CN111592993B - 一种解淀粉芽孢杆菌菌剂保藏剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌菌剂常温贮存技术,属于微生物菌剂技术领域。通过向所述解淀粉芽孢杆菌菌剂中添加保藏剂来提高微生物活力,延长菌剂肥效期。所述保藏剂包括甘油、海藻糖、山梨酸钾、农乳500&600复配中的一种。保藏6月内,无添加组菌剂活菌数不断下降,从1.3*108下降到9.7*106 CFU/mL,添加农乳500&600复配作为保藏剂的菌剂活菌数稳中有升,常温贮存6个月仍有2.9*108 CFU/mL。另一批菌剂保藏45天内,添加农乳500&600复配作为保藏剂的菌剂活菌数从初始5.8*109上升到9.7*1011 CFU/mL,农乳500&600保藏效果很好。本发明通过优选保藏剂可以保持微生物活力,大大延长菌剂稳定期,提高了菌剂利用效率。
Description
技术领域
本发明涉及一种单一保藏剂对解淀粉芽孢杆菌菌剂常温贮存效果,属于微生物菌剂技术领域。
背景技术
随着绿色农业的发展,微生物菌剂占有越来越重要的地位。但进行大面积的土地施用迫切需要应用简便、易于存储运输的优良菌剂。如何维持微生物活力,即对菌剂进行有效保藏使之在存储过程中不死亡、不变异、不被杂菌污染至关重要。
在菌剂中添加保藏剂是目前使用较为广泛的保藏方式。不同类型的保藏剂效果不同,通常是在保藏半年左右时间内定期检测菌剂含菌量,通过固体培养基计数这一方法来实现。目前常用的保藏剂类型有以下几种:一是吸附剂,比如海藻酸钙、草炭、沸石、黄原胶、肥土、草木灰、碳酸钙等。二是防腐剂,常见的有山梨酸钾、苯甲酸钠、脱氢乙酸等。三是一些其他保护剂,比如表面活性剂、糖类、有机溶剂等。
表面活性剂中,常用的农药乳化剂兼具乳化和分散功能,是一种很好的表面活性剂,如果应用到菌剂保藏上,不仅可以延长菌剂肥效期,还可以在土地施用过程中大大降低乳化剂用量和农药成本。并且复合乳化剂有协同效应,在实际应用中,多采用复配型乳化剂,以期达到最佳稳定效果。目前尚未发现将乳化剂应用到菌剂保藏上的研究,但如上所述,倘若乳化剂在菌剂常温贮存方面效果显著,也是一件很有意义的发现。
发明内容
解决的技术问题:本发明的目的是提供一种有利于解淀粉芽孢杆菌菌剂常温贮存的保藏剂,以增强其菌剂稳定性。
技术方案:一种解淀粉芽孢杆菌菌剂,所述微生物菌剂常温保藏半年活菌数高于零点活菌数,不低于108CFU/mL。
作为优选,将发酵培养的菌液在超净工作台中不添加任何其他试剂、不需要任何其他设备和操作、直接加入单一保藏剂进行无菌回收。
作为优选,所述保藏剂是指2%(v/v)甘油、0.5%(w/v)海藻糖、5%(v/v)农乳500&600复配、0.5%(w/v)山梨酸钾中的一种。
有益效果:本发明涉及一种解淀粉芽孢杆菌菌剂保藏剂,通过对菌剂添加保藏剂来提高菌剂活力、增强稳定性。常温贮存6月,添加5%(v/v)农乳500&600复配作为保藏剂的菌剂活菌数,是无添加保藏6月活菌数的30倍。同时,该保藏剂还是常用的农药乳化剂,在土地施用时可降低农药用量和成本,既实现了菌剂的有效保藏,又节省了成本,一举多得,在农业应用上具有很大的应用前景。
附图说明
图1为实施例1中常温贮存6月内不同保藏剂对菌剂影响示意图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明作进一步描述。
实施例1
解淀粉芽孢杆菌菌剂贮存
解淀粉芽孢杆菌菌剂在超净工作台进行回收后,分组依次加入①2%(v/v)甘油;②0.5%(w/v)海藻糖;③5%(v/v)农乳500&600复配;④0.5%(w/v)山梨酸钾,作为不同处理与无添加CK组进行比较。常温贮藏6月内多次涂板计数,依据活菌数变化来判断保藏剂效果,结果见表1。常温贮存2月,添加2%(v/v)甘油作为保藏剂的菌剂活菌数基本没有变化;添加5%(v/v)农乳500&600复配作为保藏剂的菌剂活菌数略有上升;而添加其他保藏剂以及无添加的菌剂活菌数都出现了不同程度下降。常温贮存6月,除添加5%(v/v)农乳500&600复配作为保藏剂的菌剂活菌数稳定在108CFU/mL外,其他组活菌数继续降低。
表1常温贮存6月各保藏剂对菌剂活菌数影响
实施例2
解淀粉芽孢杆菌菌剂贮存
经过优化培养,获得的另一批解淀粉芽孢杆菌菌剂在超净工作台进行回收后,分组依次加入①0.5%(w/v)海藻糖;②5%(v/v)农乳500&600复配;③0.5%(w/v)山梨酸钾,作为不同处理与无添加CK组进行比较。常温贮存45天内多次涂板计数,依据活菌数和芽孢数变化来判断保藏剂效果,结果见表2。从保藏45天内来看,仍然是农乳500&600复配保藏效果最佳,其他两种保藏剂也对菌剂常温贮存有一定效果。并且初始活菌数较高的这批菌剂,保藏剂效果更加显著。
表2常温贮存45天各保藏剂对菌剂影响
Claims (1)
1.保藏剂在增强解淀粉芽孢杆菌菌剂常温贮存稳定性中的应用,其特征在于,将发酵培养的菌液在超净工作台中不添加任何其他试剂、不需要任何其他设备和操作、直接加入单一保藏剂进行无菌回收;所述保藏剂是5% v/v农乳500&600复配;所述解淀粉芽孢杆菌菌剂常温保藏半年活菌数高于零点活菌数,不低于108 CFU/mL,所述零点活菌数为2.6×108CFU/mL。
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解淀粉芽孢杆菌GB1水悬浮剂的制备方法;张俊祥等;《农药科学与管理》;20150915;第36卷(第09期);第30-33页 * |
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