CN111150750A - 一种酒萸肉的炮制方法及应用 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及中药炮制技术领域，具体涉及一种山茱萸的酒制方法及应用。所述的酒萸肉的制备方法包括以下步骤：将山茱萸药材中残留的果梗和果核筛分，除去，得山茱萸果肉。加入黄酒，拌匀，密闭容器，至酒被吸尽。上锅，隔水炖制。将炖后所得酒萸肉进行干燥，即得。制得的酒萸肉以药典规定的测定指标—莫诺苷和马钱苷总量、水溶性浸出物含量及水分为主要考察指标，并综合考虑炮制过程产生的副产物—5‑羟甲基糠醛含量，对炮制过程的工艺参数进行优化。显著缩短产品干燥时间，并提高产品成品收率，为生产企业降低人工和能源成本，提高产出，增大生产效益。本发明制得酒萸肉在制备治疗肾阴虚药物中的应用。

Description

一种酒萸肉的炮制方法及应用
技术领域
本发明属于中药炮制技术领域，具体涉及一种山茱萸的酒制方法及应用。
背景技术
山茱萸为山茱萸科植物山茱萸Cornus officinalis Sieb.et Zucc.的干燥成熟果肉，具有补益肝肾、收涩固脱之功效。临床使用的饮片品种有山萸肉和酒萸肉，其中山萸肉长于收涩固脱，酒制后补益作用增强，多用于补益的方剂，如金匮肾气丸、六味地黄丸等。酒萸肉是临床最为常用的饮片品种。药典规定酒萸肉的炮制方法为“取净山萸肉，照酒炖法或酒蒸法（通则0213）炖或蒸至酒吸尽；表面紫黑色或黑色，质滋润柔软”。对于炮制过程的加酒量、蒸或炖的时间等重要工艺参数药典中尚无规定。
山茱萸中含有多种化学成分，其中主要成分为环烯醚萜苷类，以莫诺苷和马钱苷为代表，两者在药材中含量较高，药典规定山茱萸中莫诺苷和马钱苷总量不得低于1.2%，酒萸肉中两成分总量不得低于0.70%；此外，山茱萸中含有丰富的多糖类成分，该类成分在受热过程中会发生热降解和美拉德反应，生成5-羟甲基糠醛。目前的研究表明5-羟甲基糠醛对人体横纹肌和内脏有损害，具有神经毒性，并能促进结肠小囊异常生长，有潜在的致癌和一定程度的基因毒性等危害。因此在酒萸肉的炮制工艺参数建立中既应考虑有效成分莫诺苷和马钱苷的含量，也要考虑5-羟甲基糠醛的含量，从而保证饮片在临床应用过程的安全、有效。
目前酒萸肉的炮制工艺多以酒蒸为主，如：山茱萸饮片及其炮制方法（CN109481489 A）提供了一种对鲜山茱萸去核并酒制的方法，工艺参数的确立以马钱苷含量为指标，未考虑含量较高的莫诺苷，且未考虑炮制过程产生的5-羟甲基糠醛情况；一种控制酒萸肉炮制工艺参数的指纹图谱建立方法（CN 109975442 A）提供了炮制过程中马钱苷、莫诺苷、没食子酸、原儿茶酸、5-羟甲基糠醛的含量测定方法，并依据此方法对山茱萸燀制时间、焖润时间、蒸制时间进行了考察，但没有提供加酒量、蒸制后产品的干燥工艺参数等。
基于以上情况，综合考虑酒萸肉产品质量评价指标—莫诺苷和马钱苷总量、水溶性浸出物含量（药典规定），炮制过程副产物—5-羟甲基糠醛含量，并同时考虑产品成品收率，建立切实可行的酒萸肉生产工艺，对中药饮片生产企业酒萸肉饮片的生产具有重要意义。
发明内容
鉴于现有技术存在的问题，本发明的目的是提供一种酒萸肉的炮制方法及应用。本发明提供的炮制方法制得的酒萸肉产品中莫诺苷和马钱苷含量及水溶性浸出物含量符合药典中对酒萸肉饮片的质量规定；产品的成品收率在98%以上，提高生产效率；副产物5-羟甲基糠醛含量在可控范围之内，可保证临床使用的安全、有效。本发明炮制方法制得的酒萸肉产品具有较好的滋阴作用，可为补益方剂的药效发挥提供物质基础。
为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案。
