CN111214483B - 一种桃胶多糖的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种桃胶多糖在制备治疗抗敏止痒的药物中的应用。本发明还公开了一种桃胶多糖在制备抗敏止痒的化妆品中的应用。本发明的桃胶多糖的应用，其有益效果是：可以对皮肤起到快速的抗敏止痒，消炎止痛的功效。因此在医药和美容领域具有广泛的应用价值。

Description

一种桃胶多糖的应用

技术领域

本发明属于生物工程领域，具体地说，是关于一种桃胶多糖的应用。

背景技术

皮肤过敏是因皮肤直接接触、吸入、炎症反应等受内外部环境刺激引起的一种皮肤变态反映，常伴随红肿、瘙痒、紫癜、丘疹、水肿等临床症状，严重影响人们的生活质量。其中，极度瘙痒会促使人们用手抓挠局部，过度抓挠会继发引起皮肤损伤、皮肤感染等症状。皮肤过敏的治疗可通过口服和外用药物缓解症状。如局部外用激素、口服液抗组胺药(如氯雷他定或盐酸西利替嗪片等)。许多中草药成分也具有一定抗敏舒缓的功效，如甘草提取物，牡丹根提取物等，都广泛用于缓解皮肤瘙痒具有卓越的效果。

桃胶是桃或山桃等树皮中分泌出来的树脂，是桃树树干受损或者被真菌感染产生，是桃树的自我防卫机制。树胶的主要组成为半乳糖、鼠李糖、α-葡萄糖醛酸等，主要有清血降脂，调节血糖、缓解压力和抗皱嫩肤的功效，是重要的养生保健的食材及中药材料。桃胶含有98％的可溶物，这些可溶物大部分是多糖成分，但桃胶的高度交联状态通过简单浸泡或蒸煮就能有效释放多糖成分，即便进入胃肠后也难以被消化系统有效吸收。此外，桃胶溶胀软化后形成的粘稠胶体对皮肤有很好的保湿滋润作用，但目前尚未有报道桃胶提取物中含有抗敏止痒的作用，有些杂质含量高的桃树脂产品用于皮肤后会引起皮肤过敏。

发明内容

本发明通过研究发现，从桃胶中提取的多糖成分可快速有效抑制皮肤表面瘙痒，抑制外界物质对皮肤的刺激性瘙痒，对组胺引起的过敏反应有良好的止痒去红消肿的作用。因此本发明的目的在于提供一种桃胶多糖的应用。本发明的第二目的是提供一种桃胶多糖的提取方法。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

作为本发明的第一个方面，一种桃胶多糖在制备治疗抗敏止痒的药物中的应用。

根据本发明，所述桃胶多糖的浓度大于或等于0.1mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.1mg/mL-50mg/mL。在该范围内，其获得的产品的品质好，而且生产成本低。当桃胶多糖的浓度高于50mg/mL时，由于桃胶粘度大，其生产工艺成本大大增加，而且影响产品的品质。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.5-10mg/mL。该浓度的桃胶多糖，其抗敏止痒效果良好。

更佳的，所述桃胶多糖的浓度为10mg/mL，当桃胶多糖的浓度大于或等于10mg/mL时，其对皮肤瘙痒的缓解率可以达到100％。

作为本发明的第二个方面，一种桃胶多糖在制备抗敏止痒的化妆品中的应用。

根据本发明，所述桃胶多糖的浓度大于或等于0.1mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.1mg/mL-50mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.5-10mg/mL。

优选的，所述桃胶多糖的浓度为10mg/mL，当桃胶多糖的浓度大于或等于10mg/mL时，其对皮肤瘙痒的缓解率可以达到100％。

作为本发明的第三个方面，一种药物组合物，包括桃胶多糖，所述桃胶多糖的浓度大于或等于0.1mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.1mg/mL-50mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.5-10mg/mL。

优选的，所述桃胶多糖的浓度为10mg/mL，当桃胶多糖的浓度大于或等于10mg/mL时，其对皮肤瘙痒的缓解率可以达到100％。

作为本发明的第四个方面，一种皮肤外用制剂，包括桃胶多糖，所述桃胶多糖的浓度为0.1mg/mL，可以用于缓解止痒、消肿、去红等抗过敏。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.1mg/mL-50mg/mL。在该范围内，其获得的产品的品质好，而且生产成本低。当桃胶多糖的浓度高于50mg/mL时，由于桃胶的粘度大，其生产工艺成本大大增加，而且影响产品的品质。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.5mg/mL-10mg/mL，其抗敏止痒效果良好。

更佳的，所述桃胶多糖的浓度为10mg/mL，当桃胶多糖的浓度大于或等于10mg/mL时，其对皮肤瘙痒的缓解率可以达到100％。

作为本发明的第五个方面，一种美容组合物，包括桃胶多糖，所述桃胶多糖的浓度大于或等于0.1mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.1mg/mL-50mg/mL。

较佳的，所述桃胶多糖的浓度为0.5-10mg/mL。

优选的，所述桃胶多糖的浓度为10mg/mL，当桃胶多糖的浓度大于或等于10mg/mL时，其对皮肤瘙痒的缓解率可以达到100％。

作为本发明的第六个方面，一种化妆品，包括上述所述的美容组合物。

作为本发明的第七个方面，一种桃胶多糖的提取方法，包括如下步骤：

步骤一、原料预处理

去除桃胶明显杂质；并用水浸泡桃胶让其充分软化；

步骤二、原料细化处理

把预处理后的桃胶充分搅碎；然后与水一并加热，使其充分溶胀于热水中；

步骤三、制备粗制桃胶多糖溶液

利用高压均质机把融化的桃胶打碎成更细小的分子颗粒。

根据本发明，所述桃胶多糖的提取方法，还包括如下步骤：

步骤四、桃胶多糖溶液的精制处理

先往粗制桃胶多糖溶液中添加4％-6.5％饱和食盐水，后逐渐添加无水乙醇至乙醇含量为70-85％；然后进行高速离心，转速为5000-8000rpm；以将难除的杂质与多糖分离开并去除。

根据本发明，所述桃胶多糖的提取方法，还包括如下步骤：

步骤五、桃胶干粉的制备

将精制处理后获得的多糖结晶放于容器内，间断地往容器内添加热水并搅拌，多糖全部溶解后停止加水；待其冷却后分装至西林瓶，放入冻干机制作冻干粉。

根据本发明，步骤二加热时，其水量为桃胶干重重量的10-20倍，加热温度为80-95℃，加热时间为3.5-4.5h。

根据本发明，步骤二加热时，其水量为桃胶湿重重量的20-40倍，带压加热温度为115-121℃，时间为1.5-2h。

根据本发明，步骤三的高压均质压力为100-500Bar。

根据本发明，步骤四的离心转速为5000-8000rpm。

本发明的桃胶多糖的应用，其有益效果是：可以对皮肤起到快速的抗敏止痒，消炎止痛的功效。因此在医药和美容领域具有广泛的应用价值。

具体实施方式

以下结合具体实施例，对本发明作进一步说明。应理解，以下实施例仅用于说明本发明而非用于限定本发明的范围。

本发明通过研究发现，将桃胶提取物用于改善皮肤瘙痒、红肿等皮肤过敏症状，对外界环境刺激具有优秀的抵抗作用。

为此，本发明提供了桃胶多糖的提取方法。主要包括如下步骤：

步骤一、原料预处理

该步骤的主要目的是去除附着于桃胶上的明显杂质，并让桃胶充分软化以便后续提取操作效率更高。

具体操作包括：1)去除桃胶明显杂质(如树皮、灰尘等)；2)用适量水浸泡桃胶让其充分软化。

较优选择，浸泡桃胶使用的水量为桃胶重量的17-25倍；浸泡时间为12-24h。

步骤二、原料细化处理。

该步骤的主要目的是让块状的桃胶细碎分散，分布均匀让预处理阶段未暴露在外的杂质与桃胶分离，以便去除；同时桃胶呈块状时难溶于水，细化处理后有利于桃胶多糖水溶液的制备。

具体操作包括：1)把预处理后的桃胶充分搅碎；2)把搅碎的桃胶和适量水一并加热，使其充分溶胀于热水中。

较优选择其一，加热时水量为桃胶干重重量的10-20倍，加热温度为80-95℃，加热时间为3.5-4.5h；其结果为桃胶完全融化，但是由于加水量少加热时间长又蒸发了一部分，此时得到的溶液中桃胶多糖的浓度很高，可以提高接下来的醇提效率。

较优选择其二，水量为桃胶湿重重量的20-40倍，带压加热温度为115-121℃，时间为1.5-2h。其结果为桃胶完全融化，肉眼观察为普通带颜色的水溶液的状态，可以顺利通过高压均质机而不堵也不伤机器，并且此时多糖含量在一个合理范围内，后续不需要额外稀释或浓缩的操作。

步骤三、制备粗制桃胶多糖溶液

该步骤的主要目的是利用高压均质机把融化的桃胶打碎成更细小的分子颗粒。这使得桃胶多糖可以更均匀分散于水溶液中，并后续分离杂质，对提取高纯度桃胶多糖起到积极作用。较优选择，高压均质压力为100-500Bar。

步骤四、桃胶多糖溶液的精制处理

该步骤的目的是提取纯度更高的桃胶多糖。

具体步骤为：利用多糖醇析的原理和高速离心等操作把难除的杂质与多糖分离开并去除，提取出纯的多糖结晶。较优选择，高速离心转速5000-8000rpm；多糖醇析时，先往桃胶多糖溶液添加4％-6.5％饱和食盐水，后逐渐添加无水乙醇至乙醇含量为70-85％。

步骤五、桃胶干粉的制备

该步骤的目的是使桃胶多糖能更长久稳定地保存。

具体操作为：将精制处理后获得的多糖结晶放于容器内，间断地往容器内添加热水并搅拌，多糖全部溶解后停止加水。待其冷却后分装至西林瓶，放入冻干机制作冻干粉。

应当说明，获得粗制桃胶多糖溶液的方法有多种，其目的是提高桃胶多糖分子的水溶性和分散性，提高多糖的利用率。例如，将桃胶颗粒通过水溶液或醇溶液浸泡后，利用水煮或高压处理桃胶树脂颗粒后，获得水溶性分散性好，透明澄清的高浓度桃胶多糖溶液。又如，使用高压法制备的桃胶多糖。高压法无需高温长时间煮沸提取，具有能耗低、用时短、粘度低、回收效率高等特点。其中，以高压萃取法的回收率最高，达到99％，效率高，应用实际生产中可大大降低生产成本。

以下通过3个不同方法来提取桃胶多糖溶液，分别为实施例1、实施例2和实施例3，并检测所获得的桃胶多糖的抗敏止痒效果。

实施例1水煮法制备桃胶多糖溶液

(1)称取普通市购桃胶1kg，用手初步去除附着于上面的树皮等杂质；用水连续冲洗桃胶2min，去除灰尘等杂杂质。

(2)将桃胶置于20L不锈钢桶，加入10～20倍重量的纯水浸泡，24小时。

(3)用筛子将浸泡桃胶的水滤去，将泡软的桃胶放入搅拌机，启动搅拌机将其充分搅碎后倒出。

(4)将搅碎后的桃胶置于恒温锅，加入桃胶干重10倍重量的水；盖好锅盖开启加热，温度调整为95℃，持续加热1.5h；至桃胶已经熔化呈黏稠胶状时，静置降温。

(5)用纱布将桃胶液滤出，得到滤液。

(6)准备10ml饱和氯化钠溶液和6L无水乙醇，将上清液全部倒入洁净不锈钢桶，添加饱和氯化钠溶液搅拌均匀，接着缓慢添加无水乙醇并同时搅拌直至乙醇全部添加完毕；可以观察到不断有多糖晶体缓慢析出，静置1.5h确保多糖已经析出完毕。

(7)用纱布将沉淀滤出，收集至烧杯放入烘箱，温度调至65℃时间4h，将残留的乙醇和水分烘干。

(8)加入湿重10倍体积的热水搅拌将直至干燥的多糖沉淀完全溶解。用苯酚-硫酸法测得多糖回收率72.6％，经HPLC-ELSD色谱分析，该多糖由半乳糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖组成，其摩尔比为18.12：13.64：54.37：2.58：10.75。用水将多糖浓度浓度定量至50mg/ml，得桃胶多糖溶液A。

实施例2高压法制备桃胶多糖溶液

(1)称取普通市购桃胶1kg，用手初步去除附着于上面的树皮等杂质；用水连续冲洗桃胶2min，去除灰尘等杂杂质。

(2)将桃胶置于20L不锈钢桶，加入25倍重量的纯水浸泡，24小时。

(3)用筛子将浸泡桃胶的水滤去，将泡软的桃胶放入搅拌机，启动搅拌机将其充分搅碎后倒出。

(4)将桃胶搅碎液用高压均质机以500Bar均质一遍，将桃胶液再分装至洁净离心杯，以7000rpm的速度离心20min。

(5)用苯酚-硫酸法测得多糖回收率为95％，经HPLC-ELSD色谱分析，该多糖组分与实施例1中的组分比例接近。用水将浓度调整为50mg/ml，得桃胶多糖溶液B。

