CN111759840A - 一种防治心肌缺血的药物组合物及其制备方法和用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了塞克硝唑在制备治疗和/或预防心肌缺血的药物中的应用。本发明还公开了一种用于治疗和/或预防心肌缺血的药物组合物，所述药物组合物包含塞克硝唑和药学上可接受的赋形剂。药效学实验结果显示塞克硝唑对实验性心肌缺血性损伤具有保护作用，能够明显缩小心肌梗死面积，减轻心肌受损程度，降低血清MDA含量，增加SOD活性酶含量，能够有效的抗急性心肌缺血，保护心肌，从而改善心肌缺血的症状。

Description

一种防治心肌缺血的药物组合物及其制备方法和用途

技术领域

本发明涉及药物技术领域，具体涉及一种防治心肌缺血的药物组合物及其制备方法和用途。

背景技术

心肌缺血(myocardial ischemia)是指心脏的血液灌注减少，导致心脏的供氧减少，心肌能量代谢不正常，不能支持心脏正常工作的一种病理状态。按照世界卫生组织发表的“缺血性心脏病”的命名和诊断标准，心肌缺血分为以下四类：心绞痛、心肌梗死、缺血性心肌病和猝死。而急性心肌缺血在临床上主要表现为急性心绞痛、急性心肌梗死等症状,严重者可危及患者的生命。其中急性心肌梗死通常是在冠状动脉粥样硬化病变的基础上继发血栓形成所致，急性心肌梗死是临床上一种严重的致命性疾病，总死亡率可达30％。随着人民生活水平的提高，目前心肌缺血在我国的患病率呈逐年上升的趋势，已成为中老年人的常见病和多发病，一些20～30岁的年轻人也出现了心肌缺血的表现。

近年来，随着对心肌缺血损伤机制研究的不断深入，实验研究发现心肌缺血时伴有氧自由基生成，后者可转变成羟基自由基，同时在心肌缺血时，心肌内与自由基相关的指标会发生显著变化，丙二醛(MDA)含量显著上升，而SOD活性显著下降。SOD是一种机体清除氧自由基的超氧化物歧化酶，其活性下降提示心肌内有大量的自由基产生，从而造成对心肌组织的氧化应激损伤，引起心肌细胞膜脂质过氧化，破坏膜功能，加剧心肌缺血。

目前，针对心肌缺血的临床治疗手段以手术治疗和药物治疗为主，其中心肌缺血的药物治疗的关键是使氧的供应与消耗重新达到平衡，其治疗机理主要可分为两类。一种是减少心肌耗氧量；另一种是改善冠脉血流量。目前常用的药物主要包括：①抗血小板药物：常用药物有阿司匹林、氯吡格雷等，此类药物一般需要长期用药；②β受体阻断剂：为稳定型心绞痛的首选，与硝酸酯类合用可互相取长补短，一般应从小剂量开始，根据治疗反应及心率变化调整剂量；③钙离子拮抗剂：常用药物有维拉帕米、硝苯地平等。然而在临床实际应用中上述药物由于其自身原因，针对不同人群或者具体适应症，仍存在各种局限性。因此，目前临床上仍亟需寻找新的心肌缺血的防治手段，为心肌缺血的药物治疗开发新的作用靶点。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是丰富治疗和/或预防心肌缺血的临床用药选择，提供一种防治心肌缺血的药物组合物及其制备方法和用途。

发明人通过实验发现塞克硝唑对实验性心肌缺血性损伤具有保护作用，能够明显缩小心肌梗死面积，减轻心肌受损程度，降低血清MDA含量，增加SOD活性酶含量，能够有效的抗急性心肌缺血，因此可以预期其在治疗心肌缺血方面是有用的。

作为活性成分的塞克硝唑(Secnidazole)是一种硝基咪唑类抗原虫和厌氧菌药物，化学名为1-(羟基-2-丙基)-2-甲基-5-硝基咪唑，其结构及药理作用与甲硝唑相似，常温下为白色至类白色或微黄色结晶性粉末，无臭、味苦，具有抗滴虫、抗阿米巴原虫作用。最初由法国罗纳普朗克(Rhone-PoulencRorer)制药公司研发成功，通过作用于原虫或厌氧菌的生长期，破坏DNA链或抑制DNA的合成，导致原虫和厌氧菌死亡。临床上常用于治疗阴道毛滴虫引起的尿道炎和阴道炎，急性阿米巴病或贾第鞭毛虫病等。目前临床上尚无报道发现塞克硝唑在治疗心肌缺血方面的药理活性或治疗作用。

