏水时，所述有机相含有0-0.5％的甲酸，所述水相均含有0-0.5％的甲酸；柱温为18-40℃；流速为0.2-0.5mL/min。
针对柱温来说，18-40℃是指18℃至40℃范围内的任意值，比如，18℃、20℃、22℃、24℃、26℃、28℃、30℃、32℃、34℃、36℃、38℃以及40℃。
针对流速来说，0.2-0.5mL/min是指0.2mL/min至0.5mL/min范围内的任意值，比如，0.2mL/min、0.3mL/min、0.4mL/min以及0.5mL/min。
具体地，洗脱流动相的水相或者有机相中可以加入甲酸也可以不添加甲酸。当洗脱流动相中加入甲酸，由于质谱检测器为ESI(+)检测模式，因此，通过该洗脱流动相对待测样品进行检测，可以增加待测样品的离子化程度，提高目标物质谱峰的强度。还可以避免流动相中的甲酸的量过多，导致流动相pH值过低，对色谱柱造成不可逆的损伤。
针对洗脱流动相中的甲酸来说，0-0.5％是指0至0.5％范围内的任一值，比如，水相和/或有机相中添加0％、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％以及0.5％的甲酸。
优选地，当所述有机相与所述水相采用等度洗脱时，所述有机相与所述水相的洗脱比例包括55％:45％-70％:30％；当所述有机相与所述水相采用梯度洗脱时，所述有机相与所述水相的洗脱比例包括：0.00min：70％:30％-20％:80％；0.01min：80％:20％-95％:5％；0.50min：80％:20％-95％:5％；0.51min：70％:30％-20％:80％；3.00min：70％:30％-20％:80％。
具体地，洗脱流动相可以采用等度洗脱或梯度洗脱的分析方式。
针对等度洗脱的有机相和水相的洗脱比例55％:45％-70％:30％，是指55％:45％至70％:30％范围内的任意比例。比如，55％:45％、60％:40％、65％:35％以及70％:30％。
针对梯度洗脱中有机相与水相在0.00min、0.51min以及3.00min的比例，70％:30％-20:80％是指70％:30％至20％:80％范围内的任一比例，比如，70％:30％、65％:35％、60％:40％、55％:45％、50％:50％、45％:55％、40％:60％、35％:65％、30％:70％、25％:75％以及20％:80％。
针对梯度洗脱中有机相与水相在0.01min以及0.50min的比例，80％:20％-95％:5％是指80％:20％至95％:5％范围内的任一比例，比如，80％:20％、85％:15％、90％:10％以及95％:5％。
例如，当0min有机相与水相的比例为45％:55％，0.01min有机相与水相的比例为70％:30％时，那么在0min至0.01min时间段内，有机相由占比45％逐渐增加至70％，水相则由占比55％逐渐降低至30％。
由于有机相与水相在洗脱流动相中占比的总和为1，因此，当有机相在洗脱流动相中的占比增加，水相在洗脱流动相中的占比则相应降低。
优选地，所述检测条件中的质谱条件，包括：
所述液相色谱质谱联用仪中的质谱检测器为ESI(+)检测模式；
所述液相色谱质谱联用仪中的离子源参数为：加热气流速(L/min):8-12，雾化气流速(L/min):25-35，加热气温度(℃):300-350，毛细管电压(V):3000-4000。
针对加热气流速来说，8-12L/min是指8L/min至12L/min范围内的任意值，比如，8L/min、9L/min、10L/min、11L/min以及12L/min。
针对雾化气流速来说，25-35L/min是指25L/min至35L/min范围内的任意值，比如，25L/min、27L/min、30L/min、32L/min以及35L/min。
针对加热气温度来说，300-350℃是指300℃至350℃范围内的任意值，比如，300℃、310℃、320℃、330℃、340℃以及350℃。
毛细管电压来说，3000-4000V是指3000V至4000V范围内的任意值，比如，3000V、3100V、3200V、3300V、3400V、3500V、3600V、3700V、3800V、3900V以及4000V。
优选地，所述标准曲线方程的两个变量分别为：所述第一检测结果中的卡马西平的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值，以及所述标准溶液中的卡马西平的浓度与内标物的浓度的比值。
可以理解的是，当第一检测结果中的卡马西平的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值作为标准曲线方程的纵坐标y时，标准溶液中的卡马西平的浓度与所述标准溶液中的内标物的浓度的比值作为标准曲线方程的横坐标x。
若第一检测结果中的卡马西平的色谱峰面积与第一检测结果中的内标物的色谱峰面积的比值作为标准曲线方程的横坐标x时，标准溶液中卡马西平的浓度与标准溶液中的内标物的浓度的比值作为标准曲线方程的纵坐标y。
优选地，所述沉淀蛋白试剂包括：甲醇溶液、乙腈溶液、三氯乙酸、磺基水杨酸和高氯酸中的至少一种。
优选地，所述沉淀蛋白试剂与所述第一上清液的体积比为15:1-100:1。
