CN111996151B - 含多种乳酸菌的微生物制剂及其在玉米青贮中的应用 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种含多种乳酸菌的微生物制剂及其在玉米青贮中的应用，所述微生物制剂其包含植物乳杆菌和两歧双歧杆菌粉以及辅料成分；本发明的微生物制剂通过同型发酵乳酸菌和异型发酵乳酸菌的组合以及乳酸钠的加入提供了良好的霉菌抑制性能和保存性能。
Description
技术领域
本发明属于微生物领域和青贮发酵领域，具体地，本发明提供了一种含多种乳酸菌的微生物制剂及其在玉米青贮中的应用，其包含植物乳杆菌和两歧双歧杆菌粉以及辅料成分。
背景技术
青贮是指在密封条件下，通过青贮原料上附着的乳酸菌等厌氧发酵将碳水化合物转化成以乳酸为主的有机酸，使pH下降，抑制有害菌的生长，从而使饲料得以长期保存并优化其营养价值的过程。自古以来青贮就是寒冷地区畜牧业饲料的主要来源之一，可以青贮的饲料主要有玉米、苜蓿、大麦、燕麦、高粱、紫云英、甜菜、马铃薯等，玉米为我国北方主要饲料青贮品种。
为了提高青贮饲料的质量，玉米青贮中可以添加各种添加剂，常见的添加剂包括酶添加剂、微生物添加剂、化学添加剂等，其中微生物添加剂能够直接人为影响青贮这一发酵变化过程，大幅度改善青贮饲料品质，虽然受到的影响因素较多，控制难度较化学和酶添加剂更大，仍然是青贮添加剂的主要研究方向。根据目前的研究，青贮的发酵过程主要依赖于多种乳酸菌，特别是同型发酵乳酸菌如植物乳杆菌，异型发酵乳酸菌如布氏乳杆菌，两歧双歧杆菌，短乳杆菌等由于产乳酸量相对少且有不期望的乙酸产物，应用较少。
研究新的青贮微生物制剂，提供低pH，高乳酸含量，低乙酸和丁酸含量并且少霉菌的青贮饲料，仍然是本领域的重要研究目标。
发明内容
一方面，本申请提供了一种含多种乳酸菌的微生物制剂，其包含植物乳杆菌和两歧双歧杆菌粉5重量份，辅料95重量份。
进一步地，所述含多种乳酸菌的微生物制剂中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为4-8×109cfu/g和1-3×109cfu/g。
进一步地，所述含多种乳酸菌的微生物制剂中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g。
进一步地，所述含多种乳酸菌的微生物制剂中辅料为碳酸氢钠和葡萄糖。
进一步地，所述含多种乳酸菌的微生物制剂中碳酸氢钠为15重量份，葡萄糖为80重量份。
进一步地，所述含多种乳酸菌的微生物制剂中还包括在菌粉和辅料之外单独提供的乳酸或乳酸盐15重量份。
另一方面，本申请提供了含多种乳酸菌的微生物制剂在于玉米青贮中的应用。
具体包括向待青贮的玉米中加入0.03%-0.2%重量的上述玉米青贮用微生物制剂。
进一步地，向待青贮的玉米中加0.1%重量的上述玉米青贮用微生物制剂。
本申请中的碳酸氢钠、葡萄糖和乳酸钠不限产地和厂家，各产地和厂家的产品经过适当验证后均可用于本发明。
本申请中的玉米品种不限于实施例中的使用的品种，各种现有和未来开发的青贮专用、粮饲兼用玉米均可使用。
本申请的添加剂产品中不排斥使用其他添加剂成分，包括但不限于酶添加剂和化学添加剂。
实施例
材料、仪器和试剂
食品用碳酸氢钠：由山东宏全化工有限公司生产
食品用葡萄糖：由山东龙晟泽化工科技有限公司生产。
乳酸和乳酸钠：。由徐州丰瑞生物科技有限公司生产。
pH计：CT-6020A便携式pH计（柯迪达电子制造）。
离子色谱仪：ICS-2500离子色谱仪（DIONEX制造）。
纤维分析仪：A2000i纤维分析仪（ANKOM制造）。
定氮仪：KDN-08A凯式定氮仪（杭州汇尔制造）
其他试剂和仪器均为常规国产型号。
青贮玉米品种和基本处理过程：
选择东北地区常用的中原单32号品种，实验过程所用的玉米来自固定种植基地的同批次玉米，品质基本一致（平均株高约230cm，平均果穗长约24cm，种植密度3800株/亩）。玉米收获期为抽丝期第40-43日，留茬高度为30cm，切割长度约2cm。
实验用青贮方法和取样方法：
将切割后的玉米加入添加剂并混合均匀后按照约500g/L压紧至于1L玻璃瓶中，玻璃胶密封瓶盖接缝，20-25摄氏度的室温下避光保存；在所需测定时间取3个平行青贮罐，取出上层2-10cm处的青贮料混合供测试。
感官评定:
根据德国农业协会（DLG）评分法对嗅觉、结构、色泽评分，按照得分分为优良、良好、中等、下等四个级别。
pH测定：
称取取青贮料10g，加入100mL去离子水中，搅拌3min后两层纱布过滤，过滤后立即使用上述pH计测量浸出液的pH。
有机酸测定：
干物质（DM）：60摄氏度烘干48小时测定作为基础；进样前稀释20倍，50微米膜过滤，使用上述ICS-2500离子色谱仪测定有机酸（AS11柱，0.5mL/min，进样8微升，1% KOH流动相）。
微生物计数：
使用平板计数法，取10g样品加入90mL无菌水后做适当稀释（5个平行），培养乳酸菌：MRS培养基、酵母菌：土豆葡萄糖琼脂培养基、霉菌：高盐察氏培养基。
有氧稳定性：
青贮90 日后，取 100g青贮料置于500ml烧瓶中，置于封闭的保温箱中，向瓶中插入温度计测定温度变化，同时监测室温，从取样时样品接触空气到样品温度高于室温 2 ℃的时间（h）即为计为有氧稳定持续的时间。
实施例1菌种组合对玉米青贮的效果
实施例1和实施例2的实验使用相同原料在同一季节内分多个批次进行，另有多种被筛选的配方由于缺乏代表性未展示。
添加剂1：菌粉5重量份，葡萄糖90重量份：其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g。
添加剂2：菌粉5重量份，葡萄糖90重量份：其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和3×109cfu/g。
添加剂3：菌粉5重量份，葡萄糖90重量份：其中有植物乳杆菌7×109cfu/g。
感官评定:
三组添加剂均能使青贮料达到优良级。
pH：
使用添加剂1-3的青贮料pH在3.80-3.91之间，均达到了较为理想的状态。
有机酸含量测试：
结果表明三组有机酸含量差异不大，虽然使用同型和异型发酵乳酸菌的组合较单独使用同型发酵乳酸菌时乙酸含量略高，但乳酸和乙酸的相对比例并无明显差异。
有氧稳定性：
结果表明使用同型和异型发酵乳酸菌的组合较单独使用同型发酵乳酸菌时的有氧稳定性明显改善，相应地，实际使用时腐败的概率也会相应减小，给应用带来便利。
实施例2 添加乳酸/乳酸盐和碳酸氢钠对玉米青贮的效果
添加剂4：菌粉5重量份，葡萄糖90重量份：其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g；另有乳酸15重量份。
添加剂5：菌粉5重量份，葡萄糖90重量份：其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g；另有乳酸钠15重量份。
添加剂6：菌粉5重量份，葡萄糖80重量份，碳酸氢钠15重量份：其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g；另有乳酸钠15重量份。
添加剂7：菌粉5重量份，葡萄糖80重量份，碳酸氢钠25重量份：其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g；另有乳酸钠15重量份。
感官评定:
4组添加剂均能使青贮料达到优良级。
pH：
使用添加剂4-7的青贮料pH在3.72-3.87之间，均达到了较为理想的状态。
微生物测定：
结果表明：乳酸/乳酸盐的加入都可以有效抑制霉菌(添加剂1-3的霉菌在2.67-2.72之间)，碳酸氢钠的使用似乎有抑制酵母菌的作用。
有机酸含量测试：
结果表明使用乳酸钠的添加剂相比使用乳酸的添加剂能够明显改善乳酸容易被产丁酸利用做底物，造成丁酸（引起酮症等疾病）的问题。
有氧稳定性：
结果表明乳酸/乳酸盐的加入进一步改善了有氧稳定性，抑制霉菌和酵母菌综合效果较好的添加剂6和7的有氧稳定性最佳。
Claims (2)
1.含多种乳酸菌的微生物制剂在玉米青贮中的应用，其特征在于所述含多种乳酸菌的微生物制剂包含植物乳杆菌和两歧双歧杆菌粉5重量份，碳酸氢钠15重量份，葡萄糖80重量份，乳酸钠15重量份；其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌粉中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为4-8×109cfu/g和1-3×109cfu/g。
2.根据权利要求1所述的应用，其中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌粉中植物乳杆菌和两歧双歧杆菌含量分别为5×109cfu/g和1×109cfu/g。
Priority Applications (1)
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