CN111154682A - 一种鼠李糖乳杆菌、微生物菌剂及食物制品 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus FLRH93)，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60956。经动物的损伤干预实验结果显示，鼠李糖乳杆菌FLRH93可明显改善药物造成的肠损伤，组织染色切片表明该菌株维持了小肠结构的完整性，减少了药物处理后的杯状细胞损失，而且能够调控Bcl‑2和NLRP3的分泌，进而减少炎症因子IL1‑β和TNF‑α的产生。本发明属于微生物技术领域，提供的菌株能提高药物损伤小鼠的存活率，并且还能显著促进创伤皮肤的愈合。
Description
技术领域
本发明属于微生物技术领域，涉及新的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956(Lactobacillus rhamnosus FLRH93)菌株及其益生功能，尤其是用于保护由临床治疗后的损伤。
背景技术
药物治疗是临床大多数疾病的主要诊治方法，如5-氟尿嘧啶(5-FU)等作为一种常用的 化疗药物，被广泛的应用于肿瘤的治疗过程中。然而很多药物都会有副作用，造成机体损伤， 如在接受5-FU之类的药物治疗后，有超过50％的患者出现口腔黏膜炎和肠黏膜炎。黏膜屏 障的损伤是最令患者衰弱的副作用之一，常常伴随着疼痛、菌血症和营养不良的症状。这些 并发症是由于肠细胞增殖和迁移减少以及细胞凋亡增加所致，这些因素共同破坏了正常的肠 屏障功能[3]。肠粘膜的破坏导致营养吸收减少和感染的易感性增加，影响患者的生活质量， 严重时会导致减少化疗剂量甚至中止治疗，最终影响了癌症的治疗。手术后也会留下创口， 存在感染、修复等问题。
局部麻醉剂、镇痛药和抗生素是对上述副作用的一些治疗方法。然而，这些治疗方法只 能短暂和暂时缓解化疗带来的副作用，不能减少这种病理状况的持续时间和严重程度。近年 来，临床共识支持使用益生菌来减轻对肠粘膜的损害，因为益生菌能够改变肠微生物群落的 组成，以及它们具有改善上皮屏障功能和免疫调节作用的能力。因此，使用具有益生潜力的 微生态制剂可促进临床放化疗等术后恢复，减轻并发症等，是当前最寄予厚望的发展前景之 一。
目前研究已经证明益生菌能够提高机体抗氧化的能力、调节炎症过程、促进免疫应答、 抑制致病菌的生长和定植、促进营养物质的吸收，改善肠道屏障等多种益生功能。故我们尝 试筛选益生菌，帮助恢复化疗药物诱导的肠道损伤，并探究其对肠道损伤修复的分子机制。
发明内容
本发明人鉴定了一种新的鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosus FLRH93菌株，经鉴定， 是一类厌氧，不产孢子的革兰氏阳性菌，菌体呈长杆状，在MRS琼脂平板培养基中呈白棕色， 圆形，光滑的菌落。本发明提供的鼠李糖乳杆菌Lactobacillus rhamnosusFLRH93可以在MRS 肉汤培养基上生长，是革兰氏阳性菌。
本发明提供一种鼠李糖乳杆菌，其菌株名称为Lactobacillus rhamnosusFLRH93，保藏于 广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60956，保藏日期为2020年1月12 日，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
本发明还提供一种损伤修复的微生物菌剂，包括所述的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956。
优选地，所述损伤为药物诱导的肠道损伤。
本发明还提供一种食物制品，包含所述的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956，或包含所 述的微生物菌剂；所述制品包括乳制品、蔬菜制品及饮料制品。
本发明还提供一种组合物，包含所述的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956；或包含所述 的微生物菌剂；包含所述的食物制品。
灌胃本发明提供的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956可以减少药物作用小鼠后的肠道组 织的完整性破坏和杯状细胞损失。在进一步的机制探究中发现，其能够上调Bcl-2在肠道中 的表达，并下调NLRP3的分泌，进而减少炎症因子IL1-β和TNF-α的产生，进而减少体内 炎症诱导的进一步损伤。在连续注射5-氟尿嘧啶的小鼠存活保护实验中，使用鼠李糖乳杆菌 GDMCC No：60956发酵乳处理的小鼠存活率是模型组的两倍。
总之，本发明提供的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956能够对机体损伤有一个很好的保 护性，这是一种很有前景的预防癌症化疗造成肠道损伤的潜在微生物制剂。本发明扩大了该 菌株的应用前景，支持新的益生菌治疗与抗癌治疗相关的机体损伤修复。
本发明提供的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956可用于制作保护机体损伤组合物成分， 还可以用于保健品和机体康复药品的复合剂。
附图说明
图1鼠李糖乳杆菌损伤修复的相关分子机制。鼠李糖乳杆菌通过维持杯状细胞的稳定， 上调Bcl-2蛋白的表达，抑制由5氟尿嘧啶诱导的活性氧的产生以及NLRP3的表达和相关炎 症因子TNF-α和IL-1β的合成分泌，从而保护肠道组织的完整性，进而保护机体健康。
图2鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳对机体损伤小鼠的食物摄入量、动物体重 和小肠长度的影响。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL 鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)，5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)。
图3鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳对机体损伤小鼠的小肠通透性的影响。其 中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌 GDMCCNo：60956的发酵乳100μL)，5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每 天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃 109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)。
图4鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对5氟尿嘧啶诱导的小鼠肠道损伤的病理组织学 分析。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李 糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)，5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg， 每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌 胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)。
图5鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳的灌胃对小鼠小肠组织中杯状细胞数量的 影响。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李 糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)，5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg， 每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌 胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)。
图6鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳的灌胃对小鼠血清中TNF-α和IL-1β分泌的影响。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠 李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)，5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300 mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg， 每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)。
图7鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956菌株对Caco-2细胞转录水平的差异性分析
图8鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对小鼠中5氟尿嘧啶诱导的肠道损伤的小肠组织 中NLRP3和Bcl-2蛋白表达的real-time PCR分析。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)， 5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93 组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No： 60956的发酵乳100μL)。
图9鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对小鼠中5氟尿嘧啶诱导的肠道损伤的小肠组织 中NLRP3和Bcl-2蛋白表达的Western Blotting分析。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)， FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)，5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93 组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No： 60956的发酵乳100μL)。
图10鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对小鼠中5氟尿嘧啶诱导的肠道损伤的小肠组织中NLRP3和Bcl-2蛋白表达的免疫组化分析。其中，CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)， 5-FU组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和5-FU+FLRH93 组(单次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No： 60956的发酵乳100μL)。
图11鼠李糖乳杆菌GDMCC 60956发酵乳的灌胃对化疗损伤小鼠死亡率的影响。CTL组(每天灌胃脱脂乳100μL)，FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No： 60956的发酵乳100μL)，5-FU组(两次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃脱脂乳 100μL)和5-FU+FLRH93组(两次腹腔注射5氟尿嘧啶300mg/kg，每天灌胃109CFU/mL 鼠李糖乳杆菌GDMCCNo：60956的发酵乳100μL)。
图12鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对阿霉素诱导的小鼠变化的影响。其中，DOX组(单次腹腔注射阿霉素10mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和DOX+FLRH93组(单次腹 腔注射阿霉素10mg/kg，每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳 100μL)。
图13鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对阿霉素诱导的小鼠肠道损伤的病理组织学分析。 其中，DOX组(单次腹腔注射阿霉素10mg/kg，每天灌胃脱脂乳100μL)和DOX+FLRH93组(单次腹腔注射阿霉素10mg/kg，每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956 的发酵乳100μL)。
图14鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对小鼠皮肤创伤愈合的影响。其中，Control组(每天灌胃脱脂乳100μL)和FLRH93组(每天灌胃109CFU/mL鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的发酵乳100μL)。
本发明提供的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956，其菌株名称为Lactobacilusrhamnosus. FLRH93，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60956，保藏日期为 2020年1月12日，保藏地址为广州市先烈中路100号大院59号楼5楼。
具体实施方式
以下结合实例来进一步解释本发明，但实施例仅用于说明本发明，而本发明的应用范围 不能以任何方式由这些实施例所限制。
实施例1：鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的分离与鉴定
将新鲜制备的泡菜用组织研磨棒进行研磨至浆状，生理盐水梯度稀释后涂布在含1％万古 霉素的MRS平板上，放至37℃厌氧恒温培养箱中培养48h。待菌落长出后，挑取单菌落， 在平板上划线分离，反复进行纯化培养，用革兰氏染色法观察菌落形态选出革兰氏阳性菌。 将分离得到的菌株液体培养后，平板培养，用接种环挑取单一的菌落作为模板，进行菌落PCR。 将阳性PCR产物送至公司测序。
将所分离菌菌株的16S rRNA碱基序列分析测序碱基序列进行比对分析，发现与数据库 里的鼠李糖乳杆菌序列一致，并保存于广东省微生物菌种保藏中心，保藏号为GDMCCNo： 60956。序列(即SEQ ID NO:1)如下：
实施例2：鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳的制备
将1mL活化的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956菌株接种到100mL脱脂乳(10％w/v)中。在37℃厌氧条件下培养24h，得到终密度为2×109CFU/mL发酵乳。
实施例3：鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对动物机体损伤模型的影响
