CN109943605A - 一种均一组分低聚原花青素的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种均一组分低聚原花青素的制备方法，包括步骤：将经灭菌的含有原花青素的物料粉末加入水中，接种微生物进行发酵；然后经提取、脱脂、萃取、干燥得原花青素粗品；然后将原花青素粗品溶于溶剂a中，过树脂柱，经洗脱、除去洗脱液、冻干得低聚原花青素。本发明方法得到的低聚原花青素纯度高、产率高、聚合度均一、平均聚合度较小。

Description

一种均一组分低聚原花青素的制备方法

技术领域

本发明涉及一种天然原花青素的制备方法，特别涉及一种均一组分低聚原花青素的制备方法，属于生物工程技术领域。

背景技术

原花青素(Proanthocyanidin，简称PC)是广泛存在于植物中的多酚类化合物，是缩合单宁中的一种，由不同数量的黄烷醇类单体儿茶素(Catechin,C)、表儿茶素(Epicatechin,EC)、儿茶素没食子酸酯(Catechin-3-O-gallate,CG)和表儿茶素没食子酸酯(Epicatechin-3-O-gallate,ECG)缩合而成，形成二聚体直至十五聚体化合物。通常将二至四聚体称为低聚原花青素(OPC)，将五聚体以上称为高聚原花青素(PPC)。原花青素资源分布广泛，存在于葡萄、花生、松树皮、茶叶、苹果、白桦树、银杏、莲房等植物部位中，法国教授Jaeques Masquelier于1951年首次从海松树皮中成功提取出原花青素，上世纪70年代又从葡萄籽中分离得到，这是目前主要的原花青素的来源。

原花青素因其突出的抗氧化活性而被广泛关注，是国际公认的清除人体自由基最有效的天然抗氧化剂，其抗氧化活性远远高于维生素C和维生素E，约为V_E的50倍，V_C的20倍。此外，还发现原花青素可以有效降低胆固醇和低密度脂蛋白水平，预防血栓形成，有助于预防心脑血管病的发生。且原花青素是一种毒性低，非常安全的物质，毒理实验表明，大鼠灌胃葡萄籽提取物，LD50在4000mg/kg以上，且连续灌胃60mg/kg●d 6个月无任何副作用且耐受性良好，无致畸致突变作用。目前原花青素已成为医药、保健品中的重要添加剂产品，由于其高效的抗氧化活性，在清除自由基和抗衰老方面尤其受消费者的青睐。

在原花青素中，OPC的活性，尤其是二聚体和三聚体要远大于高聚体PPC。且由于PPC结构复杂，且聚合度越大，水溶性越差，不易于人体吸收，降低了生物利用率，同时PPC存在较高的收敛性，口感较差，在实际应用中制约了原花青素的发展。迄今为止已有大量文献和专利报道制备原花青素。如，中国专利文献CN1454896A公开了一种葡萄籽低聚原花青素的提取方法，该方法首先是将葡萄籽进行粉碎、过筛、脱脂，再经含无机矿酸的有机溶剂提取、过滤、无机碱中和、过滤、减压浓缩后即可得到原花青素粗提物，再将粗提物中加入石油醚或三氯甲烷，放置、过滤、干燥得到精制原花青素；虽然该发明能够得到低聚原花青素，但该发明没有对复杂的原花青素组分进行分离，得到的原青花素聚合度不够均一，且虽是低聚原花青素，但聚合度还是偏高，且产率较低。又如，中国专利文献CN102690858A公开一种葡萄籽原花青素的制备方法，首先制备康宁木霉和黑曲霉直投式发酵剂，然后将葡萄籽经加水磨浆、加葡萄糖配料、高温灭菌、接菌发酵、离心除渣、超滤提取、干燥等工艺制成葡萄籽原花青素；但该发明发酵剂的制备步骤繁琐，成本较高，最后得到的原花青素聚合度不均一。

