CN111366657A - 高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法 - Google Patents

高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111366657A
CN111366657A CN202010278471.4A CN202010278471A CN111366657A CN 111366657 A CN111366657 A CN 111366657A CN 202010278471 A CN202010278471 A CN 202010278471A CN 111366657 A CN111366657 A CN 111366657A
Authority
CN
China
Prior art keywords
impurity
vitamin
high performance
liquid chromatography
performance liquid
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN202010278471.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111366657B (zh
Inventor
茅燕鸿
吉丽峰
姜春阳
谢军
李惠
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Jiangsu Haiyuekang Pharmaceutical Technology Co ltd
Original Assignee
Jiangsu Haiyuekang Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Haiyuekang Pharmaceutical Technology Co ltd filed Critical Jiangsu Haiyuekang Pharmaceutical Technology Co ltd
Priority to CN202010278471.4A priority Critical patent/CN111366657B/zh
Publication of CN111366657A publication Critical patent/CN111366657A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111366657B publication Critical patent/CN111366657B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J14/00—Chemical processes in general for reacting liquids with liquids; Apparatus specially adapted therefor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N30/14—Preparation by elimination of some components
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/74—Optical detectors
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G01N2030/067—Preparation by reaction, e.g. derivatising the sample
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/884—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample organic compounds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/88—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86
    • G01N2030/8809—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample
    • G01N2030/8872—Integrated analysis systems specially adapted therefor, not covered by a single one of the groups G01N30/04 - G01N30/86 analysis specially adapted for the sample impurities

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)

Abstract

本发明公开了高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，选用Merck Lichrospher 100 RP18色谱柱，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相，流动相的流速设置为0.9ml/min～1.1ml/min，采用梯度洗脱，所述庚烷磺酸钠溶液浓度为18mmol/L～22mmol/L，其PH值为2.6～3.0。本发明的有益效果是，利用方便快捷的高效液相色谱法，对维生素B1的EP杂质进行检测，重复性、准确度均十分良好，有利于药品的质量控制；采用碱性溶液进行降解，降解效果佳。

Description

高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法
技术领域
本发明涉及药物分析技术领域，特别是高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法。
背景技术
维生素B1，化学名为氯化3-[(4-氨基-2-甲基-5-嘧啶基)-甲基]-5-2-羟乙基)-4-甲基噻唑鎓盐酸盐，其化学结构如下：
Figure BDA0002445647230000011
维生素B1又称硫胺素，是最早被人们提纯的水溶性维生素，具有维持正常糖代谢及神经传导的功能，用于治疗脚气和中枢神经及胃肠病、心脏活动失调等疾病。
维生素B1已被中国药典、欧洲药典、日本药典收录，除欧洲药典提供的有关物质检测方法对单个已知杂质(杂质A、杂质B、杂质C)进行分离并单独控制外，其他各国药典均未对单个杂质进行分离并控制；其中，欧洲药典对物质检测方法为，采用色谱柱规格为：MerckLichrospher 100RP18，250×4mm，5μm，其中流动相A为3.764g/L己烷磺酸钠溶液(用磷酸调节pH值至3.1)，流动相B为甲醇，其检测波长为248nm，流速为1.0ml/min，柱温为45℃，进样量为25μl，其梯度洗脱程序见附图1；系统适用性溶液配制：分别取维生素B1及欧洲药典杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H对照品适量，加5％乙酸溶液溶解并稀释制成每1ml中约含HCC3.5mg，各有关物质均约20μg的溶液，作为系统适用性溶液；按照上述检测条件，量取系统适用性溶液25μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(见附图2)，结果表明，杂质B与杂质D重合，维生素B1主峰及各杂质均拖尾严重，主峰拖尾因子为5.6，杂质最大拖尾因子为2.3。
因此欧洲药典有关物质方法控制的杂质A、杂质B、杂质C实际上也并不是维生素B1的降解杂质，不便于人们进行适用，为了保证维生素B1生产及存储过程中的质量，需寻找一种可对其降解杂质进行控制的方法，便于我们使用的需要。
发明内容
本发明的目的是为了解决目前市场上并没有对维生素B1的杂质进行准确且有效分离的问题，因此我们设计了一种高效检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法，具体为高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法。
实现上述目的本发明的技术方案为，高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，选用Merck Lichrospher 100RP18色谱柱，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相，流动相的流速设置为0.9ml/min～
1.1ml/min，采用梯度洗脱，所述庚烷磺酸钠溶液浓度为18mmol/L～22mmol/L，其PH值为2.6～3.0；其中，流动相的流速优选为1.0mL/min，所述庚烷磺酸钠溶液浓度优选20mmol/L，PH值优选为2.8。
对方案的进一步补充，所述庚烷磺酸钠溶液中含有0.5％三乙胺。
对方案的进一步补充，所述Merck Lichrospher 100RP18色谱柱选用：内径为4mm，长度为250mm，填料粒径为5μm的Merck Lichrospher 100 RP18色谱柱。
对方案的进一步补充，其进样量为25μL，柱温为38℃～42℃。
对方案的进一步补充，选用紫外检测器，其检测波长为246nm～250nm。
对方案的进一步补充，供试品溶液维生素B1的浓度为1.5mg/mL。
降解杂质的方法，取维生素B1样品约30mg，精密称定，置20mL量瓶中，加2mL浓度为1mol/L的氢氧化钠，90℃加热2h，用2mL浓度为1mol/L的盐酸中和，用15％甲醇稀释至刻度，摇匀。
其有益效果在于，利用方便快捷的高效液相色谱法，对维生素B1的EP杂质进行检测，重复性、准确度均十分良好，有利于药品的质量控制；采用碱性溶液进行降解，降解效果佳。
附图说明
图1是本发明背景技术中的欧洲药典检测条件的梯度洗脱程序；
图2是本发明背景技术中的欧洲药典检测条件下系统适用性溶液的色谱图；
图3是本发明检测条件下系统适用性溶液的色谱图；
图4是本发明实施例1中氧化降解溶液的色谱图；
图5是本发明实施例2中碱降解溶液的色谱图。
具体实施方式
首先说明本发明的设计初衷，是由于目前市场上并没有对维生素B1的杂质进行准确且有效分离的问题，为了保证维生素B1生产及存储过程中的质量更佳，本发明提供了一种高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质及降解杂质的方法。
下面通过具体的实施例，对本发明做详细的描述：
实施例1
色谱条件：色谱柱：Merck Lichrospher 100RP18，粒径5μm，柱规格(250×4mm)；检测器：紫外检测器，检测波长248nm，流动相：庚烷磺酸钠溶液和甲醇；庚烷磺酸钠溶液的浓度：20mmol/L；庚烷磺酸钠溶液PH值为2.8；流速：1.0mL/min；柱温：40℃；进样量：25μL
梯度洗脱比例：如下表1所示；
表1梯度洗脱比例
时间(分钟) 庚烷磺酸钠溶液(％) 甲醇(％)
0 85 15
25 75 25
30 70 30
45 50 50
50 50 50
52 85 15
60 85 15
系统适用性溶液配制：分别取维生素B1及欧洲药典杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H对照品适量，加15％甲醇溶解并稀释制成每1mL中约含HCC 1.5mg，各有关物质均约1.5μg的溶液，作为系统适用性溶液(杂质控制限度：0.1％)。
检测方式，量取系统适用性溶液25μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(见附图3)，结果表明，主峰与各杂质峰形良好，各杂质与维生素B1均能有效地分离。
降解杂质的方法(氧化降解溶液配制)：取维生素B1约30mg，精密称定，置20ml量瓶中，加30％过氧化氢溶液2ml，90℃水浴破坏0.5h，冷却后用15％甲醇稀释至刻度，摇匀。
按本发明的检测方法，量取降解溶液25μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(如附图4)。
实施例2
检测杂质的方法与实施例1相同；降解杂质的方法(碱降解溶液配制)：取维生素B1样品约30mg，精密称定，置20ml量瓶中，加1mol/L氢氧化钠2ml，90℃加热2h，用1mol/L盐酸2ml中和，用15％甲醇稀释至刻度，摇匀。
按本发明的检测方法，量取降解溶液25μl，注入液相色谱仪，记录色谱图(如附图5)。
根据实施例1与实施例2的色谱图对比可知，维生素B1在碱性条件下更易降解，主要降解产物相对维生素B1保留时间为0.93，与欧洲药典杂质A、杂质B、杂质C、杂质D、杂质E、杂质F、杂质G、杂质H均可有效分离。
上述技术方案仅体现了本发明技术方案的优选技术方案，本技术领域的技术人员对其中某些部分所可能做出的一些变动均体现了本发明的原理，属于本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，选用Merck Lichrospher100 RP18色谱柱，以庚烷磺酸钠溶液和甲醇为流动相，流动相的流速设置为0.9ml/min～1.1ml/min，采用梯度洗脱，所述庚烷磺酸钠溶液浓度为18mmol/L～22mmol/L，其PH值为2.6～3.0。
2.根据权利要求1所述的高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，所述庚烷磺酸钠溶液中含有0.5％三乙胺。
3.根据权利要求1所述的高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，所述Merck Lichrospher 100 RP18色谱柱选用：内径为4mm，长度为250mm，填料粒径为5μm的Merck Lichrospher 100 RP18色谱柱。
4.根据权利要求1所述的高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，其进样量为25μL，柱温为38℃～42℃。
5.根据权利要求1所述的高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，选用紫外检测器，其检测波长为246nm～250nm。
6.根据权利要求1所述的高效液相色谱检测维生素B1的EP杂质的方法，其特征在于，供试品溶液维生素B1的浓度为1.5mg/mL。
7.降解杂质的方法，其特征在于，取维生素B1样品约30mg，精密称定，置20mL量瓶中，加2mL浓度为1mol/L的氢氧化钠，90℃加热2h，用2mL浓度为1mol/L的盐酸中和，用15％甲醇稀释至刻度，摇匀。
CN202010278471.4A 2020-04-10 2020-04-10 高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法 Active CN111366657B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010278471.4A CN111366657B (zh) 2020-04-10 2020-04-10 高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010278471.4A CN111366657B (zh) 2020-04-10 2020-04-10 高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111366657A true CN111366657A (zh) 2020-07-03
CN111366657B CN111366657B (zh) 2022-07-29

Family

ID=71207813

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010278471.4A Active CN111366657B (zh) 2020-04-10 2020-04-10 高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111366657B (zh)

Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112608280A (zh) * 2020-12-01 2021-04-06 南京健友生化制药股份有限公司 一种维生素b1注射液开环降解杂质及其制备和检测方法
CN112684022A (zh) * 2020-12-01 2021-04-20 南京健友生化制药股份有限公司 一种维生素b1注射液杂质及其制备和检测方法
CN114295736A (zh) * 2021-12-02 2022-04-08 华中药业股份有限公司 一种维生素b1杂质的检测方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120048003A1 (en) * 2010-08-24 2012-03-01 GOLDEN PRODUCTS LLC, Limited Liability Company Vitamin assay methods
CN109239230A (zh) * 2018-10-30 2019-01-18 广州汉光药业股份有限公司 多种维生素制剂的杂质分析方法
CN110715995A (zh) * 2018-07-12 2020-01-21 北京藏卫信康医药研发有限公司 一种多种维生素注射剂杂质的检测方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20120048003A1 (en) * 2010-08-24 2012-03-01 GOLDEN PRODUCTS LLC, Limited Liability Company Vitamin assay methods
CN110715995A (zh) * 2018-07-12 2020-01-21 北京藏卫信康医药研发有限公司 一种多种维生素注射剂杂质的检测方法
CN109239230A (zh) * 2018-10-30 2019-01-18 广州汉光药业股份有限公司 多种维生素制剂的杂质分析方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
EUROPEAN DIRECTORATE FOR THE QUALITY OF MEDICINES & HEALTHCARE: "《European Pharmacopoeia 8th Edition》", 15 July 2013, DRUCKEREI C. H. BECK *
PILAR VIN˜AS 等: "Comparison of ion-pair and amide-based column reversed-phase liquid chromatography for the separation of thiamine-related compounds", 《JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY B》 *
刘红: "高效液相检测注射用甲硫氨酸维B1杂质的方法建立", 《科学中国人》 *
李文倩 等: "RP-HPLC法测定复合维生素BC注射液中维生素B1的有关物质", 《药物分析杂志》 *
程辉跃 等: "甲硫氨酸维B1注射液中维生素B_1的有关物质及含量的测定", 《药物分析杂志》 *

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112608280A (zh) * 2020-12-01 2021-04-06 南京健友生化制药股份有限公司 一种维生素b1注射液开环降解杂质及其制备和检测方法
CN112684022A (zh) * 2020-12-01 2021-04-20 南京健友生化制药股份有限公司 一种维生素b1注射液杂质及其制备和检测方法
CN112684022B (zh) * 2020-12-01 2022-10-11 南京健友生化制药股份有限公司 一种维生素b1注射液杂质及其制备和检测方法
CN114295736A (zh) * 2021-12-02 2022-04-08 华中药业股份有限公司 一种维生素b1杂质的检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN111366657B (zh) 2022-07-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111366657B (zh) 高效液相色谱检测维生素b1的ep杂质及降解杂质的方法
CN106706768B (zh) 一种分离测定恩格列净及其有关物质的方法
CN116953129B (zh) 高效液相色谱法同时测定富马酸伏诺拉生中十二种杂质的方法
CN111239299B (zh) 一种分离测定帕博西尼及其杂质的方法
CN107917972A (zh) 一种高效液相色谱分析奥贝胆酸及其合成中间体的方法
CN109134430B (zh) 一种hplc法制备雷贝拉唑杂质的方法
CN105806966A (zh) 一种用于高光学纯度叶酸制备过程的质量控制方法
CN107727773B (zh) 采用液相色谱法检测甲磺酸奥希替尼纯度的方法
CN109406685B (zh) 一种分离卡非佐米和其异构体的高效液相色谱方法
CN108072710A (zh) 一种依达拉奉氯化钠注射液有关物质检测方法
CN109251161B (zh) 2-亚硫酸氢色氨酸的制备方法
CN111505154A (zh) 一种枸橼酸莫沙必利及其制剂中五种关键杂质的检测方法
CN109668988B (zh) 一种分析测定琥珀酸曲格列汀中2-(二溴甲基)-4-氟苯腈的方法
CN108872405A (zh) 一种洛度沙胺氨丁三醇有关物质的hplc分析检测方法
CN109293682A (zh) 一种托法替布杂质及其制备方法
CN114113385A (zh) β-烟酰胺单核酸含量和有关物质的测定方法
CN111983075A (zh) 一种检测雷沙吉兰及其对映异构体的方法
CN115201349A (zh) 奥氮平起始物料中关键试剂丙醛等含量的gc分析方法
CN109251162B (zh) 色氨酸衍生物及其用途
CN111458423A (zh) 一种分析测定琥珀酸曲格列汀中2-氰基-5-氟溴苄的方法
CN111024861A (zh) 一种莱特莫韦及含莱特莫韦的制剂中有关物质的检测方法
Hamsa et al. Analytical profile of cinacalcet hydrochloride: A review
CN115541755B (zh) 一种硝呋太尔片的质量控制方法
CN111458431B (zh) 奥利司他中间体的异构体的检测方法
CN114609293B (zh) 一种采用lc-ms法检测血浆中匹维溴铵的方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant