CN109438302B - 一种酸/还原降解两亲性化合物及其制备方法与用途 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种酸/还原降解两亲性化合物及其制备方法与用途，通过以衣康酸酐、2，2’‑二硫二乙醇和乙烯基异辛醚作为原料，以氯仿作为溶剂，以对甲苯磺酸作为催化剂，分两步进行反应。第一步为衣康酸酐和2，2’‑二硫二乙醇发生反应，得到纯产物A，接着将纯产物A与乙烯基异辛醚反应，得到酸/还原降解两亲性化合物。通过酸/还原降解两亲性化合物制得的纳米胶束的生物相容性很好，基本无毒，对人体健康不会产生影响，也不会被人体所排斥；同时还可以在酸性条件下发生降解，同时还会在高还原(如加DTT)或者特定的酶(如谷胱甘肽GSH)的表达环境下发生降解，适合作为一些抗癌药物的靶向载体。
Description
技术领域
本发明涉及有机合成领域，更具体的说是涉及一种酸/还原降解两亲性化合物及其制备方法与用途。
背景技术
癌症是指起源于上皮组织的恶性肿瘤，是恶性肿瘤中最常见的一类，是世界五大绝症之一。为了治疗癌症，各国的科学家研制出了各种抗癌药物，这些抗癌药物能够对治疗癌症起到一定的康复作用，但现有的临床抗癌药物在实际应用中存在毒性过强、水溶性差等制约因素，这些因素大大的限制抗癌药物的应用。为了降低抗癌药物的毒性以及提高其水溶性，科学家想通过药物载体装载这些抗癌药物来解决这些制约因素，特别是自组装两亲聚合物胶束药物载体备受国内外学者的关注，因为其亲水外壳能够避免网状内皮系统(RES)识别与吞噬，延长药物体内循环时间；疏水内核可作为疏水药物储存器，具有较强药物负载能力。但目前现有的两亲性胶束的生物相容性较差，易受到人体排斥，从而对患者康复造成影响，限制了其发展。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明的目的在于提供一种酸/还原降解两亲性化合物及其制备方法，该化合物制得的纳米胶束具有很好的生物相容性，不易被人体所排斥。
为实现上述目的，本发明提供了如下技术方案：一种酸/还原降解两亲性化合物，包括下列摩尔份物质组成：
2，2’-二硫二乙醇0.8-1份；
衣康酸酐0.8-1.2份；
乙烯基异辛醚0.8-1.2份。
作为本发明的进一步改进，所述衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇和乙烯基异辛醚的反应是在溶剂中进行，所述溶剂为氯仿。
作为本发明的进一步改进，所述衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇和乙烯基异辛醚在溶剂中反应时，还向溶剂中加入了催化剂，所述催化剂为对甲苯磺酸。
作为本发明的进一步改进，所述化合物的分子结构式为
其反应式为
作为本发明的进一步改进，一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将2，2’-二硫二乙醇与氯仿放入反应容器A中混合均匀，形成混合溶液A；
步骤二：将衣康酸酐与氯仿放入反应容器B中混合均匀，形成混合溶液B；
步骤三：将混合溶液B倒入混合溶液A中混合均匀，然后升高溶液温度，反应开始；
步骤四：待步骤三中反应完全后，经过干燥获得粗产物，粗产物用硅胶柱层析分离得到纯产物A；
步骤五：将纯产物A、氯仿和对甲苯磺酸放入反应容器C中搅拌混合，形成混合溶液C；
步骤六：将乙烯基异辛醚和氯仿放入反应容器D中混合均匀，形成混合溶液D；
步骤七：将混合溶液D倒入混合溶液C中混合均匀，然后升高溶液温度，反应开始；
步骤八：待步骤七中反应完全后，经过干燥获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析分离得到酸/还原降解两亲性化合物。
作为本发明的进一步改进，步骤三中升高溶液温度，反应开始是指将溶液温度升高至50-70℃，然后在转速为1000-1400rad/min的条件下开始反应，反应时间为10-14h。
作为本发明的进一步改进，步骤七中升高溶液温度，反应开始是指将溶液温度升高至80-120℃，然后在转速为1400-1600rad/min的条件下开始反应，反应时间为14-16h。
作为本发明的进一步改进，步骤四中硅胶柱层析分离所用的展开剂为乙酸乙酯；步骤八中硅胶柱层析分离所用的展开剂为石油醚和乙酸乙酯的混合液，其中石油醚和乙酸乙酯的体积比为3：1。
作为本发明的进一步改进，一种酸/还原降解两亲性化合物制备成纳米胶束的方法，包括以下步骤：
S1：将酸/还原降解两亲性化合物20mg溶于四氢呋喃2ml中，形成溶液；
S2：取S1中制得的20ul溶液加入到2ml去离子水中，混合搅拌制得纳米胶束。
作为本发明的进一步改进，所述纳米胶束作为药物载体使用。
本发明的有益效果：通过以衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇和乙烯基异辛醚作为原料，以氯仿作为溶剂，以对甲苯磺酸作为催化剂，分两步进行反应。作为本发明的一个新创点，在第一步反应时，先将2，2’-二硫二乙醇溶于氯仿中形成混合溶液A，衣康酸酐溶于氯仿中形成混合溶液B，再将混合溶液A与混合溶液B混合均匀，然后升高温度，反应开始；这样的目的是保证反应物衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇能够完全溶于氯仿中，在氯仿溶剂分散开来，便于两者之间发生较好的反应，反应更加充分完全，产率也更高；衣康酸酐和1，4-丁二醇反应温度设置为50-70摄氏度，优选60摄氏度，进一步提高产物的产率，反应时间为10-14h，优选12h；反应完全之后进行干燥，处理，硅胶柱层析分离得到纯产物A；在第二步反应时，为了避免因为反应物在氯仿中分散不均匀而导致产率较低的现象发生，先将纯产物A与对甲苯磺酸和氯仿混合形成混合溶液C，乙烯基异辛醚和氯仿混合形成混合溶液D，再将混合溶液C与混合溶液D混合均匀，发生反应；进一步提高了本发明的产率；第二步反应温度为80-120摄氏度，优选100摄氏度，反应时间为14-16h，优选15h；最终制得的酸/还原降解两亲性化合物的产率可达90％；此外本发明的反应温度最高不超过120摄氏度，且在常压下进行，反应条件十分温和，反应步骤也仅为两步，适合工业生产，适合大规模生产。本发明制得的酸/还原降解两亲性化合物，一端亲油，另一端亲水，具有两亲性，能够在水中自组装成纳米胶束。本发明制得的酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束的生物相容性很好，基本无毒，对人体健康不会产生影响，也不会被人体所排斥；同时还可以在酸性条件下发生降解，同时还会在高还原(如加DTT)或者特定的酶(如谷胱甘肽GSH)的表达环境下发生降解，进一步拓展了其应用范围，特别适合作为一些抗癌药物的靶向载体。
附图说明
图1为本发明实施例1产物的核磁共振氢谱图；
图2为本发明实施例1产物的红外光谱图；
图3为本发明实施例1制得的纳米胶束酸降解前后的的DLS粒径图；
图4为本发明实施例1制得的纳米胶束还原降解前后的的DLS粒径图。
具体实施方式
下面结合附图和实施例，对本发明进一步详细说明。
一种酸/还原降解两亲性化合物，所述化合物的分子结构式为
实施例1
一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将0.0009mol2，2’-二硫二乙醇与10ml氯仿放入反应容器A中，在25℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液A；
步骤二：将0.001mol衣康酸酐与10ml份氯仿放入反应容器B中混合均匀，在25℃的条件下，以300rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液B；
步骤三：将混合溶液B倒入混合溶液A中，在30℃的条件下，以400rad/min的转速搅拌20min；将溶液温度升高至60℃，然后在转速为1200rad/min的条件下开始反应，反应时间为12h；
步骤四：待步骤三中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为乙酸乙酯)分离得到纯产物A；
步骤五：将步骤四制得的纯产物A、10ml氯仿和0.000045mol对甲苯磺酸放入反应容器C中，在30℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液C；
步骤六：将0.0009mol乙烯基异辛醚和10ml氯仿放入反应容器D中，在20℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液D；
步骤七：将混合溶液D倒入混合溶液C中，在30℃的条件下，以400rad/min的转速搅拌25min；接着将溶液温度升高至100℃，然后在转速为1500rad/min的条件下开始反应，反应时间为15h；
步骤八：待步骤七中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝3∶1)分离得到酸/还原降解两亲性化合物。
实施例2
一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将0.001mol2，2’-二硫二乙醇与10ml氯仿放入反应容器A中，在25℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液A；
步骤二：将0.0012mol衣康酸酐与10m1份氯仿放入反应容器B中混合均匀，在25℃的条件下，以300rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液B；
步骤三：将混合溶液B倒入混合溶液A中，在30℃的条件下，以400rad/min的转速搅拌20min；将溶液温度升高至60℃，然后在转速为1200rad/min的条件下开始反应，反应时间为12h；
步骤四：待步骤三中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为乙酸乙酯)分离得到纯产物A；
