CN111562392A

CN111562392A - 一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒

Info

Publication number: CN111562392A
Application number: CN202010417228.6A
Authority: CN
Inventors: 刘萍; 黄爱龙; 栾大伟; 刘朝阳; 占时涛; 李欣; 李克锦; 汪德强; 陈娟
Original assignee: Bioscience Tianjin Diagnostic Technology Co ltd; Chongqing Medical University
Current assignee: Bioscience Tianjin Diagnostic Technology Co ltd; Chongqing Medical University
Priority date: 2020-05-18
Filing date: 2020-05-18
Publication date: 2020-08-21
Anticipated expiration: 2040-05-18
Also published as: CN111562392B

Abstract

本发明创造提供了一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，包括设有包被板和标记垫的检测卡，所述包被板的检测区包被有新型冠状病毒抗原，质控区包被有羊抗鼠IgG或驴抗羊IgG。本发明创造所述的试剂盒与现有核酸检测试剂盒相比具有操作简便，速度快，成本低，对实验室要求低，配套设备小巧、便携等特点。

Description

一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒

技术领域

本发明创造属于免疫分析医学领域，尤其是涉及一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒。

背景技术

冠状病毒属于单股正链RNA病毒，既往已知感染人的冠状病毒有6种，即HCoV-229E、HCoV-OC43、SARSr-CoV、HCoV-NL63、HCoV-HKU1和MERSr-CoV。新型冠状病毒(2019-nCoV)属于第7种。

新型冠状病毒肺炎是一种急性感染性肺炎，其病原体是一种先前未在人类中发现的新型冠状病毒，即2019新型冠状病毒。经呼吸道飞沫和密切接触传播是主要的传播途径，在相对封闭的环境中长时间暴露于高浓度气溶胶情况中存在经气溶胶传播的可能。患者初始症状多为发热，乏力和干咳，并逐渐出现呼吸困难等严重表现。多数患者预后良好，部分严重病例可出现急性呼吸窘迫综合征或脓毒症休克，甚至死亡。

目前临床实验室的检测方法主要依靠核酸检测，但核酸检测要在有条件和资质的实验室进行，存在检测时间长、样本采集要求高、步骤多、场地和设备要求高等不足，难以大规模开展。而用胶体金技术进行抗体检测，可在样本量少或初诊使用。解决核酸检测误诊和漏诊、速度慢、通量低、成本高(150元/人，免疫学检测成本仅需15-30元/人)、实验室条件要求高的问题。胶体金检测试剂便携，不需要专用设备，可在流动车上使用。IgG可用于新型冠状病毒感染肺炎原发感染或继发感染急性期的临床辅助诊断。

发明内容

有鉴于此，本发明创造旨在提出一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，与现有核酸检测试剂盒相比具有操作简便，速度快，成本低，对实验室要求低，可肉眼判读结果等特点。

为达到上述目的，本发明创造的技术方案是这样实现的：

一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，包括设有包被板和标记垫的检测卡，所述包被板的检测区包被有新型冠状病毒抗原，质控区包被有羊抗鼠IgG或驴抗羊IgG。

优选的，所述新型冠状病毒抗原中的新型冠状病毒抗原包括如表1所示的氨基酸序列的重组抗原，

表1重组抗原的氨基酸系列信息

优选的，所述标记垫上固化有包含荧光标记的抗人IgG的工作液，所述工作液的制备方法包括如下步骤：

将荧光标记物用0.05MBB PH为7.4-8.0的缓冲液配制成1：10-1：5的溶液，混匀后在14000-20000RPM，2-8℃条件下离心，弃上清，用0.05-0.1M的HEPES或MES缓冲液复溶，PH为5.5-6.0复溶后加入新配制的浓度为15-35mg/mL的碳二亚胺溶液10-100μL,吹吸混匀后，向其中加入新配制的浓度为15-35mg/mL的N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液10-100μL，常温混匀10-30min,离心处理，弃上清，用0.05-0.1M的Tris或CB缓冲液复溶至原体积；向其中加入100-200微克/毫升的抗人IgG，常温混匀2-4小时，加入牛血清蛋白和/或甘氨酸中的一种或几种，封闭0.5-2小时，离心处理，弃上清，用0.05-0.1M含糖的MES或BB缓冲液复溶至原体积得到荧光标记抗人IgG(2-8度保存备用)。

优选的，所述荧光标记抗人IgG经过荧光标记抗人IgG复溶液稀释后使用，所述荧光标记抗人IgG复溶液包括如下组分：0.05-0.1M PH为7.4-8.0的BB；质量百分比为0.1-0.5％的海藻糖；质量百分比为0.2-0.5％甘氨酸；质量百分比为0.5-1.5％的牛血清蛋白，质量百分比为0.1-0.3％的Casein-Na；体积百分比为0.3-1％的TW-20。

优选的，所述荧光标记抗人IgG与荧光标记抗人IgG复溶液按照重量比为1：2-1：20的比例稀释。

优选的，所述试剂盒还包括样本稀释液，所述样本稀释液由包括如下组分制得：0.05-0.1M PH值为7.0-7.5的HEPES；质量百分比0.1-0.5％的海藻糖；质量百分比0.5-1％的NaCl；质量百分比0.5-1.5％的牛血清蛋白；质量百分比0.05－0.1％的Casein-Na；体积百分比0.1-0.5％的TW-20；质量百分比0.05-0.2％的EDTA-2Na。

优选的，所述样本稀释液与将待测样本按照体积比为10：1的比例稀释。

优选的，所述荧光标记物为羧基荧光微球、异硫氰酸荧光素、罗丹明及其衍生物中的一种。

优选的，当质控区包被羊抗鼠IgG时，所述抗人IgG为鼠抗人IgG，当质控区包被驴抗羊IgG时，所述抗人IgG为羊抗人IgG。

本试剂盒采用免疫层析法，将需要检测的血液样本与含有抗人IgG包被的荧光微球颗粒的样本缓冲液充分混合，若样本中存在IgG抗体，则与荧光微球表面包被的抗人IgG结合，形成“二抗-抗体-荧光微球”复合物；当该复合物在硝酸纤维素膜上移行时，可在包被有新型冠状病毒重组抗原的检测区(T区)结合，形成“二抗-抗体-抗原-荧光微球”复合物，未结合样本中IgG的荧光微球标记2019-nCOV重组抗原与则在包被有羊抗鼠的质控区(C区)被捕获，反应后的检测卡利用配套使用的荧光免疫分析仪测量检测区和质控区内的荧光强度，通过与内置cutoff荧光信号的比较进行阴阳性判定。

相对于现有技术，本发明创造所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒具有以下优势：

附图说明

图1为本发明试剂盒的制备工艺流程图。

具体实施方式

除有定义外，以下实施例中所用的技术术语具有与本发明创造所属领域技术人员普遍理解的相同含义。以下实施例中所用的试验试剂，如无特殊说明，均为常规生化试剂；所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法。

下面结合实施例来详细说明本发明创造。

本发明所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，本试剂盒中使用的新型冠状病毒抗原为2019-nCOV重组抗原，所述2019-nCOV重组抗原的氨基酸序列如下表所示，

重组抗原的氨基酸系列信息

本实施例所述的试剂盒的制备方法，包括如下步骤：

1.工作液

1.1鼠抗人IgG-荧光微球制备方法

将荧光微球用0.05MBB PH为7.4的缓冲液配制成1：10-1：5的溶液，混匀后在14000RPM，2-8℃条件下离心15min，弃上清，用0.05M的HEPES缓冲液复溶，PH为6.0复溶后加入新配制的浓度为20mg/mL的碳二亚胺溶液10μL,吹吸混匀后，向其中加入新配制的浓度为20mg/mL的N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液10μL，常温混匀10min,离心处理，弃上清，用0.05M的pH为7.4的Tris复溶至原体积；向其中加入100微克/毫升的鼠抗人IgG，常温混匀2小时，加入牛血清蛋白和/或甘氨酸中的一种或几种，封闭0.5小时，离心处理，弃上清，用0.05M含糖的BB缓冲液复溶至原体积得到荧光标记鼠抗人IgG(2-8度保存备用)。

1.2荧光标记鼠抗人IgG复溶液的配制

将PH为8.0的0.05M BB加入海藻糖0.1％，甘氨酸0.25％，牛血清蛋白0.5％，Casein-Na 0.3％，TW-20 0.3％(均为质量分数，TW-20是体积分数)混合均匀即得。

2.样本稀释液配制

将0.05M PH值为7.0的HEPES；质量百分比0.5％的海藻糖；质量百分比0.5％的NaCl；质量百分比1.5％的牛血清蛋白；质量百分比0.1％的Casein-Na；体积百分比0.5％的TW-20；质量百分比0.2％的EDTA-2Na。

3.检测卡

3.1制备方法

荧光标记垫：将荧光标记的鼠抗人IgG与荧光标记鼠抗人IgG复溶液按1：8稀释，喷涂在玻纤膜或聚酯膜膜材上，处理量为55微升每平方厘米，37℃条件下，烘干12小时，即得荧光标记垫。

需要说明的是，作为本发明的另一种实施方式，检测卡中也可不包括荧光标记垫，此时工作液单独在2-8度保存备用，保质期12个月，需要检测时，将稀释后的待测样本加入至复溶液稀释后的鼠抗人IgG-荧光微球溶液中，在加至检测卡中进行检测。

样品垫：样品垫处理液为pH＝7.4的PB缓冲液，含量量百分比0.9％的NaCl，质量百分比1.2％的蔗糖，TW-20 0.5％，将样品垫处理液以60微升每平方厘米的量，喷涂或浸泡玻纤膜或聚酯膜，37℃条件下，烘干12小时，即得样品垫。

滤血膜：可直接使用；也可以经过抗RBC抗体处理后使用，处理浓度可以在0.05mg/ml,处理量为60微升每平方厘米，37℃条件下，烘干12小时。可起到拦截血液样本中的红细胞的作用。

贴膜：将硝酸纤维素膜和吸水滤纸粘贴于PVC板上。

包被：分别将鼠抗人IgG及2019-nCOV抗原配制成溶液，使用划膜喷金仪将羊抗鼠IgG包被在C线的位置，使用划膜喷金仪将2019-nCOV抗原包被在T线的位置，37℃干燥后得到包被的硝酸纤维素膜；

贴板：将吸水纸、NC膜、荧光标记垫、滤血膜、样品垫依次搭接的粘贴在PVC板上组成试剂板；

切条：用斩切机将试剂板分切成4.0±0.2mm的试剂条；

装卡：将试剂条装入卡中扣合；

贴签：按要求在试剂条、铝箔袋、包装盒、缓冲液管上粘贴对应的标签；

装袋封口：将试剂卡及干燥剂装入铝箔袋中，使用连续封口机封口；

3.2使用要求

在2～30℃条件下储存，有效期12个月；铝箔袋开封后，应2小时内使用。

4.企业参考品

企业参考品，包括阴性参考品，阳性参考品，最低检出限参考品，精密度参考品。

4.1阴性参考品

对10份企业阴性参考品进行检测，结果不得出现假阳性。制备方法，经过核酸多次检测的10份正常人2019-nCoV-IgG阴性血清，灭活后，每份分装量为0.5mL，-20℃保存。

4.2阳性参考品

对10份企业阳性参考品进行检测，结果不得出现假阴性。制备方法，经过核酸多次检测后的10份2019-nCoV-IgG抗体阳性血清，灭活后，每份分装量为0.5mL，-20℃保存。

