CN103070925A - 用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，它含有原花青素和半胱氨酸，所述原花青素与半胱氨酸的质量比为0.1~10:1，优选为1~3:1，所述的原花青素优选为莲原花青素。本发明能够提高脑组织的抗氧化能力，避免其受到自由基损伤，抑制MAO-B和AchE活性，增强脑和海马抗氧化系统及血清抗氧化能力，从而改善学习记忆功能。动物试验表明本发明能够有效改善由乙醇和东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆损伤，疗效优于脑复康和原花青素。

Description

用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物。

背景技术

随着人口老龄化的快速发展，阿尔茨海默病已成为危及老年人生命的第四大病因。 阿尔茨海默病（Alzheimer disease，AD），又叫老年性痴呆，是一种中枢神经系统变性病，起病隐袭，病程呈慢性进行性，是老年期痴呆最常见的一种类型。主要表现为渐进性记忆障碍、认知功能障碍、人格改变及语言障碍等神经精神症状，严重影响社交、职业与生活功能。AD的病因及发病机制尚未阐明，特征性病理改变为β淀粉样蛋白沉积形成的细胞外老年斑和tau蛋白过度磷酸化形成的神经细胞内神经原纤维缠结，以及神经元丢失伴胶质细胞增生等。

AD发病机制的研究及防治AD的药物的研究受到了全世界医疗研究机构及各领域的科学家的重视。由于AD的发生发展受到多种因素影响，因此，治疗AD的靶点有很多。但是，目前治疗AD的每一种药物一般都只针对一个靶点，比如，神经营养因子的靶点是营养神经，类胆碱能剂（他克林，多奈哌齐，卡巴拉汀，加兰他敏）等的靶点是改善胆碱能系统功能。由于这些药物只针对某一个靶点，它们并不能很好达到治疗AD的目的，也并不适合所有患者服用。因此，开发有效针对多个靶点的新药是大势所趋。联合治疗是使用针对不同靶点的2种或多种药物的混合物来防治AD，该混合物必需安全无副作用，联合治疗现在是治疗AD最有希望的方法之一。联合治疗比针对单一靶点的单一药物有更多优势，一是可以针对AD发病机制的多个靶点进行治疗，治疗效果优于单一药物；二是联合治疗中使用的混合药物能够在较低剂量时达到使用较高剂量单一药物所能达到的治疗效果，这样就能够因降低剂量而减小药物的副作用。

多酚类化合物广泛存在于自然界的植物中，主要包括松树、葡萄、荔枝、苹果、山楂、蓝莓、银杏、茶叶和莲科植物等。研究表明多酚类化合物不仅毒性小，而且具有很高的生物活性，比如减少低密度脂蛋白的氧化、降低炎症和癌症的发生率、抑制神经进行性疾病和延长生命等。Kyoung Ja Kwon等人研究发现褪黑素和白藜芦醇的组合物具有拮抗的神经保护作用，能够显著改善原代皮层神经元和海马器官切片培养中由H₂O₂诱导的神经毒性，作用机制是通过调节PI3K-Akt-GSK3β途径来增加血红素氧合酶-1蛋白表达，以增加记忆相关组织的抗氧化能力，该组合物提供了保护神经损伤的新方法，同时也避免了使用高剂量单一化合物带来的副作用。原花青素是一类多酚类化合物，研究表明它具有很高的抗氧化活性（远高于维生素C和E），能够抑制由自由基引起的多种疾病，包括关节炎、癌症、眼科疾病等。目前国内外对原花青素的结构和药理活性研究十分关注，国外已经在葡萄原花青素的药理活性研究方面取得了重要成果。研究表明，葡萄籽原花青素能抑制APPSwe/PS1dE9转基因老年小鼠脑组织中β淀粉样蛋白并改善脑组织炎症。低聚物原花青素能改善快速老化小鼠行为学及血管内皮生长因子受体2（VEGFR-2）磷酸化。绿茶儿茶素能改善快速老化小鼠SAMP8的空间记忆损伤，降低海马组织中Aβ1-42聚合物的含量并上调突触可塑性相关蛋白。柿子原花青素对D-半乳糖诱导的学习记忆损伤老化小鼠认知损伤具有改善作用，能够提高脑组织和血清的抗氧化能力，并抑制神经变性和海马组织细胞核固缩。原花青素单体（表儿茶素、儿茶素）及低聚体对β淀粉样蛋白25-35诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用并阻滞细胞S期核上调p53基因表达。苹果原花青素能抑制PC-12细胞中β淀粉样蛋白聚集作用，并改善由Aβ42诱导的神经毒性。