发明内容

针对现有技术存在的问题，为提高原花青素聚合度的均一性，降低平均聚合度，本发明提供一种均一组分低聚原花青素的制备方法；本发明方法得到的低聚原花青素纯度高、产率高、聚合度均一、平均聚合度较小。

本发明的技术方案如下：

一种均一组分低聚原花青素的制备方法，包括步骤：

(1)将经灭菌的含有原花青素的物料粉末加入水中，混合均匀得混合物；然后接种微生物进行发酵得发酵物料；所述微生物为米曲霉(Aspergillus oryzae)、绿色木霉(Trichoderma viride)、黑曲霉、根霉或白腐真菌中的一种或两种以上的组合；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入提取液进行提取，取液体，经除去提取液中的有机溶剂得提取物；然后经脱脂得脱脂物，经萃取、干燥得原花青素粗品；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于溶剂a中，过树脂柱，然后进行洗脱，经除去洗脱液、冻干得低聚原花青素。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述含有原花青素的物料为葡萄籽、花生衣或松树皮中的一种或两种以上的组合。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述含有原花青素的物料粉末的粒径为20～80目；优选的，步骤(1)中所述含有原花青素的物料粉末的粒径为20目。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述混合物中水的质量含量为10％～60％；优选的，步骤(1)中所述混合物中水的质量含量为50％。

根据本发明优选的，步骤(1)中，利用质量浓度为20～60％的乙酸水溶液调节混合物的pH为6.5。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述微生物为米曲霉。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述微生物的接种量为0.5～2％；优选的，步骤(1)中所述微生物的接种量为1％。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述发酵温度为28～35℃，静置发酵3～7天，发酵过程中每天进行翻料；优选的，步骤(1)中所述发酵温度为31℃，静置发酵3天。

根据本发明优选的，步骤(2)中所述提取液为体积比为50％～80％的丙酮/水、乙醇/水或甲醇/水中的一种；优选的，步骤(2)中所述提取液为体积比为70％的丙酮/水。

根据本发明优选的，步骤(1)中所述经灭菌的含有原花青素的物料粉末的质量与步骤(2)中所述提取液的体积比为1:2～5kg/L。

根据本发明优选的，步骤(2)中，提取温度为室温，超声搅拌提取2～5h。

根据本发明优选的，步骤(2)中所述脱脂所用溶剂为石油醚、正己烷、环己烷或四氯化碳中的一种；优选的，步骤(2)中所述脱脂所用溶剂为石油醚。

优选的，所述溶剂与步骤(2)中所述提取物的体积比为1:1～2。

根据本发明优选的，步骤(2)中所述萃取所用萃取剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷或正丁醇中的一种；优选的，步骤(2)中所述萃取所用萃取剂为乙酸乙酯。

优选的，所述萃取剂与步骤(2)中所述脱脂物的体积比为1:1～2。

根据本发明优选的，步骤(2)中所述脱脂和萃取均在室温进行。

根据本发明优选的，步骤(2)中所述干燥是于35～60℃旋干溶剂得原花青素粗品；优选的，所述干燥温度为40℃。

根据本发明优选的，步骤(3)中所述溶剂a为质量浓度为5％的甲醇水溶液；所述原花青素粗品的质量与5％甲醇水溶液的体积比为1:10～1:20kg/L。

根据本发明优选的，步骤(3)中所述树脂柱为LH-20凝胶柱；所述凝胶柱为湿法装填，用5wt％的甲醇水溶液平衡。

根据本发明优选的，步骤(3)中所述洗脱方法为梯度洗脱，依次用质量浓度为5wt％、30wt％、70wt％、95wt％的甲醇水溶液进行洗脱。

优选的，所述每个质量浓度梯度的甲醇水溶液的用量均为3个树脂柱体积。

根据本发明，用盐酸-香草醛法检测低聚原花青素的平均聚合度，检测方法包括步骤：

A：称取15-40mg的样品用甲醇溶解，最后定容于100mL；从中取1mL样品溶液加到10mL比色管中，然后再加入3mL 4wt％香草醛甲醇溶液和1.5mL质量浓度为37％的浓盐酸，在20土1℃下避光反应15min后，在500nm处测定其吸光度；以甲醇代替样品溶液作为空白，用原花青素(Sigma公司，含量98.5wt％)标准曲线计算样品中原花青素的质量a；

