CN111323577B - 一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明涉及医学检验技术领域，特别涉及一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。该试剂盒包括磁微粒混悬液、酶结合物试剂、样本稀释液试剂和校准品；磁微粒混悬液由磁微粒‑链霉亲和素复合物和磁微粒缓冲液组成；酶结合物试剂由化学发光标记物标记的抗人IgG抗体和酶结合物稀释液组成；样本稀释液试剂由生物素化心磷脂抗原溶液和样本稀释液组成；生物素化心磷脂抗原溶液为生物素化的β2‑GP1抗原‑心磷脂抗原溶液。本发明试剂盒采用生物素间接标记心磷脂抗原，可解决漏检的难题，且检测方法简单、有效，可全自动操作，单人份测试，且试剂盒具备较佳的灵敏度、准确度、精密度和稳定性。

Description

一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒

技术领域

本发明涉及医学检验技术领域，特别涉及一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。

背景技术

抗磷脂综合征(antiphospholipid syndrome，APS)是一种由抗磷脂抗体(antiphospholipid-antibody,APL)介导的非器官特异的自身免疫病，临床上以动脉、静脉血栓形成、病态妊娠(妊娠早期流产和中晚期死胎)和血小板减少等症状为主要表现，同时伴随中、高滴度APLs阳性。抗磷脂抗体(APL)是一组以磷脂或磷脂结合蛋白为靶抗原的自身抗体总称。APLs通过识别并结合相关磷脂或磷脂结合蛋白来干扰各种依赖磷脂的凝血过程，如：影响血管内皮细胞和血小板功能，促进磷脂依赖性凝血过程的发生，抑制抗凝物质的作用(如β2-GP1、凝血酶原、蛋白C、蛋白S、继发性抗凝血酶Ⅲ)，与胎盘抗凝蛋白结合，导致胎盘血栓形成及自发流产等。

抗心磷脂抗体(anticardiolipinantibodies,aCL)是一种以血小板和内皮细胞膜上带负电荷的心磷脂作为靶抗原的自身抗体。为抗磷脂抗体的一种，也是抗磷脂抗体综合征(APS)的标志性抗体。抗心磷脂抗体的存在被认为是机体自身免疫反应的有力证据。aCL是一组特性不同的非均一性抗体，可分为IgG、IgM、IgA三种亚型。根据临床病症不同又可分为两类：一类是非β2-GP1依赖型抗体，多见于感染性疾病；一类是β2-GP1依赖型抗体，多见于自身免疫性疾病。在2006年修订的札幌标准中，实验室阳性指标之一为IgG/M类抗心磷脂抗体阳性(滴度>99的百分位数)。此外，在第十三届国际共识中，诊断APS推荐测定心磷脂抗体的IgG和IgM亚型，当两者都为阴性，但仍然怀疑是APS患者时，推荐测定心磷脂抗体的IgA亚型。

临床上检测抗心磷脂抗体的方法主要为酶联免疫吸附法(ELISA)和磁微粒化学发光法(CLIA)。其技术原理如下：

将心磷脂抗原(cL)，包被到96孔酶联板或者磁微粒上，加入样本，样本中的抗心磷脂抗体IgG(aCL-IgG)与孔内的心磷脂抗原(cL)发生特异性反应，使用清洗液洗去游离物质，之后加入辣根过氧化物酶(HRP)/碱性磷酸酶(AP)或者吖啶酯(标记的兔/羊或者鼠抗人IgG抗体，形成心磷脂抗原-抗心磷脂抗体IgG-标记后的抗人IgG抗体的复合物，再次使用清洗液洗去游离物质，加入底物，底物被催化或者直接发光，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据吸光或者发光值来进行定性或定量分析。

酶联免疫吸附法(ELISA)存在着下述的不足之处：

(1)使用12×8型、6×8型、8×12型或整板型96孔专用微孔板作为抗原包被用具和反应容器，在使用时只能分成12批次、6批次、8批次或整板一次使用，无法进行独立的、单人份的检测；

(2)定量测定所用的试剂种类较多，每一种检测试剂都要用试剂瓶来盛装，并且每使用一种试剂时都需要更换吸液嘴来分别加注到微孔板的微孔中，不但试剂瓶种类多，加注试剂的操作也极为繁琐；

(3)缺少对检测信息的相应标注，只能通过查看试剂盒外包装盒的标识才能了解或知悉检测试剂的生产批号及有效期信息，而且所知悉的信息在检测过程中不受控，具有很大的随意性；

(4)检测试剂在检测过程中处于开放的空间，容易引起各种试剂之间的交叉污染而影响检测结果的准确性；

(5)检测过程多采用手工操作，试剂或样本的加量不很精确，操作过程极为繁琐和复杂，容易发生操作差错，检测结果的准确度和精密度较差；

(6)在检测项目成套试剂的数量配置及使用上均为项目数×48/96人份，如果需要检测10个项目，则试剂的配置及使用数须为10×48/96人份，如果只有一份样本需要检测10个不同的项目，也需要配置10×48/96人份的试剂，存在着不够经济合理的缺点。

(7)每次检测都需要进行重新定标，提高检测成本，且重复性较差。

磁微粒化学发光法可实现全自动、高通量检测，反应时间短，重复性、准确度、精密度和稳定性均较佳。但目前国内的抗心磷脂抗体试剂盒均采用将心磷脂抗原直接包被到磁微粒上的方式，由于心磷脂抗原分子量较小，可与磁微粒连接的功能基团少，容易受空间位阻影响，不易于直接连接到磁微粒上，或者连接上以后可能导致抗原变构等，造成漏检或者与临床不符等现象。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。该试剂盒采用生物素间接标记心磷脂抗原，可解决漏检的难题，且检测方法简单、有效，可全自动操作，单人份测试，且试剂盒具备较佳的灵敏度、准确度、精密度和稳定性。

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，包括磁微粒混悬液、酶结合物试剂、样本稀释液试剂和校准品；

磁微粒混悬液由磁微粒-链霉亲和素复合物和磁微粒缓冲液组成；

酶结合物试剂由化学发光标记物标记的抗人IgG抗体和酶结合物稀释液组成；

样本稀释液试剂由生物素化心磷脂抗原溶液和样本稀释液组成；生物素化心磷脂抗原溶液为生物素化的β2-GP1抗原-心磷脂抗原溶液。

在本发明中，抗心磷脂抗体IgG定量测定试剂盒其工作原理及反应步骤如下：

样本先与样本稀释液和磁微粒混悬液混合，37℃下温育反应15min，样本中的抗心磷脂抗体与样本稀释液中的生物素化心磷脂抗原进行结合，然后生物素与链霉亲和素磁珠进行结合，形成磁微粒-链霉亲和素-生物素-心磷脂-抗心磷脂抗体的复合物，温育完成后，使用清洗液对反应液进行清洗分离5次。然后加入酶结合物，37℃下温育反应15min。酶结合物中的兔/羊抗人IgG抗体与该复合物结合，形成磁微粒-链霉亲和素-生物素-心磷脂-抗心磷脂抗体-兔/羊抗人IgG抗体-HRP的复合物，温育完成后，使用清洗液对反应液进行清洗分离5次。加入底物A液和底物B液。对反应液进行混匀，1～5分钟检测发光强度。HRP会催化发光底物发出光子，发光强度与抗心磷脂抗体IgG的含量成正比。校准品定标的加样模式和反应步骤与样本一致，定标曲线有效期为28天，不需要反复定标。

作为优选，以3mL磁微粒混悬液计，各组分用量为：磁微粒25～35μL，链霉亲和素7.5～75μg，磁微粒缓冲液补足至3mL。

优选地，以3mL磁微粒混悬液计，各组分用量为：磁微粒30μL，链霉亲和素30μg，磁微粒缓冲液补足至3mL。

作为优选，磁微粒缓冲液的配方为：Tris 5～7g、NaCl 8～9g、BSA 10～30g、防腐剂0.5～2g、甘油10～100mL、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

优选地，磁微粒缓冲液的配方为：Tris 6.05g、NaCl 8.20g、BSA 20g、防腐剂1g、甘油50mL、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

作为优选，以1L酶结合物试剂计，各组分用量为：化学发光标记物标记的抗人IgG抗体100～1000μL，酶结合物稀释液补足至1L。

优选地，以1L酶结合物试剂计，各组分用量为：化学发光标记物标记的抗人IgG抗体500μL，酶结合物稀释液补足至1L。

作为优选，酶结合物稀释液的配方为：Tris 5～7g、NaCl 8～9g、BSA 10～30g、防腐剂0.5～2g、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

优选地，酶结合物稀释液的配方为：Tris 6.05g、NaCl 8.20g、BSA 20g、防腐剂1g、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

作为优选，生物素化的β2-GP1抗原-心磷脂抗原溶液中，生物素、β2-GP1抗原、心磷脂抗原的摩尔比为(10～20)：1：(1～5)。

优选地，生物素化的β2-GP1抗原-心磷脂抗原溶液中，生物素、β2-GP1抗原、心磷脂抗原的摩尔比为20：1：5。

作为优选，样本稀释液的配方为：Tris 5～7g、NaCl 8～9g、BSA 10～30g、防腐剂0.5～2g、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

优选地，样本稀释液的配方为：Tris 6.05g、NaCl 8.20g、BSA 20g、防腐剂1g、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

作为优选，样本稀释液试剂中，以μL/L计，生物素化心磷脂抗原溶液与样本稀释液的体积比为(100～1000)：1。

优选地，样本稀释液试剂中，以μL/L计，生物素化心磷脂抗原溶液与样本稀释液的体积比为500：1。

作为优选，校准品中抗心磷脂抗体IgG的浓度为0～200GPL。

优选地，校准品中抗心磷脂抗体IgG的浓度为0～150GPL。

作为优选，化学发光标记物为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、吖啶酯、三联吡啶钌中的一种或几种。

作为优选，防腐剂为Proclin300。

作为优选，抗人IgG抗体为兔/羊抗人IgG抗体。

本发明提供了一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒。该试剂盒包括磁微粒混悬液、酶结合物试剂、样本稀释液试剂和校准品；磁微粒混悬液由磁微粒-链霉亲和素复合物和磁微粒缓冲液组成；酶结合物试剂由化学发光标记物标记的抗人IgG抗体和酶结合物稀释液组成；样本稀释液试剂由生物素化心磷脂抗原溶液和样本稀释液组成；生物素化心磷脂抗原溶液为生物素化的β2-GP1抗原-心磷脂抗原溶液。本发明具有的技术效果如下：

1、与直接将抗原包被到磁微粒上的化学发光法比对：

心磷脂抗原分子量较小，可与磁微粒连接的功能基团少，容易受空间位阻影响，不易于直接连接到磁微粒上，或者连接上以后可能导致抗原变构等，造成漏检或者与临床不符等现象。而心磷脂与生物素的连接存在相同的问题，本发明的创新点在于，先将β2-GP1抗原与生物素进行连接，之后将心磷脂抗原加入到生物素化的β2-GP1溶液中，β2-GP1可通过其结构域V的正电荷与带负电的心磷脂结合，达到将心磷脂抗原与生物素进行间接连接的目的，便于后续抗体的检测，提高抗心磷脂抗体检测的灵敏度。

2、与ELISA法比对：

化学发光法相对于ELISA法，可实现自动化，减少人为因素的误差，缩短反应时间，且经济高效，准确度、精密度和稳定性均较佳。

可见，本发明试剂盒采用生物素间接标记心磷脂抗原，可解决漏检的难题，且检测方法简单、有效，可全自动操作，单人份测试，且试剂盒具备较佳的灵敏度、准确度、精密度和稳定性。

具体实施方式

本发明公开了一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本发明。本发明的方法及应用已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本发明技术。

术语解释：

APS：抗磷脂综合征；

APL：抗磷脂抗体；

aCL：抗心磷脂抗体；

cL：心磷脂；

aβ2-GP1：抗β2-糖蛋白1抗体；

β2-GP1：β2-糖蛋白1；

ELISA：酶联免疫吸附法；

HRP：辣根过氧化酶。

本发明提供的抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒中所用试剂或仪器均可由市场购得。

下面结合实施例，进一步阐述本发明：

实施例1生物素化抗原的检测试剂盒

本实施例提供了一种抗心磷脂抗体IgG定量测定试剂盒，包括磁微粒混悬液、酶结合物试剂、样本稀释液试剂、校准品。制备过程包括：

一、磁微粒缓冲液的制备过程，以1L为例：

(1)量取900mL纯化水于容器中，称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)Tris 6.05g和NaCl 8.20g加入容器中，充分搅拌至完全溶解。

(2)用浓盐酸调pH，控制在7.4±0.05；

(3)称取1-3％的牛血清白蛋白(BSA)，0.05％-0.2％的Proclin300，量取1％-10％的甘油，加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(4)2-8℃保存。

二、磁微粒混悬液的制备过程，以3mL为例：

(1)磁珠含有羧基(COOH)活性基团，每克(g)磁珠(干重)羧基含量约30μg，是均一粒子，粒子直径是1.5-3μm。

(2)链霉亲和素(Streptavidin)，粉末状，使用去离子水或者磷酸缓冲液将其溶解为1-5mg/mL。

(3)2-吗啉乙磺酸(MES)、碳二亚胺(EDC)、三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)、N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)和其他试剂应达到化学纯。

(4)取30μL磁珠原液，添加pH＝5.0±0.05的MES缓冲液300μL洗涤，震荡5min，磁分离，弃上清，重复洗涤5次；

(5)称取EDC和NHS，用pH＝5.0±0.05的MES缓冲液配制成20μg/mL溶液，各加入50μL，室温下震荡反应60min；

(6)磁分离，弃上清，加入30μg的链霉亲和素，并用pH＝5.0±0.05的MES缓冲液定容至100μL，室温下震荡反应60-120min；

(4)磁分离，弃上清，加入300μL磁微粒缓冲液，震荡洗涤5min，重复洗涤4次；

(5)用磁微粒缓冲液定容至3mL，完成磁微粒混悬液的制备；

三、酶结合物试剂的制备步骤如下，以1L为例：

(1)量取1000mL纯化水于容器中，称取Tris 6.05g和NaCl 8.20g加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(2)用浓盐酸调pH，控制在7.4±0.05；

(3)称取2％的牛血清白蛋白(BSA)，0.1％的Proclin300，加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(4)取HRP标记的兔/羊抗人IgG抗体500μL，搅拌30min；

(5)2-8℃保存。

四、生物素化心磷脂抗原溶液的制备

将β2-GP1抗原加入到0.01-0.1M PBS缓冲液中(PH＝7.0-8.0)，浓度为1mg/mL，室温震荡反应30-60min。将生物素溶于N,N-二甲基甲酰胺(DMF)或者二甲基亚砜(DMSO)中，制备成浓度为20mg/mL的生物素溶液，按照生物素与β2-GP1抗原按照20:1的摩尔比加入生物素(边震荡边缓慢加入)，室温震荡反应1-2h。将得到的混合溶液在0.01-0.1M PBS缓冲液中(PH＝7.0-8.0)进行充分透析24h，得到生物素化的β2-GP1抗原溶液。将心磷脂抗原按照与β2-GP1抗原为5：1的摩尔比加入到生物素化的β2-GP1抗原溶液中，得到生物素化的心磷脂抗原溶液。

五、样本稀释液试剂的配制步骤如下，以1L为例：

(1)量取1000mL纯化水于容器中，称取Tris 6.05g和NaCl 8.20g加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(2)用浓盐酸调pH，控制在7.4±0.05；

(3)称取2％的牛血清白蛋白(BSA)，0.1％的Proclin300，加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(4)取生物素化的心磷脂抗原溶液500μL，搅拌30min；

(5)2-8℃保存。

六、校准品的制备：

用阴性血清稀释抗心磷脂抗体IgG阳性样本，配制浓度为0、10、30、80、120、150GPL的6个校准品；

实施例2检测方法

本试剂盒适用于郑州安图生物工程股份有限公司生产的AutoLumo A2000、AutoLumo A2000 Plus、AutoLumo A2000 Plus B、AutoLumo A1000化学发光检测仪。

准备测试样本(校准品或待测样本)并正确放置后，点击启动按钮进行定标程序或样本检测程序，仪器将执行以下操作：

1)将样本架传送到吸样位，将反应容器加载到加样位。

2)使用系统稀释液按1:9稀释待测样本(20μL样本与180μL系统稀释液混合均匀)。注意：校准品已预先稀释，可直接使用。

3)执行定标程序时，完成100μL校准品、20μL磁微粒混悬液的分注。

4)执行样本检测程序时，完成10μL待测样本、20μL磁微粒混悬液、90μL样品稀释液的分注。

5)对反应液进行混匀、温育，温育温度为37℃，温育时间为15分钟。

6)温育完成后，对反应液进行磁分离，使用清洗液进行清洗分离。

7)完成100μL酶结合物的分注，对反应液进行混匀。

8)对反应液进行混匀、温育，温育温度为37℃，温育时间为15分钟。

9)温育完成后，使用清洗液对反应液进行清洗分离。

10)完成50μL底物A液和50μL底物B液的分注。

11)对反应液进行混匀，检测发光强度。

仪器相关功能和操作参考相应的仪器系统操作说明。

对比例1磁微粒直接包被抗原的检测试剂盒

一、磁微粒缓冲液的制备过程，以1L为例：

(1)量取900mL纯化水于容器中，称取三(羟甲基)氨基甲烷(Tris)Tris 6.05g和NaCl 8.20g加入容器中，充分搅拌至完全溶解。

(2)用浓盐酸调pH，控制在7.4±0.05；

(3)称取1-3％的牛血清白蛋白(BSA)，0.05％-0.2％的Proclin300，量取1％-10％的甘油，加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(4)2-8℃保存。

二、磁微粒混悬液的制备过程，以3mL为例：

(1)磁珠含有羧基(COOH)活性基团，每克(g)磁珠(干重)羧基含量约30μg，是均一粒子，粒子直径是1.5-3μm。

(2)从牛心肌中提取的心磷脂储存于乙醇中(4.7-5.3mg/mL)。该心磷脂抗原购于Sigma公司(产品编号：SRE0029)

(3)取30μL磁珠原液，添加无水乙醇300μL洗涤，震荡5min，磁分离，弃上清，重复洗涤5次；

(4)加入150μg的心磷脂抗原，室温下震荡反应120-180min；

(5)磁分离，弃上清，加入300μL磁微粒缓冲液，震荡洗涤5min，重复洗涤4次；

(5)用磁微粒缓冲液定容至3mL，完成磁微粒混悬液的制备；

三、酶结合物试剂的制备步骤如下，以1L为例：

(1)量取1000mL纯化水于容器中，称取Tris 6.05g和NaCl 8.20g加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(2)用浓盐酸调pH，控制在7.4±0.05；

(3)称取2％的牛血清白蛋白(BSA)，0.1％的Proclin300，加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(4)取HRP标记的兔/羊抗人IgG抗体500μL，搅拌30min；

(5)2-8℃保存。

三、样本稀释液试剂的配制：

(1)量取1000mL纯化水于容器中，称取Tris 6.05g和NaCl 8.20g加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(2)用浓盐酸调pH，控制在7.4±0.05；

(3)称取2％的牛血清白蛋白(BSA)，0.1％的Proclin300，加入容器中，充分搅拌至完全溶解；

(4)2-8℃保存。

四、校准品的制备：

用阴性血清稀释抗心磷脂抗体IgG阳性样本，配制浓度为0、10、30、80、120、150GPL的6个校准品；

试验例1试剂盒效果对比

分别采用对比例1和实施例1试剂盒共检测50份INOVA的ELISA试剂盒定值样本，试验结果如下：

表1对比例1和实施例1试剂盒对比数据

表2对比例1与INOVA试剂盒的检测符合率

表3实施例1与INOVA试剂盒的检测符合率

从上表可知，共检测50份INOVA的ELISA试剂盒定值样本，以18GPL为界值。抗原直接包被到磁微粒上，与INOVA的阳性符合率为88.46％；生物素化的抗原与INOVA的阳性符合率96.15％，降低漏检风险。可见，与直接将抗原包被到磁微粒上的化学发光法比对，生物素化的抗原可提高灵敏度，降低漏检风险。

对比例2抗原直接标记生物素的检测试剂盒

与实施例1试剂盒基本一致，只有生物素标记的抗原不同。实施例1试剂盒先用生物素标记β2-GP1，后加入cL进行连接。该比对抗原是直接用生物素标记cL(安图自身标记，方法与上述方法一致)。

对比例3抗原直接标记生物素的检测试剂盒

与实施例1试剂盒基本一致，只有生物素标记的抗原不同。实施例1试剂盒先用生物素标记β2-GP1，后加入cL进行连接。该比对抗原是让郑州伊美诺公司直接标记的cL(无货号)。

试验例2对比例2-3试剂盒效果

采用试验例1的检测方法检测对比例2(生物化心磷脂抗原①)、对比例3(生物化心磷脂抗原②)试剂盒效果，试验结果如下：

表4对比例2-3试剂盒效果

从心磷脂抗原自身结构分析，其无法直接标记生物素，因为生物素和磁微粒一样是通过-COOH基团进行连接，但心磷脂不存在能和-COOH连接的基团，且如果通过修饰的话，抗原自身的功能极可能受到影响。并且从实验中，得出结论，采用2种直接标记生物素的方法，其反应性与商业试剂盒均无相关性。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (9)

1.一种抗心磷脂抗体IgG磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，包括磁微粒混悬液、酶结合物试剂、样本稀释液试剂和校准品；

所述磁微粒混悬液由磁微粒-链霉亲和素复合物和磁微粒缓冲液组成；

所述酶结合物试剂由化学发光标记物标记的抗人IgG抗体和酶结合物稀释液组成；

样本稀释液试剂由生物素化心磷脂抗原溶液和样本稀释液组成；所述生物素化心磷脂抗原溶液为生物素化的β2-GP1抗原-心磷脂抗原溶液；

所述生物素化的β2-GP1抗原-心磷脂抗原溶液中，生物素、β2-GP1抗原、心磷脂抗原的摩尔比为（10~20）：1：（1~5）。

2.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，以3mL磁微粒混悬液计，各组分用量为：磁微粒25~35μL，链霉亲和素7.5~75μg，磁微粒缓冲液补足至3mL。

3.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述磁微粒缓冲液的配方为：Tris 5~7g、NaCl 8~9g、BSA 10~30g、防腐剂0.5~2g、甘油10~100mL、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

4.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，以1L酶结合物试剂计，各组分用量为：化学发光标记物标记的抗人IgG抗体100~1000μL，酶结合物稀释液补足至1L。

5.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述酶结合物稀释液的配方为：Tris 5~7g、NaCl 8~9g、BSA 10~30g、防腐剂0.5~2g、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

6.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述样本稀释液的配方为：Tris 5~7g、NaCl 8~9g、BSA 10~30g、防腐剂0.5~2g、水补足至1L，pH为7.4±0.05。

7.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，样本稀释液试剂中，以μL/L计，生物素化心磷脂抗原溶液与样本稀释液的体积比为（100~1000）：1。

8.根据权利要求1所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述校准品中抗心磷脂抗体IgG的浓度为0~200 GPL。

9.根据权利要求1至8中任一项所述的磁微粒化学发光免疫检测试剂盒，其特征在于，所述化学发光标记物为辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、吖啶酯、三联吡啶钌中的一种或几种。