CN111938005A - 一种含多糖的糖果类休闲食品及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种含多糖的糖果类休闲食品及其制备方法,属于食品加工技术领域。本发明提供了一种糖果类休闲食品,此糖果类休闲食品添加有岩藻多糖、海参多糖或卡拉胶中的一种或一种以上,并且,由于岩藻多糖、海参多糖和卡拉胶自身结构较为稳定,在此糖果类休闲食品的制备过程中,岩藻多糖、海参多糖和卡拉胶的活性不会消失,因此,此糖果类休闲食品可预防和治疗新型冠状病毒感染。

Description

一种含多糖的糖果类休闲食品及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种含多糖的糖果类休闲食品及其制备方法,属于食品加工技术领域。
背景技术
新型冠状病毒(2019-nCoV),正式分类命名为严重急性呼吸综合征冠状病毒2(Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2),简称新冠病毒(novel coronavirus),于2019年底开始出现,在全球迅速传播扩散,已造成上百万人感染。人感染了冠状病毒后常见体征有呼吸道症状、发热、咳嗽、气促和呼吸困难等。在较严重病例中,感染可导致肺炎、严重急性呼吸综合征、肾衰竭,甚至死亡。因此,急需研发可预防和治疗新型冠状病毒感染的产品。
发明内容
[技术问题]
本发明要解决的技术问题是提供一种可预防和治疗新型冠状病毒感染的产品。
[技术方案]
为解决本发明的技术问题,本发明提供了一种制备糖果类休闲食品的方法,所述方法为在制备糖果类休闲食品的过程中添加活性物质;所述活性物质为岩藻多糖、海参多糖或卡拉胶中的一种或一种以上。
在本发明的一种实施方式中,所述糖果类休闲食品为软糖、果冻、口香糖或硬糖。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为软糖时,所述方法为将鱼胶和卡拉胶按照1:1~3:1的质量比混合,得到混合物A;将混合物A添加至水中进行溶胀后于70~90℃水浴中搅拌0.5~1.0h,得到胶液;将蔗糖和甜菊糖苷按照3:1~5:1的质量比混合,得到混合物B;将混合物B添加至水中后于100~120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将胶液、糖浆、活性物质混合后加热,得到混合液;将混合液趁热倒入模具中进行浇模,冷却后获得软糖。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为软糖时,所述方法为将鱼胶和卡拉胶按照2:1的质量比混合,得到混合物A;将混合物A加入2倍重量的水中进行溶胀后于70℃水浴中搅拌1.0h,得到胶液;将蔗糖和甜菊糖苷按照4:1的质量比混合,得到混合物B;将混合物B添加到等质量的水中后于110℃真空熬煮锅中熬煮并搅拌0.5h,得到糖浆;将胶液、糖浆、调味剂和活性物质混合,得到混合物C;将混合物C加热至水分含量为15%,得到混合液;将混合液趁热倒入模具中进行浇模,冷却后获得软糖。
在本发明的一种实施方式中,所述胶液和糖浆的质量比为3:2。
在本发明的一种实施方式中,所述调味剂的质量占混合物C总质量的0.5~1.0%。
在本发明的一种实施方式中,所述调味剂为柠檬酸或针叶樱桃提取物。
在本发明的一种实施方式中,所述活性物质的质量占混合物C总质量的0.01~0.2%。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为果冻时,所述方法为将卡拉胶、魔芋粉末按照1:1~3:1的质量比混合,得到混合物;将混合物加入水中后于85~100℃水浴中加热5~15min,得到胶体混合物;将胶体混合物、活性物质和调味剂混合,得到预果冻液;将预果冻液杀菌、冷却,得到果冻。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为果冻时,所述方法为将卡拉胶、魔芋粉末按照2:1的质量比混合,得到混合物;将混合物加入3倍重量的水中后于95℃水浴中加热10min,得到胶体混合物;将胶体混合物、活性物质和调味剂混合,得到预果冻液;将预果冻液罐装封口后进行巴氏杀菌、冷却,得到果冻。
在本发明的一种实施方式中,所述调味剂的质量占预果冻液总质量的2~3%。
在本发明的一种实施方式中,所述调味剂为赤藓糖醇和针叶樱桃提取物。
