CN111693708A - 一种降钙素原测定试剂盒及其测定方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种降钙素原测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R2试剂包括胶乳与抗体的偶联物。本发明还提出一种降钙素原的测定方法，包括胶乳与抗体的偶联物制备，R1缓冲液的配制，R2试剂的配制，降钙素原的测定，测定时，将全自动生化仪按照设定的程序先将R1和血浆样品加入全自动生化仪的比色杯中，血浆样品和R1在比色杯中37℃孵育20‑30min后，加入R2试剂并开始测试吸光度值A1，10‑15min后测试吸光度值A2，计算吸光度差值ΔA＝A2‑A1，通过校准品定标可以得出ΔA与浓度的关系式，即可进行降钙素原的定量测定。本发明，检测灵敏度提高了四倍左右，检测结果更加准确，且测定方法简单，值得推广和普及。
Description
技术领域
本发明属于肌钙蛋白I测定领域，更具体地说，尤其涉及一种降钙素原测定试剂盒。同时，本发明还涉及一种降钙素原的测定方法。
背景技术
降钙素原(PCT)是一种蛋白质，当严重细菌、真菌、寄生虫感染以及脓毒症和多脏器功能衰竭时它在血浆中的水平升高。自身免疫、过敏和病毒感染时PCT不会升高。局部有限的细菌感染、轻微的感染和慢性炎症不会导致其升高。细菌内毒素在诱导过程中担任了至关重要的作用。PCT反映了全身炎症反应的活跃程度。影响PCT水平的因素包括被感染器官的大小和类型、细菌的种类、炎症的程度和免疫反应的状况。另外，PCT只是在少数患者的大型外科术后1～4d可以测到。PCT水平的升高出现在严重休克、全身性炎症反应综合征(SIRS)和多器官功能紊乱综合征(MODS)，即使没有细菌感染或细菌性病灶。
免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是：当抗原与胶乳上的抗体在缓冲液体系中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时，形成的可溶性免疫复合物在缓冲液体系中的促聚剂的作用下，形成微粒，使反应液出现浊度。当抗体浓度固定时，形成的免疫复合物的量随着样本中抗原量的增加而增加，反应液的浊度也随之增加。通过测定反应液的浊度与一系列标准品对照，即可计算出样本中抗原的含量。
降钙素原是一种炎症标志物，在正常人体内浓度低于0.5ng/ml。所以，用于降钙素原检测的试剂检测灵敏度必须达到0.1ng/ml；目前，胶乳免疫比浊法的检测灵敏度基本为1ng/ml级别，现有技术的缺点：由于方法学的局限性，现有的免疫比浊法试剂检测灵敏度较低，诊断界限附近浓度的血清精密度不够，达不到降钙素原检测需要的灵敏度，为此提出一种降钙素原测定试剂盒及其测定方法。
发明内容
本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种降钙素原测定试剂盒。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：
一种降钙素原测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R2试剂包括胶乳与抗体的偶联物。
本发明还提出一种降钙素原的测定方法，包括如下步骤：
1)胶乳与抗体的偶联物制备：
S1、将20-30g的羧基胶乳微球用PBS缓冲液稀释至10％-15％的浓度，制得第一溶液；
S2、按80-100ml的量向第一溶液内部加入EDC溶液，室温活化30-40min，制得第二溶液；
S3、将第二溶液离心20-30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至10％-15％的浓度，制得第三溶液；
S4、按3-5mg的量向第三溶液内部加入亲和素，室温活化8-11h，制得第四溶液；
S5、将第四溶液离心20-30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至10％-15％的浓度，制得第五溶液；
S6、将30-40mg的肌钙蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至20％-30％的浓度，制得第六溶液；
S7、按100-120ml的量向第六溶液的内部加入NHS溶液，室温活化25-35min，制得第七溶液；
S8、按5-7mg的量向第七溶液加入生物素亲和素，室温活化110-130min，制得第八溶液；
S9、将第八溶液离心20-30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至20％-30％的浓度，制得第九溶液；
S10、将第五溶液和第九溶液按比例1∶1-1.3混合，室温活化110-130min制得第十溶液；
S11、将第十溶液离心20-30min，弃掉上清液，用Tris缓冲液复溶至10％-15％的浓度，即得胶乳与抗体的偶联物；
2)R1缓冲液的配制：
S12、称取配制体积70-90％的纯化水；
S13、称量3-5ml的Tris、4-6g的氯化镁、10-12ml的聚乙二醇、11-15ml的吐温20、16-18ml的蛋白保护剂以及1-3ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第一混合溶液；
S14、将第一混合溶液的pH值调节至6.8-7.2，制得第二混合溶液；
S15、将第二混合溶液补充纯化水至配制体积，即制得R1试剂
3)R2试剂的配制：
S16、称取配制体积70-90％的纯化水；
S17、称量4-6ml的Tris、8-10ml的吐温20、14-16ml的蛋白保护剂、1-3ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第三混合溶液；
S18、将第三混合溶液的pH值调节至6.8-7.2，制得第四混合溶液；
S19、将第四混合溶液补充纯化水至配制体积；
S20、按比例1∶1-1.5向第四混合溶液内部加入胶乳与抗体的偶联物，即得R2试剂；
4)降钙素原的测定：
S21、测定时，将全自动生化仪按照设定的程序先将R1和血浆样品加入全自动生化仪的比色杯中，血浆样品和R1在比色杯中37℃孵育20-30min后，加入R2试剂并开始测试吸光度值A1，10-15min后测试吸光度值A2，计算吸光度差值ΔA＝A2-A1，通过校准品定标可以得出ΔA与浓度的关系式，即可进行降钙素原的定量测定。
优选的，所述步骤S1中提到的羧基胶乳微球的粒径为150nm-400nm。
优选的，所述Tris和PBS缓冲液均可以用MES缓冲液或CB缓冲液代替，且各缓冲液浓度在5mM至500mM范围内。
优选的，所述吐温20可以用吐温80和Triton X100代替。
优选的，所述聚乙二醇可以采用聚乙二醇8000或聚乙二醇10000促聚剂进行代替。
优选的，所述蛋白保护剂为牛血清白蛋白保护剂。
优选的，所述防腐剂为ProClin300、叠氮钠或硫柳汞防腐剂的一种或多种。
本发明的技术效果和优点：本发明提供的一种降钙素原测定试剂盒及其测定方法，通过加入生物素亲和素，降钙素原抗体与胶乳微球的偶联效率提高了四倍左右，检测灵敏度同时也提高了四倍左右；通过选择更大粒径的羧基胶乳微球，检测灵敏度也得到了提高；大分子量聚乙二醇促聚剂的使用有效提高了促聚效果，同样提高了检测灵敏度，使得检测结果更加准确，值得推广和普及。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种降钙素原测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R2试剂包括胶乳与抗体的偶联物。
本发明还提出一种降钙素原的测定方法，包括如下步骤：
1)胶乳与抗体的偶联物制备：
S1、将20g的羧基胶乳微球用PBS缓冲液稀释至10％的浓度，制得第一溶液；
S2、按80ml的量向第一溶液内部加入EDC溶液，室温活化30min，制得第二溶液；
S3、将第二溶液离心20min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至10％的浓度，制得第三溶液；
S4、按3mg的量向第三溶液内部加入亲和素，室温活化8h，制得第四溶液；
S5、将第四溶液离心20min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至10％的浓度，制得第五溶液；
S6、将30mg的肌钙蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至20％的浓度，制得第六溶液；
S7、按100ml的量向第六溶液的内部加入NHS溶液，室温活化25min，制得第七溶液；
S8、按5mg的量向第七溶液加入生物素亲和素，室温活化110min，制得第八溶液；
S9、将第八溶液离心20min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至20％的浓度，制得第九溶液；
S10、将第五溶液和第九溶液按比例1∶1混合，室温活化110min制得第十溶液；
S11、将第十溶液离心20min，弃掉上清液，用Tris缓冲液复溶至10％的浓度，即得胶乳与抗体的偶联物；
2)R1缓冲液的配制：
S12、称取配制体积70％的纯化水；
S13、称量3ml的Tris、4g的氯化镁、10ml的聚乙二醇、11ml的吐温20、16ml的蛋白保护剂以及1ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第一混合溶液；
S14、将第一混合溶液的pH值调节至6.8，制得第二混合溶液；
S15、将第二混合溶液补充纯化水至配制体积，即制得R1试剂
3)R2试剂的配制：
S16、称取配制体积70％的纯化水；
S17、称量4ml的Tris、8ml的吐温20、14ml的蛋白保护剂、1ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第三混合溶液；
S18、将第三混合溶液的pH值调节至6.8，制得第四混合溶液；
S19、将第四混合溶液补充纯化水至配制体积；
S20、按比例1∶1向第四混合溶液内部加入胶乳与抗体的偶联物，即得R2试剂；
4)降钙素原的测定：
S21、测定时，将全自动生化仪按照设定的程序先将R1和血浆样品加入全自动生化仪的比色杯中，血浆样品和R1在比色杯中37℃孵育20min后，加入R2试剂并开始测试吸光度值A1，10min后测试吸光度值A2，计算吸光度差值ΔA＝A2-A1，通过校准品定标可以得出ΔA与浓度的关系式，即可进行降钙素原的定量测定。
较佳地，所述步骤S1中提到的羧基胶乳微球的粒径为150nm。
较佳地，所述Tris和PBS缓冲液均可以用MES缓冲液或CB缓冲液代替，且各缓冲液浓度为5mM。
较佳地，所述吐温20可以用吐温80和Triton X100代替。
较佳地，所述聚乙二醇可以采用聚乙二醇8000或聚乙二醇10000促聚剂进行代替。
较佳地，所述蛋白保护剂为牛血清白蛋白保护剂。
较佳地，所述防腐剂为ProClin300、叠氮钠或硫柳汞防腐剂的一种或多种。
实施例2
一种降钙素原测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R2试剂包括胶乳与抗体的偶联物。
本发明还提出一种降钙素原的测定方法，包括如下步骤：
1)胶乳与抗体的偶联物制备：
S1、将25g的羧基胶乳微球用PBS缓冲液稀释至13％的浓度，制得第一溶液；
S2、按90ml的量向第一溶液内部加入EDC溶液，室温活化35min，制得第二溶液；
S3、将第二溶液离心25min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至13％的浓度，制得第三溶液；
S4、按4mg的量向第三溶液内部加入亲和素，室温活化9h，制得第四溶液；
S5、将第四溶液离心25min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至12％的浓度，制得第五溶液；
S6、将35mg的肌钙蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至25％的浓度，制得第六溶液；
S7、按110ml的量向第六溶液的内部加入NHS溶液，室温活化30min，制得第七溶液；
S8、按6mg的量向第七溶液加入生物素亲和素，室温活化120min，制得第八溶液；
S9、将第八溶液离心25min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至25％的浓度，制得第九溶液；
S10、将第五溶液和第九溶液按比例1∶1.2混合，室温活化120min制得第十溶液；
S11、将第十溶液离心25min，弃掉上清液，用Tris缓冲液复溶至13％的浓度，即得胶乳与抗体的偶联物；
2)R1缓冲液的配制：
S12、称取配制体积80％的纯化水；
S13、称量4ml的Tris、5g的氯化镁、11ml的聚乙二醇、13ml的吐温20、17ml的蛋白保护剂以及2ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第一混合溶液；
S14、将第一混合溶液的pH值调节至7，制得第二混合溶液；
S15、将第二混合溶液补充纯化水至配制体积，即制得R1试剂
3)R2试剂的配制：
S16、称取配制体积80％的纯化水；
S17、称量5ml的Tris、9ml的吐温20、15ml的蛋白保护剂、2ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第三混合溶液；
S18、将第三混合溶液的pH值调节至7，制得第四混合溶液；
S19、将第四混合溶液补充纯化水至配制体积；
S20、按比例1∶1.2向第四混合溶液内部加入胶乳与抗体的偶联物，即得R2试剂；
4)降钙素原的测定：
S21、测定时，将全自动生化仪按照设定的程序先将R1和血浆样品加入全自动生化仪的比色杯中，血浆样品和R1在比色杯中37℃孵育25min后，加入R2试剂并开始测试吸光度值A1，13min后测试吸光度值A2，计算吸光度差值ΔA＝A2-A1，通过校准品定标可以得出ΔA与浓度的关系式，即可进行降钙素原的定量测定。
较佳地，所述步骤S1中提到的羧基胶乳微球的粒径为260nm。
较佳地，所述Tris和PBS缓冲液均可以用MES缓冲液或CB缓冲液代替，且各缓冲液浓度为300mM。
较佳地，所述吐温20可以用吐温80和Triton X100代替。
较佳地，所述聚乙二醇可以采用聚乙二醇8000或聚乙二醇10000促聚剂进行代替。
较佳地，所述蛋白保护剂为牛血清白蛋白保护剂。
较佳地，所述防腐剂为ProClin300、叠氮钠或硫柳汞防腐剂的一种或多种。
实施例3
一种降钙素原测定试剂盒，包括R1试剂和R2试剂，所述R2试剂包括胶乳与抗体的偶联物。
本发明还提出一种降钙素原的测定方法，包括如下步骤：
1)胶乳与抗体的偶联物制备：
S1、将30g的羧基胶乳微球用PBS缓冲液稀释至15％的浓度，制得第一溶液；
S2、按100ml的量向第一溶液内部加入EDC溶液，室温活化40min，制得第二溶液；
S3、将第二溶液离心30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至15％的浓度，制得第三溶液；
S4、按5mg的量向第三溶液内部加入亲和素，室温活化11h，制得第四溶液；
S5、将第四溶液离心30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至15％的浓度，制得第五溶液；
S6、将40mg的肌钙蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至30％的浓度，制得第六溶液；
S7、按120ml的量向第六溶液的内部加入NHS溶液，室温活化35min，制得第七溶液；
S8、按7mg的量向第七溶液加入生物素亲和素，室温活化130min，制得第八溶液；
S9、将第八溶液离心30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至30％的浓度，制得第九溶液；
S10、将第五溶液和第九溶液按比例1∶1.3混合，室温活化130min制得第十溶液；
S11、将第十溶液离心30min，弃掉上清液，用Tris缓冲液复溶至15％的浓度，即得胶乳与抗体的偶联物；
2)R1缓冲液的配制：
S12、称取配制体积90％的纯化水；
S13、称量5ml的Tris、6g的氯化镁、12ml的聚乙二醇、15ml的吐温20、18ml的蛋白保护剂以及3ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第一混合溶液；
S14、将第一混合溶液的pH值调节至7.2，制得第二混合溶液；
S15、将第二混合溶液补充纯化水至配制体积，即制得R1试剂
3)R2试剂的配制：
S16、称取配制体积90％的纯化水；
S17、称量6ml的Tris、10ml的吐温20、16ml的蛋白保护剂、3ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第三混合溶液；
S18、将第三混合溶液的pH值调节至7.2，制得第四混合溶液；
S19、将第四混合溶液补充纯化水至配制体积；
S20、按比例1∶1.5向第四混合溶液内部加入胶乳与抗体的偶联物，即得R2试剂；
4)降钙素原的测定：
S21、测定时，将全自动生化仪按照设定的程序先将R1和血浆样品加入全自动生化仪的比色杯中，血浆样品和R1在比色杯中37℃孵育30min后，加入R2试剂并开始测试吸光度值A1，15min后测试吸光度值A2，计算吸光度差值ΔA＝A2-A1，通过校准品定标可以得出ΔA与浓度的关系式，即可进行降钙素原的定量测定。
较佳地，所述步骤S1中提到的羧基胶乳微球的粒径为400nm。
较佳地，所述Tris和PBS缓冲液均可以用MES缓冲液或CB缓冲液代替，且各缓冲液浓度为500mM。
较佳地，所述吐温20可以用吐温80和Triton X100代替。
较佳地，所述聚乙二醇可以采用聚乙二醇8000或聚乙二醇10000促聚剂进行代替。
较佳地，所述蛋白保护剂为牛血清白蛋白保护剂。
较佳地，所述防腐剂为ProClin300、叠氮钠或硫柳汞防腐剂的一种或多种。
实施例1-3中的降钙素原测定试剂盒的检测灵敏度实验数据如下表：
从上表可知，实施例1为最优实施例。
综上所述：本发明提供的一种降钙素原测定试剂盒及其测定方法，通过加入生物素亲和素，降钙素原抗体与胶乳微球的偶联效率提高了四倍左右，检测灵敏度同时也提高了四倍左右；通过选择更大粒径的羧基胶乳微球，检测灵敏度也得到了提高；大分子量聚乙二醇促聚剂的使用有效提高了促聚效果，同样提高了检测灵敏度，使得检测结果更加准确，值得推广和普及。
最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说，其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (8)
1.一种降钙素原测定试剂盒，其特征在于：包括R1试剂和R2试剂，所述R2试剂包括胶乳与抗体的偶联物。
2.一种权利要求1所述的降钙素原的测定方法，其特征在于：包括如下步骤：
1)胶乳与抗体的偶联物制备：
S1、将20-30g的羧基胶乳微球用PBS缓冲液稀释至10％-15％的浓度，制得第一溶液；
S2、按80-100ml的量向第一溶液内部加入EDC溶液，室温活化30-40min，制得第二溶液；
S3、将第二溶液离心20-30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至10％-15％的浓度，制得第三溶液；
S4、按3-5mg的量向第三溶液内部加入亲和素，室温活化8-11h，制得第四溶液；
S5、将第四溶液离心20-30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至10％-15％的浓度，制得第五溶液；
S6、将30-40mg的肌钙蛋白抗体用PBS缓冲液稀释至20％-30％的浓度，制得第六溶液；
S7、按100-120ml的量向第六溶液的内部加入NHS溶液，室温活化25-35min，制得第七溶液；
S8、按5-7mg的量向第七溶液加入生物素亲和素，室温活化110-130min，制得第八溶液；
S9、将第八溶液离心20-30min，弃掉上清液，用PBS缓冲液将沉淀复溶至20％-30％的浓度，制得第九溶液；
S10、将第五溶液和第九溶液按比例1∶1-1.3混合，室温活化110-130min制得第十溶液；
S11、将第十溶液离心20-30min，弃掉上清液，用Tris缓冲液复溶至10％-15％的浓度，即得胶乳与抗体的偶联物；
2)R1缓冲液的配制：
S12、称取配制体积70-90％的纯化水；
S13、称量3-5ml的Tris、4-6g的氯化镁、10-12ml的聚乙二醇、11-15ml的吐温20、16-18ml的蛋白保护剂以及1-3ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第一混合溶液；
S14、将第一混合溶液的pH值调节至6.8-7.2，制得第二混合溶液；
S15、将第二混合溶液补充纯化水至配制体积，即制得R1试剂
3)R2试剂的配制：
S16、称取配制体积70-90％的纯化水；
S17、称量4-6ml的Tris、8-10ml的吐温20、14-16ml的蛋白保护剂、1-3ml的防腐剂，依次加入纯化水中搅拌溶解并混匀，制得第三混合溶液；
S18、将第三混合溶液的pH值调节至6.8-7.2，制得第四混合溶液；
S19、将第四混合溶液补充纯化水至配制体积；
S20、按比例1∶1-1.5向第四混合溶液内部加入胶乳与抗体的偶联物，即得R2试剂；
4)降钙素原的测定：
S21、测定时，将全自动生化仪按照设定的程序先将R1和血浆样品加入全自动生化仪的比色杯中，血浆样品和R1在比色杯中37℃孵育20-30min后，加入R2试剂并开始测试吸光度值A1，10-15min后测试吸光度值A2，计算吸光度差值ΔA＝A2-A1，通过校准品定标可以得出ΔA与浓度的关系式，即可进行降钙素原的定量测定。
3.根据权利要求2所述的一种降钙素原的测定方法，其特征在于：所述步骤S1中提到的羧基胶乳微球的粒径为150nm-400nm。
4.根据权利要求2所述的一种降钙素原的测定方法，其特征在于：所述Tris和PBS缓冲液均可以用MES缓冲液或CB缓冲液代替，且各缓冲液浓度在5mM至500mM范围内。
5.根据权利要求2所述的一种降钙素原的测定方法，其特征在于：所述吐温20可以用吐温80和Triton X100代替。
6.根据权利要求2所述的一种降钙素原的测定方法，其特征在于：所述聚乙二醇可以采用聚乙二醇8000或聚乙二醇10000促聚剂进行代替。
7.根据权利要求2所述的一种降钙素原的测定方法，其特征在于：所述蛋白保护剂为牛血清白蛋白保护剂。
8.根据权利要求2所述的一种降钙素原的测定方法，其特征在于：所述防腐剂为ProClin300、叠氮钠或硫柳汞防腐剂的一种或多种。
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Citations (5)
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|---|---|---|---|---|
| US20010007022A1 (en) * | 1999-12-22 | 2001-07-05 | Dade Behring Marburg Gmbh. | Anti-procalcitonin antibodies and the preparation and use thereof |
| US20050164317A1 (en) * | 1995-04-18 | 2005-07-28 | Biosite, Inc. | Novel methods for the assay of troponin I and T and complexes of troponin I and T and selection of antibodies for use in immunoassays |
| CN102759631A (zh) * | 2012-08-02 | 2012-10-31 | 南京诺尔曼生物技术有限公司 | 一种定量检测降钙素原pct的胶乳增强免疫比浊试剂盒 |
| CN105606597A (zh) * | 2016-01-28 | 2016-05-25 | 武汉华美生物工程有限公司 | 一种化学发光底物液及利用其的降钙素原检测试剂盒 |
| CN106018816A (zh) * | 2016-05-27 | 2016-10-12 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定降钙素原的试剂盒 |
-
2019
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Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20050164317A1 (en) * | 1995-04-18 | 2005-07-28 | Biosite, Inc. | Novel methods for the assay of troponin I and T and complexes of troponin I and T and selection of antibodies for use in immunoassays |
| US20010007022A1 (en) * | 1999-12-22 | 2001-07-05 | Dade Behring Marburg Gmbh. | Anti-procalcitonin antibodies and the preparation and use thereof |
| CN102759631A (zh) * | 2012-08-02 | 2012-10-31 | 南京诺尔曼生物技术有限公司 | 一种定量检测降钙素原pct的胶乳增强免疫比浊试剂盒 |
| CN105606597A (zh) * | 2016-01-28 | 2016-05-25 | 武汉华美生物工程有限公司 | 一种化学发光底物液及利用其的降钙素原检测试剂盒 |
| CN106018816A (zh) * | 2016-05-27 | 2016-10-12 | 安徽伊普诺康生物技术股份有限公司 | 一种测定降钙素原的试剂盒 |
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