CN111265533A - 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法 - Google Patents

一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111265533A
CN111265533A CN201911167233.XA CN201911167233A CN111265533A CN 111265533 A CN111265533 A CN 111265533A CN 201911167233 A CN201911167233 A CN 201911167233A CN 111265533 A CN111265533 A CN 111265533A
Authority
CN
China
Prior art keywords
zif
solution
dmpc
alip
aqueous solution
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911167233.XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN111265533B (zh
Inventor
崔大祥
徐艳
张兆坤
陈玮嘉
朱君
金彩虹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shanghai National Engineering Research Center for Nanotechnology Co Ltd
Original Assignee
Shanghai National Engineering Research Center for Nanotechnology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shanghai National Engineering Research Center for Nanotechnology Co Ltd filed Critical Shanghai National Engineering Research Center for Nanotechnology Co Ltd
Priority to CN201911167233.XA priority Critical patent/CN111265533B/zh
Priority to PCT/CN2019/127924 priority patent/WO2021103232A1/zh
Publication of CN111265533A publication Critical patent/CN111265533A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111265533B publication Critical patent/CN111265533B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K41/00—Medicinal preparations obtained by treating materials with wave energy or particle radiation ; Therapies using these preparations
    • A61K41/0057—Photodynamic therapy with a photosensitizer, i.e. agent able to produce reactive oxygen species upon exposure to light or radiation, e.g. UV or visible light; photocleavage of nucleic acids with an agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5052—Proteins, e.g. albumin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及一种药物载体的制备方法和应用，包括ZIF‑M纳米颗粒制备、ZIF‑M@PVP/DMPC纳米颗粒制备和ZIF‑M@LIP纳米颗粒制备。本发明纳米颗粒的主要材料为ZIF‑8和脂质体，其本身毒性低、生物相容性好，同时降解能力较好，克服了化学合成法中有毒残留的问题。制备的纳米颗粒具有高结晶度、颗粒均一、物理化学性质稳定的优点。本发明中反应原料廉价易得，制备方法工艺简单，可操作性强，能进一步满足生产和应用需求。本发明纳米颗粒在脂质外壳嵌入IR780时，可以实现药物可控释放，即pH和近红外NIR控制释放药物。

Description

一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法
技术领域
本发明涉及一种药物载体的制备方法和应用，具体涉及一种基于脂质体和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，发明属于纳米药物载体领域。
背景技术
纳米技术在人们生活、医疗和科技发展中的应用受到日益广泛的关注，特别的，新型纳米给药系统因其载药量高、靶向性好和毒副作用小，极具应用潜力。新型纳米给药系统是指借助纳米级载体、配体或抗体将药物选择性地浓集于靶组织、靶器官或细胞内部结构的给药系统；同时借助药物载体的承载作用，辅助以外界刺激实现将药物缓慢释放至患处。然而，具有生物相容性好、靶向性好、尺寸合理、可体内降解等优点的纳米载体少之又少，因此设计并研究新型响应型纳米载体是实现纳米给药系统高效、低毒治疗疾病的基础。
目前响应型的药物载体主要有：超声控释型（中国专利：一种基于普鲁兰多糖的用于超声控制释放的纳米药物载体、药物载体系统及制备方法，公开号：CN10849845A。）；光控释型（中国专利：一种近红外光触发释放化疗药物的纳米载体及其制备方法，公开号：CN106512000A。）；内环境影响型：1）pH控释型（中国专利：pH控释靶向药物纳米运输载体及其制备方法和应用，公开号：CN107952081A。）；2）氧化还原控释型（中国专利：一种刺激响应型聚吡咯纳米管靶向药物载体及其制备方法，公开号：CN105412936A。）。然而针对复杂的生理环境，单一响应型药物载体难以实现最佳的药物递送和治疗效果，因此急需制备多刺激响应型、良好生物相容性的新型药物载体。
综合考虑材料本身的生物毒性、降解能力以及载药性能，沸石咪唑骨架ZIF-8纳米颗粒可以作为合适的载药核心。在药物控释性能方面，ZIF-8在肿瘤微酸环境下具有较好的缓释药物的特点，并且具有尺寸小、比表面积大、生物相容性好、可体内降解等多项优点，常被用于靶向递送和缓释药物。然而药物载体载带化疗药物进入机体后，其释放可能会造成正常细胞和组织的损伤，因此需要采取一定方法将其封闭。考虑易被修饰材料的低毒性和外壳保护性，以天然大豆磷脂分子HSPC和磷脂酰胆碱DMPC两者材料为主的脂质膜可作为纳米药物传递系统外壳。脂质膜具有很多的优点：生物相容性好、生物可降解、无免疫原性、毒性低等。因此，使用ZIF-8作为核心，同时结合脂质体膜作为壳体制备药物载体，不仅可以利用脂质膜可以进行靶向修饰，而且可以解决多孔结构药物泄露问题，具有较高的研究意义和应用价值。
发明内容
针对现有技术存在的不足，本发明目的在于提供一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法。
本发明目的通过下述方案实现：一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）ZIF-M纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8合成材料，将0.5-0.9 g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0-0.5 mL化疗药物溶液（1.5-2 mg），于在37℃条件下搅拌均匀；
2）在上述溶液中加入0.1 mL六水合硝酸锌（10-15 mg）溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应15-240 min；3）反应结束后，以3500-6500 rpm/min离心30min分离去除上清液，洗涤三次得到ZIF-M纳米颗粒（其中M代表药物，可被所采用药物英文首字母代替）；
（2）中ZIF-M@PVP/DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-M内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-M颗粒分散溶解于4 mL水溶液，随后依次加入0.5 mL PVP（20-30mg）溶液，0.5 mL DMPC（25-40 mg）溶液，上述混合液在37℃与低压条件下，以300-800 rpm/min的搅拌速度下反应1-2 h；
3）反应结束后，以3500-6500 rpm/min离心 20 min分离去除上清液，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-M@PVP/DMPC；
（3）ZIF-M@LIP纳米颗粒制备：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-M@LIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-M@PVP/DMPC颗粒溶于圆底烧瓶，依次加入300 μL HSPC溶液（25-30 mg/mL），100 μL再加入胆固醇溶液（18-27 mg/mL），0-150 µL IR780 (2 mg/mL) ，0-50 µL 靶向多肽-DSPE (18-20 mg/mL) 和550 µL 氯仿溶液，上诉混合液在低压旋转蒸发条件下反应1-3 h；
2）反应结束后，先加入水溶液在温和超声条件下将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过核孔膜为400nm、200nm的挤压处理5-10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-M@LIP。
所述药物为抗肿瘤药物或者活性蛋白药物、生长因子、RNA、肽类的一种或者多种，其中优选的药物为盐酸阿霉素(DOX)。
所述的靶向多肽-DSPE合成方法采用2013年10月8日发表在InternationalJournal of Nanomedicine第8卷第3855-3866页题为A novel application of maleimidefor advanced drug delivery: in vitro and in vivo evaluation of maleimide-modified pH-sensitive liposomes中第3857页中Liposome preparation所记载的方法。
优选的靶向多肽为Abarelix，优选的靶向癌细胞为前列腺癌相关细胞。
本发明提供一种脂质体-金属有机框架复合的多功能核壳结构颗粒载药体系，包括颗粒及其负载物。所述的纳米颗粒以沸石咪唑骨架ZIF-8为核心，可加载多种药物小分子；以脂质膜为外壳包被材料，将多孔结构ZIF-8核心进行密封保护，避免化学药物的随机释放；同时外壳脂质膜可修饰性强，可将靶向多肽及光敏剂嵌入壳体，实现药物载体在化疗、光热和光动力疗法的协同作用。
一种多功能核壳结构ZIF-8 @ lipid film(ZIF-8 @ LIP)纳米粒子载药体系，实现对不同药物小分子的递送，同时通过多肽修饰提高载体对肿瘤部位靶向性，达到提高药物利用度和可控释药的目的。
本发明的有益效果为：本发明制备了负载抗肿瘤相关药物的核壳结构纳米复合粒子ZIF-M@LIP。该药物具有很好的生物相容性和稳定性，其中脂质体壳层可修饰靶向材料和光敏剂，实现药物载体在特定靶细胞或靶组装的聚集和热疗； ZIF-M内核颗粒的孔隙中可以载带药物分子，并作为刺激响应型药物递送平台，在特定光照和肿瘤微酸性环境下实现药物快速释放。该载药平台的制备简单、成本较低、制备的颗粒均一稳定，极具应用前景。
本发明的实例效果为：本发明以负载抗癌药物DOX的ZIF-8 纳米颗粒（ZIF-D，ZIF-DOX，负载DOX的ZIF-8纳米颗粒）作为内核，以嵌入靶向多肽Abarelix和光敏剂IR780的脂质体作为外壳，制备核壳药物载体（ZIF-D@ALIP， ZIF-DOX@Abarelix-lipid film，外壳嵌入了靶向多肽Abarelix和光敏剂IR780的药物载体颗粒），并以前列腺癌细胞及荷瘤小鼠测试该载体的靶向性和药效。实例效果显示，该载药体系具有很好的靶向性，可以响应pH和NIR刺激进行药物可控释放，是集成像、化疗和热疗等一体化的纳米药物载体。
本发明的优点在于：
（1）本发明纳米颗粒的主要材料为ZIF-8和脂质体，其本身毒性低、生物相容性好，同时降解能力较好，克服了化学合成法中有毒残留的问题。
（2）本发明制备的纳米颗粒具有高结晶度、颗粒均一、物理化学性质稳定的优点。
（3）本发明中反应原料廉价易得，制备方法工艺简单，可操作性强，能进一步满足生产和应用需求。
（4）本发明纳米颗粒在脂质外壳嵌入IR780时，可以实现药物可控释放，即pH和近红外NIR控制释放药物。
（5）本发明纳米脂质外壳可修饰性强，在嵌入靶向多肽条件下，可以实现精准靶向目标肿瘤部位，本发明以前列腺癌为实例模型进行测试。
附图说明
附图1为实施例1所制备ZIF-D @ ALIP的透射电镜成像图；
附图2为实施例1所制备ZIF-D @ ALIP的P元素映射图像；
附图3为实施例1所制备的ZIF-8和ZIF-D @ ALIP的尺寸分布图；
附图4为实施例1所制备的ZIF-8、ZIF-D、ZIF-D @ LIP和ZIF-D @ ALIP的zeta电位图；
附图5为实施例1所制备的ZIF-D和ZIF-D @ ALIP的紫外光谱；
附图6为实施例1所制备的ZIF-8、IR780、Abarelix-DSPE和ZIF-D @ ALIP红外光谱；
附图7为实施例1所制备的ZIF-D @ ALIP响应激光照射后温度变化图谱；
附图8为实施例1所制备的ZIF-D @ ALIP响应激光照射后热成像图；
附图9为实施例1所制备的ZIF-D @ ALIP响应pH和NIR双重刺激的释药曲线；
附图10为实施例1所制备的DOX、IR780、ZIF-8、ZIF-D、ZIF-D @ LIP和ZIF-D @ ALIP的细胞毒性图；
附图11为实施例1所制备的不同浓度ZIF-D @ ALIP的细胞毒性图；
附图12为实施例1所制备的ZIF-D @ ALIP（有靶向多肽修饰）纳米颗粒被前列腺正常细胞RWPE-2细胞吞噬的共聚焦成像图；
附图13为实施例1所制备的ZIF-D @ ALIP（有靶向多肽修饰）纳米颗粒被前列腺癌细胞PC-3细胞吞噬的共聚焦成像图；
附图14为实施例1所制备的ZIF-D@ LIP（无靶向多肽修饰）被前列腺癌细胞PC-3细胞吞噬的共聚焦成像图；
附图15为实施例1所制备的ZIF-D @ ALIP（有靶向多肽修饰）纳米颗粒处理荷瘤小鼠后的肿瘤组织体积成像图。
具体实施方式
以下通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步描述。以下的实施例是对本发明的进一步说明，而不限制本发明的范围。
本发明所用的试剂除非特别指明，以下实施例所有的试验方法均为本领域中所用的常规方法。
除非特别说明，以下实施例中所使用的试剂均为分析纯级试剂，且可以从正规渠道购买获得。
实施例1
一种核壳式药物载体，其中ZIF-8载带盐酸阿霉素DOX/抗肿瘤活性药物为核心载药模型，表面修饰嵌入Abarelix多肽和IR780脂质体外壳，本发明采用前列腺癌细胞测试ZIF-8靶向性和肿瘤细胞杀伤效果，按如下步骤制备：
（1）ZIF-D纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.786g的2-MIM溶解于0.9mL水中得到水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.6 mg DOX的水溶液，于在37℃条件下混合并搅拌2分钟搅拌均匀；
2）在上述溶液中加入0.1 mL含12.6 mg的Zn（NO3）2·6H2O水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应15分钟；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，洗涤三次得到载药DOX的沸石咪唑骨架材料ZIF-D纳米颗粒；
（2）ZIF-D @ Abarelix-lipid film（ZIF-D@ ALIP）核壳纳米结构的合成：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-D内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒分散溶解于4 mL水溶液，随后在连续搅拌下快速依次加入0.5 mL含26mg PVP的溶液，0.5 mL含32mg DMPC的溶液，在搅拌下反应1h；
3）反应结束后，离心去除上清液，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-D/DMPC；
（3）ZIF-D@ALIP纳米颗粒制备：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-D@ALIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-D@ DMPC颗粒分散液置于圆底烧瓶中，同时加入将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和50 µL 浓度15 mg/mL靶向多肽-DSPE溶解于550 µL 氯仿的混合液，上述二种混合液在低压旋转蒸发条件下反应1 h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声，将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过规格为400nm、200nm的多孔膜挤压处理10次，并经过6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。
本实施例制备的ZIF-D @ ALIP纳米颗粒，通过电子显微镜和红外进行基本表征，如附图1所示，可以看出ZIF-D @ ALIP呈现近似圆球的形状，有比较明显的核壳结构，粒径大约在170 nm左右。而ZIF-8内核呈现非圆球状，粒径大约在80 nm左右。附图2中的元素分析显示，ZIF-D @ ALIP中有P元素，且与Zn元素的比例在预期范围。附图3为ZIF-D@ALIP的动态光散射图，测得其水合半径为180 nm左右，与附图1结果接近。附图4测定ZIF-8、ZIF-D、ZIF-D@LIP和ZIF-D@ALIP 的Zeta电位分别为+13.6 mV, +14.9 mV, -15.1 mV and -15.7mV。附图5中ZIF-D @ ALIP的UV光谱在480和780 nm处显示了DOX和IR780的特征吸收峰。附图6的红外数据显示ZIF-8粒子在2330 cm-1处出现明显的峰，这是由于C=O与Zn2+离子形成配位键所致。与纯IR 780相比，脂质膜包裹引起了嵌入在ZIF-D @ ALIP中的IR 780的特征峰2950 cm-1出现拉伸。特别是ZIF-D @ ALIP纳米粒子在1685cm-1处出现了一个Abarelix多肽峰。