本发明的第一方面是塞克硝唑在制备治疗和/或预防心肌缺血的药物中的应用。

进一步地，所述心肌缺血是急性心肌缺血。

本发明的第二方面是提供一种用于治疗和/或预防心肌缺血的药物组合物，所述药物组合物包含塞克硝唑和药学上可接受的赋形剂。

进一步地，所述药学上可接受的赋形剂包含固体脂质材料。

更进一步地，所述固体脂质材料选自棕榈酸甘油酯、山嵛酸甘油酯或辛葵酸甘油酯中的一种或多种。

发明人在对塞克硝唑进行研究的过程中发现，塞克硝唑口服给药时会产生一种金属异味，从而产生胃肠道紊乱、恶心、呕吐等不良反应，此外塞克硝唑的水溶性较差(略溶于水，在中性条件下约为34mg/mL)，致使其在临床剂型的研发方面也受到了限制。基于上述问题，发明人通过反溶剂沉淀法制备了负载塞克硝唑的固体脂质微粒，从而改善塞克硝唑的溶解性能并降低其口服给药的胃肠道反应，改善其金属异味，提高患者服药的顺应性。

因此，本发明优选地将所述药物组合物制备成固体脂质微粒形式。

更优选地，所述固体脂质微粒通过反溶剂沉淀法制备获得。

进一步地，所述药物组合物中还包含其他有效成分。

更进一步地，所述其他有效成分包括硝苯地平、维拉帕米、阿司匹林、氯吡格雷、美托洛尔、阿托伐他汀。所述其他有效成分优选为硝苯地平。

本发明的第三方面是提供所述药物组合物在制备用于治疗和/或预防心肌缺血的药物中的用途。

进一步地，所述心肌缺血是急性心肌缺血。

下面将结合具体实施例对本发明的优选实施方案及其效果进行描述。但是，应当理解，这些描述只是用于说明性的目的，而绝非对本发明的权利要求构成任何限制。

具体实施方式

实施例1：塞克硝唑固体脂质微粒的制备

通过反溶剂沉淀法制备负载塞克硝唑的固体脂质微粒(SLM)。

制备方法：将25毫克塞克硝唑和100毫克棕榈酸甘油酯PrecirolATO5加到100毫升异丙醇中，加热到45℃，直到固体完全溶解。同时，将100mL去离子水加热至相同温度。然后使用配备有251/2G规格针头的注射器在500rpm的恒定搅拌下将有机溶液注入水中。在室温下继续搅拌15分钟。加入0.1M盐酸将所得浆液的pH值调节至1.5，以使沉淀的颗粒絮凝。将聚集的颗粒在Centrific^TM离心机上以最大速度离心20分钟。然后除去上清液，并将沉淀用去离子水洗涤两次。使用冷冻干燥机过夜，通过冷冻干燥分离沉淀的颗粒，即得塞克硝唑固体脂质微粒。

实施例2：塞克硝唑固体脂质微粒的制备

通过反溶剂沉淀法制备负载塞克硝唑的固体脂质微粒(SLM)。

制备方法：将45毫克塞克硝唑和150毫克山嵛酸甘油酯加到100毫升异丙醇中，加热到70℃，直到固体完全溶解。同时，将100mL去离子水加热至相同温度。然后使用配备有251/2G规格针头的注射器在500rpm的恒定搅拌下将有机溶液注入水中。在室温下继续搅拌25分钟。加入0.1M盐酸将所得浆液的pH值调节至2.0，以使沉淀的颗粒絮凝。将聚集的颗粒在Centrific^TM离心机上以最大速度离心25分钟。然后除去上清液，并将沉淀用去离子水洗涤两次。使用冷冻干燥机过夜，通过冷冻干燥分离沉淀的颗粒，即得塞克硝唑固体脂质微粒。

实施例3：塞克硝唑固体脂质微粒的制备

通过反溶剂沉淀法制备负载塞克硝唑的固体脂质微粒(SLM)。

制备方法：将45毫克塞克硝唑和150毫克辛葵酸甘油酯加到100毫升异丙醇中，加热到55℃，直到固体完全溶解。同时，将100mL去离子水加热至相同温度。然后使用配备有251/2G规格针头的注射器在500rpm的恒定搅拌下将有机溶液注入水中。在室温下继续搅拌15分钟。加入0.1M盐酸将所得浆液的pH值调节至1.5以使沉淀的颗粒絮凝。将聚集的颗粒在Centrific^TM离心机上以最大速度离心20分钟。然后除去上清液，并将沉淀用去离子水洗涤两次。使用冷冻干燥机过夜，通过冷冻干燥分离沉淀的颗粒，即得塞克硝唑固体脂质微粒。

药效学实验

1.实验动物：

SD大鼠50只，体重250g左右，雌雄各半。

2.实验分组：

50只大鼠被随机分为5组，每组10只。其中组A为空白对照组，不进行造模处理，以5ml/kg/d给予0.9％氯化钠溶液灌胃；组B为缺血对照组，造模后以5ml/kg/d给予0.9％氯化钠溶液灌胃；组C为小剂量塞克硝唑组，造模后以4mg/kg/d给予实施例1制备的塞克硝唑固体脂质微粒混悬液灌胃，混悬液以生理盐水临灌胃前配制；组D为大剂量塞克硝唑组，造模后以10mg/kg/d给予实施例1制备的塞克硝唑固体脂质微粒混悬液灌胃，混悬液以生理盐水临灌胃前配制；组E为阳性药对照组，造模后以4mg/kg/d给予硝苯地平灌胃；组F为塞克硝唑(给药剂量为4mg/kg/d)+硝苯地平组(给药剂量为4mg/kg/d)。

3.实验方法：

各组腹腔内注射戊巴比妥钠60mg/kg麻醉，将大鼠仰位固定于手术台，自左侧3-4肋间开胸，暴露心脏，于肺动脉圆锥及左心房间找出左冠脉前降支，在冠脉下穿以0号线，立即结扎冠脉(组A除外)，缝合后，按照实验分组分别进行灌胃10天，末次灌胃后1小时，取血、离心、低温保存，用于检测各生化指标；注射氯化钾5ml，心跳停止后，取大鼠心脏，取左心室心肌组织制成2-3mm的切片，用0.5％的氯硝基四氮哩蓝(NBT)染色，称重，计算梗死心肌占左室重量的百分率。

4.检测指标及方法：

按心肌大体标本NBT染色法计算心梗面积；采用邻苯三酚自氧化法测定血清SOD活力；采用硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛(MDA)含量；磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)按试剂盒(北京中生生物工程高技术公司生产)说明测定。所有数据均以

表示，采用组间t检验进行统计分析处理。

5.实验结果：

5.1大鼠心肌梗死面积的变化：

实验结果显示，4组大鼠心肌梗死面积百分率间差别有非常显著性意义(P<0.01,见表1)。塞克硝唑组、阳性药物组大鼠的心肌梗死面积百分率明显低于缺血对照组；塞克硝唑组与阳性药物组间无差别，说明塞克硝唑具有明显缩小梗死心肌面积的作用；同时塞克硝唑与硝苯地平的联合应用，对缩小心肌梗死面积的作用最为明显，效果最优。

表1 4组大鼠心肌梗死面积的百分率(

％)

注：*表示与组B比，P<0.01。

5.2大鼠血清中MDA、SOD以及磷酸肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量的变化：

实验结果显示：缺血对照组中血清MDA含量较空白对照组明显升高，SOD含量显著降低，这说明在心肌缺血的大鼠中伴有氧化应激损伤的发生。大剂量和小剂量塞克硝唑组与缺血对照组相比，SOD活性均明显升高(P<0.01)，MDA含量明显降低(P<0.01)，这说明塞克硝唑可明显保护心肌组织SOD活性,减少MDA生成,减轻心肌氧化应激损伤；此外，大剂量和小剂量塞克硝唑组也显示出可显著抑制心肌CK和LDH的释放和血清CK和LDH的升高。同时，大剂量和小剂量塞克硝唑组与阳性药对照组比较,其差异也有显著性(P<0.05)；同时塞克硝唑与硝苯地平的联合应用后，能够显著提高心肌缺血大鼠血清中SOD活性，降低MDA生成，这提示二者联合应用能够更好的在临床使用中从不同靶点缓解心肌缺血症状，保护心肌。见表2和表3。

表2塞克硝唑对心肌缺血大鼠血清中SOD和MDA含量的影响(

n＝10)

注：*表示与组B比，P<0.01；#表示与组E比，P<0.05；Δ表示与组A比，P<0.01。

表3塞克硝唑对心肌缺血大鼠血清中CK和LDH含量的影响(

n＝10)

注：*表示与组B比，P<0.01；#表示与组E比，P<0.05；Δ表示与组A比，P<0.01。

以上结果提示:塞克硝唑对实验性心肌缺血性损伤具有保护作用，能够明显缩小心肌梗死面积，减轻心肌受损程度，降低血清MDA含量，增加SOD活性酶含量，能够有效的抗急性心肌缺血，保护心肌，从而改善心肌缺血的症状。

Claims (10)

1.塞克硝唑在制备治疗和/或预防心肌缺血的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述心肌缺血是急性心肌缺血。

3.一种用于治疗和/或预防心肌缺血的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物包含塞克硝唑和药学上可接受的赋形剂。

4.根据权利要求3所述的药物组合物，其特征在于：所述药学上可接受的赋形剂包含固体脂质材料。

5.根据权利要求4所述的药物组合物，其特征在于：所述固体脂质材料选自棕榈酸甘油酯、山嵛酸甘油酯或辛葵酸甘油酯中的一种或多种。

6.根据权利要求4或5所述的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物制备成固体脂质微粒形式。

7.根据权利要求6所述的药物组合物，其特征在于：所述固体脂质微粒通过反溶剂沉淀法制备获得。

8.根据权利要求3-7任意一项所述的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物中还包含其他有效成分，所述其他有效成分包括硝苯地平、维拉帕米、阿司匹林、氯吡格雷、美托洛尔、阿托伐他汀，优选地，所述其他有效成分为硝苯地平。

9.权利要求3-8任意一项所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防心肌缺血的药物中的用途。

10.根据权利要求9所述的用途，其特征在于：所述心肌缺血是急性心肌缺血。