CN111781378B - 一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条 - Google Patents

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Abstract

本发明提出了一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，涉及生物检测技术领域。该试纸条除胶体金试纸条的常规部件外，硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次设有金标垫、用于检测病原的V线、用于检测具有免疫评价标准的抗体的B线、用于检测自然感染所产生特有抗体的E线和质控线；金标垫上吸附有胶体金标记的具有特定病原免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白；V、B和E线上依次喷涂有抗体D’、抗体C’、抗体B’。该试纸条能实现同时检测病原和抗体，同时还能分辨该抗体是自然感染后产生的还是疫苗免疫产生的，为我国畜牧业的检测提供极大的帮助。

Description

一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条
技术领域
本发明涉及生物检测技术领域，具体而言，涉及一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条。
背景技术
随着分子生物学技术的不断进步，分子生物学技术很好的被应用于疫苗研发领域以至于目前基因缺失或基因工程疫苗的广泛使用，尤其是在兽医疾病防控领域基因缺失疫苗的使用极为广泛。而病原检测和抗体监测对于传染性疾病的防控极为重要，虽然现在病原和抗体检测的方法极为丰富，但真正能便捷的应用于现地或生产一线的检测方法当数胶体金试纸条。疫苗的广泛免疫和可靠的检测方法是防控及根除相关病原的有效手段，虽然二者目前已经完成了配合使用但仍然存在多个问题亟待解决。比如如何利用可靠的鉴别诊断方法来区分机体所产生的抗体是由疫苗接种而产生的抗体还是自然感染病原后而产生的抗体；是否具有一种检测方法能同时检测病原和抗体；能否有可靠的病原及抗体检测方法能便捷的应用于临床一线；亦或是能否在生产一线使用某种可靠便捷的检测方法来检测相关病原和抗体同时又能做到对所产生抗体进行鉴别等等。由于目前临床上尚缺乏此类综合性的有效便捷检测方法，使得各类疾病给我国的畜牧业造成了严重的经济损失，甚至使得各类疾病持续的对人类身体健康造成不可避免的危害。所以，开发一种能在临床一线便捷使用的综合性检测方法对于各类疾病的防控和根除十分重要。
发明内容
本发明的目的在于提供一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，此病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条能实现同时检测病原和抗体，同时还能分辨该抗体是自然感染产生还是疫苗免疫产生，为我国畜牧业的检测提供极大的帮助。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
本申请实施例提供一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，包括PVC板、样品垫和吸水垫，所述样品垫和吸水垫之间设有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的一端和样品垫紧密衔接，所述硝酸纤维素膜的另一端和吸水垫紧密衔接，所述硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次设有金标垫、用于检测病原的V线、用于检测具有免疫评价标准的抗体的B线、用于检测自然感染所产生的特有抗体的E线，所述E线后还设置有质控线；所述金标垫上吸附有机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白；所述缺失基因的截短体蛋白为不包含A表位但包含B表位的截短体蛋白；所述V线上喷涂特定病原的结构蛋白D的抗体D’；所述B线上喷涂抗原C对应的抗体C’；所述E线上喷涂缺失基因的B表位的抗体B’。
综上，相对于现有技术，本发明的实施例至少具有如下优点或有益效果：
本发明提供的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，通过在金标垫上同时设置机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白，缺失基因的截短体蛋白为不包含A表位但包含B表位的截短体，并在后续检测线上设置对应抗体，使得该试纸条能实现同时检测病原和抗体，并且实现同时分辨该抗体是自然感染产生还是疫苗免疫产生，大大加快了检测进度和检测精度，可以为我国畜牧业的检测提供极大的帮助。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
本申请实施例提供一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，包括PVC板、样品垫和吸水垫，所述样品垫和吸水垫之间设有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的一端和样品垫紧密衔接，所述硝酸纤维素膜的另一端和吸水垫紧密衔接，所述硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次设有金标垫、用于检测病原的V线、用于检测具有免疫评价标准的抗体的B线和用于检测自然感染所产生特有抗体的E线，所述E线的后面还设置有质控线；所述金标垫上吸附有机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白；所述缺失基因的截短体蛋白为不包含A表位但包含B表位的截短体蛋白；所述V线上喷涂特定病原的结构蛋白D的抗体D’；所述B线上喷涂抗原C对应的抗体C’；所述E线上喷涂缺失基因的B表位的抗体B’。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述质控线上喷涂有能与鼠源IgG蛋白反应的山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述抗体A’为单克隆抗体。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述抗体B’为单克隆抗体。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述抗体C’为单克隆抗体。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述抗体D’为单克隆抗体。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体为单克隆抗体。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述金标垫吸附有机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白通过如下方式制备而成：将机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白加入胶体金溶液，搅拌混匀，得到混合液一，再向混合液一种加入稳定剂，离心去上清，加入金标缓冲溶液，得到金标蛋白溶液，将金标垫吸附金标蛋白溶液，即得到吸附有机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白的金标垫。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述胶体金溶液的粒径为25nm。
在本发明的一些实施例中，上述病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，所述稳定剂为终浓度为0.01～1wt％的PGE-20000。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例的目的在于提供一种检测伪狂犬病病毒的试纸条。
本实施例提供的试纸条制备过程如下：
(1)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液，所得胶体金溶液粒径为25nm；
(2)取适量胶体金溶液，将胶体金溶液的pH值调至8.5，再将适量的伪狂犬病病毒的gE蛋白截短体gE-B(缺失基因的截短体蛋白B)、gB(抗原C)、gE蛋白的A表位的单抗A’(缺失基因的A表位的抗体A’)和鼠源IgG蛋白缓慢滴加入前述胶体金溶液中，搅拌30分钟，得到混合液一；
(3)再向步骤(2)中得到的混合液一中加入终浓度0.01～1％的PEG-20000稳定未结合的胶体金颗粒，离心后取上清，再将上清在8700r/min条件下离心30分钟并去除上清，得到沉淀，再用含有PEG的PBS重悬沉淀并调整至适宜浓度，得到金标蛋白溶液，最后于4℃条件下保存待用；
(4)组装胶体金试纸条：在PVC板的两端分别布置样品垫和吸水垫，样品垫和吸水垫之间布置酸纤维素膜，硝酸纤维素膜两端分别和样品垫和吸水垫紧密衔接，硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次布置金标垫、V线、B线、E线和C线；
(5)向步骤(4)中组装好的胶体金试纸条的金标垫上吸附适量步骤(2)中的金标蛋白溶液，其中检测病原的V线上布置适量gD蛋白的鼠源单抗D(抗体D’)，检测gB抗体的B线上布置适量鼠源单抗C(抗体C’)，检测gE抗体的E线上布置适量鼠源单抗B(抗体B’)，质控C线上布置适量山羊抗鼠IgG蛋白的抗体(山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体)。
检测试验及结果判读：首先将待检测血清加入到样品孔内，然后等待5-15分钟进行结果判读，若超过30分钟后再进行判读则结果无效。
结果判读方法如下：
(1)若V、B、E、C四线均为红色，则提示该样品中含有伪狂犬病病毒，但没有疫苗免疫和自然感染所产生的抗体；
(2)若V、E、C三线为红色，B线为无色，则提示该样品中含有伪狂犬病病毒和疫苗免疫所产生的抗体但没有自然感染所产生的抗体；
(3)若B、E、C三线为红色，V线为无色，则提示该样品中不含有伪狂犬病病毒和疫苗免疫及自然感染所产生的抗体；
(4)若V、C双线为红色，B、E双线为无色，则提示该样品中含有伪狂犬病病毒和自然感染所产生的抗体但疫苗免疫后是否产生抗体仍不能确定；
(5)若E、C双线为红色，V、B双线为无色，则提示该样品中不含有伪狂犬病病毒和自然感染所产生的抗体但含有疫苗免疫所产生的抗体；
(6)若仅C线为红色，V、B、E三线为无色，则提示该样品中不含有伪狂犬病病毒但含有自然感染所产生的抗体，但疫苗免疫后是否产生抗体仍不能确定；
(7)若除C线以外的其他检测线有颜色浅淡的现象可与C线进行比对后对结果进行综合判读；
(8)当C线为无色时不论其他三线情况如何均判定为无效需重新检测。
实施例2
本实施例的目的在于提供一种检测非洲猪瘟病毒的试纸条。
本实施例提供的试纸条制备过程如下：
(1)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液，所得胶体金溶液粒径为25nm；
(2)取适量胶体金溶液，将胶体金溶液的pH值调至8.5，再将适量的非洲猪瘟病毒CD2v截短体蛋白CV2v-B(缺失基因的截短体蛋白B)、p72(抗原C)、CD2v蛋白的A表位的单抗A’(缺失基因的A表位的抗体A’)和鼠源IgG蛋白搅拌缓慢滴加入前述胶体金溶液中，搅拌30分钟，得到混合液一；
(3)再向步骤(2)中得到的混合液一中加入终浓度0.01～1％的PEG-20000稳定未结合的胶体金颗粒，离心后取上清，再将上清在8700r/min条件下离心30分钟并去除上清，得到沉淀，再用含有PEG的PBS重悬沉淀并调整至适宜浓度，得到金标蛋白溶液，最后于4℃条件下保存待用；
(4)组装胶体金试纸条：在PVC板的两端分别布置样品垫和吸水垫，样品垫和吸水垫之间布置酸纤维素膜，硝酸纤维素膜两端分别和样品垫和吸水垫紧密衔接，硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次布置金标垫、V线、B线、E线和C线；
(5)向步骤(4)中组装好的胶体金试纸条的金标垫上吸附适量步骤(2)中的金标蛋白溶液，其中检测病原的V线上布置适量p30蛋白的鼠源单抗D(抗体D’)，检测p72抗体的B线上布置适量p72鼠源单抗C(抗体C’)，检测CV2v抗体的E线上布置适量CV2v鼠源单抗B(抗体B’)，质控C线上布置适量山羊抗鼠IgG蛋白的抗体E(山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体)。
检测试验及结果判读：首先将待检测血清加入到样品孔内，然后等待5-15分钟进行结果判读，若超过30分钟后再进行判读则结果无效。
结果判读方法如下：
(1)若V、B、E、C四线均为红色，则提示该样品中含有非洲猪瘟病毒、没有疫苗免疫和自然感染所产生的抗体；
(2)若V、E、C三线为红色，B线为无色，则提示该样品中含有非洲猪瘟病毒和疫苗免疫所产生的抗体但没有自然感染所产生的抗体；
(3)若B、E、C三线为红色，V线为无色，则提示该样品中不含有非洲猪瘟病毒和疫苗免疫及自然感染所产生的抗体；
(4)若V、C双线为红色，B、E双线为无色，则提示该样品中含有非洲猪瘟病毒和自然感染所产生的抗体但疫苗免疫后是否产生抗体仍不能确定；
(5)若E、C双线为红色，V、B双线为无色，则提示该样品中不含有非洲猪瘟病毒和自然感染所产生的抗体但含有疫苗免疫所产生的抗体；
(6)若仅C线为红色，V、B、E三线为无色，则提示该样品中不含有非洲猪瘟病毒但含有自然感染所产生的抗体，但疫苗免疫后是否产生抗体仍不能确定；
(7)若除C线以外的其他检测线有颜色浅淡的现象可与C线进行比对后对结果进行综合判读；
(8)当C线为无色时不论其他三线情况如何均判定为无效需重新检测。
实施例3
本实施例的目的在于提供一种检测牛传染性鼻气管炎病毒的试纸条。
本实施例提供的试纸条制备过程如下：
(1)采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金溶液，所得胶体金溶液粒径为25nm；
(2)取适量胶体金溶液，将胶体金溶液的pH值调至8.5，再将适量的牛传染性鼻气管炎病毒gE蛋白的截短体gE-B(缺失基因的截短体蛋白B)、gB(抗原C)、gE蛋白的A表位的单抗A’(缺失基因的A表位的抗体A’)和鼠源IgG蛋白搅拌加入，搅拌时间30分钟，得到混合液一；
(3)再向步骤(2)中得到的混合液一中加入终浓度0.01～1％的PEG-20000稳定未结合的胶体金颗粒，离心后取上清，再将上清在8700r/min条件下离心30分钟并去除上清，得到沉淀，再用含有PEG的PBS重悬沉淀并调整至适宜浓度，得到金标蛋白溶液，最后于4℃条件下保存待用；
(4)组装胶体金试纸条：在PVC板的两端分别布置样品垫和吸水垫，样品垫和吸水垫之间布置酸纤维素膜，硝酸纤维素膜两端分别和样品垫和吸水垫紧密衔接，硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次布置金标垫、V线、B线、E线和C线；
(5)向步骤(4)中组装好的胶体金试纸条的金标垫上吸附适量步骤(2)中的金标蛋白溶液，其中检测抗原的V线上布置适量gD蛋白的鼠源单抗D(抗体D’)，检测gB抗体的B线上布置适量鼠源单抗C(抗体C’)，检测gE抗体的E线上布置适量鼠源单抗B(抗体B’)，质控C线上布置适量山羊抗鼠IgG蛋白的抗体(山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体)。
检测试验及结果判读：首先将待检测血清加入到样品孔内，然后等待5-15分钟进行结果判读，若超过30分钟后再进行判读则结果无效。
结果判读方法如下：
(1)若V、B、E、C四线均为红色，则提示该样品中含有牛传染性鼻气管炎病毒没有疫苗免疫和自然感染所产生的抗体；
(2)若V、E、C三线为红色，B线为无色，则提示该样品中含有牛传染性鼻气管炎病毒和疫苗免疫所产生的抗体但没有自然感染所产生的抗体；
(3)若B、E、C三线为红色，V线为无色，则提示该样品中不含有牛传染性鼻气管炎病毒和疫苗免疫及自然感染所产生的抗体；
(4)若V、C双线为红色，B、E双线为无色，则提示该样品中含有牛传染性鼻气管炎病毒和自然感染所产生的抗体但疫苗免疫后是否产生抗体仍不能确定；
(5)若E、C双线为红色，V、B双线为无色，则提示该样品中不含有牛传染性鼻气管炎病毒和自然感染所产生的抗体但含有疫苗免疫所产生的抗体；
(6)若仅C线为红色，V、B、E三线为无色，则提示该样品中不含有牛传染性鼻气管炎病毒但含有自然感染所产生的抗体，但疫苗免疫后是否产生抗体仍不能确定；
(7)若除C线以外的其他检测线有颜色浅淡的现象可与C线进行比对后对结果进行综合判读；
(8)当C线为无色时不论其他三线情况如何均判定为无效需重新检测。
本发明提供的试纸条的检测原理如下：
人工疫苗免疫后不能产生针对缺失基因的抗体(包括针对缺失基因的多个表位的抗体)，但可以产生抗原C对应的抗体，自然感染(野毒感染)由于未经过人为的基因改造，则感染后可以产生缺失基因的抗体(包括针对缺失基因的多个表位的抗体)，也可以产生抗原C对应的抗体。因此，试纸条的样品区吸附待测样品后，待测样品中的各种物质随着水分子向C线逐渐移动，在移动过程中，样品中含有不同物质时的各线的显色原理如下：
V线：如果样品中有特定病原即病毒，样品中的病毒会首先与金标垫上的缺失基因的A表位的抗体A’结合(金标垫上的抗体A’是针对缺失基因的A表位，所以不会与金标垫上的缺失基因截短体蛋白B结合进而影响其他线的检测)，并随样品朝吸附方向移动，当移动至V线上时，由于V线上喷涂的是特定病原的结构蛋白D的抗体D’，与缺失基因的A表位的抗体A’结合的病毒还会与抗体D’结合，进而停留在V线上，V线显色，即表明含有特定病原(待检测的病毒)，反之，V线不会显色，因此，V线显色表示样品中有病原，V线不显色表示样品中没有病原；
B线：当样品中有抗原C的抗体时，不管是人工疫苗免疫后产生的抗体还是自然感染产生的抗体，该抗体中均含有能阻断抗体C’与抗原C结合的抗体，样品中的抗体与金标垫上的抗原C结合后占据抗原C上能与抗体C’结合的表位，从而竞争性抑制了B线上的抗体C’与抗原C结合，此时B线则不会显色，反之，如果没有抗体，金标垫上的抗原C随样品移动至B线后，会与B线上的抗体C’结合而停留在B线上，B线显色，因此，B线不显色表示有抗体，B线显色表示没有抗体，但不清楚该抗体是自然感染产生还是疫苗免疫产生；
E线：当样品中有针对缺失基因的抗体时，该抗体必然是自然感染(野毒感染)后所产生的针对缺失基因的抗体(该抗体能够阻断针对缺失基因B表位的抗体B’与缺失基因截短体蛋白B的结合)，样品中针对缺失基因的抗体会首先与金标垫上的缺失基因的截短体蛋白B结合，由于样品中的抗体已经与缺失基因的截短体蛋白B结合，所以缺失基因的截短体蛋白B不会再与E线上针对缺失基因B表位的抗体B’结合，E线不会显色，反之，如果没有自然感染产生的抗体，金标垫上的缺失基因的截短体蛋白B移动至E线后与缺失基因的B表位的抗体B’结合而停留在E线上，E线显色，因此，E线不显色表示有自然感染(野毒感染)产生的抗体，E线显色表示没有自然感染产生的抗体；
C线：金标垫上的鼠源IgG蛋白移动至C线，与C线上的山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体结合而停留在C线上，表明前述检测有效。