4.3最低检出限参考品

对企业参考品中的灵敏度参考品进行检测，结果是企业参考品的最低检出限不低于L2。制备方法，将1份2019-nCoV-IgG抗体阳性血清灭活后，用含有牛血清的稀释液进行系列稀释(L1-L4)，要求最低检出限的企业参考品不低于L2。每份灵敏度参考品分装量为0.5mL，-20℃保存。

4.4精密度参考品

对精密性参考品进行检测，10次反应结果均为阳性，且T线显色度均一。制备方法，取2019-nCoV-IgG抗体阳性样本，灭活后作为精密性参考品，每份分装量为0.5mL，-20℃保存。

试剂盒的检测方法：

1.使用相配套的荧光免疫分析仪Axceed p200：开机后进入样本检测界面。

2.用移液器取50μL血液样本(血清、血浆或全血)加入到样本稀释液中(血液样本与样本稀释液以体积比为1：10混合)，用移液器反复抽吸混匀至少10次。

3.用移液器取100μL经过充分混匀和反应后的样本缓冲液加入到检测卡的加样孔中并计时。

4.加样15min后，将检测卡插入到仪器卡槽中并选择样本类型，立即点击“检测”键，在1分钟内完成检测。

5.记录或连接打印机打印结果，或将检测结果上传到相连接的信息化管理软件。

6.以上实验过程在25℃±1℃环境中进行。

实验过程应注意：

1.操作过程需要保持连续性。

2.除非检测卡准备即刻使用，否则必须将其保存在密封铝箔袋中。一旦打开铝箔袋，须于2小时内使用，使用后，请丢弃处理，禁止重复使用。

3.缓冲液请避光保存，请勿长时间暴露在光线直接照射中。

4.缓冲液在使用前应恢复至室温。

质量控制：

当检测界面提示“质控值过低”时，需重新检测。

阳性判断值：

根据684份血清样本检测结果，经统计学分析，2019-nCoV阴性样本结果呈正偏态分布，临界值(cut-off)定为：临界值＝阳性对照均值×0.1+阴性对照均值。

检验结果的解释：

样本S/CO＝样本T/C值/cut-off。

阴性判断：样品T/C值<临界值(cut-off)，样本S/CO＜1.0，检测结果判为阴性；

阳性判断：样品T/C值≥临界值(cut-off)，样本S/CO≥1.0，检测结果判为阳性；

该产品临床试验以《新型冠状病毒肺炎诊疗方案》明确的疾病确诊/排除标准为对比，选取684例病例，其中确诊病例282例，排除病例402例。试验结果显示见下表，该产品临床灵敏度93.2％、特异度为94.1％。

将三批连续生产的产品存放在37℃温箱，分别在第0天、第7天、第21天、第30天和第35天进行检测，检测产品的物理性能、最低检出限、精密度和准确性，结果见下表：

具体数据见下表：

以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。

序列表

<110> 博奥赛斯（天津）生物科技有限公司

<120> 一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒

<160> 6

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 204

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

Met Ser Asp Asn Gly Pro Gln Asn Gln Arg Asn Ala Pro Arg Ile Thr

1 5 10 15

Phe Gly Gly Pro Ser Asp Ser Thr Gly Ser Asn Gln Asn Gly Glu Arg

20 25 30

Ser Gly Ala Arg Ser Lys Gln Arg Arg Pro Gln Gly Leu Pro Asn Asn

35 40 45

Thr Ala Ser Trp Phe Thr Ala Leu Thr Gln His Gly Lys Glu Asp Leu

50 55 60

Lys Phe Pro Arg Gly Gln Gly Val Pro Ile Asn Thr Asn Ser Ser Pro

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Asp Asp Gln Ile Gly Tyr Tyr Arg Arg Ala Thr Arg Arg Ile Arg Gly

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100 105 110

Leu Gly Thr Gly Pro Glu Ala Gly Leu Pro Tyr Gly Ala Asn Lys Asp

115 120 125

Gly Ile Ile Trp Val Ala Thr Glu Gly Ala Leu Asn Thr Pro Lys Asp

130 135 140

His Ile Gly Thr Arg Asn Pro Ala Asn Asn Ala Ala Ile Val Leu Gln

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Leu Pro Gln Gly Thr Thr Leu Pro Lys Gly Phe Tyr Ala Glu Gly Ser

165 170 175

Arg Gly Gly Ser Gln Ala Ser Ser Arg Ser Ser Ser Arg Ser Arg Asn

180 185 190

Ser Ser Arg Asn Ser Thr Pro Gly Ser Ser Arg Gly

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<210> 2

<211> 244

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

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1 5 10 15

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20 25 30

Ala Arg Met Ala Gly Asn Gly Gly Asp Ala Ala Leu Ala Leu Leu Leu

35 40 45

Leu Asp Arg Leu Asn Gln Leu Glu Ser Lys Met Ser Gly Lys Gly Gln

50 55 60

Gln Gln Gln Gly Gln Thr Val Thr Lys Lys Ser Ala Ala Glu Ala Ser

65 70 75 80

Lys Lys Pro Arg Gln Lys Arg Thr Ala Thr Lys Ala Tyr Asn Val Thr

85 90 95

Gln Ala Phe Gly Arg Arg Gly Pro Glu Gln Thr Gln Gly Asn Phe Gly

100 105 110

Asp Gln Glu Leu Ile Arg Gln Gly Thr Asp Tyr Lys His Trp Pro Gln

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Ile Ala Gln Phe Ala Pro Ser Ala Ser Ala Phe Phe Gly Met Ser Arg

130 135 140

Ile Gly Met Glu Val Thr Pro Ser Gly Thr Trp Leu Thr Tyr Thr Ala

145 150 155 160

Ala Ile Lys Leu Asp Asp Lys Asp Pro Asn Phe Lys Asp Gln Val Ile

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Leu Leu Asn Lys His Ile Asp Ala Tyr Lys Thr Phe Pro Pro Thr Glu

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Leu Asp Asp Phe Ser Lys Gln Leu Gln Gln Ser Met Ser Ser Ala Asp

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Ser Thr Gln Ala

<210> 3

<211> 325

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

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20 25 30

Thr Arg Gly Val Tyr Tyr Pro Asp Lys Val Phe Arg Ser Ser Val Leu

35 40 45

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50 55 60

Phe His Ala Ile His Val Ser Gly Thr Asn Gly Thr Lys Arg Phe Asp

65 70 75 80

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Lys Ser Asn Ile Ile Arg Gly Trp Ile Phe Gly Thr Thr Leu Asp Ser

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Lys Thr Gln Ser Leu Leu Ile Val Asn Asn Ala Thr Asn Val Val Ile

115 120 125

Lys Val Cys Glu Phe Gln Phe Cys Asn Asp Pro Phe Leu Gly Val Tyr

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Tyr His Lys Asn Asn Lys Ser Trp Met Glu Ser Glu Phe Arg Val Tyr

145 150 155 160

Ser Ser Ala Asn Asn Cys Thr Phe Glu Tyr Val Ser Gln Pro Phe Leu

165 170 175

Met Asp Leu Glu Gly Lys Gln Gly Asn Phe Lys Asn Leu Arg Glu Phe

180 185 190

Val Phe Lys Asn Ile Asp Gly Tyr Phe Lys Ile Tyr Ser Lys His Thr

195 200 205

Pro Ile Asn Leu Val Arg Asp Leu Pro Gln Gly Phe Ser Ala Leu Glu

210 215 220

Pro Leu Val Asp Leu Pro Ile Gly Ile Asn Ile Thr Arg Phe Gln Thr

225 230 235 240

Leu Leu Ala Leu His Arg Ser Tyr Leu Thr Pro Gly Asp Ser Ser Ser

245 250 255

Gly Trp Thr Ala Gly Ala Ala Ala Tyr Tyr Val Gly Tyr Leu Gln Pro

260 265 270

Arg Thr Phe Leu Leu Lys Tyr Asn Glu Asn Gly Thr Ile Thr Asp Ala

275 280 285

Val Asp Cys Ala Leu Asp Pro Leu Ser Glu Thr Lys Cys Thr Leu Lys

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Gln Pro Thr Glu Ser

325

<210> 4

<211> 395

<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

Thr Leu Lys Ser Phe Thr Val Glu Lys Gly Ile Tyr Gln Thr Ser Asn

1 5 10 15

Phe Arg Val Gln Pro Thr Glu Ser Ile Val Arg Phe Pro Asn Ile Thr

20 25 30

Asn Leu Cys Pro Phe Gly Glu Val Phe Asn Ala Thr Arg Phe Ala Ser

35 40 45

Val Tyr Ala Trp Asn Arg Lys Arg Ile Ser Asn Cys Val Ala Asp Tyr

50 55 60

Ser Val Leu Tyr Asn Ser Ala Ser Phe Ser Thr Phe Lys Cys Tyr Gly

65 70 75 80

Val Ser Pro Thr Lys Leu Asn Asp Leu Cys Phe Thr Asn Val Tyr Ala

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Asp Ser Phe Val Ile Arg Gly Asp Glu Val Arg Gln Ile Ala Pro Gly

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Gln Thr Gly Lys Ile Ala Asp Tyr Asn Tyr Lys Leu Pro Asp Asp Phe

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Thr Gly Cys Val Ile Ala Trp Asn Ser Asn Asn Leu Asp Ser Lys Val

130 135 140

Gly Gly Asn Tyr Asn Tyr Leu Tyr Arg Leu Phe Arg Lys Ser Asn Leu

145 150 155 160

Lys Pro Phe Glu Arg Asp Ile Ser Thr Glu Ile Tyr Gln Ala Gly Ser

165 170 175

Thr Pro Cys Asn Gly Val Glu Gly Phe Asn Cys Tyr Phe Pro Leu Gln

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Ser Tyr Gly Phe Gln Pro Thr Asn Gly Val Gly Tyr Gln Pro Tyr Arg

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Val Val Val Leu Ser Phe Glu Leu Leu His Ala Pro Ala Thr Val Cys

210 215 220

Gly Pro Lys Lys Ser Thr Asn Leu Val Lys Asn Lys Cys Val Asn Phe

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Asn Phe Asn Gly Leu Thr Gly Thr Gly Val Leu Thr Glu Ser Asn Lys

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Asp Ala Val Arg Asp Pro Gln Thr Leu Glu Ile Leu Asp Ile Thr Pro

275 280 285

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Asn Gln Val Ala Val Leu Tyr Gln Asp Val Asn Cys Thr Glu Val Pro

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Val Ala Ile His Ala Asp Gln Leu Thr Pro Thr Trp Arg Val Tyr Ser

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<212> PRT

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

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Asn Lys Val Thr Leu Ala Asp Ala Gly Phe Ile Lys Gln Tyr Gly Asp

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Asp Ser Leu Ser Ser Thr Ala Ser Ala Leu Gly Lys Leu Gln Asp Val

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Ser Asn Phe Gly Ala Ile Ser Ser Val Leu Asn Asp Ile Leu Ser Arg

275 280 285

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Arg

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<212> PRT

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130 135 140

Glu Lys Asn Phe Thr Thr Ala Pro Ala Ile Cys His Asp Gly Lys Ala

145 150 155 160

His Phe Pro Arg Glu Gly Val Phe Val Ser Asn Gly Thr His Trp Phe

165 170 175

Val Thr Gln Arg Asn Phe Tyr Glu Pro Gln Ile Ile Thr Thr Asp Asn

180 185 190

Thr Phe Val Ser Gly Asn Cys Asp Val Val Ile Gly Ile Val Asn Asn

195 200 205

Thr Val Tyr Asp Pro Leu Gln Pro Glu Leu Asp Ser Phe Lys Glu Glu

210 215 220

Leu Asp Lys Tyr Phe Lys Asn His Thr Ser Pro Asp Val Asp Leu Gly

225 230 235 240

Asp Ile Ser Gly Ile Asn Ala Ser Val Val Asn Ile Gln Lys Glu Ile

245 250 255

Asp Arg Leu Asn Glu Val Ala Lys Asn Leu Asn Glu Ser Leu Ile Asp

260 265 270

Leu Gln Glu Leu Gly Lys Tyr Glu Gln Tyr Ile Lys Trp Pro Trp Tyr

275 280 285

Ile Trp Leu Gly Phe Ile Ala Gly Leu Ile Ala

290 295

Claims

1.一种新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：包括设有包被板和标记垫的检测卡，所述包被板的检测区包被有新型冠状病毒抗原，质控区包被有羊抗鼠IgG或驴抗羊IgG。

2.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述新型冠状病毒抗原包括如下所示的氨基酸序列的重组抗原：

3.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述标记垫上固化有包含荧光标记的抗人IgG的工作液，所述工作液的制备方法包括如下步骤：

将荧光标记物用0.05MBB PH为7.4-8.0的缓冲液配制成1：10-1：5的溶液，混匀后在14000-20000RPM，2-8℃条件下离心，弃上清，用0.05-0.1M的HEPES或MES缓冲液复溶，PH为5.5-6.0复溶后加入新配制的浓度为15-35mg/mL的碳二亚胺溶液10-100μL,吹吸混匀后，向其中加入新配制的浓度为15-35mg/mL的N-羟基硫代琥珀酰亚胺溶液10-100μL，常温混匀10-30min,离心处理，弃上清，用0.05-0.1M的Tris或CB缓冲液复溶至原体积；向其中加入100-200微克/毫升的抗人IgG，常温混匀2-4小时，加入牛血清蛋白和/或甘氨酸中的一种或几种，封闭0.5-2小时，离心处理，弃上清，用0.05-0.1M含糖的MES或BB缓冲液复溶至原体积得到荧光标记抗人IgG。

4.根据权利要求3所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述荧光标记抗人IgG经过荧光标记抗人IgG复溶液稀释后使用，所述荧光标记抗人IgG复溶液包括如下组分：0.05-0.1M PH为7.4-8.0的BB；质量百分比为0.1-0.5％的海藻糖；质量百分比为0.2-0.5％甘氨酸；质量百分比为0.5-1.5％的牛血清蛋白，质量百分比为0.1-0.3％的Casein-Na；质量百分比为0.3-1％的TW-20。

5.根据权利要求4所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述荧光标记抗人IgG与荧光标记抗人IgG复溶液按照重量比为1：2-1：20的比例稀释。

6.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括样本稀释液，所述样本稀释液由包括如下组分制得：0.05-0.1M PH值为7.0-7.5的HEPES；质量百分比0.1-0.5％的海藻糖；质量百分比0.5-1％的NaCl；质量百分比0.5-1.5％的牛血清蛋白；质量百分比0.05－0.1％的Casein-Na；体积百分比0.1-0.5％的TW-20；质量百分比0.05-0.2％的EDTA-2Na。

7.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述样本稀释液与将待测样本按照体积比为10：1的比例稀释。

8.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：所述荧光标记物为羧基荧光微球、异硫氰酸荧光素、罗丹明及其衍生物中的一种。

9.根据权利要求1所述的新型冠状病毒IgG抗体荧光免疫法检测试剂盒，其特征在于：当质控区包被羊抗鼠IgG时，所述抗人IgG为鼠抗人IgG，当质控区包被驴抗羊IgG时，所述抗人IgG为羊抗人IgG。

10.权利要求1-9任一所述的新试剂盒在检测型冠状病毒中的应用。