在本发明的一种实施方式中,所述赤藓糖醇和针叶樱桃提取物的质量比为1:1~3:1。
在本发明的一种实施方式中,所述活性物质的质量占预果冻液总质量的0.05~0.2%。
在本发明的一种实施方式中,所述巴氏杀菌的温度为85℃、时间为20min。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为口香糖时,所述方法为将胶基于90~110℃下加热并搅拌1~5min,得到胶液;将白砂糖加入水中后于100~120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将胶液和糖浆按照1:1~1:5的质量比混合,得到混合液A;将混合液A、添加剂和活性物质混合,得到混合液B;将混合液B挤压成型,得到糖坯;将糖坯分切,得到口香糖粗品;将口香糖粗品于温度为20~30℃、相对湿度为35~45%的条件下老化15~20h,得到口香糖。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为口香糖时,所述方法为将胶基于100℃下加热并搅拌3min,得到胶液;将白砂糖加入等重量的水中后于120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将糖浆于80℃保温,得到保温糖浆;将胶液和保温糖浆按照1:3的质量比混合,得到混合液A;将混合液A、添加剂和活性物质混合,得到混合液B;将混合液B冷却至温度为20℃后,于温度为20℃、相对湿度为60%的条件下,先用螺旋挤压机挤压成型,然后用旋转式“滚筒”压片机压片,得到糖坯;将糖坯降温至15℃后,于温度为15℃、相对湿度为40~50%的条件下,用辊筒切断机分切,得到口香糖粗品;将口香糖粗品于温度为25℃、相对湿度为40%的条件下老化17h,得到口香糖。
在本发明的一种实施方式中,所述添加剂的质量占混合液B总质量的3~5%。
在本发明的一种实施方式中,所述添加剂为甘油、薄荷香精、薄荷精油。
在本发明的一种实施方式中,所述甘油、薄荷香精、薄荷精油的质量比为2:1:1。
在本发明的一种实施方式中,所述活性物质的质量占混合液B总质量的0.01~0.2%。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为硬糖时,所述方法为将甘草片、胖大海和金银花粉混合并粉碎,得到混合粉末;将混合粉末加入水中熬煮、过滤,得到滤液;将滤液与活性物质混合,得到混合液A;将白砂糖、麦芽糖和混合液A混合后于70~80℃下化糖,得到糖液;将糖液于130~140℃下熬糖,得到糖浆;将糖浆和调味剂混合,得到混合液B;将混合液B倒入模具中浇注成型后进行干燥、冷却、脱模,得到硬糖。
在本发明的一种实施方式中,当糖果类休闲食品为硬糖时,所述方法为将甘草片、胖大海和金银花按照2:1:1的质量比混合后用破壁机粉碎,得到混合粉末;将混合粉末加入6倍重量的水中熬煮、过滤,得到混合粉末2倍重量的滤液;将滤液与活性物质混合,得到混合液A;将白砂糖和麦芽糖按照1:1的质量比混合后加入白砂糖和麦芽糖2倍重量的混合液A,于75℃下化糖,得到糖液;将糖液于135℃下熬糖,得到糖浆;将糖浆冷却至95℃后与调味剂混合,得到混合液B;调整混合液B的温度保持在85℃,将温度保持在85℃的混合液B倒入模具中浇注成型后进行干燥、冷却、脱模,得到硬糖。
在本发明的一种实施方式中,所述活性物质的质量占混合液A总质量的0.03~0.12%。
在本发明的一种实施方式中,所述调味剂的质量占混合液B总质量的1~2%。
在本发明的一种实施方式中,所述调味剂为柠檬酸或针叶樱桃提取物。
本发明还提供了一种糖果类休闲食品,所述糖果类休闲食品为使用上述方法制备而得。
[有益效果]
本发明提供了一种糖果类休闲食品,此糖果类休闲食品添加有岩藻多糖、海参多糖或卡拉胶中的一种或一种以上,并且,由于岩藻多糖、海参多糖和卡拉胶自身结构较为稳定,在此糖果类休闲食品的制备过程中,岩藻多糖、海参多糖和卡拉胶的活性不会消失,因此,此糖果类休闲食品可预防和治疗新型冠状病毒感染。
附图说明
图1:不同浓度的泡叶藻岩藻多糖对新冠病毒的抑制作用,横坐标:泡叶藻岩藻多糖的浓度,纵坐标:感染细胞率(%)=进入细胞的病毒数量/总病毒数量×100。
图2:将SARS-CoV-2病毒与不同浓度的岩藻多糖混合处理后的细胞免疫荧光图。岩藻多糖的浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6μg/mL。阴性对照为空白培养基。
