CN111272991A - 抗原稳定剂 - Google Patents

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金君玉
赵年福
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Abstract

本发明公开了一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂，缓冲液的浓度为20‑200mmol/L，稳定剂的质量百分比为1%‑26%，表面活性剂的质量百分比0.01%‑0.15%，防腐剂的质量百分比为0.001%‑0.46%；缓冲液包括100mM的2‑(N‑吗啉)乙磺酸、100mM 4‑羟乙基哌嗪乙磺酸中的一种或两种；稳定剂包括无机盐、金属络合剂、抗氧化剂、海藻糖、蔗糖、甘油中的一种或几种；表面活性剂包括吐温‑20、吐温‑80、brij35中的一种或几种；防腐剂包括抗菌肽、甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、多聚赖氨酸中的一种或几种。本发明的抗原稳定剂能使抗原在20ng/ml以下的低浓度下长期稳定保存，抗原的活性基本稳定，又能使抗原具有较好的热稳定性和运输稳定性，使产品更便于运输和储藏，降低运输和储藏的成本。

Description

抗原稳定剂
技术领域
本发明涉及一种生化分析技术领域，尤其涉及一种抗原稳定剂。
背景技术
体外诊断试剂校准品、质控品是实现体外诊断试剂临床检验及监督检验结果准确一致的重要工具同时也是保证量值溯源，传递结果一致的主要工具，所以校准质控的稳定性在体外诊断试剂的检验中有非常重要的作用。
校准质控中包括的主要成分有很多是有生物活性的抗原蛋白，蛋白本身长时间保存容易降解，或者因保存环境的改变功能活性发生改变。公开号为CN106483282B的专利文件，公开了一种抗原稳定剂，具体公开了，包括如下的重量份的组分，Tris-HCl缓冲液100份，牛血清白蛋白1-5份，甘油1-10份，甘露醇1-10份，β-疏基乙醇0.1-0.5份，Proclin-3000.01-1份。该抗原稳定剂能使抗原在100ng/ml的低浓度下长期保存，但是对于20ng/ml的低浓度下的抗原，该抗原稳定剂的储存稳定性较差，而且该抗原稳定剂并不能使抗原具有热稳定性和运输稳定性，因而需要研制一种抗原稳定剂，使抗原能够长时间保存，而且经过运输和温度变化后，抗原的活性能够保持，使得校准品在检验工作中更加具有可靠性，准确性。
发明内容
本发明的目的在于针对背景技术中所述的现有的抗原稳定剂对低浓度的抗原储存稳定性差，且不具有热稳定性和运输稳定性等问题，提供一种能够解决前述问题的抗原稳定剂。
为实现以上目的，本发明通过以下技术方案予以实现：抗原稳定剂，其特点是：其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂，缓冲液的浓度为20-200mmol/L，稳定剂的质量百分比为1％-26％，表面活性剂的质量百分比0.01％-0.15％，防腐剂的质量百分比为0.001％-0.46％；缓冲液包括2-(N-吗啉)乙磺酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的一种或两种；稳定剂包括无机盐、金属络合剂、抗氧化剂、海藻糖、蔗糖、甘油中的一种或几种；表面活性剂包括吐温-20、吐温-80、brij35中的一种或几种；防腐剂包括抗菌肽、甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、多聚赖氨酸中的一种或几种。
进一步的方案是，所述的缓冲液包括20-100mmol/L的2-(N-吗啉)乙磺酸或50-100mmol/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸。
进一步的方案是，所述的稳定剂包括无机盐：1-5％、金属络合剂：1-5％、抗氧化剂：1-5％、海藻糖：0.2-1％、蔗糖：1-5％或甘油：1-5％。
进一步的方案是，所述的表面活性剂包括吐温-20：0.01-0.05％、吐温-80：0.01-0.05％或brij35：0.01-0.05％。
进一步的方案是，所述的防腐剂包括抗菌肽：0.1-0.3％、甲基氯异噻唑啉酮：0.05-0.075％、甲基异噻唑啉酮：0.05-0.075％或多聚赖氨酸：0.001％-0.01％。
进一步的方案是，所述的无机盐包括氯化镁、硫酸铵、氯化钾中的一种或多种。
进一步的方案是，所述的金属络合剂为EDTA、亚氨基二琥珀酸四钠、乙二胺四乙酸中的一种或多种组合。
进一步的方案是，所述的抗氧化剂为抗坏血酸或者茶多酚中的一种或两种。
上述的几种无机盐、金属络合剂和抗氧化剂仅仅为举例说明，在实践中还有很多无机盐、金属络合剂和抗氧化剂都可以用于稳定剂，不可能全部列举，因而仅公开了几种常用的无机盐、金属络合剂和抗氧化剂的例子。
本发明的抗原稳定剂具有以下优点，本发明的稳定剂用于抗原稀释后，既能使抗原在20ng/ml以下的低浓度下长期稳定保存，保存期可长达120天，保存期内，抗原的活性基本稳定，又能使抗原具有较好的热稳定性和运输稳定性，使产品更便于运输和储藏，降低运输和储藏的成本。
具体实施方式
下面通过实施例对本发明的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是2-(N-吗啉)乙磺酸水溶液，其浓度为20mmol/L；
稳定剂包括无机盐：2％、金属络合剂：2％、抗氧化剂：2％、海藻糖：1％和蔗糖：2.5％；
表面活性剂为吐温-20：0.03％；
防腐剂为甲基氯异噻唑啉酮：0.05％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000031
Figure BDA0002377210470000041
实施例2
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是4-羟乙基哌嗪乙磺酸水溶液，其浓度为50mmol/L；
稳定剂包括无机盐：1％、抗氧化剂：5％、海藻糖：0.8％和蔗糖：5％；
表面活性剂为吐温-80：0.01％；
防腐剂为抗菌肽：0.1％
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000042
Figure BDA0002377210470000051
实施例3
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是2-(N-吗啉)乙磺酸水溶液，其浓度为40mmol/L；
稳定剂包括金属络合剂：5％、抗氧化剂：1％、海藻糖：0.2％和蔗糖：1％；
表面活性剂为brij35：0.03％；
防腐剂为甲基异噻唑啉酮：0.05％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000052
Figure BDA0002377210470000061
实施例4
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是4-羟乙基哌嗪乙磺酸水溶液，其浓度为100mmol/L；
稳定剂包括抗氧化剂：3％、海藻糖：0.5％和蔗糖：3％和甘油：1％；
表面活性剂为吐温-20：0.01％；
防腐剂为多聚赖氨酸：0.001％。
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000062
实施例5
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是2-(N-吗啉)乙磺酸水溶液，其浓度为100mmol/L；
稳定剂包括无机盐：5％、金属络合剂：3％、海藻糖：0.6％和蔗糖：2％；
表面活性剂为吐温-80：0.05％；
防腐剂为甲基氯异噻唑啉酮：0.075％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000071
实施例6
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是4-羟乙基哌嗪乙磺酸水溶液，其浓度为70mmol/L；
稳定剂包括无机盐：3％、金属络合剂：1％、抗氧化剂：2％、海藻糖：0.6％和甘油5％；
表面活性剂为brij35：0.05％；
防腐剂为抗菌肽：0.3％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000081
实施例7
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是2-(N-吗啉)乙磺酸水溶液，其浓度为80mmol/L；
稳定剂包括无机盐：1％、金属络合剂：4％、抗氧化剂：3％、蔗糖：4％和甘油3％；
表面活性剂为吐温-20：0.05％；
防腐剂为多聚赖氨酸：0.001％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000091
实施例8
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是4-羟乙基哌嗪乙磺酸水溶液，其浓度为60mmol/L；
稳定剂包括无机盐：1％、金属络合剂：4％、抗氧化剂：3％、蔗糖：4％、海藻糖：0.8％和甘油2％；
表面活性剂为吐温-80：0.03％；
防腐剂为多聚赖氨酸：0.006％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用于抗原的测定值与现有的稳定剂的对比数据如下：
Figure BDA0002377210470000092
Figure BDA0002377210470000101
实施例9
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是4-羟乙基哌嗪乙磺酸水溶液，其浓度为60mmol/L；
稳定剂包括无机盐：1％、金属络合剂：4％、抗氧化剂：3％、蔗糖：4％、海藻糖：0.8％和甘油2％；
表面活性剂为吐温-80：0.03％；
防腐剂为多聚赖氨酸：0.006％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用验证该配方在不同温度下的稳定测值：
Figure BDA0002377210470000102
Figure BDA0002377210470000111
实施例10
一种抗原稳定剂，其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂；
缓冲液是4-羟乙基哌嗪乙磺酸水溶液，其浓度为60mmol/L；
稳定剂包括无机盐：1％、金属络合剂：4％、抗氧化剂：3％、蔗糖：4％、海藻糖：0.8％和甘油2％；
表面活性剂为吐温-80：0.03％；
防腐剂为多聚赖氨酸：0.006％；
上述各组分的百分比均为质量百分比。
本实施例的抗原稳定剂用验证该配方在运输前后稳定测值：
Figure BDA0002377210470000112
Figure BDA0002377210470000121
本发明的实施例1-10的方案中，抗原浓度在15ng/ml以下，保存120天后，抗原测定值基本稳定，另外在热稳定实验和运输实验中证实了配方的稳定性可见实施例1-10的抗原稳定剂都能对抗原起到很好的储藏稳定的作用。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。

