CN111393501A - 牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构及牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法 - Google Patents

牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构及牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及分离鉴定技术领域，本发明通过高效液相制备出了高纯度的牛磺酸‑3‑脱氢‑鹅脱氧胆酸，该工艺简单，可实现大生产；本发明采用现代化波谱技术，如13C NMR，1H NMR对分离纯化的牛磺酸‑3‑脱氢‑鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构进行结构鉴定，推导出了其在亲水溶剂中的分子结构形式；对该化合物的进一步构象和结构活性关系研究具有重要的指导意义。

Description

牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构及牛磺酸-3- 脱氢-鹅脱氧胆酸的制法
技术领域
本发明涉及分离鉴定技术领域，尤其涉及牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构及其制备方法。
背景技术
动物胆汁中的胆汁酸是一组重要的生物活性化合物，在许多疾病的诊断和治疗中起重要作用，例如肝胆和胃肠道疾病。尤其动物胆汁中的熊胆汁(Fel Ursi)是一种珍贵的动物药，经常在治疗肝脏和/或胆疾病的处方中找到。据报道，Fel Ursi的主要成分是胆汁酸，其中牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)和牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)是最著名的成分。对牛磺熊去氧胆酸(TUDCA)和牛磺鹅去氧胆酸(TCDCA)进行了许多广泛而深入的研究，而关于Fel Ursi其他成分的报道很少。
发明内容
本发明的目的是提供一种牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸在亲水溶剂中的半缩酮形式结构；本发明还提供牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的快速制备方法。
为了实现上述目的，本发明的技术方案是：
牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构，牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的化学名称为22[[(5β,7α)–7–羟基3,24-二氧胆烷24-基]氨基]-乙磺酸，
化学结构为：
Figure BDA0002479051910000021
牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸在亲水性溶剂中的半缩酮形式结构式如下：
Figure BDA0002479051910000022
所述的亲水性溶剂为氘代甲醇(CD3OD)。
所述的亲水性溶剂为重水(D2O)。
牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸在氘代甲醇中的半缩酮形式结构的碳核磁共振光谱结果如下：
13C NMR(CD3OD,125MHz):36.32(C-1),33.55(C-2),102.00(C-3),40.57(C-4),40.48(C-5),35.36(C-6),69.06(C-7),40.69(C-8),33.86(C-9),36.95(C-10),22.01(C-11),40.97(C-12),43.69(C-13),51.49(C-14),24.6(C-15),29.23(C-16),57.09(C-17),12.19(C-18),23.30(C-19),36.29(C-20),18.83(C-21),33.16(C-22),33.44(C-23),177.80(C-24),37.35(C-25),50.88(C-26)；其中102.00(C-3)该数值代表半缩酮结构形式的形成。
牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸在重水中的半缩酮形式结构的碳核磁共振光谱结果如下：
13C NMR(D2O,125MHz):36.73(C-1),33.32(C-2),100.90(C-3),35.3(C-4),42.95(C-5),33.4(C-6),67.99(C-7),39.32(C-8),33.27(C-9),35.14(C-10),21.02(C-11),39.42(C-12),42.50(C-13),49.95(C-14),23.52(C-15),28.03(C-16),55.10(C-17),11.17(C-18),21.67(C-19),35.28(C-20),18.23(C-21),31.79(C-22),32.56(C-23),177.10(C-24),35.43(C-25),50.07(C-26)；其中102.00(C-3)该数值代表半缩酮结构形式的形成。
牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法：
S01称取干燥的动物胆汁粉末用体积浓度为40-80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为5-150mg/mL的动物胆汁粉末溶液；将过滤后的动物胆汁粉末溶液进行C18反相柱色谱分离，用水-甲醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-1；