图3:将SARS-CoV-2病毒与不同浓度的海参多糖的混合处理后的细胞免疫荧光图。海参多糖的终浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9μg/mL。阴性对照为空白培养基。
图4:将SARS-CoV-2病毒与不同浓度的卡拉胶混合处理后的细胞免疫荧光图。卡拉胶的浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8μg/mL。阴性对照为空白培养基。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明进行进一步的阐述。
下述实例中涉及的金银花、甘草片、胖大海购自中国海王星辰连锁药房;下述实例中涉及的白砂糖购自大连沃尔玛超市;下述实例中涉及的鱼胶购自武汉卡布达化工有限公司;下述实例中涉及的卡拉胶、赤藓糖醇购自安徽宏通生物工程有限公司;下述实例中涉及的柠檬酸购自济南国丞化工有限公司;下述实例中涉及的麦芽糖购自西安拉维亚生物科技有限公司;下述实例中涉及的胶基购自福建省宁化县利丰化工有限公司;下述实例中涉及的针叶樱桃提取物购自陕西浩洋生物科技有限公司;下述实例中涉及的薄荷精油购自吉水县益康天然香料油提炼厂;下述实例中涉及的薄荷香精、甜菊糖苷、魔芋粉、甘油购自成都万象宏润生物科技有限公司。
实施例1-1:制备泡叶藻(褐藻)岩藻多糖
泡叶藻岩藻多糖的制备方法如下:
S1、将泡叶藻(Ascophyllum nodosum)洗净、沥干、自然风干、粉碎并过80目筛,得泡叶藻粉A;
S2、将步骤S1所述泡叶藻粉A置于25℃无水乙醇中浸泡4h,纱布过滤取沉淀A,将所述沉淀A置于25℃无水乙醇中搅拌4h,纱布过滤取沉淀B,将所述沉淀B置于25℃无水乙醇中浸泡4h,纱布过滤取沉淀C室温晾干,从而除去脂类及脂溶性小分子,得泡叶藻粉B;其中,所述泡叶藻粉A、沉淀B和本步骤所述无水乙醇的重量体积比均为1:4g/mL;
S3、取步骤S2所述泡叶藻粉B,加入pH=5的磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液、纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶,搅拌混匀,50℃水浴振荡酶解4h,使岩藻多糖解离,后加热至98℃,保持10分钟以钝化酶活,所得混合物于4500r/min室温离心15min,取上清液;其中,所述泡叶藻粉B和所述磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液的重量体积比为1:30g/mL;所述泡叶藻粉B、纤维素酶(比酶活100units/mg)、果胶酶(比酶活50units/mg)和木瓜蛋白酶(比酶活2units/mg)的重量比为12500:42:6:6;
S4、向步骤S3所述上清液中边搅拌边加入过量的CaCl2,于4500r/min室温离心15min,将褐藻胶沉淀除去,取上清液;使用的步骤S3的上清液和CaCl2体积重量比是20:1mL/g;
S5、向步骤S4所述上清液中加入十六烷基三甲基溴化铵(CTAB),使岩藻多糖沉淀,将所得混合物在4500r/min室温离心15min收集沉淀,将沉淀溶解于3mol/L CaCl2溶液中,再加无水乙醇,4℃放置24h,使岩藻多糖沉淀,4500r/min、4℃离心15min,收集沉淀;使用的步骤S4的上清液和CTAB体积重量比是50:1mL/g;所述沉淀和所述3mol/L CaCl2溶液的重量体积比是1:3g/mL;所述CaCl2溶液和所述无水乙醇的体积比为2:3;
S6、将步骤S5所述沉淀用体积分数为80%的乙醇洗涤3次,再使用体积分数为95%乙醇洗沉淀3次,室温晾干,超纯水溶解,使用分子量3500Da的透析袋自来水流水透析24h,然后使用超纯水作为透析液透析48h,除去岩藻多糖中含有的氯化钙及其它盐离子,其中每2h换透析液,在真空度为1pa和温度为-60℃的条件下冻干72h,得到泡叶藻岩藻多糖(ANP);所述沉淀和所述体积分数为80%的乙醇溶液的重量体积比是1:3g/mL;所述沉淀和所述体积分数为95%的乙醇溶液的重量体积比是1:3g/mL;所述沉淀和所述超纯水的重量体积比是1:150g/mL。
本实施例还可以包括溶液配制、超纯水的制备等前处理步骤。
实施例1-2:确定实施例1-1所制备的泡叶藻岩藻多糖的结构特性和组成
具体方法如下:
采用明胶比浊法进行泡叶藻岩藻多糖硫酸基含量的测定;
采用BCA法进行泡叶藻岩藻多糖蛋白含量的测定;