B：称取1.5-4mg样品用冰乙酸溶解，最后定容于100mL；从中取1mL样品溶液加到10mL比色管中，然后再加入5mL含4wt％盐酸和0.5wt％香草醛的冰乙酸溶液，在20土1℃下避光反应15min后，在500nm处测定其吸光度，以冰乙酸代替样品溶液作为空白，用儿茶素标准曲线计算样品中原花青素物质的量b；

样品的平均聚合度为a/b/290。

根据本发明，本发明中所述米曲霉(Aspergillus oryzae)、绿色木霉(Trichoderma viride)、黑曲霉、根霉和白腐真菌均为现有技术，可市购获得。

本发明的技术特点及有益效果：

1、本发明以葡萄籽、花生衣或松树皮等为原料，采用微生物固体发酵、萃取、柱层析等技术降低了原料中原花青素的平均聚合度，提高了聚合度的均一性，并且增加了低聚合度的原花青素的含量，进一步提高产率；本发明选用的微生物皆为腐生真菌及有广泛应用的发酵菌种，相比酵母菌，丝状真菌具有更强的降解能力，米曲霉和黑曲霉为工业用途很广的发酵菌种，具有极强的降解大分子的能力，且具有能够有效降解大分子多酚和单宁的能力，本专利即借用此能力来降解高聚合的原花青素，而得到低聚原花青素。

2、本发明的萃取工艺常温常压下即可进行，本发明优选利用乙酸乙酯作为萃取剂，乙酸乙酯可以针对性的萃取低聚合度的原花青素，不会对原花青素的结构造成破坏，安全有效，且工艺简单，成本低。

3、本发明过树脂柱，依次以5wt％甲醇水溶液、30wt％甲醇水溶液、70wt％甲醇水溶液、95wt％甲醇水溶液进行洗脱，用70％的甲醇水溶液进行洗脱后所得洗脱液中的原花青素为二聚及三聚原花青素组分，平均聚合度为2.1，产率达30.15g/kg干基原料，产率高，纯度高达98.37％，得到了均一组分的低聚原花青素。本发明柱子优选兼有分子排阻和极性吸附作用的LH-20树脂，可针对低聚原花青素分子量和极性进行洗脱，可得到分子量较为均一的原花青素组分。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明做进一步的说明，但不限于此。

同时下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

实施例1

一种均一组分低聚原花青素的制备方法，具体工艺参数如下：

(1)称取5kg新鲜葡萄籽，粉碎至20目，灭菌后转移至固体发酵罐，用质量浓度为50％的乙酸水溶液调节水的pH为6.5，然后用上述pH为6.5的水调节湿度至体系含水量为60wt％，按照接种量1％接入米曲霉(中国工业微生物菌种保藏管理中心有售)，31℃发酵3天，每天翻搅物料，得发酵物料；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入10L体积比为70％的丙酮/水，室温超声搅拌提取3h，过滤得上清液，提取3次，合并，40℃旋干丙酮，得提取物。按照与提取物的体积比1:1加入石油醚，反复脱脂3次，得脱脂物；按照与脱脂物的体积比1:1加入乙酸乙酯萃取3次，合并乙酸乙酯相，35℃旋干得原花青素粗品；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于5wt％甲醇水溶液并过LH-20凝胶柱，凝胶柱采用湿法装填，以5wt％甲醇水溶液平衡。依次以5wt％甲醇水溶液、30wt％甲醇水溶液、70wt％甲醇水溶液、95wt％甲醇水溶液各洗脱3个柱体积，每个馏分蒸干甲醇并冻干，其中5％甲醇水溶液所得到的产物为小分子糖类，苷类等杂质，30％甲醇水溶液所得到的产物为花青素组分及少量儿茶素、表儿茶素。70％甲醇水溶液所得到的产物为二聚及三聚原花青素组分，95％甲醇水溶液所得到的产物为高聚原花青素组分；70％甲醇水溶液所得到的产物即为均一组分低聚原花青素；