6-8周龄雌性BABL/c小鼠(由南昌大学医学院动物实验中心提供)40只，圈养在笼中， 并维持在22℃±2℃的温度和65％±5％的湿度，具有12小时的明暗循环。所有动物护理和实 验程序均根据南昌大学动物科学部的指导，用于实验室动物的护理和使用。将小鼠随机分成 4组(每组10只动物)：CTL组(对照)，FLRH93组(对照+益生菌)，5-FU组(模型组)和5-FU+FLRH93组(模型+益生菌组)。CTL组和5-FU组每天灌胃脱脂乳100μL，FLRH93 组和5-FU+FLRH93组每天灌胃鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳100μL。在第10天 诱导胃肠粘膜炎，对5FU组和5-FU+FLRH93组小鼠进行单次腹腔注射(ip)5-FU(300 mg/kg)，CTL组和FLRH93组腹腔注射(ip)0.9％的NaCl(w/v)。在3天后用无水乙醚麻 醉动物，收集血液和小肠用于分析。每天统计体重和饮食质量。
鼠李糖乳杆菌损伤修复的相关分子机制如图1所示。
如图2所示，通过灌胃鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳能缓解因5氟尿嘧啶诱导的小鼠食物摄入量的减少、体重减轻和小肠缩短的状况，一定程度上缓解了宿主的机体损 伤。
实施例4：菌株对造模小鼠的肠道通透性的影响
截取实施例3中获取的小肠3-4cm，用无菌的预冷PBS清洗肠道内容物，清洗三遍。用 移液器吸取50μL蓝色葡聚糖2000(20mg/mL)灌入到各组的小肠中，用无菌棉线封闭两端， 放置到6孔细胞培养板内，加入含100U/mL青霉素和100μg/mL链霉素的无色DMEM培养基至4mL。放置到37℃，5％(v/v)CO2的细胞培养箱中孵育2h，之后吸取细胞培养板内的 培养液100μL，测定其在610nm处的吸光度值，作为判断小肠渗透的完整性。
实验结果如图3所示，表明鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956能够有效的保护由5氟尿嘧啶诱导的肠道屏障的破坏。
实施例5：菌株对造模小鼠的小肠组织病理评分和杯状细胞数量的测定
患肿瘤小鼠进行取样做组织病理切片分析，并进行病理评估，进一步对小肠进行了小肠 的AB-PAS染色，测定其杯状细胞的数量。如图4和图5所示，相对于模型组，灌胃鼠李糖 乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳保护了肠道组织结构的完整性，维持了杯状细胞数量的稳 定。
实施例6：菌株对造模小鼠血清中的促炎细胞因子的影响
把实施例3得到的血清放4℃冰箱12h，之后5000r/min离心10min，分离血清，采用生物素双抗体夹心ELISA法测定小鼠血清中TNF-α和IL-1β的水平。具体操作按照对应细胞因子的ELISA试剂盒说明书方法进行。
如图6所示，相较于5-FU组，FLRH93发酵乳灌胃组显著下调了血清中TNF-α和IL-1β的表达水平，进而下调了炎症的产生。
实施例7：鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956菌株对Caco-2细胞转录水平的差异性分析
按照转录组测序的要求准备细胞，将结肠癌Caco-2细胞培养至105个/mL，弃去培养基， 加入鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956(用无双抗的DMEM培养基重悬到密度为108CFU/mL) 菌株共孵育2h。之后用Trizol法提取总RNA，并用DNase I消化DNA杂质，之后以mRNA 为模板合成cDNA。将cDNA送样到华大基因公司，进行细胞转录组的高通量测序，研究鼠 李糖乳杆菌GDMCC No：60956菌株引起的细胞转录水平的变化。
如图7所示，鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956引起1743个基因的转录差异，其中有917个基因表达上调，826个基因表达下调。其中，与对照组相比NLRP3下调了22.5％和Bcl-2上调了175％。
实施例8：菌株对造模小鼠的Bcl-2和NLRP3蛋白表达的real-time PCR分析
截取实施例3中的小肠组织30mg，混合并均质化，使用Trizol试剂(Invitrogen，Carlsbad， CA)提取总RNA。使用RT 2 First Strand Kit(Qiagen)将RNA逆转录成互补DNA。在ABI 7900 HT Fast Real-Time PCR System(Applied Biosystems，Foster City，CA)上用RT 2 SYBR Green qPCR Mastermix(Qiagen)进行Q-PCR。2个与肠道损伤相关的基因和管家基因的引 物购自Generay Biotech(中国上海)，包括NLRP3(R：5’-GCAGCCCTGCTGTTTCAGCAC-3’； F:5’-CTGTGTGTGGGACTGAAGCAC-3’)和Bcl-2(R：5’-TACTGCTTTAGTGAACCTTTT-3’； F:5’-TTGTGGCCTTCTTTGAGTTCG-3’)。管家基因甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH:R： 5’-CTGAACGGGAAGCTCACTGG-3’；F:5’-ATGCCTGCTTCACCACCTTC-3’)用于标准化。 表达的倍数差异计算为阈值循环(2-△△Ct)。
如图8所示，与正常对照组相比，用5-FU组的小鼠的Bcl-2的表达量显著下降，NLRP3 表达量显著升高。然而，鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳灌胃组的小鼠显著减缓了 5-FU诱导的NLRP3表达的升高和Bcl-2的表达的下降。
实施例9：菌株对造模小鼠的Bcl-2和NLRP3蛋白表达的Western Blotting分析
截取实施例3中的回肠，用液氮研磨成粉末状，按组织和缓冲液1:10的比例加入蛋白上 样缓冲液溶解，将溶解液煮沸5分钟，冷却至室温后取上清液，按照Chen的方法进行Western 印迹方案和数据分析的细节。一抗包括Anti-NLRP3 Polyclonal Antibody(rabbit，1:1000， solarbio，China)、Anti-BCL2 Polyclonal Antibody(rabbit，1:1000，solarbio，China)和Anti-β-Actin Polyclonal antibody(rabbit，1:1000，solarbio，China)和Goat Anti-rabbit IgG/HRP antibody(rabbit， 1:5000，solarbio，China)。
如图9所示，与正常对照组相比，用5-FU组的小鼠的Bcl-2的表达量显著下降，NLRP3 表达量显著升高。然而，鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳灌胃组的小鼠显著减缓了 5-FU诱导的NLRP3表达的升高和Bcl-2的表达的下降。
实施例10：菌株对造模小鼠的Bcl-2和NLRP3蛋白表达的免疫组化分析
截取实施例3中的回肠，送样到公司进行Bcl-2和NLRP3蛋白表达的免疫组化分析。
如图10所示，与正常对照组相比，用5-FU组的小鼠的Bcl-2的表达量显著下降，NLRP3 表达量显著升高。然而，鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956发酵乳灌胃组的小鼠显著减缓了 5-FU诱导的NLRP3表达的升高和Bcl-2的表达的下降。
实施例11：验证鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956对化疗损伤动物的保护性
按照实施例3的实验条件培养。将小鼠随机分成4组(每组10只动物)：CTL组(对照)， FLRH93组(对照+益生菌)，5-FU组(模型组)和5-FU+FLRH93组(模型+益生菌组)。 CTL组和5-FU组每天灌胃脱脂乳100μL，FLRH93组和5-FU+FLRH93组每天灌胃FLRH93 发酵乳100μL。在第10天诱导胃肠粘膜炎，对5-FU组和5-FU+FLRH93组小鼠进行单次腹 腔注射(ip)5-FU(300mg/kg)，CTL组和FLRH93组腹腔注射(ip)0.9％的NaCl(w/v)。 在7天后再次对5-FU组和5-FU+FLRH93组小鼠进行单次腹腔注射(ip)5-FU(300mg/kg)， CTL组和FLRH93组腹腔注射(ip)0.9％的NaCl(w/v)进行上述腹腔注射。每天统计动物 的存活率。
如图11所示，5-FU+FLRH93组小鼠存活率(60％)是5-FU组(30％)的两倍。该实验结果证明FLRH93发酵乳的灌胃对化疗诱导的机体损伤具有防护性。
实施例12：菌株对阿霉素诱导的机体损伤的保护性
按照实施例3的实验条件培养。将小鼠随机分成2组(每组10只动物)：DOX组(模 型组)和DOX+FLRH93组(模型+益生菌组)。DOX组每天灌胃脱脂乳100μL，DOX+FLRH93 组每天灌胃FLRH93发酵乳100μL。在第10天诱导胃肠粘膜炎，对5-FU组和5-FU+FLRH93 组小鼠进行单次腹腔注射(ip)5-FU(300mg/kg)，CTL组和FLRH93组腹腔注射(ip)0.9％ 的NaCl(w/v)。在7天后再次对5-FU组和5-FU+FLRH93组小鼠进行单次腹腔注射(ip) 阿霉素(10mg/kg)，CTL组和FLRH93组腹腔注射(ip)0.9％的NaCl(w/v)进行上述腹 腔注射。每天统计动物的体重。在3天后用无水乙醚麻醉动物。对各组小鼠小肠进行HE染 色，分析其病理组织学评分。
如图12和图13所示，相对于DOX组，鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956干预后，显 著减缓了小鼠体重的下降和维持了小鼠肠道组织结构的完整性。该实验结果证明鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956的灌胃对阿霉素诱导的机体损伤具有保护性。
实施例13：菌株对鼠皮肤创伤愈合情况的影响
按照实施例3的实验条件培养。将小鼠随机分成2组(每组10只动物)：Control组(模 型组)和FLRH93组(模型+益生菌组)。Control组每天灌胃脱脂乳100μL，FLRH93组每 天灌胃FLRH93发酵乳100μL。在第7天对每只老鼠背部进行剃毛处理，然后用无菌手术刀 割开2cm大小的表皮伤口。实验进行24h，测定小鼠的伤口长度，统计与原始伤口(0h)大 小比值情况。
如图14所示，FLRH93能够显著提高小鼠皮肤创伤愈合速度。
以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明 的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本 发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。
序列表
<110> 深圳市沁帆科技有限公司
<120> 一种鼠李糖乳杆菌、微生物菌剂及食物制品
<160> 1
<170> SIPOSequenceListing 1.0
<210> 1
<211> 1459
<212> DNA
<213> Lactobacillus rhamnosus
<400> 1
tcaccttaaa cggctcgctc cctaaagggt tacgccaccg gcttcgggtg ttacaaactc 60
tcatggtgtg acgggcggtg tgtacaaggc ccgggaacgt attcaccgcg gcgtgctgat 120
ccgcgattac tagcgattcc gacttcgtgt aggcgagttg cagcctacag tccgaactga 180
gaatggcttt aagagattag cttgacctcg cggtctcgca actcgttgta ccatccattg 240
tagcacgtgt gtagcccagg tcataagggg catgatgatt tgacgtcatc cccaccttcc 300
tccggtttgt caccggcagt cttactagag tgcccaacta aatgctggca actagtcata 360
agggttgcgc tcgttgcggg acttaaccca acatctcacg acacgagctg acgacaacca 420
tgcaccacct gtcattttgc ccccgaaggg gaaacctgat ctctcaggtg atcaaaagat 480
gtcaagacct ggtaaggttc ttcgcgttgc ttcgaattaa accacatgct ccaccgcttg 540
tgcgggcccc cgtcaattcc tttgagtttc aaccttgcgg tcgtactccc caggcggaat 600
gcttaatgcg ttagctgcgg cactgaaggg cggaaaccct ccaacaccta gcattcatcg 660
tttacggcat ggactaccag ggtatctaat cctgttcgct acccatgctt tcgagcctca 720
gcgtcagtta cagaccagac agccgccttc gccactggtg ttcttccata tatctacgca 780
tttcaccgct acacatggag ttccactgtc ctcttctgca ctcaagtttc ccagtttccg 840
atgcacttcc tcggttaagc cgagggcttt cacatcagac ttaaaaaacc gcctgcgctc 900
gctttacgcc caataaatcc ggataacgct tgccacctac gtattaccgc ggctgctggc 960
acgtagttag ccgtggcttt ctggttggat accgtcacgc cgacaacagt tactctgccg 1020
accattcttc tccaacaaca gagttttacg acccgaaagc cttcttcact cacgcggcgt 1080
tgctccatca gacttgcgtc cattgtggaa gattccctac tgctgcctcc cgtaggagtt 1140
tgggccgtgt ctcagtccca atgtggccga tcaacctctc agttcggcta cgtatcattg 1200
ccttggtgag ccgttacctc accaactagc taatacgccg cgggtccatc caaaagcgat 1260
agcttacgcc atctttcagc caagaaccat gcggttcttg gatttatgcg gtattagcat 1320
ctgtttccaa atgttatccc ccacttaagg gcaggttacc cacgtgttac tcacccgtcc 1380
gccactcgtt caaaattaaa tcaagatgca agcacctttc aataatcaga actcgttcga 1440
cttgcatgta tagcacccg 1459
Claims (7)
1.一种鼠李糖乳杆菌，其特征在于：其菌株名称为Lactobacillus rhamnosus FLRH93，保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC No：60956。
2.一种能促进损伤修复的微生物菌剂，其特征在于：包括权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌GDMCC No：60956。
3.根据权利要求2所述的促进损伤修复的微生物菌剂，其特征在于：所述损伤为临床治疗后的损伤。
4.一种食物制品，其特征在于：包含权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌，或包含权利要求2或3所述的微生物菌剂；所述制品包括乳制品、蔬菜制品及饮料制品。
5.一种组合物，其特征在于：包含权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌；或包含权利要求2或3所述的微生物菌剂；或包含权利要求4所述的食物制品。
6.根据权利要求1所述的鼠李糖乳杆菌在制备促进损伤修复的药物中的用途。
7.根据权利要求6所述的鼠李糖乳杆菌在制备促进损伤修复的药物中的用途，其特征在于：所述损伤为临床治疗后的损伤。
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