CN111387338A - 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 - Google Patents
一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN111387338A CN111387338A CN202010267708.9A CN202010267708A CN111387338A CN 111387338 A CN111387338 A CN 111387338A CN 202010267708 A CN202010267708 A CN 202010267708A CN 111387338 A CN111387338 A CN 111387338A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- pepper seed
- active protein
- protein peptide
- preparing
- mass
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000002566 Capsicum Nutrition 0.000 title claims abstract description 57
- 239000006002 Pepper Substances 0.000 title claims abstract description 57
- 235000016761 Piper aduncum Nutrition 0.000 title claims abstract description 57
- 235000017804 Piper guineense Nutrition 0.000 title claims abstract description 57
- 235000008184 Piper nigrum Nutrition 0.000 title claims abstract description 57
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 title claims abstract description 41
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 title claims abstract description 40
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 title claims abstract description 40
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 31
- 244000203593 Piper nigrum Species 0.000 title 1
- 241000722363 Piper Species 0.000 claims abstract description 56
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 35
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims abstract description 34
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims abstract description 34
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 25
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 21
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 17
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims abstract description 16
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 claims abstract description 14
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims abstract description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 12
- 238000005238 degreasing Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 11
- 235000007650 Aralia spinosa Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 241000949456 Zanthoxylum Species 0.000 claims abstract description 10
- 238000002791 soaking Methods 0.000 claims abstract description 9
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 238000007873 sieving Methods 0.000 claims abstract description 7
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 5
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims abstract description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 32
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 26
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 26
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 26
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 15
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 14
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims description 14
- 239000004365 Protease Substances 0.000 claims description 13
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 10
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 claims description 7
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 7
- 229940055729 papain Drugs 0.000 claims description 7
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 claims description 7
- 108091005658 Basic proteases Proteins 0.000 claims description 6
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 claims description 6
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 claims description 6
- 102000005158 Subtilisins Human genes 0.000 claims description 6
- 108010056079 Subtilisins Proteins 0.000 claims description 6
- 230000009849 deactivation Effects 0.000 claims description 6
- 239000012156 elution solvent Substances 0.000 claims description 6
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 claims description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 claims description 6
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- SHFGJEQAOUMGJM-UHFFFAOYSA-N dialuminum dipotassium disodium dioxosilane iron(3+) oxocalcium oxomagnesium oxygen(2-) Chemical compound [O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[O--].[Na+].[Na+].[Al+3].[Al+3].[K+].[K+].[Fe+3].[Fe+3].O=[Mg].O=[Ca].O=[Si]=O SHFGJEQAOUMGJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 claims description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000010451 perlite Substances 0.000 claims description 5
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000005070 sampling Methods 0.000 claims description 3
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 claims 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 abstract description 6
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 abstract description 5
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 abstract description 5
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 abstract description 3
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 abstract description 3
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 abstract description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 3
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 abstract description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 12
- 210000000582 semen Anatomy 0.000 description 8
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 7
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 3
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- 244000089698 Zanthoxylum simulans Species 0.000 description 1
- 238000003916 acid precipitation Methods 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 239000012752 auxiliary agent Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 239000003337 fertilizer Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
- A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
- A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
- A23J3/346—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of vegetable proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
- A23J1/006—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from vegetable materials
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
- A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
- A23J3/14—Vegetable proteins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
本发明提出一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，包括如下处理步骤：将花椒籽预处理后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，收集脱脂后的花椒籽粕；将花椒籽粕超微粉碎后过筛，之后加水并加入碱液调节体系为弱碱性，浸泡一段时间后搅拌、离心分离后收集上清液；向上清液中加入酸液调节体系为弱酸性，搅拌后收集沉淀物；将沉淀物加水复溶，调节体系pH为7～9，之后加入复合酶制剂进行酶解；灭酶、过滤、制粉。本发明采用亚临界萃取技术对花椒籽高效脱脂，降低了传统高温或者化学溶剂脱脂造成的蛋白质变性、溶剂残留等干扰，最终获得了多肽含量高、营养构成全面的花椒籽活性蛋白肽；本发明原料易得、生产效率高、能耗小。
Description
技术领域
本发明属于生物技术领域，特别涉及一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法。
背景技术
花椒籽是花椒果皮生产中的主要副产物，含有约18.7％的蛋白质。现有技术中，花椒籽除一小部分被留作种子育苗外，大部分被烧掉或作为肥料，甚至被当作废料丢弃。由花椒籽制备花椒籽活性蛋白肽需要先进行花椒籽蛋白的提取、再对花椒籽蛋白进行酶解。花椒籽蛋白酶解后可以得到全营养活性肽，该全营养活性肽不仅能够被人体内的酶系降解、消化，还能最大程度保持食品的营养价值。花椒籽蛋白提取前需要进行脱脂，现有的脱脂工艺多采用乙醇、石油醚等溶剂脱脂，其一，这些溶剂不但成本高，而且存在溶剂残留干扰后续加工工艺；其二，脱脂中的高温工艺使得蛋白质存在不同程度的变性，由此导致所得的蛋白肽活性低，营养价值不高。另外，现有的花椒籽制备花椒籽活性蛋白肽大多为实验室小规模探索，能耗大、生产效率低，虽然提供了理论上的依据，但是离工业化还比较远。
发明内容
为解决以上现有技术的不足，本发明提出了一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法。
本发明的技术方案是这样实现的：
一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，包括如下处理步骤：
(1)将花椒籽预处理(预处理主要包括清洗、除杂、晾干、粉碎和压坯，压坯后得到的坯体含水量为10％左右)后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，收集脱脂后的花椒籽粕；
(2)将花椒籽粕超微粉碎后过筛，之后加水并加入碱液调节体系为弱碱性，浸泡一段时间后搅拌、离心分离后收集上清液；
(3)向上清液中加入酸液调节体系为弱酸性，搅拌后收集沉淀物；
(4)将沉淀物加水复溶，调节体系pH为7～9，之后加入复合酶制剂进行酶解；
(5)将上一步的产物灭酶后过滤、制粉。
本发明先采用亚临界萃取技术对花椒籽脱脂，再对脱脂后的花椒籽粕碱溶、酸析后得到粗蛋白，然后将粗蛋白酶解，最后灭酶、过滤、制粉后得到多肽含量丰富、营养构成全面的花椒籽活性蛋白肽。本发明采用亚临界萃取技术对花椒籽高效脱脂，降低了传统高温或者化学溶剂脱脂造成的蛋白质变性、溶剂残留等干扰。而且，本发明原料易得、生产效率高，所得产物的成品率高、多肽含量高、能耗小。
优选的，步骤(1)中，亚临界萃取工艺中萃取温度为30～50℃、萃取压力为0.8～2MPa、萃取时间为40～50min。亚临界萃取不仅可以实现花椒籽无毒、无害、环保、无污染的脱脂，而且为非热加工方式，有助于避免提取物中的活性成分受到破坏，还极大地降低了后续花椒籽蛋白分离工艺的难度。
优选的，步骤(2)中，花椒籽粕超微粉碎后过100～200目筛，加水后底物质量百分数为5％～20％，浸泡8～12h后搅拌2～4h，浸泡过程中体系温度为20～40℃。
优选的，步骤(3)中，酸液为质量百分数为5％～10％的弱酸，弱酸为柠檬酸、醋酸、乳酸中的至少一种，搅拌持续8～12h。采用弱酸沉淀蛋白质，可以避免强酸对蛋白质营养物质的破坏，有利于优化所得的活性肽的营养成分，还可以提高操作的安全性。
优选的，步骤(4)中，复合酶制剂为质量比(5～7):(2～3):(1～2)的Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物。使用该复合酶制剂后，蛋白的水解度有所提高(最高可达23％，与单纯使用木瓜蛋白酶相比，水解度提高了16％～18％)，水解度的提高有助于提高多肽成分的多样性，丰富多肽的营养构成。
进一步优选的，复合酶制剂的投放质量为待酶解液总质量的2％～10％，酶解条件为：底物质量百分数为3％～30％，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2.5～5h。
优选的，步骤(5)中过滤的具体操作为：先离心过滤、再通过压滤机过滤、最后用大孔树脂吸附柱过滤。过滤后得到活性肽透过液，然后将活性肽透过液冷冻干燥得到花椒籽活性肽粉，冷冻干燥能进一步保留热敏活性物质，三重过滤结合冷冻干燥极大的提高了花椒籽活性蛋白肽的活性和纯度。
进一步优选的，压滤机中设有过滤助剂，过滤助剂为质量比(4～5)：(3～4)：(1～3)的活性炭、珍珠岩和硅藻土的混合物，该过滤助剂不仅可以提高过滤效率，还可以将成品纯度提高10％～20％。
更为优选的，大孔树脂吸附柱中填充有非极性或弱极性树脂中的至少一种，现有的非极性或弱极性树脂：DA201、DA201-C、D101、D101-B、D301R、XDA-07、XDA-1B均可以。花椒籽活性蛋白肽的主要活性成分采用非极性或弱极性大孔树脂的吸附效果比较好；吸附完毕后，再洗脱附。优选的吸附、洗脱附工艺参数为：待过滤液的质量百分数为5％～10％，吸附柱上样流速5～10mL/min，洗脱溶剂为质量百分数50％～75％的乙醇溶剂，洗脱流速5～10mL/min。
优选的，步骤(2)中，加入碱液后体系的pH为8～11；步骤(3)中，加入酸液后体系的pH为3～6；步骤(5)中，采用高温浸提灭酶，灭酶温度为90～125℃、时间为0.5～3h，灭酶后先调节体系pH为7(优选采用弱酸进行调节，比如质量百分数为5％～10％的柠檬酸、醋酸、乳酸均可)再过滤、制粉。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例，对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
选取1kg的陇南大红袍花椒籽分别按照实施例1～4所示的操作步骤进行花椒籽蛋白的连续制备。
实施例1
一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，包括如下处理步骤：
(1)将花椒籽预处理后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，萃取温度50℃、萃取压力1.2MPa、萃取时间40min，收集脱脂后的花椒籽粕；
(2)将花椒籽粕超微粉碎后过200目筛，先加水至底物质量百分数为10％，再加稀氢氧化钠溶液调节体系pH为8，体系温度为30℃，浸泡10h后搅拌2h，然后离心分离后收集上清液；
(3)向上清液中加入质量百分数为10％的醋酸调节体系pH为4，搅拌8h后收集沉淀物；
(4)将沉淀物加水复溶至底物质量百分数为30％，调节体系pH为7，之后加入复合酶制剂进行酶解，酶解温度40℃、时间5h，复合酶制剂为质量比6:2:2的Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物，复合酶制剂的投放质量为待酶解液总质量的5％；
(5)将上一步的产物先高温灭酶，灭酶温度90℃、时间3h，之后加入质量分数5％的乳酸调节体系pH为7，再依序离心过滤、压滤机过滤、大孔树脂吸附柱过滤，压滤机中设有质量比4.5：3：3的活性炭、珍珠岩和硅藻土的过滤助剂，大孔树脂吸附柱中填充有树脂DA201、DA201-C(质量比1：1)，大孔树脂吸附柱过滤的技术参数为：待过滤液的质量百分数为8％，吸附柱上样流速5mL/min，洗脱溶剂为质量百分数75％的乙醇溶剂，洗脱流速8mL/min；最后冷冻干燥得到花椒籽活性肽粉。
实施例2
一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，包括如下处理步骤：
(1)将花椒籽预处理后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，萃取温度40℃、萃取压力0.8MPa、萃取时间50min，收集脱脂后的花椒籽粕；
(2)将花椒籽粕超微粉碎后过150目筛，先加水至底物质量百分数为5％，再加稀氢氧化钠溶液调节体系pH为11，体系温度为25℃，浸泡8h后搅拌4h，然后离心分离后收集上清液；
(3)向上清液中加入质量百分数为8％的醋酸调节体系pH为3，搅拌12h后收集沉淀物；
(4)将沉淀物加水复溶至底物质量百分数为10％，调节体系pH为8，之后加入复合酶制剂进行酶解，酶解温度60℃、时间4h，复合酶制剂为质量比5:3:1.5的Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物，复合酶制剂的投放质量为待酶解液总质量的2％；
(5)将上一步的产物先高温灭酶，灭酶温度125℃、时间2h，之后加入质量份数8％的醋酸调节体系pH为7，再依序离心过滤、压滤机过滤、大孔树脂吸附柱过滤，压滤机中设有质量比4：4：2的活性炭、珍珠岩和硅藻土的过滤助剂，大孔树脂吸附柱中填充有树脂D101、D101-B、D301R(质量比1：2：1)，大孔树脂吸附柱过滤的技术参数为：待过滤液的质量百分数为5％，吸附柱上样流速10mL/min，洗脱溶剂为质量百分数60％的乙醇溶剂，洗脱流速5mL/min；最后冷冻干燥得到花椒籽活性肽粉。
实施例3
一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，包括如下处理步骤：
(1)将花椒籽预处理后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，萃取温度30℃、萃取压力2MPa、萃取时间45min，收集脱脂后的花椒籽粕；
(2)将花椒籽粕超微粉碎后过100目筛，先加水至底物质量百分数为20％，再加稀氢氧化钠溶液调节体系pH为9，体系温度为20℃，浸泡12h后搅拌3h，然后离心分离后收集上清液；
(3)向上清液中加入质量百分数为5％的乳酸调节体系pH为6，搅拌10h后收集沉淀物；
(4)将沉淀物加水复溶至底物质量百分数为3％，调节体系pH为9，之后加入复合酶制剂进行酶解，酶解温度50℃、时间2.5h，复合酶制剂为质量比7:2.5:1的Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物，复合酶制剂的投放质量为待酶解液总质量的10％；
(5)将上一步的产物先高温灭酶，灭酶温度110℃、时间0.5h，之后加入质量百分数10％的柠檬酸调节体系pH为7，再依序离心过滤、压滤机过滤、大孔树脂吸附柱过滤，压滤机中设有质量比5：3.5：1的活性炭、珍珠岩和硅藻土的过滤助剂，大孔树脂吸附柱中填充有树脂XDA-07、XDA-1B(质量比2：1)，大孔树脂吸附柱过滤的技术参数为：待过滤液的质量百分数为10％，吸附柱上样流速8mL/min，洗脱溶剂为质量百分数50％的乙醇溶剂，洗脱流速10mL/min；最后冷冻干燥得到花椒籽活性肽粉。
实施例4
一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，包括如下处理步骤：
(1)将花椒籽预处理后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，萃取温度40℃、萃取压力1.5MPa、萃取时间45min，收集脱脂后的花椒籽粕；
(2)将花椒籽粕超微粉碎后过150目筛，先加水至底物质量百分数为15％，再加稀氢氧化钠溶液调节体系pH为10，体系温度为40℃，浸泡10h后搅拌3h，然后离心分离后收集上清液；
(3)向上清液中加入质量百分数为7％的柠檬酸调节体系pH为4.5，搅拌10h后收集沉淀物；
(4)将沉淀物加水复溶至底物质量百分数为12％，调节体系pH为7.5，之后加入复合酶制剂进行酶解，酶解温度50℃、时间4h，复合酶制剂为质量比6:2.5:1.5的Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物，复合酶制剂的投放质量为待酶解液总质量的5％；
(5)将上一步的产物先高温灭酶，灭酶温度100℃、时间2h，之后加入质量分数9％的醋酸调节体系pH为7，再依序离心过滤、压滤机过滤、大孔树脂吸附柱过滤，压滤机中设有质量比4.5：3.5：2的活性炭、珍珠岩和硅藻土的过滤助剂，大孔树脂吸附柱中填充有树脂D301R，大孔树脂吸附柱过滤的技术参数为：待过滤液的质量百分数为7％，吸附柱上样流速8mL/min，洗脱溶剂为质量百分数65％的乙醇溶剂，洗脱流速7mL/min；最后冷冻干燥得到花椒籽活性肽粉。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (10)
1.一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：包括如下处理步骤：
(1)将花椒籽预处理后采用亚临界萃取工艺进行脱脂，收集脱脂后的花椒籽粕；
(2)将所述花椒籽粕超微粉碎后过筛，之后加水并加入碱液调节体系为弱碱性，浸泡一段时间后搅拌、离心分离后收集上清液；
(3)向所述上清液中加入酸液调节体系为弱酸性，搅拌后收集沉淀物；
(4)将所述沉淀物加水复溶，调节体系pH为7～9，之后加入复合酶制剂进行酶解；
(5)将上一步的产物灭酶后过滤、制粉。
2.根据权利要求1所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：步骤(1)中，所述亚临界萃取工艺中萃取温度为30～50℃、萃取压力为0.8～2MPa、萃取时间为40～50min。
3.根据权利要求1所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，所述花椒籽粕超微粉碎后过100～200目筛，加水后底物质量百分数为5％～20％，浸泡8～12h后搅拌2～4h，浸泡过程中体系温度为20～40℃。
4.根据权利要求1所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：步骤(3)中，所述酸液为质量百分数为5％～10％的弱酸，所述弱酸为柠檬酸、醋酸、乳酸中的至少一种，搅拌持续8～12h。
5.根据权利要求1所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：步骤(4)中，所述复合酶制剂为质量比(5～7):(2～3):(1～2)的Alcalase碱性蛋白酶、Protamex复合蛋白酶和木瓜蛋白酶的混合物。
6.根据权利要求5所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述复合酶制剂的投放质量为待酶解液总质量的2％-10％，酶解条件为：底物质量百分数为3％～30％，酶解温度为40～60℃，酶解时间为2.5～5h。
7.根据权利要求1所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：步骤(5)中过滤的具体操作为：先离心过滤、再通过压滤机过滤、最后用大孔树脂吸附柱过滤。
8.根据权利要求7所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述压滤机中设有过滤助剂，所述过滤助剂为质量比(4～5)：(3～4)：(1～3)的活性炭、珍珠岩和硅藻土的混合物。
9.根据权利要求7所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：所述大孔树脂吸附柱中填充有非极性或弱极性树脂中的至少一种，所述大孔树脂吸附柱过滤的技术参数为：待过滤液的质量百分数为5％～10％，吸附柱上样流速5～10mL/min，洗脱溶剂为质量百分数50％～75％的乙醇溶剂，洗脱流速5～10mL/min。
10.根据权利要求1～9任一项所述的花椒籽活性蛋白肽的制备方法，其特征在于：步骤(2)中，加入碱液后体系的pH为8～11；步骤(3)中，加入酸液后体系的pH为3～6；步骤(5)中，采用高温灭酶，灭酶温度为90～125℃、时间为0.5～3h，灭酶后先调节体系pH为7再过滤、制粉。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010267708.9A CN111387338A (zh) | 2020-04-08 | 2020-04-08 | 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202010267708.9A CN111387338A (zh) | 2020-04-08 | 2020-04-08 | 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN111387338A true CN111387338A (zh) | 2020-07-10 |
Family
ID=71412288
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202010267708.9A Pending CN111387338A (zh) | 2020-04-08 | 2020-04-08 | 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN111387338A (zh) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112772767A (zh) * | 2021-01-27 | 2021-05-11 | 四川省食品发酵工业研究设计院有限公司 | 一种从花椒副产物中提取蛋白质的方法 |
| CN114027389A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-02-11 | 山西椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒籽鲜味多肽及其制备方法 |
| CN114098037A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-01 | 山西椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒呈味肽香精及其制备方法 |
| CN114098042A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-01 | 山东椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒籽美拉德风味肽及其制备方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105124132A (zh) * | 2015-08-07 | 2015-12-09 | 河南省农业科学院 | 一种超声波辅助弱碱提取冷榨芝麻饼粕中蛋白的方法 |
| CN107624951A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-01-26 | 林峰 | 一种茶籽活性肽及制备方法 |
| CN107828840A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-03-23 | 林峰 | 蚕蛹活性肽、组合物及制备方法 |
| CN108070629A (zh) * | 2018-01-24 | 2018-05-25 | 广西壮族自治区农业科学院 | 一种工业化生产火麻蛋白低聚肽的方法 |
-
2020
- 2020-04-08 CN CN202010267708.9A patent/CN111387338A/zh active Pending
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN105124132A (zh) * | 2015-08-07 | 2015-12-09 | 河南省农业科学院 | 一种超声波辅助弱碱提取冷榨芝麻饼粕中蛋白的方法 |
| CN107624951A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-01-26 | 林峰 | 一种茶籽活性肽及制备方法 |
| CN107828840A (zh) * | 2017-11-02 | 2018-03-23 | 林峰 | 蚕蛹活性肽、组合物及制备方法 |
| CN108070629A (zh) * | 2018-01-24 | 2018-05-25 | 广西壮族自治区农业科学院 | 一种工业化生产火麻蛋白低聚肽的方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 姜太玲，等: ""花椒籽蛋白抗菌肽的分离纯化研究"，姜太玲，等，中国油脂，第40卷第10期，第20-24页，2015年12月", 《中国油脂》 * |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN112772767A (zh) * | 2021-01-27 | 2021-05-11 | 四川省食品发酵工业研究设计院有限公司 | 一种从花椒副产物中提取蛋白质的方法 |
| CN114027389A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-02-11 | 山西椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒籽鲜味多肽及其制备方法 |
| CN114098037A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-01 | 山西椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒呈味肽香精及其制备方法 |
| CN114098042A (zh) * | 2021-11-25 | 2022-03-01 | 山东椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒籽美拉德风味肽及其制备方法 |
| CN114027389B (zh) * | 2021-11-25 | 2024-03-08 | 山西椒肽生物科技有限公司 | 一种花椒籽鲜味多肽及其制备方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN111387338A (zh) | 一种花椒籽活性蛋白肽的制备方法 | |
| CN109810201B (zh) | 一种蛹虫草中虫草多糖和虫草素的超声波复合酸性水提取方法 | |
| CN103820203B (zh) | 从茶叶籽中提取茶叶籽油、茶皂素和蛋白粉的工艺 | |
| CN106366136A (zh) | 一种唾液酸及其制备方法、用途 | |
| CN108112728B (zh) | 一种茶叶中活性成分提取的工艺 | |
| CN100376684C (zh) | 用低次烟叶蛋白制备抑菌肽的方法 | |
| CN111642666A (zh) | 一种人参提取物大豆肽粉固体饮料的制备方法 | |
| CN101869169B (zh) | 以鱼下脚料发酵耦合膜技术制备鱼低聚肽的方法 | |
| CN113244657A (zh) | 一种紫青稞麸皮功能成分的梯次提取方法 | |
| CN106177898A (zh) | 一种无抗水产免疫增强剂的制备方法 | |
| CN107722132B (zh) | 一种从海藻中联产海藻多糖和海藻蛋白的方法 | |
| CN111662393A (zh) | 一种灵芝的全组分提取方法 | |
| CN109758498B (zh) | 一种油橄榄叶提取物的制备方法 | |
| CN110922498A (zh) | 一种以残次香菇和香菇柄制备香菇多糖及香菇多肽的方法 | |
| CN112915154A (zh) | 一种芦笋下脚料中芦笋黄酮制备方法 | |
| CN110777173B (zh) | 一种利用罗汉果离心废渣制备罗汉果氨基酸的方法 | |
| CN112390847A (zh) | 一种从川楝果实中提取川楝素的方法 | |
| CN114276885B (zh) | 一种用鲜罗汉果制备乙醇的方法 | |
| CN109907304A (zh) | 一种杏鲍菇多糖的制备方法 | |
| CN112125948B (zh) | 一种从植物叶片中同步提取植物多酚和植物蛋白并制备植物蛋白水解肽的方法 | |
| CN110484577B (zh) | 一种从火龙果茎中提取和制备甘露糖的方法 | |
| CN111363001A (zh) | 一种花椒籽蛋白的连续制备工艺 | |
| CN112057894A (zh) | 一种提取大麻二酚的方法 | |
| CN108047288B (zh) | 一种栀子苷的制备方法 | |
| CN101805528B (zh) | 一种欧李红色素的提取纯化方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination |