CN111713582A - 化橘红茶的应用及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于茶类应用技术领域,具体涉及化橘红茶的应用,更具体的,涉及化橘红茶在制备缓解非酒精性脂肪肝药物或食品中的应用。化橘红茶应用于缓解非酒精性脂肪肝产品的制备中,尤其是化橘红茶在制备缓解非酒精性脂肪肝药物/食品中的应用,是本发明所要重点保护的范围。化橘红茶为化橘红红茶、化橘红黄茶、化橘红绿茶中的任一种。本发明所提供的化橘红茶,能显著地降低HepG 2细胞模型中脂质沉积,能够通过调控AMPK信号通路,上调p-AMPK/AMPK,p-ACC/ACC,CPT-1以促进脂质氧化,下调SREBP1c和FAS蛋白表达以抑制脂肪合成,从而达到减少肝脏细胞中脂肪沉积的效果,使得由高脂饮食、不良习惯等造成的非酒精性脂肪肝病得到改善,具有明显的缓解非酒精性脂肪肝的作用。
Description
技术领域
本发明属于茶类应用技术领域,具体涉及化橘红茶的应用,更具体的,涉及化橘红茶在制备缓解非酒精性脂肪肝药物或食品中的应用。
背景技术
化橘红是一种名贵中药材,具有散寒燥湿,利气消疾,止咳、健脾消食等功效,有“南方人参”之称。熊萧萧在华中农业大学硕士学位论文中披露:化橘红中含有黄酮、多糖、挥发油、香豆素类化合物以及金属元素;其药理作用研究发现,化橘红具有以下的作用:1镇痛、抗炎、解热;2袪痰、镇咳、抑菌;3抗氧化;4抗癌;5降血糖;6降胆固醇。
刘敏等人在《化浊降脂茶联合当飞利肝宁治疗非酒精性脂肪肝的临床观察》一文中披露,参照组给予当飞利肝宁胶囊(四川美大康药业股份有限公司生产,每粒0.25g)口服,每次4粒,每天3次,观察组在对照组的基础上,加予化浊降脂茶(决明子10g,生山楂6g,化橘红6g,绿萼梅6g,红景天6g,丹参6g)水煎或开水冲泡,代茶频饮,疗程为3个月。结果表明,临床观察显示,化浊降脂茶和当飞利肝宁胶囊联合运用能明显改善患者临床症状,体征,且有修复肝功能和改善血脂代谢的作用,对湿热内蕴型非酒精性单纯性脂肪肝有显著的疗效。
以上的文献中所披露的是浊降脂茶和当飞利肝宁胶囊联合应用,对湿热内蕴型非酒精性单纯性脂肪肝有显著的疗效,而仅采用其中的一味原料比如单用化橘红是否同样能对湿热内蕴型非酒精性单纯性脂肪肝有显著的疗效,或者是将化橘红与其它茶类联合使用,是否能达到上述的疗效,都不得而知。
发明内容
本发明在小青柑加工工艺的基础上,将化橘红与特色红茶品种英红九号相结合,创新地将化橘红与茶叶加工工艺相结合制作出化橘红茶产品,结果表明这种产品在缓解非酒精性脂肪肝中的作用显著。
化橘红茶应用于缓解非酒精性脂肪肝产品的制备中,更具体的,化橘红茶在制备缓解非酒精性脂肪肝药物/食品中的应用,是本发明所要重点保护的范围。
上述的化橘红茶为化橘红红茶、化橘红黄茶、化橘红绿茶中的任一种。这三种化橘红茶均能起到缓解非酒精性脂肪肝的作用,但是三者在具体的应用效果方面具有一定的差异,详见具体实施例中的分析。
所获得的化橘红茶中,主要的活性成分的含量如下:
橘红绿茶中,没食子儿茶素含量为2.16±0.01mg/g;表没食子儿茶素含量为7.77±0.12mg/g;儿茶素含量为5.81±0.19mg/g;表儿茶素含量为13.71±0.24mg/g;表没食子基儿茶素没食子酸酯含量为19.18±0.17mg/g;没食子基儿茶素没食子酸酯含量为4.68±0.09mg/g,没食子酰表儿茶素含量为28.71±0.11mg/g;
橘红红茶中,表没食子儿茶素含量为3.88±0.36mg/g;儿茶素含量为1.22±0.02mg/g;表儿茶素含量为2.94±0.06mg/g;表没食子基儿茶素没食子酸酯含量为2.56±0.03mg/g;没食子基儿茶素没食子酸酯含量为1.04±0.03mg/g,没食子酰表儿茶素含量为4.66±0.05mg/g;
橘红黄茶中,没食子儿茶素含量为2.49±0.04mg/g;表没食子儿茶素含量为7.65±0.07mg/g;儿茶素含量为6.55±0.13mg/g;表儿茶素含量为14.08±0.24mg/g;表没食子基儿茶素没食子酸酯含量为21.43±0.31mg/g;没食子基儿茶素没食子酸酯含量为5.37±0.01mg/g,没食子酰表儿茶素含量为32.78±0.18mg/g。
化橘红红茶、化橘红黄茶、化橘红绿茶减少脂质沉积的作用在0.1-0.8mg/ml范围内呈现剂量依赖关系。
化橘红茶的制备方法,包括以下的步骤:
取化州橘红茶粗粉,加入沸蒸馏水水浴浸提,趁热抽滤茶汤,反复浸提,浓缩茶汤,干燥,获得化橘红茶粉。
上述的制备方法中,优选的,化州橘红茶粗粉与沸蒸馏水的质量体积比为1:18~22;优选的,化州橘红茶粗粉与沸蒸馏水的质量体积比为1:20。
优选的,水浴浸提的温度为80~95℃,时间为20~40min;优选的水浴浸提的温度为90℃,时间为30min。
优选的,抽滤茶汤,反复浸提3次;
优选的,茶汤旋转蒸发浓缩至原来体积的1/12~1/10;
优选的,干燥方式为冷冻干燥或者是喷雾干燥。
上述的制备方法,包括以下的步骤:
取化州橘红茶粗粉(茶粗粉为化州橘红红茶粗粉或化州橘红绿茶粗粉或化州橘红黄茶粗粉,三种不同的茶粗粉均适用于以下的方法),加入沸蒸馏水水浴浸提,橘红茶粗粉与沸蒸馏水的质量体积比为1:18~22,水浴浸提的温度为80~95℃,时间为20~40min,趁热抽滤茶汤,反复浸提3次,浓缩茶汤至原来体积的1/12~1/10,冷冻干燥或喷雾干燥,获得化橘红茶粉。
本发明将化州橘红与茶树品种英红九号茶相结合,制作出化橘红茶:化橘红红茶(BTCM),化橘红黄茶(YTCM),化橘红绿茶(GTCM)。本发明通过分析三种橘红茶的有效成分含量,披露了其缓解非酒精性脂肪肝的作用及其机制。结果表明,三种橘红茶茶多酚、游离氨基酸、酚氨比、咖啡碱的含量在橘红黄茶与橘红绿茶中差异较小,却明显高于橘红红茶中的含量,橘红黄茶中的酯型儿茶素、非酯型儿茶素、总儿茶素含量明显高于橘红绿茶和橘红红茶。三种橘红茶都有明显的降低HepG2细胞模型中脂质沉积的作用,其中橘红黄茶作用略强于橘红黄茶和橘红绿茶;其分子机制为调控AMPK信号通路,上调p-AMPK/AMPK,p-ACC/ACC,CPT-1以促进脂质氧化,下调SREBP1c和FAS蛋白表达以抑制脂肪合成,从而达到减少肝脏细胞中脂肪沉积的效果,使得由高脂饮食、不良习惯等造成的非酒精性脂肪肝病得到改善。化州橘红茶,尤其是化州橘红黄茶和绿茶是对非酒精性脂肪肝具有良好的缓解作用的健康饮品。
本发明的有益效果在于,本发明所提供的化橘红茶,能显著地降低HepG2细胞模型中脂质沉积,能够通过调控AMPK信号通路,上调p-AMPK/AMPK,p-ACC/ACC,CPT-1以促进脂质氧化,下调SREBP1c和FAS蛋白表达以抑制脂肪合成,从而达到减少肝脏细胞中脂肪沉积的效果,使得由高脂饮食、不良习惯等造成的非酒精性脂肪肝病得到改善,具有明显的缓解非酒精性脂肪肝的作用。
附图说明
图1为化橘红茶水提物降低HepG2细胞脂质沉积作用图;
图2为化橘红红茶、绿茶、黄茶对能够降低非酒精性脂肪肝模型HepG2细胞中TC、TG及FFA的含量;
图3为化橘红红茶、绿茶、黄茶能够激活HepG2细胞中AMPK/ACC信号通路;
图4为化橘红红茶、绿茶、黄茶通过调控AMPK/ACC信号通路而缓解非酒精性脂肪肝。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作更进一步的说明,以便本领域的技术人员更了解本发明,但并不因此限制本发明。
实施例1A
化橘红茶水提物的制备
称取一定量的粉碎后的化州橘红茶粗粉,按料液比(W/V)=1:20加入沸蒸馏水在90℃水浴浸提30min,趁热抽滤茶汤,反复浸提3次,茶汤旋转蒸发浓缩至原来体积的1/10,冷冻干燥得到化州橘红茶冻干粉,即橘红茶水提物。
实施例1B
与实施例1A的不同在于,化州橘红茶粗粉为化州橘红绿茶粗粉,制作的产品为化橘红绿茶水提物。
实施例1C
与实施例1A的不同在于,化州橘红茶粗粉为化州橘红黄茶粗粉,制作的产品为化橘红黄茶水提物。
实施例2
对实施例1中所A~C中获得的茶水提物进行检测,检测方法参照如下标准进行:
茶多酚含量:GB/T 31740.2-2015《茶叶中茶多酚和儿茶素类含量的检测方法》;游离氨基酸含量:GB/T 8314-2013《茶游离氨基酸总量的测定》;可溶性糖含量:蒽酮-硫酸比色法;茶黄素、茶红素、茶褐素总量测定:系统比色法。
并且,对于儿茶素、橙皮苷、咖啡碱和没食子酸等单体成分的检测,检测方法如下:
(1)茶汤浸提:称取0.2g粉碎且过筛的茶样,置于10mL离心管中,加入在70℃中预热过的70%甲醇溶液5mL,用玻璃棒充分搅拌均匀,立即移入70℃水浴中,浸提10min(每隔5min搅拌一次),浸提后冷却至室温,3500r/min离心10min,将上清液转移至10mL容量瓶。残渣再用5mL 70%甲醇溶液提取一次,重复以上操作。合并提取液定容至10mL,摇匀,0.45μm过滤膜过滤,待用。
(2)HPLC法检测儿茶素类单体含量:色谱柱:AgilentZORBAX Eclipse XDB-C18柱,150mm×4.6mm;检测波长280nm,检测温度28℃;流动相A:含0.5%乙酸、1%乙腈和2%甲醇的水溶液;流动相B:含0.5%乙酸、10%乙腈和20%甲醇的水溶液;洗脱步骤:在0-30min内,A相由72.5%到20%,B相由27.5%到80%,30min后在5min内,A相由20%恢复到72.5%,B相由80%恢复到27.5%,流速1.0mL/min,进样量为10μL,(B相由80%到27.5%之后,一直持续到40min),以外标法按峰面积进行定量。
(3)样品处理方法:称取一定量的样品粉末,加50%甲醇水溶液溶解,过0.22μm微孔滤膜,得10mg/mL样液。用移液器准确吸取100μL的10mg/mL样液,用色谱级甲醇和超纯水稀释成含80%甲醇的1mg/mL样液,即得供试品溶液,备用。
(4)UPLC法检测橙皮苷类单体含量:超液相色谱仪采用Agilent 1290超高效液相色谱仪,色谱柱为Agilent XDB-C18(1.8μm,2.1×100mm),流动相A相(色谱纯乙腈:色谱纯甲醇=1:1)—B相(超纯水)、梯度浓度时长78min,柱温30℃,进样量5μL,流速0.3mL/min。洗脱步骤:在0-4min内,A相由2.5%到5%,B相由95%到90%;在4-30min内,A相由5%到15%,B相由90%到70%;在30-46min内,A相由15%到22.5%,B相由70%到55%;在46-70min内,A相由22.5%到45%,B相由55%到10%;在70-78min内,A相由45%到2.5%,B相由10%恢复到95%。
检测结果如下:
橘红茶水提物中活性成分含量
三种橘红茶的常规成分检测结果如表1所示,橘红黄茶与橘红绿茶中茶多酚、游离氨基酸和黄酮类含量以及酚氨比明显高于橘红红茶。而可溶性糖的含量在橘红绿茶、橘红黄茶与橘红红茶中的含量依次增加,并且达到显著水平。
三种橘红茶儿茶素、没食子酸与咖啡碱等单体成分检测结果如表2所示,除橘红红茶中GA含量明显高于橘红绿茶和黄茶外,橘红黄茶与橘红绿茶中总儿茶素、酯型儿茶素、非酯型儿茶素、咖啡碱和其他儿茶素各单体的含量均明显高于橘红红茶。其中,EGCG、ECG的含量在橘红黄茶、橘红绿茶和橘红红茶的含量依次显著降低;橘红黄茶与橘红绿茶中的咖啡碱含量均高于在橘红红茶中的含量,并呈现出显著性差异。
表1三种橘红茶的常规成分检测结果
Component | GTCM绿茶 | YTCM黄茶 | BTCM红茶 |
Water content | 8.01±0.03 | 8.16±0.06* | 8.71±0.07* |
Water extracts | 28.06±0.00 | 28.53±0.03 | 27.22±0.04* |
Tea polyphenols(TP) | 22.14±1.04 | 21.98±0.4 | 11.21±0.08** |
Amino acid(AA) | 1.69±0.07 | 1.74±0.03 | 1.34±0.04 |
TP/AA | 13.11±0.06 | 12.04±0.07 | 8.32±0.03** |
Solube sugar | 6.52±0.03 | 7.28±0.01* | 8.44±0.2** |
Flavonols | 0.61±0.02 | 0.65±0.09 | 0.70±0.03 |
Theaflavins(TFs) | / | / | 0.12±0.02 |
Thearubigins(TRs) | / | / | 1.98±0.32 |
Theabrownins(TBs) | / | / | 3.33±0.12** |
表中数值表示为:平均值±SD(n=3).*p<0.05vs GTCM组,**p<0.01vs GTCM组.
表2三种橘红茶儿茶素、没食子酸与咖啡碱等单体成分检测结果(mg/g)
表中数值表示为:平均值±SD(n=3).*p<0.05vs GTCM组,**p<0.01vs GTCM组.
实施例3
关于化橘红茶是否能减少脂肪肝细胞中的脂质沉积,本发明人通过构建非酒精性脂肪肝细胞模型,以及油红O染色、Western blot免疫印迹法分析橘红茶缓解非酒精性脂肪肝作用的机制,发现本发明的化橘红茶具有显著的缓解非酒精性脂肪肝的作用。
取对数生长期的HepG2肝细胞,用胰酶消化成单细胞悬液,用血球计数板计数细胞密度,利用DMEM培养基稀释,使细胞悬液中细胞浓度为1.0×106个/ml,接种于6孔板中。在37℃,5%(体积分数)CO2饱和湿度培养箱中培养12h,细胞贴壁后换成无血清的DMEM培养基饥饿培养12h。
然后把细胞分为正常对照组、模型对照组、三种橘红茶剂量组,除正常对照组外,其他各组加入0.4mM的油酸,诱导24小时后,各橘红茶剂量组加适当浓度的橘红茶,孵育24h后,收集上清液和细胞。
油红O染色
(1)染色前将油红O饱和溶液与蒸溜水3:2混合,过滤(现配现用);
(2)小心吸走培养液,用PBS缓冲液清洗3次,4%多聚甲醛固定5min;
(3)将6孔板内多聚甲醛吸去,再用PBS清洗2次;
(4)加入油红O染液常温染色30min,染色时需加盖,防止染液中异丙醇挥发;
(5)染色结束后,将油红O染液吸去;
(6)用双蒸水再次反复洗涂,直至没有多余的油红O杂质;
(7)显微镜下观察细胞内脂滴,并拍照记录实验结果;
(8)每孔加入500μl异丙醇充分溶解油红O,每孔100μl加入96孔板,在酶标仪490nm处检测吸光度值。
S7:Western blot免疫印迹法分析橘红茶缓解非酒精性脂肪肝作用的机制
1细胞总蛋白的提取
(1)蛋白样品的提取
从37℃CO2培养箱中取出于6cm直径的细胞培养皿中培养的HepG2细胞,(细胞密度约为1×106个/ml培养液),吸弃原培养液,用4℃预冷的1×PBS洗细胞表面3~4次,以去除培养基中的血清及死细胞,并尽量吸弃细胞培养皿中残余的PBS。加入含PMSF的裂解液:向上述各培养皿中加300μl含PMSF的蛋白提取液,轻轻晃动,使裂解液均匀铺于细胞表面,用冰上预冷的1.5ml EP管收集蛋白提取液,于冰中静置30min,然后在4℃,18506rcf离心20min。将上清液小心移入预冷的1.5ml EP管中(为避免反复冻融导致蛋白降解,可按需要将其分装使用),-80℃保存备用。
(2)蛋白定量蛋白
1)BCA工作液的配制:根据测定需要量将A液和B液按50:1的比例混合均匀;
2)蛋白标准液的配制:配制0,0.125,0.25,0.5,1.0,2.0的蛋白标准品;
3)装配好酶标板后,加入稀释25倍后(1μl样品+24μl水)的样品和标准品25μl,再加入200μl工作液,轻敲混匀;
4)37℃孵箱孵育30min后,在560nm波长下酶标仪测OD值,根据标准曲线求各样本的蛋白浓度。
Western Blot检测
(1)轻轻拔去梳子,将玻璃夹板“凹”面贴紧电泳槽,两侧用夹子很好的固定在电泳槽上。由-80℃冰箱取出已制备好的蛋白样品,立即插入冰中待其融化,吸取细胞总蛋白样品15μl加入1.5ml EP管中,每样品管中分别加入5μl4×蛋白质凝胶电泳上样缓冲液,轻轻混合,98℃变性5分钟,立即插入冰中,振荡均匀,短暂离心;
(2)吸出变性蛋白液,贴紧加样孔上方,将样品轻轻加至凝胶孔中;将电泳仪设置成稳压状态,接通电源,将电压调至80V使样品通过浓缩胶。当染料进入分离胶后,将电压调高到120V,继续电泳使染料至分离胶适当位置;
(3)待蛋白分离完全后,停止电泳,小心取出凝胶,去除浓缩胶部分,提前准备好适当大小的PVDF膜并在甲醇中浸泡5min左右,转膜装置从下到上依次是阳极板、海绵、滤纸、凝胶、PVDF膜、滤纸、海绵、阴极板。要确保各层间均接触良好,每一层滤纸接触面都要排出气泡。将准备好的转膜夹子插入转膜槽中,在其中加入预先4℃预冷的转膜液,正确连接电源,保证电荷由负极向正极流动。置于装有冰的盒子中,接通电源,恒流275mA运行60-90min;
(4)转膜结束后小心取出转移膜,在膜的右上角做标记,在1×TBST液中漂洗一下,放入含有5%脱脂奶粉的封闭液中,室温、摇床上缓慢摇动封闭1-2h。
(5)根据蛋白分子量大小将PVDF膜剪开,加入用封闭液按照一定比例稀释的一抗室温孵育2h或4℃过夜;
(6)回收一抗,用1×TBST漂洗3次,每次5分钟,之后加入用1×TBST按照一定比例稀释的二抗孵育50min之后回收二抗,1×TBST洗膜3次,每次5min。
(7)按1:1(v/v)混合ECL试剂盒中两种液体,将上述混合液均匀铺在PVDF膜表面,室温作用2分钟。将膜置于Canon凝胶成像系统中显影。
数据分析:有数据均以平均值±标准差(x±SD)表示,使用Graph Pad Prism 7.0软件进行数据分析。在三种茶样之间进行one-way ANOVA分析,同行或同图中不同小写字母表示在0.05水平上差异显著。
油红O染色结果显示油酸OA很明显诱导HepG2细胞形成非酒精性脂肪肝细胞模型(图1),本发明人分别用0.1、0.4、0.8mg/ml的化州橘红绿茶、橘红黄茶、橘红红茶处理模型细胞,结果显示三种橘红茶都明显减少模型细胞中脂质沉积(p<0.05),其中橘红黄茶较其他两种橘红茶效果更好。另外,三种橘红茶减少脂质沉积的作用在0.1-0.8mg/ml范围内呈现剂量依赖关系。与脂质沉积相关的指标甘油三指(TG)、胆固醇(TC)、游离脂肪酸(FFA)的检测结果也显示了类似的结果(图2),三种橘红茶都很明显抑制了NAFLD细胞模型中的TC、TG和FFA的含量橘红黄茶和橘红绿茶效果优于橘红红茶。因此,三种橘红茶都可以明显减少NAFLD细胞模型中的脂质沉积,但是相比于橘红红茶,橘红绿茶和橘红黄茶效果更好。由于0.4和0.8mg/ml橘红茶对脂质沉积的抑制作用与对照组相比均有显著差异,因此后续实验中均选择0.4mg/ml浓度处理细胞。
关于化州橘红茶调控AMPK信号通路缓解非酒精性脂肪肝作用,从图3A中可以看出,由OA诱导的非酒精性脂肪肝细胞模型中的TC、TG和FFA的含量明显高于正常细胞处理组,而三种橘红茶处理之后这三项指标均明显下降,其中橘红黄茶下降更为明显。由于AMPK与能量代谢和脂质代谢密切相关,因此AMPK是预防和治疗NAFLD的关键和有效的靶点。以油酸处理的HepG2细胞模型中AMPKα蛋白磷酸化水平相比于正常细胞明显下降,而三种橘红茶均可以显著提高其水平,其中橘红黄茶和橘红绿茶效果均比橘红红茶好(图3B)。AMPKα下游蛋白ACC的磷酸化表达水平和CPT-1蛋白表达水平也随着AMPKα磷酸化水平的增加有一定程度的增加,三种橘红茶中橘红黄茶效果最为明显;反之,与脂肪合成相关的SREBP1c和FAS则由于橘红茶的干预而降低表达,橘红绿茶和橘红黄茶作用相当,但均优于橘红红茶(图3B)。因此,三种橘红茶均可以激活AMPKα通路,橘红黄茶在促进脂肪氧化过程中发挥的作用较明显,而在抑制脂肪合成过程中,橘红黄茶与橘红绿茶作用相当。
本发明人还进一步验证化州橘红茶通过AMPK信号通路缓解非酒精性脂肪肝,具体方法是,用AMPKα特异性抑制剂Compound C(CC)干扰AMPKα蛋白的表达。从图4A中可以看出CC明显阻碍了橘红茶对AMPKα及其下游蛋白的调控作用,同时也阻碍了其对TC、TG和FFA的抑制作用(图4B)。由此,橘红茶确实通过调控AMPKα信号通路调节脂质代谢,进而发挥其改善非酒精性脂肪肝的作用。
由此可见,本发明对化橘红茶缓解非酒精性脂肪肝作用的分子机制进行了探索,结果显示,化橘红茶能够通过调控AMPK信号通路,上调p-AMPK/AMPK,p-ACC/ACC,CPT-1以促进脂质氧化,下调SREBP1c和FAS蛋白表达以抑制脂肪合成,从而达到减少肝脏细胞中脂肪沉积的效果,使得由高脂饮食、不良习惯等造成的非酒精性脂肪肝病得到改善。
Claims (10)
1.化橘红茶应用于缓解非酒精性脂肪肝产品的制备中。
2.化橘红茶在制备缓解非酒精性脂肪肝药物/食品中的应用。
3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的化橘红茶为化橘红红茶、化橘红黄茶、化橘红绿茶中的任一种。
4.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述的化橘红茶中,主要的活性成分的含量如下:
橘红绿茶中,没食子儿茶素含量为2.16±0.01mg/g;表没食子儿茶素含量为7.77±0.12mg/g;儿茶素含量为5.81±0.19mg/g;表儿茶素含量为13.71±0.24mg/g;表没食子基儿茶素没食子酸酯含量为19.18±0.17mg/g;没食子基儿茶素没食子酸酯含量为4.68±0.09mg/g,没食子酰表儿茶素含量为28.71±0.11mg/g;
橘红红茶中,表没食子儿茶素含量为3.88±0.36mg/g;儿茶素含量为1.22±0.02mg/g;表儿茶素含量为2.94±0.06mg/g;表没食子基儿茶素没食子酸酯含量为2.56±0.03mg/g;没食子基儿茶素没食子酸酯含量为1.04±0.03mg/g,没食子酰表儿茶素含量为4.66±0.05mg/g;
橘红黄茶中,没食子儿茶素含量为2.49±0.04mg/g;表没食子儿茶素含量为7.65±0.07mg/g;儿茶素含量为6.55±0.13mg/g;表儿茶素含量为14.08±0.24mg/g;表没食子基儿茶素没食子酸酯含量为21.43±0.31mg/g;没食子基儿茶素没食子酸酯含量为5.37±0.01mg/g,没食子酰表儿茶素含量为32.78±0.18mg/g。
5.如权利要求1所述的应用,其特征在于,化橘红红茶、化橘红黄茶、化橘红绿茶减少脂质沉积的作用在0.1~0.8mg/ml范围内呈现剂量依赖关系。
6.化橘红茶的制备方法,包括以下的步骤:
取化州橘红茶粗粉,加入沸蒸馏水水浴浸提,趁热抽滤茶汤,反复浸提,浓缩茶汤,干燥,获得化橘红茶粉。
7.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,
化州橘红茶粗粉与沸蒸馏水的质量体积比为1:18~22。
8.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,水浴浸提的温度为80~95℃,时间为20~40min;优选的,水浴浸提的温度为90℃,时间为30min。
9.如权利要求6所述的制备方法,其特征在于,抽滤茶汤,反复浸提3次;
优选的,茶汤旋转蒸发浓缩至原来体积的1/12~1/10;
优选的,干燥方式为冷冻干燥或者是喷雾干燥。
10.如权利要求6所述的制备方法,包括以下的步骤:
取化州橘红茶粗粉,加入沸蒸馏水水浴浸提,橘红茶粗粉与沸蒸馏水的质量体积比为1:18~22,水浴浸提的温度为80~95℃,时间为20~40min,趁热抽滤茶汤,反复浸提3次,浓缩茶汤至原来体积的1/12~1/10,冷冻干燥或喷雾干燥,获得化橘红茶粉。
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