CN114835675A - 一种用于治疗心肌缺血的药物及其用途 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种用于治疗心肌缺血的药物及其用途。所述药物具有式I所示结构，能够明显减少心肌梗死面积，减少血清CK、AST及LDH活性。因此可作为预防和治疗心肌缺血的药物，并且可用于抗心肌缺血再灌注损伤。

Description

一种用于治疗心肌缺血的药物及其用途

技术领域

本发明涉及心血管药物领域，具体而言，本发明涉及一种用于治疗心肌缺血的药物及其用途。

背景技术

心肌缺血(myocardial ischemia)也称缺血性心脏病，是指由于冠状动脉狭窄从而使得心脏系统中的大量血氧和其他营养素的供给不平衡而产生的造成人体心脏系统无法达到保证其正常生命运行和恢复工作的某种特殊性的病理反应状态。心肌缺血发病高、死亡高并且难以治愈，已发展成为直接危害和严重影响人类生命健康生活的主要诱发疾病之一，位居当今世界十大心血管疾病的主要死亡诱因之首，是目前世界医学领域研究的重点。

心肌缺血的治疗一直是以西医、西药为主，常用的治疗药物包括有机硝酸酯类、钙通道阻滞剂、肾上腺素能β受体阻滞剂、心肌代谢药物等，但这些药物在治疗常常导致一些不良反应。而中医、中药在心肌缺血的治疗上也发挥着重要作用，例如速效救心丸、丹参制剂、复方银杏制剂等中成药在治疗心肌缺血上也具有一定疗效。实际上，从中药材中提取活性成分应用在预防和治疗心血管疾病上的研究一直倍受关注，例如，多种黄酮类化合物已被验证具备较好疗效，并且中药活性化合物作为先导化合物开发活性药物具备天然优势，是目前新药开发的重要来源之一。

发明内容

本发明提供了一种用于治疗心肌缺血的药物，所述药物对于心肌缺血有较好的预防和治疗作用；本发明还提供所述药物的用途，以及其制备方法。

因此，本发明提供了一种式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体：

其中，

R₀选自-C_3-6环烷基、苯基、苄基；

R₁、R₂相同或不同地选自-OH、-OC_1-4烷基、-O卤代C_1-4烷基；

R₁'、R₂'相同或不同地选自-H、-C_1-4烷基、-卤代C_1-4烷基；

n选自1、2、3或4，n'选自0、1、2或3，并且n和n'之和不超过5；

m选自1、2、3或4，m'选自0、1、2或3，并且m和m'之和不超过5。

本发明还提供了一种包括式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体的药物组合物。

本发明还提供了一种包括式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体以及对于心肌缺血的治疗有帮助的其他药物的组合药物。

本发明还提供了式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体在制备药物中的应用，以及其预防和治疗疾病的用途。

本发明还提供了本发明式I所示的化合物的制备方法。

有益效果

本发明的式I所示的化合物在预防和治疗心肌缺血上具有显著作用，能够明显减少心肌梗死面积，减少血清CK、AST及LDH活性。因此可作为预防和治疗心肌缺血的药物，并且可用于抗心肌缺血再灌注损伤。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明的保护范围。

在本文中，术语治疗和其它类似的同义词包括缓解、减轻或改善疾病或病症症状，预防其它症状，改善或预防导致症状的潜在代谢原因，抑制疾病或病症，例如阻止疾病或病症的发展，缓解疾病或病症，使疾病或病症好转，缓解由疾病或病症导致的症状，或者中止疾病或病症的症状，此外，该术语包含预防的目的。该术语还包括获得治疗效果和/或预防效果。所述治疗效果是指治愈或改善所治疗的潜在疾病。此外，对与潜在疾病相关的一种或多种生理症状的治愈或改善也是治疗效果，例如尽管患者可能仍然受到潜在疾病的影响，但观察到患者情况改善。就预防效果而言，可向具有患特定疾病风险的患者施用所述组合物，或者即便尚未做出疾病诊断，但向出现该疾病的一个或多个生理症状的患者施用所述组合物。

在本文中，术语药学上可接受的是指不影响本申请化合物的生物活性或性质的物质(如载体或辅剂)，并且相对无毒，即该物质可施用于个体而不造成不良的生物反应或以不良方式与组合物中包含的任意组分相互作用。

在本文中，所述卤代是指被氟、氯、溴、碘中的至少一个或多个取代。

本发明提供了一种式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体：

其中，

R₀选自-C_3-6环烷基、苯基、苄基；

R₁、R₂相同或不同地选自-OH、-OC_1-4烷基、-O卤代C_1-4烷基；

R₁'、R₂'相同或不同地选自H、-C_1-4烷基、-卤代C_1-4烷基；

n选自1、2、3或4，n'选自0、1、2或3，并且n和n'之和不超过5；

m选自1、2、3或4，m'选自0、1、2或3，并且m和m'之和不超过5。

优选的，R₀选自环丙基、环丁基；

R₁、R₂相同或不同地选自-OH、甲氧基、乙氧基；

R₁'、R₂'相同或不同地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基；

n选自1、2或3，n'选自0、1或2；

m选自1、2或3，m'选自0、1或2。

更优选的，R₀选自环丙基；

R₁、R₂均选自-OH；

R₁'、R₂'相同或不同地选自H、甲基；

n选自1、2或3，n'选自0、1或2；

m选自1、2或3，n'选自0、1或2。

更优选的，R₀选自环丙基；

R₁、R₂均选自-OH；

R₁'、R₂'均选自-H；

n选自1或2，n'选自0；

m选自1或2，m'选自0。

优选的，式I所示的化合物选自：

以上列举了本发明式I所示的化合物的一些具体化学结构，但本发明不局限于所列的这些化学结构，凡是以式I所示的化合物为基础，取代基为如上所限定的基团都应包含在内。

本发明的式I所示的化合物也可以以与无机或有机酸成盐，以药学上可接受的盐的形式使用。所述无机或有机酸例如为盐酸、氢溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、乙酸、乙醇酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、丁二酸、戊二酸、富马酸、苹果酸、扁桃酸、酒石酸、柠檬酸、抗坏血酸、棕榈酸、马来酸、羟基马来酸、苯甲酸、羟基苯甲酸、苯乙酸、肉桂酸、水杨酸、甲磺酸、苯磺酸和甲苯磺酸。

本发明的化合物可以存在特定的几何或立体异构体形式，包括(-)-和(+)-对映体、(R)-和(S)-对映体、非对映异构体、(D)-异构体、(L)-异构体，及其外消旋混合物和其他混合物，例如对映异构体或非对映体富集的混合物，所有这些混合物都属于本发明的范围之内。

本发明还提供了一种包括式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体的药物组合物。

优选的，所述药物组合物包括药学上可接受的载体、赋形剂、辅剂。

本发明的药物组合物可以按照常规方法配制用于口服和肠胃外给药，包括静脉内、腹膜内、皮下、直肠和局部给药途径。用于给药的组合物可以采取各种形式，例如片剂、粉剂、软和硬明胶胶囊、水溶液、悬浮液、乳剂、糖浆、颗粒剂、气溶胶剂、无菌水溶液、无菌粉末、非水溶液和冻干剂。

可以通过将活性成分与药学上可接受的载体、赋形剂、辅剂混合来制备本发明的口服给药的药物组合物。载体、赋形剂、辅剂的实例是稀释剂、崩解剂、填充剂和增量剂、粘合剂、以及润滑剂、润湿剂等。另外还包括常规的添加剂，例如着色剂、调味剂、甜味剂、防腐剂等。

本发明化合物及其组合物的精确剂量和给药方案将依赖于化合物本身的生物活性、患者的年龄、体重和性别、接受药物施用的个体的需要、痛苦或需要的程度以及执业医师的判断。通常，肠胃外给药要求比更依赖于吸收的其它给药方法的剂量低。然而，对于人而言剂量优选为0.001-10mg/kg体重。通常，经肠道和肠胃外给药的剂量将在每天0.1至1000mg的总活性成分的范围内。

本发明还提供了一种包括式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体以及对于心肌缺血的治疗有帮助的其他药物的组合药物。

本发明的式I所示的化合物可以单独使用，也可以与其他治疗剂联合使用。联合治疗可以提供加和作用或者协同作用，当产生协同作用时，是指活性成分一起使用时达到的效果大于分别使用所述化合物所产生效果的加和。

所述其他药物包括有机硝酸酯制剂、钙通道阻滞剂、肾上腺素能β受体阻滞剂、抗血小板药物、调整血脂药物或抗凝药物中的至少一种，但不限于此。

本发明还提供了式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体在制备药物中的应用。

优选的，所述药物用于预防和治疗心肌缺血。

优选的，所述药物用于抗心肌缺血再灌注损伤。

本发明还提供了式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体预防和治疗心肌缺血的用途。

本发明还提供了式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体抗心肌缺血再灌注损伤的用途。

本发明还提供了本发明式I所示的化合物的制备方法，以R₁、R₂选自-OH为例，其包括以下步骤：

步骤1：合成中间体b

原料a与羟基保护试剂反应生成羟基被保护的中间体b；

步骤2：合成中间体d

原料c与硫醇在碱的作用下反应生成中间体d；

步骤3：合成中间体e

原料b与原料d在碱的作用下反应生成中间体e；

步骤4：合成中间体f

中间体e经还原生成中间体f；

步骤5：合成式I所示的化合物

中间体e在酸的存在下环合，然后脱保护，得到式I所示的化合物；

其中，X选自-Cl或-Br，R选自-C_3-6烷基，PG表示羟基保护基团，R₁、R₂、R₁'、R₂'、n、m、n'、m'如本文所述。

优选的，步骤1所述羟基保护试剂选自酰基类保护试剂、醚类保护试剂、硅醚类保护试剂、缩醛类保护试剂中的至少一种。更优选的，所述羟基保护试剂为氯甲基甲醚(MOMCl)。

优选的，步骤2的碱是强碱，选自KOH、NaOH、NaH中的至少一种。

优选的，步骤3的碱选自双(三甲基硅基)氨基锂、双(三甲基硅基)氨基钠、双(三甲基硅基)氨基钾中的至少一种。

优选的，步骤4所述还原的还原剂选自NaBH₄、LiAlH₄中的至少一种。

优选的，步骤5所述酸为三氟乙酸；所述脱保护在酸的作用下进行，所述酸选自浓盐酸、对甲苯磺酸、甲磺酸中的至少一种，并且所述脱保护在升高的温度例如回流下进行。

优选的，R选自异丙基或叔丁基。

另外，当R₁、R₂不全为-OH时或者不为-OH，可类似的选择性保护羟性，或者省略羟基保护及脱保护的步骤，此为本领域技术人员所熟知。

以下将对发明的优选实例进行详细描述。所举实例是为了更好地对发明内容进行，并不是发明内容仅限于实例。根据发明内容对实施方案的非本质的改进和调整，仍属于发明范畴。

下面实施例中的实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。实施例中未注明具体技术或条件者，按照本领域内的文献所描述的技术或条件，或者按照产品说明书进行。

实施例1：化合物1的制备

步骤1：合成中间体1-b

将化合物1-a(26.0g，100mmol)溶于CH₂Cl₂(500ml)中，搅拌下连续加入N,N-二异丙基乙胺(DIEA，155g，1.2mol)和氯甲基甲醚(MOMCl，48g，600mmol)，然后在室温下搅拌10h，反应结束后加入饱和NH₄Cl水溶液(600ml)，充分混合后静置分层，有机相用水、盐水各洗涤一次，再用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂得到中间体1-b，43.5g。

步骤2：合成中间体1-d

将粉末状的KOH(6.2g，110mmol)和叔丁基硫醇(11.7g，130mmol)加入到DMSO(30ml)中，搅拌下加入2-氯-4-环丙基苯甲醛(18.0g，100mmol)，并逐渐将温度升至120℃，添加完毕后，降温到110℃并搅拌反应6h。反应结束后，冷却至室温，加入乙酸乙酯(500ml)和水(800ml)萃取，静置分层，有机相用水洗涤，再用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂得到中间体1-d，22.7g。

步骤3：合成中间体1-e

将步骤1的中间体1-b溶于四氢呋喃(300ml)中，冷却到-78℃，滴加入双(三甲基硅基)氨基钠(2M在四氢呋喃中，50mL)，搅拌15min后加入步骤2的中间体1-d，自然升至室温，再搅拌反应2h。随后加入饱和NaCl溶液(120ml)，静置分层，水相用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并有机相，用无水Na₂SO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用乙醇重结晶得到中间体1-e，53.5g，收率82％。

步骤4：合成中间体1-f

在氮气保护下，将LiAlH₄(3.7g，99mmol)溶于THF(70ml)中，置于0℃下搅拌；将步骤3的中间体1-e溶于100ml THF中，在搅拌下逐滴加入，在0℃下反应1h；加水200ml终止反应，乙酸乙酯(200ml×3)萃取，合并有机相，用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用二氯甲烷和石油醚体积比2：1混合溶剂重结晶，得到中间体1-f，47.7g，收率89％。

步骤5：合成化合物1

将体积比为1：20的三氟乙酸(TFA)和CH₂Cl₂混合溶剂(300ml)冷却至0℃，加入步骤4的中间体1-f，然后在0℃下继续搅拌反应20min；随后，加入对甲苯磺酸(6.8g，40mmol)，并回流搅拌10h，加入饱和NaHCO₃水溶液(95mL)，充分混合后静置分层，有机相用盐水洗涤，用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用硅胶柱纯化，洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚体积比为1：10的混合溶剂，得到白色晶状产物的化合物1，22.7g，收率77％。

ESI-MS：405.2[M+H]⁺。

元素分析：理论元素含量(％)C₂₄H₂₀O₄S：C,71.27；H,4.98；O,15.82；S,7.93；实测元素含量(％)：C,71.23；H,4.97；O,15.87；S,7.97。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.71(s,1H),8.35(s,1H),8.11(s,1H),7.43(d,J＝8.5Hz,1H),7.39(s,1H),7.16–7.08(m,2H),7.00–6.92(m,2H),6.82(s,1H),6.76(d,J＝8.8Hz,1H),6.44(d,J＝8.5Hz,1H),6.32–6.30(m,2H),5.86(s,1H),2.50(quint,J＝5.7Hz,1H),1.05–0.90(m,4H)。

实施例2：化合物2的制备

步骤1：合成中间体2-b

将化合物2-a(24.4g，100mmol)溶于CH₂Cl₂(500ml)中，搅拌下连续加入N,N-二异丙基乙胺(DIEA，116g，0.9mol)和氯甲基甲醚(MOMCl，36g，450mmol)，然后在室温下搅拌8h，反应结束后加入饱和NH₄Cl水溶液(600ml)，充分混合后静置分层，有机相用水、盐水各洗涤一次，再用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂得到中间体2-b，37g。

步骤2：合成中间体1-d

将粉末状的KOH(6.2g，110mmol)和叔丁基硫醇(11.7g，130mmol)加入到DMSO(30ml)中，搅拌下加入2-氯-4-环丙基苯甲醛(18.0g，100mmol)，并逐渐将温度升至120℃，添加完毕后，降温到110℃并搅拌反应6h。反应结束后，冷却至室温，加入乙酸乙酯(500ml)和水(800ml)萃取，静置分层，有机相用水洗涤，再用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂得到中间体1-d，22.6g。

步骤3：合成中间体2-e

将步骤1的中间体2-b溶于四氢呋喃(300ml)中，冷却到-78℃，滴加入双(三甲基硅基)氨基钠(2M在四氢呋喃中，50mL)，搅拌15min后加入步骤2的中间体1-d，自然升至室温，再搅拌反应1.5h。随后加入饱和NaCl溶液(120ml)，静置分层，水相用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并有机相，用无水Na₂SO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用乙醇重结晶得到中间体2-e，50.3g，收率85％。

步骤4：合成中间体2-f

在氮气保护下，将LiAlH₄(3.8g，103mmol)溶于THF(70ml)中，置于0℃下搅拌；将步骤3的中间体2-e溶于100ml THF中，在搅拌下逐滴加入，在0℃下反应1.5h；加水200ml终止反应，乙酸乙酯(200ml×3)萃取，合并有机相，用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用二氯甲烷和石油醚体积比2：1混合溶剂重结晶，得到中间体2-f，46.0g，收率91％。