一种酒萸肉的炮制方法，具体包括以下步骤。
S1净制：将山茱萸药材中残留的果梗和果核筛分，除去，得山茱萸果肉。
S2焖润：加入黄酒，拌匀，密闭容器，至酒被吸尽。
S3炖制：上锅，隔水炖制。
S4干燥：将炖后所得酒萸肉进行干燥，即得。
进一步地，所述步骤S2中黄酒加入量为药材重:酒重=100:（30~50），焖润时间约1小时。
优选地，所述步骤S2中黄酒加入量为药材重:酒重=100:30。
进一步地，所述步骤S3中炖制时间为4~10 h。
优选地，所述步骤S3中炖制时间为6 h。
进一步地，所述步骤S4中干燥温度为40~60℃，干燥时间为3~5 h。
优选地，所述步骤S4中干燥温度为50℃，干燥时间为4 h。
一种酒炖法制得的酒萸肉在制备治疗肾阴虚药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果如下。
1）本发明以药典规定的测定指标—莫诺苷和马钱苷总量、水溶性浸出物含量为主要考察指标，并综合考虑炮制过程产生的副产物—5-羟甲基糠醛含量，对炮制过程重要的工艺参数：加酒量、炖制时间、干燥时间和干燥温度进行优化，得到酒萸肉的炖制工艺参数，可为饮片临床应用中的安全性和有效性提供保障。
2）本发明制备酒萸肉采用的是酒炖法，与酒蒸法相比可显著缩短产品干燥时间，并提高产品成品收率，为生产企业降低人工和能源成本，提高产出，增大生产效益。
3）山茱萸生用收涩固脱，酒制补益肝肾，本发明所得产品具有显著的补肾阴作用，在中药补益方剂中使用为药效的发挥提供保障。
附图说明
图1是5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷对照品液相色谱图。
图2是山萸肉中莫诺苷、马钱苷含量测定液相色谱图。
图3是酒萸肉中5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷含量测定液相色谱图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步的详细描述。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实施例，凡基于本发明内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1 山茱萸的酒炖工艺优化实验。
1.山茱萸的酒炖制备方法-加酒量实验。
一种山茱萸的酒炖制备方法，包括以下步骤。
（1）取净制山萸肉5份，每份20 g，分别按100:10、100:20、100:30、100:40、100:50比例加入黄酒，焖润至酒被吸尽，密闭容器，上锅炖4 h，取出，置搪瓷盘中平铺，50℃烘干。
（2）将所得酒萸肉粉碎，过4号筛，取粉末各0.1 g，精密称定，精密加入80%甲醇25mL，超声提取20 min，取出，滤过，取续滤液，过0.45 µm微孔滤膜，分别吸取10 µL注入高效液相色谱仪，测定5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷色谱峰面积，外标一点法计算含量，双样双针测定结果平均值如表1所示。
（3）将所得酒萸肉粉碎，过2号筛，照《中国药典》2015年版第四部，通则2201项下的冷浸法测定各样品水溶性浸出物含量，平行测定3份，结果平均值如表1所示。
Figure 937664DEST_PATH_IMAGE002
从表1可以看出，本发明选取加酒量为100:（30~50），其产品中5-羟甲基糠醛含量较低，约为0.26%；莫诺苷和马钱苷总含量较高，大于1.0%；水溶性浸出物含量较高，约为53.0%。当加酒量达到100:30时，随着加酒量的增加，5-羟甲基糠醛含量逐渐下降，莫诺苷和马钱苷的总量均不少于0.7%，符合药典规定，综合考虑原料成本，优选加酒量为100:30。
2.山茱萸的酒炖制备方法-炖制时间实验。
一种山茱萸的酒炖制备方法，包括以下步骤。
（1）取净制山萸肉10份，每份20 g，按100:30比例加入黄酒，焖润至酒被吸尽，密闭容器，分别上锅炖2、4、6、8、10 、12、14 h，取出，置搪瓷盘中平铺，50℃烘干。
（2）将所得酒萸肉粉碎，过4号筛，取粉末各0.1 g，精密称定，精密加入80%甲醇25mL，超声提取20 min，取出，滤过，取续滤液，过0.45 µm微孔滤膜，分别吸取10 µL注入高效液相色谱仪，测定5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷色谱峰面积，外标一点法计算含量，双样双针测定结果平均值如表2所示。
（3）将所得酒萸肉粉碎，过2号筛，照《中国药典》2015年版第四部，通则2201项下的冷浸法测定各样品水溶性浸出物含量，平行测定3份，结果平均值如表2所示。
Figure 854805DEST_PATH_IMAGE003
从表2可以看出，5-羟甲基糠醛随炖制时间逐渐延长含量逐渐增高；莫诺苷和马钱苷的总含量当炖制时间超过4小时后，含量不随时间的增加而显著增大，基本达到平稳，其含量约为1.0%，符合药典规定；水溶性浸出物含量当炖制时间超过4小时后可达约53.0%，炖制时间增长，会略有下降；且随着炖制时间的延长，酒萸肉湿度增大，会对烘干温度及时间有影响，综合考虑，炖制时间课控制在4~10h，优选炖制时间为6 h。
3.山茱萸的酒炖制备方法-干燥温度与时间实验。
一种山茱萸的酒炖制备方法，包括以下步骤。
取净制山萸肉6份，每份100 g，按100:30比例加入黄酒，焖润至酒被吸尽，密闭容器，上锅炖6 h，取出，置搪瓷盘中平铺，其中1#、2#在40℃烘干，3#、4#在50℃烘干，5#、6#在60℃烘干，分别在不同时间取出适量，按《中国药典》2015年版四部通则0832第二法测定水分，相同操作2份结果取平均值，结果如表3所示。
Figure 228017DEST_PATH_IMAGE004
《中国药典》2015年版一部山茱萸项下规定酒萸肉含水量不得过16.0%。为防止干燥过程中由于高温引起化学成分的变化，因此选择低温干燥，温度可在40℃~60℃。若选择较低的40℃进行干燥则需要较长的干燥时间，为确保水分低于16.0%应保持干燥5h以上；选择50℃和60℃进行干燥则3h即可达到规定的水分要求。为了确保水分低于16.0%最好选择干燥4h以上，并且为了节省能源，最优干燥温度宜选择50℃。综合考虑，优选50℃干燥4h。
4.山茱萸的酒炖制备方法-炖制次数实验。
一种山茱萸的酒炖制备方法，包括以下步骤。
取净制山萸肉100 g，按100:30比例加入黄酒，焖润至酒被吸尽，密闭容器，上锅分别炖6 h，取出，置搪瓷盘中平铺，50℃烘干。取出10g留作炖制1次样品。余下干燥的酒萸肉再按100:30比例加入黄酒，同法炖制，干燥后取10g留作炖制2次样品。同法操作，共炖制5次。将所得样品分别测定5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷含量及水溶性浸出物含量，测定方法同前。结果如表4所示。
Figure DEST_PATH_IMAGE005
从表4可以看出，5-羟甲基糠醛含量随着炖制次数的增加而升高，莫诺苷和马钱苷的总量随着炖制次数的增加而降低，水溶性浸出物含量受炖制次数影响较小。为了保证产品的安全有效，兼顾产品外观黑色有光泽，炖制1次即可。
实施例2 酒炖与酒蒸酒萸肉质量的比较。
一种山茱萸的酒炖制备方法，包括以下步骤。
取净制山萸肉2份，每份50 g，按100:30比例加入黄酒，焖润至酒被吸尽，密闭容器，上锅分别炖6 h，取出，置搪瓷盘中平铺，50℃干燥4h。
一种山茱萸的酒蒸制备方法，包括以下步骤。
取净制山萸肉2份，每份50 g，按100:30比例加入黄酒，焖润至酒被吸尽，上锅分别蒸制6 h，取出，置搪瓷盘中平铺，50℃干燥4h。
分别测定炖制和蒸制所得酒萸肉的原料及产品重量，计算产品得率；并测定5-羟甲基糠醛、莫诺苷、马钱苷含量及水溶性浸出物含量，同时测定产品水分，测定方法均同前。结果如表5所示。
Figure 92068DEST_PATH_IMAGE006
将酒炖法与酒蒸法进行比较，由于酒蒸过程药材与水蒸气充分接触，造成美拉德反应程度增大，所得产物5-羟甲基糠醛含量增高；由于与水蒸气充分接触造成产品湿度增大，50℃干燥4h所得产品水分不能满足药典规定的限度，若使水分低于16.0%应适当提高干燥温度，延长干燥时间，而这将造成生产成本的增高；由于与水蒸气充分接触造成大极性成分流失到锅底水中造成产品重量的减失，在干燥过程中发现搪瓷盘中残留糖浆样物质，应是造成产品得率降低的主要原因。
综合以上结果，本发明所述的山茱萸酒炖法制备酒萸肉与传统酒蒸相比可有效缩短生产周期，提高产品的成品率，可为企业节省人工、能源成本，提高生产效益。
实施例3 酒萸肉药理学研究实验-采用氢化可的松造模法复制小鼠肾阴虚模型。
取小鼠30只，随机分为空白组、模型组及实施例2中酒炖产品组，每组10只，按50mg/kg的剂量皮下注射氢化可的松。每日1次，连续5 d，复制肾阴虚模型。空白组和模型组灌胃给予纯净水，酒炖产品组灌胃给予酒萸肉水提液，将实施例2中酒炖产品取20g加10倍量纯净水浸泡0.5 h，加热回流提取3次，1 h /次，过滤，合并滤液，配制成浓度约为156 mg·ml-1的给药液，按每10 g体重灌胃0.1ml计算给药量，给药14天。于末次给药24 h后摘眼球取血，离心10 min（3 000 r·min-1），吸取上清液，以ELISA法测定小鼠血清中cAMP、cGMP的含量，结果如表6所示。
Figure DEST_PATH_IMAGE007
注：采用LSD检验，与空白组比较，#P<0.05，##P<0.01；与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01。
由表6结果可见，服用酒萸肉产品后，肾阴虚模型小鼠的血清中cAMP含量降低、cGMP含量升高，说明酒萸肉产品起到补肾阴的作用。

Claims (6)

1.一种酒萸肉的炮制方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1净制：将山茱萸药材中残留的果梗和果核筛分，除去，得山茱萸果肉；
S2焖润：加入黄酒，拌匀，密闭容器，至酒被吸尽；
S3炖制：上锅，隔水炖制；
S4干燥：将炖后所得酒萸肉进行干燥，即得。
2.如权利要求1所述的一种酒萸肉的炮制方法，其特征在于，S2中黄酒加入量为药材重:酒重=100:（30~50），焖润时间1小时。
3.如权利要求1所述的一种酒萸肉的炮制方法，其特征在于，S3中炖制时间为4~10 h。
4.如权利要求1所述的一种酒萸肉的炮制方法，其特征在于，S4中干燥温度为40~60℃。
5.如权利要求1所述的一种酒萸肉的炮制方法，其特征在于，干燥时间为3~5 h。
6.一种酒炖法制得的酒萸肉在制备治疗肾阴虚药物中的应用。
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