采用间羟基联苯法进行泡叶藻岩藻多糖糖醛酸含量的测定;
采用苯酚硫酸法进行泡叶藻岩藻多糖总糖含量的测定;
采用凝胶渗透色谱法进行泡叶藻岩藻多糖分子量的测定;
采用高效液相色谱+PMP衍生化法进行泡叶藻岩藻多糖单糖组成的测定;
采用傅里叶红外光谱法进行泡叶藻岩藻多糖官能团的测定。
结果表明,泡叶藻岩藻多糖的分子量为490kDa;糖醛酸含量为2.9~3.2%;蛋白含量为3.8~4.0%;硫酸基含量为28~30%;总糖含量为54%;所述褐藻岩藻多糖的单糖组成为:摩尔比为6.5:1.1:1的岩藻糖、甘露糖和半乳糖;官能团包括羟基、羧基和硫酸基等官能团。
实施例1-3:验证泡叶藻岩藻多糖阻止SARS-CoV-2病毒侵入机体细胞的用途
将编码HCoV-19刺突蛋白的基因的全长序列克隆到pCAGGS载体用于假病毒的生产,所得到的重组载体称为pCAGGS-HCoV-19-S。通过DNA测序确认pCAGGS-HCoV-19-S构建成功。将pCAGGS-HCoV-19-S和pNL4-3的质粒共转染到HEK 293T细胞,培养48h后,收集含有SARS-CoV-2假病毒模型的上清液,并通过感染Huh7细胞确定假病毒的50%组织细胞感染量(TCID50)。
使用该SARS-CoV-2假病毒模型评价泡叶藻岩藻多糖的抗新型冠状病毒的作用,具体步骤如下:
(1)选择生长状态良好的Huh7细胞,胰酶消化后,96孔铺板,培养过夜,至18-24h时细胞达到80-100%;
(2)每孔100TCID50假病毒,与含有泡叶藻岩藻多糖的无血清培养基混合,混合后泡叶藻岩藻多糖的终浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL和1mg/mL,37℃孵育30min。EK1肽作为阳性对照,空白无血清培养基作为阴性对照。
(3)以PBS洗涤Huh7细胞去除血清后,用3倍倍比稀释病毒与泡叶藻岩藻多糖的混合物感染Huh7细胞,每个孔100μL,每个样品设置三个平行孔,4-6h后,补加含有5%FBS血清的培养基100μL。
(4)48h测定Luciferase值。参考Promega公司Luciferase Assay SystemProtocol或Dual Luciferase Reporter Assay System Protocol。具体操作:倒扣96孔板,用PBS洗2遍,确保吸干PBS,然后加入30μL的裂解液,常温裂解30min,吸出10μL于白板上,底物50μL,测定luciferase值。
如下表1所示,泡叶藻岩藻多糖在浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL和1mg/mL时,都能够有效的抑制SARS-CoV-2病毒感染细胞。
表1不同浓度下的泡叶藻岩藻多糖对SARS-CoV-2病毒感染细胞的抑制作用
Figure BDA0002649253630000061
又进一步采用相同实验方法检测了多个浓度的泡叶藻岩藻多糖对新冠病毒的抑制作用,计算了IC50值。结果如图1所示,泡叶藻岩藻多糖抑制新冠病毒的IC50为0.327mg/mL。
而且,由于所使用的模型为仅具有S蛋白的SARS-CoV-2假病毒,可以推出泡叶藻岩藻多糖的作用靶点为S蛋白。
实施例1-4:购买的商品化岩藻多糖的组成分析与抗新冠病毒研究
参考中华人民共和国水产行业标准SC/T 3404-2012,测得青岛明月海藻集团有限公司的商品化岩藻多糖中硫酸基含量为28.5±0.1%,总糖含量为63.2±2.6%,岩藻糖含量为36.9±3.8%。
将SARS-CoV-2真病毒(来源于第二军医大学)和岩藻多糖用含有5%胎牛血清的DMEM培养基混匀,37℃放置1h,加入提前12h接种Vero E6细胞的96孔板(加入以前吸除原细胞培养液),培养24h,然后用免疫荧光检测病毒蛋白,DAPI染色细胞核。采用免疫荧光显微镜观测了终浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8μg/mL的岩藻多糖对病毒的抑制作用,结果如图2所示,在浓度范围15.6~500μg/mL浓度范围内,岩藻多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染。
实施例2-1:制备海参多糖的方法
具体方法如下:
将海参(刺参,Stichopusjaponicus)洗净、水煮、沥干、剪成小块,然后冻干。将冻干样品置于4℃丙酮中浸泡24h,室温下晾干。以1g冻干样品为例,加入30mL 0.1mol/L乙酸钠缓冲溶液(pH 6.0)、100mg木瓜蛋白酶(比酶活2units/mg)、48mg乙二胺四乙酸和18mg半胱氨酸,涡旋混合,于60℃水浴振荡酶解24h,将反应混合物离心(6000g,15min,室温),取上清液。向上清液中加入1.6mL 10%氯化十六烷基吡啶溶液,室温下放置24h后,离心(8000g,15min,室温)取沉淀。将沉淀溶解于15mL 3mol/LNaCl-乙醇(100:15v/v))溶液中,再加入30mL 95%乙醇溶液,4℃放置24h,离心(8000g,15min,室温)取沉淀。将沉淀用10mL 80%乙醇洗2至3次后,再用10mL 95%乙醇洗2至3次,室温晾干,蒸馏水溶解,用透析袋(3500Da)进行除盐,冻干,得海参多糖。
本实施例还可以包括溶液配制、超纯水的制备等前处理步骤。
实施例2-2:确定实施例2-1所制备的海参多糖的结构特性和组成
具体方法如下:
采用1H NMR进行海参多糖结构特性和纯度检测;
采用凝胶渗透色谱法进行海参多糖分子量检测;
采用明胶比浊法进行海参多糖硫酸根含量检测;
采用高效液相色谱+PMP衍生化法进行海参多糖单糖组成检测;
采用傅里叶红外进行海参多糖官能团检测。
结果表明,海参多糖含有岩藻聚糖硫酸酯和岩藻糖基化硫酸软骨素,岩藻聚糖硫酸酯分子量>670kDa,岩藻糖基化硫酸软骨素的分子量>179kDa;硫酸根含量为26-28%;岩藻糖、葡萄糖醛酸和氨基半乳糖的摩尔比为9:0.8:1。
实施例2-3:使用假病毒模型评价海参多糖的抗新型冠状病毒的作用
将编码HCoV-19刺突蛋白的基因的全长序列克隆到pCAGGS载体用于假病毒的生产,构建得到的重组载体称为pCAGGS-HCoV-19-S。通过DNA测序确认pCAGGS-HCoV-19-S构建成功。将pCAGGS-HCoV-19-S和pNL4-3质粒共转染到HEK 293T细胞,培养48h后,收集含有SARS-CoV-2假病毒的上清液,并通过感染Huh7细胞确定假病毒的50%组织细胞感染量(TCID50)。
使用该SARS-CoV-2假病毒模型评价海参多糖的抗新型冠状病毒的作用,具体步骤如下:
(1)选择生长状态良好的Huh7细胞,胰酶消化后,96孔铺板,培养过夜,至18-24h时细胞达到80-100%;
(2)每孔100TCID50假病毒,与含有海参多糖的无血清培养基混合,混合后海参多糖的终浓度为0.01mg/mL、0.1mg/mL和1mg/mL,于37℃孵育30min。EK1肽作为阳性对照,空白无血清培养基作为阴性对照。
(3)以PBS洗涤Huh7细胞去除血清后,用3倍倍比稀释病毒与海参多糖的混合物并感染Huh7细胞,每个孔100μL,每个样品设置三个平行孔,4-6h后,补加含有5%FBS血清的培养基100μL。
(4)48h测定Luciferase值。参考Promega公司LuciferaseAssay System Protocol或Dual Luciferase ReporterAssay System Protocol。具体操作:倒扣96孔板,用PBS洗2遍,确保吸干PBS,然后加入30μL的裂解液,常温裂解30min,吸出10μL于白板上,底物50μL,测定luciferase值,结果如下表2所示。
如下表2所示,海参多糖终浓度为0.1mg/mL和1mg/mL时,都能够有效的抑制SARS-CoV-2病毒进入细胞。而且由于所使用的模型为具有S蛋白的SARS-CoV-2假病毒,可以推出海参多糖的作用靶点为S蛋白。
表2不同浓度下的海参多糖对SARS-CoV-2病毒感染细胞的抑制作用
Figure BDA0002649253630000081
实施例2-4:海参多糖对duSARS-CoV-2真病毒的作用
SARS-CoV-2真病毒(来源于第二军医大学)和海参多糖用含有5%胎牛血清的DMEM培养基混匀,使海参多糖的终浓度为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9μg/mL,37℃放置1h,加入提前12h接种Vero E6细胞的96孔板(加入以前吸除原细胞培养液),培养24h,然后用免疫荧光检测病毒蛋白,DAPI染色细胞核。用免疫荧光显微镜观测了500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8、3.9μg/mL八个浓度梯度的海参多糖对病毒的抑制作用,结果如图3所示,在500~3.9μg/mL浓度范围内,海参多糖均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染。
实施例3-1:τ-卡拉胶抗新冠病毒作用
将SARS-CoV-2真病毒(来源于第二军医大学)和τ-卡拉胶用含有5%胎牛血清的DMEM培养基混匀,37℃放置1h,加入提前12h接种Vero E6细胞的96孔板(加入以前吸除原细胞培养液),培养24h,然后用免疫荧光检测病毒蛋白,DAPI染色细胞核。采用免疫荧光显微镜观测了浓度分别为500、250、125、62.5、31.3、15.6、7.8μg/mL的卡拉胶对病毒的抑制作用,结果如图4所示,在浓度范围62.5~500μg/mL浓度范围内,卡拉胶均能够显著抑制新冠病毒对细胞的感染。
实施例4-1:糖果类休闲食品的制备(软糖)
包括如下步骤:
当糖果类休闲食品为软糖时,所述方法为将鱼胶和卡拉胶按照2:1的质量比混合,得到混合物A;将混合物A加入2倍重量的水中进行溶胀后于70℃水浴中搅拌1.0h,得到胶液;将蔗糖和甜菊糖苷按照4:1的质量比混合,得到混合物B;将混合物B添加到等质量的水中后于110℃真空熬煮锅中熬煮并搅拌0.5h,得到糖浆;将胶液、糖浆、调味剂和活性物质混合,得到混合物C;将混合物C加热至水分含量为15%,得到混合液;将混合液趁热倒入模具中进行浇模,冷却后获得软糖;所述胶液和糖浆的质量比为3:2;所述调味剂的质量占混合物C总质量的0.5~1.0%;所述调味剂为柠檬酸或针叶樱桃提取物;所述活性物质的质量占混合物C总质量的0.01~0.2%;所述活性物质为岩藻多糖和/或海参多糖(岩藻多糖的制备方法见实施例1-1或购自青岛明月海藻集团有限公司,海参多糖的制备方法见实施例2-1)。
实施例4-2:糖果类休闲食品的制备(果冻)
包括如下步骤:
当糖果类休闲食品为果冻时,所述方法为将卡拉胶、魔芋粉末按照2:1的质量比混合,得到混合物;将混合物加入3倍重量的水中后于95℃水浴中加热10min,得到胶体混合物;将胶体混合物、活性物质和调味剂混合,得到预果冻液;将预果冻液罐装封口后进行巴氏杀菌、冷却,得到果冻;所述调味剂的质量占预果冻液总质量的2~3%;所述调味剂为赤藓糖醇和针叶樱桃提取物;所述赤藓糖醇和针叶樱桃提取物的质量比为1:1~3:1;所述活性物质的质量占预果冻液总质量0.05~0.2%;所述巴氏杀菌的温度为85℃、时间为20min;所述活性物质为岩藻多糖和/或海参多糖(岩藻多糖的制备方法见实施例1-1或购自青岛明月海藻集团有限公司,海参多糖的制备方法见实施例2-1)。
实施例4-3:糖果类休闲食品的制备(口香糖)
包括如下步骤:
所述方法为将胶基于100℃下加热并搅拌3min,得到胶液;将白砂糖加入等重量的水中后于120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将糖浆于80℃保温,得到保温糖浆;将胶液和保温糖浆按照1:3的质量比混合,得到混合液A;将混合液A、添加剂和活性物质混合,得到混合液B;将混合液B冷却至温度为20℃后,于温度为20℃、相对湿度为60%的条件下,先用螺旋挤压机挤压成型,然后用旋转式“滚筒”压片机压片,得到糖坯;将糖坯降温至15℃后,于温度为15℃、相对湿度为40~50%的条件下,用辊筒切断机分切,得到口香糖粗品;将口香糖粗品于温度为25℃、相对湿度为40%的条件下老化17h,得到口香糖;所述添加剂的质量占混合液B总质量的3~5%;所述添加剂为甘油、薄荷香精、薄荷精油;所述甘油、薄荷香精、薄荷精油的质量比为2:1:1;所述活性物质的质量占混合液B总质量的0.01~0.2%;所述活性物质为岩藻多糖、海参多糖或卡拉胶中的一种或一种以上(岩藻多糖的制备方法见实施例1-1或购自青岛明月海藻集团有限公司,海参多糖的制备方法见实施例2-1)。
实施例4-4:糖果类休闲食品的制备(硬糖)
包括如下步骤:
所述方法为将甘草片、胖大海和金银花按照2:1:1的质量比混合后用破壁机粉碎,得到混合粉末;将混合粉末加入6倍重量的水中后熬煮、过滤,得到混合粉末2倍重量的滤液;将滤液与活性物质混合,得到混合液A;将白砂糖和麦芽糖按照1:1的质量比混合后加入白砂糖和麦芽糖2倍重量的混合液A,于75℃下化糖,得到糖液;将糖液于135℃下熬糖,得到糖浆;将糖浆冷却至95℃后与调味剂混合,得到混合液B;调整混合液B的温度保持在85℃,将温度保持在85℃的混合液B倒入模具中浇注成型后进行干燥、冷却、脱模,得到硬糖;所述活性物质的质量占混合液A总质量的0.03~0.12%;所述调味剂的质量占混合液B总质量的1~2%;所述调味剂为柠檬酸或针叶樱桃提取物;所述活性物质为岩藻多糖、海参多糖或卡拉胶中的一种或一种以上(岩藻多糖的制备方法见实施例1-1或购自青岛明月海藻集团有限公司,海参多糖的制备方法见实施例2-1)。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上,但其并非用以限定本发明,任何熟悉此技术的人,在不脱离本发明的精神和范围内,都可做各种的改动与修饰,因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。

Claims (10)

1.一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,所述方法为在制备糖果类休闲食品的过程中添加活性物质;所述活性物质为岩藻多糖、海参多糖或卡拉胶中的一种或一种以上。
2.如权利要求1所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,所述糖果类休闲食品为软糖、果冻、口香糖或硬糖。
3.如权利要求2所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为软糖时,所述方法为将鱼胶和卡拉胶按照1:1~3:1的质量比混合,得到混合物A;将混合物A添加至水中进行溶胀后于70~90℃水浴中搅拌0.5~1.0h,得到胶液;将蔗糖和甜菊糖苷按照3:1~5:1的质量比混合,得到混合物B;将混合物B添加至水中后于100~120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将胶液、糖浆、活性物质混合后加热,得到混合液;将混合液趁热倒入模具中进行浇模,冷却后获得软糖。
4.如权利要求2或3所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为软糖时,所述方法为将鱼胶和卡拉胶按照2:1的质量比混合,得到混合物A;将混合物A加入2倍重量的水中进行溶胀后于70℃水浴中搅拌1.0h,得到胶液;将蔗糖和甜菊糖苷按照4:1的质量比混合,得到混合物B;将混合物B添加到等质量的水中后于110℃真空熬煮锅中熬煮并搅拌0.5h,得到糖浆;将胶液、糖浆、调味剂和活性物质混合,得到混合物C;将混合物C加热至水分含量为15%,得到混合液;将混合液趁热倒入模具中进行浇模,冷却后获得软糖。
5.如权利要求2所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为果冻时,所述方法为将卡拉胶、魔芋粉末按照1:1~3:1的质量比混合,得到混合物;将混合物加入水中后于85~100℃水浴中加热5~15min,得到胶体混合物;将胶体混合物、活性物质和调味剂混合,得到预果冻液;将预果冻液杀菌、冷却,得到果冻。
6.如权利要求2或5所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为果冻时,所述方法为将卡拉胶、魔芋粉末按照2:1的质量比混合,得到混合物;将混合物加入3倍重量的水中后于95℃水浴中加热10min,得到胶体混合物;将胶体混合物、活性物质和调味剂混合,得到预果冻液;将预果冻液罐装封口后进行巴氏杀菌、冷却,得到果冻。
7.如权利要求2所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为口香糖时,所述方法为将胶基于90~110℃下加热并搅拌1~5min,得到胶液;将白砂糖加入水中后于100~120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将胶液和糖浆按照1:1~1:5的质量比混合,得到混合液A;将混合液A、添加剂和活性物质混合,得到混合液B;将混合液B挤压成型,得到糖坯;将糖坯分切,得到口香糖粗品;将口香糖粗品于温度为20~30℃、相对湿度为35~45%的条件下老化15~20h,得到口香糖。
8.如权利要求2或7所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为口香糖时,所述方法为将胶基于100℃下加热并搅拌3min,得到胶液;将白砂糖加入等重量的水中后于120℃下熬煮并搅拌,得到糖浆;将糖浆于80℃保温,得到保温糖浆;将胶液和保温糖浆按照1:3的质量比混合,得到混合液A;将混合液A、添加剂和活性物质混合,得到混合液B;将混合液B冷却至温度为20℃后,于温度为20℃、相对湿度为60%的条件下,先用螺旋挤压机挤压成型,然后用旋转式“滚筒”压片机压片,得到糖坯;将糖坯降温至15℃后,于温度为15℃、相对湿度为40~50%的条件下,用辊筒切断机分切,得到口香糖粗品;将口香糖粗品于温度为25℃、相对湿度为40%的条件下老化17h,得到口香糖。
9.如权利要求2所述的一种制备糖果类休闲食品的方法,其特征在于,当糖果类休闲食品为硬糖时,所述方法为将甘草片、胖大海和金银花粉混合并粉碎,得到混合粉末;将混合粉末加入水中熬煮、过滤,得到滤液;将滤液与活性物质混合,得到混合液A;将白砂糖、麦芽糖和混合液A混合后于70~80℃下化糖,得到糖液;将糖液于130~140℃下熬糖,得到糖浆;将糖浆和调味剂混合,得到混合液B;将混合液B倒入模具中浇注成型后进行干燥、冷却、脱模,得到硬糖。
10.一种糖果类休闲食品,其特征在于,所述糖果类休闲食品为使用权利要求1-9任一所述的方法制备而得。
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Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101451157A (zh) * 2008-12-25 2009-06-10 大连海晏堂生物有限公司 一种低分子量海参多糖的制备方法
CN102578346A (zh) * 2012-03-09 2012-07-18 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 叶黄素酯软糖及制备方法
CN106106979A (zh) * 2016-06-24 2016-11-16 福建好来屋食品工业有限公司 一种海藻提取物软糖及其制备方法
CN106615544A (zh) * 2016-11-16 2017-05-10 安徽四平食品开发有限责任公司 一种鱼籽生姜橘皮软糖及其制备方法
CN111419787A (zh) * 2020-04-16 2020-07-17 广州康健医学科技有限公司 一种氯喹喷剂及其制备方法
CN111471088A (zh) * 2020-04-21 2020-07-31 北京中科微盾生物科技有限责任公司 一种抑制sars-cov-2感染的多肽、组合物及其用途

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101451157A (zh) * 2008-12-25 2009-06-10 大连海晏堂生物有限公司 一种低分子量海参多糖的制备方法
CN102578346A (zh) * 2012-03-09 2012-07-18 华北制药集团新药研究开发有限责任公司 叶黄素酯软糖及制备方法
CN106106979A (zh) * 2016-06-24 2016-11-16 福建好来屋食品工业有限公司 一种海藻提取物软糖及其制备方法
CN106615544A (zh) * 2016-11-16 2017-05-10 安徽四平食品开发有限责任公司 一种鱼籽生姜橘皮软糖及其制备方法
CN111419787A (zh) * 2020-04-16 2020-07-17 广州康健医学科技有限公司 一种氯喹喷剂及其制备方法
CN111471088A (zh) * 2020-04-21 2020-07-31 北京中科微盾生物科技有限责任公司 一种抑制sars-cov-2感染的多肽、组合物及其用途

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LEONEL PEREIRA ET AL.: "The COVID 19 novel coronavirus pandemic 2020: seaweeds to the rescue? Why does substantial, supporting research about the antiviral properties of seaweed polysaccharides seemto go unrecognized by the pharmaceutical community in these desperate times?", 《JOURNAL OF APPLIED PHYCOLOGY》, vol. 1, pages 149 - 3 *

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