针对沉淀蛋白试剂与所述第一上清液的体积比来说，15:1-100:1是指15:1至100：1范围内的任意比值，比如，15:1、20:1、30:1、40:1、50:1、60:1、70:1、80:1、90:1以及100:1。
比如，沉淀蛋白试剂的体积为500μL时，第一上清液可以是5μL至25μL范围内的任一体积。
优选地，所述内标物包括：环庚米特。采用环庚米特作为内标物，可以避免卡马西平相关的联合用药作为内标物影响目标物的检测，并且由于环庚米特为外源性合成的产物，无法在体内合成，因此可以在不干扰目标物检测的同时，完成对目标物的含量进行测定。
优选地，所述标准溶液中的稀释液包括：50-100％的甲醇水溶液。
稀释液中的水含量不大于50％，可以避免标准工作液、内标工作液和标准溶液中含水量过大的情况下低温存储时出现凝固现象，还可以降低稀释液中甲醇溶液的挥发速度，降低通过稀释液配制的溶液的浓度的改变速度。
针对稀释液中甲醇的含量为50％至100％范围内的任意值，比如，含有50％的甲醇水溶液、含有60％的甲醇水溶液，含有70％的甲醇水溶液、含有80％的甲醇水溶液、含有90％的甲醇水溶液以及100％的甲醇溶液。
优选地，所述向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品，包括：
向所述第一上清液内加入内标物，在1000-2000rpm的转速下涡旋震荡混合30-60s；
顺次向混合后的所述第一上清液中加入沉淀蛋白试剂，在1200-2000rpm的转速下涡旋震荡混合60-180s后，并在10000-15000rpm的转速下高速离心480-900s，取离心后的第二上清液作为待测样品。
具体地，在向第一上清液内加入内标物后，可先对混合液进行涡旋混合，以使第一上清液与内标物充分混合。然后再加入沉淀蛋白试剂，然后再次进行涡旋混合，通过沉淀蛋白试剂对第一上清液中的蛋白进行沉淀。最后通过高速离心对沉淀后的蛋白进行分离得到待测样品。
针对第一次涡旋的转速来说，1000-2000rpm是指1000rpm至2000rpm范围内的任意值，比如，1000rpm、1200rpm、1400rpm、1600rpm、1800rpm以及2000rpm。
针对第二次涡旋的转速来说，1200-2000rpm是指1200rpm至2000rpm范围内的任意值，比如，1200rpm、1400rpm、1600rpm、1800rpm以及2000rpm。
针对涡旋振荡的时间来说，60-180s是指60s至180s范围内的任意值，比如，60s、80s、100s、120s、140s、160s以及180s。
针对离心的转速来说，10000-15000rpm是指10000rpm至15000rpm范围内的任意值，比如，10000rpm、11000rpm、12000rpm、13000rpm、14000rpm以及15000rpm。
针对离心的时间来说，480-900s是指480s至900s范围内的任意值，比如，480s、500s、550s、600s、650s、700s、750s、800s、850s以及900s。
本发明提供了卡马西平的检测方法，通过液相色谱质谱联用仪对含有不同浓度的卡马西平的标准溶液进行检测，可以得到每种浓度的标准溶液对应的第一检测结果，然后基于各种浓度标准溶液中的卡马西平的浓度、内标物的浓度和多个检测结果拟合得到卡马西平的标准曲线方程。再对待处理样品进行预处理，以初步去除待处理样品中的干扰物得到第一上清液。顺次加入沉淀蛋白试剂和内标物进行蛋白沉淀处理，即可得到能够进行检测的待测样品。利用与标准溶液相同的检测方法对待测样品进行检测，可以得到待测样品的第二检测结果，基于标准曲线方程和第二检测结果即可得到待测样品中卡马西平的含量。通过对待处理样品进行预处理、蛋白沉淀后即可得到能够进行测试待测样品，样品的前处理相对简单，耗费时间较少，从而可以实现缩短样品检测时间。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明一实施例提供的卡马西平的检测方法的流程图；
图2是本发明一实施例提供的标准溶液中的卡马西平的色谱图；
图3是本发明一实施例提供的待测样品中的卡马西平的色谱图；
图4是本发明一实施例提供的待测样品进样量10μL的色谱图；
图5是本发明一实施例提供的待测样品进样量8μL的色谱图；
图6是本发明一实施例提供的待测样品进样量6μL的色谱图；
图7是本发明一实施例提供的待测样品进样量0.1μL的色谱图；
图8是本发明一实施例提供的流速0.2mL/min、柱温18℃下待测样品的色谱图；
图9是本发明一实施例提供的流速0.3mL/min、柱温25℃下待测样品的色谱图；
图10是本发明一实施例提供的流速0.4mL/min、柱温30℃下待测样品的色谱图；
图11是本发明一实施例提供的流速0.4mL/min、柱温40℃下待测样品的色谱图；
图12是本发明一实施例提供的流速0.5mL/min、柱温40℃下待测样品的色谱图；
图13是本发明一实施例提供的流速0.6mL/min、柱温40℃下待测样品的色谱图；
图14是本发明一实施例提供的流速0.5mL/min、柱温45℃下待测样品的色谱图；
图15是本发明一实施例提供的沉淀蛋白试剂与第一上清液的比例为100:1时的色谱图；
图16是本发明一实施例提供的蛋白沉淀试剂为甲醇溶液的色谱图；
图17是本发明一实施例提供的蛋白沉淀试剂为乙腈溶液的色谱图；
