CN111795964B - 一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，包括(1)分别向比色管中加入3,3',5,5'‑四甲基联苯胺溶液、含Fe³⁺的溶液后，迅速加入缓冲溶液，将所得体系置于水浴中反应；(2)再分别向体系中加入缓冲溶液和不同浓度的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于水浴中反应，测定500‑700nm波长处吸光度，并得到吸光度差值ΔA；(3)绘制标准曲线；向化妆品中加入水超声提取后得到澄清上层清液；分别向步骤(1)所得体系中加入缓冲溶液和上层清液，将所得体系置于水浴中反应，再测定500‑700nm波长处的吸光度，得到吸光度差值ΔA’，将ΔA’代入标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸含量。

Description

一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法

技术领域

本发明涉及一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，属于化妆品检测技术领域。

背景技术

辛酰羟肟酸(C₈H₁₇NO₂，CAS 7377-03-9)，又称辛基羟肟酸、辛酰异羟肟酸或N-羟基正辛酰胺，是一种对金属离子具有高效选择性的螯合剂。辛酰羟肟酸具有强的抑制真菌作用，其抑菌原理是基于辛酰羟肟酸对Fe³⁺具有高效选择性螯合作用。铁是微生物生长的关键元素，辛酰羟肟酸作为螯合剂能从环境中捕获Fe³⁺形成螯合物，且螯合物稳定常数高，因此可以防止霉菌获得铁元素，使霉菌的生长受限。而且辛酰羟肟酸在pH为中性时依然有效，因而是抑菌的理想有机酸。由于辛酰羟肟酸不在《化妆品安全技术规范》(2015年版)的防腐剂列表中，但其却具有良好的防腐性能，所以越来越多化妆品生产商把其当作防腐剂添加到化妆品中，同时宣称其产品“不含防腐剂”，以达到宣传效果，因为无添加防腐剂的化妆品更受消费者青睐。目前全球已有3000多种化妆品使用辛酰羟肟酸。根据最新的《国际化妆品原料字典和手册》，辛酰羟肟酸被认为是螯合剂在化妆品中使用。在CFDA发布的已使用化妆品原料名称目录(2015版)中，辛酰羟肟酸的原料序号为07218，可用于国产非特殊用途化妆品中，无使用限制说明。但在国产特殊用途化妆品以及进口化妆品中，凡是用到该成分的，则需提供安全性评价资料。

目前我国尚未制定化妆品中辛酰羟肟酸的限量值和检测的标准方法，仅有少量文献报道采用高效液相色谱法测定化妆品中辛酰羟肟酸。高效液相色谱法中，采用有机溶剂对辛酰羟肟酸进行提取，C18色谱柱分离。由于辛酰羟肟酸具有弱的紫外吸收，因此一般采用二极管阵列检测器进行检测。该方法需要借助大型设备，操作时间过长且需要熟练的实验技术人员。因此，建立操作简便、灵敏可靠、绿色环保、成本低廉的方法用于化妆品中辛酰羟肟酸的检测十分必要。

3,3',5,5'-四甲基联苯胺(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine,以下用TMB表示)是一种新型安全的还原试剂，已逐步取代强致癌物联苯胺和其他致癌性的联苯胺衍生物，应用于临床化验、法医检验、刑事侦破及环境监测领域，迄今为止，该试剂在化妆品检测领域的应用尚未见报导。

因此，提供一种新型的基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法已经成为本领域亟需解决的技术问题。

发明内容

为了解决上述的缺点和不足，本发明的目的在于提供一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法。

为了实现以上目的，本发明提供了一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其中，所述方法包括：

绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线：

(1)分别向比色管中加入3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液、含Fe³⁺的溶液后，迅速加入缓冲溶液，将所得体系置于水浴中反应一段时间；

(2)分别向步骤(1)所得体系中加入缓冲溶液和一系列不同浓度的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于水浴中反应一段时间，再测定500-700nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA；

其中，ΔA＝A₀-A，A₀为加入缓冲溶液的体系的吸光度，A为加入辛酰羟肟酸溶液的体系的吸光度；

(3)以吸光度差值ΔA为纵坐标，辛酰羟肟酸浓度为横坐标，绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线；

提取化妆品中辛酰羟肟酸：

向化妆品中加入适量水，对所得体系进行超声提取，再经离心处理后，得到澄清上层清液；

待测样品检测：

分别向步骤(1)所得体系中加入缓冲溶液和澄清上层清液，将所得体系置于水浴中反应一段时间，再测定500-700nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA’，再将所述吸光度差值ΔA’代入所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量；

其中，ΔA’＝A₀-A’，A₀为加入缓冲溶液的体系的吸光度，A’为加入澄清上层清液的体系的吸光度。

在以上所述的方法中，优选地，所述绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线，具体包括：

(1)分别向比色管中加入相同体积的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液、含Fe³⁺的溶液后，迅速加入缓冲溶液，将所得体系置于水浴中反应一段时间至体系吸光度稳定；

(2)分别向步骤(1)所得体系中加入相同体积的缓冲溶液和一系列不同浓度的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于水浴中反应一段时间，再测定500-700nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA；

其中，ΔA＝A₀-A，A₀为加入缓冲溶液的体系的吸光度，A为加入辛酰羟肟酸溶液的体系的吸光度；

(3)以吸光度差值ΔA为纵坐标，辛酰羟肟酸浓度为横坐标，绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线。

在以上所述的方法中，优选地，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA。其中，体系在656nm波长处的吸收最强，灵敏度最高。

在以上所述的方法中，所述绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线，具体包括：

(1)分别向比色管中加入浓度为0.8mmol/L的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液500μL、浓度为0.5mmol/L的Fe³⁺溶液500μL后，迅速加入1.5mL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，将所得体系置于40℃水浴中反应7min；

(2)分别向步骤(1)所得体系中加入500μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500μL一系列不同浓度的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于40℃水浴中反应5min，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA；

其中，ΔA＝A₀-A，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A为加入辛酰羟肟酸溶液的体系的吸光度；

(3)以吸光度差值ΔA为纵坐标，辛酰羟肟酸浓度为横坐标，绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线。

在以上所述的方法中，优选地，所述含Fe³⁺的溶液包括FeCl₃水溶液、Fe₂(SO₄)₃水溶液、Fe(NO₃)₃水溶液中的任一种。

在以上所述的方法中，优选地，向化妆品中加入适量水，对所得体系进行超声提取，再经离心处理后，得到澄清上层清液，包括：

向0.5g化妆品中加入水并定容至10mL，对所得体系进行超声提取，再经离心处理后，得到澄清上层清液。

在以上所述的方法中，优选地，所述待测样品检测，具体包括：

分别向步骤(1)所得体系中加入相同体积的缓冲溶液和澄清上层清液，将所得体系置于水浴中反应一段时间，再测定500-700nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA’，再将所述吸光度差值ΔA’代入所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量；

其中，ΔA’＝A₀-A’，A₀为加入缓冲溶液的体系的吸光度，A’为加入澄清上层清液的体系的吸光度。

在以上所述的方法中，优选地，优选地，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA’。其中，体系在656nm波长处的吸收最强，灵敏度最高。

在以上所述的方法中，优选地，所述缓冲溶液的浓度为20mmol/L，pH值为3.8。

在以上所述的方法中，优选地，所述缓冲溶液包括乙酸-乙酸钠缓冲溶液或者Tris-HCl缓冲溶液。

在以上所述的方法中，优选地，所述缓冲溶液为乙酸-乙酸钠缓冲溶液。

在以上所述的方法中，所述待测样品检测，具体包括：

分别向步骤(1)所得体系中加入500μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500μL的澄清上层清液，将所得体系置于40℃水浴中反应5min，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA’，再将所述吸光度差值ΔA’代入所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量；

其中，ΔA’＝A₀-A’，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A’为加入澄清上层清液的体系的吸光度。

优选地，所述方法还包括根据以下公式1)计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量：

公式1)中，W为化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量，单位为mg/kg；C为根据所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量，单位为mmol/L；159.23为辛酰羟肟酸的分子量；V为向化妆品中加入适量水后的定容体积，单位为L；m为所称取化妆品的质量，单位为kg。

优选地，所述方法具体包括：

(1)分别向比色管中加入浓度为0.8mmol/L的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液500μL、浓度为0.5mmol/L的含Fe³⁺的溶液500μL后，迅速加入1.5mL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，将所得体系置于40℃水浴中反应7min；

(2)分别向步骤(1)所得体系中加入500μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500μL一系列不同浓度的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于40℃水浴中反应5min，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA；

其中，ΔA＝A₀-A，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A为加入辛酰羟肟酸溶液的体系的吸光度；

(3)以吸光度差值ΔA为纵坐标，辛酰羟肟酸浓度为横坐标，绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线；

(4)向0.5g化妆品中加入水并定容至10mL，对所得体系进行超声提取，再经离心处理后，得到澄清上层清液；

(5)分别向步骤(1)所得体系中加入500μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500μL的澄清上层清液，将所得体系置于40℃水浴中反应5min，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA’，再将所述吸光度差值ΔA’代入所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量；

其中，ΔA’＝A₀-A’，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A’为加入澄清上层清液的体系的吸光度。

优选地，所述方法还包括根据以下公式1)计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量：

公式1)中，W为化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量，单位为mg/kg；C为根据所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量，单位为mmol/L；159.23为辛酰羟肟酸的分子量；V为向化妆品中加入适量水后的定容体积，单位为L；m为所称取化妆品的质量，单位为kg。

在以上所述的方法中，优选地，所述化妆品包括化妆水、爽肤水、防晒喷雾、面膜、乳液或面霜。

本发明所提供的方法的原理为：以3,3',5,5'-四甲基联苯胺作为显色剂，Fe³⁺在酸性条件下催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺诱导显现蓝色，加入的辛酰羟肟酸能够与Fe³⁺产生强螯合作用，引起竞争反应，最终引起褪色反应导致显色体系的蓝色褪去，且体系在656nm波长处吸光度的变化与辛酰羟肟酸浓度具有线性关系，由此建立了基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法。

在本发明所提供的基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法中，3,3',5,5'-四甲基联苯胺与Fe(III)接触后反应，在40℃水浴中7分钟即可产生明显的蓝色，测定656nm处的吸光度；加入辛酰羟肟酸溶液后，由于辛酰羟肟酸与Fe³⁺螯合，导致体系颜色发生褪色，溶液体系在656nm处吸光度降低。利用该反应的特点实现辛酰羟肟酸的检测，本发明所提供的基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法的检出限为0.02mmol/L，即最低可检测出化妆品中0.006％的辛酰羟肟酸。

定量检测时，化妆品样品中加入水超声离心后，上清液即可加入体系中进行检测。

经干扰试验验证，化妆品中存在的其他类型防腐剂等对检测没有干扰，并且该方法所用3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色剂对人体无毒害，对环境无危害。

综上，本发明所提供的该方法前处理过程简单，无需经过复杂繁琐的步骤即可实现显色反应，节省了检测时间，检测结果稳定可靠，且可避免使用大量有机溶剂，成本较低，便于普及，具有开发成为化妆品快检方法的潜在价值。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1为本发明实施例1中所提供的辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线。

图2为本发明实施例1中向步骤(1)所得体系中加入500μL浓度为0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、0.8mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L的辛酰羟肟酸溶液后，体系颜色的变化情况。

图3为本发明所提供的干扰试验中显色结果示意图。

具体实施方式

为了对本发明的技术特征、目的和有益效果有更加清楚的理解，现结合以下具体实施例对本发明的技术方案进行以下详细说明，但不能理解为对本发明的可实施范围的限定。

实施例1

本实施例提供了一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其中，所述方法包括：

(1)分别向比色管中加入浓度为0.8mmol/L的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液500μL、浓度为0.5mmol/L的FeCl₃水溶液500μL后，迅速加入1.5mL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液(所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液的浓度为20mmol/L，pH值为3.8)，将所得体系置于40℃水浴中反应7min；

(2)分别向步骤(1)所得体系中加入500μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500μL浓度为0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、0.8mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于40℃水浴中反应5min，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA；

其中，ΔA＝A₀-A，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A为加入不同浓度辛酰羟肟酸溶液的体系的吸光度；步骤(2)中A₀、A、ΔA以及辛酰羟肟酸溶液浓度数据请参加如下表1所示；

表1 辛酰羟肟酸溶液及吸光度数据

向步骤(1)所得体系中加入500μL浓度为0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、0.8mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L的辛酰羟肟酸溶液后，体系颜色变化情况如图2所示，图2中，从左至右的七个试管依次对应向步骤(1)所得体系中加入浓度为0.1mmol/L、0.2mmol/L、0.5mmol/L、0.8mmol/L、1.0mmol/L、1.5mmol/L、2.0mmol/L的辛酰羟肟酸溶液后的体系；从图2中可以看出，随着辛酰羟肟酸溶液浓度的增大，步骤(1)所得显色体系颜色逐渐消失，由此可见，本发明所提供的方法还可以通过肉眼判断显色体系颜色的变化情况，判断待测样品中是否存在辛酰羟肟酸，并能实现对辛酰羟肟酸的半定量测定；

(3)以吸光度差值ΔA为纵坐标，辛酰羟肟酸浓度(c)为横坐标，绘制得到如图1所示的辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线，线性方程为：ΔA＝0.3156c+0.0278，线性相关系数为r＝0.9959；

(4)向0.5g化妆品中加入水并定容至10mL，对所得体系进行超声提取，再经离心处理后，得到澄清上层清液；

本实施例中所述化妆品为SKINVITALS品牌的维肌泉鲜活莹亮胶囊面膜，其批号为20211026，生产厂家为广州品赫生物科技有限公司；

(5)分别向步骤(1)所得体系中加入500μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500μL的澄清上层清液，将所得体系置于40℃水浴中反应5min，再测定656nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA’，再将所述吸光度差值ΔA’代入所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量；

其中，ΔA’＝A₀-A’，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A₀为加入澄清上层清液的体系的吸光度；

本实施例中，所述方法还包括根据以下公式1)计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量：

公式1)中，W为化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量，单位为mg/kg；C为根据所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量，单位为mmol/L；159.23为辛酰羟肟酸的分子量；V为向化妆品中加入适量水后的定容体积，单位为L；m为所称取化妆品的质量，单位为kg。

实施例2

本实施例提供了一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其与实施例1的区别仅在于所针对的化妆品不同，本实施例中的化妆品为露兰姬娜品牌的VC小灯泡提亮霜，其批号为ZUNRI0815，生产厂家为广州市尊爱日用化妆品有限公司。

实施例3

本实施例提供了一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其与实施例1的区别仅在于所针对的化妆品不同，本实施例中的化妆品为森田品牌的水滢祛痘面膜，其批号为NO:18AT23P2，生产厂家为南六企业(平湖)有限公司。

实施例4

本实施例提供了一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其与实施例1的区别仅在于所针对的化妆品不同，本实施例中的化妆品为谷雨品牌的谷雨·冰川水养肤保湿喷雾，其批号为LAHL01，生产厂家为广州雅镁化妆品制造有限公司。

实施例5

本实施例提供了一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其与实施例1的区别仅在于所针对的化妆品不同，本实施例中的化妆品为妮维雅品牌的丝柔美白爽肤水，其批号为83718029 A，生产厂家为妮维雅(上海)有限公司。

实施例1-实施例5中所得到的实验数据以及检测结果如下表2所示。

表2 实际样品测定结果

实施例6

本实施例对以上实施例1-实施例5中的化妆品样品进行加标回收试验，所得试验结果见如下表3所示。

表3 化妆品样品加标回收试验结果

从以上表3中可以看出，以上实施例1-实施例5中的化妆品的回收率范围为84.1％-118.2％。

干扰试验：

(1)分别向8个比色管中加入浓度为0.8mmol/L的3,3',5,5'-四甲基联苯胺溶液500μL、浓度为0.5mmol/L的FeCl₃水溶液500μL后，迅速加入1.5mL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液(所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液的浓度为20mmol/L，pH值为3.8)，将所得体系置于40℃水浴中反应7min；

(2)向步骤(1)所得体系中分别加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液、辛酰羟肟酸、苯甲酸、山梨酸、苯氧乙醇、脱氢乙酸、三氯卡班、甲基异噻唑啉酮，显色结果如图3所示，图3中从左至右的比色管分别对应加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液、辛酰羟肟酸、苯甲酸、山梨酸、苯氧乙醇、脱氢乙酸、三氯卡班、甲基异噻唑啉酮的体系，从图3中可以看出，在步骤(1)所得的显色体系中加入辛酰羟肟酸后，显色体系原有颜色发生褪色，而加入苯甲酸、山梨酸、苯氧乙醇、脱氢乙酸、三氯卡班、甲基异噻唑啉酮等防腐剂之后，显色体系颜色并未发生褪色，这说明化妆品中所存在的苯甲酸、山梨酸、苯氧乙醇、脱氢乙酸、三氯卡班、甲基异噻唑啉酮等防腐剂均对化妆品中辛酰羟肟酸的检测没有干扰。

综上所述，本发明实施例所提供的该基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法前处理过程简单，无需经过复杂繁琐的步骤即可实现显色反应，节省了检测时间，检测结果稳定可靠，且可避免使用大量有机溶剂，成本较低，便于普及，具有开发成为化妆品快检方法的潜在价值。

以上所述，仅为本发明的具体实施例，不能以其限定发明实施的范围，所以其等同组件的置换，或依本发明专利保护范围所作的等同变化与修饰，都应仍属于本专利涵盖的范畴。另外，本发明中的技术特征与技术特征之间、技术特征与技术发明之间、技术发明与技术发明之间均可以自由组合使用。

Claims (5)

1.一种基于分光光度法定量检测化妆品中辛酰羟肟酸的方法，其特征在于，所述方法包括：

（1）分别向比色管中加入浓度为0.8 mmol/L的3, 3', 5, 5'-四甲基联苯胺溶液500μL、浓度为0.5 mmol/L的含Fe³⁺的溶液500 μL后，迅速加入1.5 mL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液，将所得体系置于40^oC水浴中反应7min；

（2）分别向步骤（1）所得体系中加入500 μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500 μL一系列不同浓度的辛酰羟肟酸溶液，将所得体系置于40^oC水浴中反应5min，再测定656 nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA；

其中，ΔA=A₀-A，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A为加入辛酰羟肟酸溶液的体系的吸光度；

（3）以吸光度差值ΔA为纵坐标，辛酰羟肟酸浓度为横坐标，绘制辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线；

（4）向0.5 g化妆品中加入水并定容至10 mL，对所得体系进行超声提取，再经离心处理后，得到澄清上层清液；

（5）分别向步骤（1）所得体系中加入500 μL的乙酸-乙酸钠缓冲溶液和500 μL的澄清上层清液，将所得体系置于40^oC水浴中反应5min，再测定656 nm波长处的吸光度，并获取得到吸光度差值ΔA^，，再将所述吸光度差值ΔA^，代入所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线中，计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量；

其中，ΔA^，=A₀-A^，，A₀为加入乙酸-乙酸钠缓冲溶液的体系的吸光度，A^，为加入澄清上层清液的体系的吸光度；

其中，所述乙酸-乙酸钠缓冲溶液的浓度为20 mmol/L，pH值为3.8。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括根据以下公式1）计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量：

公式1）中，W为化妆品中辛酰羟肟酸的质量含量，单位为mg/kg；C为根据所述辛酰羟肟酸浓度-吸光度标准曲线计算得到化妆品中辛酰羟肟酸的含量，单位为mmol/L；159.23为辛酰羟肟酸的分子量；V为向化妆品中加入适量水后的定容体积，单位为L；m为所称取化妆品的质量，单位为kg。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述含Fe³⁺的溶液包括FeCl₃水溶液、Fe₂(SO₄)₃水溶液、Fe(NO₃)₃水溶液中的任一种。

4.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述化妆品包括化妆水、防晒喷雾、面膜、乳液或面霜。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，所述化妆品包括化妆水、防晒喷雾、面膜、乳液或面霜。

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