需要注意的是，虽然实施例只列举了三种病毒的检测，但并不代表本发明提供的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条只限于这三种病毒的检测，还可以是其他所有病原及抗体的检测，即可作为所有具有基因缺失疫苗的病原，也可是尚无基因缺失疫苗病原的储备检测方法。
综上所述，本发明实施例的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，此病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条能实现同时检测病原和抗体，同时还能分辨该抗体是自然免疫产生还是疫苗免疫产生，大大加快了检测进度和检测精度，为我国畜牧业的检测提供极大的帮助。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (10)

1.一种病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，包括PVC板、样品垫和吸水垫，所述样品垫和吸水垫之间设有硝酸纤维素膜，所述硝酸纤维素膜的一端和样品垫紧密衔接，所述硝酸纤维素膜的另一端和吸水垫紧密衔接，其特征在于：
所述硝酸纤维素膜上从样品垫到吸水垫方向依次设有金标垫、用于检测病原的V线、用于检测具有免疫评价标准的抗体的B线和用于检测自然感染所产生的特有抗体的E线，所述E线后还设置有质控线；
所述金标垫上吸附有机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白；
所述缺失基因的截短体蛋白为不包含A表位但包含B表位的截短体蛋白；
所述V线上喷涂特定病原的结构蛋白D的抗体D’，当样品中有待检测病毒，样品中的病毒会首先与金标垫上的缺失基因的A表位的抗体A’结合，与缺失基因的A表位的抗原A’结合的病毒继续移动与V线上的抗体D’结合，发生显色；反之，不显色；
所述B线上喷涂抗原C对应的抗体C’，当样品中有抗原C的抗体时，样品中的抗体会首先与金标垫上的抗原C结合，占据抗原C上能与抗体C’结合的表位，从而竞争性抑制B线上的抗体C’与抗原C结合，此时B线不显色；反之，显色；
所述E线上喷涂缺失基因的B表位的抗体B’，当样品中有针对缺失基因的抗体时，样品中针对缺失基因的抗体会首先与金标垫上的缺失基因的截短体蛋白B结合，从而，在样品继续移动到E线时，不会再与此处抗体B’结合，此时E线不显色；反之，显色。
2.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述质控线上喷涂有能与鼠源IgG蛋白反应的山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体。
3.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述抗体A’为单克隆抗体。
4.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述抗体B’为单克隆抗体。
5.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述抗体C’为单克隆抗体。
6.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述抗体D’为单克隆抗体。
7.根据权利要求2所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述山羊抗鼠源IgG蛋白的抗体为单克隆抗体。
8.根据权利要求1所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述金标垫上吸附的机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白通过如下方式制备而成：将机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白加入胶体金溶液，搅拌混匀，得到混合液一，再向混合液一中加入稳定剂，离心去上清，加入金标缓冲溶液，得到金标蛋白溶液，将金标垫吸附金标蛋白溶液，即得到吸附有胶体金标记的机体免疫评价标准的抗体所对应的抗原C、缺失基因的截短体蛋白B、缺失基因的A表位的抗体A’和鼠源IgG蛋白的金标垫。
9.根据权利要求8所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述胶体金溶液的粒径为25nm。
10.根据权利要求9所述的病原及其抗体检测和鉴别诊断胶体金试纸条，其特征在于，所述稳定剂为终浓度为0.01～1wt％的PEG -20000。
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