步骤5：合成化合物2

将体积比为1：20的三氟乙酸(TFA)和CH₂Cl₂混合溶剂(300ml)冷却至0℃，加入步骤4的中间体2-f，然后在0℃下继续搅拌反应20min；随后，加入对甲苯磺酸(5.1g，30mmol)，并回流搅拌10h，加入饱和NaHCO₃水溶液(75mL)，充分混合后静置分层，有机相用盐水洗涤，用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用硅胶柱纯化，洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚体积比为1：15的混合溶剂，得到浅白色晶状产物的化合物2，24.0g，收率80％。

ESI-MS：389.1[M+H]⁺。

元素分析：理论元素含量(％)C₂₄H₂₀O₃S：C,74.20；H,5.19；O,12.36；S,8.25；实测元素含量(％)：C,74.24；H,5.20；O,12.43；S,8.22。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.53(s,1H),8.73(s,1H),8.69(s,1H),7.42(d,J＝8.7Hz,1H),7.38(s,1H),7.21–7.15(m,2H),7.15–7.08(m,1H),6.95(s,1H),6.83–6.75(m,2H),6.72–6.64(m,2H),6.61(m,1H),5.90(s,1H),2.49(quint,J＝5.7Hz,1H),1.05–0.90(m,4H)。

实施例3：化合物3的制备

步骤1：合成中间体3-b

将化合物3-a(27.4g，100mmol)溶于CH₂Cl₂(500ml)中，搅拌下连续加入N,N-二异丙基乙胺(DIEA，155g，1.2mol)和氯甲基甲醚(MOMCl，48g，600mmol)，然后在室温下搅拌11h，反应结束后加入饱和NH₄Cl水溶液(600ml)，充分混合后静置分层，有机相用水、盐水各洗涤一次，再用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂得到中间体3-b，44.1g。

步骤2：合成中间体1-d

将粉末状的KOH(6.2g，110mmol)和叔丁基硫醇(11.7g，130mmol)加入到DMSO(30ml)中，搅拌下加入2-氯-4-环丙基苯甲醛(18.0g，100mmol)，并逐渐将温度升至120℃，添加完毕后，降温到110℃并搅拌反应6h。反应结束后，冷却至室温，加入乙酸乙酯(500ml)和水(800ml)萃取，静置分层，有机相用水洗涤，再用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂得到中间体1-d，22.4g。

步骤3：合成中间体3-e

将步骤1的中间体3-b溶于四氢呋喃(300ml)中，冷却到-78℃，滴加入双(三甲基硅基)氨基钠(2M在四氢呋喃中，50mL)，搅拌15min后加入步骤2的中间体1-d，自然升至室温，再搅拌反应3h。随后加入饱和NaCl溶液(120ml)，静置分层，水相用乙酸乙酯萃取(100ml×3)，合并有机相，用无水Na₂SO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用乙醇重结晶得到中间体3-e，52.6g，收率79％。

步骤4：合成中间体3-f

在氮气保护下，将LiAlH₄(3.7g，99mmol)溶于THF(70ml)中，置于0℃下搅拌；将步骤3的中间体3-e溶于100ml THF中，在搅拌下逐滴加入，在0℃下反应1.5h；加水200ml终止反应，乙酸乙酯(200ml×3)萃取，合并有机相，用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用二氯甲烷和石油醚体积比2：1混合溶剂重结晶，得到中间体3-f，45.4g，收率86％。

步骤5：合成化合物3

将体积比为1：20的三氟乙酸(TFA)和CH₂Cl₂混合溶剂(300ml)冷却至0℃，加入步骤4的中间体3-f，然后在0℃下继续搅拌反应20min；随后，加入对甲苯磺酸(6.8g，40mmol)，并回流搅拌12h，加入饱和NaHCO₃水溶液(100mL)，充分混合后静置分层，有机相用盐水洗涤，用无水MgSO₄干燥，过滤，蒸除溶剂后用硅胶柱纯化，洗脱剂为乙酸乙酯和石油醚体积比体积比为1：12的混合溶剂，得到白色粉末状产物的化合物3，23.3g，收率82％。

ESI-MS：419.2[M+H]⁺。

元素分析：理论元素含量(％)C₂₅H₂₂O₄S：C,71.75；H,5.30；O,15.29；S,7.66；实测元素含量(％)：C,71.79；H,5.33；O,15.24；S,7.60。

¹H NMR(400MHz,Chloroform-d)δ9.15(s,1H),8.33(s,1H),7.43(d,J＝8.5Hz,1H),7.39(s,1H),7.15–7.08(m,1H),7.00(s,1H),6.98–6.92(m,2H),6.82(s,1H),6.75(d,J＝8.8Hz,1H),6.73(s,1H),6.64(s,1H),6.32(s,1H),5.94(s,1H),2.18(s,3H),2.49(quint,J＝5.7Hz,1H),1.05–0.90(m,4H)。

药效实施例：急性心肌梗死模型测定体内抗心肌缺血作用

药物：化合物1、2、3，用5％DMSO、2％Tween80及93％的生理盐水配制成20mg/ml的混悬药液，使用前超声混匀；各大鼠均给予100μl/100g的给药体积，给药剂量均为20mg/kg·d。

将体重220g左右的清洁级雄性SD大鼠45只(购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司)进行适应性饲养7天，然后按照体重水平随机平均分成5组，即假手术组、模型组、给药组(化合物1组、化合物2组、化合物3组)，每组各分配9只。给药组以20mg/kg·d的剂量灌胃测试化合物1-3，共给药5天。假手术组和模型组灌胃同等体积的溶剂。大鼠末次给药后30min用乙醚麻醉处理后进行实验，待大鼠翻正反射消失，取仰卧位将其四肢和头部固定在操作台上，颈部和胸部皮肤进行备皮消毒，铺无菌巾。气管插管进行机械通气，连接呼吸机进行机械通气。鼠四肢通过针形电极连接心电图机进行心电监护。于胸骨旁左侧切开，分离皮肤、肌肉，于第3～4肋间暴露心脏，分离心包膜，暴露冠脉前降支，用丝线打活结的方法结扎冠脉前降支，观察结扎远端的心室肌变色，同时心电监护可见I导联ST段抬高，提示缺血操作成功，随后关闭胸腔。假手术组实验鼠只分离暴露心脏，不结扎左前降支。结扎冠脉24h后，以1％戊巴比妥钠50mg/kg腹腔注射麻醉，腹主动脉插管取血，用COBAS-FARA自动生化分析仪测血清CK(肌酸磷酸激酶)、AST(谷草转氨酶)及LDH(乳酸脱氢酶)活性。取血后剖取大鼠心脏，剔除血管和脂肪等非心肌组织，称重，将左心室心肌横切4～5片(1cm/片)，心肌切片放在1％TTC溶液中，置37℃孵箱中5～20分钟，并不时摇晃或搅拌染色使之与心肌充分接触。用生理盐水冲洗去多余染料，剪去各心肌切片被染色的非梗死区心肌，把未染色的梗死心肌称重，用梗死心肌与左心室湿重的百分比计算心肌梗死面积(MIS)。用SPSS10.0统计软件处理实验数据。结果如表1所示。

试验结果表明，模型组大鼠心肌大面积梗死，血清CK、AST及LDH活性显著增加，提示心肌缺血的发生，按照上述方法造模成功。而在给予本发明化合物1-3的情况下，大鼠心肌梗死的面积明显缩小，血清CK、AST及LDH活性降低，提示本发明化合物对于心肌缺血有较好的预防和治疗作用。

表1：心肌梗死大鼠的MIS、CK、AST、LDH

对象	存活数量	MIS(％)	CK(u/L)	AST(u/L)	LDH(u/L)
						化合物1组	9	17.42±2.21<sup>＊＊</sup>	770.45±98.11<sup>＊＊</sup>	802.25±87.24<sup>＊</sup>	1837.22±254.01<sup>＊＊</sup>
化合物2组	9	19.88±2.57<sup>＊＊</sup>	802.41±102.12<sup>＊＊</sup>	859.44±100.39<sup>＊</sup>	1917.54±199.88<sup>＊＊</sup>
						化合物3组	9	20.93±2.45<sup>＊＊</sup>	832.11±62.55<sup>＊＊</sup>	872.36±98.32<sup>＊</sup>	1965.74±276.12<sup>＊＊</sup>
假手术组	9	2.97±0.33	689.25±69.77	786.31±88.12	1597.67±203.56
						模型组	8	40.56±6.22<sup>##</sup>	1341.58±187.22<sup>##</sup>	1239.36±177.40<sup>##</sup>	2881.28±339.02<sup>##</sup>

注：^＊P＜0.01，^＊＊P＜0.001vs模型组；^##P＜0.001vs假手术组

以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。

Claims (10)

1.一种式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体：

其中，

R₀选自-C_3-6环烷基、苯基、苄基；

R₁、R₂相同或不同地选自-OH、-OC_1-4烷基、-O卤代C_1-4烷基；

R₁'、R₂'相同或不同地选自-H、-C_1-4烷基、-卤代C_1-4烷基；

n选自1、2、3或4，n'选自0、1、2或3，并且n和n'之和不超过5；

m选自1、2、3或4，m'选自0、1、2或3，并且m和m'之和不超过5。

2.根据权利要求1所述的式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体，其特征在于，

R₀选自环丙基、环丁基；

R₁、R₂相同或不同地选自-OH、甲氧基、乙氧基；

R₁'、R₂'相同或不同地选自-H、甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、仲丁基、叔丁基；

n选自1、2或3，n'选自0、1或2；

m选自1、2或3，m'选自0、1或2。

3.根据权利要求1所述的式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体，其特征在于，

R₀选自环丙基；

R₁、R₂均选自-OH；

R₁'、R₂'相同或不同地选自H、甲基；

n选自1、2或3，n'选自0、1或2；

m选自1、2或3，n'选自0、1或2。

4.根据权利要求1所述的式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体，其特征在于，

R₀选自环丙基；

R₁、R₂均选自-OH；

R₁'、R₂'均选自-H；

n选自1或2，n'选自0；

m选自1或2，m'选自0。

5.根据权利要求1所述的式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体，其特征在于，式I所示的化合物选自：

6.一种包括根据权利要求1-5任一项所述的式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体的药物组合物。

7.一种包括式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体以及对于心肌缺血的治疗有帮助的其他药物的组合药物。

8.根据权利要求1-5任一项所述的式I所示的化合物、其药学上可接受的盐、立体异构体在制备药物中的应用，所述药物用于预防和治疗心肌缺血，或用于抗心肌缺血再灌注损伤。

9.根据权利要求1所述的式I所示的化合物的制备方法，其包括以下步骤：

步骤1：合成中间体b

原料a与羟基保护试剂反应生成羟基被保护的中间体b；

步骤2：合成中间体d

原料c与硫醇在碱的作用下反应生成中间体d；

步骤3：合成中间体e

原料b与原料d在碱的作用下反应生成中间体e；

步骤4：合成中间体f

中间体e经还原生成中间体f；

步骤5：合成式I所示的化合物

中间体e在酸的存在下环合，然后脱保护，得到式I所示的化合物；

其中，X选自-Cl或-Br，R选自-C_3-6烷基，PG表示羟基保护基团，R₁、R₂选自-OH，R₁'、R₂'、n、m、n'、m'如权利要求1所述。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，

步骤1所述羟基保护试剂选自酰基类保护试剂、醚类保护试剂、硅醚类保护试剂、缩醛类保护试剂中的至少一种；

步骤2的碱选自KOH、NaOH、NaH中的至少一种；

步骤3的碱选自双(三甲基硅基)氨基锂、双(三甲基硅基)氨基钠、双(三甲基硅基)氨基钾中的至少一种；

步骤4所述还原的还原剂选自NaBH₄、LiAlH₄中的至少一种；

步骤5所述酸为三氟乙酸；所述脱保护在酸的作用下进行。