但是，对莲科植物中原花青素的研究，本申请人在国内外首屈一指。从发现莲原花青素以来，已经建立一套完善的提取分离莲原花青素的工艺（专利号ZL02115423. 6）并鉴定了其组成成分。在生物活性和药理活性研究方面也取得了重要成果，莲原花青素具有很强的抗氧化能力，具有降低血脂、提高机体免疫力、保护心脏和皮肤、激活杀伤肿瘤细胞的NK细胞活性，并有效抑制体内黑色素瘤生长，以及抗辐射和抗衰老的作用。显著改善由乙醇、东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆下降（专利号ZL200610124805.2），改善自然衰老认知损伤大鼠和快速老化小鼠SAMP8的记忆功能，降低海马组织和血液中Aβ1-42聚合物的含量，能有效预防和治疗阿尔茨海默病。莲科植物莲（Nelumbo nucifera Gaertn）是我国主要的水生经济作物之一，古今都是药食同源植物。早在《本草纲目》和《中华本草》就记载了莲的活血化淤、延年益寿和抗老化等作用，但是对莲中的活性成分以及作用机理没有记载。本实验室对莲原花青素低聚体的研究不仅为我国传统中医提供了有力支撑，也为现代医学提供了可靠依据。

另外，半胱氨酸是含硫半必需氨基酸，是合成牛磺酸的前体，牛磺酸大量存在于脑组织中，能够帮助调节神经系统；半胱氨酸也是谷胱氨肽的限制性前体氨基酸，谷胱氨肽是细胞内抗氧化剂，主要用于清除细胞内过多的自由基。除此之外，半胱氨酸可以抑制淋巴细胞中核因子κB (nuclear factor κB) 的活性、保护PC12细胞和中枢羟色胺能系统。Torres et al.的研究表明儿茶素与半胱氨酸生成共轭抗氧化化合物的神经保护作用，表儿茶素及表儿茶素没食子酸酯与半胱氨酸及其衍生物的共轭抗氧化化合物通过清除线粒体产生的氧自由基和维持谷胱甘肽水平来保护神经细胞HT-22。

众所周知，自由基引起的氧化应激在AD的发展进程中起重要作用，过多的自由基会持续进攻脂质、蛋白质、DNA和RNA等大分子，引起严重而且不可逆转的氧化损伤，最终导致神经细胞死亡。氧化损伤存在于AD患者脑组织中这一点已经被证实，因此氧化损伤已经成为AD病程中的一个早期指标，同时也成为治疗AD的靶点之一。另外，越来越多的流行病学研究结果表明营养缺乏与AD的发生有密切联系，AD患者缺乏某些营养物质，那么这就提示了增加AD患者对某些特殊营养物的摄入可能会减慢AD的发展进程。到目前为止，国内外尚未见到关于原花青素与半胱氨酸组合物用于抗阿尔茨海默病药物中应用的报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，该药物组合物可改善小鼠学习记忆障碍，疗效优于脑复康和原花青素。

上述目的是采用以下技术方案实现的：

本发明将原花青素和半胱氨酸组合，制成了一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，该药物组合物中原花青素与半胱氨酸的质量比为0.1~10׃1。

进一步优选的方案是：原花青素与半胱氨酸的质量比为1~3׃1。

本发明的药物组合物中还含有药学上可接受的载体，用于将其制成适合临床使用的药物剂型，本发明优选的剂型是粉剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂或口服液体制剂。

进一步优选的方案是：所述原花青素为莲原花青素。所述莲原花青素是本发明人首次发现并提取出来的，它的提取工艺已经获得中国发明专利保护（专利号为ZL02115423. 6），所述莲原花青素的提取方法更加简便，原料更加丰富，费用更加低廉，且已经证明无毒副作用。

