CN111280446A - Epa提取物及其制备方法和应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及EPA的提取领域，具体涉及EPA提取物及其制备方法和应用。该方法包括：(1)在研磨介质的存在下，将藻类原料与提取液和/或分相溶剂接触并振荡，以进行破壁处理；(2)在分相溶剂的存在下，将步骤(1)的破壁产物进行分相提取，得到第一萃余相和第一萃取相，从而得到含有所述第一萃取相的富含脂肪酸的萃取相。本发明可达到提高藻类EPA的提取效率的目的，可以得到蛋白质和色素含量低、EPA含量高的提取物。

Description

EPA提取物及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及EPA的提取领域，具体涉及一种EPA提取物及其制备方法和应用。
背景技术
二十碳五烯酸(EPA)属于ω-3多不饱和脂肪酸，是一种人体自身无法合成必需从食物中摄取的必需脂肪酸。它与人体的生理功能密切相关，可维持大脑、视网膜等的正常功能和生长发育，具有抑制血小板凝聚、降血脂及防动脉硬化、健脑益智、保护视力、提高免疫力等功效，对抑制炎症和部分癌症、糖尿病的发生也有较好的功效。目前被广泛应用于各种保健品、奶粉、乳制品及各类烘焙产品中。
陆地植物和海洋生物是自然界中的EPA主要来源。微藻也是EPA的一种主要来源，如单细胞的微拟球藻(Nannochloropsis sp.)、卵囊藻(Oocystis sp.)、红胞藻(Rhodomonas sp.)、紫球藻(Porphyridium sp.)、巴夫藻(Pavlova sp.)、球等鞭金藻(Isochrysis galbana)、裂壶藻(Schizochytrium sp.)、褐指藻(Phaeodactylum sp.)，多细胞的黄丝藻(Tribonema sp.)和扁藻(Tetraselmis sp.)等。
然而，现有从微藻类原料中提取EPA的方法通常借助于酶的作用，提取效率低，EPA含量低，而且提取物中的蛋白质和色素残留也较多，后期需要复杂的纯化步骤才可用于下游产品。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术存在的上述问题，一方面提供一种从藻类原料中提取脂肪酸的方法，该方法包括：
(1)在研磨介质的存在下，将藻类原料与提取液和/或分相溶剂接触并振荡，以进行破壁处理；
(2)在分相溶剂的存在下，将步骤(1)的破壁产物进行分相提取，得到第一萃余相和第一萃取相，从而得到含有所述第一萃取相的富含脂肪酸的萃取相。
优选的，该方法包括：
(1)在研磨介质的存在下，将藻类原料与提取液接触并振荡，以进行破壁处理，得到裂解液；
(2)将所述裂解液与分相溶剂接触，以进行分相提取，得到第一萃余相和富含脂肪酸的第一萃取相，从而得到含有所述第一萃取相的富含脂肪酸的萃取相。
优选的，所述研磨珠为球状硅珠。
优选的，所述振荡在快速核酸提取仪中进行。
优选的，所述提取液为硫酸的甲醇溶液。
第二方面，本发明还提供了如上所述的方法制备得到的EPA提取物。
第三方面，本发明还提供了如上所述的EPA提取物在制备食品、药品、保健品、饲料、饵料或食品添加剂中的应用。
通过本发明的技术方案，可以取得如下的有益效果：
(1)本发明通过使藻类原料在提取液和/或分相溶剂与研磨介质碰撞形成的摩擦和剪切力，进行细胞的破碎，可以使得藻细胞细胞壁充分破碎，细胞内的油脂充分释放到细胞外，使分相溶剂与藻类活性物质充分接触，最终达到提高藻类EPA的提取效率的目的。
(2)使用本发明的方法提藻类EPA的过程，可以得到蛋白质和色素含量低、EPA含量高的提取物，可不经过纯化，只需要进行简单的浓缩步骤，即可获得符合商业化EPA产品标准的EPA浓缩物。
(3)本发明提供的方法不需要酶对藻类原料进行处理，一方面降低了成本，另一方面，降低了最终产物中的蛋白质残留。
(4)通过本发明的方法得到的产品还含有较高含量的十六碳烯酸(C16:1)，从而赋予产品抵抗炎症、控制体重、减轻糖尿病等功效。
附图说明
图1是实施例1提取物中EPA和TFA(总脂肪酸)的纯度和回收率结果图；
图2是按照实施例4的方法对黄丝藻进行破壁的破壁效果图；
图3是按照实施例7的方法对黄丝藻进行破壁的破壁效果图；
图4是按照实施例5的方法对黄丝藻进行破壁的破壁效果图。
具体实施方式
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
根据本发明的第一方面，提供一种从藻类原料中提取脂肪酸的方法，该方法包括：
(1)在研磨介质的存在下，将藻类原料与提取液和/或分相溶剂接触并振荡，以进行破壁处理；
(2)在分相溶剂的存在下，将步骤(1)的破壁产物进行分相提取，得到第一萃余相和第一萃取相，从而得到含有所述第一萃取相的富含脂肪酸的萃取相。
本发明在此需要说明的是，步骤(2)中，“在分相溶剂的存在下”是指只要在对破壁产物进行分相提取时，体系中存在分相溶剂即可，具体的，步骤(1)中，当将藻类原料仅与提取液接触以进行破壁时，在步骤(2)中需要向破壁产物中添加分相溶剂，当将藻类原料与分相溶剂或分相溶剂与提取液的混合液接触以进行破壁时，在步骤(2)中可以不向破壁产物中添加分相溶剂。
根据本发明，为了进一步提高终产品中EPA的提取率和纯度，降低蛋白质和色素的残留，本发明的方法优选包括：在研磨介质的存在下，先将藻类原料与提取液接触以进行破壁处理，得到裂解液；然后再将所述裂解液与分相溶剂接触，以进行分相提取，得到第一萃余相和第一萃取相。
根据本发明，为了充分提取藻类原料中的EPA，本发明的方法还包括将所述第一萃余相与分相溶剂接触，以对所述第一萃余相进行分相提取，得到第二萃余相和第二萃取相。还可以对第二萃余相、通过同样的方法获得的第三萃余相等等重复该操作步骤。在每次重复萃取后，将得到的萃取相并入所述第一萃取相中作为所述富含脂肪酸的萃取相以进行后续处理。
根据本发明，所述研磨介质可以为常规的用于细胞破碎的研磨珠，本发明优选可以对0.5-3μm的细胞进行破碎的研磨珠，例如，直径在0.5-1.5mm的研磨珠。所述研磨珠的实例可以包括但不限于球状硅珠、不规则石榴石、锆珠和球状陶瓷珠。然而，本发明的发明人在研究的过程中发现，通过选择球状硅珠作为研磨介质能够进一步提高终产品中EPA的提取率和浓度，降低蛋白质和色素的残留。
其中，相对于每克的藻类原料，所述研磨介质的用量可以为0.3-0.5g。
根据本发明，所述振荡的条件可以包括：振荡速度为4-6m/s，振荡频率为20-60s/次循环。根据本发明一种优选的实施方式，所述振荡破壁在快速核酸提取仪中进行，例如，通过在快速核酸提取仪中在如上的振荡速度下通过3-8次循环，优选6-8次循环振荡破壁循环完成。
其中，所述振荡可以在室温下进行。
根据本发明，为了进一步提高终产品中EPA的提取率和浓度，降低蛋白质和色素的残留，所述提取液为硫酸的醇溶液或水溶液。而本发明的发明人在研究的过程中发现，通过将提取液选择为硫酸的醇溶液，当破壁产物中的脂肪酸进入分相溶剂中时，破壁产物中的蛋白质和色素却难以进入分相溶剂，而留在醇中，从而进一步降低了终产品的蛋白质和色素。因此，优选的，所述提取液为硫酸的醇溶液。
其中，所述醇可以为C1-C4的醇，例如，甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇和叔丁醇。优选的，所述醇为甲醇。
优选的，在所述硫酸的醇溶液或水溶液中，所述硫酸的浓度为0.5-15重量％，优选为1-5重量％和8-10重量％，例如，1.2重量％、1.4重量％、1.6重量％、1.8重量％、2.0重量％、2.2重量％、2.4重量％、2.6重量％、2.8重量％、3.0重量％、3.2重量％、3.4重量％、3.6重量％、3.8重量％、4.0重量％、4.2重量％、4.4重量％、4.6重量％、4.8重量％、5.0重量％、8重量％、9重量％、10重量％。
根据本发明，所述提取液的用量可以在较宽的范围内选择，优选的，相对于每克的藻类原料，所述提取液的用量为20-40mL。