图18是本发明一实施例提供的蛋白沉淀试剂为三氯乙酸的色谱图；
图19是本发明一实施例提供的蛋白沉淀试剂为高氯酸的色谱图；
图20是本发明一实施例提供的蛋白沉淀试剂为磺基水杨酸的色谱图；
图21是本发明一实施例提供的色谱柱为Aglient-SB-Aq的色谱图；
图22是本发明一实施例提供的色谱柱为AglientExtend-C18的色谱图；
图23是本发明一实施例提供的色谱柱为Waters Atlantis dC18的色谱图；
图24是本发明一实施例提供的色谱柱为SHIMADZU-SP-C18的色谱图；
图25是本发明一实施例提供的洗脱流动相为水和甲醇溶液的色谱图；
图26是本发明一实施例提供的有机相与水相比例80％:20％时的色谱图；
图27是本发明一实施例提供的有机相与水相比例70％:30％时的色谱图；
图28是本发明一实施例提供的有机相与水相比例60％:40％时的色谱图；
图29是本发明一实施例提供的有机相与水相比例55％:45％时的色谱图；
图30是本发明一实施例提供的有机相与水相比例50％:50％时的色谱图；
图31是本发明一实施例提供的一种梯度洗脱的色谱图；
图32是本发明一实施例提供的一种梯度洗脱的色谱图；
图33是本发明一实施例提供的一种梯度洗脱的色谱图；
图34是本发明一实施例提供的一种梯度洗脱的色谱图；
图35是本发明一实施例提供的一种梯度洗脱的色谱图。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例，基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
目前，检测待测样品中卡马西平通常采用衍生化法，利用衍生化试剂与卡马西平结构中的目标官能团反应生成衍生物，基于衍生物与卡马西平的质量比来判断待测样品中卡马西平的含量。但是，衍生化试剂通常稳定性较差，这样就增加了衍生化试剂的存储难度，从而增加检测待测样品中卡马西平的难度。并且衍生化试剂与待测样品中卡马西平反应需要在一定温度、PH值等条件下进行，这就进一步增加待测样品中卡马西平的检测难度，并且衍生化反应需要的时间较长，这就增加了待测样品中卡马西平整体的检测时长。
基于上述问题，本发明实施例提供了卡马西平的检测方法，如图1所示，包括：
步骤101：制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有卡马西平和内标物的溶液；
步骤102：利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；
步骤103：根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的卡马西平和内标物的浓度，拟合卡马西平的标准曲线方程；
步骤104：对待处理样品进行预处理，得到第一上清液；
步骤105：向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；
步骤106：利用液相色谱质谱联用仪在所述检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；
步骤107：基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中卡马西平的浓度。
在本发明实施例中，通过液相色谱质谱联用仪对含有不同浓度的卡马西平的标准溶液进行检测，可以得到每种浓度的标准溶液对应的第一检测结果，然后基于各种浓度标准溶液中的卡马西平的浓度、内标物的浓度和多个检测结果拟合得到卡马西平的标准曲线方程。再对待处理样品进行预处理，以初步去除待处理样品中的干扰物得到第一上清液。顺次加入沉淀蛋白试剂和内标物进行蛋白沉淀处理，即可得到能够进行检测的待测样品。利用与标准溶液相同的检测方法对待测样品进行检测，可以得到待测样品的第二检测结果，基于标准曲线方程和第二检测结果即可得到待测样品中卡马西平的含量。通过对待处理样品进行预处理、蛋白沉淀后即可得到能够进行测试待测样品，样品的前处理相对简单，耗费时间较少，从而可以实现缩短样品检测时间。
下面通过几个实施例对卡马西平的检测方法进行详细说明。
实施例1：制备系列浓度的标准溶液
(a)标准工作液的配制
精确称取卡马西平标准品(纯度为99.7％)4mg置于2mL容量瓶，用含水量为50％的甲醇水溶液进行溶解，并定容于2mL，得到标准储备液A，其卡马西平浓度为1994μg/mL，该标准储备液A于-80℃保存，有效期12个月；用含水量为50％的甲醇水溶液进行稀释，得到浓度分别为32.0μg/mL、16.0μg/mL、8.0μg/mL、4.0μg/mL、2.0μg/mL、1.0μg/mL、0.5μg/mL的卡马西平标准工作液，置于-80℃保存，有效期6个月。
(b)内标工作液的配制：
将1mg内标物溶于10mL含水量为50％的甲醇水溶液中，得到标准内标储备液B，浓度为100μg/mL的溶液，置于-80℃保存，有效期12个月。取10μL标准内标储备液B加入990μL含水量为50％的甲醇水溶液进行稀释，得到1μg/mL的内标工作液，置于-80℃保存，有效期12个月。
(c)标准溶液的标定
分别移取上述步骤(a)中七种不同浓度的标准工作液5μL分别置于1.5ml离心管中，向离心管中分别加入步骤(b)中的内标工作液10μL和85μL含水量为50％的甲醇水溶液，混合制成七种不同浓度的混合液。将上述七种混合液分别在转速为2000rpm下涡旋混匀30s，得到七种不同浓度的标准溶液。
实施例2：拟合标准曲线方程
利用液相色谱质谱联用仪对实施例1中七种浓度的标准溶液分别进行检测，得到七种不同浓度的卡马西平的标准溶液的色谱图。
从上述卡马西平的标准溶液色谱图中分别得到七种标准溶液中卡马西平的色谱峰面积和内标物的色谱峰面积，以上述每种浓度的标准溶液的色谱图中得到的卡马西平的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值作为标准曲线方程的纵坐标y，以上述标准溶液中的卡马西平的浓度与内标物的浓度的比值作为标准曲线方程的横坐标x，将以上检测所得的七种不同浓度的数据进行线性归回，拟合得到标准曲线方程y＝a*x+b，其中，a和b为权重系数，a为标准曲线方程的斜率，b为标准曲线方程的截距。
上述检测条件包括：
色谱柱：Agilent ZORBAX XDB-C8，(色谱柱内径2.1×柱长50mm、填料粒径5μm)。
仪器：安捷伦1290-6410高效液相色谱质谱联用仪。
洗脱流动相：含有0.1％的甲酸的蒸馏水和甲醇溶液；
色谱柱的柱温：25℃，待测样品的进样量：1μL，洗脱流动相的流速：0.3mL/min。
质谱检测器为ESI(+)检测模式，离子源参数为：加热气流速(L/min):10，雾化气流速(L/min):30，加热气温度(℃):350，毛细管电压(V):4000。
其中，洗脱流动相中的有机相为甲醇溶液，水相为蒸馏水；
有机相与水相的洗脱比例为65％:35％。
其中，液相色谱质谱联用仪中的质谱检测器离子对参数如下述表1所示：
表1
物质名称 母离子 子离子 Dwell Fragmentor CE CAV
卡马西平(定量) 237.1 179 100 120 40 7
卡马西平(定性) 237.1 165 100 120 40 7
环庚米特(定性) 238.1 178 100 120 25 7
环庚米特(定量) 238.1 115.1 100 120 18 7
其中，Dewll为扫描时间，Fragmentor为碎裂电压，CE为碰撞电压，CAV：为线性加速电压。
实施例3：待测样品的处理
3.1取待处理样品60μL，在离心速度为3500rpm下离心10min，取第一上清液得血清或血浆，将上述血清或血浆置于-20℃冷冻下保存至分析前备用。
3.2用移液枪移取10μL实施例1步骤(b)的内标工作液于1.5mL的离心管中，然后加入5μL步骤3.1中的第一上清液，在2000rpm的转速下涡旋混合30s，顺次向离心管中加入85μL甲醇，在2000rpm的转速下涡旋震荡混合60s后，并在12000rpm的转速下高速离心10min，得到离心后的第二上清液即为待测样品。
需要说明的是，待处理样品的取用量为50-80μL，取用量较少，不仅可以提高样品来源者的依从性，还可以通过最少样品完成对目标物含量的检测。
实施例4：待测样品的检测
移取步骤3.2中的待测样品80μL，利用液相色谱质谱联用仪采用实施例2中的检测条件对待测样品进行检测，得到待测样品的色谱图。
从待测样品的色谱图中可以得到待测样品中卡马西平的色谱峰面积和内标物的色谱峰面积，将待测样品中的卡马西平的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值作为纵坐标y1，代入到实施例2的标准曲线方程为y＝a*x+b中，由于权重系数a和b已知，所以可以得出待测样品中卡马西平的浓度与内标物的浓度的比值，由于待测样品中的内标物的浓度已知，由此可以计算得到待测样品中的卡马西平的浓度。
实施例5：卡马西平的检测方法的线性关系和定量限
分别移取步骤(a)中七种不同浓度的卡马西平标准工作液5μL，分别向移取的每种浓度的卡马西平标准工作液中加入10μL步骤(b)中的内标工作液和85μL甲醇，混匀后利用液相色谱质谱联用仪按照实施例2中的检测条件进行检测，其中，本实施例中按照浓度由低至高的顺序进行检测，避免检测时浓度高的混合液对浓度低的混合液产生影响。然后以定量色谱峰面积-浓度作图，得到标准曲线，结果表明卡马西平的线性范围和定量限如下：
(1)检测限(LOD)：27.8ng/mL
(2)定量限(LOQ)：83.3ng/mL
(3)线性范围：卡马西平在0.025μg/mL到1.60μg/mL范围内，线性良好，相关系数R2﹥0.995。
实施例6：卡马西平的检测方法的回收率和精密度
移取步骤(a)中的卡马西平标准工作液配制成高、中、低3种浓度进行加样回收率实验和精密度实验，按实施例2中的检测条件进行测定，重复分析测定3批次，其回收率和精密度如下述表2所示：
表2
加标量 1.0μg/mL 4.0μg/mL 16.0μg/mL
平均回收率 98.95％ 102.91％ 102.73％
精密度RSD 3.96％ 1.17％ 2.57％
综合上述验证试验，本实施例的检测限，回收率和精密度等各项技术指标均符合要求，利用本发明提供的方法检测待测样品中卡马西平的浓度，重现性良好，加样回收率高，提高了检测结果的准确度。
图2为实施例2中的标准溶液中的卡马西平的色谱图，图3为实施例3中的待测样品中的卡马西平的色谱图，其中，图2和图3中的卡马西平和内标的保留时间一致。图2和图3中，位于上方为卡马西平的色谱图，位于下方的为内标物环庚米特的色谱图。
其中，图2的横坐标的单位长度为0.05，图2中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图3的横坐标的单位长度为0.05，图3中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103。
由图2和图3可知，本实施例方法中的目标物的保留时间约为0.88min，内标物的保留时间约为1.14min，分析时间短、目标物识别准确、干扰小，特异性强。
实施例7：针对进样量的说明
图4至图7分别对应的试验是与实施例3和4中的试验相对应的平行试验，区别为进样量不同。其中，图4至图7的色谱图中，位于上方的均为卡马西平的色谱图，位于下方的均为内标物环庚米特的色谱图。
图4是待测样品的进样量为10μL的色谱图，图4的横坐标的单位长度为0.05，图4中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×104；
图5是待测样品的进样量为8μL的色谱图，图5的横坐标的单位长度为0.05，图5中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×104；
图6是待测样品的进样量为6μL的色谱图，图6的横坐标的单位长度为0.05，图6中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×104。
图7是待测样品的进样量为0.1μL的色谱图，图7的横坐标的单位长度为0.1，纵坐标的单位长度为0.2×101。
具体地，待测样品的进样量为0.1μL-6μL，进样量0.1μL时的信噪比为15.2，可满足定量要求，而进样量超出6μL后会出现溶剂效应，影响目标物色谱峰的峰型，因此，待测样品的进样量为0.1μL-6μL。
实施例8：针对柱温和流动相的流速的说明
图8至图14分别对应的试验是与实施例3和4中的试验相对应的平行试验，区别为流动相的流速和柱温不同。其中，图8至图14的色谱图中，位于上方的均为卡马西平的色谱图，位于下方的均为内标物环庚米特的色谱图。
图8为流速0.2mL/min、柱温18℃时的色谱图，图8的横坐标的单位长度为0.1，图8中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图9为流速0.3mL/min、柱温25℃时的色谱图，图9的横坐标的单位长度为0.1，图9中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图10为流速0.4mL/min、柱温30℃时的色谱图，图10的横坐标的单位长度为0.05，图10中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图11为流速0.4mL/min、柱温40℃时的色谱图，图11的横坐标的单位长度为0.05，图11中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图12为流速0.5mL/min、柱温40℃时的色谱图，图12的横坐标的单位长度为0.05，图12中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图13为流速0.6mL/min、柱温40℃时的色谱图，图13的横坐标的单位长度为0.05，图13中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图14为流速0.5mL/min、柱温45℃时的色谱图，图14的横坐标的单位长度为0.05，图14中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103。
通过图8至图14可见，当流速低于0.2mL/min，柱温低于18℃时，卡马西平的内标物的保留时间大于2min，这样会使得待测样品整体的检测时间过长，影响样品检测的时效性。并且由于流动相的流速过低，待测样品在高效液相色谱质谱联用仪中的离子化效率较差，使得检测信号较差，不利于待测样品的检测。
而当流速大于0.5mL/min，柱温大于40℃时，色谱柱的柱压会超过色谱柱所能承受的压力，当待测样品检测数量较多时，会对色谱柱造成不可逆的损伤，也会使得待测样品检测的准确性降低。并且，此时的柱温已超过色谱柱能够承受的温度，这样会对色谱柱中的填料造成不可逆的损伤，影响样品检测效果。最重要的是，使得卡马西平的保留时间会小于0.5min，使得卡马西平的出风过快，由于溶剂峰的保留时间通常在0.5min左右，这样溶剂峰会对卡马西平的色谱峰造成干扰，不利于识别目标物。
综上，本发明对待测样品检测的流速在0.2-0.5mL/min区间，柱温在18-40℃区间，可以使得卡马西平和内标物的保留时间均在2.0min之内，缩短待测样品的整体检测时间，提高样品检测的时效性。
实施例9：针对沉淀蛋白试剂的用量的说明
图15对应的试验是与实施例3和4中的试验相对应的平行试验，区别为沉淀蛋白试剂的用量不同。
图15为沉淀蛋白试剂与第一上清液的比例为100:1时的色谱图，其中，图15的横坐标的单位长度为0.1，纵坐标的单位长度为0.1×102。
具体地，通过图15可知，当沉淀蛋白试剂与第一上清液的比例为100:1时，L1点信噪比为88:5，能够保证定量检测。而当沉淀蛋白试剂与第一上清液的比例大于100:1时，第一上清液会被沉淀蛋白试剂过度稀释，从而影响目标物的检测。由于待处理样品的取用量较少，所以会导致得到的第一上清液的量也较少，这样当沉淀蛋白试剂与第一上清液的比例小于15:1时，会导致无法有效地分离出第二上清液，不利于样品中卡马西平的检测。
实施例10：针对沉淀蛋白试剂的说明
图16至图20分别对应的试验是与实施例3和实施例4中的试验相对应的平行试验，区别为对第一上清液进行蛋白沉淀的沉淀蛋白试剂不同。其中，图16至图20中的色谱图中，位于上方为卡马西平的色谱图，位于下方的为内标物环庚米特的色谱图。
图16是蛋白沉淀试剂为甲醇溶液的色谱图，图16的横坐标的单位长度为0.1，图16中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图17是蛋白沉淀试剂为乙腈溶液的色谱图，图17的横坐标的单位长度为0.1，图17中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103；
图18是蛋白沉淀试剂为5％的三氯乙酸的色谱图，图18的横坐标的单位长度为0.1，图18中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×103；
图19是蛋白沉淀试剂为6％的高氯酸的色谱图，图19的横坐标的单位长度为0.1，图19中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103；
图20是蛋白沉淀试剂为6％的磺基水杨酸的色谱图，图20的横坐标的单位长度为0.1，图20中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103。
通过图16至图20，由甲醇溶液、乙腈溶液、三氯乙酸、磺基水杨酸和高氯酸中的至少一种作为对第一上清液进行蛋白沉淀的沉淀蛋白试剂，得到的待测样品的色谱峰的不是前沿峰、拖尾峰，并且色谱峰的峰宽没有出现过宽的情况。并且由于甲醇溶液、乙腈溶液、三氯乙酸、磺基水杨酸和高氯酸为常用试剂，容易获得，因此，可以降低第一上清液蛋白沉淀的难度。
实施例11：针对色谱柱的说明
图21至图24分别对应的试验是与实施例3和实施例4中的试验相对应的平行试验，区别为所使用的色谱柱不同。其中，图21至图24中的色谱图中，位于上方为卡马西平的色谱图，位于下方的为内标物环庚米特的色谱图。
图21是色谱柱为Aglient-SB-Aq的色谱图，其中，色谱柱内径为2.1、色谱柱柱长为50mm、填料粒径为5μm，图21的横坐标的单位长度为0.1，图21中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103；
图22是色谱柱为AglientExtend-C18的色谱图，其中，色谱柱内径为2.1、色谱柱柱长为50mm、填料粒径为5μm，图22的横坐标的单位长度为0.1，图22中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103；
图23是色谱柱为Waters Atlantis dC18的色谱图，其中，色谱柱内径为2.1、色谱柱柱长为50mm、填料粒径为5μm，图23的横坐标的单位长度为0.1，图23中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103；
图24是色谱柱为SHIMADZU-SP-C18的色谱图，其中，色谱柱内径为2.1、色谱柱柱长为50mm、填料粒径为2.6μm，图24的横坐标的单位长度为0.1，图24中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
通过图2、图21至图24可见，利用Aglient-SB-Aq、AglientExtend-C18、WatersAtlantis dC18、SHIMADZU-SP-C18以及Agilent ZORBAX XDB-C8色谱柱对待测样品进行检测得到的目标物的色谱峰未出现前沿和拖尾的情况，且峰宽也符合检测需求。
实施例12：针对洗脱流动相的说明
图25的试验是与实施例3和实施例4中的试验相对应的平行试验，区别为洗脱流动相中未添加甲酸。其中，图25中，位于上方为卡马西平的色谱图，位于下方的为内标物环庚米特的色谱图。
图25示出了洗脱流动相的水相为蒸馏水、有机相为甲醇溶液的色谱图，其中，图25的横坐标的单位长度为0.1，图25中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
图25中的洗脱流动相中虽然未添加甲酸，但目标物和内标物的色谱峰的峰型、峰宽均符合测试需求。
实施例13：针对洗脱流动相的洗脱比例的说明
图26至图35分别对应的试验是与实施例3和实施例4中的试验相对应的平行试验，区别为洗脱流动相的比例不同。其中，图26至图35中，位于上方为卡马西平的色谱图，位于下方的为内标物环庚米特的色谱图。
图26至图30示出了等度洗脱时，待测样品在洗脱流动相中的有机相与水相比例分别为：80％:20％、70％:30％、60％:40％、55％:45％以及50％:50％条件下的色谱图；
其中，图26的横坐标的单位长度为0.1，图26中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为1×102，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
图27的横坐标的单位长度为0.1，图27中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×103。
图28的横坐标的单位长度为0.1，图28中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
图29的横坐标的单位长度为0.1，图29中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
图30的横坐标的单位长度为0.1，图30中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
图31至图35示出了梯度洗脱时，待测样品在不同梯度的洗脱流动相条件下的色谱图；
其中，图31中的有机相与水相比的比例为：0.00min：30％:70％；0.01min：95％:5％；0.05min：95％:5％；0.51min：30％:70％；3min：30％:70％；图31的横坐标的单位长度为0.1，图31中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×103。
图32中的有机相与水相比的比例为：0.00min：30％:70％；0.01min：90％:10％；0.05min：90％:10％；0.51min：30％:70％；3min：30％:70％；图32的横坐标的单位长度为0.1，图32中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103。
图33中的有机相与水相比的比例为：0.00min：30％:70％；0.01min：90％:10％；0.05min：90％:10％；0.51min：30％:70％；3min：30％:70％；图33的横坐标的单位长度为0.1，图33中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.1×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103。
图34中的有机相与水相比的比例为：0.00min：40％:60％；0.01min：80％:20％；0.05min：80％:20％；0.51min：40％:60％；3min：40％:60％；图34的横坐标的单位长度为0.1，图34中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.25×103。
图35中的有机相与水相比的比例为：0.00min：70％:30％；0.01min：95％:5％；0.05min：95％:5％；0.51min：70％:30％；3min：70％:30％；图35的横坐标的单位长度为0.1，图35中位于上方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.2×103，位于下方的色谱图的纵坐标的单位长度为0.5×103。
通过图2、图26至图35可见，当采用等度洗脱方式时，若有机相在洗脱流动相中的占比大于70％，会使得目标峰的保留时间过短，影响目标物的检测。而有机相在洗脱流动相中的占比小于55％时，则会使得目标物的保留时间过长，从而增加待测用品整体检测时间，影响样品检测的时效性。
在采用梯度洗脱时，若水相的初始占比为80％时，在0.01min时有机相的占比需要调至95％，否则会导致内标物的保留时间大于3min。若水相的初始占比为70％，则在0.01min时有机相的占比不小于90％，否则会影响内标物的色谱峰峰型。
需要说明的是，图2至图35的横坐标均为采集时间，纵坐标均为离子信号强度，且色谱图中缺失的图形不影响本方案的技术内容。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。在没有更多限制的情况下，由语句“包括一个······”限定的要素，并不排除在包括所述要素的过程、方法、物品或者设备中还存在另外的相同因素。
最后需要说明的是：以上所述仅为本发明的较佳实施例，仅用于说明本发明的技术方案，并非用于限定本发明的保护范围。凡在本发明的精神和原则之内所做的任何修改、等同替换、改进等，均包含在本发明的保护范围内。

Claims (10)

1.卡马西平的检测方法，其特征在于，包括：
制备至少三种浓度的标准溶液，其中，所述标准溶液为具有卡马西平和内标物的溶液；
利用液相色谱质谱联用仪在预设的检测条件下分别检测每一种所述标准溶液，获得每一种所述标准溶液对应的第一检测结果；
根据各个所述第一检测结果、所述标准溶液中的卡马西平和内标物的浓度，拟合卡马西平的标准曲线方程；
对待处理样品进行预处理，得到第一上清液；
向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品；
利用液相色谱质谱联用仪在所述检测条件下检测所述待测样品，获得所述待测样品的第二检测结果；
基于所述标准曲线方程和所述第二检测结果，得到所述待测样品中卡马西平的浓度。
2.根据权利要求1所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述检测条件中的液相条件，包括：
当洗脱流动相的有机相为甲醇溶液、水相为蒸馏水时，所述有机相含有0-0.5％的甲酸，所述水相均含有0-0.5％的甲酸；
柱温为18-40℃；
流速为0.2-0.5mL/min。
3.根据权利要求2所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
当所述有机相与所述水相采用等度洗脱时，所述有机相与所述水相的洗脱比例包括：
55％:45％-70％:30％；
当所述有机相与所述水相采用梯度洗脱时，所述有机相与所述水相的洗脱比例包括：
0.00min：70％:30％-20％:80％；
0.01min：80％:20％-95％:5％；
0.50min：80％:20％-95％:5％；
0.51min：70％:30％-20％:80％；
3.00min：70％:30％-20％:80％。
4.根据权利要求1所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述检测条件中的质谱条件，包括：
所述液相色谱质谱联用仪中的质谱检测器为ESI(+)检测模式；
所述液相色谱质谱联用仪中的离子源参数为：加热气流速(L/min):8-12，雾化气流速(L/min):25-35，加热气温度(℃):300-350，毛细管电压(V):3000-4000。
5.根据权利要求1所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述标准曲线方程的两个变量分别为：卡马西平的色谱峰面积与内标物的色谱峰面积的比值，以及卡马西平的浓度与内标物的浓度的比值。
6.根据权利要求1所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述沉淀蛋白试剂包括：甲醇溶液、乙腈溶液、三氯乙酸、磺基水杨酸和高氯酸中的至少一种。
7.根据权利要求1所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述沉淀蛋白试剂与所述第一上清液的体积比为15:1-100:1。
8.根据权利要求1所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述内标物包括：环庚米特。
9.根据权利要求1至8中任一所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述标准溶液和所述待测样品中的稀释液包括：50-100％的甲醇水溶液。
10.根据权利要求1至8中任一所述的卡马西平的检测方法，其特征在于，
所述向所述第一上清液内加入沉淀蛋白试剂和内标物，涡旋混合，并高速离心，取离心后的第二上清液作为待测样品，包括：
向所述第一上清液内加入内标物，在1000-2000rpm的转速下涡旋震荡混合30-60s；
顺次向混合后的所述第一上清液中加入沉淀蛋白试剂，在1200-2000rpm的转速下涡旋震荡混合60-180s后，并在10000-15000rpm的转速下高速离心480-900s，取离心后的第二上清液作为待测样品。
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105136957A (zh) * 2015-09-11 2015-12-09 无锡市人民医院 一种同时测定人血浆中oxc以及代谢产物mhd和mhd-g的检测方法
CN107991420A (zh) * 2018-01-25 2018-05-04 北京和合医学诊断技术股份有限公司 一种检测血液中卡马西平含量的液相色谱分析方法
CN109541107A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中卡马西平浓度的方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105136957A (zh) * 2015-09-11 2015-12-09 无锡市人民医院 一种同时测定人血浆中oxc以及代谢产物mhd和mhd-g的检测方法
CN107991420A (zh) * 2018-01-25 2018-05-04 北京和合医学诊断技术股份有限公司 一种检测血液中卡马西平含量的液相色谱分析方法
CN109541107A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中卡马西平浓度的方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
任秀华 等: "HPLC-MS 同时测定人血浆中卡马西平和苯妥英钠的血药浓度", 《中国现代应用药学》 *
王长陆 等: "人血浆卡马西平浓度测定的LC- MS/MS 方法开发、验证及在室间质评中的应用", 《中国药师》 *
贾永娟 等: "三种卡马西平血药浓度测定方法比较", 《化学试剂》 *

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