本发明采用昆明小鼠进行动物实验，通过Y迷宫法及跳台法，测定原花青素与半胱氨酸组合物对学习记忆障碍小鼠的行为学影响，并通过检测脑组织、海马或血清中丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、B型单胺氧化酶（MAO-B）、乙酰胆碱酯酶（AchE）、一氧化氮（NO）、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和神经型一氧化氮合酶（nNOS）的含量或活性来探讨其作用机制。结果表明：

1）脑复康是常用的抗痴呆药物，其增强学习记忆作用和抗痴呆作用得到了公认，因此常作为促智药的阳性对照药，但是脑复康有一定副作用，如消化道不良反应、中枢神经系统不良反应、轻度肝功能损害等，不宜长期服用。原花青素与半胱氨酸的组合物是天然提取物与天然半必需氨基酸的混合物，无毒副作用作用且疗效优于脑复康和单独使用原花青素。

2）原花青素与半胱氨酸组合物能显著改善由乙醇诱导的学习记忆障碍，提高小鼠脑中的T-AOC水平, 增加GSH-Px和SOD活性，降低MAO-B活性，说明原花青素与半胱氨酸组合物能够提高脑组织的抗氧化能力，避免其受到自由基损伤，抑制MAO-B活性，从而改善学习记忆功能。另外，与单独使用原花青素相比，原花青素与半胱氨酸组合物能够更显著地提高小鼠脑T-AOC水平和增加SOD活性，说明原花青素与半胱氨酸组合物提高脑组织的抗氧化作用的能力显著优于单独使用原花青素，提示原花青素与半胱氨酸组合物改善学习记忆障碍的能力优于原花青素，同时也验证了联合治疗优于单一药物的效果。

3）试验表明，中剂量和高剂量原花青素与半胱氨酸组合物组均能有效改善由东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍；而且能够降低脑组织中MDA含量，提高脑GSH-Px和SOD活性，降低脑AchE活性；降低海马NO含量和iNOS活性；降低血清iNOS活性。以上结果说明原花青素与半胱氨酸组合物改善东莨菪碱致小鼠学习记忆损伤的作用与其抑制脑AchE活性升高，同时增强脑和海马抗氧化系统及血清抗氧化能力，减少氧化损伤密切相关，且效果略优于脑复康。但是，单独使用半胱氨酸并不能有效改善学习记忆障碍小鼠的行为学表现，也没有改善由东莨菪碱诱导引起的小鼠脑和海马抗氧化系统及血清抗氧化能力降低和脑AchE活性升高，因此，半胱氨酸不能改善由东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍，这就说明半胱氨酸通过营养途径并不能对东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍起到改善作用，提示原花青素与半胱氨酸组合物改善小鼠学习记忆障碍的能力优于半胱氨酸，也验证了联合治疗优于单一药物的效果。

附图说明

图1是本发明实施例中莲原花青素与半胱氨酸组合物对乙醇诱导学习记忆障碍小鼠Y迷宫行为学影响（

, n=12），图中CON，Alcohol，Piracetam，LSPC和LSPC+CYS分别表示正常组、模型组、脑复康组、莲原花青素组和莲原花青素与半胱氨酸组合物组，不同上标表示不同显著水平，P < 0.05。

图2是本发明实施例中莲原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱诱导学习记忆障碍小鼠Y迷宫行为学和跳台行为学的影响（ , n=12）。其中A：Y迷宫错误次数；B：跳台错误次数；C：跳台潜伏期。CON，SCOP，Piracetam，CYS，L-Dose，M-Dose 和 H-Dose分别表示正常组、模型组、脑复康组、半胱氨酸组、低剂量、中剂量和高剂量莲原花青素与半胱氨酸组合物组，图中不同上标表示不同显著水平，P<0.05。

具体实施方式

下面结合具体实施例对发明进行详细说明。

实施例1

一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，含有莲原花青素和半胱氨酸，所述莲原花青素与半胱氨酸的质量比为0.1׃1，该组合物中还含有适量的糖粉、微晶纤维素、硬脂酸镁作为载体，制成的剂型是片剂。

实施例2

一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，含有莲原花青素和半胱氨酸，所述莲原花青素与半胱氨酸的质量比为10׃1，该组合物中还含有适量的淀粉，微粉硅胶作为载体，制成的剂型是胶囊剂。

实施例3

一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，含有葡萄原花青素和半胱氨酸，所述葡萄原花青素与半胱氨酸的质量比为1׃1，该组合物中还含有适量的糖粉作为载体，制成的剂型是颗粒剂。

实施例4

一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，含有苹果原花青素和半胱氨酸，所述苹果原花青素与半胱氨酸的质量比为3׃1，该组合物中还含有适量的水和蔗糖作为载体，制成的剂型是糖浆。

实施例5：莲原花青素与半胱氨酸组合物对乙醇诱导的小鼠学习记忆障碍的改善作用

1 实验材料

1.1 实验药物

莲原花青素：莲科植物原料采自洪湖蓝田种植区，品种名称为“武植2号”。将莲房（荷叶、莲籽壳、莲藕皮、莲藕节、莲子心、莲梗、莲须和莲花）清洗，加入偏磷酸和亚硫酸钠，用沸水密封浸提，浸提液用100目砂滤机过滤，滤液过大孔吸附树脂再用水洗除糖类和低分子量物质，最后用70%乙醇溶液洗脱树脂，浓缩乙醇洗脱液除去乙醇后采用喷雾干燥，得到浅棕色原花青素提取物粉末，上述提取工艺参照申请号为02115423. 6的专利方法进行。采用本工艺提取得到的莲原花青素产品中原花青素含量大于98%，原料中原花青素的利用率大于90%。通过LC-MS分析，莲原花青素的分子量范围为290.1-1154.3，为低聚体原花青素，主要为二聚体，还含有少量单体和三、四聚体，以及原花青素二、三聚棓酸单酯，对应的M/Z峰分别为579.2（290.2+H+288），291.1（M+H），867.2（578.2+H+288），1155.3（866.3+H+288），731.2（578.2+H+152），1049.4（866.4+H+152）。莲原花青素主要为儿茶素和表儿茶素通过C4-C6或C4-C8连接。

L-半胱氨酸：国药集团化学试剂有限公司。

脑复康（吡拉西坦片）：0.4克/片，湖北华中药业有限公司。

1.2 实验动物：

昆明小鼠60只，雄性，体重20±2g，购自湖北省预防医学科学院实验动物研究中心。

1.3 试剂：

总抗氧化能力（T-AOC），谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、B型单胺氧化酶（MAO-B）和蛋白质含量（考马斯亮蓝）测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。无水乙醇为国药集团化学试剂有限公司分析纯试剂，用时稀释为40%乙醇水溶液。

1.4 主要仪器：

MG-2型Y迷宫，张家港市生物医学仪器厂；OPTIZEN 2120UV紫外可见分光光度计，韩国美卡希斯MECA。

2 实验方法

2.1 分组方法：

实验动物随机分为5组，每组12只，分别为正常组、模型组、脑复康组（400mg/kg）、莲原花青素组（90mg/kg）和莲原花青素与半胱氨酸组合物组（莲原花青素和L-半胱氨酸剂量分别为90mg/kg和45mg/kg）。

2.2 给药方法：

五组动物分别灌胃蒸馏水、蒸馏水、40mg/ml脑复康、9mg/ml莲原花青素、莲原花青素与半胱氨酸组合物（简称组合物，莲原花青素和L-半胱氨酸浓度分别为9mg/ml和4.5mg/ml）。以上溶液用蒸馏水每天配制。每天上午9点左右以0.1ml/10g BW连续灌胃20天后进行Y迷宫。

2.3 Y迷宫实验方法：

在第20天给药后1h进行训练，每只小鼠训练35次。次日给药后30min，按0.1ml/10g BW灌胃蒸馏水（仅正常组）或40%乙醇，30min后进行测试，以10次测试中的错误次数作为测试记忆成绩。

2.4 检测指标

2.4.1 Y迷宫行为学测试。

2.4.2 Y迷宫测试结束后，颈椎脱臼处死小鼠，迅速去脑组织，称重，冰浴下用生理盐水制成10%匀浆。按试剂盒操作说明分别测定蛋白质含量、T-AOC水平，GSH-Px、SOD和MAO-B活性。

2.5 数据处理

数据以平均值±标准偏差（

）表示，采用SPSS 16.0软件，进行一元方差分析和DUNCAN多重比较。

3 结果

图1显示，乙醇模型组小鼠Y迷宫测试时的错误次数比正常组增多，经统计学分析，有显著性差异（P<0.05）；莲原花青素与半胱氨酸组合物组及莲原花青素组小鼠Y迷宫测试时错误次数均显著小于模型组（分别为P<0.05和P<0.05），而且其错误次数显著低于脑复康组（P<0.05），但与正常组无显著性差异（P>0.05）。

下表为莲原花青素与半胱氨酸组合物对乙醇诱导学习记忆障碍小鼠脑组织T-AOC，GSH-Px、SOD和MAO-B活性的影响（

，n=12）。

注：同一列中不同上标表示不同显著水平，P < 0.05。

上表显示，组合物组及莲原花青素组的小鼠脑组织GSH-Px活性均显著高于模型组和脑复康组（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.05和P<0.05），且与正常组无显著差异（分别为P>0.05和P>0.05）。组合物组的小鼠脑组织GSH-Px活性略高于莲原花青素组，但无显著性差异。组合物组及莲原花青素组小鼠脑组织SOD活性显著高于模型组和正常组（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.05和P<0.05）。而且组合物组小鼠脑组织SOD活性显著高于莲原花青素组（P<0.05）。组合物组小鼠脑组织T-AOC显著高于其他4个组（分别为P<0.05、P<0.05、P<0.05和P<0.05）。组合物组及莲原花青素组小鼠脑组织MAO-B活性显著低于模型组、正常组和脑复康组（分别为P<0.05和P<0.05）。以上结果提示，莲原花青素与半胱氨酸组合物及莲原花青素都能有效改善乙醇诱导的小鼠学习记忆损伤，可能是通过增加脑组织的抗氧化能力以及增加单胺类胆碱能活性来改善学习记忆。而且莲原花青素与半胱氨酸组合物的改善效果要优于单独莲原花青素。

实施例6：莲原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍的改善作用

1 实验材料

1.1 实验药物：同实施例1。

1.2 实验动物：

昆明小鼠84只，雄性，体重20 ± 2g，购自湖北省预防医学科学院实验动物研究中心。

1.3 试剂：

氢溴酸东莨菪碱注射液，规格0.3mg/ml，购自徐州莱恩药业有限公司。丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、乙酰胆碱酯酶（AchE）、一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）和蛋白质含量（考马斯亮蓝）测定试剂盒均购自南京建成生物工程研究所。

1.4 主要仪器：

MG-2型Y迷宫，张家港市生物医学仪器厂；YLS-3T型跳台记录仪，山东省医学科学院设备站；OPTIZEN 2120UV紫外可见分光光度计，韩国美卡希斯MECA。

2 实验方法

2.1 分组方法：

实验动物随机分为7组，每组12只，分别为正常组、模型组、脑复康组（400mg/kg）、半胱氨酸组（45mg/kg）、低剂量、中剂量和高剂量莲原花青素与半胱氨酸组合物组（简称组合物，莲原花青素剂量分别为45、90和135mg/kg，L-半胱氨酸剂量均为45mg/kg）。

2.2 给药方法：

分别灌胃蒸馏水、蒸馏水、40mg/ml脑复康、4.5mg/ml半胱氨酸、低剂量、中剂量和高剂量莲原花青素与半胱氨酸组合物（简称组合物，莲原花青素浓度分别为4.5、9和13.5mg/ml，L-半胱氨酸浓度均为4.5mg/ml）。以上溶液用蒸馏水每天配制。每天上午9点左右以0.1ml/10gBW连续灌胃20天后进行Y迷宫。Y迷宫结束后继续灌胃1周后再进行跳台实验。

2.3 Y迷宫实验方法：

在第20天给药后1h进行训练，每只小鼠训练35次。训练前30min按0.1ml/10g BW腹腔注射生理盐水（仅正常组）或氢溴酸东莨菪碱注射液。次日给药后1h进行测试，以10次测试中的错误次数作为测试记忆成绩。

2.4 跳台实验方法：

Y迷宫结束后1周再进行跳台实验。训练前30min按0.1ml/10g BW腹腔注射生理盐水（仅正常组）或氢溴酸东莨菪碱注射液。训练时，小鼠放入室中平台上适应3min后给予0.35A电流刺激，记录5min内的错误次数。次日给药后1h进行测试，记录5min内的错误次数以及潜伏期（第一次跳下跳台的时间）作为测试成绩。

2.5 检测指标

2.5.1 Y迷宫和跳台行为学测试。

2.5.2 跳台实验测试结束后，摘眼球取血后颈椎脱臼处死小鼠，迅速去脑组织，右脑海马组织，称重，冰浴下用生理盐水制成10%脑匀浆和5%海马匀浆。按试剂盒操作说明分别测定蛋白质、MDA和NO含量，GSH-Px、SOD、AchE、i NOS和n NOS活性。

2.5 数据处理

数据以平均值±标准偏差（

）表示，采用SPSS 16.0软件，进行一元方差分析和DUNCAN多重比较。

3 结果

图2A显示，东莨菪碱模型组小鼠Y迷宫测试时的错误次数比正常组显著增多（P<0.05）；三个剂量组合物组小鼠Y迷宫测试时错误次数均显著小于模型组（分别为P<0.05，P<0.05和P<0.05），但与正常组和脑复康组均无显著差异。半胱氨酸组错误次数小于模型组（P>0.05），显著大于正常组、脑复康组和中、高剂量组合物组（分别为P<0.05，P<0.05，P<0.05和P<0.05）。另外，高剂量组合物组小鼠Y迷宫测试错误次数显著性小于低剂量组合物组（P<0.05），但与中剂量组合物组错误次数无显著差异（P>0.05）。

图2B和图2C分别显示东莨菪碱导致小鼠跳台实验训练及测试错误次数都显著增加（P<0.05和P<0.05），而测试潜伏期显著缩短（P<0.05）。半胱氨酸组小鼠跳台训练和测试时潜伏期与模型组均无显著性差异（分别为P>0.05和P>0.05），但测试错误次数显著小于模型组（P<0.05）和显著大于正常组（P<0.05）。但是三个剂量组合物组小鼠跳台训练和测试时的错误次数均显著小于模型组（分别为P<0.05，P<0.05；P<0.05，P<0.05；和P<0.05，P<0.05），且与正常组无显著差异。三个剂量组合物组小鼠潜伏期显著长于模型组小鼠（分别为P<0.05，P<0.05和P<0.05），且与正常组和脑复康组无显著性差异。结果提示拥有许多生理活性的半胱氨酸并不能够有效改善东莨菪碱致学习记忆损伤，但是莲原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱致学习记忆损伤有很好的改善作用。

下表为莲原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱诱导学习记忆障碍小鼠MDA含量、SOD、GSH-Px和AchE活性的影响（

, n=12）

注：同一列中不同上标表示不同显著水平，P < 0.05。

从上表可以看出东莨菪碱能引起小鼠脑组织中MDA含量增加，显著高于正常组（P<0.05）。中、高剂量组合物组与模型组相比能显著降低小鼠脑组织MDA含量（分别为P<0.05，P<0.05），与正常组和脑复康组相比无显著差异。半胱氨酸组小鼠脑组织MDA含量与模型组无显著差异（P>0.05）。东莨菪碱能引起小鼠脑组织中SOD和GSH-Px活性降低，显著低于正常组（分别为P<0.05和P<0.05）。半胱氨酸组小鼠脑组织SOD和GSH-Px活性与模型组无显著差异。但是与模型组相比，三个剂量组合物都能显著增加小鼠脑组织中SOD和GSH-Px活性（分别为P<0.05，P<0.05；P<0.05，P<0.05；和P<0.05，P<0.05）。其中，中、高剂量组合物组小鼠脑组织中SOD和GSH-Px活性均与正常组及脑复康组无显著差异；低剂量组合物组小鼠脑组织中SOD和GSH-Px活性均显著高于正常组及脑复康组（分别为P<0.05，P<0.05；P<0.05，P<0.05）。但是，高剂量组合物组的SOD活性与MDA含量的比值（SOD/MDA）显著大于低剂量组合物组（P<0.05）。东莨菪碱能引起小鼠脑组织中AchE活性增加，显著高于正常组（P<0.05）。半胱氨酸组小鼠脑组织AchE活性略低于模型组，但无显著性差异。但是三个剂量组合物都能显著降低小鼠脑组织AchE活性（分别为P<0.05，P<0.05和P<0.05），且呈一定剂量效应关系。三个剂量组小鼠脑组织AchE活性与正常组及脑复康组相比均无显著性差异。提示莲房原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱致学习记忆损伤的改善作用可能与提高脑组织抗氧化能力，抑制氧化损伤和抑制AchE活性相关。

下表是莲原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱诱导学习记忆障碍小鼠血清iNOS和nNOS活性，海马组织NO含量和iNOS活性的影响（

, n=12）。

注：同一列中不同上标表示不同显著水平，P < 0.05。

上表显示了东莨菪碱能引起血清iNOS活性增加，显著高于正常组及脑复康组（分别为P<0.05和P<0.05）。半胱氨酸组小鼠血清iNOS活性低于模型组，但无显著差异。三个剂量组合物都能降低血清iNOS活性，但是与模型组相比，只有中剂量组显著降低血清iNOS活性（P<0.05）；而且中剂量组小鼠血清iNOS活性与正常组及脑复康组无显著性差异。血清nNOS活性没有受到东莨菪碱的影响，半胱氨酸及组合物对血清nNOS活性也没有影响。东莨菪碱能增加海马组织中NO含量及iNOS活性，与正常组相比有显著性差异（分别为P<0.05和P<0.05）。半胱氨酸组小鼠海马组织中NO含量及iNOS活性与模型组相比无显著差异。但是，三个剂量组合物组小鼠海马组织中NO含量及iNOS活性均显著低于模型组（分别为P<0.05，P<0.05；P<0.05，P<0.05；和P<0.05，P<0.05），且与正常组及脑复康组无显著性差异。低、中、高剂量组合物降低小鼠海马组织中NO含量及iNOS活性的作用无显著性差异。以上结果提示，半胱氨酸不能改善东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍，但是莲原花青素与半胱氨酸组合物能够改善东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆障碍，且中、高剂量的改善效果优于低剂量和脑复康。提示莲房原花青素与半胱氨酸组合物对东莨菪碱致学习记忆损伤的改善作用可能与增强海马及血清抗氧化能力，减少氧化损伤密切相关。

总之，这些结果提示了莲房原花青素与半胱氨酸组合物能够有效改善由乙醇和东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆损伤。而且，莲房原花青素与半胱氨酸组合物改善乙醇诱导的小鼠学习记忆损伤的效果显著优于单独莲房原花青素。关于改善乙醇诱导的学习记忆损伤，机理有两点，一是提高非酶抗氧化防御系统及内源性抗氧化酶活性，从而抑制氧化损伤，二是增强与认知功能相关的单胺能系统的功能。关于改善东莨菪碱诱导的小鼠学习记忆损伤，机理有两点，一是提高内源性抗氧化酶活性、抑制组织中自由基及中间有毒物的产生、抑制脂质过氧化，从而抑制氧化损伤，二是增强与认知功能相关的胆碱能系统的功能。

Claims (6)

1.一种用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其特征在于含有原花青素和半胱氨酸，所述原花青素与半胱氨酸的质量比为0.1~10׃1。

2.根据权利要求1所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其特征在于：所述原花青素与半胱氨酸的质量比为1~3׃1。

3.根据权利要求1所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其特征在于：还含有药学上可接受的载体。

4.根据权利要求1~3任何一项所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物是粉剂、胶囊剂、颗粒剂、片剂或口服液体制剂。

5.根据权利要求1~3任何一项所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其特征在于：所述原花青素为莲原花青素。

6.根据权利要求5所述的用于治疗阿尔茨海默病的药物组合物，其特征在于：所述原花青素为莲原花青素。

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