(4)利用盐酸香草醛法检测70％甲醇水溶液所得到的低聚原花青素组分平均聚合度，测试方法如下：

A：称取15-40mg的样品用甲醇溶解，最后定容于100mL。从中取1mL样品溶液加到10mL比色管中，然后再加入3mL 4wt％香草醛甲醇溶液和1.5mL质量浓度为37％的浓盐酸在20土1℃下避光反应15min后，在500nm处测定其吸光度，以甲醇代替样品溶液作为空白，用原花青素(Sigma公司，含量98.5wt％)标准曲线计算样品中原花青素的质量a；

B：称取1.5-4mg样品用冰乙酸溶解，最后定容于100mL。从中取1mL样品溶液加到10mL比色管中，然后再加入5mL含4wt％盐酸和0.5wt％香草醛的冰乙酸溶液，在20土1℃下避光反应15min后，在500nm处测定其吸光度，以冰乙酸代替样品溶液作为空白，用儿茶素标准曲线计算样品中原花青素物质的量b；

样品的平均聚合度为a/b/290。

实施例2

一种均一组分低聚原花青素的制备方法，具体工艺参数如下：

(1)称取5kg花生衣，粉碎至80目，灭菌后转移至固体发酵罐，用质量浓度为60％的乙酸水溶液调节水的pH为6.5，然后用上述pH为6.5的水调节湿度至体系含水量50wt％，，按照接种量1％接入绿色木霉(中国工业微生物菌种保藏管理中心有售)，31℃发酵3天，每天翻搅物料，得发酵物料；；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入15L体积比为70％的乙醇/水，室温超声搅拌提取3h，过滤得上清液，提取3次，合并，35℃旋干乙醇，得提取物。按照与提取物的体积比1:1加入环己烷，反复脱脂3次，得脱脂物；按照与脱脂物的体积比1:1加入二氯甲烷萃取3次，合并二氯甲烷相，35℃旋干得原花青素粗品；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于5wt％甲醇水溶液并过LH-20凝胶柱，凝胶柱采用湿法装填，以5wt％甲醇水溶液平衡。依次以5wt％甲醇水溶液、30wt％甲醇水溶液、70wt％甲醇水溶液、95wt％甲醇水溶液各洗脱3个柱体积，每个馏分蒸干甲醇并冻干，其中5％甲醇水溶液所得到的产物为小分子糖类，苷类等杂质，30％甲醇水溶液所得到的产物为花青素组分及少量儿茶素、表儿茶素。70％甲醇水溶液所得到的产物为二聚及三聚原花青素组分，95％甲醇水溶液所得到的产物为高聚原花青素组分；70％甲醇水溶液所得到的产物即为均一组分低聚原花青素；

(4)利用盐酸香草醛法检测70％甲醇水溶液所得到的低聚原花青素组分平均聚合度，测试方法如实施例1所述。

实施例3

一种均一组分低聚原花青素的制备方法，具体工艺参数如下：

(1)称取5kg雪松树皮，粉碎至20目，灭菌后转移至固体发酵罐，用质量浓度为40％的乙酸水溶液调节水的pH为6.5，然后用上述pH为6.5的水调节湿度至体系含水量20wt％，，按照接种量1％接入米曲霉，31℃发酵3天，每天翻搅物料，得发酵物料；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入25L体积比为50％的丙酮/水，室温超声搅拌提取3h，过滤得上清液，提取3次，合并，60℃旋干丙酮得提取物。按照与提取物的体积比1:1加入正己烷，反复脱脂3次，得脱脂物；按照与脱脂物的体积比1:1加入三氯甲烷萃取3次，合并三氯甲烷相，35℃旋干得原花青素粗品；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于5wt％甲醇水溶液并过LH-20凝胶柱，凝胶柱采用湿法装填，以5wt％甲醇水溶液平衡。依次以5wt％甲醇水溶液、30wt％甲醇水溶液、70wt％甲醇水溶液、95wt％甲醇水溶液各洗脱3个柱体积，每个馏分蒸干甲醇并冻干，其中5％甲醇水溶液所得到的产物为小分子糖类，苷类等杂质，30％甲醇水溶液所得到的产物为花青素组分及少量儿茶素、表儿茶素。70％甲醇水溶液所得到的产物为二聚及三聚原花青素组分，95％甲醇水溶液所得到的产物为高聚原花青素组分；70％甲醇水溶液所得到的产物即为均一组分低聚原花青素；

(4)利用盐酸香草醛法检测70％甲醇水溶液所得到的低聚原花青素组分平均聚合度，测试方法如实施例1所述。

实施例4

一种均一组分低聚原花青素的制备方法，具体工艺参数如下：

(1)称取5kg新鲜葡萄籽，粉碎至20目，灭菌后转移至固体发酵罐，用质量浓度为20％的乙酸水溶液调节水的pH为6.5，然后用上述pH为6.5的水调节湿度至体系含水量60wt％，，按照接种量1％接入米曲霉，31℃发酵3天，每天翻搅物料，得发酵物料；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入10L体积比为80％甲醇/水，室温超声搅拌提取3h，过滤得上清液，提取3次，合并，40℃旋干甲醇，得提取物。按照与提取物的体积比1:2加入四氯化碳，反复脱脂3次，得脱脂物；按照与脱脂物的体积比1:2加入正丁醇萃取3次，合并正丁醇相，35℃旋干得原花青素粗品；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于5wt％甲醇水溶液并过LH-20凝胶柱，凝胶柱采用湿法装填，以5wt％甲醇水溶液平衡。依次以5wt％甲醇水溶液、30wt％甲醇水溶液、70wt％甲醇水溶液、95wt％甲醇水溶液各洗脱3个柱体积，每个馏分蒸干甲醇并冻干，其中5％甲醇水溶液所得到的产物为小分子糖类，苷类等杂质，30％甲醇水溶液所得到的产物为花青素组分及少量儿茶素、表儿茶素。70％甲醇水溶液所得到的产物为二聚及三聚原花青素组分，95％甲醇水溶液所得到的产物为高聚原花青素组分；70％甲醇水溶液所得到的产物即为均一组分低聚原花青素；

(4)利用盐酸香草醛法检测70％甲醇水溶液所得到的低聚原花青素组分平均聚合度，测试方法如实施例1所述。

对比例1

一种原花青素的制备方法，如实施例4所述，所不同的是：步骤(1)中，米曲霉替换为酵母菌(中国工业微生物菌种保藏管理中心有售)，其它条件与实施例4一致。

对比例2

一种原花青素的制备方法，如实施例4所述，所不同的是：

步骤(1)中，米曲霉替换为黑曲霉(中国工业微生物菌种保藏管理中心有售)，31℃发酵5天；

步骤(3)中，将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于5wt％甲醇水溶液并过AB-8型大孔吸附树脂，树脂采用湿法装填，以5wt％甲醇水溶液平衡。依次以5wt％甲醇水溶液、10wt％甲醇水溶液、20wt％甲醇水溶液、40wt％甲醇水溶液、95wt％甲醇水溶液各洗脱3个柱体积，收集20％和40％原花青素组分；

其它条件与实施例4一致。

试验例1

对实施例1-4以及对比例1、2制备得到的原花青素的纯度、产率和平均聚合度进行测试，结果如下：

表1测定结果

样品	OPC纯度	OPC产率	OPC平均聚合度
				实施例1	98.37％	30.15g/kg	2.12
实施例2	96.25％	25.21g/kg	2.28
				实施例3	95.96％	26.18g/kg	2.25
实施例4	97.57％	19.26g/kg	2.19
				对比例1	94.25％	10.75g/kg	2.34
对比例2	92.73％	27.97g/kg	5.85

由表1可知，本发明经发酵后提取并纯化低聚原花青素，可以显著提高OPC得率，且通过控制洗脱液极性和洗脱体积，可得到平均聚合度较低的均一组分。本发明中还换用酵母菌作为发酵菌种探究OPC的提取分离情况，发现换用酵母菌，OPC纯度和平均聚合度并没有明显变化，而且OPC的产率显著下降，说明酵母菌的发酵并没有使总体原花青素的平均聚合度降低，因此原花青素中多以高聚体形式存在，低聚体原花青素的产生较少；同时，换用AB-8型大孔吸附树脂与LH-20凝胶进行对比，发现大孔吸附树脂并不能把原花青素按照分子量分开，得到的原花青素精制物平均聚合度达到5.85，远高于本发明。

Claims (10)

1.一种均一组分低聚原花青素的制备方法，包括步骤：

(1)将经灭菌的含有原花青素的物料粉末加入水中，混合均匀得混合物；然后接种微生物进行发酵得发酵物料；所述微生物为米曲霉(Aspergillus oryzae)、绿色木霉(Trichoderma viride)、黑曲霉、根霉或白腐真菌中的一种或两种以上的组合；

(2)向步骤(1)得到的发酵物料中加入提取液进行提取，取液体，经除去提取液中的有机溶剂得提取物；然后经脱脂得脱脂物，经萃取、干燥得原花青素粗品；

(3)将步骤(2)制备的原花青素粗品溶于溶剂a中，过树脂柱，然后进行洗脱，经除去洗脱液、冻干得低聚原花青素。

2.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，包括以下条件中任一项或多项：

a、所述含有原花青素的物料为葡萄籽、花生衣或松树皮中的一种或两种以上的组合；

b、所述含有原花青素的物料粉末的粒径为20～80目；

c、所述混合物中水的质量含量为10％～60％；

d、利用质量浓度为20-60％的乙酸水溶液调节混合物的pH为6.5。

3.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(1)中，包括以下条件中任一项或多项：

a、所述微生物为米曲霉；

b、所述微生物的接种量为0.5～2％；优选的，步骤(1)中所述微生物的接种量为1％；

c、所述发酵温度为28～35℃，静置发酵3～7天，发酵过程中每天进行翻料；优选的，所述发酵温度为31℃，静置发酵3天。

4.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(2)中，包括以下条件中任一项或多项：

a、所述提取液为体积比为50％～80％的丙酮/水、乙醇/水或甲醇/水中的一种；优选的，所述提取液为体积比为70％的丙酮/水；

b、步骤(1)中所述经灭菌的含有原花青素的物料粉末的质量与步骤(2)中所述提取液的体积比为1:2～5kg/L；

c、所述提取温度为室温，超声搅拌提取2～5h；

d、所述脱脂所用溶剂为石油醚、正己烷、环己烷或四氯化碳中的一种；优选的，所述溶剂与步骤(2)中所述提取物的体积比为1:1～2。

5.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述萃取所用萃取剂为乙酸乙酯、二氯甲烷、三氯甲烷或正丁醇中的一种；优选的，步骤(2)中所述萃取所用萃取剂为乙酸乙酯。

6.根据权利要求5所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，所述萃取剂与步骤(2)中所述脱脂物的体积比为1:1～2。

7.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述溶剂a为质量浓度为5％的甲醇水溶液；所述原花青素粗品的质量与5％甲醇水溶液的体积比为1:10～20kg/L。

8.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述树脂柱为LH-20凝胶柱；所述凝胶柱为湿法装填，用5wt％的甲醇水溶液平衡。

9.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述洗脱方法为梯度洗脱，依次用质量浓度为5wt％、30wt％、70wt％、95wt％的甲醇水溶液进行洗脱；

优选的，所述每个质量浓度梯度的甲醇水溶液的用量均为3个树脂柱体积。

10.根据权利要求1所述的均一组分低聚原花青素的制备方法，其特征在于，用盐酸-香草醛法检测低聚原花青素的平均聚合度。