测试ZIF-D @ ALIP纳米颗粒的光热效应：
将不同浓度的ZIF-D @ ALIP核壳纳米结构分散在PBS溶液中，浓度范围为0 mg/mL、0.05 mg/mL、0.1 mg/mL至0.2 mg/mL。将不同的样品用808 nm NIR激光（1 W cm-2）照射8分钟，并通过温度计每20 s记录这些溶液的温度。如附图7和附图8所示，在近红外辐射下，ZIF-D @ ALIP(0.2 mg/mL)溶液的温度在6 min内从24.8 ℃迅速升高到60.8 ℃。相比较，在相同条件下PBS溶液的温度改变仅为6.9 ℃，表明ZIF-D @ ALIP的脂质膜上成功负载IR780，具有显著的光热效应。
测试ZIF-D @ ALIP颗粒的pH的响应性：
将相同量的纳米粒子添加到每个样品管中，并将溶液的pH分别调节至对应的pH 7.4、6.5或5.5。我们将其分为六组：NIR照射+pH 5.5、无NIR照射+pH 5.5、NIR照射+pH 6.5、无NIR照射、pH 6.5组、NIR照射+pH 7.4和无NIR照射+pH 7.4。每组包含三个平行样品，NIR激光的功率调整为1.0W。将试管在黑暗条件下于室温振荡器下孵育。在相同的时间间隔后，通过离心收集溶液，并通过UV光谱法对释放的DOX的量进行定量。如附图9所示，ZIF-D @ ALIP明显显示出pH和NIR刺激反应性阿霉素的释放行为。具体来说，在酸性微环境（pH 6.8和pH5.5）显然比pH 7.4组药物释放快，并且在4小时内释放了超过50％的DOX。相比之下，在pH7.4溶液中只有25％的药物。显然，pH酸性条件引发的Zn-O和Zn-N配位键断裂是造成不同释放效果的原因。
测试ZIF-D @ ALIP纳米颗粒的生物相容性：
使用CCK-8分析评估了其细胞活力。将细胞以2000个细胞/孔的密度接种在96孔微孔板中。孵育24小时后，将各种浓度（50、100、150、200、250和300 µg/mL）的ZIF-D @ ALIP NPs加入每个孔中。 同时，以相同的方式对PBS，free+DOX，ZIF-8，ZIF-D，ZIF-D @ LIP和ZIF-D @ALIP。温育8小时后，在有或没有808 nm的NIR照射下处理细胞。然后，将CCK-8溶液加入细胞中，并进一步孵育0.5小时。通过IMark / xMark酶标准仪器在450nm处测量每个孔的吸光度。
如附图10和11所示，PBS (PBS+NIR)，free DOX (free DOX+NIR)，ZIF-8 (ZIF-8+NIR)，ZIF-D(ZIF-D+NIR)，ZIF-D@LIP (ZIF-D@LIP+NIR) and ZIF-D@ALIP (ZIF-D@ALIP+NIR) 的细胞活性分别为95.4% (93.9%)，67.5% (63.8%)，87.0% (67.1%)， 94.9%(91.7%)，60.4% (59.6%)，74.1% (50.7%) 及59.6% (20.8%)。其中ZIF-D @ ALIP+NIR（300µg mL-1）对前列腺癌PC3细胞的优异的肿瘤细胞杀伤率为79.2％，表明光热疗法和化学疗法的协同作用的治疗效果。
测试前列腺相关细胞对ZIF-D @ ALIP颗粒的吞噬效果：
为了研究靶向吞噬作用的效果，将前列腺癌细胞PC-3细胞和前列腺正常细胞RWPE-2细胞接种在35毫米培养皿中生长12小时。然后，将细胞与含有120 μg/mL DOX标记的ZIF-D @LIP NP（无靶向修饰）和120 μg/ mL DOX标记的ZIF-D @ ALIP NP（靶向修饰）的培养液在37℃孵育8小时。接下来，将细胞用冷PBS溶液洗涤3次，并用Hoechst 33258染色10分钟。通过在共聚焦显微镜成像来分析细胞吞噬作用。附图12显示，靶向修饰的ZIF-D @ ALIP并不能被前列腺正常细胞RWPE-2细胞吞噬。同时附图13显示，在PC3细胞核周围观察到明显的药物载体的荧光，表明ZIF-D @ ALIP NPs可以被癌细胞有效地吞噬。与之相较，附图14中未修饰的ZIF-D @ LIP纳米颗粒表现出较差的细胞摄取能力。这些结果表明，ZIF-D @ ALIP可以用作高性能纳米载体，具有高效的靶向性能，并且可改善细胞摄取效果，具有治疗前列腺癌的潜力。
本实施例验证了ZIF-D @ ALIP的杀伤肿瘤组织的效果：将1 × 106 PC3细胞注入5周龄雄性小鼠后腿右后侧皮下，制备荷瘤小鼠。待肿瘤体积长至约100 mm2时，荷瘤小鼠随机分为四组：PBS、ZIF-D、ZIF-D@LIP和ZIF-D@ALIP,每组3只。小鼠尾静脉注射PBS（150 μL）、ZIF-D（DOX浓度为1mg/mL150 μL）、ZIF-D@LIP（等效DOX浓度为ZIF-D，150 μL）和ZIF-D@ALIP（等效DOX浓度为ZIF-D，150 μL）注射后第1天和第9天分别进行激光照射。每天测量肿瘤大小和小鼠体重。接种后18天处死所有小鼠，然后切除肿瘤并称重。附图15显示，经ZIF-D@ALIP处理的肿瘤组织体积最小，肿瘤抑制率可达90%。
以上是本发明的优选实施方式，本发明的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本发明思路的技术方案均属于本发明的保护范围。应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应该为本发明的保护范围。
实施例2
一种以盐酸阿霉素DOX/抗肿瘤活性药物为核心载药模型，同时以Abarelix多肽和IR780嵌入脂质壳体为模型的ZIF-D@ALIP载药体系，来测试ZIF-8载药性和脂质壳体的易修饰性，按下述步骤制备：
一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，按以下步骤：
（1）ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.786g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.8mgDOX的水溶液，于在37℃条件下混合并搅拌2分钟；然后，
2）在上述溶液中缓慢加入0.1 mL含12.6 mg六水合硝酸锌的水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应30min；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，洗涤三次得到载药M的沸石咪唑骨架材料ZIF-D纳米颗粒；
（2）ZIF-D@PVP/DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-M内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒分散溶解于4 mL水溶液，随后在连续搅拌下快速依次加入0.5 mL含26mg PVP的溶液和0.5 mL含32 mg DMPC的溶液，上述混合液搅拌反应1h；
3）反应结束后，离心分离去除上清液，收集产物ZIF-D/DMPC，洗涤三次，产物分散在1mL去离子水中，得到最终产物分散液；
（3）ZIF-D@ALIP纳米颗粒制备：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-M@LIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-M@PVP/DMPC颗粒分散液置于圆底烧瓶，加入将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20 mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和50 µL 浓度15 mg/mL靶向多肽-DSPE溶解于550 µL 氯仿的混合液，上述二种混合液在低压旋转蒸发条件下反应1 h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声处理溶解，然后，溶解物分别经过400nm、200nm的核孔膜挤压处理10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。
实施例3
一种以盐酸阿霉素DOX/抗肿瘤活性药物为核心载药模型，同时以Abarelix多肽和IR780嵌入脂质壳体为模型的ZIF-D@ALIP载药体系，来测试ZIF-8载药性和脂质壳体的易修饰性，按以下步骤制备：
（1）ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）的合成：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.8 g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.6mgDOX水溶液，于在37℃条件下混合并搅拌2分钟；然后，
2）在上述溶液中缓慢加入0.1 mL含12.6 mg六水合硝酸锌的水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应60 min；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，回收ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）纳米颗粒，洗涤三次；
（2）ZIF-M@PVP/DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-D内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒重新分散溶解于4 mL水溶液中，随后连续搅拌下快速依次加入0.5 mL含26 mg PVP的溶液和0.5 mL含32mg DMPC的溶液，上述混合液在搅拌下反应1h；
3）反应结束后，离心收集产物ZIF-D/DMPC，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-D@ DMPC分散液；
（3）ZIF-D @ Abarelix-lipid film（ZIF-D@ ALIP）核壳纳米结构的合成：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-D@ALIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-D@PVP/DMPC分散液置于圆底烧瓶，同时将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和 50 µL 浓度15 mg/mL靶向多肽-DSPE脂质膜的微乳液溶解于550 µL 氯仿溶液中的混合液，上述分散液和混合液在低压旋转蒸发条件下反应1h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声，将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过400nm、200nm的核孔膜挤压处理10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。
实施例4
一种以盐酸阿霉素DOX/抗肿瘤活性药物为核心载药模型，同时以Abarelix多肽和IR780嵌入脂质壳体为模型的ZIF-D@ALIP载药体系，来测试ZIF-8载药性和脂质壳体的易修饰性，按以下步骤制备：
（1）ZIF-M纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.8 g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.8 mgDOX水溶液，混合并搅拌2分钟；然后，
2）在上述溶液中缓慢加入0.1 mL含12.6 mg六水合硝酸锌的水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应120 min；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，回收ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）纳米颗粒，洗涤三次；
（2）ZIF-D@DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-M内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒重新分散溶解于4 mL水中，然后在连续搅拌下快速加入0.5 mL含26 mg PVP的溶液，0.5 mL含32 mg DMPC的溶液，反应1h；
3）反应结束后，离心去除上清液，收集产物ZIF-D/DMPC，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-D@ DMPC分散液；
（3）ZIF-D @ Abarelix-lipid film（ZIF-D@ ALIP）核壳纳米结构的合成：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-D@ALIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-D@PVP/DMPC分散液置于圆底烧瓶，同时将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和 50 µL 浓度15 mg/mLAbarelix-DSPE脂质膜的微乳液溶解于550 µL 氯仿溶液中的混合液，上述分散液和混合液在低压旋转蒸发条件下反应1h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声，将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过400nm、200nm的核孔膜挤压处理10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。

Claims (7)

1.一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）ZIF-M纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.5-0.9 g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0-0.5 mL含1.5-2 mg化疗药物（M）的溶液，于在37℃条件下搅拌均匀，其中，所述药物为抗肿瘤药物或者活性蛋白药物、生长因子、RNA、靶向多肽的一种或者多种；
2）在上述溶液中加入0.1 mL含10-15 mg六水合硝酸锌的溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应15-240 min；
3）反应结束后，以3500-6500 rpm/min离心30min分离去除上清液，洗涤三次得到载药M的沸石咪唑骨架材料ZIF-M纳米颗粒；
（2）ZIF-M@PVP/DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-M内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-M颗粒分散溶解于4 mL水溶液，随后依次加入0.5 mL含20-30 mgPVP的溶液，0.5 mL含25-40 mg DMPC的溶液，上述混合液在37℃与低压条件下，以300-800rpm/min的搅拌速度下反应1-2 h；
3）反应结束后，离心分离去除上清液，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-M@PVP/DMPC的分散液；
（3）ZIF-M@LIP纳米颗粒制备：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-M@LIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-M@PVP/DMPC颗粒的分散液置于圆底烧瓶，同时，加入将300 μL浓度25-30 mg/mLHSPC的溶液、100 μL浓度18-27 mg/mL胆固醇溶液、0-150 µL浓度2 mg/mL IR780和0-50 µL浓度18-20 mg/mL靶向多肽-DSPE溶解于550 µL 氯仿得混合溶液，上述分散液和混合液在低压旋转蒸发条件下反应1-3 h；
2）反应结束后，先加入水溶液在温和超声条件下将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过核孔膜为400nm、200nm的挤压处理5-10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-M@LIP。
2.根据权利要求1所述基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述抗肿瘤药物为盐酸阿霉素(DOX)。
3.根据权利要求1所述基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于：所述的靶向多肽为Abarelix，靶向癌细胞为前列腺癌相关细胞。
4.根据权利要求1至3任一项所述基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于：一种核壳式药物载体ZIF-D@ALIP，其中ZIF-8载带盐酸阿霉素（DOX）/抗肿瘤活性药物为核心载药模型，表面修饰嵌入Abarelix多肽和IR780脂质体外壳，按如下步骤制备：
（1）ZIF-D纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.786g的2-MIM溶解于0.9mL水中得到水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.6 mg DOX的水溶液，于在37℃条件下混合并搅拌2分钟搅拌均匀；
2）在上述溶液中加入0.1 mL含12.6 mg的Zn（NO3）2·6H2O水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应15分钟；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，洗涤三次得到载药DOX的沸石咪唑骨架材料ZIF-D纳米颗粒；
（2）ZIF-D @ Abarelix-lipid film（ZIF-D@ ALIP）核壳纳米结构的合成：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-D内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒分散溶解于4 mL水溶液，随后在连续搅拌下快速依次加入0.5 mL含26mg PVP的溶液和0.5 mL含32mg DMPC的溶液，在搅拌下反应1h；
3）反应结束后，离心去除上清液得产物，洗涤三次，洗涤后产物分散在1 mL去离子水中，得到ZIF-D/DMPC分散液；
（3）ZIF-D@ALIP纳米颗粒制备：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-D@ALIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-D@ DMPC分散液置于圆底烧瓶中，同时加入将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和50 µL 浓度15 mg/mL靶向多肽-DSPE溶解于550 µL 氯仿的混合液，上述分散液和混合液在低压旋转蒸发条件下反应1 h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声溶解，溶解物分别经过规格为400nm、200nm的多孔膜挤压处理10次，并经过6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到ZIF-D@ALIP。
5.根据权利要求1至3任一项所述基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于：一种核壳式药物载体ZIF-D@ALIP，按如下步骤制备：
（1）ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.786g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.8mgDOX的水溶液，于在37℃条件下混合并搅拌2分钟；然后，
2）在上述溶液中缓慢加入0.1 mL含12.6 mg六水合硝酸锌的水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应30min；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，洗涤三次得到载药M的沸石咪唑骨架材料ZIF-D纳米颗粒；
（2）ZIF-D@PVP/DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-M内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒分散溶解于4 mL水溶液，随后在连续搅拌下快速依次加入0.5 mL含26mg PVP的溶液和0.5 mL含32 mg DMPC的溶液，上述混合液搅拌反应1h；
3）反应结束后，离心分离去除上清液，收集产物ZIF-D/DMPC，洗涤三次，产物分散在1mL去离子水中，得到最终产物分散液；
（3）ZIF-D@ALIP纳米颗粒制备：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-M@LIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-M@PVP/DMPC颗粒分散液置于圆底烧瓶，加入将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20 mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和50 µL 浓度15 mg/mL靶向多肽-DSPE溶解于550 µL 氯仿的混合液，上述二种混合液在低压旋转蒸发条件下反应1 h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声处理溶解，然后，溶解物分别经过400nm、200nm的核孔膜挤压处理10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。
6.根据权利要求1至3任一项所述基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于：一种核壳式药物载体ZIF-D@ALIP，按如下步骤制备：
（1）ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）的合成：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.8 g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.6mgDOX水溶液，于在37℃条件下混合并搅拌2分钟；然后，
2）在上述溶液中缓慢加入0.1 mL含12.6 mg六水合硝酸锌的水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应60 min；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，回收ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）纳米颗粒，洗涤三次；
（2）ZIF-M@PVP/DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-D内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒重新分散溶解于4 mL水溶液中，随后连续搅拌下快速依次加入0.5 mL含26 mg PVP的溶液和0.5 mL含32mg DMPC的溶液，上述混合液在搅拌下反应1h；
3）反应结束后，离心收集产物ZIF-D/DMPC，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-D@ DMPC分散液；
（3）ZIF-D @ Abarelix-lipid film（ZIF-D@ ALIP）核壳纳米结构的合成：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-D@ALIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-D@PVP/DMPC分散液置于圆底烧瓶，同时将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和 50 µL 浓度15 mg/mL靶向多肽-DSPE脂质膜的微乳液溶解于550 µL 氯仿溶液中的混合液，上述分散液和混合液在低压旋转蒸发条件下反应1h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声，将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过400nm、200nm的核孔膜挤压处理10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。
7.根据权利要求1至3任一项所述基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法，其特征在于：一种核壳式药物载体ZIF-D@ALIP，按如下步骤制备：
（1）ZIF-M纳米颗粒制备：
1）选用六水合硝酸锌和2-甲基咪唑为ZIF-8的合成材料，将0.8 g 2-甲基咪唑溶解于0.9 mL水溶液，随后在溶液中加入0.5 mL含1.8 mgDOX水溶液，混合并搅拌2分钟；然后，
2）在上述溶液中缓慢加入0.1 mL含12.6 mg六水合硝酸锌的水溶液，随后混合液于37℃，300-800 rpm/min搅拌速度下反应120 min；
3）反应结束后，以6500 rpm/min离心20min分离去除上清液，回收ZIF-8 @ DOX（ZIF-D）纳米颗粒，洗涤三次；
（2）ZIF-D@DMPC纳米颗粒制备：
1）选用聚乙烯吡咯烷酮PVP(k30)和磷脂酰胆碱DMPC作为ZIF-M内脂质修饰材料；
2）首先将150 mg ZIF-D颗粒重新分散溶解于4 mL水中，然后在连续搅拌下快速加入0.5 mL含26 mg PVP的溶液，0.5 mL含32 mg DMPC的溶液，反应1h；
3）反应结束后，离心去除上清液，收集产物ZIF-D/DMPC，洗涤三次，产物分散在1 mL去离子水中，得到最终产物ZIF-D@ DMPC分散液；
（3）ZIF-D @ Abarelix-lipid film（ZIF-D@ ALIP）核壳纳米结构的合成：
1）选用天然大豆磷脂分子HSPC和胆固醇作为ZIF-D@ALIP外脂质材料；首先将步骤（2）制备的ZIF-D@PVP/DMPC分散液置于圆底烧瓶，同时加入将300 μL浓度28 mg/mL HSPC的溶液、100 μL浓度20mg/mL胆固醇溶液、150 µL浓度2 mg/mL IR780和 50 µL 浓度15 mg/mLAbarelix-DSPE脂质膜的微乳液溶解于550 µL 氯仿中的混合液，上述分散液和混合液在低压旋转蒸发条件下反应1h，并除去有机溶剂，再低温真空干燥获得最终产物；
2）反应结束后，将产物分散在水溶液中，进行快速超声，将吸附在烧瓶壁上的产物溶解，溶解物分别经过400nm、200nm的核孔膜挤压处理10次，并经过3500-6500 rpm/min离心20 min分离去除上清液，洗涤三次得到最终产物ZIF-D@ALIP。
CN201911167233.XA 2019-11-25 2019-11-25 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法 Active CN111265533B (zh)

