CN111467385A - 组合物在预防或治疗神经退行性疾病中的用途 - Google Patents

组合物在预防或治疗神经退行性疾病中的用途 Download PDF

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Abstract

本发明提出了药物组合物以及组合物在预防或治疗神经退行性疾病中的用途。该药物组合物包括：印加果油和/或硫辛酸，所述药物组合物用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。该药物组合物预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。

Description

组合物在预防或治疗神经退行性疾病中的用途
技术领域
本发明涉及生物医药领域，具体地，本发明涉及组合物在预防或治疗神经退行性疾病中的用途。
背景技术
在衰老和神经退行性疾病中，炎症、氧化应激和线粒体功能下降是这类神经疾病的普遍特点，例如阿尔兹海默症、帕金森综合症、亨廷顿病等。氧化损伤会导致线粒体内能量转换体系障碍，进而损伤线粒体功能活性。
神经退行性疾病的发病机制通常涉及线粒体的功能紊乱，其中负责调节阴离子通道(voltage dependent anion channel，VDAC)氧化还原状态、维持线粒体完整性的细胞质谷氧还蛋白-1的下调会进一步加剧这一现象。
帕金森病(Parkinson’s Disease，PD)是一种常见的中老年人神经系统退行性疾病，多见于中老年人，其发病率与年龄密切相关，至2015年的数据结果显示，PD总患病率为315/10万人，60岁-69岁人群患病率约428/10万人，80岁以上发病率高达1903/10万人，平均发病年龄为55岁，男性PD的患病率约为女性的1.5倍。目前，全世界大约有450万PD患者，而中国患病总人数占全球患者的50％以上。随着老龄化社会的加快，PD患病率及患病总数逐年增长，给家庭和社会都带来了沉重负担。
PD的特征性的病理变化主要为中脑黑质致密部多巴胺能神经元退行性病变导致的多巴胺(DA)与乙酰胆碱平衡失调，及残存的神经元内含有聚集α-突触核蛋白(α-synuclein)的路易小体(Lewy body)形成。多巴胺能神经元的病理变化会导致黑质纹状体通路破坏及尾状核、壳核中多巴胺含量减少，通常当多巴胺的减少量高于70％时即会出现PD临床症状，其中包括非运动症状，如认知障碍、嗅觉功能减退、睡眠障碍、自主神经功能紊乱、精神症状、感觉障碍等，及运动障碍如静止性震颤、肌肉僵直、运动迟缓、姿势不稳、步态异常等。多年来PD因其高患病率、高致残性以及无法根治，一直都是医学界研究的热点领域，但PD的发病机制尚未完全明确。
硫辛酸在西兰花、菠菜、动物内脏等常见食物中大量存在，是一种生物体内由线粒体合成的辅酶，具有一定抗氧化性。
印加果(Plukenetia volubilis L.，Inca Peanut，sacha inchi)又称南美油藤、美藤果、印奇果、星油藤等，为大戟科藤本植物、多年生油料作物。原产于南美洲秘鲁亚马逊河流域雨林，最初由印加人将野生改为家种。
印加果种子富含油脂(35％～60％)和蛋白质(27％)及带有热不稳定苦味成分。该油富含ω-3、ω-6和ω-9多不饱和脂肪酸及维生素A、维生素E和其它一些微量元素，其不饱和脂肪酸含量达92％以上，对人体具有良好营养作用；并可用于食品、保健品、药品、化妆品等，具有预防心血管疾病、保养肌肤等作用。
印加果油中含量大量脂质活性成分，主要为生育酚，同时含有甾醇、多酚、胡萝卜素等。研究显示印加果油中的生育酚主要为γ-生育酚和δ-生育酚，并且不同方法得到印加果油的生育酚含量有差异。
油脂的甘三酯(TAG)组成对于理解油脂的性质非常重要，而印加果油中含有的21种TAG，大部分都至少含有一个亚麻酸，可以降低总胆固醇和低密度胆固醇的水平，从而降低发生心血管疾病的风险。
印加果油可以降低胆固醇和甘油三酯含量，增加高密度胆固醇含量。摄入印加果油能降低高胆固醇患者总胆固醇和非酯化脂肪酸平均水平，并提高高密度脂蛋白平均值，及胰岛素水平。
发明内容
临床上现有治疗神经退行性疾病的药物，如治疗帕金森病的单胺氧化酶抑制剂类药物，只能改善症状，不能延缓和控制疾病的发生、发展。
基于上述事实和问题的发现，发明人开发了一种能用于延缓和控制神经退行性疾病发生和发展的新的药物组合物。发明人首次发现了硫辛酸与印加果油的混合物能有效预防神经细胞凋亡、提高神经细胞的存活率、有效升高线粒体膜电势、减缓线粒体膜的损伤、有效升高神经细胞内ATP水平、有效保护神经细胞能量代谢水平。因此，发明人惊喜地首次发现了硫辛酸与印加果油的混合物具有神经保护作用，有预防和控制神经退行性疾病(尤其是帕金森病)的发生，及延缓疾病发展的功效。同时，发明人还发现了硫辛酸与印加果油的混合物可与临床上现有的治疗退行性疾病药物联合使用，提高疗效，降低现有临床药物的副作用，既能改善症状，又能延缓、控制神经退行性疾病的进程。
在本发明的第一方面，本发明提出了一种药物组合物。根据本发明的实施例，所述药物组合物包括：印加果油和/或硫辛酸，所述药物组合物用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。发明人通过实验发现，硫辛酸与印加果油同时使用有如下至少之一的优势：1)提高神经细胞的存活率，2)有效预防神经细胞凋亡，3)有效升高神经细胞线粒体膜电势，进而有效减缓或修复线粒体膜损伤，即可有效保护线粒体功能，4)有效升高神经细胞内ATP水平，有效保护神经细胞能量代谢水平，进而有效减缓或修复神经细胞的损伤，5)有效预防神经退行性疾病(尤其是帕金森病)的发生和进展，同时有效治疗神经退行性疾病，且相对于现有临床上使用的治疗神经退行性疾病的药物没有副作用。进而，根据本发明实施例的药物组合物预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
在本发明的第二方面，本发明提出了一种食品。根据本发明的实施例，所述食品包括：印加果油和/或硫辛酸，所述食品用于下列的至少之一：预防和/或缓解神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。如前所述，包含印加果油和/或硫辛酸的食品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
在本发明的第三方面，本发明提出了一种保健品。根据本发明的实施例，所述保健品包括：印加果油和/或硫辛酸，所述保健品用于下列的至少之一：预防和/或缓解神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。如前所述，包含印加果油和/或硫辛酸的保健品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
在本发明的第四方面，本发明提出了印加果油和/或硫辛酸在制备药物、食品或保健品中的用途，所述药物、食品或保健品用于下列的至少之一：预防和/或治疗和/或缓解神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。如前所述，利用印加果油和/或硫辛酸制备获得的药物、食品或保健品能预防和/或治疗和/或缓解神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