Claims (8)

1.一种抗原稳定剂，其特征在于：其包括缓冲液、稳定剂、表面活性剂和防腐剂，缓冲液的浓度为20-200mmol/L，稳定剂的质量百分比为1%-26%，表面活性剂的质量百分比0.01%-0.15%，防腐剂的质量百分比为0.001%-0.46%；缓冲液包括2-(N-吗啉)乙磺酸、4-羟乙基哌嗪乙磺酸中的一种或两种；稳定剂包括无机盐、金属络合剂、抗氧化剂、海藻糖、蔗糖、甘油中的一种或几种；表面活性剂包括吐温-20、吐温-80、brij35中的一种或几种；防腐剂包括抗菌肽、甲基氯异噻唑啉酮、甲基异噻唑啉酮、多聚赖氨酸中的一种或几种。
2.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的缓冲液包括20-100mmol/L的2-(N-吗啉)乙磺酸或50-100mmol/L的4-羟乙基哌嗪乙磺酸。
3.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的稳定剂包括无机盐：1-5%、金属络合剂：1-5%、抗氧化剂：1-5%、海藻糖：0.2-1%、蔗糖：1-5%或甘油：1-5%。
4.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的表面活性剂包括吐温-20：0.01-0.05%、吐温-80：0.01-0.05%或brij35：0.01-0.05%。
5.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的防腐剂包括抗菌肽：0.1-0.3%、甲基氯异噻唑啉酮：0.05-0.075%、甲基异噻唑啉酮：0.05-0.075%或多聚赖氨酸：0.001%-0.01%。
6.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的无机盐包括氯化镁、硫酸铵、氯化钾中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的金属络合剂为EDTA、亚氨基二琥珀酸四钠、乙二胺四乙酸中的一种或多种组合。
8.根据权利要求1所述的抗原稳定剂，其特征在于：所述的抗氧化剂为抗坏血酸或者茶多酚中的一种或两种。
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