S02粉末Ⅰ-1用体积浓度40-80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50-150mg/mL的粉末Ⅰ-1溶液，将过滤后的粉末Ⅰ-1溶液进行硅胶柱色谱分离，用乙酸乙酯-乙醇-水进行梯度洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-2；
S03粉末Ⅰ-2用体积浓度40-80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50-150mg/mL的粉末Ⅰ-2溶液；采用微孔滤膜过滤，将过滤后的粉末Ⅰ-2溶液进行高效液相色谱分离，以甲醇-水为流动相，按照体积比60：40的洗脱液洗脱，流速控制在10-400mL/min，在紫外线波长200-400nm检测，收集含量大于98％的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸洗脱液，减压浓缩干燥得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸粉末。
其中，步骤S01中，所用的水和甲醇体积比为：1:9，2:9，3:8，4:7，5:6，6:5，7:4，8:3，9:2，10:1，10:0的洗脱溶剂进行梯度洗脱，并分别收集各洗脱部分。
其中，步骤S02中，所用的乙酸乙酯，乙醇和水体积比为：18:2:1，17:2:1，16:2:1，15:2:1，14:2:1，13:2:1，12:2:1，11:2:1，10:2:1，9:2:1，8:2:1，7:2:1，6:2:1的洗脱溶剂进行梯度洗脱，并分别收集各洗脱部分。
所述减压浓缩干燥温度为40-60℃。
所述动物胆汁为熊胆汁，猪胆汁，牛胆汁和鸡胆汁中的任意一种。
采用了上述技术方案后，本发明具有以下的有益效果：
本制备方法先通过成本较低的柱色谱分离提纯粗品，后经过分辨率高、分析速度快、重复性高的高效液相色谱进行高纯度的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸制备，该工艺简单，可实现大生产；本发明采用现代化波谱技术，如13C NMR，1H NMR对分离纯化的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式进行结构鉴定，推导出了其在亲水溶剂中的分子结构形式；由于D2O(重水)比DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)更类似于体内环境，预期是半缩酮形式在体内发挥生物活性，为动物胆汁的体内化学成分研究提供参考，为进一步阐明动物胆汁的药效物质基础与作用机理研究奠定基础，并且半缩酮形式的NMR数据对该化合物的进一步构象和结构活性关系研究具有重要意义。
附图说明
图1化合物1的3D结构图。
图2化合物1a的3D结构图。
图3化合物2的3D结构图。
图4化合物3的3D结构图。
图5牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的化学结构式。
图6牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式的化学结构式。
图7 1，22[[((5β，7β)-7-羟基3,24-二氧胆烷24-基]氨基]-乙磺酸的化学结构式。
图8 3-羟基-7-氧胆酰基牛磺酸的化学结构式。
具体实施方式
下面结合附图对本发明作更进一步的说明。
实施例1
在我们最近对Fel Ursi(熊胆汁)中化学成分的研究中，我们分离出了氧化的胆汁酸，牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸，并观察到了有趣的NMR现象。该化合物于CD3OD(甲醇)和D2O(重水)中以完全半缩酮形式存在，而在DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)中以酮醇形式存在。这是首次观察到这种化合物的半缩酮形式。由于D2O(重水)比DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)更类似于体内环境，预期是半缩酮形式在体内发挥生物活性，并且半缩酮形式的NMR数据可能对该化合物的进一步构象和结构活性关系研究具有重要意义。
研究过程如下：
1.实验方法：
将Fel Ursi(熊胆汁)粉末(25g)用体积浓度为40％乙醇溶液溶解，配置成浓度为50mg/mL的供试品溶液，离心过滤，离心转速为1000r/min，得过滤后的熊胆汁粉末溶液；采用ODS柱进行色谱分离，以水和甲醇体积比为：1:9，2:9，3:8，4:7，5:6，6:5，7:4，8:3，9:2，10:1，10:0的洗脱溶剂分别进行梯度洗脱2-4柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-1；
粉末Ⅰ-1用体积浓度50％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50mg/mL的粉末Ⅰ-1溶液，将过滤后的粉末Ⅰ-1溶液进行Silicagel硅胶柱色谱分离，用乙酸乙酯-乙醇-水进行梯度洗脱，所用的乙酸乙酯，乙醇和水体积比为：18:2:1，17:2:1，16:2:1，15:2:1，14:2:1，13:2:1，12:2:1，11:2:1，10:2:1，9:2:1，8:2:1，7:2:1，6:2:1的洗脱溶剂分别进行洗脱2-5柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-2；
粉末Ⅰ-2用体积浓度80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为100mg/mL的粉末Ⅰ-2溶液；采用0.45微孔滤膜过滤，将过滤后的粉末Ⅰ-2溶液进行高效液相色谱分离纯化，以甲醇-水为流动相，按照体积比60：40的洗脱液洗脱，流速控制在180mL/min，在紫外线波长254nm检测，收集含量大于98％的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸洗脱液，减压浓缩干燥得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸粉末。
在8.2分钟时获得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸(化合物1,110mg)，4.6分钟的鹅去氧胆酸(化合物2,230mg)和10.0分钟的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸(化合物3,10mg)。将化合物1(35mg)溶于0.8mL氘化溶剂中进行核磁共振实验。
在Varian Unity 500(1H，500MHz；13C，125MHz)NMR光谱仪上对在5-mm NMR管中获得的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸溶液进行NMR实验。TMS用作内标，J值以赫兹表示。常规脉冲序列用于COSY，HMBC和HMQC。
2.核磁共振实验结果和讨论
表1和表2分别列出了DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)，CD3OD(氘代甲醇)和D2O(重水)中牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的1H和13C NMR值。
表1.在不同溶剂中，牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的1H NMR化学位移(ppm)
Figure BDA0002479051910000061
a:溶剂为DMSO-d6；
b:溶剂为CD3OD；
c：溶剂为D2O。
表2.在不同溶剂中的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的13C NMR化学位移(ppm)
Figure BDA0002479051910000062
Figure BDA0002479051910000071
a:溶剂为DMSO-d6；
b:溶剂为CD3OD；
C:溶剂为D2O。
化合物1在DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)中的1H NMR光谱显示出信号分别为在(δ7.68(1H，br s)的酰胺质子，δ3.68的氧化次甲基，在δH-4α3.40(1H,t,J＝10.8Hz)处靠近羰基的三个亚甲基,δH-4β1.96(1H,t)；H-2a 2.34(1H,m),δH-2β1.96(1H,t,),和δH-23α 2.06(1H,m),δH-23β1.96(1H,t),在δ3.28(2H，br s，H-25)处与胺基相邻的亚甲基。在δH-26 2.59(2H,t,J＝6.0Hz)，处与磺酸基相连的亚甲基，δH-19 0.92(3H,s)，δH-21 0.88(3H,d,J＝5.6Hz)和δH-180.62(3H,s)处的三个甲基。7个亚甲基和5个次甲基在1.0和2.0ppm之间的区域(见表1)。DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)中的13C NMR显示包括酮碳在内的26个碳的信号(δC-3211.5ppm)，酰胺碳(δC-24 172.2ppm),两个季碳(δC-10 35.0ppm,δC-13 42.1ppm)，七个次甲基碳,十二个亚甲基碳，三个甲基碳。这些化合物1的光谱与报告的数据一致，表明化合物1为Tauro-3-dehydro-CDCA，化学名称为22[[(5,7)–7–羟基3,24-二氧胆烷24-基]氨基]-乙磺酸(图5)。
然而，在H2O-d2中，化合物1的13C NMR光谱(表2)的特征是存在半缩酮碳(δ，100.0ppm)，而不是C-3处的酮羰基碳信号(δ，211.6ppm)。另外，比较在DMSO-d6(氘代二甲基亚砜)和H2O-d2中测得的相应碳的δ值，C-7(δ，66.3ppm)处的氧化次甲基碳的化学位移略微移至2.8ppm的低场，而C-2(δ，36.5ppm)和C-4(δ，45.4ppm)的两个亚甲基碳的化学位移移至3.0和4.9ppm的高场。这些观察结果表明，在H2O-d2溶液中，在C-3处的酮碳与C-7处的氧在化合物1(图1，图5)中形成了分子内半缩酮(1a)(图2，图6)。
化合物1(图5)还以与1H和13C NMR光谱相同的半缩酮形式结构存在于甲醇-d4溶液中(表1和2)。
相比较，化合物的两个异构体1，22[[((5β，7β)-7-羟基3,24-二氧胆烷24-基]氨基]-乙磺酸和3-羟基-7-氧胆酰基牛磺酸的NMR光谱在不同溶剂中也测定了。结果，在化合物2(见图3，7)或3(见图4，8)中均未观察到半缩酮形成。
半缩酮结构形成的机理为：在化合物1(见图5)中，C7/C3的羟基和C3/C7的羰基之间的距离才足以形成半酮基。另外，化合物1中的C7-OH是一个具有高度空间位阻的轴向基团，这使得它很难与亲水溶剂形成氢键。另一方面，半缩酮形式(见图6)，具有一个非常低的空间位阻的C3-OH基团和在C7处的醚氧，从它的3D图像(见图2)中可以看到，空间位阻并不大，这可能是化合物1在亲水溶剂D2O(重水)和CD3OD(甲醇)中转变为半酮基形式的原因。
本实施例首次报道了胆汁酸化合物在D2O(重水)溶液中以半缩酮形式存在，并首次描述了半缩酮形式的核磁共振数据，由于该化合物以半缩酮形式存在于以水为主要成分的体内基质中，因此在研究该化合物的构效关系时，考虑其半缩酮结构是非常重要的。
实施例2
将猪胆汁(25g)用体积浓度为80％乙醇溶液溶解，配置成浓度为150mg/mL的供试品溶液，过滤后，得过滤后的猪胆汁粉末溶液；采用ODS柱进行色谱分离，以水和甲醇体积比为：1:9，2:9，3:8，4:7，5:6，6:5，7:4，8:3，9:2，10:1，10:0的洗脱溶剂分别进行梯度洗脱2-4柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-1；
粉末Ⅰ-1用体积浓度50％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为40mg/mL的粉末Ⅰ-1溶液，将粉末Ⅰ-1溶液进行Silicagel硅胶柱色谱分离，用乙酸乙酯-乙醇-水进行梯度洗脱，所用的乙酸乙酯，乙醇和水体积比为：18:2:1，17:2:1，16:2:1，15:2:1，14:2:1，13:2:1，12:2:1，11:2:1，10:2:1，9:2:1，8:2:1，7:2:1，6:2:1的洗脱溶剂分别进行洗脱2-5柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-2；
粉末Ⅰ-2用体积浓度80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为150mg/mL的粉末Ⅰ-2溶液；采用0.45微孔滤膜过滤，将过滤后的粉末Ⅰ-2溶液进行高效液相色谱分离纯化，以甲醇-水为流动相，按照体积比60：40的洗脱液洗脱，流速控制在398mL/min，在紫外线波长360nm下检测，收集含量大于98％的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸洗脱液，减压浓缩干燥得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸粉末。
实施例3
将鸡胆汁粉末(25g)用水溶液溶解，配置成浓度为5mg/mL的供试品溶液，离心过滤后，得鸡胆汁粉末溶液；采用ODS柱进行色谱分离，以水和甲醇体积比为：1:9，2:9，3:8，4:7，5:6，6:5，7:4，8:3，9:2，10:1，10:0的洗脱溶剂分别进行梯度洗脱2-4柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-1；
粉末Ⅰ-1用体积浓度50％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为150mg/mL的粉末Ⅰ-1溶液，将粉末Ⅰ-1溶液进行Silicagel硅胶柱色谱分离，用乙酸乙酯-乙醇-水进行梯度洗脱，所用的乙酸乙酯，乙醇和水体积比为：18:2:1，17:2:1，16:2:1，15:2:1，14:2:1，13:2:1，12:2:1，11:2:1，10:2:1，9:2:1，8:2:1，7:2:1，6:2:1的洗脱溶剂分别进行洗脱2-5柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-2；
粉末Ⅰ-2用体积浓度40％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50mg/mL的粉末Ⅰ-2溶液；采用0.45微孔滤膜过滤，将过滤后的粉末Ⅰ-2溶液进行高效液相色谱分离纯化，以甲醇-水为流动相，按照体积比60：40的洗脱液洗脱，流速控制在10mL/min，在紫外线波长212nm下检测，收集含量大于98％的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸洗脱液，减压浓缩干燥得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸粉末。
实施例4
将牛胆汁粉末(25g)用40％乙醇溶液溶解，配置成浓度为80mg/mL的供试品溶液，离心过滤后，得鸡胆汁粉末溶液；采用ODS柱进行色谱分离，以水和甲醇体积比为：1:9，2:9，3:8，4:7，5:6，6:5，7:4，8:3，9:2，10:1，10:0的洗脱溶剂分别进行梯度洗脱2-4柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-1；
粉末Ⅰ-1用体积浓度40％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为120mg/mL的粉末Ⅰ-1溶液，将粉末Ⅰ-1溶液进行Silicagel硅胶柱色谱分离，用乙酸乙酯-乙醇-水进行梯度洗脱，所用的乙酸乙酯，乙醇和水体积比为：18:2:1，17:2:1，16:2:1，15:2:1，14:2:1，13:2:1，12:2:1，11:2:1，10:2:1，9:2:1，8:2:1，7:2:1，6:2:1的洗脱溶剂分别进行洗脱2-5柱程，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，显色，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-2；
粉末Ⅰ-2用体积浓度50％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50mg/mL的粉末Ⅰ-2溶液；采用0.45微孔滤膜过滤，将过滤后的粉末Ⅰ-2溶液进行高效液相色谱分离纯化，以甲醇-水为流动相，按照体积比60：40的洗脱液洗脱，流速控制在180mL/min，在紫外线波长395nm下检测，收集含量大于98％的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸洗脱液，减压浓缩干燥得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸粉末。
尽管已经详细描述了本发明的实施方式，但是应该理解的是，在不偏离本发明的精神和范围的情况下，可以对本发明的实施方式做出各种改变、替换和变更。

Claims (8)

1.牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构，其特征在于：
牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸在亲水性溶剂中的半缩酮形式结构式如下：
Figure FDA0002479051900000011
2.根据权利要求1所述的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构，其特征在于：所述的亲水性溶剂为氘代甲醇。
3.根据权利要求1所述的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的半缩酮形式结构，其特征在于：所述的亲水性溶剂为重水。
4.牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法，其特征在于：
S01称取干燥的动物胆汁粉末用水或者40-80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为5-150mg/mL的动物胆汁粉末溶液；将过滤后的动物胆汁粉末溶液进行C18反相柱色谱分离，用水-甲醇进行梯度洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-1；
S02粉末Ⅰ-1用体积浓度40-80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50-150mg/mL的粉末Ⅰ-1溶液，将过滤后的粉末Ⅰ-1溶液进行硅胶柱色谱分离，用乙酸乙酯，乙醇和水进行梯度洗脱，收集洗脱液，用薄层色谱进行检测，合并含有牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的洗脱液，减压浓缩干燥得粉末Ⅰ-2；
S03粉末Ⅰ-2用体积浓度40-80％乙醇水溶液溶解，配置成浓度为50-150mg/mL的粉末Ⅰ-2溶液；采用微孔滤膜过滤，将过滤后的粉末Ⅰ-2溶液进行高效液相色谱分离，以甲醇和水为流动相，按照体积比60：40的洗脱液洗脱，流速控制在10-400mL/min，在紫外线波长200-400nm检测，收集含量大于98％的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸洗脱液，减压浓缩干燥得牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸粉末。
5.根据权利要求4所述的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法，其特征在于：步骤S01中，所用的水和甲醇体积比为：1:9，2:9，3:8，4:7，5:6，6:5，7:4，8:3，9:2，10:1，10:0的洗脱溶剂进行梯度洗脱，并分别收集各洗脱部分。
6.根据权利要求4所述的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法，其特征在于：步骤S02中，所用的乙酸乙酯，乙醇和水体积比为：18:2:1，17:2:1，16:2:1，15:2:1，14:2:1，13:2:1，12:2:1，11:2:1，10:2:1，9:2:1，8:2:1，7:2:1，6:2:1的洗脱溶剂进行梯度洗脱，并分别收集各洗脱部分。
7.根据权利要求4所述的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法，其特征在于：所述减压浓缩干燥温度为40-60℃。
8.根据权利要求4所述的牛磺酸-3-脱氢-鹅脱氧胆酸的制法，其特征在于：所述动物胆汁为熊胆汁，猪胆汁，牛胆汁和鸡胆汁中的任意一种。
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CN115340587B (zh) * 2022-08-26 2024-10-29 湖南福来格生物技术有限公司 一种从家禽胆汁中制备牛磺鹅去氧胆酸和牛磺胆酸的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110548037A (zh) * 2019-09-24 2019-12-10 江西天元药业有限公司 精制熊胆粉及其增强体质治疗和预防肿瘤和癌症的用途

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN110548037A (zh) * 2019-09-24 2019-12-10 江西天元药业有限公司 精制熊胆粉及其增强体质治疗和预防肿瘤和癌症的用途

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN115340587A (zh) * 2022-08-26 2022-11-15 湖南福来格生物技术有限公司 一种从家禽胆汁中制备牛磺鹅去氧胆酸和牛磺胆酸的方法
CN115340587B (zh) * 2022-08-26 2024-10-29 湖南福来格生物技术有限公司 一种从家禽胆汁中制备牛磺鹅去氧胆酸和牛磺胆酸的方法

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