实施例3乙醇-水提取法制备桃胶多糖溶液

(1)称取普通市购桃胶1kg，用手初步去除附着于上面的树皮等杂质；用水连续冲洗桃胶2min，去除灰尘等杂杂质。

(2)将桃胶置于20L不锈钢桶，将泡软的桃胶放入搅拌机，启动搅拌机将其充分搅碎后，加入25倍重量的50％乙醇-水溶液浸泡，24小时。

(3)用纱布分离浸泡液和桃胶颗粒，得到桃胶多糖乙醇水溶液。

(4)用苯酚-硫酸法测得多糖回收率为20％，经HPLC-ELSD色谱分析，该多糖由半乳糖、木糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、组成，其摩尔比为18.54：13.35：54.82：2.56：10.69。与实施例1和实施例2中组分比例接近。

加热蒸发乙醇后，用水将多糖浓度浓缩为含50mg/ml，得多糖醇溶液C。

从实施例1-3的结果可以看出，高压法获得的桃胶多糖得率最高。样品无需长时间高温加热，能耗最低，制备工艺最简单；乙醇-水法得率最低。

对比例1桃胶粉末水悬液

(1)称取普通市购桃胶1kg，用手初步去除附着于上面的树皮等杂质；用水连续冲洗桃胶2min，去除灰尘等杂杂质。

(2)将桃胶置于20L不锈钢桶，加入10～20倍重量的纯水浸泡，24小时。

(3)用筛子将浸泡桃胶的水滤去，将泡软的桃胶放入搅拌机，启动搅拌机将其充分搅碎后倒出。

此法用于制备的桃胶多糖呈高度聚集的颗粒状，未充分将多糖溶解于水中。桃胶多糖的分散程度对效果有很大影响。该法模拟人们常规食用桃胶时的状态。

实施例4抗右旋糖酐致小鼠皮肤瘙痒的作用

取小鼠48只，雌雄各半，随机分成6组，按表1所列剂量灌胃给药。连续5天，于末次给药后30min，各小鼠尾静脉注射右旋糖酐0.95mg/kg。以小鼠前爪搔头部、后爪搔躯干、嘴咬全身各部位作为瘙痒指征，记录30min内小鼠瘙痒次数及瘙痒持续时间。结果见表1。

表1桃胶多糖抗右旋糖酐致小鼠皮肤瘙痒作用(X±s)

注：与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01

结果显示：桃胶粉对小鼠全身皮肤瘙痒模型无明显抑制效果，扑尔敏作为阳性对照，效果最佳。而水提法桃胶多糖A、高压法桃胶多糖B、醇提法桃胶多糖C对小鼠全身皮肤瘙痒模型都有明显止痒效果。

结论：桃胶多糖溶于水，其水溶液具有缓解瘙痒的功效。

实施例5对组胺致小鼠毛细血管通透性增高的作用

取小鼠48只，雌雄各半，随机分成8组，按表2所列剂量灌胃给药。连续5天，于末次给药30min后，腹部皮内注射组胺10ug/ml，形成一小皮丘，立即尾静脉注射0.5％依文思蓝0.01mL/g，30min后处死动物，用直径0.8的打孔器打下两片蓝染皮片，放入3mL生理盐水-丙酮(3:7)混合液中，37℃恒温水浴锅中放置24h，浸出液离心，取上清液，用分光光度计(610nm)测吸光度。结果见表2。

表2桃胶多糖抗血管通透性增高作用(X±s)

注：与空白对照组比较，*P<0.05,**P<0.01

结果显示：水煮法、高压法和水醇法制备的桃胶多糖对组胺引起的毛细血管通透性增加有明显的抑制作用，可以减轻或消除过敏症状。而桃胶粉末水悬液没有显著的抑制组胺作用。

实施例6人体皮肤抗敏测试

招募6名皮肤健康的志愿者。清洁手臂皮肤，晾干。在两个手臂正面各选取3个区域(总共6个区域)，用记号笔画上轮廓，剪取3×3cm的滤纸贴在手臂上。吸取3ml的1.5％组胺溶液，滴加在每片滤纸上。让滤纸均匀吸收溶液。让组胺溶液在手臂上静置30分钟。随后去掉滤纸，冲洗掉皮肤表面组胺溶液。选择红肿和瘙痒程度接近的四块区域。分别涂上1mg/ml的水提法桃胶多糖A、高压法桃胶多糖B和乙醇-水法桃胶多糖C。阳性对照使用1mg/ml的燕麦仁提取物。空白组涂抹生理盐水。30分钟后观察皮肤瘙痒和表面红肿情况。结果见表3。

表3桃胶多糖对皮肤瘙痒、丘疹、发红症状的缓解作用

结果显示，桃胶多糖具有显著的止痒抗敏去红的作用。

实施例7糖浓度对皮肤瘙痒的缓解作用

此实施例中共招募42名皮肤健康的志愿者。将水煮法桃胶多糖A、高压法桃胶多糖B和水醇法桃胶多糖C三种待测样品，分别配置了0.1mg/ml、0.5mg/ml，1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、20mg/ml进行测试。共21种样品。测试方法：将42名志愿者分为7组，每组6人，每组测试不同浓度的相同种类样品。如第一天测水煮法桃胶多糖A样品，第二天待手臂完全恢复后再在不同部位测高压法桃胶多糖B，第三天待手臂完全恢复后再在不同部位测水醇法桃胶多糖C。清洁手臂皮肤，晾干。在两个手臂正面各选取3个区域(总共6个区域)，用记号笔画上轮廓，剪取3×3cm的滤纸贴在手臂上。吸取3ml的2％组胺溶液，滴加在每片滤纸上。让滤纸均匀吸收溶液。让组胺溶液在手臂上静置30分钟。随后去掉滤纸，冲洗掉皮肤表面组胺溶液。选择红肿和瘙痒程度接近的四块区域。其中两块区域涂上待测浓度的样品，另外两块区域涂上生理盐水作为空白对照组。与对照组相比观察对应浓度在30分钟内的止痒效率。结果见表4。

表4桃胶多糖对皮肤瘙痒缓解作用

表4结果显示，桃胶多糖对皮肤瘙痒的缓解率达到50％以上需要使用浓度大于或等于0.5mg/ml。当使用浓度达到10mg/ml时效果达到了最大值。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰。这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

Claims (5)

1.一种桃胶多糖作为唯一活性成分在制备抗敏止痒的药物中的应用，所述桃胶多糖的提取方法，包括如下步骤：

步骤一、原料预处理

去除桃胶明显杂质；并用水浸泡桃胶让其充分软化；

步骤二、原料细化处理

把预处理后的桃胶充分搅碎；然后与水一并加热，使其充分溶胀于热水中；

步骤三、制备粗制桃胶多糖溶液

利用高压均质机把融化的桃胶打碎成更细小的分子颗粒。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述桃胶多糖的浓度大于或等于0.1mg/mL。

3.一种桃胶多糖作为唯一活性成分在制备抗敏止痒的药物中的应用，所述桃胶多糖的提取方法，包括如下步骤：

（1）称取普通市购桃胶1kg，用手初步去除附着于上面的树皮等杂质；用水连续冲洗桃胶2min，去除灰尘等杂质；

（2）将桃胶置于20L不锈钢桶，加入10～20倍重量的纯水浸泡24小时；

（3）用筛子将浸泡桃胶的水滤去，将泡软的桃胶放入搅拌机，启动搅拌机将其充分搅碎后倒出；

（4）将搅碎后的桃胶置于恒温锅，加入桃胶干重10倍重量的水；盖好锅盖开启加热，温度调整为95℃，持续加热1.5h；至桃胶已经熔化呈黏稠胶状时，静置降温；

（5）用纱布将桃胶液滤出，得到滤液；

（6）准备10 ml饱和氯化钠溶液和6L无水乙醇，将上清液全部倒入洁净不锈钢桶，添加饱和氯化钠溶液搅拌均匀，接着缓慢添加无水乙醇并同时搅拌直至乙醇全部添加完毕；可以观察到不断有多糖晶体缓慢析出，静置1.5h确保多糖已经析出完毕；

（7）用纱布将沉淀滤出，收集至烧杯放入烘箱，温度调至65℃时间4h，将残留的乙醇和水分烘干；

（8）加入湿重10倍体积的热水搅拌将直至干燥的多糖沉淀完全溶解。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述桃胶多糖的浓度大于或等于0.1mg/mL。

5.一种桃胶多糖作为唯一活性成分在制备抗敏止痒的药物中的应用，所述桃胶多糖的提取方法，包括如下步骤：

1）称取普通市购桃胶1kg，用手初步去除附着于上面的树皮等杂质；用水连续冲洗桃胶2min，去除灰尘等杂质；

2）将桃胶置于20L不锈钢桶，将泡软的桃胶放入搅拌机，启动搅拌机将其充分搅碎后，加入25倍重量的50%乙醇-水溶液浸泡24小时；

3）用纱布分离浸泡液和桃胶颗粒，得到桃胶多糖乙醇水溶液；

4）加热蒸发乙醇后，将多糖浓度浓缩为50mg/ml，得多糖醇溶液。