Priority Applications (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911167233.XA CN111265533B (zh) 2019-11-25 2019-11-25 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法
PCT/CN2019/127924 WO2021103232A1 (zh) 2019-11-25 2019-12-24 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911167233.XA CN111265533B (zh) 2019-11-25 2019-11-25 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111265533A true CN111265533A (zh) 2020-06-12
CN111265533B CN111265533B (zh) 2023-07-18

Family

ID=70990935

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911167233.XA Active CN111265533B (zh) 2019-11-25 2019-11-25 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法

Country Status (2)

Country Link
CN (1) CN111265533B (zh)
WO (1) WO2021103232A1 (zh)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111437399A (zh) * 2020-05-27 2020-07-24 山东大学 一种基因与化学小分子共递送系统及在肿瘤治疗中的应用
CN111643673A (zh) * 2020-07-08 2020-09-11 福建医科大学孟超肝胆医院(福州市传染病医院) 一种同时包载光敏剂和蛋白质的肿瘤靶向纳米药物及其应用
CN111700881A (zh) * 2020-07-02 2020-09-25 四川大学 Wnt蛋白\ZIF-8纳米复合体、其制备方法及其应用
CN114652854A (zh) * 2022-03-04 2022-06-24 中国科学院海洋研究所 一种双锁mof材料及其制备和应用
CN115260508A (zh) * 2022-06-06 2022-11-01 西北工业大学 一种zif-8以及谷胱甘肽响应型空心微球的制备方法
CN115260566A (zh) * 2022-07-05 2022-11-01 北京林业大学 一种基于zif-8的琼脂糖多孔微球的制备方法

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2022261186A1 (en) * 2021-06-08 2022-12-15 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Nanoparticles for preventing peri/post-menopausal bone loss and/or obesity
EP4351655A1 (en) * 2021-06-08 2024-04-17 University of Georgia Research Foundation, Inc. Nanoparticles for targeted non-surgical spaying and neutering
EP4351659A1 (en) * 2021-06-08 2024-04-17 University of Georgia Research Foundation, Inc. Nanoparticles for treating prostate cancer
CN115317624A (zh) * 2021-12-01 2022-11-11 武汉纺织大学 一种主动靶向骨肿瘤的液态金属-金属有机框架纳米载药材料及其制备方法和应用
CN114437183A (zh) * 2022-02-17 2022-05-06 中国农业科学院兰州兽医研究所 一种基于金属有机框架仿生矿化提高病毒样颗粒热稳定性的方法
CN116350591B (zh) * 2022-12-22 2024-04-09 济南大学 pH响应双驱动Pt/FePc@Mn-MOF Janus型纳米马达及制备方法和应用

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107189074A (zh) * 2017-05-26 2017-09-22 西安电子科技大学 基于脂质体膜的金属有机骨架材料的表面功能化修饰方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2713194T3 (es) * 2007-09-25 2019-05-20 Univ California Entramados organometálicos comestibles y biocompatibles
CN107095861A (zh) * 2017-06-29 2017-08-29 中国医学科学院生物医学工程研究所 基于egcg与金属离子的双刺激响应药物及制备方法
CN107648606A (zh) * 2017-11-09 2018-02-02 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 集化疗与热疗一体化核壳纳米材料的制备方法及其产品和应用
CN107998404B (zh) * 2017-12-09 2021-05-04 浙江大学 一种负载抗癌药物的叶酸靶向载体及其制备方法和应用
CN109512797A (zh) * 2018-12-21 2019-03-26 上海纳米技术及应用国家工程研究中心有限公司 基于金属有机框架的纳米药物载体的制备方法及其产品
CN109985247A (zh) * 2019-04-03 2019-07-09 河南科技学院 一种用于药物释放的杂化金属有机骨架化合物的制备方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107189074A (zh) * 2017-05-26 2017-09-22 西安电子科技大学 基于脂质体膜的金属有机骨架材料的表面功能化修饰方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
NADIA NASIHAT SHENO等: "A novel approach for the synthesis of phospholipid bilayer-coated zeolitic imidazolate frameworks: preparation and characterization as a pH-responsive drug delivery system", 《NEW JOURNAL OF CHEMISTRY》 *
张能攀: "血栓靶向脂质体在溶栓治疗中的应用", 《中国博士学位论文全文数据库 医药卫生科技辑》 *
李叶阔等: "载IR-780与多柔比星温敏脂质体的制备与表征", 《第二军医大学学报》 *
武华乙等: "金属有机框架材料在药物载运方面的研究进展", 《海峡药学》 *

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111437399A (zh) * 2020-05-27 2020-07-24 山东大学 一种基因与化学小分子共递送系统及在肿瘤治疗中的应用
CN111437399B (zh) * 2020-05-27 2021-07-09 山东大学 一种基因与化学小分子共递送系统及在肿瘤治疗中的应用
CN111700881A (zh) * 2020-07-02 2020-09-25 四川大学 Wnt蛋白\ZIF-8纳米复合体、其制备方法及其应用
CN111700881B (zh) * 2020-07-02 2021-05-18 四川大学 Wnt蛋白＼ZIF-8纳米复合体、其制备方法及其应用
CN111643673A (zh) * 2020-07-08 2020-09-11 福建医科大学孟超肝胆医院(福州市传染病医院) 一种同时包载光敏剂和蛋白质的肿瘤靶向纳米药物及其应用
CN111643673B (zh) * 2020-07-08 2022-09-13 福建医科大学孟超肝胆医院(福州市传染病医院) 一种同时包载光敏剂和蛋白质的肿瘤靶向纳米药物及其应用
CN114652854A (zh) * 2022-03-04 2022-06-24 中国科学院海洋研究所 一种双锁mof材料及其制备和应用
CN114652854B (zh) * 2022-03-04 2023-05-12 中国科学院海洋研究所 一种双锁mof材料及其制备和应用
CN115260508A (zh) * 2022-06-06 2022-11-01 西北工业大学 一种zif-8以及谷胱甘肽响应型空心微球的制备方法
CN115260508B (zh) * 2022-06-06 2023-09-19 西北工业大学 一种zif-8以及谷胱甘肽响应型空心微球的制备方法
CN115260566A (zh) * 2022-07-05 2022-11-01 北京林业大学 一种基于zif-8的琼脂糖多孔微球的制备方法
CN115260566B (zh) * 2022-07-05 2023-06-06 北京林业大学 一种基于zif-8的琼脂糖多孔微球的制备方法

Also Published As

Publication number Publication date
WO2021103232A1 (zh) 2021-06-03
CN111265533B (zh) 2023-07-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111265533B (zh) 一种基于脂质膜和金属有机框架的核壳纳米颗粒的制备方法
Luo et al. Combined near infrared photothermal therapy and chemotherapy using gold nanoshells coated liposomes to enhance antitumor effect
CN106806343B (zh) 一种叶酸和聚多巴胺修饰的肿瘤靶向介孔二氧化硅纳米粒及制备方法与应用
Ni et al. Uniformly sized hollow microspheres loaded with polydopamine nanoparticles and doxorubicin for local chemo-photothermal combination therapy
CN106806344A (zh) 聚多巴胺和聚乙二醇维生素e琥珀酸酯修饰的介孔二氧化硅纳米粒及其制备方法与应用
CN111760024B (zh) 一种渗透增强型金纳米簇载药靶向制剂及其制法和应用
US20190224238A1 (en) Tumor therapeutic drug
CN115192543B (zh) 载脂溶性色素纳米粒的制备方法
CN108653733A (zh) 具有气泡生成功能的双载蒽环类药物及光敏剂的聚合物囊泡与制备
CN114259477B (zh) 一种促渗透、缓解肿瘤缺氧并能靶向肿瘤细胞的纳米递送体系及其制备方法和应用
CN106421784A (zh) 一种具有光热效应的纳米药物载体及其制备方法及应用
CA3062089A1 (en) Immunomagnetic nanocapsule, fabrication method and use thereof, and kit for treating cancer
CN104288093B (zh) 纳米药物透皮制剂在肿瘤中的应用
Pourmadadi et al. Synthesis and characterization of biological macromolecules double emulsion based on carboxymethylcellulose/gelatin hydrogel incorporated with ZIF-8 as metal organic frameworks for sustained anti-cancer drug release
CN112791061B (zh) 一种具有靶向长循环的多级仿生纳米药物载体的制备方法
CN114042155A (zh) 基于金纳米笼的多功能药物载体材料及其制备方法
CN113599368A (zh) 一种细胞膜拮抗联合纳米酶的仿生载药纳米系统、制备方法和用途
CN115192708B (zh) 负载抗肿瘤药物的纳米复合材料、纳米载药体系及制备与应用
CN111135314A (zh) 一种用于胃癌早期诊断和治疗的纳米复合物及其制备方法
CN105997892A (zh) 一种微球生物新材料包裹sod活性药物载体制备方法
CN110343255B (zh) 聚合物载体及其制备方法、抗肿瘤纳米粒子
KR102110424B1 (ko) 산화 그래핀-리포좀 복합체 및 이를 포함하는 약물전달체
CN103919738B (zh) 一种甲氨喋呤前药及其胶束制剂和制备方法
KR101686341B1 (ko) 약물 표적화를 위한 초상자성 산화철 나노입자의 제조방법
CN108451931B (zh) 一种pah/f聚电解质复合物纳米载体及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant