CN111157641A - 一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法 - Google Patents

一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN111157641A
CN111157641A CN201911420890.0A CN201911420890A CN111157641A CN 111157641 A CN111157641 A CN 111157641A CN 201911420890 A CN201911420890 A CN 201911420890A CN 111157641 A CN111157641 A CN 111157641A
Authority
CN
China
Prior art keywords
sample
carbamazepine
acetonitrile
solution
percent
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201911420890.0A
Other languages
English (en)
Other versions
CN111157641B (zh
Inventor
王樱桃
滕馨莹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Anling Biomedical (suzhou) Co Ltd
Original Assignee
Anling Biomedical (suzhou) Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anling Biomedical (suzhou) Co Ltd filed Critical Anling Biomedical (suzhou) Co Ltd
Priority to CN201911420890.0A priority Critical patent/CN111157641B/zh
Publication of CN111157641A publication Critical patent/CN111157641A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN111157641B publication Critical patent/CN111157641B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N30/06—Preparation
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/34—Control of physical parameters of the fluid carrier of fluid composition, e.g. gradient
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/26—Conditioning of the fluid carrier; Flow patterns
    • G01N30/28—Control of physical parameters of the fluid carrier
    • G01N30/36—Control of physical parameters of the fluid carrier in high pressure liquid systems
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/62—Detectors specially adapted therefor
    • G01N30/72—Mass spectrometers
    • G01N30/7233—Mass spectrometers interfaced to liquid or supercritical fluid chromatograph
    • G01N30/724—Nebulising, aerosol formation or ionisation
    • G01N30/7266—Nebulising, aerosol formation or ionisation by electric field, e.g. electrospray
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N2030/022—Column chromatography characterised by the kind of separation mechanism
    • G01N2030/027—Liquid chromatography
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N30/00—Investigating or analysing materials by separation into components using adsorption, absorption or similar phenomena or using ion-exchange, e.g. chromatography or field flow fractionation
    • G01N30/02—Column chromatography
    • G01N30/04—Preparation or injection of sample to be analysed
    • G01N2030/042—Standards
    • G01N2030/045—Standards internal

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)

Abstract

本发明公开了一种HPLC‑MS‑MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，包括以下步骤：分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测人血浆中加入50.0ng/mL卡马西平‑d8内标工作液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍即可进样分析。分别向空白基质和水样中加入50％乙腈水溶液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍即可进样分析。将上述处理后的各个样品分别注入液相色谱质谱联用仪中，对卡马西平以及卡马西平‑d8成分进行定量检测。本发明对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。

Description

一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法
技术领域
本发明涉及了生物医药技术领域，具体的是一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法。
背景技术
生物样品分析随着质谱技术的发展，其应用日益广泛。但由于生物样品中的基质复杂，且药物浓度低。因此，需要获得更准确且稳定的测定方法。HPLC-MS-MS技术中，高效液相色谱是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次的交换过程，它借助溶质在两相间的分配系数、亲和力、吸附能力、离子交换或分子大小不同引起的排阻作用差别使不同溶质进行分离。采用HPLC-MS-MS技术，建立并验证人血浆中卡马西平浓度测定的液质联用方法，可以获得更加准确且稳定性高的含量测定方法，从而便于科研以及工业化应用。
发明内容
为了克服现有技术中的缺陷，本发明实施例提供了提供了一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。
本发明公开了一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，包括以下步骤：
步骤一、样品制备：
制备校正标示样品：以卡马西平为溶质，以50％乙腈水溶液为溶剂，配制卡马西平梯度浓度为20～20000ng/mL的校正标示工作液；分别取各浓度校正标示工作液，用空白基质稀释20倍，得到校正标示样品；
制备质控样品：以卡马西平为溶质，以50％乙腈水溶液为溶剂，配制卡马西平梯度浓度为20～16000ng/mL的质控工作液；分别取各浓度质控工作液，用空白基质稀释20倍，得到质控样品；
制备内标样品：以卡马西平-d8为溶质，以甲醇二甲基亚砜溶液为溶剂，得到卡马西平-d8储备液；将储备液用50％乙腈水溶液稀释得到卡马西平-d8浓度为50.0ng/mL、10000ng/mL的内标工作液；分别取各浓度内标工作液，用空白基质稀释20倍，得到内标样品；
步骤二、样品处理：
分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测人血浆中加入50.0ng/mL卡马西平-d8内标工作液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍；
分别向空白基质和水样中加入50％乙腈水溶液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍；
步骤三、样品检测：
将上述步骤二中处理后的校正标示样品、质控样品、内标样品、待测人血浆、空白基质和水样分别注入液相色谱质谱联用仪中，对卡马西平以及卡马西平-d8成分进行定量检测。
作为优选，所述步骤一中，甲醇二甲基亚砜溶液中，甲醇和二甲基亚砜的体积比为1:1。
作为优选，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
固定相：填料粒径为5μm，直径2mm，长度50mm的Gemini C18色谱柱；
流动相：流动相为为A和B的混合体系，A为甲酸水溶液，其中甲酸与水的体积比为0.1:100；B为甲酸乙腈溶液，其中甲酸与乙腈的体积比为0.1:100；
洗脱梯度为：
0.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％；
1.3min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％；
2min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％；
2.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％；
3min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％。
作为优选，所述检测步骤中，所述液相色谱进样器清洗液为：强洗采用30％乙腈水溶液，弱洗采用甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、水、氨水按照体积比30:30:10:10:20:1混合而成。
作为优选，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
流速：0.2～0.6mL/min。
作为优选，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
流速：0.4mL/min；
柱温：40℃；
自动进样器温度：8℃；
进样量：5μL。
作为优选，所述检测步骤中，按照下述质谱条件进行检测：
离子源：电喷雾离子源；
离子化模式：正离子模式；
分辨力模式为Unit；
碰撞气、气帘气、雾化气、辅助气1和辅助气2均为高纯氮气；
喷雾电压5000V。
本发明的有益效果如下：本发明一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其对样品分析简单便捷，检出限低、灵敏度高、重复性和回收率好。
为让本发明的上述和其他目的、特征和优点能更明显易懂，下文特举较佳实施例，并配合所附图式，作详细说明如下。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
图1是本发明实施例中溶剂样品中分析物为卡马西平的谱图；
图2是本发明实施例中溶剂样品中分析物为卡马西平-d8的谱图；
图3是本发明实施例中双空白样品中分析物为卡马西平的谱图；
图4是本发明实施例中双空白样品中分析物为卡马西平-d8的谱图；
图5是本发明实施例中质控样品中分析物为卡马西平的谱图；
图6是本发明实施例中质控样品中分析物为卡马西平-d8的谱图；
图7是本发明实施例中分析物为卡马西平的残留效应谱图；
图8是本发明实施例中分析物为卡马西平-d8的残留效应谱图；
图9是本发明实施例中质控样品定量下限中分析物为卡马西平的谱图；
图10是本发明实施例中质控样品定量下限中分析物为卡马西平-d8的谱图；
图11是本发明实施例中质控样品定量上限中分析物为卡马西平的谱图；
图12是本发明实施例中质控样品定量上限中分析物为卡马西平-d8的谱图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
以下实施例中的仪器与试药如下：
仪器：
高效液相色谱 Shimadzu LC-20AD
质谱仪 AB SCIEX-4000Q TRAP-LC/MS/MS system
数据采集及管理 Analyst 1.6.3,Applied Biosystem
日常计算/报告处理 Office 2003or other version,Microsoft
试药：
乙腈 HPLC级
甲醇 HPLC级
二甲基亚砜 HPLC级
异丙醇 AR级
甲酸 AR级
丙酮 AR级
NH3·H2O AR级
本实施例一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，包括以下步骤：
一、样品和溶液制备：
1.制备校正标示样品：
称量一定量的卡马西平，溶解于50％乙腈水溶液中，得到1.00mg/mL卡马西平储备液。
取1.00mg/mL卡马西平储备液，以50％乙腈水溶液稀释至卡马西平系列浓度20、40、200、800、4000、8000、18000、20000、100000ng/mL的校正标示工作液。
分别取10uL各个浓度的校正标示工作液与190mL空白基质混合，分别得到卡马西平系列浓度为1、2、10、40、100、200、900、1000ng/mL的校正标示样。
2.制备质控样品：
称量一定量的卡马西平，溶解于50％乙腈水溶液中，得到1.00mg/mL卡马西平储备液。取1.00mg/mL卡马西平储备液，以50％乙腈水溶液稀释至卡马西平系列浓度为20、60、600、10000、16000、200000ng/mL的质控工作液。
分别取10uL各个浓度的质控工作液与190mL空白基质混合，分别得到卡马西平系列浓度为1、3、30、500、800ng/mL的质控样品。
3.制备内标样品：以卡马西平-d8为溶质，以甲醇二甲基亚砜溶液为溶剂，得到卡马西平-d8浓度为1.00mg/mL的储备液；将储备液用50％乙腈水溶液稀释得到卡马西平-d8系列浓度为50.0ng/mL、10000ng/mL的内标工作液；分别取各浓度的内标工作液，用空白基质稀释20倍，得到内标样品。
4.制备双空白样品：空白基质，本实施例中空白基质均为从中国科学院上海药物研究所采集的人血浆，以肝素锂为抗凝剂。
5.制备溶剂样品：水样。本实施例中所用的水均未纯水。
6.制备待测样品：即待测人血浆。
7.制备纯液体样品：乙腈。
8.制备回收率和基质效应纯溶液，即neat溶液：
以卡马西平-d8溶液和50％乙腈水溶液混合，使卡马西平-d8终浓度为6.25ug/mL。
以卡马西平溶液和50％乙腈水溶液混合，使卡马西平终浓度为0.125、62.5ug/mL。
二、样品处理
以下处理步骤中用到的内标工作液为50.0ng/mL卡马西平-d8内标工作液。乙腈代表100％浓度乙腈。
将50μL校正标示样、50μL内标工作液、300μL乙腈混合均匀，离心取上清液100μL,加入300μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL质控样品、50μL内标工作液、300μL乙腈混合均匀，离心取上清液100μL，加入300μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL内标样品、50μL内标工作液、300μL乙腈混合均匀，离心取上清液100μL，加入300μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL待测样品、50μL内标工作液、300μL乙腈混合均匀，离心取上清液100μL，加入300μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL溶剂样品即水、50μL浓度50％乙腈水溶液、300μL乙腈混合均匀，离心取上清液100μL，加入300μL 20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL双空白样品、50μL浓度50％乙腈水溶液、300μL乙腈混合均匀，离心取上清液100μL，加入300μL 20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL基质效应样品、50μL浓度50％乙腈水溶液、300μL乙腈混合均匀；离心取100μL上清液，与100μLneat溶液，200μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。基质效应样品为至少6个批次的空白基质。
将50μL回收率样品即空白基质、50μL浓度50％乙腈水溶液、300μL乙腈混合均匀；离心取100μL上清液，与100μLneat溶液，200μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
将50μL纯液体样品即乙腈、50μL浓度50％乙腈水溶液、300μL乙腈混合均匀；离心取100μL上清液，与100μLneat溶液，200μL20％乙腈水溶液低速涡旋混匀，进样分析。
三、检测：将上述步骤二中处理后的校正标示样品、质控样品、内标样品、待测样品、双空白样品、溶剂样品、纯液体样品、基质效应样品以及回收率样品，分别注入液相色谱质谱联用仪中，对卡马西平以及卡马西平-d8成分进行定量检测，其得到的相应谱图见附图1～12。
其中，检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
固定相：填料粒径为5μm，直径2mm，长度50mm的Gemini C18色谱柱；
流动相：流动相为为A和B的混合体系，A为甲酸水溶液，其中甲酸与水的体积比为0.1:100，A的配置方法为在1L玻璃瓶中加入1000mL H2O and 1.0mL甲酸，混匀。
B为甲酸乙腈溶液，其中甲酸与乙腈的体积比为0.1:100，B的配置方法为在1L玻璃瓶中加入1000mL乙腈and 1.0mL甲酸，混匀。
洗脱梯度为：
0.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％；
1.3min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％；
2min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％；
2.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％；
3min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％。
进样器清洗液为：强洗为进样器清洗液1，进样器清洗液1为30％乙腈水溶液，30％乙腈水溶液配置方法为在1L玻璃瓶中加入500mL乙腈和500mL H2O，混匀。
弱洗为进样器清洗液2，进样器清洗液2为甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、水、氨水按照体积比30:30:10:10:20:1混合而成。进样器清洗液2的配置方法为在1L玻璃瓶中加入300mL甲醇，300mL乙腈，100mL异丙醇，100mL丙酮，200mL H2O，10mL NH3·H2O，混匀。
稀释液1为乙腈。
稀释液2为50％乙腈水溶液，在1L玻璃瓶中加入500mL乙腈，500mL H2O，混匀。
稀释液3为20％乙腈水溶液，在1L玻璃瓶中加入200mL乙腈，800mL H2O，混匀。
流速：0.4mL/min；
柱温：40℃；
自动进样器温度：8℃；
进样量：5μL。
在进样时，卡马西平的保留时间大约为1.30min，卡马西平-d8的保留时间大约为1.27min。
其中，检测步骤中，按照下述质谱条件进行检测：
离子源：电喷雾离子源；
离子化模式：正离子模式；
分辨力模式为Unit；
碰撞气、气帘气、雾化气、辅助气1和辅助气2均为高纯氮气；
喷雾电压5000V。
四、回归和数据处理
回归模型为y＝ax+b,线性回归，权重因子1/x2。，y为分析物与内标的峰面积比，x为校正标示样中分析物的浓度。
计算软件为Analyst 1.6.3,Analyst software Microsoft Office 2003orother version，所有浓度值保留3位有效数字，％Bias和％CV保留到小数点后1位。
分析物：卡马西平；
基质：血浆(肝素锂为抗凝剂)；
校正曲线范围：0.500ng/mL～500ng/mL；
定量下限：0.500ng/mL；
回收率：92.2％～98.0％；
基质效应：79.0％～98.0％；
线性范围：1.0ng/mL～1000ng/mL。
本发明中应用了具体实施例对本发明的原理及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只是用于帮助理解本发明的方法及其核心思想；同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明的思想，在具体实施方式及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。

