CN111973750A - 一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法 - Google Patents

一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111973750A
CN111973750A CN202010826193.1A CN202010826193A CN111973750A CN 111973750 A CN111973750 A CN 111973750A CN 202010826193 A CN202010826193 A CN 202010826193A CN 111973750 A CN111973750 A CN 111973750A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysorbate
oleate
pim
psm
ratios
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202010826193.1A
Other languages
English (en)
Inventor
孙会敏
李婷
王珏
谢兰桂
江颖
邹健
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
National Institutes for Food and Drug Control
Original Assignee
National Institutes for Food and Drug Control
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by National Institutes for Food and Drug Control filed Critical National Institutes for Food and Drug Control
Priority to CN202010826193.1A priority Critical patent/CN111973750A/zh
Publication of CN111973750A publication Critical patent/CN111973750A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L71/00—Compositions of polyethers obtained by reactions forming an ether link in the main chain; Compositions of derivatives of such polymers
    • C08L71/02—Polyalkylene oxides
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/17—Systems in which incident light is modified in accordance with the properties of the material investigated
    • G01N21/25—Colour; Spectral properties, i.e. comparison of effect of material on the light at two or more different wavelengths or wavelength bands
    • G01N21/31—Investigating relative effect of material at wavelengths characteristic of specific elements or molecules, e.g. atomic absorption spectrometry
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/86—Signal analysis
    • G01N30/8675—Evaluation, i.e. decoding of the signal into analytical information
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5014—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics for testing toxicity
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • G01N33/5044—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics involving specific cell types
    • G01N33/5067—Liver cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
    • C08L2205/00—Polymer mixtures characterised by other features
    • C08L2205/02—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group
    • C08L2205/025—Polymer mixtures characterised by other features containing two or more polymers of the same C08L -group containing two or more polymers of the same hierarchy C08L, and differing only in parameters such as density, comonomer content, molecular weight, structure

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Library & Information Science (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种优化PSM/PIM‑油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法，聚山梨酯80产品中PSM‑油酸酯的份数与PIM‑油酸酯的份数比例为0～10：0～10；制备方法包括以下步骤：S1、取常规聚山梨酯80适量，用四氢呋喃溶解，得到样品溶液；S2、将样品溶液挥发溶剂即可。安全研究方法为对L‑929初步细胞毒性进行评价、对L‑02肝细胞毒性进行检测、对RBL‑2H3细胞致敏性进行检测、对家兔红细胞溶血性进行检测。功能研究方法为对优化PSM/PIM‑油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的增溶性进行研究；应用制剂为注射剂、片剂、乳膏剂、消毒液、栓剂、滴剂或膜剂。

Description

一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备 方法
技术领域
本发明涉及生物医用高分子材料技术领域，尤其涉及一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法。
背景技术
聚山梨酯又名吐温，型号主要有聚山梨酯20、40、60、80，对应化学名为聚氧乙烯(20)山梨醇酐单月桂酸酯/棕榈酸酯/硬脂酸酯/油酸酯，以失水山梨醇为骨架，侧链连接具有亲水特性的3个氧乙烯链，1个具有亲脂特性的脂肪链。聚山梨酯20/40/60/80是目前应用最广泛的非离子表面活性剂，其制备过程是由山梨醇经失水环合并与油酸酯化制得中间体，再与环氧乙烷聚合而得。聚山梨酯20/40/60/80由于具有较强的亲水性和在化学上的不解离性，对强电解质有显著的抵抗力，能与多种药物配伍，被广泛用于注射剂、片剂、乳膏剂、消毒液、栓剂、滴剂和膜剂，可作为药物的增溶剂、稳定剂、乳化剂、分散剂等。其中，聚山梨酯20/80是使用频率最高的两种聚山梨酯，也是目前单独设有注射用途径的聚山梨酯产品，在注射剂和生物制剂起着具有重要的作用。据大量文献报道，聚山梨酯20/40/60/80的不良反应主要有：致敏性、溶血性、肝毒性等。以聚山梨酯80(PS80)为例，近年来临床上含聚山梨酯80的注射剂(依托泊苷注射液、多西紫杉醇注射液和鱼腥草注射液)多有不良反应发生，目前研究认为聚山梨酯80是引起不良反应的主要原因之一。聚山梨酯80常作为增溶剂加入到注射剂中，注射剂直接注射进入体内进入血液循环系统，相对于口服、外用等其他剂型，注射剂用辅料的安全性要求更高。聚山梨酯80主要生产原料为山梨醇、油酸和环氧乙烷，其中油酸来源不同且成分复杂，含有多种脂肪酸。聚山梨酯80的生产工艺有2种，分别为先酯化后聚合的传统生产工艺和先聚合后酯化的现代生产工艺，因山梨醇脱水程度不同会生成山梨醇酐(一脱水)和异山梨醇(二脱水)，因油酸酯化程度不同会生成一酯、二酯、三酯和四酯，因环氧乙烷聚合程度不同会生成大量同系物，加之生产工艺与生产原料来源不同决定了聚山梨酯80本身就是一个非常复杂的混合物，使得市售聚山梨酯80产品的化学组分及比例可能存在很大的差异。市售聚山梨酯80产品不仅含有聚氧乙烯(20)山梨醇酐单油酸酯(polyoxyethylenesorbitanmonooleate，PSM-油酸酯)，还含有大量其它副产物如聚氧乙烯山梨醇酐(polyoxyethylenesorbitan，PS)、聚氧乙烯异山梨醇酐(polyoxyethyleneisosorbide，PI)、聚氧乙烯山梨醇酐二油酸酯(polyoxyethylenesorbitandioleates，PSD-油酸酯)、聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯(polyoxyethylenesorbitantrioleates，PSTri-油酸酯)、聚氧乙烯山梨醇酐四油酸酯(polyoxyethylenesorbitantetraoleates，PSTetra-油酸酯)、聚氧乙烯异山梨醇酐单油酸酯(polyoxyethyleneisosorbidemonooleate，PIM-油酸酯)、聚氧乙烯异山梨醇酐二油酸酯(polyoxyethyleneisosorbidedioleates，PID-油酸酯)、聚乙二醇(polyethyleneglycols，PEG)、聚氧乙烯单油酸酯(polyethyleneglycolsmonooleate，PM-油酸酯)和聚氧乙烯二油酸酯(polyethyleneglycolsdioleates，PD-油酸酯)等。从化学结构看，这些组分物理化学性质差异很大，PSM-油酸酯、PSD-油酸酯、PSTri-油酸酯、PIM-油酸酯和PM-油酸酯同时含有亲水的聚氧乙烯链和亲脂的脂肪酸酯链，是聚山梨醇酯80的活性组分。PS、PI和PEG不含脂肪酸基团，完全亲水，这些组分没有表面活性，属于非活性组分。PID-油酸酯和PD-油酸酯因羟基完全被酯化，属于非极性化合物，脂溶性强，极可能影响细胞膜的稳定性。这提示聚山梨酯80的组成及其组分比例很可能是造成不同来源的聚山梨酯80功能性及安全性差异的原因。因此，制备不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比的聚山梨酯80可为研究高效低毒的聚山梨酯80提供思路，而分析聚山梨酯的组成分布对其质量控制及安全性评价具有重要的意义。
发明内容
本发明目的是针对上述问题，提供一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法。
为了实现上述目的，本发明的技术方案是：
一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品，所述PSM-油酸酯的份数与PIM-油酸酯的份数比例为0～10：0～10，其中，PSM-油酸酯的份数与PIM-油酸酯的份数之和为10份。
进一步的，所述PSM-油酸酯的份数/PIM-油酸酯的份数≥8/2。
进一步的，所述聚山梨酯80中还含有聚乙二醇、聚氧乙烯山梨醇酐、聚氧乙烯异山梨醇酐中的一种，聚氧乙烯山梨醇酐二油酸酯，聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯。
一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的制备方法，包括以下步骤：
S1、取常规聚山梨酯80适量，用四氢呋喃溶解，制得浓度为0.5g/ml的供试品溶液，结合常规聚山梨酯80的分离图谱和各色谱峰的定性结果，设定收集参数，在线收集所需组分，得到样品溶液；
S2、将样品溶液于40℃旋转蒸发至溶剂挥干，用甲醇溶液溶解，再次旋干，最后抽真空挥发剩余溶剂，得到所制备的聚山梨酯80。
进一步的，还包括以下步骤：
S3、将四氢呋喃溶液进行HPLC制备；
S4、将HPLC制备的条件设定为：色谱柱为150×19mm；柱温为室温；流动相：A为甲醇与水的混合物，甲醇：水＝95:5，B为四氢呋喃；流速为25ml/min；进样量为800μL；检测器为蒸发光散射检测器；漂移管温度为60℃；运行时间为19分钟；载气压力为40.0psi；数据采集速率为10点/秒；
S5、将甲醇溶液进行HPLC检测；
S6、将HPLC检测的条件设定为：色谱柱为4.6×150mm；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μL；检测器为蒸发光散射检测器；检测器温度为60℃；N2流速为1.6L/min；流动相：A为甲醇，B为THF；梯度洗脱过程为：第0.00～4.99min将100％A过渡到90％A；第5.00～18.99min将90％A过渡到20％A；第19.00～19.09min将20％A过渡到100％A；第19.10～24.00min为100％A。
一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的安全研究方法，所述安全研究方法包括对L-929初步细胞毒性进行评价、对L-02肝细胞毒性进行检测、对RBL-2H3细胞致敏性进行检测、对家兔红细胞溶血性进行检测。
一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的功能研究方法，采用研究药物模型对优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的增溶性进行研究。
进一步的，所述研究药物模型为布洛芬、维生素A、黄芩苷、紫杉醇中的一种。
一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的应用，所述聚山梨酯80产品的应用制剂为注射剂、片剂、乳膏剂、消毒液、栓剂、滴剂或膜剂。
进一步的，所述聚山梨酯80产品的应用制剂的给药方式为鼻腔给药、经皮给药、眼部给药、口服给药或注射给药。
与现有技术相比，本发明具有的优点和积极效果是：
本发明通过对山梨醇酐和异山梨醇酐两种母核聚合物的安全性进行研究，得到了优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品，并以聚山梨酯80为模型，提出一种新PSM/PIM配比的聚山梨酯80的制备方法，使聚山梨酯辅料在制剂上更好地发挥作用，给聚山梨酯的发展作出了一定的贡献。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1为聚山梨酯80的HPLC色谱图；
图2为不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的毒性级别示意图；
图3为不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的EC50值示意图；
图4为不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的β-氨基己糖苷酶释放率示意图；
图5为不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的溶血率示意图；
图6为优化PSM/PIM配比聚山梨酯80及聚山梨酯80产品(黑色)的毒性级别示意图；
图7为优化PSM/PIM配比聚山梨酯80及聚山梨酯80产品(黑色)的EC50值示意图；
图8为优化PSM/PIM配比聚山梨酯80及聚山梨酯80产品(黑色)的β-氨基己糖苷酶释放率示意图；
图9为优化PSM/PIM配比聚山梨酯80及聚山梨酯80产品(黑色)的溶血率示意图；
图10为PSM/PIM含量差异化样品及对照的被增溶峰面积(△A)示意图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
本发明提供了一种聚山梨酯80的制备方法，包括以下步骤：
1)取聚山梨酯80适量，用四氢呋喃溶解，制得浓度为0.5g/ml的供试品溶液。结合聚山梨酯80的分离图谱和各色谱峰的定性结果，设定收集参数，在线收集需要的组分。
2)将收集到的样品溶液于40℃旋转蒸发至溶剂挥干，用适量甲醇溶解，再次旋干，最后抽真空挥发剩余溶剂，得到山梨醇酐聚合物和异山梨醇酐聚合物样品。
3)HPLC法测定制备所得的梨醇酐聚合物和异山梨醇酐聚合物样品的纯度在本发明中，所述的HPLC制备方法优选具体为：聚山梨酯80：色谱柱：XBridgePrepC18,5μm150*19mm；流动相：A＝甲醇:水＝95:5(V/V),B＝四氢呋喃，梯度表见表1；流速：25ml/min；进样量：800μL；柱温：室温；检测器：蒸发光散射检测器，漂移管温度：60℃；接收方法：蒸发光检测触发接收；运行时间：19分钟；载气压力：40.0psi；数据采集速率：10点/秒。
表1聚山梨酯80的HPLC法流动相梯度表
Figure BDA0002636312020000071
在本发明中，所述的HPLC(SHIMADZULC-20AD)纯度测定方法具体为：
聚山梨酯80：色谱柱：AgilentEclipseXDB-C18(4.6×150mm，5μm)；柱温：30℃；流速：1.0ml/min；进样体积：20μL；检测器：Alltech3300蒸发光散射检测器，检测器温度：60℃，N2流速：1.6L/min，增益2；流动相：A＝甲醇，B＝THF；梯度洗脱：0.00～4.99min:100％A过渡到90％A；5.00～18.99min:90％A过渡到20％A；19.00～19.09min:20％A过渡到100％A；19.10～24.00min:100％A。色谱图如图1所示。
聚山梨酯80的HPLC色谱图中PEG/PS/PI组分对应1号色谱峰，PSM-油酸酯对应2号色谱峰，PIM-油酸酯对应3号色谱峰，PSD-油酸酯对应5号色谱峰，PSTri-油酸酯对应8号色谱峰。
本发明提供一种不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比的制备方法
称取适量PSM-油酸酯和PIM-油酸酯，用生理盐水溶解，制得浓度约为10mg/ml的A～K样品储备液，根据不同PSM油酸酯/PIM油酸酯的配比，制备优化配比的聚山梨酯80。
表2A～K组PSM-油酸醋/PIM-油酸醋配比样品议置
Figure BDA0002636312020000072
如表2所示，采用HPLC对PS80组成进行分析，筛选含量较高的次级组分，然后，以PS80(应用B)为对照，在次级组分质量相同的基础上，根据初筛实验结果得到的含量比范围，改变PSM/PIM含量比，通过细胞模型研究PSM/PIM含量差异化样品的安全性。
本发明采用HPLC-ELSD法对聚山梨酯80组成分析：
取两个不同厂家的PS80样品适量，以甲醇作为溶剂，制得浓度为1.0mg/ml的样品溶液。结果(表3)显示PS80中含量较大的次级组分有PEG/PS/PI、PSM、PIM、PSD和PSTri。制备上述5个次级组分，采用HPLC测定纯度。
表3 HPLC-ELSD法对PS80组成分析
Figure BDA0002636312020000081
在本发明中，所述的各组分线性范围确定方法具体为：
精密称取PEG/PS/PI、PSM、PIM、PSD和PSTri次级组分适量，以甲醇作为溶剂，逐级稀释。线性与范围浓度设置：PEG/PS/PI系列浓度为0.02、0.05、0.1、0.15、0.2和0.25mg/ml，PSM系列浓度为0.05、0.1、0.2、0.4、0.5和0.6mg/ml，PIM系列浓度为0.02、0.04、0.1、0.2、0.4和0.5mg/ml，PSD系列浓度为0.05、0.1、0.2、0.5、1和2mg/ml，PSTri系列浓度为0.05、0.1、0.2、0.5、1和2mg/ml。以浓度的对数为x，以峰面积的对数为y，计算5个次级组分的线性与范围。结果表明PEG/PS/PI在0.02～0.25mg/ml、PSM在0.05～0.6mg/ml、PIM在0.02～0.5mg/ml、PSD在0.05～2mg/ml和PSTri在0.05～2mg/ml内线性良好(表4)。
表4 5个次级组分的线性与范围、检出限、定量限和重复性
Figure BDA0002636312020000091
以聚山梨酯80作为对照，选取PEG/PS/PI、PSM、PIM、PSD和PSTri5个组分，照在聚山梨酯80中所占质量进行配制。采用HPLC-ELSD法测定由聚山梨酯80制得的组分PEG/PS/PI、PSM、PIM、PSD和PSTri的线性与范围，得出每1mg聚山梨酯80中PEG/PS/PI(0.1828mg)、PSM(0.2958mg)、PIM(0.1801mg)、PSD(0.2628mg)和PSTri(0.2311mg)的质量数，PSM+PIM为PSM/PIM配比的总质量0.4759mg。在本发明中，采用细胞模型优化PSM油酸酯/PIM油酸酯的配比范围，安全性评价方法具体为：初步细胞毒性评价(L-929细胞模型)、肝细胞毒性(L-02细胞模型)、细胞致敏性(RBL-2H3细胞模型)和溶血性(家兔红细胞)。在本发明中，所述的L-929细胞对不同PSM/PIM配比的聚山梨酯80的细胞毒性进行初步评价方法优选具体为：
已知在浓度为75/150/300μmol/L下，PSM-油酸酯(2级，相当于0.1113～0.4452mg/ml)和PIM-油酸酯(4级，相当于0.0836～0.3342mg/ml)的细胞毒性有明显差异。设定本实验的研究浓度范围为0.0625～0.5mg/ml，设置4组浓度，分别为0.0625/0.125/0.25/0.5mg/ml。
A1)样品储备液的配制
按表2称取适量PSM-油酸酯和PIM-油酸酯，用生理盐水溶解，制得浓度约为10mg/ml的A～K样品储备液。
B1)细胞培养
L-929细胞培养于含10％胎牛血清的MEM培养基，将L-929细胞置于37℃、5％CO2、饱和湿度的CO2培养箱中无菌培养。细胞呈单层贴壁生长，每2～3天传代一次，传代时用含0.25％EDTA的胰蛋白酶室温下消化1～2min。
C1)MTS实验
采用MTS法分别检测浓度为75μmol/L、150μmol/L和300μmol/L的各组分对L-929细胞的细胞毒性。取浓度1×105个/ml的L-929细胞悬液接种于96孔板，每孔加100μL，24h贴壁后，弃去孔液，加入100μL高中低浓度的样品溶液，设置6个复孔。培养24h后，加MTS溶液20μL，继续培养3h。选择490nm作为检测波长，650nm作为参比波长，在SpectraMaxM2e酶标仪上测定各孔吸光度(A)，记录结果。设空白对照组的OD值为100％细胞存活率，按照下式计算相对细胞存活率(relativegrowthrate,RGR)，据表5评价样品的细胞毒性级别。RGR(％)＝样品吸光度(OD均值)/对照组吸光度(OD均值)×100。
表5细胞毒性级别标准
Figure BDA0002636312020000101
采用L-929细胞初步评价不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品毒性，最低浓度0.0625mg/ml(黑色)时样品毒性级别的拐点是配比5/5；随着浓度增大，拐点向右移动(虚线区域)，即PSM-油酸酯占比增大；最大浓度0.5mg/ml时，不同配比样品的毒性级别没有差异(4级，重度)。总的来说配比6/4～10/0范围的样品毒性级别较低，如图2和表6所示。
表6不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的RGR(％，n＝6，
Figure BDA0002636312020000111
)和毒性级别
Figure BDA0002636312020000112
在本发明中，所述的L-02细胞对不同PSM/PIM配比的聚山梨酯80的肝细胞毒性测定方法具体为：
A1)样品储备液的配制
按表2称取适量PSM-油酸酯和PIM-油酸酯，用生理盐水溶解，制得浓度约为20mg/ml的A～K样品储备液。
B1)细胞培养
L-02细胞培养于含10％胎牛血清的1640培养基，将L-02细胞置于37℃、5％CO2、饱和湿度的CO2培养箱中无菌培养。细胞呈单层贴壁生长，每2～3天传代一次，传代时用含0.25％EDTA的胰蛋白酶室温下消化1～2min。
C1)MTS实验
采用MTS法分别检测不同浓度的各组分对L-02细胞的细胞毒性。取浓度1×105个/ml的L-02细胞悬液接种于96孔板，每孔加100μL，24h贴壁后，弃去孔液，加入不同浓度的样品溶液(由1640培养基稀释样品储备液制得)，每孔100μL，设置6个复孔。培养24h后，加MTS溶液20μL，继续培养3h。选择490nm作为检测波长，650nm作为参比波长，在SpectraMaxM2e酶标仪上测定各孔吸光度(A)，记录结果。用SoftMax.Pro7.0软件处理结果，以浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制细胞抑制率曲线，得到EC50值。
采用EC50评价不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的肝细胞毒性(表7)，假设聚山梨酯80对照(应用B)在肝细胞毒性中安全性得分为10分(EC50值为0.9766mg/ml)，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。配比≥6/4时，EC50开始显著增大(虚线区域)，表明样品的肝细胞毒性减小(如图3所示)。
表7不同PSM-油酸醋/PIM-油酸醋配比样品的EC50值(n＝6，
Figure BDA0002636312020000121
）
Figure BDA0002636312020000122
在本发明中，所述的RBL-2H3细胞对不同PSM/PIM配比的聚山梨酯80的细胞致敏性测定方法具体为：
A1)阳性对照溶液配制
称取Compound48/80适量，用改良Tyrode液(NaCl137mmol/L,KCl2.7mmol/L,Glucose5.6mmol/L,CaCl21.8mmol/L,MgCl21mmol/L,HEPES20mmol/L,BSA1mg/ml,pH7.4)溶解，制得浓度为2mg/ml阳性对照溶液。
B1)样品溶液的配制
称取适量样品，用改良Tyrode液溶解，制得浓度为0.01mg/ml、0.1mg/ml、1mg/ml和10mg/ml样品溶液。
C1)细胞培养
RBL-2H3细胞培养于含15％胎牛血清的MEM培养基，将RBL-2H3细胞置于37℃、5％CO2、饱和湿度的CO2培养箱中无菌培养。细胞呈单层贴壁生长，每2～3天传代一次，传代时用含0.25％EDTA的胰蛋白酶室温下消化1～2min。
D1)取浓度2×105/ml的RBL-2H3细胞悬液接种于96孔板，每孔200μL，24h贴壁后，弃去孔液，用改良Tyrode液洗2遍，加入各种受试液：①阴性对照组加入改良Tyrode液；②阳性对照组加入阳性对照溶液；③裂解组加改良Tyrode液；④试验组加入各组样品溶液，每孔200μL，设置3个复孔；孵育1h后，置于冰上10min终止反应。裂解组相应的复孔中加入40μL1.2％说明书TritonX-100，冰上裂解10min，获得细胞裂解液；4℃、1500r/min离心5min。分别取细胞上清50μL或细胞裂解液60μL，转移至新96孔板，在各组细胞上清液及阴性对照中加入10μL1.2％TritonX-100补齐体积至60μL。各孔加入底物(5mmol/Lp-Nitrophenyl-2-acetamido-2-deoxy-β-D-glucopy-ranoside+0.1mol/ml柠檬酸钠缓冲液,pH4.5)60μL；孵育1h后，每孔加入终止液(100mmol/LNa2CO3、100mmol/LNaHCO3缓冲,pH10.7)150μL终止反应，于405nm处测定吸光度(A)值。按该式计算β-氨基己糖苷酶释放率：β-氨基己糖苷酶释放率(％)＝(样品A值-空白A值)/(裂解组A值-空白A值)×100。假设浓度为1mg/ml时，聚山梨酯80对照(应用B)在细胞致敏性中安全性得分为10分(释放率为7.4％)，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。结果表明配比6/4～10/0的细胞致敏性相对较小，如图4和表8所示。
表8不同PSM-油酸酯/PIM-油酸醋配比样品的β-氨基己糖苷酶释放率(n＝3，
Figure BDA0002636312020000141
）
Figure BDA0002636312020000142
在本发明中，所述的不同PSM/PIM配比的聚山梨酯80的溶血性测定方法具体为：
A1)取新鲜家兔血10ml，置50ml烧杯中，用玻璃棒搅拌5分钟，以去除纤维蛋白。取10ml刻度离心管，每支加入1ml去纤维蛋白兔血和生理盐水9ml，混悬，置离心机，以1500r/min离心10min，去除上清液，沉淀的红细胞再加入生理盐水至10ml混匀并离心，反复清洗2次，将红细胞转移至锥形瓶，加入生理盐水稀释，制得2％红细胞悬液。
B1)样品溶液的配制
称取适量样品，用生理盐水溶解并稀释成20mg/ml样品溶液A和2mg/ml样品溶液B。蒸馏水作为阳性对照，生理盐水作为阴性对照。
C1)溶血实验
取0.5mlEP管6支，设6个浓度实验样品组(1-6号，样品终浓度分别为10mg/ml、5mg/ml、2mg/ml、1mg/ml、0.1mg/ml和0.01mg/ml)；阴性对照组(7号)；阳性对照组(8号)；空白对照组(9号)。各管配制程序如表9。
表9各管溶液配制方法
Figure BDA0002636312020000151
将各管于1500r/min离心10min。取上清液于紫外分光光度计415nm处检查。按该式计算溶血率：溶血率(％)＝(ODt-ODnc)/(ODpc-ODnc)×100，其中，ODt为样品管吸光度；ODnc为阴性对照管吸光度；ODpc为阳性对照管吸光度。
假设浓度为1mg/ml时，聚山梨酯80对照(应用B)在细胞致敏性中安全性得分为10分(溶血率为16.5％)，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。结果显示，浓度为0.1mg/ml时，PSM/PIM含量比≥6/4时，安全性显著提高，说明PSM/PIM含量比为6/4～10/0范围的样品溶血性较小。如图5和表10、表11所示。
表10不同PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的溶血率(n＝3，
Figure BDA0002636312020000152
)
Figure BDA0002636312020000153
表11 PSM-油酸酯/PIM-油酸酯配比样品的安全性分数
Figure BDA0002636312020000161
综上所述，经优化后，确定制备的聚山梨酯80样品中PSM/PIM组分配比为6/4～10/0。
本专利对新PSM/PIM配比聚山梨酯80的安全性进行了初步研究，以市售聚山梨酯80作为对照，研究优化PSM/PIM配比聚山梨酯80的细胞毒性，假设浓度为0.25mg/ml时，对照在L-929细胞毒性中安全性得分为10分，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。结果表明PSM/PIM配比为8/2～10/0范围的样品毒性级别≤对照品(见表12和图6)。
表12优化PSM/PIM配比样品及对照的RGR(n＝6，
Figure BDA0002636312020000171
)和毒性级别
Figure BDA0002636312020000172
以市售聚山梨酯80作为对照，以EC50评价优化PSM/PIM配比聚山梨酯80样品的肝细胞毒性(表13和图7)，假设对照在肝细胞毒性中安全性得分为10分，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。结果表明PSM/PIM配比越大，样品的肝细胞毒性越小；与对照相比，PSM/PIM配比为9/1～10/0时，样品的肝细胞毒性较小。
表13优化PSM/PIM配比样品及对照的EC50值(n＝6，
Figure BDA0002636312020000173
)
Figure BDA0002636312020000174
以市售聚山梨酯80作为对照，采用优化PSM/PIM配比聚山梨酯80样品处理RBL-2H3细胞的β-氨基己糖苷酶释放率评价致敏性(表14和图8)，假设浓度为1mg/ml时，对照在细胞致敏性中安全性得分为10分，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。结果表明，PSM/PIM配比与释放率无明显变化规律，可能是因为样品释放率较小(0～18％)。提示优化PSM/PIM配比聚山梨酯80和聚山梨酯80产品的细胞致敏性均较小。
表14优化PSM/PIM配比样品及对照的β-氨基己糖苷酶释放率(n＝3，
Figure BDA0002636312020000181
）
Figure BDA0002636312020000182
如表13所示，以市售聚山梨酯80作为对照，比较不同浓度优化PSM/PIM配比聚山梨酯80的溶血率，假设浓度为1mg/ml时，对照在溶血性中安全性得分为10分，计算各样品的安全性得分，分数越高说明安全性越好。结果表明PSM/PIM配比越大，样品的溶血性越小；与对照相比，PSM/PIM配比范围为9/1～10/0时，样品的溶血性较小。(表15、表16和图9)。
表15优化PSM/PIM配比样品及对照的溶血率(n＝3，
Figure BDA0002636312020000191
)
Figure BDA0002636312020000192
表16优化PSM/PIM配比样品的细胞安全性总分
Figure BDA0002636312020000193
PSM/PIM配比越大，样品的安全性总分越高，当比值为9/1～10/0时，样品的安全性最高。说明提高PSM/PIM含量比，能够显著提高PS80的安全性，达到相对低毒的效果。
本发明以HPLC色谱方法考察优化PSM/PIM配比聚山梨酯80的功能性(增溶性)。
以酸度系数(pKa)和极性表面积(tPSA)筛选功能性研究研的药物模型：布洛芬、维生素A、黄芩苷和紫杉醇，如表17所示。
表17增溶性药物的具体信息
Figure BDA0002636312020000201
在本发明中，所述的HPLC方法优选具体为：
分别配制相同体积系列浓度为0.1％，0.2％，0.3％，0.4％，0.5％的聚山梨酯80及其单组分溶液，加入过量药物，于37℃恒温摇床中振摇24小时，取出后滤过，取续滤液用高效液相色谱仪测定各浓度条件下药物的溶解度，同法用水做溶剂测定药物的固有溶解度。用△S表示各浓度下药物的被增溶(mg/ml)。
药物被增溶量用加权平均值表示：S＝(0.1％S1+0.2％S2+0.3％S3+0.4％S4+0.5％S5)/(0.1％+0.2％+0.3％+0.4％+0.5％)
△S＝S-SH2O；
SH2O、S1、S2、S3、S4和S5：药物在等体积的H2O、0.1％、0.2％、0.3％、0.4％和0.5％增溶剂中的溶解度。
四种难溶性药物中，随着PSM/PIM含量比增加，提高PSM/PIM含量比，对增溶效果有一定影响，在黄芩苷和维生素A药物中，当含量比达到10/0时，样品的增溶效果最强，在布洛芬药物中，增溶效果有略微差异，黄芩苷药物的紫外吸收较强，响应较高，对于不同物化性能的药物，样品的增溶效果不同。(表18、表19、表20和图10)。
表18优化PSM/PIM配比样品及对照的被增溶峰面积(ΔA)
Figure BDA0002636312020000211
表19优化PSM/PIM配比样品的增溶性分数
Figure BDA0002636312020000212
表20优化PSM/PIM配比样品的安全性和增溶性总分
Figure BDA0002636312020000213
结合安全性分数，结果显示，提高PSM/PIM配比，样品的安全性和功能性总分显著增大，当配比为9/1～10/0时，安全性和增溶性综合效果最好。说明提高PSM/PIM配比，有助于实现聚山梨酯80相对增效减毒的目的。人们可以通过优化生产工艺来提高PSM/PIM含量比，以期得到安全性高的聚山梨酯类辅料。本发明为提高聚山梨酯类辅料安全性提供了研究方法和方向，为企业生产或选择安全性高的聚山梨酯类辅料提供了研究支持；同时聚山梨酯20,40,60同样适用于本发明的技术方案，其同样属于本发明的保护范围。

Claims (10)

1.一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品，其特征在于：所述PSM-油酸酯的份数与PIM-油酸酯的份数比例为0～10：0～10，其中，PSM-油酸酯的份数与PIM-油酸酯的份数之和为10份。
2.如权利要求1所述的优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品，其特征在于：所述PSM-油酸酯的份数/PIM-油酸酯的份数≥8/2。
3.如权利要求1所述的优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品，其特征在于：所述聚山梨酯80中还含有聚乙二醇、聚氧乙烯山梨醇酐、聚氧乙烯异山梨醇酐中的一种，聚氧乙烯山梨醇酐二油酸酯，聚氧乙烯山梨醇酐三油酸酯。
4.一种如权利要求3所述的优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1、取常规聚山梨酯80适量，用四氢呋喃溶解，制得浓度为0.5g/ml的供试品溶液，结合常规聚山梨酯80的分离图谱和各色谱峰的定性结果，设定收集参数，在线收集所需组分，得到样品溶液；
S2、将样品溶液于40℃旋转蒸发至溶剂挥干，用甲醇溶液溶解，再次旋干，最后抽真空挥发剩余溶剂，得到所制备的聚山梨酯80。
5.如权利要求4所述的优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
S3、将四氢呋喃溶液进行HPLC制备；
S4、将HPLC制备的条件设定为：色谱柱为150×19mm；柱温为室温；流动相：A为甲醇与水的混合物，甲醇：水＝95:5，B为四氢呋喃；流速为25ml/min；进样量为800μL；检测器为蒸发光散射检测器；漂移管温度为60℃；运行时间为19分钟；载气压力为40.0psi；数据采集速率为10点/秒；
S5、将甲醇溶液进行HPLC检测；
S6、将HPLC检测的条件设定为：色谱柱为4.6×150mm；柱温为30℃；流速为1.0ml/min；进样体积为20μL；检测器为蒸发光散射检测器；检测器温度为60℃；N2流速为1.6L/min；流动相：A为甲醇，B为THF；梯度洗脱过程为：第0.00～4.99min将100％A过渡到90％A；第5.00～18.99min将90％A过渡到20％A；第19.00～19.09min将20％A过渡到100％A；第19.10～24.00min为100％A。
6.一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的安全研究方法，其特征在于：所述安全研究方法包括对L-929初步细胞毒性进行评价、对L-02肝细胞毒性进行检测、对RBL-2H3细胞致敏性进行检测、对家兔红细胞溶血性进行检测。
7.一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的功能研究方法，其特征在于：采用研究药物模型对优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的增溶性进行研究。
8.如权利要求7所述的优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的功能研究方法，其特征在于：所述研究药物模型为布洛芬、维生素A、黄芩苷、紫杉醇中的一种。
9.一种优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的应用，其特征在于：所述聚山梨酯80产品的应用制剂为注射剂、片剂、乳膏剂、消毒液、栓剂、滴剂或膜剂。
10.如权利要求9所述的优化PSM/PIM-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品的应用，其特征在于：所述聚山梨酯80产品的应用制剂的给药方式为鼻腔给药、经皮给药、眼部给药、口服给药或注射给药。
CN202010826193.1A 2020-08-17 2020-08-17 一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法 Pending CN111973750A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010826193.1A CN111973750A (zh) 2020-08-17 2020-08-17 一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010826193.1A CN111973750A (zh) 2020-08-17 2020-08-17 一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN111973750A true CN111973750A (zh) 2020-11-24

Family

ID=73435112

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010826193.1A Pending CN111973750A (zh) 2020-08-17 2020-08-17 一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111973750A (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113092605A (zh) * 2021-03-22 2021-07-09 中国日用化学研究院有限公司 一种用于低分子量聚乙二醇检测的分析方法
CN115290772A (zh) * 2022-07-18 2022-11-04 长春圣金诺生物制药有限公司 一种检测注射用重组尿酸氧化酶中聚山梨酯80含量的方法
CN116297915A (zh) * 2023-02-10 2023-06-23 中国食品药品检定研究院 聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101983977A (zh) * 2010-08-17 2011-03-09 南京威尔化工有限公司 注射用聚山梨酯-80的合成方法
CN102127217A (zh) * 2010-12-16 2011-07-20 南京威尔化工有限公司 供注射用的聚山梨酯80（ⅰ）的合成方法
CN102352031A (zh) * 2011-07-21 2012-02-15 南京威尔化工有限公司 通过三类有效组分合成再混合制备高纯度聚山梨酯80的方法
CN102585198A (zh) * 2011-12-26 2012-07-18 南京泛太化工医药研究所 一种不含异山梨醇酐聚氧乙烯脂肪酸酯的聚山梨酯
CN108484898A (zh) * 2018-04-20 2018-09-04 江苏保易制药有限公司 不含聚氧乙烯异山梨醇脂肪酸酯的聚山梨酯的制备方法
CN109758582A (zh) * 2017-11-09 2019-05-17 中国食品药品检定研究院 一种穿透血脑屏障的聚山梨酯80及其组分形成的载药胶束递送系统

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101983977A (zh) * 2010-08-17 2011-03-09 南京威尔化工有限公司 注射用聚山梨酯-80的合成方法
CN102127217A (zh) * 2010-12-16 2011-07-20 南京威尔化工有限公司 供注射用的聚山梨酯80（ⅰ）的合成方法
CN102352031A (zh) * 2011-07-21 2012-02-15 南京威尔化工有限公司 通过三类有效组分合成再混合制备高纯度聚山梨酯80的方法
CN102585198A (zh) * 2011-12-26 2012-07-18 南京泛太化工医药研究所 一种不含异山梨醇酐聚氧乙烯脂肪酸酯的聚山梨酯
CN109758582A (zh) * 2017-11-09 2019-05-17 中国食品药品检定研究院 一种穿透血脑屏障的聚山梨酯80及其组分形成的载药胶束递送系统
CN108484898A (zh) * 2018-04-20 2018-09-04 江苏保易制药有限公司 不含聚氧乙烯异山梨醇脂肪酸酯的聚山梨酯的制备方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
SUN, HM ET AL.: "Component-based biocompatibility and safety evaluation of polysorbate 80", 《RSC ADVANCES》 *
王晓锋: "多组分聚山梨酯20 精确质量控制及其安全性结构探究", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113092605A (zh) * 2021-03-22 2021-07-09 中国日用化学研究院有限公司 一种用于低分子量聚乙二醇检测的分析方法
CN115290772A (zh) * 2022-07-18 2022-11-04 长春圣金诺生物制药有限公司 一种检测注射用重组尿酸氧化酶中聚山梨酯80含量的方法
CN116297915A (zh) * 2023-02-10 2023-06-23 中国食品药品检定研究院 聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法
CN116297915B (zh) * 2023-02-10 2023-12-01 中国食品药品检定研究院 聚山梨酯类辅料的分析鉴定方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111973750A (zh) 一种优化psm/pim-油酸酯不同比例的聚山梨酯80产品及制备方法
CN109943605A (zh) 一种均一组分低聚原花青素的制备方法
CN111303154A (zh) 马齿苋中一种具有抗炎活性生物碱及其提取分离方法与用途
CN109337953B (zh) 一种桦褐孔菌素d提取物及其制备方法与检测方法
CN110818669A (zh) 沉香四氢2-（2-苯乙基）色酮类化合物及其分离方法和应用
CN112358516A (zh) 一种香叶木素(4-o-甲基)葡萄糖苷类化合物在制备降脂药物中的应用
CN113101293B (zh) 熊果酸衍生物在制备治疗神经系统疾病药物中的应用
Gaylord et al. Isolation of diphenyl-substituted tetronic acids from cultures of Paxillus atrotomentosus
CN110057933B (zh) 一种多种维生素矿物质复方制剂中维生素k2的检测方法
CN110749679B (zh) 一种三甲基吡嗪残留的检测方法
CN109438302B (zh) 一种酸/还原降解两亲性化合物及其制备方法与用途
CN112505223A (zh) 一种同时检测食品中毒黄素和米酵菌酸含量的方法
CN109232253B (zh) 阿魏酸饱和脂肪二酯的制备方法
CN111012687A (zh) 一种复方非瑟酮微乳凝胶及其制备方法和应用
CN113135975B (zh) 一种熊果酸衍生物及其制备方法与应用
CN112114080B (zh) 一种阿立哌唑有关物质的检测方法
CN114917246B (zh) 覆盆子多糖r2在制备抗肿瘤药物和抗炎制剂中的应用
CN115260336B (zh) 一种海洋杂色曲霉胞外多糖、制备方法及其应用
CN105002230B (zh) 一种酶提取紫锥菊多糖的方法
CN113143934B (zh) 熊果酸衍生物在制备预防或治疗心血管疾病药物中的应用
CN115286597B (zh) 一种沙棘籽粕中5-羟色胺的分离制备方法及用途
CN111574362B (zh) 一种脂肪酸类化合物
CN116590185B (zh) 一株鼠李糖乳杆菌与酵母菌共发酵改善豌豆粉特性的应用
CN114230682B (zh) 一种功能性香蕉多糖bpf2及其制备与应用
CN114920723B (zh) 一种具有抗氧化活性的色烯类化合物及其制备方法与应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20201124