CN111759871A - 一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:S1、滤渣滤液分离;S2、提取油脂;S3、提取黄酮;S4、提取多糖;本发明能够连续从白刺种子中提取出油脂、黄酮和多糖类化合物,提取工艺简单可行,设备投入低,仅需要一套提取设备。并且在提取不同成分时不需要将物料从提取罐中取出,节约了时间和人力,避免了物料在转移过程中的损耗。在本发明的优选方案下,油脂、黄酮和多糖三种活性成分的得率均达到较高值,提高了白刺种子的利用率。
Description
技术领域
本发明涉及一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法。
背景技术
白刺为蒺藜科的多分枝、耐盐碱、旱生型低矮灌木,具有耐干旱,抗高温、保水力强等生理特性。我国的白刺果资源丰富,分布广泛,在我国西北沙漠、华北、东北沿海地区,张家口坝上、天津、沧州等地都有野生。据统计,柴达木盆地的白刺分布在海拔3000米以上无污染的地区,每年可产白刺果6~10万吨,具有巨大的开发价值。
白刺果实具有较高的经济和药用价值,并已得到了很好的研究与开发应用。在利用白刺果实时,产出大量白刺种子。据报道,白刺种子油中的不饱和脂肪酸含量较高,其中亚油酸含量高达65.85%(索有瑞,高航,汪汉卿.中国唐古特白刺:二氧化碳超临界萃取种子油化学成分的研究(英文)[J].天然产物研究与开发,2004(01):16-18.),是自然界少有的富含不饱和脂肪酸的功能性油脂。目前已经公开了一些白刺种子油的提取方法,如《天然产物研究与开发》2004年第16卷第1期“中国唐古特白刺:二氧化碳超临界萃取种子油化学成分的研究(英文)”一文报道,使用超临界CO2流体技术在压力22.0MPa、温度42℃、CO2流量46L/h条件下萃取唐古特白刺种子8h,油得率为11.6%;国家专利“CN200510041879”中同样使用超临界CO2流体技术,在压力15~45MPa、温度25~50℃、CO2流量45~250L/h条件下萃取唐古特白刺种子6h,油得率为10.13%;“CN201110374709”中描述了一种使用亚临界流体萃取白刺种子油的方法,油脂得率约为12%。而在《食品研究与开发》2015年3月第36卷第6期“超临界CO2萃取西伯利亚白刺籽油工艺研究”一文,公开的最佳工艺为萃取压力40MPa,萃取温度55℃,CO2流量10L/min,在此条件下得率为4.63%,可能是白刺品种不同导致了油脂得率的差别。以上所公开的方法,虽具有得率高,油脂品质好等优点,但都需要复杂昂贵的提取设备,不利于工业推广。
除油脂外,黄酮类化合物也是白刺种子中的一类重要活性成分。据报道称,白刺种子中总黄酮含量约为1.1%~1.9%,这些黄酮具有清除自由基,修复血管内皮细胞损伤等功效。在已经公布的白刺种子黄酮提取方法,如“CN200510041880”中,使用乙醇为溶剂热回流提取,并将提取液经过非极性大孔树脂塔进行纯化,该法工艺简单,设备成本低,适合工业化生产。但众所周知,植物中的活性成分复杂多样,提取物中也存在多种有效成分,仅从白刺种子提取物中获得总黄酮,并不利于白刺种子的开发利用。
多糖也是植物中一类重要的活性成分,许多植物多糖具有抗氧化、抗炎症等功效。白刺多糖研究主要集中于白刺果实上,未见白刺种子多糖的提取报道,但在我们的研究中发现,白刺种子中多糖类化合物含量在6%以上,因此多糖提取有望成为综合利用开发白刺种子的新途径。
工业上,从植物中提取不同的目标成分往往需要不同的提取设备或提取工艺,这就使得生产者需要投入更多的设备、人力、时间,并承担更多的风险,所以急需开发一种简单、快速、并能同时或连续从植物中提取不同有效成分的方法。
发明内容
针对上述现有技术的不足之处,本发明解决的问题为:提供一种从白刺种子中快速、简便、连续的提取油脂、黄酮和多糖的工艺。
为解决上述问题,本发明采取的技术方案如下:
一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将白刺种子清洗、晒干、粉碎,得到白刺种子粉末;向白刺种子粉末中加入乙醇进行混合,加热提取1~3次;抽滤后合并滤液,得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ;
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ减压浓缩,回收乙醇,接着加入纯净水稀释得浓缩液Ⅰ,然后使用石油醚萃取,分离得石油醚层和水层;将石油醚层减压浓缩,回收石油醚得白刺种子油;
S3、提取黄酮:向步骤S1中的滤渣Ⅰ中加入纯净水,加热提取1~3次;提取结束后抽滤得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入95%乙醇,静置沉淀,离心分离上清液与沉淀;上清液减压浓缩回收乙醇后与步骤S2中水层混合,然后配制成相应浓度的上样液,调节pH后上样到大孔吸附树脂柱内;先使用清水洗脱至流出液无色,然后使用乙醇溶液进行洗脱直至洗脱液为无色透明、收集乙醇洗脱液后浓缩、冻干得总黄酮;
S4、提取多糖:将步骤S3中沉淀冻干得到多糖。
进一步,所述步骤S1中,白刺种子在粉碎前,晒干至水分≤5%;白刺种子粉碎至40~60目;按液料比4:1~14:1mL/g向白刺种子粉末中加入体积分数为55~95%乙醇;加热温度至45~85℃下提取2次,每次1~3h。
进一步,所述步骤S2中,所加纯净水与浓缩液Ⅰ体积比为0:1~1:1;所加石油醚与稀释后浓缩液Ⅰ体积比为1:1~3:1;石油醚萃取时间为10~60min;石油醚萃取次数为1~4次。
进一步,所述步骤S3中,按液料比5:1~20:1mL/g向滤渣Ⅰ中加入纯净水;加热回流提取的温度为60~100℃;提取1次,每次1~3h;按乙醇:浓缩液Ⅱ体积比2:1~5:1向浓缩液Ⅱ中加入95%乙醇,4℃下静置沉淀12h。
进一步,所述步骤S3中,所用大孔吸附树脂柱材料为AB-8型大孔树脂;上样液中黄酮浓度为0.5~2.5mg/mL;上样液pH为3~7;上样液以0.5~2.5BV/h的流速上样到大孔吸附树脂柱内;洗脱用乙醇溶液的体积分数为15%~95%;乙醇溶液洗脱流速为0.5~2.5BV/h。
本发明的有益效果
1.本发明的白刺种子粉末本质上经过了两次的乙醇分离提取,并且将两次的提取滤液进行混合作为提取黄酮的载体液,同时第一次的分离的滤液提供了油脂分离的载体,工艺设计巧妙、高效、便利。
2.本发明能够连续从白刺种子中提取出油脂、黄酮和多糖类化合物,提取工艺简单可行,设备投入低,仅需要一套提取设备。并且在提取不同成分时不需要将物料从提取罐中取出,节约了时间和人力,避免了物料在转移过程中的损耗。在本发明的优选方案下,油脂、黄酮和多糖三种活性成分的得率均达到较高值,提高了白刺种子的利用率。
3.本发明研究了料液比、乙醇体积分数、提取温度、石油醚萃取时间、石油醚用量、石油醚萃取次数等因素对白刺种子油脂或总黄酮提取的影响,确定了乙醇提取白刺种子黄酮的最优工艺。在使用水提取白刺种子中多糖时,同样研究了料液比、提取温度、提取时间、提取次数等因素对多糖得率的影响,确定了多糖提取的最优工艺。此外,对于白刺种子黄酮的纯化工艺进行了优化,确定了最优上样液浓度、上样液pH、上样液流速、洗脱液的体积分数、洗脱液的流速等工艺条件,显著提高了白刺种子黄酮的纯度。
附图说明
图1为本发明的工艺流程图。
图2是本发明方法中用于测定总黄酮含量的以芦丁为对照品的标准曲线。
具体实施方式
下面结合附图对本发明内容作进一步详细说明。
实施例1
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.30%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入95%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取2h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取1.5h,提取结束后抽滤,滤渣重复提取一次,合并两次滤液后得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为5,以1BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用55%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例2
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.30%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入95%乙醇,在75℃下回流提取2次,每次提取2h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比10:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取1.5h,提取结束后抽滤得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为5,以1BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用55%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例3
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.25%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入95%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取1h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取1.5h,提取结束后抽滤得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为4,以1BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用55%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例4
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.25%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入85%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取1.5h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取2h,提取结束后抽滤,滤渣重复提取一次,合并两次滤液后得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为5,以1BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用55%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例5
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.25%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比12:1mL/g加入95%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取2h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取2h,提取结束后抽滤,滤渣重复提取一次,合并两次滤液后得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为5,以1BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用55%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例6
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.25%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入95%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取2h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取2h,提取结束后抽滤,滤渣重复提取一次,合并两次滤液后得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1mg/mL溶液,调节pH为5,以1BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用55%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例7
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.25%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入95%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取2h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取2h,提取结束后抽滤,滤渣重复提取一次,合并两次滤液后得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为5,以1.5BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用45%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
实施例8
如图1所示,一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将清洗干净后的白刺种子晒干至水分含量为4.25%,粉碎后过40目筛得到白刺种子粉末,然后按液料比10:1mL/g加入95%乙醇,在85℃下回流提取2次,每次提取2h,抽滤后合并滤液,得滤液Ⅰ和滤渣Ⅰ。
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅰ,使用占浓缩液Ⅰ体积1/2的纯净水将其稀释,然后加入占稀释后浓缩液3倍体积的石油醚萃取2次,每次30min,分离得到石油醚层和水层;将石油醚层浓缩回收石油醚,得到白刺种子油。
S3、提取黄酮:按液料比15:1mL/g,向步骤S1中滤渣Ⅰ中加入纯净水,在80℃下回流提取2h,提取结束后抽滤,滤渣重复提取一次,合并两次滤液后得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ在60℃下减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入5倍体积的95%乙醇,在4℃下静置沉淀12h,离心分离上清液与沉淀;将上清液在60℃下减压浓缩后与步骤S2中的水层合并,然后将其配成总黄酮浓度为1.5mg/mL溶液,调节pH为5,以1.5BV/h的流速上样到AB-8大孔树脂柱内,先用足量清水洗涤树脂柱至流出液为无色,然后使用65%乙醇以1BV/h流速洗脱至流出液无色,收集乙醇洗脱液,浓缩后冻干得到白刺种子总黄酮。
S4、提取多糖:将步骤(5)中的沉淀冻干得到多糖。
如图2所示,本发明中白刺种子油和多糖得率是通过产品称重后计算的,黄酮得率则通过紫外-可见分光光度法测定黄酮含量后计算。黄酮含量的测定方法采用硝酸铝显色法,以芦丁为对照品。首先精密称取芦丁10mg,使用70%乙醇溶解后定容至50mL,分别取0、1、2、3、4、5、6mL芦丁对照品溶液于25mL容量瓶中,先加入1mL 5%NaNO2(溶剂为70%乙醇溶液),摇匀静置6min后加入1mL 10%Al(NO3)3(溶剂为70%乙醇溶液),再次摇匀静置6min后加入10mL 4%NaOH溶液,最后定容至25mL,静置6min,以不加显色剂为空白,在510nm处测定吸光度值。以芦丁浓度为横坐标,吸光度值为纵坐标绘制芦丁标准曲线为Y=12.88929X+0.00827(r2=0.99982)。取适量样品液按上述方法显色后,通过芦丁标准曲线计算黄酮含量。
本发明各个实施例中的提取出油脂、黄酮和多糖的含量数据如下。
从上表可知,本发明实施例6中的各项提取物的得率以及纯度均达到了一定的高度,为最佳的优选方案。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已,并不用以限制本发明,凡在本发明的精神和原则之内,所作的任何修改、等同替换、改进等,均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (5)
1.一种连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,其特征在于,包括如下步骤:
S1、滤渣滤液分离:将白刺种子清洗、晒干、粉碎,得到白刺种子粉末;向白刺种子粉末中加入乙醇进行混合,加热提取1~3次;抽滤后合并滤液,得滤渣Ⅰ和滤液Ⅰ;
S2、提取油脂:将步骤S1中的滤液Ⅰ减压浓缩,回收乙醇,接着加入纯净水稀释得浓缩液Ⅰ,然后使用石油醚萃取,分离得石油醚层和水层;将石油醚层减压浓缩,回收石油醚得白刺种子油;
S3、提取黄酮:向步骤S1中的滤渣Ⅰ中加入纯净水,加热提取1~3次;提取结束后抽滤得滤液Ⅱ,滤液Ⅱ减压浓缩得浓缩液Ⅱ;向浓缩液Ⅱ中加入95%乙醇,静置沉淀,离心分离上清液与沉淀;上清液减压浓缩回收乙醇后与步骤
S2中水层混合,然后配制成相应浓度的上样液,调节pH后上样到大孔吸附树脂柱内;先使用清水洗脱至流出液无色,然后使用乙醇溶液进行洗脱直至洗脱液为无色透明、收集乙醇洗脱液后浓缩、冻干得总黄酮;
S4、提取多糖:将步骤S3中沉淀冻干得到多糖。
2.根据权利要求1所述的连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,其特征在于,所述步骤S1中,白刺种子在粉碎前,晒干至水分≤5%;白刺种子粉碎至40~60目;按液料比4:1~14:1mL/g向白刺种子粉末中加入体积分数为55~95%乙醇;加热温度至45~85℃下提取2次,每次1~3h。
3.根据权利要求1所述的连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,其特征在于,所述步骤S2中,所加纯净水与浓缩液Ⅰ体积比为0:1~1:1;所加石油醚与稀释后浓缩液Ⅰ体积比为1:1~3:1;石油醚萃取时间为10~60min;石油醚萃取次数为1~4次。
4.根据权利要求1所述的连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,其特征在于,所述步骤S3中,按液料比5:1~20:1mL/g向滤渣Ⅰ中加入纯净水;加热回流提取的温度为60~100℃;提取1次,每次1~3h;按乙醇:浓缩液Ⅱ体积比2:1~5:1向浓缩液Ⅱ中加入95%乙醇,4℃下静置沉淀12h。
5.根据权利要求1所述的连续从白刺种子中提取油脂、黄酮和多糖的方法,其特征在于,所述步骤S3中,所用大孔吸附树脂柱材料为AB-8型大孔树脂;上样液中黄酮浓度为0.5~2.5mg/mL;上样液pH为3~7;上样液以0.5~2.5BV/h的流速上样到大孔吸附树脂柱内;洗脱用乙醇溶液的体积分数为15%~95%;乙醇溶液洗脱流速为0.5~2.5BV/h。
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