在本发明的第五方面，本发明提出了一种药物联合。根据本发明的实施例，所述药物联合用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平，所述药物联合包括：印加果油作为第一活性剂，硫辛酸或其药学上可接受的盐作为第二活性剂。如前所述，根据本发明实施例的药物联合预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
在本发明的第六方面，本发明提出了一种药盒。根据本发明的实施例，所述药盒用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平，所述药盒包括：第一容器，所述第一容器中设置有印加果油；第二容器，所述第二容器中设置有硫辛酸或其药学上可接受的盐。如前所述，根据本发明实施例的药盒预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
附图说明
图1是根据本发明实施例的细胞存活率的统计图，其中，MPP+为1-甲基-4-苯基-吡啶离子，LA为硫辛酸，SIO为印加果油，柱高代表细胞存活率，柱高则代表细胞存活率高(％，与对照组相比)，结果表示为平均值±标准误差(x±SD,n≥10)；不同字母表示差异显著(P<0.05)；
图2是根据本发明实施例的AO/EB染色图，其中，MPP+为1-甲基-4-苯基-吡啶离子，LA为硫辛酸，SIO为印加果油，细胞数量少代表存活率低，细胞形态变圆、固缩，代表细胞发生凋亡，其中，图中的箭头标识为明显凋亡的细胞；
图3是根据本发明实施例的JC-1线粒体膜电势(Δψ)检测结果图，其中，MPP+为1-甲基-4-苯基-吡啶离子，LA为硫辛酸，SIO为印加果油，柱高代表线粒体膜电势，比例高则代表膜电势低，线粒体膜损伤严重(绿/红荧光比，％，与对照组相比)，结果表示为平均值±标准误差(x±SD,n≥10)；不同字母表示差异显著(P<0.05)；
图4是根据本发明实施例的细胞内ATP水平检测结果图，其中，MPP+为1-甲基-4-苯基-吡啶离子，LA为硫辛酸，SIO为印加果油，柱高代表细胞内ATP水平，水平低代表细胞受损，ATP水平下降(％，与对照组相比)，结果表示为平均值±标准误差(x±SD,n≥10)；不同字母表示差异显著(P<0.05)；
图5是根据本发明实施例的含有浓度为0、1、2、5mmol/L MPP+的无血清培养基，培养箱内孵育24h后细胞活力的检测结果图；
图6是根据本发明实施例的含有浓度为0、12.5、25、50、100μmol/L LA或20-50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育24h后细胞活力的检测结果图；
图7是根据本发明实施例的含有(或不含)0、12.5、25、50、100μmol/L LA或20-50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后细胞活力的检测结果图；
图8是根据本发明实施例的在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，不同浓度配比的硫辛酸与印加果油混合物保护线粒体膜电势的结果图；
图9是根据本发明实施例的在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，不同浓度配比的硫辛酸与印加果油混合物保护细胞能量代谢水平的结果图；
图10是根据本发明实施例的在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，硫辛酸印加果油混合物与司来吉兰联合使用可有效提升司来吉兰单独作用下的细胞能量代谢水平的结果图；
图11是根据本发明实施例的在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，硫辛酸印加果油混合物在保护线粒体膜电势方面优于硫辛酸或印加果油的单独作用的结果图；
图12是根据本发明实施例的在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，硫辛酸印加果油混合物在保护细胞能量代谢水平方面优于硫辛酸或印加果油的单独作用的结果图；
图13是根据本发明实施例的在正常细胞和MPP+构建的帕金森病细胞模型中，不同浓度的印加果油对细胞存活率具有不同程度的改善作用的结果图。
具体实施方式
下面详细描述本发明的实施例，所述实施例的示例在附图中示出。下面通过参考附图描述的实施例是示例性的，旨在用于解释本发明，而不能理解为对本发明的限制。
需要说明的是，本发明中所述的“印加果油”相关功能成分的配比为：每100g印加果油包含α-亚麻酸41.9g，亚油酸35.6g，油酸8.3g。
需要说明的是，本发明中所述的“硫辛酸”可以商业购买，也可以依据现有技术中的方法合成获得。
需要说明的是，本发明中的硫辛酸可以与印加果油直接混合，也可以采用将硫辛酸先溶解在10％NaOH溶液或脂肪族溶剂(如甲醇、乙醇、氯仿、乙醚、DMSO等)中，再与印加果进行混合，也可以选择硫辛酸的注射液、片剂或胶囊等与印加果油进行混合。
需要说明的是，在附图中的柱状图上出现的a、b、c各自代表的是显著性，字母不同代表组间具有统计学意义(p<0.05)。
药物组合物
在本发明的第一方面，本发明提出了一种药物组合物。根据本发明的实施例，所述药物组合物包括：印加果油和/或硫辛酸，所述药物组合物用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。发明人通过实验发现，硫辛酸与印加果油同时使用至少具有如下之一的优势：1)提高神经细胞的存活率，2)有效预防神经细胞凋亡，3)有效升高神经细胞线粒体膜电势，进而有效减缓或修复线粒体膜损伤，进而有效保护线粒体膜电势，4)有效升高神经细胞内ATP水平，有效保护神经细胞能量代谢水平，进而有效减缓或修复神经细胞的损伤，5)有效预防神经退行性疾病(尤其是帕金森病)的发生和进展，同时有效治疗神经退行性疾病，且相对于现有临床上使用的治疗神经退行性疾病的药物没有副作用。进而，根据本发明实施例的药物组合物预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
根据本发明的实施例，所述神经退行性疾病为帕金森病。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物治疗和/或预防帕金森病的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物提高人神经母细胞瘤细胞存活率的效果更佳、减少人神经母细胞瘤细胞凋亡的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电势的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1。由此，根据本发明实施例的药物组合物预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。由此，根据本发明实施例的药物组合物预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更进一步提高、副作用更进一步减小、提高神经细胞的存活率的效果更进一步提高、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更进一步提高、保护神经细胞能量代谢水平的效果更进一步提高。
根据本发明的实施例，所述印加果油与所述硫辛酸是以溶液的形式提供的。需要说明的是，硫辛酸可以与印加果油直接混合，也可以采用DMSO，将两者各自溶解之后再混合，也可以选择硫辛酸的注射液、片剂或胶囊等与印加果油进行混合。
根据本发明的实施例，所述硫辛酸的浓度为12.5～100μmol/L。由此，根据本发明实施例的药物组合物预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述药物组合物进一步包括：药学上可以接受的赋形剂。
根据本发明的实施例，所述药物组合物呈丸剂、颗粒剂、片剂、糖浆剂、合剂、胶囊剂、酊剂、搽剂或注射剂。
根据本发明的实施例，所述药物组合物进一步包括：其他治疗神经退行性疾病的药物。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物与其他治疗神经退行性疾病的药物一起用，能显著降低上述药物的副作用，提高疗效。进而，进一步包含其他治疗神经退行性疾病药物的药物组合物既能改善疾病的症状，又能延缓、控制神经退行性疾病的进程。
根据本发明的实施例，所述其他治疗神经退行性疾病的药物包括左旋多巴、卡比多巴、司来吉兰。由此，根据本发明实施例的药物组合物改善疾病症状的效果更佳，同时延缓、控制疾病进程的效果也更佳。
根据本发明的一些实施例，本发明的用于治疗和/或预防神经退行性疾病的药物组合物还可以包括药物上可接受的载体，且药物组合物的剂型不受特别限制。对于口服给药，该药物上可接受的载体可以包括粘合剂，润滑剂，崩解剂，赋形剂，增溶剂，分散剂，稳定剂，悬浮剂，着色剂和芳香剂。对于局部给药的制剂，药物上可接受的载体可以包括碱，赋形剂，润滑剂和防腐剂。本发明的药物组合物可以与上述的药物上可接受的载体结合被制备成各种剂型。例如，对于口服给药，药物组合物可以被制备成小片，片剂，胶囊，酏剂，混悬液，糖浆或薄片。药物组合物还可以被制备成溶液，悬浮液，药片，药丸，胶囊和长效制剂。
其中，根据本发明的一些具体示例，适合药物配方的载体中赋形剂和稀释液的可以包括：乳糖，葡萄糖，蔗糖，山梨糖醇，甘露醇，木糖醇，赤藻糖醇，麦芽糖醇，淀粉，阿拉伯橡胶，藻酸盐，凝胶，磷酸钙，硅酸钙，纤维素，甲基纤维素，微晶纤维素，聚乙烯吡咯烷酮，水，羟基苯甲酸甲酯，羟苯丙酯，滑石，硬脂酸镁和矿物油。
根据本发明的另一些实施例，本发明的药物组合物中还可以包括填充剂，抗凝血剂，润滑剂，保湿剂，芳香剂和防腐剂。
根据本发明的实施例，本发明的药物组合物能够用于提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，升高神经细胞内ATP水平。因而，本发明的药物组合物可以在治疗或预防神经退行性疾病时被给药。
在本文中所使用的术语“给药”指将预定量的物质通过某种适合的方式引入病人。本发明的药物可以通过常见的途径被给药，只要它可以到达预期的组织。此外，本发明的药物组合物可以使用将活性成分传送到靶细胞的特定器械来给药。
本发明的药物组合物的给药频率和剂量可以通过多个相关因素被确定，该因素包括要被治疗的疾病类型，给药途径，病人年龄，性别，体重和疾病的严重程度以及作为活性成分的药物类型。根据本发明的一些实施例，日剂量可分为适宜形式的1剂、2剂或多剂，以在整个时间段内以1次、2次或多次给药，只要达到治疗有效量即可。
术语“治疗有效量”是指化合物足以显著改善某些与疾病或病症相关的症状的量，也即为给定病症和给药方案提供治疗效果的量。例如，在慢性肾病的减少、预防、延缓、抑制或阻滞疾病或病症的任何症状的药物或化合物应当是治疗有效的。治疗有效量的药物或化合物不需要治愈疾病或病症，但将为疾病或病症提供治疗，使得个体的疾病或病症的发作被延缓、阻止或预防，或者疾病或病症的症状得以缓解，或者疾病或病症的期限被改变，或者例如疾病或病症变得不严重，或者加速康复。
术语“治疗”用于指获得期望的药理学和/或生理学效果。所述效果就完全或部分预防疾病或其症状而言可以是预防性的，和/或就部分或完全治愈疾病和/或疾病导致的不良作用而言可以是治疗性的。本文使用的“治疗”涵盖哺乳动物、特别是人的疾病(主要指神经退行性疾病)的治疗，包括：(a)在容易患病但是尚未确诊得病的个体中预防疾病(例如预防神经退行性疾病)或病症发生；(b)抑制疾病，例如阻滞疾病发展；或(c)缓解疾病，例如减轻与疾病相关的症状。本文使用的“治疗”涵盖将药物或化合物给予个体以治疗、治愈、缓解、改善、减轻或抑制个体的疾病的任何用药，包括但不限于将含本文所述硫辛酸和印加果油的药物给予有需要的个体。
根据本发明的实施例，本发明的药物或药物组合物可与常规治疗方法和/或疗法相结合使用，或者可与常规治疗方法和/或疗法分开使用。当本发明的药物或药物组合物在采用与其它药物的联合疗法中给药时，它们可序贯地或同时地给予个体。或者，本发明的药物组合物可包含本发明的硫辛酸和印加果油、药学上可接受的载体或药学上可接受的赋形剂以及本领域已知的其它治疗药或预防药的组合。
食品
在本发明的第二方面，本发明提出了一种食品。根据本发明的实施例，所述食品包括：印加果油和/或硫辛酸，所述食品用于下列的至少之一：预防和/或缓解神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。如前所述，包含印加果油和/或硫辛酸的食品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
根据本发明的实施例，所述神经退行性疾病为帕金森病。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物预防和/或缓解帕金森病的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物提高人神经母细胞瘤细胞存活率的效果更佳、减少人神经母细胞瘤细胞凋亡的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电势的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1。由此，根据本发明实施例的食品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。由此，根据本发明实施例的食品预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更进一步提高、副作用更进一步减小、提高神经细胞的存活率的效果更进一步提高、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更进一步提高、保护神经细胞能量代谢水平的效果更进一步提高。
保健品
在本发明的第三方面，本发明提出了一种保健品。根据本发明的实施例，所述保健品包括：印加果油和/或硫辛酸，所述保健品用于下列的至少之一：预防和/或缓解神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。如前所述，包含印加果油和/或硫辛酸的保健品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
根据本发明的实施例，所述神经退行性疾病为帕金森病。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物预防和/或缓解帕金森病的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物提高人神经母细胞瘤细胞存活率的效果更佳、减少人神经母细胞瘤细胞凋亡的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电势的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1。由此，根据本发明实施例的保健品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。由此，根据本发明实施例的保健品预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更进一步提高、副作用更进一步减小、提高神经细胞的存活率的效果更进一步提高、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更进一步提高、保护神经细胞能量代谢水平的效果更进一步提高。
印加果油和/或硫辛酸在制备药物、食品或保健品中的用途
在本发明的第四方面，本发明提出了印加果油和/或硫辛酸在制备药物、食品或保健品中的用途，所述药物、食品或保健品用于下列的至少之一：预防和/或治疗和/或缓解神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平。如前所述，利用印加果油和/或硫辛酸制备获得的药物、食品或保健品能预防和/或治疗和/或缓解神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
根据本发明的实施例，所述神经退行性疾病为帕金森病。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物治疗帕金森病的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物提高人神经母细胞瘤细胞存活率的效果更佳、减少人神经母细胞瘤细胞凋亡的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电势的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1。由此，包含本发明实施例的印加果油和/或硫辛酸制备获得的药品、食品或保健品预防和/或缓解神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。由此，包含本发明实施例的印加果油和/或硫辛酸制备获得的药品、食品或保健品预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更进一步提高、副作用更进一步减小、提高神经细胞的存活率的效果更进一步提高、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更进一步提高、保护神经细胞能量代谢水平的效果更进一步提高。
药物联合
在本发明的第五方面，本发明提出了一种药物联合。根据本发明的实施例，所述药物联合用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平，所述药物联合包括：印加果油作为第一活性剂，硫辛酸或其药学上可接受的盐作为第二活性剂。如前所述，根据本发明实施例的药物联合预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
根据本发明的实施例，所述神经退行性疾病为帕金森病。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物治疗帕金森病的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物提高人神经母细胞瘤细胞存活率的效果更佳、减少人神经母细胞瘤细胞凋亡的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电势的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与所述硫辛酸的质量比为1:5～1:1。由此，根据本发明实施例的药物联合预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。由此，根据本发明实施例的药物联合预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与所述硫辛酸是以溶液的形式提供的。根据本发明的实施例，所述硫辛酸的浓度为12.5～100μmol/L。由此，根据本发明实施例的药物联合预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述药物联合进一步包括：其他治疗神经退行性疾病的药物作为第三活性剂。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物与其他治疗神经退行性疾病的药物一起用，能显著降低上述药物的副作用，提高疗效。进而，进一步包含第三活性剂的药物联合既能改善疾病的症状，又能延缓、控制神经退行性疾病的进程。
根据本发明的实施例，所述其他治疗神经退行性疾病的药物包括左旋多巴、卡比多巴、司来吉兰。由此，根据本发明实施例的药物联合改善疾病症状的效果更佳，同时延缓、控制疾病进程的效果也更佳。
药盒
在本发明的第六方面，本发明提出了一种药盒。根据本发明的实施例，所述药盒用于下列的至少之一：预防和/或治疗神经退行性疾病，提高神经细胞存活率，减少神经细胞的凋亡，升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，升高神经细胞内ATP水平，所述药盒包括：第一容器，所述第一容器中设置有印加果油；第二容器，所述第二容器中设置有硫辛酸或其药学上可接受的盐。如前所述，根据本发明实施例的药盒预防和/或治疗神经退行性疾病的效果好、副作用小、能有效提高神经细胞的存活率、有效保护神经细胞的线粒体膜电势、有效保护神经细胞能量代谢水平。
根据本发明的实施例，所述神经退行性疾病为帕金森病。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物治疗帕金森病的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物提高人神经母细胞瘤细胞存活率的效果更佳、减少人神经母细胞瘤细胞凋亡的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞线粒体膜电势的效果更佳、保护人神经母细胞瘤细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油是以溶解在DMSO中的形式提供的，所述印加果油与所述硫辛酸的质量比为1:5～1:1。由此，根据本发明实施例的药盒预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。由此，根据本发明实施例的药盒预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述印加果油与所述硫辛酸是以溶液的形式提供的。
根据本发明的实施例，所述硫辛酸的浓度为12.5～100μmol/L。由此，根据本发明实施例的药盒预防和/或治疗神经退行性疾病的效果更好、副作用更小、提高神经细胞的存活率的效果更好、保护神经细胞的线粒体膜电势的效果更佳、保护神经细胞能量代谢水平的效果更佳。
根据本发明的实施例，所述药盒进一步包括第三容器，所述第三容器中设置有其他治疗神经退行性疾病的药物。发明人发现，硫辛酸和印加果油的混合物与其他治疗神经退行性疾病的药物一起用，能显著降低上述药物的副作用，提高疗效。进而，进一步包含第三容器的药盒既能改善疾病的症状，又能延缓、控制神经退行性疾病的进程。
根据本发明的实施例，所述其他治疗神经退行性疾病的药物包括左旋多巴、卡比多巴、司来吉兰。由此，根据本发明实施例的药盒改善疾病症状的效果更佳，同时延缓、控制疾病进程的效果也更佳。
以下详细介绍本发明的具体实施例。
在以下实施中所使用的“印加果油”为华大基因产品印加果食用油(美藤果油)，其中每100g印加果油包含α-亚麻酸41.9g，亚油酸35.6g，油酸8.3g。
“硫辛酸”的规格为：Sigma，T1395，(±)-α-硫辛酸。
实施例1
细胞培养及PD细胞模型建立
实验材料：人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)购自中国科学院典型培养物保藏委员会昆明细胞库。
细胞培养：
培养基为含10％胎牛血清的RPMI-1640培养基，培养条件为5％CO2，37℃恒温。
造模及给药方法：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L硫辛酸(LA)或20-50％w/w印加果油(SIO)的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。
MTT法检测细胞活力：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，加入(1)含有浓度为2mmol/L MPP+的无血清培养基，培养箱内孵育24h；或(2)含有浓度为100μmol/L LA或50％w/w SIO(即LA与SIO的质量比为1:1)的无血清培养基，培养箱内孵育24h；或(3)含有(或不含)100μmol/L LA或50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。弃去旧的培养基，每孔加入100μl，含有0.5mg/mL的MTT溶液，置培养箱中孵育4h以上。移除培养液，每孔加入100μl的DMSO，以溶解蓝紫色结晶，将96孔板置于37℃，振荡10分钟，使细胞内的形成的蓝紫色甲瓒完全溶解，最后使用酶标仪测定490nm波长处的吸光度值，并计算细胞活力。细胞活力(cell viability)计算方法如下：
细胞活力(％)＝处理组的吸光度值/对照组的吸光度值×100％
见图1，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病细胞模型中，硫辛酸与印加果油混合物可有效提高细胞存活率。
细胞染色与荧光标记：
采用AO/EB染色法观察SH-SY5Y细胞凋亡形态。将SH-SY5Y细胞接种于6孔板中(5×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育，4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA和50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。
AO/EB染色：
孵育结束后，用无菌PBS清洗细胞，加入AO/EB染色液(AO和EB终浓度均为50μg/mL)，避光染色1-5min后，将6孔板放置于倒置荧光显微镜下观察细胞凋亡形态并拍照。见图2，细胞染色和形态学观察，显示了在MPP+构建的帕金森病模型细胞中，不同浓度配比的硫辛酸与印加果油混合物均可有效预防细胞凋亡。箭头标识为明显凋亡细胞。
线粒体膜电势(Δψ)检测：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA和50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，加入浓度为10μg/mL的JC-1荧光染色液，培养箱孵育1h。最后在全波长多功能酶标仪中检测荧光值(绿光激发波长485nm，发射波长538nm；红光激发波长485nm，发射波长585nm)，最终线粒体膜电势结果以绿光与红光的比值呈现。见图3，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，配比为1:1的硫辛酸与印加果油混合物可有效保护线粒体膜电势。
细胞内ATP水平检测：
将SH-SY5Y细胞接种于6孔板中(5×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育，4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA和50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，弃去培养基，每孔加入200μl RIPA裂解液裂解细胞。裂解后4℃，12000g离心5分钟，取20μl上清与100μl ATP检测工作液迅速用枪混匀，用化学发光仪测定。见图4，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，质量比为1:1的硫辛酸与印加果油混合物可有效保护细胞能量代谢水平。
实施例2
不同浓度的硫辛酸和/或印加果油对细胞活力的影响：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，加入(1)含有浓度为0、1、2、5mmol/L MPP+的无血清培养基，培养箱内孵育24h；或(2)含有浓度为0、12.5、25、50、100μmol/L LA或20-50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育24h；或(3)含有(或不含)0、12.5、25、50、100μmol/L LA或20-50％w/wSIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。弃去旧的培养基，每孔加入100μl，含有0.5mg/mL的MTT溶液，置培养箱中孵育4h以上。移除培养液，每孔加入100μl的DMSO，以溶解蓝紫色结晶，将96孔板置于37℃，振荡10分钟，使细胞内的形成的蓝紫色甲瓒完全溶解，最后使用酶标仪测定490nm波长处的吸光度值，并计算细胞活力。细胞活力(cell viability)计算方法如下：
细胞活力(％)＝处理组的吸光度值/对照组的吸光度值×100％
见图5-7，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病细胞模型中，不同浓度的硫辛酸和/或印加果油对细胞存活率具有不同程度的改善作用。基于此，发明人选取浓度为100μmol/L，硫辛酸与印加果油的质量比为1:1，改善细胞存活率的效果更佳。
实施例3
不同浓度的硫辛酸和/或印加果油对线粒体膜电势(Δψ)的影响：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA和20％或50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，加入浓度为10μg/mL的JC-1荧光染色液，培养箱孵育1h。最后在全波长多功能酶标仪中检测荧光值(绿光激发波长485nm，发射波长538nm；红光激发波长485nm，发射波长585nm)，最终线粒体膜电势结果以绿光与红光的比值呈现。见图8，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，不同浓度配比的硫辛酸与印加果油混合物均可有效保护线粒体膜电势。
实施例4
不同浓度的硫辛酸和/或印加果油对细胞内ATP的影响：
将SH-SY5Y细胞接种于6孔板中(5×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育，4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA和20％或50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，弃去培养基，每孔加入200μl RIPA裂解液裂解细胞。裂解后4℃，12000g离心5分钟，取20μl上清与100μl ATP检测工作液迅速用枪混匀，用化学发光仪测定。见图9，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，不同浓度配比的硫辛酸与印加果油混合物均可有效保护细胞能量代谢水平。
实施例5
硫辛酸印加果油混合物与司来吉兰联合使用对细胞内ATP的影响：
将SH-SY5Y细胞接种于6孔板中(5×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育，4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L司来吉兰(Dep)和浓度配比为1:1的硫辛酸印加果油混合物的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，弃去培养基，每孔加入200μl RIPA裂解液裂解细胞。裂解后4℃，12000g离心5分钟，取20μl上清与100μl ATP检测工作液迅速用枪混匀，用化学发光仪测定。见图10，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，硫辛酸印加果油混合物与司来吉兰联合使用可有效提升司来吉兰单独作用下的细胞能量代谢水平。
对比例1
硫辛酸印加果油混合物对线粒体膜电势(Δψ)的影响(与硫辛酸、印加果油单独作用的比较)：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA或50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，加入浓度为10μg/mL的JC-1荧光染色液，培养箱孵育1h。最后在全波长多功能酶标仪中检测荧光值(绿光激发波长485nm，发射波长538nm；红光激发波长485nm，发射波长585nm)，最终线粒体膜电势结果以绿光与红光的比值呈现。见图11，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，硫辛酸印加果油混合物在保护线粒体膜电势方面优于硫辛酸或印加果油的单独作用。
对比例2
硫辛酸印加果油混合物对细胞内ATP的影响(与硫辛酸、印加果油单独作用的比较)：
将SH-SY5Y细胞接种于6孔板中(5×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育，4h细胞贴壁后，弃去培养基，换为含有(或不含)100μmol/L LA或50％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。孵育结束后，弃去培养基，每孔加入200μl RIPA裂解液裂解细胞。裂解后4℃，12000g离心5分钟，取20μl上清与100μl ATP检测工作液迅速用枪混匀，用化学发光仪测定。见图12，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病模型细胞中，硫辛酸印加果油混合物在保护细胞能量代谢水平方面优于硫辛酸或印加果油的单独作用。
对比例3
不同浓度的印加果油对细胞活力的影响：
将SH-SY5Y细胞接种于96孔板中(1×104个/孔)，置于5％CO2，37℃培养箱孵育。4h细胞贴壁后，弃去培养基，加入含有10-70％w/w SIO的无血清培养基，培养箱内孵育1h后，加入含有(或不含)2mmol/L MPP+的无血清培养基孵育24h。弃去旧的培养基，每孔加入100μl，含有0.5mg/mL的MTT溶液，置培养箱中孵育4h以上。移除培养液，每孔加入100μl的DMSO，以溶解蓝紫色结晶，将96孔板置于37℃，振荡10分钟，使细胞内的形成的蓝紫色甲瓒完全溶解，最后使用酶标仪测定490nm波长处的吸光度值，并计算细胞活力。细胞活力(cellviability)计算方法如下：
细胞活力(％)＝处理组的吸光度值/对照组的吸光度值×100％
见图13，显示了在正常细胞和MPP+构建的帕金森病细胞模型中，不同浓度的印加果油对细胞存活率具有不同程度的改善作用。基于此，发明人选取50％w/w SIO提高细胞活力的效果更佳。
在本说明书的描述中，参考术语“一个实施例”、“一些实施例”、“示例”、“具体示例”、或“一些示例”等的描述意指结合该实施例或示例描述的具体特征、结构、材料或者特点包含于本发明的至少一个实施例或示例中。在本说明书中，对上述术语的示意性表述不必须针对的是相同的实施例或示例。而且，描述的具体特征、结构、材料或者特点可以在任一个或多个实施例或示例中以合适的方式结合。此外，在不相互矛盾的情况下，本领域的技术人员可以将本说明书中描述的不同实施例或示例以及不同实施例或示例的特征进行结合和组合。
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型。

Claims (12)

1.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括：印加果油和/或硫辛酸，
所述药物组合物用于下列的至少之一：
预防和/或治疗神经退行性疾病，
提高神经细胞存活率，
减少神经细胞的凋亡，
升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，
升高神经细胞内ATP水平。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述神经退行性疾病为帕金森病；
任选地，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞；
任选地，所述印加果油与所述硫辛酸的质量比为1:5～1:1；
优选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1；
任选地，所述印加果油与所述硫辛酸是以溶液的形式提供的；
任选地，所述硫辛酸的浓度为12.5～100μmol/L；
任选地，所述药物组合物进一步包括：药学上可以接受的赋形剂；
任选地，所述药物组合物呈丸剂、颗粒剂、片剂、糖浆剂、合剂、胶囊剂、酊剂、搽剂或注射剂；
任选地，所述药物组合物进一步包括：其他治疗神经退行性疾病的药物；
任选地，所述其他治疗神经退行性疾病的药物包括左旋多巴、卡比多巴、司来吉兰。
3.一种食品，其特征在于，所述食品包括：印加果油和/或硫辛酸，
所述食品用于下列的至少之一：
预防和/或缓解神经退行性疾病，
提高神经细胞存活率，
减少神经细胞的凋亡，
升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，
升高神经细胞内ATP水平。
4.根据权利要求3所述的食品，其特征在于，所述神经退行性疾病为帕金森病；
任选地，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞；
任选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1；
优选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。
5.一种保健品，其特征在于，所述保健品包括：印加果油和/或硫辛酸，
所述保健品用于下列的至少之一：
预防和/或缓解神经退行性疾病，
提高神经细胞存活率，
减少神经细胞的凋亡，
升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，
升高神经细胞内ATP水平。
6.根据权利要求5所述的保健品，其特征在于，所述神经退行性疾病为帕金森病；
任选地，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞；
任选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1；
优选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。
7.印加果油和/或硫辛酸在制备药物、食品或保健品中的用途，所述药物、食品或保健品用于下列的至少之一：
预防和/或治疗和/或缓解神经退行性疾病，
提高神经细胞存活率，
减少神经细胞的凋亡，
升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，
升高神经细胞内ATP水平。
8.根据权利要求7所述的用途，其特征在于，所述神经退行性疾病为帕金森病；
任选地，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞；
任选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:5～1:1；
优选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1。
9.一种药物联合，其特征在于，所述药物联合用于下列的至少之一：
预防和/或治疗神经退行性疾病，
提高神经细胞存活率，
减少神经细胞的凋亡，
升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，
升高神经细胞内ATP水平，
所述药物联合包括：
印加果油作为第一活性剂，
硫辛酸或其药学上可接受的盐作为第二活性剂。
10.根据权利要求9所述的药物联合，其特征在于，所述神经退行性疾病为帕金森病；
任选地，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞；
任选地，所述印加果油与所述硫辛酸的质量比为1:5～1:1；
优选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1；
任选地，所述印加果油与所述硫辛酸是以溶液的形式提供的；
任选地，所述硫辛酸的浓度为12.5～100μmol/L；
任选地，所述药物联合进一步包括：其他治疗神经退行性疾病的药物作为第三活性剂；
任选地，所述其他治疗神经退行性疾病的药物包括左旋多巴、卡比多巴、司来吉兰。
11.一种药盒，其特征在于，所述药盒用于下列的至少之一：
预防和/或治疗神经退行性疾病，
提高神经细胞存活率，
减少神经细胞的凋亡，
升高神经细胞线粒体膜电势，保护线粒体功能，
升高神经细胞内ATP水平，
所述药盒包括：
第一容器，所述第一容器中设置有印加果油，
第二容器，所述第二容器中设置有硫辛酸或其药学上可接受的盐。
12.根据权利要求11所述的药盒，其特征在于，所述神经退行性疾病为帕金森病；
任选地，所述神经细胞为人神经母细胞瘤细胞；
任选地，所述印加果油与所述硫辛酸的质量比为1:5～1:1；
优选地，所述印加果油与硫辛酸的质量比为1:1；
任选地，所述印加果油与所述硫辛酸是以溶液的形式提供的；
任选地，所述硫辛酸的浓度为12.5～100μmol/L；
任选地，所述药盒进一步包括第三容器，所述第三容器中设置有其他治疗神经退行性疾病的药物；
任选地，所述其他治疗神经退行性疾病的药物包括左旋多巴、卡比多巴、司来吉兰。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112773825A (zh) * 2019-11-01 2021-05-11 大江生医股份有限公司 含有印加果油的组合物及其用于提升神经细胞抗氧化能力及脑部保健的用途

Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2203070A1 (en) * 1997-04-18 1998-10-18 Algene Biotechnologies Chromosome 6 gene and gene products related to alzheimer's disease
CA2368719A1 (en) * 1999-03-26 2000-10-05 Craig A. Rosen 50 human secreted proteins
FR2921560A1 (fr) * 2007-09-27 2009-04-03 Innovation Cosmetique Et Derma Nouvelles compositions visant a la protection microbienne et a la conservation des produits cosmetiques
CN101484122A (zh) * 2006-07-05 2009-07-15 科蒂·普雷斯蒂奇·兰嘉斯汀集团有限公司 包含具有抗老化作用的皮肤护理复合物的美容制品
JP4361215B2 (ja) * 1998-09-01 2009-11-11 シグマ−タウ インダストリー ファーマシューティクー リウニート エス．ピー．エー． アセチルＬ−カルニチンおよびα−リポ酸を含む抗酸化組成物
CN104027439A (zh) * 2013-03-08 2014-09-10 武汉华大药业有限公司 组合物及其制备方法
KR20140114786A (ko) * 2013-03-19 2014-09-29 와커 헤미 아게 리튬 이온 전지용 애노드 물질로서 Ｓｉ／Ｃ 복합체
CN104603096A (zh) * 2012-05-07 2015-05-06 塞利克斯比奥私人有限公司 用于治疗神经肌肉障碍和神经退行性疾病的组合物和方法
AU2014203112A1 (en) * 2014-06-08 2015-12-24 Matthews, Owen Allen DR Composition and method for treating skin irritation
AU2012229871B2 (en) * 2011-03-15 2016-05-12 Phosphagenics Limited New composition
US20160235822A1 (en) * 2015-02-13 2016-08-18 Eastern Vision Limited Dietary supplements and formulations
CN105101817B (zh) * 2013-03-08 2017-09-26 武汉华大药业有限公司 可食用组合物及其制备方法和包含该组合物的食品
CN107693793A (zh) * 2016-09-20 2018-02-16 福建奥正投资发展有限公司 亲水性脂类组合物的包装组合物，其制备及调配方法和应用
DE202017006626U1 (de) * 2017-12-24 2018-05-07 Bernhard Viehweg Proteinreiche und cholesterinarme Wurst, insbesondere Rinderwurst
CN108601807A (zh) * 2016-02-16 2018-09-28 Atp研究有限公司 制剂和使用方法
CN109082342A (zh) * 2017-06-14 2018-12-25 广西启福微生物农业有限公司 一种星油藤籽油

Patent Citations (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2203070A1 (en) * 1997-04-18 1998-10-18 Algene Biotechnologies Chromosome 6 gene and gene products related to alzheimer's disease
JP4361215B2 (ja) * 1998-09-01 2009-11-11 シグマ−タウ インダストリー ファーマシューティクー リウニート エス．ピー．エー． アセチルＬ−カルニチンおよびα−リポ酸を含む抗酸化組成物
CA2368719A1 (en) * 1999-03-26 2000-10-05 Craig A. Rosen 50 human secreted proteins
CN101484122A (zh) * 2006-07-05 2009-07-15 科蒂·普雷斯蒂奇·兰嘉斯汀集团有限公司 包含具有抗老化作用的皮肤护理复合物的美容制品
FR2921560A1 (fr) * 2007-09-27 2009-04-03 Innovation Cosmetique Et Derma Nouvelles compositions visant a la protection microbienne et a la conservation des produits cosmetiques
AU2012229871B2 (en) * 2011-03-15 2016-05-12 Phosphagenics Limited New composition
CN104603096A (zh) * 2012-05-07 2015-05-06 塞利克斯比奥私人有限公司 用于治疗神经肌肉障碍和神经退行性疾病的组合物和方法
CN105101817B (zh) * 2013-03-08 2017-09-26 武汉华大药业有限公司 可食用组合物及其制备方法和包含该组合物的食品
CN104027439A (zh) * 2013-03-08 2014-09-10 武汉华大药业有限公司 组合物及其制备方法
KR20140114786A (ko) * 2013-03-19 2014-09-29 와커 헤미 아게 리튬 이온 전지용 애노드 물질로서 Ｓｉ／Ｃ 복합체
AU2014203112A1 (en) * 2014-06-08 2015-12-24 Matthews, Owen Allen DR Composition and method for treating skin irritation
US20160235822A1 (en) * 2015-02-13 2016-08-18 Eastern Vision Limited Dietary supplements and formulations
CN108601807A (zh) * 2016-02-16 2018-09-28 Atp研究有限公司 制剂和使用方法
CN107693793A (zh) * 2016-09-20 2018-02-16 福建奥正投资发展有限公司 亲水性脂类组合物的包装组合物，其制备及调配方法和应用
CN109082342A (zh) * 2017-06-14 2018-12-25 广西启福微生物农业有限公司 一种星油藤籽油
DE202017006626U1 (de) * 2017-12-24 2018-05-07 Bernhard Viehweg Proteinreiche und cholesterinarme Wurst, insbesondere Rinderwurst

Non-Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
LT DÁVILA，ET AL: "Evaluación nutricional de ocho ecotipos de líneas mejoradas de Plukenetia volubilis L", 《(SACHAINCHI) DE LA AMAZONÍA PERUANA》 *
MEDSCI: ""Redox Biol：α-硫辛酸利于阿尔茨海默病等神经退行性疾病的治疗！"", 《MEDSCI.CN/ARTICLE/SHOW_ARTICLE.DO?ID=B598120222F2》 *
张皓，等: "引起世界油料产品开发商的高度关注", 《中国科技产业》 *
张礼凤: "长在藤上的"深海鱼油"——星油藤", 《中国保健食品》 *
王亚荣,等: "星油藤营养器官的解剖结构", 《热带生物学报》 *
黄超培,等: "印加果油对大鼠的致畸性研究", 《应用预防医学》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112773825A (zh) * 2019-11-01 2021-05-11 大江生医股份有限公司 含有印加果油的组合物及其用于提升神经细胞抗氧化能力及脑部保健的用途

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