CN111909071B - 一种纯化地诺前列酮的方法 - Google Patents
一种纯化地诺前列酮的方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111909071B CN111909071B CN202010869922.1A CN202010869922A CN111909071B CN 111909071 B CN111909071 B CN 111909071B CN 202010869922 A CN202010869922 A CN 202010869922A CN 111909071 B CN111909071 B CN 111909071B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- nanofiltration
- solution
- dienogest
- purifying
- dienoprost
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- AZFLJNIPTRTECV-FUMNGEBKSA-N dienogest Chemical compound C1CC(=O)C=C2CC[C@@H]([C@H]3[C@@](C)([C@](CC3)(O)CC#N)CC3)C3=C21 AZFLJNIPTRTECV-FUMNGEBKSA-N 0.000 title claims abstract description 42
- 229960003309 dienogest Drugs 0.000 title claims abstract description 42
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 21
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 claims abstract description 52
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract description 24
- 239000003480 eluent Substances 0.000 claims abstract description 23
- 239000000945 filler Substances 0.000 claims abstract description 15
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 11
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 claims abstract description 10
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 claims abstract description 10
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 claims abstract description 9
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000001471 micro-filtration Methods 0.000 claims abstract description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000012856 packing Methods 0.000 claims description 9
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 8
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 claims description 5
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000012510 hollow fiber Substances 0.000 claims description 4
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 claims description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 4
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 3
- XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N dinoprostone Chemical compound CCCCC[C@H](O)\C=C\[C@H]1[C@H](O)CC(=O)[C@@H]1C\C=C/CCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-ARSRFYASSA-N 0.000 description 2
- 229960002986 dinoprostone Drugs 0.000 description 2
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 2
- XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N prostaglandin E2 Natural products CCCCCC(O)C=CC1C(O)CC(=O)C1CC=CCCCC(O)=O XEYBRNLFEZDVAW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 2
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 2
- 241000212384 Bifora Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000005070 ripening Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C405/00—Compounds containing a five-membered ring having two side-chains in ortho position to each other, and having oxygen atoms directly attached to the ring in ortho position to one of the side-chains, one side-chain containing, not directly attached to the ring, a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, and the other side-chain having oxygen atoms attached in gamma-position to the ring, e.g. prostaglandins ; Analogues or derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
- C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
- C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
Abstract
本发明公开了一种纯化地诺前列酮的方法，包括如下步骤：S1、取地诺前列酮的酶促反应液依次经微滤、超滤和纳滤处理得到纳滤液；S2、将纳滤液上层析柱，然后用溶液A预洗，再用溶液B洗脱并收集洗脱液，脱除溶剂即得地诺前列酮，其中，层析柱的填料为硅胶Unisil 10‑120 C18。本发明可以有效分离纯化地诺前列酮的酶促反应液，获得的地诺前列酮的纯度和收率较高。
Description
技术领域
本发明涉及生物制药技术领域，尤其涉及一种纯化地诺前列酮的方法。
背景技术
地诺前列酮(简称前列腺素E2，PGE2)为天然前列腺素，对各期妊娠子宫均有收缩作用，用于妊娠足月(从妊娠第38周开始)时促宫颈成熟，其宫颈Bishop评分小于或等于6分，单胎头先露，有引产指征且无母婴禁忌症。
目前，地诺前列酮常通过化学合成方法制得。酶催化法制备地诺前列酮的方法较少。CN201911326101.7的申请文件中提到酶催化法制备前列腺素E2得到反应液，但是从该反应液中分离纯化获得高纯度的地诺前列酮还没有合适的方法。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种纯化地诺前列酮的方法，本发明可以有效分离纯化地诺前列酮的酶促反应液，获得的地诺前列酮的纯度和收率较高。
本发明提出的一种纯化地诺前列酮的方法，包括如下步骤：
S1、取地诺前列酮的酶促反应液依次经微滤、超滤和纳滤处理得到纳滤液；
S2、将纳滤液上层析柱，然后用溶液A预洗，再用溶液B洗脱并收集洗脱液，脱除溶剂即得地诺前列酮，其中，层析柱的填料为硅胶Unisil 10-120 C18。
上述硅胶Unisil 10-120 C18可以从市场购得，如苏州纳微科技股份有限公司，硅胶Unisil 10-120 C18可以经再生处理后重复利用。
上述“地诺前列酮的酶促反应液”是指申请号为CN201911326101.7的申请文件中实施例5获得的反应液。
优选地，在S2中，用紫外检测器在线监控，检测波长为208-212nm，当洗脱液的紫外响应值为1600mAU时，开始收集洗脱液，至洗脱液的紫外响应值≤500mAU时停止收集。
优选地，在S2中，溶液A为体积分数为14.5-15.5％的乙醇水溶液。
上述15％的乙醇水溶液预洗可以有效的除去无机盐及一部分有机杂质，且不会将PGE2洗脱下来。
优选地，在S2中，溶液B为体积分数为44.5-45.5％的乙醇水溶液。
优选地，在S2中，层析柱中，填料高度与层析柱内径的比值为7-7.5:1。
优选地，在S2中，层析柱中每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为3.9-6.2mg。
优选地，在S2中，纳滤液的上样流速、洗脱流速均为每小时2.4-3.6倍柱床体积。
优选地，在S2中，溶液A的用量为2.5-3.5倍柱床体积。
上述柱床体积是指层析柱中的填料体积。
优选地，在S1中，用陶瓷膜微滤。
优选地，陶瓷膜孔径为90-110nm。
优选地，在S1中，用中空纤维柱超滤。
优选地，中空纤维柱的截留分子量为5000Da。
优选地，在S1中，纳滤膜的截留分子量为150Da。
有益效果：
发明人先选用葡聚糖凝胶CM-25作为层析柱的填料，对地诺前列酮的酶促反应液进行分离纯化，但是发现地诺前列酮的纯度和收率均不高，因此发明人通过多次试验，选用硅胶Unisil 10-120 C18作为层析柱的填料，并选用合适的洗脱液和适宜的洗脱工艺，使得到的地诺前列酮具有较高的纯度，且收率较高；并且本发明操作简单，硅胶Unisil 10-120C18重复利用率高，寿命较长，硅胶Unisil 10-120 C18的再生处理简单。
附图说明
图1为实施例1中纳滤液高效液相色谱图。
图2为实施例1中洗脱液的高效液相色谱图。
图3为实施例2中纳滤液高效液相色谱图。
图4为实施例2中洗脱液的高效液相色谱图。
图5为实施例3中纳滤液高效液相色谱图。
图6为实施例3中洗脱液的高效液相色谱图。
图7为实施例4中纳滤液高效液相色谱图。
图8为实施例4中洗脱液的高效液相色谱图。
图9为实施例5中纳滤液高效液相色谱图。
图10为实施例5中洗脱液的高效液相色谱图。
图11为实施例6中纳滤液高效液相色谱图。
图12为实施例6中洗脱液的高效液相色谱图。
图13为实施例7中纳滤液高效液相色谱图。
图14为实施例7中洗脱液的高效液相色谱图。
图15为实施例8中纳滤液高效液相色谱图。
图16为实施例8中洗脱液的高效液相色谱图。
具体实施方式
下面，通过具体实施例对本发明的技术方案进行详细说明。
实施例1
一种纯化地诺前列酮的方法，包括如下步骤：
S1、取地诺前列酮的酶促反应液依次经孔径为100nm的陶瓷膜微滤、截留分子量为5000Da的中空纤维柱超滤和截留分子量为150Da的纳滤膜纳滤得到纳滤液；
S2、将纳滤液上层析柱(柱高为40cm，内径为3.5cm，填料的填装高度为26cm，柱床体积为250mL)，然后用3倍柱床体积的体积分数为15％的乙醇水溶液预洗，再用体积分数为45％的乙醇水溶液洗脱(预洗和洗脱的流速均为10ml/min)，洗脱过程中用紫外检测器在线监控，检测波长为210nm，当洗脱液的紫外响应值为1600mAU时，开始收集洗脱液，至洗脱液的紫外响应值≤500mAU时停止收集，脱除洗脱液中的溶剂即得地诺前列酮，其中，层析柱的填料为硅胶Unisil 10-120C18；每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为3.89mg(即地诺前列酮的上样量为972.4mg)；每小时纳滤液的上样体积为柱床体积的2.4倍(即纳滤液的上样流速为10ml/min)。
实施例2
预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为12ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为3.934mg(即地诺前列酮的上样量为983.4mg)，其他同实施例1。
实施例3
预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为15ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为3.96mg(即地诺前列酮的上样量为990.6mg)，其他同实施例1。
实施例4
预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为15ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为4.82mg(即地诺前列酮的上样量为1204.5mg)，其他同实施例1。
实施例5
预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为15ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为6.23mg(即地诺前列酮的上样量为1558mg)，其他同实施例1。
实施例6
预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为15ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为5.36mg(即地诺前列酮的上样量为1341mg)，其他同实施例1。
实施例7
填料为葡聚糖凝胶CM-25，预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为12ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为3.68mg(即地诺前列酮的上样量为921mg)，其他同实施例1。
实施例8
填料为葡聚糖凝胶CM-25，预洗、洗脱、纳滤液的上样流速均为12ml/min，每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为4.0mg(即地诺前列酮的上样量为1003mg)，其他同实施例1。
分别取实施例1-8的纳滤液、洗脱液；分别用高效液相检测地诺前列酮(PGE2)的含量及纯度，结果如表1和图1-16所示。
表1
由表1和图1-16可以看出，纳滤液的上样流速、预洗流速和洗脱流速在每小时2.4-3.6倍柱床体积(10-15ml/min)内，地诺前列酮的上样量在3.9-6.2倍柱床体积内，填料为硅胶Unisil 10-120 C18的层析柱在收率和纯度方面都比葡聚糖凝胶CM-25高，且稳定性较好。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、取地诺前列酮的酶促反应液依次经微滤、超滤和纳滤处理得到纳滤液；
S2、将纳滤液上层析柱，然后用溶液A预洗，再用溶液B洗脱并收集洗脱液，脱除溶剂即得地诺前列酮，其中，层析柱的填料为硅胶Unisil 10-120C18；
其中，在S2中，溶液A为体积分数为14.5-15.5％的乙醇水溶液；
溶液B为体积分数为44.5-45.5％的乙醇水溶液。
2.根据权利要求1所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S2中，用紫外检测器在线监控，检测波长为208-212nm，当洗脱液的紫外响应值为1600mAU时，开始收集洗脱液，至洗脱液的紫外响应值≤500mAU时停止收集。
3.根据权利要求1或2所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S2中，层析柱中，填料高度与层析柱内径的比值为7-7.5:1。
4.根据权利要求1或2所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S2中，层析柱中每1ml填料上纳滤液中地诺前列酮的量为3.9-6.2mg；在S2中，纳滤液的上样流速、洗脱流速均为每小时2.4-3.6倍柱床体积。
5.根据权利要求1或2所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S2中，溶液A的用量为2.5-3.5倍柱床体积。
6.根据权利要求1或2所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S1中，用陶瓷膜微滤；陶瓷膜孔径为90-110nm。
7.根据权利要求1或2所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S1中，用中空纤维柱超滤；中空纤维柱的截留分子量为5000Da。
8.根据权利要求1或2所述纯化地诺前列酮的方法，其特征在于，在S1中，纳滤膜的截留分子量为150Da。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010869922.1A CN111909071B (zh) | 2020-08-26 | 2020-08-26 | 一种纯化地诺前列酮的方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010869922.1A CN111909071B (zh) | 2020-08-26 | 2020-08-26 | 一种纯化地诺前列酮的方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111909071A CN111909071A (zh) | 2020-11-10 |
| CN111909071B true CN111909071B (zh) | 2023-04-28 |
Family
ID=73278866
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010869922.1A Active CN111909071B (zh) | 2020-08-26 | 2020-08-26 | 一种纯化地诺前列酮的方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111909071B (zh) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112479962B (zh) * | 2020-11-23 | 2022-12-20 | 苏州纳微科技股份有限公司 | 一种前列腺素e2的高收率分离纯化方法 |
Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS49102648A (zh) * | 1973-02-14 | 1974-09-27 | ||
| US3992413A (en) * | 1975-07-25 | 1976-11-16 | Merck & Co., Inc. | Intermediates in the synthesis of prostaglandins |
| JPH04112866A (ja) * | 1990-09-03 | 1992-04-14 | Lion Corp | プロスタグランジンの精製法 |
| CN1064105A (zh) * | 1991-02-08 | 1992-09-02 | 吉林大学 | 固定化酶法生产前列腺素e1，e2 |
| CN1160766A (zh) * | 1996-03-21 | 1997-10-01 | 江西鹿迪制药有限公司 | 前列腺素e1原料药及生产工艺 |
| CN101120916A (zh) * | 2006-08-08 | 2008-02-13 | 北京儒展生化药物研究中心 | 前列腺素e2注射剂及其制作方法 |
| CN110951814A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-04-03 | 长春理工大学 | 利用基因工程环氧合酶-1和基因工程前列腺素e合成酶-1制备前列腺素e1的方法 |
| CN111394289A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-07-10 | 合肥康诺药物开发有限公司 | 一种基因工程菌及其应用，生产前列腺素e2的方法 |
| CN112479962A (zh) * | 2020-11-23 | 2021-03-12 | 苏州纳微科技股份有限公司 | 一种前列腺素e2的高收率分离纯化方法 |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001057225A1 (fr) * | 2000-02-03 | 2001-08-09 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Proteine regissant l'activite de la pge2 synthase et son utilisation |
| CN103373947A (zh) * | 2012-04-27 | 2013-10-30 | 张家港九木科技有限公司 | 地诺前列酮的一种绿色合成方法 |
-
2020
- 2020-08-26 CN CN202010869922.1A patent/CN111909071B/zh active Active
Patent Citations (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS49102648A (zh) * | 1973-02-14 | 1974-09-27 | ||
| US3992413A (en) * | 1975-07-25 | 1976-11-16 | Merck & Co., Inc. | Intermediates in the synthesis of prostaglandins |
| JPH04112866A (ja) * | 1990-09-03 | 1992-04-14 | Lion Corp | プロスタグランジンの精製法 |
| CN1064105A (zh) * | 1991-02-08 | 1992-09-02 | 吉林大学 | 固定化酶法生产前列腺素e1，e2 |
| CN1160766A (zh) * | 1996-03-21 | 1997-10-01 | 江西鹿迪制药有限公司 | 前列腺素e1原料药及生产工艺 |
| CN101120916A (zh) * | 2006-08-08 | 2008-02-13 | 北京儒展生化药物研究中心 | 前列腺素e2注射剂及其制作方法 |
| CN111394289A (zh) * | 2019-12-20 | 2020-07-10 | 合肥康诺药物开发有限公司 | 一种基因工程菌及其应用，生产前列腺素e2的方法 |
| CN110951814A (zh) * | 2019-12-30 | 2020-04-03 | 长春理工大学 | 利用基因工程环氧合酶-1和基因工程前列腺素e合成酶-1制备前列腺素e1的方法 |
| CN112479962A (zh) * | 2020-11-23 | 2021-03-12 | 苏州纳微科技股份有限公司 | 一种前列腺素e2的高收率分离纯化方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN111909071A (zh) | 2020-11-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107254449B (zh) | 一种大规模生产高纯度猪伪狂犬病毒的方法 | |
| CN111909071B (zh) | 一种纯化地诺前列酮的方法 | |
| CN102178951A (zh) | 一种生产静注人免疫球蛋白的方法 | |
| CN104876994B (zh) | 一种纯化氧化型β‑烟酰胺腺嘌呤二核苷酸的方法 | |
| CN107630037A (zh) | 一种获得高纯度腺相关病毒载体的纯化工艺 | |
| CN104818254A (zh) | 离子交换色谱纯化口蹄疫灭活病毒抗原的方法 | |
| CN104892734A (zh) | 疏水作用层析提纯口蹄疫灭活病毒抗原的方法 | |
| CN112479962B (zh) | 一种前列腺素e2的高收率分离纯化方法 | |
| CN115925890A (zh) | 一种抗新冠病毒中和抗体纯化方法 | |
| CN114249817B (zh) | 一种分离纯化人抗凝血酶ⅲ的方法 | |
| CN107721909B (zh) | 从桑科植物中连续提取dnj、黄酮、多糖的方法和系统 | |
| EP3371302A1 (en) | Method for the separation of virus compositions including depletion and purification thereof | |
| CN109336967A (zh) | 基于混合填料的抗体纯化方法 | |
| CN102020687B (zh) | 从党参中提取分离党参炔苷的方法 | |
| WO2020147421A1 (zh) | 一种舒更葡糖的分离纯化方法 | |
| CN112375142B (zh) | 静注新型冠状病毒人免疫球蛋白的制备方法 | |
| CN109134622B (zh) | 口蹄疫病毒抗原的多步连续集成纯化方法 | |
| CN103251943A (zh) | 一种制备b型流感嗜血杆菌多糖结合疫苗的方法 | |
| HRP20160815T1 (hr) | Postupak pročišćavanja ugljikohidrata iz skupine a streptokoka | |
| CN114736294A (zh) | 一种破伤风免疫球蛋白的纯化方法及其亲和层析填料 | |
| CN111575249B (zh) | 新型冠状病毒Vero细胞灭活疫苗病毒液的纯化方法 | |
| CN101781367B (zh) | 一种来匹卢定的纯化方法 | |
| CN115651917A (zh) | Ca16病毒灭活液的纯化方法及ca16病毒灭活原液的制备方法 | |
| CN105152861A (zh) | 一种从肉苁蓉低聚糖浆中制备甘露醇的方法 | |
| CN105153294A (zh) | 一种重组胰岛素及胰岛素类似物前体纯化方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 475000 66 south section of Jinming Road, Kaifeng, Henan Patentee after: KAIFENG KANGNUO PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Patentee after: Hefei Kangnuo Biopharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 475000 66 south section of Jinming Road, Kaifeng, Henan Patentee before: KAIFENG KANGNUO PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Patentee before: Hefei Kangnuo biopharmaceutical Co.,Ltd. |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder | ||
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |
Address after: 475000 66 south section of Jinming Road, Kaifeng, Henan Patentee after: KAIFENG KANGNUO PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Patentee after: Kangnuo Biopharmaceutical Co.,Ltd. Address before: 475000 66 south section of Jinming Road, Kaifeng, Henan Patentee before: KAIFENG KANGNUO PHARMACEUTICAL Co.,Ltd. Patentee before: Hefei Kangnuo Biopharmaceutical Co.,Ltd. |
|
| CP01 | Change in the name or title of a patent holder |