CN111879940A - 肺结核、肺腺癌标志物及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一组肺结核、肺腺癌标志物及应用，属于生物技术检测技术领域。本发明发现肺结核病的标志物是在肺组织中高表达的MMP8蛋白；肺腺癌标志物是在肺组织中高表达的BRCA1和PCNA蛋白其中一个或两个的组合；本发明所述标志物可以辅助活体组织检查来帮助确诊相关的肺部疾病，具有良好的临床应用前景，特别是涉及所述肺部疾病的诊断及鉴别的试剂盒等产品的开发。

Description

肺结核、肺腺癌标志物及应用
技术领域
本发明涉及肺结核、肺腺癌标志物及应用，特别是涉及利用病人肺组织样本进行肺结核、肺腺癌及肺结节病的诊断的试剂盒等产品的开发，属于生物技术检测技术领域。
背景技术
结核病(pulmonary tuberculosis)是由结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuberculosis)引起的传染性疾病。目前，全球约有四分之一的人感染结核病，且每年因结核病死亡的人数超过一百万。结核病人中，约85％属于肺结核感染。临床上，肺结核与多种其他慢性肺部疾病具有非常相似的症状、病理学特征及影像学结果，例如肺癌和肺结节病(sarcoidosis)，给鉴别诊断带来了巨大挑战。肺癌是引起人类死亡最多的一类癌症，2018年全球因肺癌死亡的人数超过170万。其中，肺腺癌(lung adenocarcinoma)是最常见的一种肺癌亚型。结节病则是一种病因不清的自身免疫性疾病，常发病于肺部，形成类似结核病特征的肉芽肿(granuloma)结构，从而引起误诊。肺结核、肺腺癌及肺结节病都是国内外常见的、分布广泛的慢性炎症性肺部疾病，为此，筛选上述疾病的特异性生物标志物分子，并将其应用于相关鉴别诊断的试剂盒开发对于这些疾病的及时确诊和治疗具有重要意义。
临床上，对于上述疾病的鉴别诊断常会采取活体组织检查的方法，通过组织病理学的特征进行判别。然而，如上所述，肺结核、肺腺癌及肺结节病在很多情况下不易区分，故需要有效的疾病特异性肺组织生物标志物进行辅助检测和判断。
发明内容
本发明提供了分别针对肺结核、肺腺癌的特异性肺组织生物标志物分子，通过简便的免疫组织化学染色或实时荧光定量等方法，可以对这些疾病进行区分，十分适合应用于相关疾病的检测、诊断和鉴别试剂盒的开发。
本发明的第一个目的是提供MMP8蛋白在作为肺结核诊断标志物中的应用。
在一种实施方式中，所述应用是用定量检测MMP8蛋白表达情况的试剂制备肺结核检测产品。
在一种实施方式中，所述检测产品包括但不限于试剂或试剂盒。
在一种实施方式中，所述应用是将检测MMP8蛋白的试剂用于制备肺结核筛查试剂盒。
在一种实施方式中，所述MMP8蛋白的氨基酸序列包括如以下(a)或(b)所示：
(a)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有相同抗原性的由(a)衍生的多肽或其类似物。
在一种实施方式中，所述应用是将特异性与MMP8蛋白结合的抗体或抗原结合片段用于制备辅助诊断结核病，或检测结核病存在，或用以选择用于减少患者发生结核病风险的试剂，或体外识别用于治疗结核病的候选试剂，或评价患者在使用用于减少结核病风险的试剂进行治疗中获益的可能性，或用于评价患者在减少结核病风险的抗体或抗原结合片段进行治疗中获益可能性的试剂盒。
在一种实施方式中，所述检测产品通过荧光定量PCR、Southern杂交、Northern杂交、荧光原位杂交、DNA微阵列、高通量测序法或免疫法检测样本中MMP8蛋白的表达情况。
在一种实施方式中，所述免疫法包括ELISA法、放射免疫测定法、免疫组织化学法、Western印迹法。
在一种实施方式中，所述检测产品中包含能够特异性扩增MMP8基因的引物和/或探针；或者能够特异性结合MMP8蛋白的抗体。
在一种实施方式中，所述MMP8蛋白的检测试剂为抗MMP8的抗体。
在一种实施方式中，所述抗MMP8的抗体为单克隆抗体。
在一种实施方式中，所述样本为组织或外周血。
在一种实施方式中，所述检测产品包括芯片、试剂盒、试纸或高通量测序平台。
在一种实施方式中，所述芯片含有与所述标志物结合的抗体。
在一种实施方式中，所述试纸含有与所述标志物结合的抗体。
在一种实施方式中，所述高通量测序平台含有与所述标志物结合的抗体。
在一种实施方式中，所述试剂盒包括与所述标志物结合的抗体。
在一些实施方式中，所述试剂盒还包括通用试剂和缓冲液。
在一种实施方式中，所述试剂盒还包括酶联标记的二抗。
在一种实施方式中，所述试剂盒还包括MMP8蛋白的对照品。
在一种实施方式中，所述试剂盒还包括检测标记；所述检测标记包括但不限于荧光素、酶、金属离子、或同位素。
本发明还提供了一种检测肺结核的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)获取受试者的待检测肺组织样本；
(2)检测受试者样品中标志物MMP8蛋白的表达水平；
(3)将测得的标志物MMP8的表达水平与对照进行比较，并将比较结果与是否患病关联。
在一种实施方式中，所述MMP8蛋白在肺部疾病组织中的表达量超出对照的12.62倍以上视为患有肺结核。
本发明的第二个目的是提供BRCA1和/或PCNA在作为肺腺癌诊断标志物中的应用
在一种实施方式中，所述BRCA1蛋白含有如以下(a)或(b)所示的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有相同抗原性的由(a)衍生的多肽或其类似物。
在一种实施方式中，所述PCNA蛋白含有如以下(a)或(b)所示的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有相同抗原性的由(a)衍生的多肽或其类似物。
在一种实施方式中，所述应用是将特异性扩增BRCA1或PCNA的基因片段，或分别与BRCA1或PCNA结合的抗体用于制备辅助诊断肺腺癌病，或检测肺腺癌的存在，或用以选择用于减少患者发生肺腺癌风险的试剂，或体外识别用于治疗肺腺癌的候选试剂，或评价患者在使用用于减少肺腺癌风险的试剂进行治疗中获益的可能性，或用于评价患者在减少肺腺癌风险的抗体或抗原结合片段进行治疗中获益可能性的试剂盒。
在一种实施方式中，所述应用包括但不限于制备肺腺癌诊断试剂盒。
在一种实施方式中，所述免疫法包括ELISA法、放射免疫测定法、免疫组织化学法、Western印迹法。
在一种实施方式中，所述样本为组织或外周血。
在一种实施方式中，所述检测产品包括诊断试剂、试剂盒、芯片、试纸或高通量测序平台。
在一种实施方式中，所述芯片包括与所述标志物结合的抗体。
在一种实施方式中，所述试纸包括与所述标志物结合的抗体。
在一种实施方式中，所述高通量测序平台包括与所述标志物结合的抗体。
在一种实施方式中，所述试剂盒包括与所述标志物结合的抗体。
在一些实施方式中，所述试剂盒还包括通用试剂和缓冲液。
在一种实施方式中，所述试剂盒还包括酶联标记的二抗。
在一种实施方式中，所述试剂盒还包括BRCA1蛋白和/或PCNA蛋白的对照品。
在一种实施方式中，所述试剂盒还包括检测标记；所述检测标记包括但不限于荧光素、酶、金属离子、或同位素。
本发明还提供了一种检测肺腺癌的方法，所述方法包括如下步骤：
(1)获取受试者的待检测肺组织样本；
(2)检测受试者样品中标志物BRCA1蛋白和/或PCNA蛋白的表达水平；
(3)将测得的标志物BRCA1蛋白和/或PCNA蛋白的表达水平与对照进行比较，并将比较结果与受试者的患病与否关联起来。
在一种实施方式中，当待测样本中的BRCA1蛋白表达量高出对照11.69倍时，认为患有肺腺癌。
在一种实施方式中，当待测样本中的PCNA蛋白表达量高出对照10.04倍时，认为患有肺腺癌。
有益效果：本发明提供了可分别鉴别诊断肺结核、肺腺癌的生物标志物分子，使用这些所述标志物可以辅助活体组织检查来帮助确诊相关的肺部疾病，具体表现为：
(1)本发明提供了MMP8作为肺结核诊断标志物的用途。与正常肺组织对照相比，MMP8在肺结核患者的肺部疾病组织中特异性高表达，表达量为16.88±1.743(均值差±标准误)，12.62-21.15(95％置信区间)，P<0.0001(t检验)；而在肺腺癌(I，II，III或IV期)或肺结节病患者的肺部疾病组织中的MMP8表达量与正常组织相比无显著性差异。
(2)本发明提供了BRCA1和PCNA蛋白在单独或组合作为肺腺癌诊断标志物方面的应用。与正常肺组织对照相比，BRCA1蛋白在肺腺癌(I，II，III或IV期)患者的肺部疾病组织中特异性高表达，表达量为13.01±0.5392(均值差±标准误)，11.69-14.33(95％置信区间)；PCNA蛋白在肺腺癌(I，II，III或IV期)患者的肺部疾病组织中特异性高表达，表达量为11.31±0.5175(均值差±标准误)，10.04-12.57(95％置信区间)；而在肺结核或肺结节病患者的肺部疾病组织中的BRCA1和PCNA表达量与正常组织相比无显著性差异。
本发明收集了一定量的临床样本进行研究和验证，研究成果符合临床实际，具有良好的临床应用前景。
附图说明
图1(A)为MMP8的免疫组织化学染色结果；(B)为定量分析MMP8在各肺组织样本中的表达量；NC，正常肺组织样本组；TB，肺结核患者肺组织样本组；AD，肺腺癌患者肺组织样本组；SA，肺结节病患者肺组织样本组。
图2(A)为BRCA1和PCNA的免疫组织化学染色结果；(B)为定量分析BRCA1在各肺组织样本中的表达量；(C)为PCNA在各肺组织样本中的表达量；NC，正常肺组织样本组；TB，肺结核患者肺组织样本组；AD，肺腺癌患者肺组织样本组；SA，肺结节病患者肺组织样本组。
具体实施方式
在本发明的上下文中，“诊断”包括判断受试者是否已经患病、判断受试者是否存在患病的风险、判断患者是否已经复发、判断患者对药物治疗的反应性、或者判断患者的预后情况。
在本发明的上下文中，本文使用的术语“标志物”意指允许区分正常和疾病状态、或能够使治疗结果被预测或客观测量的标签。具体地，在与所述疾病相关的情况下，标志物意指在患有肺结核或肺腺癌的受试者中，或肺结核或肺腺癌发病风险的受试者中，相比于正常对照(未患对应疾病的受试者)，其蛋白或基因表达水平显著升高或降低的有机生物分子，例如多肽或核酸(例如mRNA等)、脂质、糖脂、糖蛋白、糖(单糖、二糖、寡糖等)。
实施例1 MMP8蛋白用于识别肺结核病人病变肺组织
1)获得待检测的来自肺结核患者(TB)、肺腺癌患者(AD)及肺结节病(SA)患者的肺组织样本(n＝10,12及8)，并以肺腺癌患者的癌旁正常组织作为正常肺组织对照(NC；n＝8)。
2)将肺组织样品用福尔马林固定，随后用石蜡包埋组织样本。
3)将石蜡进行连续切片，一部分进行苏木精-伊红(H&E)染色病理分析，另一部分进行免疫组织化学法测定，特异性识别MMP8蛋白的抗体可选用来自Santa Cruz公司的anti-MMP8抗体，具体步骤如下
(a)石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min，二甲苯Ⅱ15min，二甲苯III 15min，无水乙醇Ⅰ5min，无水乙醇Ⅱ5min，85％酒精5min，75％酒精5min，蒸馏水洗。
(b)抗原修复：将步骤(a)蒸馏水洗后的组织切片置于盛满EDTA抗原修复缓冲液(pH8.0)的修复盒中于微波炉内进行抗原修复，中高火9min至沸，停火7min保温再转中低火7min，此过程中应防止缓冲液过度蒸发，切勿干片。自然冷却后将玻片置于PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
(c)阻断内源性过氧化物酶：将步骤(b)处理后的切片放入3％双氧水溶液，室温避光孵育25min，将玻片置于PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。
(d)血清封闭:在组化圈内滴加3％BSA均匀覆盖组织，室温封闭30min。(一抗是山羊来源的用兔血清封闭，其他来源的用BSA封闭)
(e)加一抗：轻轻甩掉封闭液，在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于湿盒内4℃孵育过夜(湿盒内加少量水防止抗体蒸发)。
(f)加二抗：玻片置于PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加与一抗相应种属的二抗(HRP标记)覆盖组织，室温孵育50min。
(g)DAB显色：玻片置于PBS(pH7.4)中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加新鲜配制的DAB显色液，显微镜下控制显色时间，阳性为棕黄色，自来水冲洗切片终止显色。
(h)复染细胞核：苏木素复染3min左右，自来水洗，苏木素分化液分化数秒，自来水冲洗，苏木素返蓝液返蓝，流水冲洗。
(i)脱水封片：将切片依次放入75％酒精5min-85％酒精5min--无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-二甲苯Ⅰ5min中脱水透明，将切片从二甲苯拿出来稍晾干，中性树胶封片。
(j)显微镜镜检，图像采集分析计算MMP8的表达量。
4)确定和比较MMP8在各组切片样品中的表达量，可以选用ImageJ 1.50e软件进行定量分析。
结果如图1所示，免疫组织化学法分析结果表明，与正常肺组织(NC组)相比，MMP8在肺结核患者(TB样本组)中特异性高表达，MMP8在肺结核患者(TB样本组)中特异性高表达，表达量为16.88±1.743(均值差±标准误)，12.62-21.15(95％置信区间)，P<0.0001(t检验)；而在肺腺癌(I，II，III或IV期)或肺结节病患者的肺部疾病组织中的表达量则分别为0.7276±0.2790，0.04488-1.410和0.5069±0.1487，0.1430-0.8708，并无显著性差异。
MMP8的阳性率(均值差及95％置信区间)为27.32％(22.18％～32.45％)，P<0.0001(one-way ANOVA)；而在肺腺癌(I，II，III或IV期)或肺结节病患者的肺部疾病组织中的阳性率则分别为1.028％(-3.914％～5.970％)，P＝0.9426和1.353％(-4.061％～6.766％)，P＝0.9059，并无显著性差异。
实施例2肺结核检测试剂盒的制备及使用
采用已有的抗MMP8蛋白的抗体，或通过常规技术制备与MMP8蛋白特异性结合的单克隆抗体或多克隆抗体。
试剂盒含有：可检测信号分子以及可以结合可检测信号分子的检测抗体，用于识别特异性检测MMP8蛋白的单克隆或多克隆抗体，与检测抗体及信号分子反应的反应物，以及抗原修复液、缓冲液等；所述可检测分子可以选择本领域的通用化学物质，例如；辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶、脲酶、吖啶酯、鲁米诺；根据不同的可检测分子的特性选择适合的反应物，例如与辣根过氧化酶反应的邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)、鲁米诺，与碱性磷酸酶反应的对硝基苯磷酸酯(p-NPP)，与钌复合物反应的三丙胺等；
可选地，还可包括无水乙醇，二甲苯，EDTA(pH8.0)抗原修复液，PBS缓冲液，3％双氧水，BSA，苏木素染液，苏木素分化液，苏木素返蓝液，中性树胶，MMP8(一抗)，HRP山羊抗小鼠(二抗)，DAB显色剂。
试剂盒的使用方法为：(1)参照免疫组化标准方法，应用试剂盒检测受试者肺组织样本中MMP8蛋白的表达水平；(2)分析MMP8蛋白的表达水平，确定可能的疾病状态：如果MMP8蛋白的表达量高于对照12.62倍以上，可以为受试者提示肺结核的发生。
实施例3 BRCA1和PCNA蛋白用于肺腺癌病变肺组织的诊断
1)获得待检测的来自肺结核患者(TB)、肺腺癌患者(AD)及肺结节病(SA)患者的肺组织样本(n＝10,12及8)，并以肺腺癌患者的癌旁正常组织作为正常肺组织对照(NC；n＝8)。
2)将肺组织样品用福尔马林固定，随后用石蜡包埋组织样本。
3)将石蜡进行连续切片，一部分按标准方法进行H&E染色病理分析，另一部分按标准方法进行免疫组织化学法检测BRCA1和PCNA的表达量。免疫组织化学法检测方法同实施例1，区别在于将MMP8抗体替换为特异性识别BRCA1蛋白或PCNA蛋白的抗体；所用特异性识别BRCA1蛋白的抗体可以是来自Abcam公司的anti-BRCA1抗体；特异性识别PCNA蛋白的抗体可以是来自Santa Cruz公司的anti-PCNA抗体。
4)确定和比较BRCA1和PCNA在各组切片样品中的表达量，可以选用ImageJ 1.50e软件进行定量分析。
如图2所示，免疫组织化学法分析结果表明，与正常肺组织对照相比，BRCA1在肺腺癌(I，II，III或IV期)患者的肺部疾病组织中的表达量为13.01±0.5392(均值差±标准误)，11.69-14.33(95％置信区间)，P<0.0001(t检验)；而在肺结核或肺结节病患者的肺部疾病组织中的表达量则分别为1.097±0.1875，0.6382-1.556，P＝0.0011和0.4086±0.09015，0.1881-0.6292，P＝0.0040。
与正常肺组织对照相比，PCNA在肺腺癌(I，II，III或IV期)患者的肺部疾病组织中的表达量为11.31±0.5175(均值差±标准误)，10.04-12.57(95％置信区间)，P<0.0001(t检验)；而在肺结核或肺结节病患者的肺部疾病组织中分别为1.452±0.1168，1.166-1.738，P<0.0001和1.081±0.2102，0.5668-1.596，P＝0.0021。
BRCA1在肺腺癌(I，II，III或IV期)患者的肺部疾病组织中的阳性率(均值差及95％置信区间)为41.11％(32.27％～49.94％)，P<0.0001(one-way ANOVA)；而在肺结核或肺结节病患者的肺部疾病组织中的表达量则分别为5.123％(-4.058％～14.30％)，P＝0.4445和3.327％(-6.351％～13.00％)，P＝0.7898，并无显著性差异。
与正常肺组织对照相比，PCNA在肺腺癌(I，II，III或IV期)患者的肺部疾病组织中的的阳性率(均值差及95％置信区间)为37.13％(27.20％～47.05％)，P<0.0001(one-wayANOVA)；而在肺结核或肺结节病患者的肺部疾病组织中分别为6.585％(-3.730％～16.90％)，P＝0.2818和4.619％(-6.254％～15.49％)，P＝0.5893，并无显著性差异。
实施例4肺腺癌检测试剂盒的制备及使用
采用已有的抗PCNA蛋白或抗BRCA1蛋白的抗体，或通过常规技术制备与PCNA蛋白或BRCA1蛋白特异性结合的单克隆抗体或多克隆抗体。
试剂盒含有：可检测信号分子以及可以结合可检测信号分子的检测抗体，用于识别特异性检测PCNA蛋白或BRCA1蛋白的单克隆或多克隆抗体，以及与检测抗体及信号分子反应的反应物；所述可检测分子可以选择本领域的通用化学物质，例如；辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶、β-D-半乳糖苷酶、脲酶、吖啶酯、鲁米诺；根据不同的可检测分子的特性选择适合的反应物，例如与辣根过氧化酶反应的邻苯二胺(OPD)、四甲基联苯胺(TMB)、鲁米诺，与碱性磷酸酶反应的对硝基苯磷酸酯(p-NPP)，与钌复合物反应的三丙胺等。
可选地，还可以包括：无水乙醇，二甲苯，EDTA(pH8.0)抗原修复液，PBS缓冲液，3％双氧水，BSA，苏木素染液，苏木素分化液，苏木素返蓝液，中性树胶，PCNA或BRCA1(一抗)，HRP山羊抗小鼠(二抗)，DAB显色剂。
试剂盒的使用方法为：(1)应用试剂盒检测受试者肺组织样本中PCNA蛋白和/或BRCA1蛋白的表达水平；(2)分析PCNA蛋白和/或BRCA1蛋白的表达水平，确定可能的疾病状态：如果BRCA1蛋白的表达量高于对照11.69倍以上，可以为受试者提示肺腺癌的发生；如果PCNA蛋白的表达量高于对照10.04倍以上，可以为受试者提示肺腺癌的发生。
虽然本发明已以较佳实施例公开如上，但其并非用以限定本发明，任何熟悉此技术的人，在不脱离本发明的精神和范围内，都可做各种的改动与修饰，因此本发明的保护范围应该以权利要求书所界定的为准。
SEQUENCE LISTING
<110> 中国科学院微生物研究所
<120> 肺结核、肺腺癌标志物及应用
<160> 3
<170> PatentIn version 3.3
<210> 1
<211> 467
<212> PRT
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260

Claims (10)

1.肺结核的检测产品，其特征在于，含有MMP8蛋白的检测试剂。
2.根据权利要求1所述的检测产品，所述MMP8蛋白的检测试剂用于MMP8蛋白的定量检测；所述检测试剂包括但不限于抗MMP8蛋白抗体。
3.根据权利要求1或2所述的检测产品，其特征在于，所述MMP8蛋白的氨基酸序列包括如以下(a)或(b)所示：
(a)SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有相同抗原性的由(a)衍生的多肽或其类似物。
4.特异性与MMP8蛋白结合的抗体或抗原结合片段在制备辅助诊断结核病或检测结核病存在的产品，或用以选择用于减少患者发生结核病风险的试剂，或体外识别用于治疗结核病的候选试剂，或用于评价患者在使用用于减少结核病风险的试剂进行治疗中获益的可能性，或用于评价患者在减少结核病风险的抗体或抗原结合片段进行治疗中获益可能性方面的应用。
5.肺腺癌的检测产品，其特征在于，含有BRCA1和/或PCNA蛋白的检测试剂。
6.根据权利要求5所述的检测产品，其特征在于，所述BRCA1蛋白含有如以下(a)或(b)所示的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有相同抗原性的由(a)衍生的多肽或其类似物。
7.根据权利要求5所述的检测产品，其特征在于，所述PCNA蛋白含有如以下(a)或(b)所示的氨基酸序列：
(a)SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；
(b)在(a)中的氨基酸序列经过取代、缺失或添加部分氨基酸且具有相同抗原性的由(a)衍生的多肽或其类似物。
8.特异性扩增BRCA1或PCNA的基因片段，或分别与BRCA1或PCNA结合的抗体在单独或组合用于(a)～(f)任一方面的应用；
(a)制备辅助诊断肺腺癌的产品；
(b)制备检测肺腺癌存在的产品；
(c)选择用于减少患者发生肺腺癌风险的试剂；
(d)体外识别用于治疗肺腺癌的候选试剂；
(e)评价患者在使用用于减少肺腺癌风险的试剂进行治疗中获益的可能性；
(f)评价患者在减少肺腺癌风险的抗体或抗原结合片段进行治疗中获益可能性。
9.根据权利要求1～3,5～7任一所述的检测产品，其特征在于，所述检测产品为芯片、试剂盒、试纸或高通量测序平台；
可选地，所述检测产品中包含能够特异性扩增标志物基因的引物和/或探针，或者能够特异性结合标志物蛋白的抗体。
10.根据权利要求1～3,5～7任一所述的检测产品，其特征在于，所述试剂盒含有(a)～(e)中的至少一种：
(a)与所述标志物结合的抗体；
(b)通用试剂和缓冲液；
(c)酶联标记的二抗；
(d)标志物蛋白的对照品；
(e)检测标记。
CN202010349875.8A 2020-04-28 2020-04-28 肺结核标志物及应用 Active CN111879940B (zh)

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CN202010349875.8A CN111879940B (zh) 2020-04-28 2020-04-28 肺结核标志物及应用

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