Claims (7)

1.一种HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一、样品制备：
制备校正标示样品：以卡马西平为溶质，以50％乙腈水溶液为溶剂，配制卡马西平梯度浓度为20～20000ng/mL的校正标示工作液；分别取各浓度校正标示工作液，用空白基质稀释20倍，得到校正标示样品；
制备质控样品：以卡马西平为溶质，以50％乙腈水溶液为溶剂，配制卡马西平梯度浓度为20～16000ng/mL的质控工作液；分别取各浓度质控工作液，用空白基质稀释20倍，得到质控样品；
制备内标样品：以卡马西平-d8为溶质，以甲醇二甲基亚砜溶液为溶剂，得到卡马西平-d8储备液；将储备液用50％乙腈水溶液稀释得到卡马西平-d8浓度为50.0ng/mL、10000ng/mL的内标工作液；分别取各浓度内标工作液，用空白基质稀释20倍，得到内标样品；
步骤二、样品处理：
分别向校正标示样品、质控样品、内标样品以及待测人血浆中加入50.0ng/mL卡马西平-d8内标工作液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍；
分别向空白基质和水样中加入50％乙腈水溶液，再分别用乙腈稀释4倍，分别离心取上清液，然后再分别将上清液用20％乙腈水溶液稀释4倍；
步骤三、样品检测：
将上述步骤二中处理后的校正标示样品、质控样品、内标样品、待测人血浆、空白基质和水样分别注入液相色谱质谱联用仪中，对卡马西平以及卡马西平-d8成分进行定量检测。
2.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述步骤一中甲醇二甲基亚砜溶液中，甲醇和二甲基亚砜的体积比为1:1。
3.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
固定相：填料粒径为5μm，直径2mm，长度50mm的Gemini C18色谱柱；
流动相：流动相为为A和B的混合体系，A为甲酸水溶液，其中甲酸与水的体积比为0.1:100；B为甲酸乙腈溶液，其中甲酸与乙腈的体积比为0.1:100；
洗脱梯度为：
0.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％；
1.3min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％；
2min，A的体积百分比为0％，B的体积百分比为100％；
2.01min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％；
3min，A的体积百分比为68％，B的体积百分比为32％。
4.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，所述液相色谱进样器清洗液为：强洗采用30％乙腈水溶液，弱洗采用甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、水、氨水按照体积比30:30:10:10:20:1混合而成。
5.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
流速：0.2～0.6mL/min。
6.根据权利要求5所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述液相色谱条件进行检测：
流速：0.4mL/min；
柱温：40℃；
自动进样器温度：8℃；
进样量：5μL。
7.根据权利要求1所述的HPLC-MS-MS法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法，其特征在于，所述检测步骤中，按照下述质谱条件进行检测：
离子源：电喷雾离子源；
离子化模式：正离子模式；
分辨力模式为Unit；
碰撞气、气帘气、雾化气、辅助气1和辅助气2均为高纯氮气；
喷雾电压5000V。
CN201911420890.0A 2019-12-31 2019-12-31 一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法 Active CN111157641B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911420890.0A CN111157641B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911420890.0A CN111157641B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN111157641A true CN111157641A (zh) 2020-05-15
CN111157641B CN111157641B (zh) 2022-09-16

Family

ID=70560534

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201911420890.0A Active CN111157641B (zh) 2019-12-31 2019-12-31 一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN111157641B (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112362770A (zh) * 2020-10-28 2021-02-12 上海药明康德新药开发有限公司 一种利用高效液相串联质谱检测5-氨基酮戊酸的方法
CN112433019A (zh) * 2020-12-28 2021-03-02 南京广祺医药科技有限公司 一种定量测定人血浆中卡马西平的方法及应用
CN112903849A (zh) * 2021-01-21 2021-06-04 山东英盛生物技术有限公司 一种检测血液中右佐匹克隆含量的方法、试剂盒及其应用
CN114166987A (zh) * 2020-12-17 2022-03-11 范国荣 一种同时测定人血浆中十二种酪氨酸激酶抑制剂浓度的方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109541107A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中卡马西平浓度的方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109541107A (zh) * 2018-11-30 2019-03-29 徐州佳生医药科技有限公司 一种液质联用测定血浆中卡马西平浓度的方法

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
DIEGO SOARES DOMINGUES ET AL.: "Determination of Drugs in Plasma Samples by High-Performance Liquid Chromatography-TandemMass Spectrometry for Therapeutic Drug Monitoring of Schizophrenic Patients", 《JOURNAL OF ANALYTICAL TOXICOLOGY》 *
张颖超 等: "HPLC-MS/MS法测定人血浆卡马西平的浓度及在室间质评中的应用", 《中国临床药理学杂志》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112362770A (zh) * 2020-10-28 2021-02-12 上海药明康德新药开发有限公司 一种利用高效液相串联质谱检测5-氨基酮戊酸的方法
CN112362770B (zh) * 2020-10-28 2021-09-17 上海药明康德新药开发有限公司 一种利用高效液相串联质谱检测5-氨基酮戊酸的方法
CN114166987A (zh) * 2020-12-17 2022-03-11 范国荣 一种同时测定人血浆中十二种酪氨酸激酶抑制剂浓度的方法
CN112433019A (zh) * 2020-12-28 2021-03-02 南京广祺医药科技有限公司 一种定量测定人血浆中卡马西平的方法及应用
CN112903849A (zh) * 2021-01-21 2021-06-04 山东英盛生物技术有限公司 一种检测血液中右佐匹克隆含量的方法、试剂盒及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
CN111157641B (zh) 2022-09-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN111157641B (zh) 一种hplc-ms-ms法测定人血浆中卡马西平成分含量的方法
CN104614479B (zh) 一种食品中维生素的检测方法
EP1962097A1 (en) Mass spectrometric quantitative detection of methyl malonic acid and succinic acid using hilic on a zwitterionic stationary phase
CN105548412A (zh) 一种同时测定食品中5种氨基糖苷类药物残留量的方法
CN105784894B (zh) 一种用于中药的农药残留检测方法
CN109030658B (zh) 一种婴幼儿乳粉中低聚果糖和棉子糖的检测方法
CN113219074A (zh) 一种HPLC-MS/MS法测定犬血浆中Rutin和Ombuoside的浓度的方法
CN113720946A (zh) 检测血液中多种类固醇激素的方法及试剂盒
CN110988193A (zh) 一种检测水产品中晚期糖基化终末产物的方法
CN112748198A (zh) 一种液相色谱串联质谱技术检测血清中抗真菌药物的方法装置
CN107422053B (zh) 一种液质联用检测化妆品中三氯乙酸的方法
CN111912920A (zh) 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中霉酚酸及其代谢物的方法
CN105092733B (zh) Lc‑ms测试物中不挥发性缓冲盐含量的降低方法和装置
CN112834680B (zh) 一种测定肿瘤患者血浆中替加氟、吉美嘧啶和5-氟尿嘧啶浓度的方法
CN111198235B (zh) 一种血浆中异橙黄酮含量的检测方法
CN104991027B (zh) 降低lc‑ms测试物中不挥发性缓冲盐含量的方法
CN113567590B (zh) 一种hplc-ms-ms法测定sd大鼠血浆中咪喹莫特成分含量的方法
CN111474279B (zh) 检测大环内酯抗生素化合物的方法和试剂盒
CN113567589B (zh) 一种hplc-ms-ms法测定sd大鼠血浆中北五加皮苷n成分含量的方法
CN113588818B (zh) Sd大鼠血浆中北五加皮苷m含量的测定方法
CN111896645A (zh) 一种超高效液相色谱串联质谱技术检测血浆中霉酚酸及其代谢物的试剂盒
CN105699575A (zh) 高效液相色谱串联质谱技术检测唾液中皮质醇的方法及试剂盒
CN111307992A (zh) 一种定量检测pm2.5中有机酸的柱前衍生液质联用分析方法
CN104991028B (zh) Lc‑ms测试物中不挥发性缓冲盐含量的降低方法
CN109358140A (zh) 一种利福昔明原料及其制剂组分的检测方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant