CN1115954C - 繁殖观赏水草红蛋叶的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明是一种快速繁殖观赏水草的方法。经过外植体的消毒、茎段初始培养、增殖培养,可获得完整的试管苗和用于增殖培养的丛生不定芽,然后继续试管苗的水培,繁殖新植株。本发明方法简单、培养成本低、繁殖率高,单芽年有效繁殖率=[3(繁殖系数)×80%(成苗率)]8(年继代次数)=1100。

Description

繁殖观赏水草红蛋叶的方法
技术领域
本发明是一种快速繁殖观赏水草的方法。
背景技术
红蛋叶(Echinodorus rubra-osiris),泽泻科,刺果泽泻属,名贵观赏水草,是一种自然杂交的园艺种,属水生植物。由于不能开花结实,所以没有种子,无法有性繁殖,常利用母株萌发出的少量不定芽或新芽进行繁殖,繁殖系数极低(《观赏水草》李尚志,中国林业出版社,1996.9)。种苗数量少,无性繁殖受到限制。至今未见其它繁殖方法的报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种新的繁殖观赏水草红蛋叶的方法,可以克服无性繁殖所受到的限制,解决了种苗大量繁殖的难题。
本发明是采用红蛋叶茎间腋芽为外植体,在特定培养条件下经离体培养,诱导腋间不定芽萌发,快速繁殖试管苗。本发明包括下述步骤:
(1)外植体的消毒:采集正常生长植株带腋芽的茎段,水洗,酒精消毒1-2分钟,用无菌水清洗两次,用10%次氯酸钙消毒8-15分钟,最后用无菌水反复冲洗5次以上;
(2)初始培养:将消毒的茎段消毒时外露的切面切去,露出新的切面,再切成0.5-1.0cm长的带芽茎段,接入已制备好的初始培养基中,初始培养基为MS+0.7%琼脂+2%蔗糖+2-4mg/L 6-BA+0.1-1mg/L NAA,PH5.8;在室温25-27℃的培养室内补充光照8小时,经过15-25天即得茎间腋芽萌生出带叶的幼芽;用相同的培养基和培养方法再连续培养二代,得到具有3-5个不定芽的丛生芽,成为中间繁殖体;
(3)增殖培养:将中间繁殖体切成2-4块保留有1-3个不定芽的丛生芽块,转入MS+0.9%琼脂+3%蔗糖+1-3mg/L 6-BA+0.1-0.2mg/L NAA,PH=5.8的增殖培养基中,在室温25-27℃的培养室内补充光照8-10小时,培养周期30-45天;用同一种方法在同一培养基上连续增殖培养;
(4)试管苗的水培:取具有根、茎、叶的幼苗,用水洗去培养基,直接移入25-30℃水中。
本发明的具体实施步骤详细描述如下:
外植体的消毒。将由水中采集到的正常生长植株,去掉叶片、叶柄和根,保留带腋芽的茎段。用自来水冲洗,在超净工作台内先用75%酒精消毒1-2分钟,用无菌水清洗,连续两次。再用10%次氯酸钙消毒8-15分钟,最后用无菌水反复冲洗5次以上。
初始培养。将消毒的茎段消毒时外露的切面切去,露出新的切面,再切成0.5-1.0cm长的带芽茎段,接入已制备好的初始培养基中(初始培养基以MS培养基为基本培养基附加0.7%琼脂+2%蔗糖+6-BA 2-4mg/L+NAA0.1-1mg/L,PH5.8)。在室温25-27℃的培养室内补充光照8小时。15-25天茎间腋芽萌生出带叶的幼芽。用相同的培养基和培养方法再连续培养二代(40-50天),即得到具有3-5个不定芽的丛生芽,成为中间繁殖体。
增殖培养。将获得的中间繁殖体切成2-4块保留有1-3个不定芽的丛生芽块,转入增殖培养基(增殖培养基:MS+0.9%琼脂+3%蔗糖+6-BA 1-3mg/L+NAA0.1-0.2mg/L,PH5.8)。培养条件与初始培养相同。培养周期30-45天。用同一种方法在同一培养基上连续增殖培养,提高繁殖率。在增殖培养中,每个不定芽长成具有根、茎、叶的幼苗,并且基部还萌发出少量的不定芽。
试管苗的水培。取出具有根、茎、叶的幼苗,用清水洗去培养基,直接移入水中,不用缓苗即可生长。水温保持在25-30℃,还要有适当的光照。
由于本发明在初始培养基中获得中间繁殖体后,在以后的快速繁殖中只使用一种增殖培养基即可获得完整的试管苗和用于增殖培养的丛生不定芽。方法简单、培养成本低、繁殖率高,单芽年有效繁殖率=[3(繁殖系数)×80%(成苗率)]8(年继代次数)=1100。
附图说明
图一为具有不定芽的丛生芽增殖培养;图二为具有根、茎、叶的幼苗;图三为水培试管苗。
具体实施方式
实施例
采南开大学生命科学学院水生植物培养箱正常生长的红蛋叶植株,取带腋芽的茎段,水洗,酒精消毒2分钟,用无菌水清洗2次,用10%次氯酸钙消毒15分钟,最后用无菌水反复冲洗5次;接入已制备好的初始培养基中,初始培养基为MS+0.7%琼脂+2%蔗糖+6-BA2mg/L+NAA0.1mg/L,PH5.8,在室温27℃的培养室内补充光照8小时,经过25天即得茎间腋芽萌生出带叶的幼芽;用相同的培养基和培养方法再连续培养二代,得到具有5个不定芽的丛生芽,成为中间繁殖体。将离体培养获得无菌的中间繁殖体,接种在添加了6-BA3mg/L、NAA0.2mg/L、3%蔗糖、0.9%琼脂的MS培养基中,PH5.8,每瓶6块,在恒温27℃的培养室培养。培养中每天人工光照8-10小时。培养45天后,在无菌条件下,切取新萌生的丛生不定芽,继续增殖培养,提高繁殖率。将具有根、茎、叶的幼苗用清水洗去培养基,直接移入水中培养,繁殖新植株。繁殖新植株结果见附图一-图三。图一为具有不定芽的丛生芽增殖培养。图二为具有根、茎、叶的幼苗。图三为水培试管苗。

Claims (2)

1、一种繁殖观赏水草红蛋叶的方法,其特征包括下述步骤:
(1)外植体的消毒:采集正常生长植株带腋芽的茎段,水洗,酒精消毒1-2分钟,用无菌水清洗两次,用10%次氯酸钙消毒8-15分钟,最后用无菌水反复冲洗5次以上;
(2)初始培养:将消毒的茎段消毒时外露的切面切去,露出新的切面,再切成0.5-1.0cm长的带芽茎段,接入已制备好的初始培养基中,初始培养基为MS+0.7%琼脂+2%蔗糖+2-4mg/L 6-BA+0.1-1mg/L NAA,PH5.8;在室温25-27℃的培养室内补充光照8小时,经过15-25天即得茎间腋芽萌生出带叶的幼芽;用相同的培养基和培养方法再连续培养二代,得到具有3-5个不定芽的丛生芽,成为中间繁殖体;
(3)增殖培养:将中间繁殖体切成2-4块保留有1-3个不定芽的丛生芽块,转入MS+0.9%琼脂+3%蔗糖+1-3mg/L 6-BA+0.1-0.2mg/L NAA,PH=5.8的增殖培养基中,在室温25-27℃的培养室内补充光照8-10小时,培养周期30-45天;用同一种方法在同一培养基上连续增殖培养;
(4)试管苗的水培:取具有根、茎、叶的幼苗,用水洗去培养基,直接移入25-30℃水中。
2、按照权利要求1所说的繁殖观赏水草红蛋叶的方法,其特征在于所说的增殖培养中,每个不定芽长成具有根、茎、叶的幼苗,并且基部还萌发出少量的不定芽。
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