步骤五：将步骤四制得的纯产物A、10ml氯仿和0.000045mol对甲苯磺酸放入反应容器C中，在30℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液C；步骤六：将0.0012mol乙烯基异辛醚和10m1氯仿放入反应容器D中，在20℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液D；
步骤七：将混合溶液D倒入混合溶液C中，在30℃的条件下，以400rad/min的转速搅拌25min；接着将溶液温度升高至100℃，然后在转速为1500rad/min的条件下开始反应，反应时间为15h；
步骤八：待步骤七中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝3∶1)分离得到酸/还原降解两亲性化合物。
实施例3
一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将0.0008mol2，2’-二硫二乙醇与10m1氯仿放入反应容器A中，在25℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液A；
步骤二：将0.0008mol衣康酸酐与10m1份氯仿放入反应容器B中混合均匀，在25℃的条件下，以300rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液B；
步骤三：将混合溶液B倒入混合溶液A中，在30℃的条件下，以400rad/min的转速搅拌20min；将溶液温度升高至60℃，然后在转速为1200rad/min的条件下开始反应，反应时间为12h；
步骤四：待步骤三中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为乙酸乙酯)分离得到纯产物A；
步骤五：将步骤四制得的纯产物A、10ml氯仿和0.000045mol对甲苯磺酸放入反应容器C中，在30℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液C；步骤六：将0.0008mol乙烯基异辛醚和10ml氯仿放入反应容器D中，在20℃的条件下，以200rad/min的转速搅拌15min，形成混合溶液D；
步骤七：将混合溶液D倒入混合溶液C中，在30℃的条件下，以400rad/min的转速搅拌25min；接着将溶液温度升高至100℃，然后在转速为1500rad/min的条件下开始反应，反应时间为15h；
步骤八：待步骤七中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝3∶1)分离得到酸/还原降解两亲性化合物。
对比例1
一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将0.0009mol2，2’-二硫二乙醇、0.001mol衣康酸酐和20ml氯仿依次放入反应容器中，以400rad/min的转速搅拌20min，形成混合溶液A；将混合溶液A的温度升高至60℃，然后在转速为1200rad/min的条件下开始反应，反应时间为12h；
步骤二：待步骤一中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为乙酸乙酯)分离得到纯产物A；
步骤三：将步骤二中制得的纯产物A、0.0009mol乙烯基异辛醚、20ml氯仿和0.000045mol对甲苯磺酸依次放入反应容器中，以400rad/min的转速搅拌25min，形成混合溶液B；接着将混合溶液B的温度升高至100℃，然后在转速为1500rad/min的条件下开始反应，反应时间为15h；
步骤四：待步骤三中反应完全后，在35℃、0.09Mpa下干燥10min，获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析(展开剂为石油醚：乙酸乙酯＝3∶1)分离得到酸/还原降解两亲性化合物。
本发明的反应方程式：
将实施例1-3和对比例1中制得的酸/还原降解两亲性化合物进行称量，然后计算产率；
| 试样 | 理论/g | 实际/g | 产率/％ |
| 实施例1 | 0.3816 | 0.351 | 92.0 |
| 实施例2 | 0.424 | 0.364 | 85.8 |
| 实施例3 | 0.3392 | 0.298 | 87.9 |
| 对比例1 | 0.3816 | 0.269 | 70.5 |
将实施例1制得的试样用核磁共振仪进行检测，制得的图像如图1.
实施例1产物的核磁共振氢谱图：1H NMR(500MHz，CDCl3)δ6.42(d，J＝17.0Hz，1H)，5.87(d，1H)，4.63(t，J＝5.1Hz，2H)，4.12(q，J＝7.1Hz，1H)，3.54(t，J＝10.3Hz，2H)，3.51-3.21(m，2H)，3.02-2.83(m，6H)，1.54-1.11(m，11H)，0.96(t，6H).
参照图2所示：实施例1产物的红外光谱图。从红外谱图中可以看出，在1550cm-1处有一吸收峰，判定为烯烃C＝C上的伸缩振动峰；缩醛键的出峰位置是1199cm-1；在595cm-1处的吸收峰，判定为S-S的吸收峰。
图1和图2同时证明了实例1所得产物合成成功，其结构式为：
一种酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束的制备方法，包括以下步骤：
S1：将20mg酸/还原降解两亲性化合物(实施例1制得)溶于2ml四氢呋喃中，形成溶液；
S2：取S1中制得的20ul溶液加入到2ml去离子水中，混合搅拌制得纳米胶束。
生物相容性测试：
复苏HEPG2细胞和HK-2细胞，培养至对数生长期后用0.25％的胰蛋白酶消化备用；在96孔培养板中接种细胞，培养24h后除去培养液，加入酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束100ul，每个剂量设6个复孔，共设定6个剂量组，最终质量浓度分别为0、10、25、50、100和250ug/mL(溶剂为水)，同时设定阳性对照组。继续培养24h后，进行WST-1检测，检测出各剂量组中具有活性细胞的百分含量。
| 质量浓度ug/ml | HEPG2细胞存活率/％ | HK-2细胞存活率/％ |
| 0 | 95 | 96 |
| 10 | 95 | 96 |
| 25 | 94 | 95 |
| 50 | 93 | 94 |
| 100 | 92 | 93 |
| 250 | 90 | 91 |
从上表可知，在加入不同浓度的酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束后，HEPG2细胞和HK-2细胞的存活率基本不变，从而说明酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束对细胞的生长和繁殖基本无影响，可视为无细胞毒性，因此说明该酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束具有很好的生物相容性。
将ICR小鼠分为3组，每组50只，分别为对照组，低剂量实验组(50mg/kg)和高剂量实验组(100mg/kg)；在ICR小鼠正常饲养条件下，对ICR小鼠进行尾静脉注射相应浓度的酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束；每周注射一次，连续注射4周；4周后，统计存活率；
| 组别 | 存活率/％ |
| 对照组 | 90 |
| 低剂量实验组 | 88 |
| 高剂量实验组 | 85 |
由上表可知，在加入酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束后，小鼠的存活率基本没有变化，这说明酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束对小鼠的生存基本无影响，进一步说明了该酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束具有很好的生物相容性。
酸降解实验：
将0.1g酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束放入pH＝7.0的0.2mol/L的磷酸盐缓冲溶液(PBS溶液)中，用粒径测试仪测得其DLS粒径；测试完后，加入0.2mol/L的磷酸氢二钠水溶液调节溶液pH，直至溶液pH为4.6，静置2h后再用粒径测试仪测得其DLS粒径。
参照图3所示：酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束酸降解前后的的DLS粒径图。可以看到加酸前后，粒径发生明显变化，证明纳米胶束在酸性条件下发生了降解。
其降解机理如下反应式所示：
在强酸或者中强酸(pH小于5.6)的条件下，酸/还原降解两亲性化合物中的缩醛键发生断裂，生成相应的醛和醇。
还原降解实验：
向制得的0.2g酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束中加入0.1gDTT，2小时后用粒径测试仪测得其DLS粒径。
参照图4所示：酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束还原降解前后的的DLS粒径图。可以看到加入DTT前后，粒径发生明显变化，证明纳米胶束发生了还原降解。其还原降解机理如下反应式所示：
在高还原(如加DTT)或者特定的酶(如谷胱甘肽GSH)的表达环境下，酸/还原降解两亲性化合物中的双硫键会发生断裂，生成新的巯基基团。
装载尼罗红实验：
将0.1g实施例1制得的酸/还原降解两亲性化合物溶于10ml四氢呋喃中，形成溶液A，将0.2ml溶液A与5ml去离子水混合，然后加入0.02g尼罗红，在100rad/min的条件搅拌10min，形成混合液；然后对混合液进行紫外测试；
实验结果：由于尼罗红不溶于水，所以在只有尼罗红时，紫外光谱图中没有吸收峰；而当用本发明的酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束装载尼罗红后，在其紫外光谱中发现在480cm-1处有一个吸收峰，因此可证明本发明制得的酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束封装药物的可行性，进一步证明了该酸/还原降解两亲性化合物胶束可作为药物载体使用。
本发明的一种酸/还原降解两亲性化合物及其制备方法，通过以衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇和乙烯基异辛醚作为原料，以氯仿作为溶剂，以对甲苯磺酸作为催化剂，分两步进行反应。作为本发明的一个新创点，在第一步反应时，先将2，2’-二硫二乙醇溶于氯仿中形成混合溶液A，衣康酸酐溶于氯仿中形成混合溶液B，再将混合溶液A与混合溶液B混合均匀，然后升高温度，反应开始；这样的目的是保证反应物衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇能够完全溶于氯仿中，在氯仿溶剂分散开来，便于两者之间发生较好的反应，反应更加充分完全，产率也更高；衣康酸酐和1，4-丁二醇反应温度设置为50-70摄氏度，优选60摄氏度，进一步提高产物的产率，反应时间为10-14h，优选12h；反应完全之后进行干燥，处理，硅胶柱层析分离得到纯产物A；在第二步反应时，为了避免因为反应物在氯仿中分散不均匀而导致产率较低的现象发生，先将纯产物A与对甲苯磺酸和氯仿混合形成混合溶液C，乙烯基异辛醚和氯仿混合形成混合溶液D，再将混合溶液C与混合溶液D混合均匀，发生反应；进一步提高了本发明的产率；第二步反应温度为80-120摄氏度，优选100摄氏度，反应时间为14-16h，优选15h；最终制得的酸/还原降解两亲性化合物的产率可达90％；此外本发明的反应温度最高不超过120摄氏度，且在常压下进行，反应条件十分温和，反应步骤也仅为两步，适合工业生产，适合大规模生产。本发明制得的酸/还原降解两亲性化合物，一端亲油，另一端亲水，具有两亲性，能够在水中自组装成纳米胶束。本发明制得的酸/还原降解两亲性化合物纳米胶束的生物相容性很好，基本无毒，对人体健康不会产生影响，也不会被人体所排斥；同时还可以在酸性条件下发生降解，同时还会在高还原(如加DTT)或者特定的酶(如谷胱甘肽GSH)的表达环境下发生降解，进一步拓展了其应用范围，特别适合作为一些抗癌药物的靶向载体。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (8)
1.一种酸/还原降解两亲性化合物，其特征在于：包括下列摩尔份物质反应而成：
2，2’-二硫二乙醇0.8-1份；
衣康酸酐0.8-1.2份；
乙烯基异辛醚0.8-1.2份；
所述化合物的分子结构式为
所述乙烯基异辛醚的分子结构式为：
其反应式为
2.根据权利要求1所述的一种酸/还原降解两亲性化合物，其特征在于：所述衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇和乙烯基异辛醚的反应是在溶剂中进行，所述溶剂为氯仿。
3.根据权利要求2所述的一种酸/还原降解两亲性化合物，其特征在于：所述衣康酸酐、2，2’-二硫二乙醇和乙烯基异辛醚在溶剂中反应时，还向溶剂中加入了催化剂，所述催化剂为对甲苯磺酸。
4.一种如权利要求1所述酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：将2，2’-二硫二乙醇与氯仿放入反应容器A中混合均匀，形成混合溶液A；
步骤二：将衣康酸酐与氯仿放入反应容器B中混合均匀，形成混合溶液B；
步骤三：将混合溶液B倒入混合溶液A中混合均匀，然后升高溶液温度，反应开始；
步骤四：待步骤三中反应完全后，经过干燥获得粗产物，粗产物用硅胶柱层析分离得到纯产物A；
步骤五：将纯产物A、氯仿和对甲苯磺酸放入反应容器C中搅拌混合，形成混合溶液C；
步骤六：将乙烯基异辛醚和氯仿放入反应容器D中混合均匀，形成混合溶液D；
步骤七：将混合溶液D倒入混合溶液C中混合均匀，然后升高溶液温度，反应开始；
步骤八：待步骤七中反应完全后，经过干燥获得粗产物；粗产物用硅胶柱层析分离得到酸/还原降解两亲性化合物。
5.根据权利要求4所述的一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，其特征在于：步骤三中升高溶液温度，反应开始是指将溶液温度升高至50-70℃，然后在转速为1000-1400rad/min的条件下开始反应，反应时间为10-14h。
6.根据权利要求5所述的一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，其特征在于：步骤七中升高溶液温度，反应开始是指将溶液温度升高至80-120℃，然后在转速为1400-1600rad/min的条件下开始反应，反应时间为14-16h。
7.根据权利要求6所述的一种酸/还原降解两亲性化合物的制备方法，其特征在于：步骤四中硅胶柱层析分离所用的展开剂为乙酸乙酯；步骤八中硅胶柱层析分离所用的展开剂为石油醚和乙酸乙酯的混合液，其中石油醚和乙酸乙酯的体积比为3∶1。
8.如权利要求1至7任意一项所述的一种酸/还原降解两亲性化合物制备成纳米胶束的方法，其特征在于：包括以下步骤：
S1：将20mg酸/还原降解两亲性化合物溶于2ml四氢呋喃中，形成溶液；
S2：取S1中制得的20ul溶液加入到2ml去离子水中，混合搅拌制得纳米胶束。
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