根据本发明，所述分相溶剂可以为本领域公知的各种具有较高的脂肪酸溶解度的有机溶剂，优选的，所述分相溶剂为正己烷或正己烷的醇溶液。
其中，所述醇可以为C1-C4的醇，例如，甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、异丁醇、仲丁醇和叔丁醇。优选的，所述醇为乙醇。在所述正己烷的醇溶液中，正己烷与醇的体积比可以为1.5-2.5:1。
根据本发明，所述分相溶剂的用量可以在较宽的范围内进行选择，优选的，相对于每克的藻类样品，所述分相溶剂的用量为4-20mL。当对萃余相进行萃取时，相对于每克的萃取相(藻渣)，所述分相溶剂的用量可以为30-40mL。
其中，所述分相提取可以在室温下进行。
根据本发明，所述藻类原料可以为任意的富含EPA的藻类原料，例如，所述藻类原料选自微拟球藻(Nannochloropsis sp.)、卵囊藻(Oocystis sp.)、红胞藻(Rhodomonassp.)、紫球藻(Porphyridium sp.)、巴夫藻(Pavlova sp.)、球等鞭金藻(Isochrysisgalbana)、裂壶藻(Schizochytrium sp.)、褐指藻(Phaeodactylum sp.)、黄丝藻(Tribonema sp.)和扁藻(Tetraselmis sp.)中的至少一种。
其中，黄丝藻中的EPA含量可高达干重的3.2％，加上黄丝藻自然生长于池塘、溪流等水体中，生长适应能力强，在淡水和海水中均能快速生长繁殖，以及其属于丝状藻，易于收获和大规模培养等特性，使其成为商业化生产EPA的很好原料。然而黄丝藻藻丝由几百到几千个细胞形成单列或具分支的状态，且具有坚硬的细胞壁，加上收获干燥后的生物质质地轻，采用现有方法提取EPA会造成脂肪酸提取时提取率低等问题。而本发明的方法成功的解决了由于黄丝藻质地轻、细胞壁厚、丝状体长等特性而造成EPA提取效率低的问题。因此，本发明的方法特别适合黄丝藻属类物质的提取。
根据本发明，该方法还包括将得到的富含脂肪酸的萃取相在惰性气体的氛围下进行干燥的步骤。其中，所述惰性气体可以为各种和脂肪酸不反应的气体，优选的，所述惰性气体为氮气。
其中，所述干燥的条件可以为本领域常规的各种条件，只要不会造成产物中活性成分的破坏即可。例如，可以通过吹干的方法进行干燥。
根据本发明的第二方面，提供了如上所述的方法制备得到的EPA提取物。
根据本发明，通过本发明如上所述的方法制备得到的EPA提取物不仅含有EPA，还含有十六碳烯酸和花生四烯酸等其他脂肪酸。其中，基于100重量份的所述EPA提取物，EPA的含量为8-20％重量份，十六碳烯酸的含量为18-35％重量份，花生四烯酸的含量为0-6.5重量％。
根据本发明，通过本发明如上所述的方法制备得到的EPA提取物具有较低的蛋白质含量和色素含量，其中，基于100重量份的所述EPA提取物，所述蛋白的含量不高于15重量份，所述色素的含量不高于1重量份。
根据本发明的第三方面，提供了如上所述的EPA提取物在制备食品、药品、保健品、饲料、饵料或食品添加剂中的应用。
其中，所述食品可以为奶粉、乳制品、各类烘焙产品等等。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。以下实施例中，
快速核酸提取仪购自美国MP公司，货号FastPrep24。
通过气相色谱-质谱联用仪(Agilent GC-MS，7890A-5977B)对终产品中的成分及含量进行分析。
实施例1
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
(1)将球状硅珠(直径约1mm)与黄丝藻藻粉加入提取管，加入硫酸-甲醇溶液震荡混匀，其中，相对于1g的黄丝藻藻粉，球状硅珠的用量为0.3g，硫酸-甲醇溶液的用量为30mL，在硫酸-甲醇溶液中，硫酸的浓度为3重量％。之后将混合物置于快速核酸提取仪，设置为振荡速度为5m/s，运行时间为20s/次循环，室温下运行8次破壁循环，得到裂解液。
(2)在裂解液中加入正己烷-乙醇(体积比2:1)，相对于1g的黄丝藻藻粉，正己烷-乙醇的加入量为4mL，室温下将混合物离心取上层提取液到新的提取管中。
(3)在藻渣中加入正己烷，相对于每克藻渣，正己烷的加入量为33mL，室温下将混合物震荡混匀后离心，取上层提取液合并至步骤(2)所得上层提取液中，重复提取两次，合并所有提取液，氮气保护下吹干后，进行分析，结果见表1，其中，EPA和TFA(总脂肪酸)的纯度和回收率如图1所示。
实施例2
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
(1)将球状硅珠(直径约0.5mm)与黄丝藻藻粉加入提取管，加入硫酸-甲醇溶液震荡混匀，其中，相对于1g的黄丝藻藻粉，球状硅珠的用量为0.4g，硫酸-甲醇溶液的用量为20mL，在硫酸-甲醇溶液中，硫酸的浓度为1重量％。之后将混合物置于快速核酸提取仪，设置为振荡速度为4m/s，运行时间为40s/次循环室温下运行8次破壁循环，得到裂解液。
(2)在裂解液中加入正己烷-乙醇(体积比1.5:1)，相对于1g的黄丝藻藻粉，正己烷-乙醇的加入量为10mL，室温下将混合物离心取上层提取液到新的提取管中。
(3)在藻渣中加入正己烷，相对于每克藻渣，正己烷的加入量为30mL，室温下将混合物震荡混匀后离心，取上层提取液合并至步骤(2)所得上层提取液中，重复提取两次，合并所有提取液，氮气保护下吹干后，进行分析，结果见表1。
实施例3
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
(1)将球状硅珠(直径约1.5mm)与黄丝藻藻粉加入提取管，加入硫酸-甲醇溶液震荡混匀，其中，相对于1g的黄丝藻藻粉，球状硅珠的用量为0.5g，硫酸-甲醇溶液的用量为40mL，在硫酸-甲醇溶液中，硫酸的浓度为5重量％。之后将混合物置于快速核酸提取仪，设置为振荡速度为6m/s，运行时间为60s/次循环，室温下运行8次破壁循环，得到裂解液。
(2)在裂解液中加入正己烷，相对于1g的黄丝藻藻粉，正己烷的加入量为20mL，室温下将混合物离心取上层提取液到新的提取管中。
(3)在藻渣中加入正己烷，相对于每克藻渣，正己烷的加入量为40mL，室温下将混合物震荡混匀后离心，取上层提取液合并至步骤(2)所得上层提取液中，重复提取两次，合并所有提取液，氮气保护下吹干后，进行分析，结果见表1。
实施例4
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，将球状硅珠替换为直径1.4mm的球状陶瓷珠，结果见表1，对黄丝藻进行破壁的破壁效果如图2所示。
实施例5
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，将硫酸-甲醇溶液替换为等量的正己烷-乙醇(体积比2:1)，结果见表1，对黄丝藻进行破壁的破壁效果如图4所示。
实施例6
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，将硫酸-甲醇溶液替换为等量的相同浓度的硫酸-水溶液，结果见表1。
实施例7
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，将破壁循环改为5次，结果见表1，对黄丝藻进行破壁的破壁效果如图3所示。
实施例8
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，硫酸-甲醇溶液中硫酸的浓度为7重量％，结果见表1。
实施例9
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，硫酸-甲醇溶液中硫酸的浓度为10重量％，结果见表1。
实施例10
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
按照实施例1的方法从藻类原料中提取脂肪酸，不同的是，将黄丝藻藻粉替换为硅藻粉，结果见表1。
实施例11
本实施例用于说明本发明提供的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
(1)将球状硅珠(直径约1mm)与黄丝藻藻粉加入提取管，加入硫酸-甲醇溶液和正己烷-乙醇(体积比2:1)震荡混匀，其中，相对于1g的黄丝藻藻粉，球状硅珠的用量为0.3g，硫酸-甲醇溶液的用量为30mL，在硫酸-甲醇溶液中，硫酸的浓度为3重量％，正己烷-乙醇的加入量为4mL。之后将混合物置于快速核酸提取仪，设置为振荡速度为5m/s，运行时间为20s/次循环，室温下运行8次破壁循环，得到裂解液。
(2)室温下将得到裂解液离心取上层提取液到新的提取管中。
(3)在藻渣中加入正己烷，相对于每克藻渣，正己烷的加入量为33mL，室温下将混合物震荡混匀后离心，取上层提取液合并至步骤(2)所得上层提取液中，重复提取两次，合并所有提取液，氮气保护下吹干后，进行分析，结果见表1。
对比例1
本对比例用于说明参比的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
本对比例不对黄丝藻藻粉进行破壁预处理，直接使用有机溶剂进行提取。具体操作过程为：
称取藻样，按料液比为1：30加入正己烷-乙醇(体积比2：1)，50℃下提取30min，重复提取两次，合并所有提取液，氮气保护下吹干后，进行分析，结果见表1。
对比例2
本对比例用于说明参比的从藻类原料中提取脂肪酸的方法
本对比例在黄丝藻藻粉中加入一定浓度的硫酸-甲醇溶液进行初步预处理，然后使用有机溶剂进行提取。具体操作过程为：
称取藻样，按料液比为1：30加入3重量％的硫酸-甲醇溶液，在90℃水浴中预处理30min。然后加入正己烷-乙醇(体积比2：1)，50℃下提取30min，重复提取两次，合并所有提取液，氮气保护下吹干后，进行分析，结果见表1。
表1
Figure BDA0001895486750000121
通过表1的结果可以看出，采用本发明的方法能够有效提高EPA的提取率，同时还提高了总体脂肪酸提取率，此外，十六碳烯酸的含量也较高。另外，本发明的最终得到的产品中还有效降低了产品中的蛋白质和色素等物质，产品可以不通过进一步纯化而直接用于下游产品。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。

Claims (12)

1.一种从藻类原料中提取EPA的方法，其特征在于，该方法包括：
(1)在研磨介质的存在下，将藻类原料与提取液和/或分相溶剂接触并振荡，以进行破壁处理；
(2)在分相溶剂的存在下，将步骤(1)的破壁产物进行分相提取，得到第一萃余相和第一萃取相，从而得到含有所述第一萃取相的富含脂肪酸的萃取相。
2.根据权利要求1所述的方法，其中，该方法包括：
(1)在研磨介质的存在下，将藻类原料与提取液接触并振荡，以进行破壁处理，得到裂解液；
(2)将所述裂解液与分相溶剂接触，以进行分相提取，得到第一萃余相和富含脂肪酸的第一萃取相，从而得到含有所述第一萃取相的富含脂肪酸的萃取相。
3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，该方法还包括：将所述第一萃余相与分相溶剂接触，以对所述第一萃余相进行分相提取，得到第二萃余相和第二萃取相；
其中，所述富含脂肪酸的萃取相还含有所述第二萃取相。
4.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述研磨介质为直径0.5-1.5mm的研磨珠；
优选的，所述研磨珠为球状硅珠、不规则石榴石、锆珠和球状陶瓷珠中的至少一种；
更优选的，所述研磨珠为球状硅珠。
5.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述振荡的条件包括：振荡速度为4-6m/s，振荡频率为20-60s/次循环；
优选的，所述振荡在快速核酸提取仪中进行。
6.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述提取液为硫酸的醇溶液或水溶液；
优选的，所述醇为C1-C4的醇；
优选的，在所述硫酸的醇溶液或水溶液中，所述硫酸的浓度为0.5-15重量％；
优选的，相对于每克的藻类原料，所述提取液的用量为20-40mL。
7.根据权利要求1-3中任意一项所述的方法，其中，所述分相溶剂为正己烷或正己烷的醇溶液；
优选的，所述醇为C1-C4的醇；
其中，相对于每克的藻类样品，所述分相溶剂的用量为4-20mL。
8.根据权利要求1-7中任意一项所述的方法，其中，所述藻类原料选自微拟球藻(Nannochloropsis sp.)、卵囊藻(Oocystis sp.)、红胞藻(Rhodomonas sp.)、紫球藻(Porphyridium sp.)、巴夫藻(Pavlova sp.)、球等鞭金藻(Isochrysis galbana)、裂壶藻(Schizochytrium sp.)、褐指藻(Phaeodactylum sp.)、黄丝藻(Tribonema sp.)和扁藻(Tetraselmis sp.)中的至少一种。
9.根据权利要求1-8中任意一项所述的方法，其中，该方法还包括：在惰性气体氛围下，将所述富含脂肪酸的萃取相进行干燥。
10.根据权利要求1-9中任意一项所述的方法制备得到的EPA提取物。
11.根据权利要求10所述的EPA提取物，其中，所述EPA提取物还含有十六碳烯酸和花生四烯酸；
优选的，基于100重量份的所述EPA提取物，EPA的含量为8-20％重量份，十六碳烯酸的含量为18-35％重量份，花生四烯酸的含量为0-6.5重量％。
12.权利要求10-11中任意一项所述的EPA提取物在制备食品、药品、保健品、饲料、饵料或食品添加剂中的应用。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111978383A (zh) * 2020-09-03 2020-11-24 福建师范大学 一种协同提取湿藻体藻红蛋白和油脂的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103589503A (zh) * 2012-08-13 2014-02-19 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 一种高效提取微生物油脂的方法
CN105001982A (zh) * 2015-07-08 2015-10-28 浙江大学 富含二十碳五烯酸拟微球藻油脂超声波辅助溶剂提取方法
CN107011225A (zh) * 2017-04-24 2017-08-04 国家开发投资公司 雨生红球藻破壁及虾青素提取方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103589503A (zh) * 2012-08-13 2014-02-19 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 一种高效提取微生物油脂的方法
CN105001982A (zh) * 2015-07-08 2015-10-28 浙江大学 富含二十碳五烯酸拟微球藻油脂超声波辅助溶剂提取方法
CN107011225A (zh) * 2017-04-24 2017-08-04 国家开发投资公司 雨生红球藻破壁及虾青素提取方法

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111978383A (zh) * 2020-09-03 2020-11-24 福建师范大学 一种协同提取湿藻体藻红蛋白和油脂的方法

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