CN114304640B - 一种保护胃黏膜的多糖组合物及其制备方法与应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种保护胃黏膜的多糖组合物及其制备方法与应用，所述多糖组合物包括岩藻多糖、银耳甘露聚糖、硫酸软骨素、魔芋葡甘聚糖和β‑葡聚糖，各多糖的重量份数比为(20～100):(10～50):(1～5):(5～20):(0.1～10)。本发明所提供的多糖组合物可显著提高经乙醇刺激后黏膜细胞的存活率，显著降低细胞氧化损伤因子和炎症因子分泌量，其从增强物理屏障保护机制、降低氧化损伤、抑制炎症因子信号通路等机理，协同促进多糖粘膜损伤的防御作用，具有显著的辅助保护胃粘膜功能，对开发具有潜在胃粘膜保护功能的保健食品提供理论基础，应用前景广阔。

Description

一种保护胃黏膜的多糖组合物及其制备方法与应用

技术领域

本发明涉及保健食品技术领域，具体涉及一种保护胃黏膜的多糖组合物及其制备方法与应用。

背景技术

胃粘膜损伤是全球常见的消化性疾病，呈现复发率高，病因复杂、难以完全治愈的特点，严重时会引起胃溃疡甚至胃穿孔，威胁着人类的健康。急性胃粘膜病变发病率居上消化道出血病因第三位，诱发原因主要是胃中攻击性因素(如胃酸分泌)增加和/或防御性因素(如胃粘膜完整性)降低。压力、吸烟、饮酒和长期使用非甾体抗炎药(NSAID)，以及幽门螺杆菌感染等因素均可导致胃粘膜损伤，导致胃酸、胆汁以及各类消化酶对胃部造成破坏，进而使得粘膜组织出现水肿、糜烂甚至出血、坏死的症状。该损伤在年轻人群中的发病率逐年增加，目前的溃疡保护类药物虽有效，但有较强的毒副作用，开发安全高效且具有辅助保护胃黏膜功能的药食同源类原料备受关注。

近年来，动植物食品来源的天然多糖被证实具有抗氧化、抗炎症等诸多生理功效，关于这类多糖对胃粘膜损伤保护研究也较多，功效显著，但由于结构差异导致保护机制各有不同。例如，褐藻和海参等棘皮类动物来源的岩藻多糖，结构主要由L-岩藻糖、硫酸酯基团组成，高浓度下有一定的抗凝活性，但低浓度下可显著促进凝血；硫酸软骨素又称糖胺聚糖，已被证实具有良好的抗炎症功效，在口腔粘膜和关节修复方面效果明显；银耳甘露聚糖具有较强的抗氧化和免疫增强的作用，魔芋来源的葡苷聚糖和β-葡聚糖均为广泛认可的膳食纤维，除具有低热量、抗炎等效果外，还有良好的流变学性质和成膜特性，有助于形成不同质构特性的食品体系。

正常情况下，胃粘膜功能是由复杂交互的防御机制维持，包括：粘液-碳酸氢盐-磷脂“屏障”、上皮屏障细胞不断增殖细胞更新、粘膜微血管血流维持、内皮屏障、感觉神经及氧化亚氮和前列腺素的生成。粘膜损伤是由于有害因素超过了防御因素，或者防御因素损伤而导致的。研究表明，导致胃黏膜损伤的原因主要有：氧化应激、炎症反应和细胞凋亡。目前，胃粘膜损伤的机制尚未完全阐明，以乙醇诱导损伤为例，促炎介质如活性氧(ROS)、细胞因子和中性粒细胞浸润是发生胃溃疡的主要因素。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)和IL-10等细胞因子在该损伤中也起关键作用。中性粒细胞浸润胃粘膜是胃溃疡发病的关键过程，乙醇诱导的中性粒细胞浸润与胃病变的形成有关。因此，通过体外细胞模型和动物模型快速筛选出具有辅助保护胃粘膜损伤的多糖组合物，研究其作用机制，对于寻找合理的防御措施具有重要的意义。

发明内容

发明目的：本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供一种多糖组合物。

本发明还要解决的技术问题是提供上述多糖组合物的制备方法。

本发明还要解决的技术问题是提供含有上述多糖组合物的制剂。

本发明最后要解决的技术问题是提供上述多糖组合物和上述制剂的应用。

为了解决上述第一个技术问题，本发明公开了一种多糖组合物，其包括岩藻多糖、银耳甘露聚糖、硫酸软骨素、魔芋葡甘聚糖和β-葡聚糖，各多糖的重量份数比为(20～100):(10～50):(1～5):(5～20):(0.1～10)，优选为100:(5～155):(0.5～6):(4～50):(0.05～55)，进一步优选为100:(25～35):(2～4):(4～6):(0.05～0.15)，或100:(145～155):(4～6):(20～30):(45～55)，或100:(5～15):(0.5～1.5):(7～17):(0.05～0.15)，或100:(45～55):(0.5～1.5):(15～25):(5～15)，更进一步优选为100:30:3:5:0.1，或100:150:5:25:50，或100:10:1:12:0.1，或100:50:1:20:10。

其中，所述岩藻多糖的重均分子量为50～1500kDa，所述耳甘露聚糖的重均分子量为1000～2500kDa，所述硫酸软骨素的重均分子量为10～500kDa，所述魔芋葡甘聚糖的重均分子量为60～250kDa，所述β-葡聚糖的重均分子量为100～300kDa。

本发明所述岩藻多糖、银耳甘露聚糖、硫酸软骨素、魔芋葡甘聚糖和β-葡聚糖可选用本发明所述制备方法制备得到，也可选用市售商品。

其中，本发明所述的制备方法具体为：

所述岩藻多糖的制备方法为将鲜海参直接匀浆或干制后粉碎，得到海参匀浆液或干粉；所得海参匀浆液或干粉经脱脂，复合蛋白酶酶解，50％～70％浓度乙醇沉淀，脱盐、干燥后得到岩藻多糖。

所述银耳甘露聚糖的制备方法为将银耳子实体粉碎后，经热水浸提，过滤，滤液经40％～60％乙醇沉淀，复溶脱盐、干燥后得到银耳甘露聚糖。

所述硫酸软骨素的制备方法为将鲜海参直接匀浆或干制后粉碎，得到海参匀浆液或干粉；所得海参匀浆液或干粉经脱脂，蛋白酶酶解，20％～40％浓度乙醇沉淀，复溶脱盐、干燥后得到硫酸软骨素。

所述魔芋葡甘聚糖的制备过程如下：魔芋精粉用50％(v/v)乙醇洗涤3次，除去水溶性杂质，用50mL无水乙醚/无水乙醇(2:1)在40℃搅拌8h脱脂，随后将脱脂样品以蒸馏水配成0.6％(w/v)水溶胶，离心取上清液，加入适量淀粉酶反应后，Sevage法脱蛋白，离心取上层水相，用40％～80％乙醇(v/v)沉淀，收集沉淀干燥得魔芋葡甘聚糖。

所述β-葡聚糖的制备方法为一定质量的酵母菌体，经细胞破碎、热水浸提，保留沉淀物质，再利用1M NaOH在50～70℃浸提4h，离心取沉淀。将残渣重悬调至pH 7.0，离心取沉淀，蒸馏水多次洗涤，干燥即可得到β-葡聚糖。

为了解决上述第二个技术问题，本发明公开了上述多糖组合物的制备方法，分别取岩藻多糖、银耳甘露聚糖、硫酸软骨素、魔芋葡甘聚糖和β-葡聚糖，溶解于水中，40～50℃加热充分溶解，高速剪切(20000r/min，10min)混匀后，过0.45μm滤膜后，-50℃预冻5～10小时，真空冷冻干燥。

为了解决上述第三个技术问题，本发明公开了一种具有保护胃粘膜功能的制剂，其包括第一个技术问题中所述的多糖组合物。

为了解决上述第四个技术问题，本发明公开了第一个技术问题中所述的多糖组合物，第三个技术问题中所述的制剂在制备保护胃黏膜或治疗胃粘膜损伤产品中的应用。

其中，所述产品包括但不限于食品、药品，尤其是保健食品。

其中，本发明中所涉及到乙醇的浓度均为体积百分比。

本发明中所述多糖组合物口服后，可在胃粘膜细胞表面形成屏障保护、降低氧化损伤因子量、降低炎症因子IL-6和TNF-α的mRNA表达以及NF-κB通路中关键蛋白p65的表达量，显著减少外源刺激导致的GES-1细胞损伤率和抑制外源刺激导致的大鼠胃粘膜出血等损伤。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：

本发明中多糖组合物的原料易得、制备方便，来源于广泛认可的药食同源动植物。本发明所提供的多糖组合物可显著提高经乙醇刺激后黏膜细胞(GES-1)的存活率，显著降低细胞氧化损伤因子(SOD、MPO和GSH)和炎症因子分泌量(TNF-α、IL-6)，其从增强物理屏障保护机制、降低氧化损伤、抑制炎症因子信号通路等机理，协同促进多糖粘膜损伤的防御作用，具有显著的辅助保护胃粘膜功能，对开发具有潜在胃粘膜保护功能的保健食品提供理论基础，应用前景广阔。

附图说明

下面结合附图和具体实施方式对本发明做更进一步的具体说明，本发明的上述和/或其他方面的优点将会变得更加清楚。

图1是五种多糖对GES-1增殖影响的实验结果。

图2是正常培养(对照组)和乙醇损伤后(模型组)GES-1细胞的细胞形态。

图3是多糖组合物对GES-1细胞乙醇损伤的抑制效果(*p<0.05)。

图4是14号多糖组合物的对细胞氧化因子的影响(a，b，c表示显著性差异，p<0.05)。

图5是14号多糖组合物的对细胞炎症因子IL-6和TNF-αmRNA表达量的影响(a，b表示显著性差异，p<0.05)。

图6是多糖组合物14号对细胞NF-κB蛋白表达量的影响(a，b表示显著性差异，p<0.05)。

图7是多糖组合物14号的流变学性质和成膜性。

图8是多糖组合物对SD大鼠乙醇型胃损伤的胃部镜检图，A为对照组，B为损伤模型组，C为多糖组合物14号组，D为溃疡指数图。

具体实施方式

下述实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。

下述实施例中所述岩藻多糖(FUC)、银耳甘露聚糖(TFP)、硫酸软骨素(Fcs)、魔芋葡甘聚糖(KGM)和β-葡聚糖(β-glucan)的制备方法分别如下：

所述岩藻多糖的制备过程如下：将鲜海参干制后粉碎，经脱脂，1wt％木瓜蛋白酶(60℃，酶活力40万U/g，酶活力定义为，在一定条件下，每分钟水解酪蛋白生产1μg酪氨酸所需的酶用量为1U)60℃酶解24小时，100℃加热10分钟灭酶，酶解液离心(5000r/min，10min)取上清，采用50％、70％浓度乙醇分级沉淀后，取70％醇沉沉淀部分，溶解于水中，3500Da透析袋处理24小时脱盐、烘干后得到岩藻多糖(1050kDa)。

所述银耳甘露聚糖的制备过程如下：银耳子实体粉碎后，经热水浸提(固液比1g：4L，70℃，4小时)，过滤，滤液经40％乙醇沉淀，溶解于水中、3500Da透析袋处理24小时，干燥后得到银耳甘露聚糖(2249kDa)。

所述硫酸软骨素的制备过程如下：将鲜海参匀浆后，经脱脂，1wt％木瓜蛋白酶(60℃，酶活力40万U/g，酶活力定义为，在一定条件下，每分钟水解酪蛋白生产1μg酪氨酸所需的酶用量为1U)60℃酶解24小时，100℃加热10分钟灭酶，酶解液离心(5000r/min，10min)取上清，采用30％浓度乙醇沉淀，将沉淀分离，溶解于水中，3500Da透析袋处理24小时脱盐、烘干后得到硫酸软骨素(63.3kDa)。

所述魔芋葡甘聚糖的制备过程如下：魔芋精粉用50％(v/v)乙醇洗涤3次，除去水溶性杂质，用50mL无水乙醚/无水乙醇(2:1v/v)在40℃搅拌8h脱脂，过滤，滤渣干燥，随后将干燥后的滤渣以蒸馏水配成0.6％(g/L)水溶胶，离心取上清液，加入适量淀粉酶(淀粉酶4万U/g，1g固体酶粉于60℃，pH6.0条件下，1小时液化1g可溶性淀粉所需的酶量，即为1个酶活力单位，以U/g表示。)(干燥后的滤渣质量的1％)60℃反应2h后，Sevage法脱蛋白，离心取上层水相，用70％乙醇(v/v)沉淀，收集沉淀干燥得魔芋葡甘聚糖(728kDa)。

所述β-葡聚糖的制备过程如下：称取一定质量的酿酒酵母菌体，经细胞破碎、热水浸提(固液比1g：30L，85℃，30min)，保留沉淀物质，再利用1M NaOH在65℃浸提4h，离心取沉淀。将残渣重悬调pH 7.0，离心(5000r/min，10分钟)取沉淀，蒸馏水多次洗涤，干燥即可得到β-葡聚糖(125kDa)。

实施例1多糖成分对GES-1细胞增殖的影响

生长状态良好的GES-1细胞，经0.25％胰酶消化(1ml，37℃，90s)后制成细胞悬液，细胞计数后稀释，按照2×10⁴个/孔的浓度加入96孔板中，每孔100μL，培养10小时待细胞完全贴壁后，弃去培养液，分别加入100μL五种不同多糖的1640细胞培养基(500μg/mL)，同体积不含多糖的细胞培养液作为对照，培养24小时(培养条件：空气，95％，二氧化碳，5％；37℃，湿度70％～80％)，每个样品设置6个复孔作为平行，MTT法测定并计算细胞存活率，细胞存活率＝(实验组OD570-空白组OD570值)/(对照组OD570值-空白组OD570值)。所有实验重复3次及以上，实验数据用平均值±标准差表示，使用SPSS软件进行数据分析，采用T检验或单因素方差分析进行多重比较检验，分析组间差异是否有统计学意义。

实验结果如下：涉及的5种多糖在一定浓度下分别作用于GES-1细胞24h后，与对照组进行比较，MTT法测定并计算细胞存活率，发现5种多糖孵育后细胞的存活率均在95％以上，与对照组无显著性影响(图1)，说明该多糖在一定浓度下不具有细胞毒性，是安全的。

实施例2多糖组合物的配比设计与优化

对于岩藻多糖(1050kDa)、银耳甘露聚糖(2249kDa)、硫酸软骨素(63.3kDa)、魔芋葡甘聚糖(728kDa)和β-葡聚糖(125kDa)，按照均匀实验设计方法优化组分配比，实验设计如表1所示。

表1均匀实验设计分组

注：各多糖用量的单位为μg/mL细胞培养液。

制备方法为：分别取岩藻多糖、银耳甘露聚糖、硫酸软骨素、魔芋葡甘聚糖和β-葡聚糖，溶解于水中，40～50℃加热充分溶解，高速剪切(20000r/min，10min)混匀后，过0.45μm滤膜后，-50℃预冻5～10小时，真空冷冻干燥。

实施例3多糖组合物成分对GES-1细胞乙醇损伤的抑制作用

生长状态良好的GES-1细胞，经0.25％胰酶消化(1ml，37℃，90s)后制成细胞悬液，细胞计数后稀释，按照5×10⁴个/孔的浓度加入到96孔板中，每孔100μL，培养24小时待细胞完全贴壁后，弃去培养液，加入100μL含多糖组合物的细胞1640培养液(分别加入表1中16组不同的多糖组合)，同体积不含多糖组合物的细胞培养液作为模型组，孵育0.5h后，吸去细胞培养液，加入含10％乙醇的细胞培养液损伤0.5h构建模型，同体积不含乙醇的细胞培养液作为对照组，MTT法测定并计算细胞存活率，损伤抑制率＝实验组细胞存活率-模型组细胞存活率。所有实验重复3次及以上，实验数据用平均值±标准差表示，使用SPSS软件进行数据分析，采用T检验或单因素方差分析进行多重比较检验，分析组间差异是否有统计学意义。

实验结果如下：正常GES-1细胞形态为不规则多边形，经乙醇损伤后，细胞失水皱缩成圆形，部分细胞能正常贴壁(图2)。5种多糖组合物提前孵育GES-1细胞0.5h后，与模型组相比，细胞对乙醇损伤表现出显著的抑制效果，其中2号(抑制率27.3±1.2％)、4号(抑制率32.6±2.4％)、10号(抑制率30.5±1.1％)和14号(抑制率34.2±1.3％)对细胞损伤的抑制率优于其他组，其中14号表现出最优的效果(图3)，说明该组合物配比合理，能起到协同增效的作用，有助于功效发挥。

实施例4多糖组合物中14号对相关细胞氧化因子的含量测定

采用6孔板进行实验，按一定浓度布板生长状态良好的GES-1细胞后，参考实施例3中96孔板中操作进行乙醇损伤细胞实验，设置提前孵育糖类组合物14号的实验组，空白对照组和模型组。收集各组细胞，冰浴匀浆，离心后取上清液，测定丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活力，谷胱甘肽(GSH)含量，指标测定参照南京建成试剂盒的方法进行。所有实验重复3次及以上，实验数据用平均值±标准差表示，使用SPSS软件进行数据分析，采用T检验或单因素方差分析进行多重比较检验，分析组间差异是否有统计学意义。

结果表明：MDA是脂质过氧化的产物，其含量可表征细胞氧化损伤的水平，乙醇刺激使MDA水平提高至正常值的125％，表明细胞出现严重的氧化损伤(图4)，提前孵育14号多糖组合物可有效抑制细胞中该指标的增加。SOD和GSH是保护胃粘膜免受氧化损伤的重要抗氧化因子，受到乙醇损伤后，细胞中SOD和GSH水平的显著降低，提前孵育14号多糖组合物的细胞中GSH和SOD活性可维持在正常水平，表明14号样品可通过抑制氧化损伤、增强抗氧化能力，来减轻乙醇诱导的胃粘膜细胞损伤。

实施例5多糖组合物中8号对相关细胞炎症因子的含量测定

细胞培养、造模等操作同实施例3，待收集各组细胞后，提取细胞总RNA提取：移去细胞培养液后，PBS清洗，加入Trizol试剂(1mL/孔)，按照Thermo Fisher说明书步骤提取总RNA，采用Nanodrop 2000测定RNA样品纯度和含量，进行核酸电泳确定RNA质量。将糖类组合物14号和对照的cDNA通过实时荧光定量PCR进行定量，使用SYBE GREEN I为荧光染料，所用引物序列见表2.

表2炎症因子引物序列

结果表明，乙醇刺激可激活先天免疫系统并改变炎症细胞因子如TNF-α和IL-6的水平。TNF-α是炎症过程中的侵袭性因子，白细胞介素-6(IL-6)可与其它促炎细胞因子共同作用加剧细胞的炎症损伤。RT-PCR结果(图5)显示，乙醇刺激可显著提高GES-1细胞中TNF-α和IL-6的mRNA表达量，而提前孵育14号样品可将细胞中的TNF-α的表达降低至模型组的20.1％，同时IL-6的表达量也显著降低。说明多糖组合物可通过减轻炎症来缓解胃粘膜损伤。

实施例6多糖组合对NF-κB通路关键蛋白表达量的研究

细胞培养、造模等操作同实施例3，待收集各组细胞后，加入RIPA组织裂解液(含10mM PMSF)冰浴高速匀浆制备10％组织匀浆液后，4℃孵育30min，12000r/min 4℃离心10min，取上清液以western blotting分析各组细胞中NF-κB p65含量的差异，以β-actin作为内参，用Image J软件进行灰度比对。

结果表明：细胞释放的多种促炎因子可通过IκB激酶复合物对κB的磷酸化来促进NF-κB的表达，释放的NF-κB易位到细胞核中增加促炎症介质(包括TNF-α和IL-6)的转录激活。Western-blotting分析结果显示(图6)，乙醇处理会显著提高细胞中NF-κB通路关键蛋白p65的表达量，而预先用14号样品处理可有效抑制乙醇刺激导致的NF-κB蛋白上调。

实施例7多糖组合物的流变学性质和成膜性研究

将14号组合物样品按一定浓度溶于水中(溶解即可)，温和振荡2h。随后在25℃下利用Physica MCR 301流变仪，测定剪切速率1-1000s^-1范围内样品的表观粘度，绘制粘度曲线。并取一定质量样品溶液经低温干燥脱水，观察其成膜性。

结果表明：多糖组合物在水溶液中可分散成为透明溶液，呈现出稳定的剪切稀化的流变学行为，零剪切速率粘度约为700mPa·s，分子链之间缠绕程度较高，干燥后形成强度较好的膜，说明复合物在溶液状态中，可以在细胞表面形成稳定的物理屏障保护层(图7)，此外，其良好的水溶性，可适用于多种食品体系中。

实施例8多糖组合物对SD大鼠乙醇胃损伤的抑制作用评价

雄性SD大鼠随机均分为3组：对照组、模型组、实验组，每组6只。实验当天14号多糖组按100mg/kg.bw灌胃样品(5mL/kg.bw)，对照组和模型组给予同剂量生理盐水，禁食禁水，12h后灌胃样品，1h后，立即灌胃4mL/kg.bw 70％乙醇造模，对照组灌入等剂量生理盐水，乙醚熏晕后腹主动脉取血，取大鼠胃组织，用解剖镜观察并拍摄，用Olympus Image pro plus统计胃溃疡面积及腺胃部总面积，计算溃疡指数：溃疡指数＝(胃溃疡总面积/对应胃组织腺胃部总面积)×100％。实验数据用平均值±标准差表示，使用SPSS软件进行数据分析，采用T检验或单因素方差分析进行多重比较检验，分析组间差异是否有统计学意义。

结果表明：比较对照组和模型组大鼠的胃组织发现，乙醇造成的损伤集中于腺胃部，出现粘膜水肿，灶状和条状出血等现象。模型组胃表面出血的溃疡指数达到13.2±2.2％(图8)。提前灌胃多糖样品组大鼠的灶状和条状出血明显改善，UI值显著低于模型组(p<0.05)。说明14号样品组合在辅助保护大鼠胃粘膜损伤中具有显著效果。

本发明选用五种食品动植物来源的功能多糖，复配成多糖组合物，通过评价该组合物成分对人胃粘膜上皮细胞(GES-1)的增殖和乙醇细胞损伤的抑制效果，筛选出所述糖类组合物的最佳配方。进一步通过细胞氧化因子、炎症因子和荧光定量PCR实验评价所述多糖组合物的保护机理，通过流变学、成膜等性质评价多糖组合物的物理保护效果，进一步通过SD大鼠乙醇胃损伤模型对该效果进行验证。结果发现，在细胞和动物水平，本发明的多糖组合物均表现出显著保护胃粘膜损伤的功效，作用机理明确。

本发明的技术方案为研究开发具有辅助保护胃粘膜的保健食品提供了基础。而且本发明的糖类组合物原料易得，制备方便，具有明显促进伤口愈合作用，产业化应用前景广阔。

本发明提供了一种保护胃黏膜的多糖组合物及其制备方法与应用的思路及方法，具体实现该技术方案的方法和途径很多，以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。本实施例中未明确的各组成部分均可用现有技术加以实现。

Claims (9)

1.一种多糖组合物，其特征在于，由岩藻多糖、银耳甘露聚糖、硫酸软骨素、魔芋葡甘聚糖和β-葡聚糖组成，各多糖的重量份数比为100:(25~35):(2~4):(4~6):(0.05~0.15)，或100:(145~155):(4~6):(20~30):(45~55)，或100:(5~15):(0.5~1.5):(7~17):(0.05~0.15)，或100:(45~55):(0.5~1.5):(15~25):(5~15)；

其中，所述岩藻多糖的重均分子量为50~1500 kDa，所述银耳甘露聚糖的重均分子量为1000~2500 kDa，所述硫酸软骨素的重均分子量为10~500 kDa，所述魔芋葡甘聚糖的重均分子量为728 kDa，所述β-葡聚糖的重均分子量为100~300 kDa。

2.根据权利要求1所述多糖组合物，其特征在于，所述岩藻多糖的制备方法为将鲜海参直接匀浆或干制后粉碎，得到海参匀浆液或干粉；所得海参匀浆液或干粉经脱脂，复合蛋白酶酶解，50%~70%浓度乙醇沉淀，脱盐、干燥后得到岩藻多糖。

3.根据权利要求1所述多糖组合物，其特征在于，所述银耳甘露聚糖的制备方法为将银耳子实体粉碎后，经热水浸提，过滤，滤液经40%~60%乙醇沉淀，脱盐、干燥后得到银耳甘露聚糖。

4.根据权利要求1所述多糖组合物，其特征在于，所述硫酸软骨素的制备方法为将鲜海参直接匀浆或干制后粉碎，得到海参匀浆液或干粉；所得海参匀浆液或干粉经脱脂，蛋白酶酶解，20%~40%浓度乙醇沉淀，脱盐、干燥后得到硫酸软骨素。

5.根据权利要求1所述多糖组合物，其特征在于，所述魔芋葡甘聚糖的制备过程如下：魔芋精粉洗涤、脱脂，随后将脱脂样品以蒸馏水配成水溶胶，离心取上清液，淀粉酶反应，Sevage法脱蛋白，离心取上层水相，用40%~80%乙醇沉淀，收集沉淀干燥后得到魔芋葡甘聚糖。

6.根据权利要求1所述多糖组合物，其特征在于，所述β-葡聚糖的制备方法为将酵母菌体破碎、热水浸提，保留沉淀物质，再利用NaOH浸提，离心取沉淀，将沉淀重悬调，再次离心取沉淀，蒸馏水洗涤，干燥即可得到β-葡聚糖。

7.一种具有保护胃粘膜功能的制剂，其特征在于，包括权利要求1~6中任意一项所述的多糖组合物。

8.权利要求1所述多糖组合物在制备保护胃黏膜或治疗胃粘膜损伤产品中的应用。

9.权利要求7所述制剂在制备保护胃黏膜或治疗胃粘膜损伤产品中的应用。