CN111848607B

CN111848607B - 一种新型bcl-2/bcl-xl抑制剂、药物组合物及用途

Info

Publication number: CN111848607B
Application number: CN202010713725.0A
Authority: CN
Inventors: 陈永恒; 周文强; 邓泽平; 成佳; 蒋江平
Original assignee: Changsha Innovation Pharmaceutical Industrial Technology Research Institute Co ltd
Current assignee: Changsha Innovation Pharmaceutical Industrial Technology Research Institute Co ltd
Priority date: 2020-07-22
Filing date: 2020-07-22
Publication date: 2023-03-17
Anticipated expiration: 2040-07-22
Also published as: CN111848607A

Abstract

本发明涉及一种抑制Bcl‑2/BCL‑XL抗凋亡蛋白的活性的化合物、含有该化合物的组合物及其作为合成药物的用途，特别是作为用于合成Bcl‑2/BCL‑XL抗凋亡蛋白抑制剂的药物的用途和用于癌症的用途。

Description

一种新型BCL-2/BCL-XL抑制剂、药物组合物及用途

技术领域

本发明涉及抑制肿瘤化合物，尤其涉及一种抑制Bcl-2/BCL-XL抗凋亡蛋白的活性的化合物、含有该化合物的组合物及其作为合成药物的用途，特别是作为用于合成Bcl-2/BCL-XL抗凋亡蛋白抑制剂的药物的用途和用于癌症的用途。

背景技术

BCL-2抗凋亡蛋白是bcl-2原癌基因的编码产物，是细胞存活促进因子，属膜整合蛋白，分子量为26kDa,定位于线粒体、内质网和连续的核周膜,在胚胎组织中广泛表达。BCL-2抗凋亡蛋白与许多疾病有关。在治疗领域还需要可抑制BCL-2 抗凋亡蛋白的活性的化合物。

BCL-XL也是BCL-2家族一员，作为抗凋亡蛋白，在多种癌细胞中过度表达，是一个具有明确效果的抗肿瘤治疗靶点。

在各种癌症和免疫系统的病症中，BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白的超表达与对化疗的耐受性、临床结果、疾病发展、总体预后或其组合有关。

BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白与膀胱癌、脑癌症、乳腺癌、骨髓癌、宫颈癌、慢性淋巴细胞性白血病、结肠直肠癌、食道癌、肝细胞癌、原始淋巴细胞性 (lymphoblastic)白血病、滤泡性淋巴瘤，T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑素瘤、粒细胞性白血病、骨髓瘤、口腔癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌、脾癌等等的相关性描述在美国专利US2004/36770(公开为WO 2005/049593)和PCT US 2004/37911(公开为WO 2005/024636)中。

BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白在免疫和自身免疫疾病中的相关性描述在下列中：Current Allergy和Asthma Reports 2003,3,378-384；British Journal of Haematology2000,110(3),584-90；Blood 2000,95(4),1283-92；和New England Journal of Medicine2004,351(14),1409-1418。BCL-2抗凋亡蛋白与关节炎的相关性公开在美国临时专利申请系列60/988,479中。BCL-2抗凋亡蛋白与骨髓移植排斥的相关性公开在美国专利申请系列11/941,196中。

在癌症的治疗中，癌细胞可以利用促生存蛋白BCL-2/BCL-XL来抑制传统化疗的治疗效应，这经常让临床医生头疼不已。也正是因为癌细胞可以利用促生存蛋白BCL-2/BCL-XL来抑制传统化疗的治疗效应，这使得临床治疗医生不得不一再的增大药物剂量，并由此导致了如恶心、脱发等化疗副作用。

本发明的目的在于提供一种能够抑制Bcl-2/BCL-XL抗凋亡蛋白的活性的化合物。

发明内容

本发明提供一种抑制Bcl-2/BCL-XL抗凋亡蛋白活性的化合物和含有该化合物的组合物，可以用于治疗与BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白抑制剂相关的疾病。

本发明化合物具有较好的药理学特性、成药可能性和改善生产成本或者可行性的因素，如合成的难度、化学稳定性以及操作的简便性。

本发明提供了一种新的BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白抑制剂的方案，其具体方案为：一方面，具有如下结构所示的化合物：

或其可药用盐。

另一方面，本发明还提供了一种药物组合物，包含上述化合物。

另一方面，该药物组合物包括药学上可接受的赋形剂、载体、辅剂、媒介物或它们的任意组合。

另一方面，该药物组合物为通过口服方式给药或注射给药。

另一方面，本发明提供了前述抑制剂或者药物组合物在制备用于预防或治疗癌症中的用途。

另一方面，本发明所述的癌症包括膀胱癌、脑癌、乳腺癌、骨髓癌、宫颈癌、慢性淋巴细胞性白血病、结肠直肠癌、食道癌、肝细胞癌、原始淋巴细胞性 lymphoblastic白血病、滤泡性淋巴瘤，T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑素瘤、粒细胞性白血病、骨髓瘤、口腔癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌或脾癌。

除非其他方面表明，本发明的化合物所有的立体异构体，几何异构体，互变异构体，氮氧化物，水合物，溶剂化物，代谢产物，盐和药学上可接受的前药都属于本发明的范围。

如果本发明的化合物是碱性的，则想得到的盐可以通过文献上提供的任何合适的方法合成得到，例如，使用无机酸，如盐酸，氢溴酸，硫酸，硝酸和磷酸等等。或者使用有机酸，如乙酸，马来酸，琥珀酸，扁桃酸，富马酸，丙二酸，丙酮酸，草酸，羟乙酸和水杨酸；吡喃糖酸，如葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸；α-羟酸，如柠檬酸和酒石酸；氨基酸，如天门冬氨酸和谷氨酸；芳香族酸，如苯甲酸和肉桂酸；磺酸，如对甲苯磺酸，乙磺酸，等等。

如果本发明的化合物是酸性的，则想得到的盐可以通过合适的方法合成得到，如，使用无机碱或有机碱，如氨(伯氨，仲氨，叔氨)，碱金属氢氧化物或碱土金属氢氧化物，等等。合适的盐包括，但并不限于，从氨基酸得到的有机盐，如甘氨酸和精氨酸，氨，如伯氨、仲氨和叔氨，和环状氨，如哌啶，吗啉和哌嗪等，和从钠，钙，钾，镁，锰，铁，铜，锌，铝和锂得到无机盐。

另一方面，本发明涉及式(I)、(II)或(III)所示的化合物的合成、分离和纯化的方法。

在实施方案中，所述化合物与BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白有强的亲和力，可抑制BCL-2/BCL-XL抗凋亡蛋白的活性。

前面所述内容只概述了本发明的某些方面，但并不限于这些方面。这些方面及其他方面的内容将在下面作更加具体完整的描述。

附图说明

图1为中间体化合物1a的核磁图谱；

图2为中间体化合物3a的核磁图谱；

图3为中间体化合物4a的核磁图谱；

图4为中间体化合物5a的核磁图谱；

图5为中间体化合物7a的核磁图谱；

图6为中间体化合物8a的核磁图谱；

图7为中间体化合物9a的核磁图谱；

图8为化合物I的核磁图谱；

图9为化合物II的核磁图谱；

图10为化合物III的核磁图谱；

图11为化合物IV的核磁图谱；

图12为化合物V的核磁图谱；

图13为化合物VI的核磁图谱。

具体实施方式

本发明化合物的各种药学上可接受的盐形式都是有用的。术语“药学上可接受的盐”是指那些盐形式对于制药化学家而言是显而易见的，即它们基本上无毒并能提供所需的药代动力学性质、适口性、吸收、分布、代谢或排泄。其他因素，在性质上更加实用，对于选择也很重要，这些是：原材料的成本、结晶的容易、收率、稳定性、吸湿性和结果原料药的流动性。简单地讲，药物组合物可以通过有效成分与药学上可接受的载体合成得到。

本文所用的术语"Bcl-2/Bcl-xL"意指Bcl-2、Bcl-xL、或Bcl-2和Bcl-xL，即Bcl-2和 /或Bcl-xL。

另外，本发明公开的化合物、包括它们的盐，也可以以它们的水合物形式或包含其溶剂(例如乙醇、DMSO，等等)的形式得到，用于它们的结晶。本发明公开化合物可以与药学上可接受的溶剂(包括水)固有地或通过设计形成溶剂化物；因此，本发明旨在包括溶剂化的和未溶剂化的形式。

本发明化合物可以药物组合物的形式使用，其中包含治疗有效量的本文所限定的本发明化合物和可药用载体或赋形剂。

像本发明所描述的，本发明药学上可接受的组合物进一步包含药学上可接受的赋形剂，这些像本发明所应用的，包括任何溶剂，稀释剂，或其他液体赋形剂，分散剂或悬浮剂，表面活性剂，等渗剂，增稠剂，乳化剂，防腐剂，固体粘合剂或润滑剂，等等，适合于特有的目标剂型。除了任何常规的赋形剂与本发明的化合物不相容的范围，例如所产生的任何不良的生物效应或与药学上可接受的组合物的任何其他组分以有害的方式产生的相互作用，它们的用途也是本发明所考虑的范围。

可以调节根据本发明的药物组合物的形式，以适于用多种给药途径向需要治疗的患者例如哺乳动物如人患者给药，例如口服给药、鼻内给药、腹膜内给药、或非消化道给药、通过静脉内、肌内、局部或皮下路径给药、或通过注射入组织给药。这种组合物和制剂应该包含至少0.01％的一种或多种本发明化合物。组合物和制剂的百分数当然可以变化和可以例如是给定单元剂型的约0.05％至约2％重量。化合物在这种治疗有用的组合物中的量使得获得有效的剂量水平。

实施例1

化合物(I)的合成

合成流程如反应路线1所示

参考现有技术中参考文献(《BCL-2选择性抑制剂--ABT-199的合成工艺改进》许云雷等，“合成化学”，第23卷第11期，1063-1067)的相关中间体5a和中间体9a的合成。中间体1a，3a，4a，5a，7a，8a，9a均可参考现有技术参考文献 (《BCL-2选择性抑制剂--ABT-199的合成工艺改进》许云雷等，“合成化学”，第 23卷第11期，1063-1067)合成。

中间体化合物1a的合成

在安装了磁搅拌器、冷凝器和惰性气体源的圆底烧瓶中加入氢化钠333g(832mmol)，碳酸二甲酯186g(2.06mol)和四氢呋喃880mL，搅拌溶解；于(60℃) 滴加原料化合物0a39g(396mmol)的四氢呋喃440mL溶液，滴加完毕之后，反应2h(TLC监测)。倒入饱和氯化铵(1L)中，猝灭反应，用乙酸乙酯(2x400mL) 萃取,合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩到淡棕色液体2-氧环己烷羧酸甲脂(A)57g，粗品收率100％。

在圆底烧瓶中加入氢化钠44.4g(110mmol)和二氯甲烷181mL，搅拌下于0℃滴加A7.83g(54.3mmol)，滴毕，反应30min。于-78℃滴加三氟甲磺酸酐17.4g (61.8mmol)，滴毕，于室温反应两小时(TLC监测)。倒入冰水150mL中淬灭反应，用二氯甲烷(2x150mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得淡棕色液体2-{[(三氟甲基)磺酰基]氧}环己-1-烯羧酸甲脂(1a，其核磁见附图1)15.49g，收率99％。LCMS[M+H]:289.0。

¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ3.61(s,3H),2.91(t,2H),2.33(t,2H),1.74(m,2H), 1.62(m,2H).

中间体化合物3a的合成

在安装了磁搅拌器和惰性气体源的圆底烧瓶中加入化合物(1a)73g (253mmol)、二氧六环1.26L，醋酸钾99.3g，4-氯苯硼酸43.5g(278mmol)和二(三苯基磷)二氯化钯9.25g，搅拌。升温至100℃，反应24h。TLC监测反应终点。

冷却至室温，过滤，滤液用乙酸乙酯(2x400mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析(洗脱剂：二氯甲烷)纯化得到淡棕色液体4’-氯-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-羧酸甲脂(3a) 51.3g，收率81％(其核磁见附图2)；LCMS[M+H]:251.0。¹H NMR(400MHz, Chloroform)δ7.65(d,2H),7.49(d,2H),3.61(s,3H),2.45(t,2H),2.33(t,2H),1.74 (m,2H),1.61(m,2H).

中间体化合物4a的合成

在安装了磁搅拌器、冷凝器和惰性气体源的圆底烧瓶中加入四氢铝锂680mg(21mmol)，乙醚32mL,搅拌溶解；于(60℃)滴加原料化合物(3a)1.8g (7.18mmol)的乙醚40mL溶液，滴加完毕之后，反应1h(TLC监测)。倒入冰水100mL中猝灭反应，用2mol/L的盐酸调至pH＝6,用乙酸乙酯(2x40mL)萃取, 合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩到淡黄色固体 4’-氯-3,4,5,6-四氢-[1,1’-联苯]-2-甲基甲醇(B)1.57g，收率94％。

在反应瓶中加依次加入B8.9g(39.8mmol)和二氯甲烷160mL和三乙胺8.8g，搅拌下于0℃滴加甲基磺酰氯5.0g(43.87mmol)，滴毕，反应10min。于室温反应2h(TLC追踪)。倒入水100mL中淬灭反应，用1mol/L盐酸调至pH6，有机相依次用饱和碳酸氢钠100mL和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物经硅胶柱层析(洗脱剂：二氯甲烷)纯化得到淡黄色固(4a，其核磁见附图3)7.84g，收率88.5％。LCMS[M+H]:223.1。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.16-7.14 (d,J＝7.5,2H),7.07-7.04(d,J＝7.8Hz,2H),3.96(s,2H),2.28(bs,4H),1.74(bs,4H).

中间体化合物5a的合成

在反应瓶中依次加入化合物(4a)8.86g(39.8mmol)、二氯甲烷160mL和三乙胺8.8g，搅拌下于0℃滴加甲基磺酰氯5g(43.87mmol)，滴毕，反应10min。于室温下反应2h，TLC监控反应终点。将反应液倒入水100mL中淬灭反应，用 1mol/L盐酸调至pH＝6，有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液100mL和饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残留物经硅胶柱层析(洗脱剂：二氯甲烷)纯化得到淡黄色固体(5a，其核磁见附图4)8.54g，收率89.0％。质谱 LCMS[M+H]:242.1。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ7.22-7.18(d,J＝8.0,2H),7.12-7.09(d,J＝12.2Hz,2H),4.01(s,2H),2.33(s,3H),2.27(bs,4H),1.72(bs,4H).

中间体化合物7a的合成

在安装了磁搅拌器、惰性气体源和恒压滴液漏斗的圆底烧瓶中加入5-溴-7- 氮杂吲哚10.0g(50.8mmol)和四氢呋喃162mL，搅拌溶解；依次滴加1mol/L 双(三甲基硅基)氨基锂的THF溶液55.8mL和三异丙基氯硅烷11.8mL，滴毕，于室温下反应1.5h，TLC监控反应终点。将反应液倒入冰水150mL中淬灭反应，用乙酸乙酯(2x150mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，加入甲醇20mL，搅拌0.5h，过滤得白色固体5-溴-1-三异丙基硅基-7-氮杂吲哚(化合物7a，其核磁见附图5)16.52g，收率92％；质谱 LCMS[M+H]:255.1。¹H NMR(400MHz,CDCl3):δ8.32(s,1H),8.03(d,1H),7.35(d,1H),6.54(d,1H),1.88(m,3H),1.16(d,18H).

中间体化合物8a的合成

在安装了磁搅拌器、惰性气体源和恒压滴液漏斗的圆底烧瓶中加入四氢呋喃600mL和化合物7a70.68g(0.2mol)，反应体系用惰性气体置换三次，用液氮降温至-80℃，从恒压滴液漏斗中滴加正丁基锂80mL(0.2mol,0.4M)，控制滴加速度使反应液温度在-80℃以下，滴加完毕后继续反应0.5h。滴加硼酸三甲酯37g (0.2mol)至反应液中，升至室温反应12h。TLC监测反应。反应结束后,用饱和氯化铵水溶液150mL淬灭，用2mol/L的盐酸调节pH＝4，再用二氯甲烷(3×200mL) 萃取，合并有机层，浓缩得粗品。往粗品中加入乙酸乙酯，在0℃下搅拌1h，过滤，收集固体用石油醚/乙酸乙酯＝10/1重结晶，得到(化合物8a，其核磁见附图 6)51g,收率80％。质谱LCMS[M+H]:319.3。¹H NMR(400MHz,DMSO):δ8.58(s,1H),8.34(s,1H),8.06(s,2H),7.45(d,1H),6.63(d,1H),1.96–1.79(m,3H),1.10(d,18H).

中间体化合物9a的合成

在安装了磁搅拌器、惰性气体源和分液漏斗的圆底烧瓶中加入(化合物8a) 10.8g(34mmol)和四氢呋喃120mL，搅拌使其溶解；于0℃依次滴加入1mol/L 氢氧化钠溶液34mL和30％过氧化氢4.60g(40.6mmol)，加毕，于0℃反应1h， TLC检测反应；加硫代硫酸钠4.8g(20.24mmol)，用2mol/L盐酸调至pH＝5，用乙酸乙酯(2x200mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：二氯甲烷]纯化得到淡黄色固体 5-羟基-1-三异丙基硅基-7-氮杂吲哚-5-硼酸1-[三异丙基硅基]-7-氮杂吲哚-5-醇(化合物9a，其核磁见附图7)9.4g，收率95.0％；质谱LCMS[M+H]:291.2。

¹H NMR(400MHz,CDCl3)：δ8.00(d,1H),7.38(d,1H),7.33(d,1H),6.48(d,1H),4.89 (s,1H),1.87(m,3H),1.15(d,J＝7.5Hz,18H).

中间体化合物11a的合成

在安装了磁搅拌器和惰性气体源的圆底烧瓶中加入(化合物9a)8g(26mmol) 和(化合物10a)9.32g(26mmol)，然后加入碳酸铯16.9g(52mmol)，最后加入 N’N-二甲基甲酰胺100mL，惰性气体置换3次，于80℃反应8h。TLC监测反应。将反应液过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1]，将得到的化合物加入安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中，冰浴下再缓慢加入 30％HCl/CH₃OH溶液80mL，室温搅拌3h，TLC检测反应完全。过滤，滤饼用少量甲醇洗，滤干溶剂，再用乙醚洗涤，得到化合物11a，8.32g,收率86％。质谱LCMS[M+H]:373.1。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ:8.06(s,1H),7.58(t,J＝7.2Hz,1H),7.01(m,1H),6.44(m,1H),6.40(t,1H),3.99(S,1H),3.46(dd,J＝8.4,12.2Hz,4H),3.40(m,2H),2.82-2.78(d,J＝6.4Hz,3H),2.74-2.70(m,6H),2.01(S,1H)

化合物I的合成

在安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中加入含氢氧化钠0.8g(20mmol)的水溶液 50mL，再加入化合物11a3.72g(10mmol)和化合物5a2.44g(10mmol)，室温搅拌过夜，TLC监测反应。用二氯甲烷(2x100mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1]，得到(化合物I)4.62g，收率80％。其核磁见附图8。 LCMS[M+H]:577.2。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ8.29(d,1H),7.79(s,1H),7.64 (m,1H),7.42-7.46(m,3H),7.30(d,1H),7.18-7.21(m,2H),6.71(q,1H),6.64(q,1H), 6.57(d,1H),3.38(t,3H),3.31(s,3H),2.97(s,2H),2.55(t,4H),2.36(m,2H),2.28(m, 2H),1.61(m,4H).

实施例2化合物II的合成

合成流程如反应路线2所示

中间体化合物11a的合成参见实施例1.

化合物II的合成

在安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中加入含氢氧化钠0.8g(20mmol)的水溶液50mL，再加入化合物11a3.72g(10mmol)和化合物5b

2.55g (10mmol)，室温搅拌过夜，TLC监测反应。用二氯甲烷(2x100mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1]，得到(化合物II)4.72g，收率80％。其核磁见附图9。LCMS[M+H]:591.2。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ8.28(d,1H), 7.79(s,1H),7.59(m,1H),7.41-7.45(m,3H),7.27(d,1H),7.17-7.20(m,2H),6.61-6.65 (m,2H),6.56(d,1H),3.38(t,4H),3.30(d,5H),2.55(t,4H),2.31(s,2H),2.15(s,2H), 0.99(s,6H).

实施例3化合物III的合成

合成流程如反应路线3所示

中间体化合物11a的合成参见实施例1.

化合物III的合成

在安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中加入含氢氧化钠0.8g(20mmol)的水溶液50mL，再加入化合物11a3.72g(10mmol)和化合物5c

2.15g (10mmol)，室温搅拌过夜，TLC监测反应。用二氯甲烷(2x100mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1]，得到(化合物III)4.40g，收率80％。其核磁见附图10。LCMS[M+H]:551.2。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ8.29(d,1H), 7.81(s,1H),7.58(m,1H),7.41-7.46(m,3H),7.29(d,1H),7.18-7.21(m,2H),6.62-6.67 (m,2H),6.57(d,1H),3.38(t,4H),3.31(s,3H),2.93(s,2H),2.55(t,4H),2.12(s,3H), 1.66(s,3H).

实施例4化合物IV的合成

合成流程如反应路线4所示

中间体化合物9a的合成参见实施例1。

中间体化合物11d的合成

在安装了磁搅拌器和惰性气体源的圆底烧瓶中加入化合物9a8g(26mmol) 和化合物10d8.4g(26mmol)，然后加入碳酸铯16.9g(52mmol)，最后加入N’N- 二甲基甲酰胺100mL，惰性气体置换3次，于80℃反应8h。TLC监测反应。将反应液过滤，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1]，将得到的化合物加入安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中，冰浴下再缓慢加入 30％HCl/CH₃OH溶液80mL，室温搅拌3h，TLC检测反应完全。过滤，滤饼用少量甲醇洗，滤干溶剂，再用乙醚洗涤，得到化合物11d，7.42g，收率84.62％。质谱LCMS[M+H]:338.1。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ:8.11(s,1H),7.62(t,J＝6.8Hz,1H),7.06(m,1H),6.46-6.43(m,1H),6.38-6.35(t,1H),4.01(S,1H),3.48(dd,J＝8.2,10.6Hz,4H),3.42(m,2H),2.78-2.75(m,6H),1.92(s,1H).

化合物IV的合成

在安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中加入含氢氧化钠0.8g(20mmol)的水溶液 50mL，再加入化合物11d3.37(10mmol)和化合物5a2.41g(10mmol)，室温搅拌过夜，TLC监测反应。用二氯甲烷(2x100mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1]，得到(化合物IV)4.50g，收率83％。其核磁见附图11。 LCMS[M+H]:544.2。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ8.29(d,1H),7.81(s,1H),7.56 (d,1H),7.49(m,1H),7.41-7.46(m,2H),7.30(d,1H),7.17-7.22(m,2H),6.64(q,1H), 6.56(q,1H),6.40(d,1H),6.38(s,2H),3.38(t,4H),2.97(s,2H),2.55(t,4H),2.37(m, 2H),2.25(m,2H),1.61(m,4H).

实施例5化合物V的合成

合成流程如反应路线5所示

中间体化合物11d的合成参见实施例4。

化合物V的合成

在安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中加入含氢氧化钠0.8g(20mmol)的水溶液 50mL，再加入化合物11d3.37g(10mmol)和化合物5b2.55g(10mmol)，室温搅拌过夜，TLC监测反应。用二氯甲烷(2x100mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1]，得到(化合物IV)4.67g，收率84％。其核磁见附图12。 LCMS[M+H]:558.2。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ8.28(d,1H),7.81(s,1H),7.56 (d,1H),7.51(m,1H),7.41-7.45(m,2H),7.30(d,1H),7.17-7.21(m,2H),6.65(q,1H), 6.56(q,1H),6.40(s,3H),3.38(t,4H),3.30(s,2H),2.55(t,4H),2.31(s,2H),2.15(s, 2H),0.99(s,6H).

实施例6化合物VI的合成

合成流程如反应路线6所示

中间体化合物11d的合成参见实施例4。

化合物VI的合成

在安装了磁搅拌器的圆底烧瓶中加入含氢氧化钠0.8g(20mmol)的水溶液50mL，再加入化合物11d3.37g(10mmol)和化合物5c2.15g(10mmol)，室温搅拌过夜，TLC监测反应。用二氯甲烷(2x100mL)萃取，合并有机相，依次用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，减压浓缩，残余物经硅胶柱层析[洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1]，得到(化合物VI)4.23g，收率82％。其核磁见附图13。 LCMS[M+H]:518.2。¹H NMR(400MHz,Chloroform)δ8.29(d,1H),7.86(s,1H), 7.54-7.57(m,2H),7.41-7.46(m,2H),7.37(d,1H),7.17-7.22(m,2H),6.95(q,1H), 6.56(q,1H),6.40(s,3H),3.38(t,4H),2.97(s,2H),2.55(t,4H),2.12(s,3H),1.66(s, 3H).

实施例7各化合物相对分子质量(分子量)和脂水分配系数(logp)数值

在药物研究领域，里宾斯基五规则(Lipinski's“rule of 5”)可以用来预测口服吸收或渗透的效果，普遍认为当满足以下两个或两个以上的条件时可以认为口服吸收或渗透效果并不理想：1)具有超过5个氢键供体；2)分子量为大于500；3) 具有大于10个氢键受体；4)计算的Log P(cLogP)大于5；5)可旋转键的数量不超过10个。

根据计算，ABT-199(Venetoclax)和化合物I到化合物VI的分子量如下表1 所示：

化合物	ABT-199	化合物I	化合物II	化合物III	化合物IV	化合物V	化合物VI
								分子量	867	577	591	551	542	556	516

表1

根据计算，ABT-199(Venetoclax)和化合物I到化合物VI的logP数值如下

表2所示：

化合物	ABT-199	化合物I	化合物II	化合物III	化合物IV	化合物V	化合物VI
								LogP	8.03	5.99	6.36	5.71	5.79	6.15	5.51

表2

本申请提供的化合物I到化合物VI的分子量都在600以下，化合物I、III、IV、 VI的LogP也在6以下，明显优于已经上市的口服Bcl-2抑制剂药物ABT-199 (Venetoclax)，特别是化合物VI、化合物III和化合物IV。

实施例8生物学特性

BCL-2/BCL-XL抑制剂与BCL-2和BCL-XL的结合实验

采用PolarScreenTM Androgen Receptor(AR)Competitor Assay,Green试剂盒(美国life technologies公司)检测BCL-2/BCL-XL抑制剂与BCL-2和BCL-XL的亲和力。实验原理是BCL-2或BCL-XL与小分子荧光酮示踪剂(Fluormone Tracer)相结合，加入抑制剂会竞争性地结合BCL-2或BCL-XL从而替换出荧光酮示踪剂，替换出的荧光酮示踪剂会发生荧光偏振，荧光偏振值与替换出示踪剂数量成反比。

具体过程如下：将药物用DMSO溶解成500uM，然后在96孔板中两倍稀释浓度梯度至244nM，在384孔板中配置反应体系BCL-2和BCL-XL+Tracer 10uL加入10uL药物，锡箔纸包裹384孔板避光孵育6小时后在多功能酶标仪上读取荧光偏振值，读数如下表所示。

化合物	BCL-XL(nM)	BCL-2(nM)
			I	50	48
II	75	66
			III	30	35
IV	53	50
			V	65	68
VI	48	42

表3

从图1中可以看出，合成的药物均可不同程度地与BCL-2和BCL-XL结合，对 BCL-2和BCL-XL均有抑制作用，抑制作用从高到低一次为化合物III>化合物VI> 化合物I>化合物IV>化合物V>化合物II。

综上所述，合成的药物实验效果最好的是III号化合物，其次是VI号化合物，再是IV号化合物。提示该III号化合物合成的药物可能具有更好的疗效和更低的副作用。

Claims

1.一种BCL-2/BCL-XL抑制剂，其为如下结构所示的化合物：

或其可药用盐。

2.一种药物组合物，其包含权利要求1所述的化合物。

3.根据权利要求2所述的药物组合物，其进一步包括药学上可接受的赋形剂、载体、辅剂、媒介物或它们的任意组合。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其中该药物组合物为通过口服给药或注射给药。

5.根据权利要求1所述的BCL-2/BCL-XL抑制剂或权利要求2-4任一项所述的药物组合物在制备药物中的用途，所述药物用于预防或治疗癌症。

6.根据权利要求5所述的用途，其中所述癌症为膀胱癌、脑癌、乳腺癌、骨髓癌、宫颈癌、慢性淋巴细胞性白血病、结肠直肠癌、食道癌、肝细胞癌、原始淋巴细胞性lymphoblastic白血病、滤泡性淋巴瘤，T细胞或B细胞源的淋巴恶性肿瘤、黑素瘤、粒细胞性白血病、骨髓瘤、口腔癌、卵巢癌、非小细胞肺癌、前列腺癌、小细胞肺癌或脾癌。