CN111148504B

CN111148504B - 含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物

Info

Publication number: CN111148504B
Application number: CN201880062456.7A
Authority: CN
Inventors: 金奎翰; 孙义东; 沈晋燮; 李泰龙
Original assignee: Amorepacific Corp
Current assignee: Amorepacific Corp
Priority date: 2017-09-26
Filing date: 2018-07-31
Publication date: 2023-02-03
Anticipated expiration: 2038-07-31
Also published as: KR20190035086A; US20200230044A1; JP7277444B2; KR102101869B1; US11185488B2; CN111148504A; WO2019066237A1; JP2020535135A

Abstract

本发明涉及一种含有1,2,3,4,6‑五‑O‑没食子酰基‑β‑D‑葡萄糖(以下，称为“PGG”)的皮肤外用剂组合物，更加详细而言，涉及通过含有PGG，在角质形成细胞中促进丝聚蛋白的生成，增加兜甲蛋白(loricrin)以及外皮蛋白(involucrin)的表达，促进正常的角质层的形成，由此强化皮肤屏障功能，从而能够提供改善皮肤保湿力的效果的皮肤外用剂组合物、其用途以及利用其的皮肤保湿方法。

Description

含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物

技术领域

本发明涉及一种含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(以下，称为“PGG”)的皮肤外用剂组合物，更加详细而言，涉及通过含有PGG，在角质形成细胞中促进丝聚蛋白的生成，增加兜甲蛋白(loricrin)以及外皮蛋白(involucrin)的表达，促进正常的角质层的形成，由此强化皮肤屏障功能，从而能够提供改善皮肤保湿力的效果的皮肤外用剂组合物、其用途以及利用其的皮肤保湿方法。

背景技术

角质层的主要功能是阻止皮肤的水分蒸发，或者从外部阻止有害物质的入侵，起到保护皮肤的功能。尤其，角质层中相对于干重量存在30％的水，其中20％存在于角质细胞(corneocyte)内，而10％存在于细胞间脂质。角质细胞内的水与丝聚蛋白分解的天然保湿因子(Natural moisturizing Factors；NMFs)结合而存在。

丝聚蛋白在表皮的分化过程中与最终分化有关而进行表达，除了丝聚蛋白之外，外皮蛋白和兜甲蛋白也是与保湿有关的重要的标记。兜甲蛋白是完成最终分化期间进行表达的蛋白质，在角质形成细胞发生分化而形成稳定的角质时需要，是占角质质量的70-85％的物质，其具有能够参与到谷氨酰胺转胺酶催化的肽之间的交联的谷氨酰胺和赖氨酸丰富的域，有助于角质形成蛋白质之间的交联，从而在角质形成中起到重要作用。如上所述兜甲蛋白在上部颗粒层中与细胞膜相互结合而完成蛋白质，因此在追踪角质形成细胞的最终分化过程时，作为示踪剂来使用。

丝聚蛋白、外皮蛋白、兜甲蛋白等标记的增加表示通过正常的角质层的形成，在角质细胞内作为NMF的前体的丝聚蛋白和细胞间脂质被正常化。因此，为了形成角质层以强化促进皮肤组织的水分维持的同时防止皮肤组织的水分损失的皮肤屏障，需要开发促进丝聚蛋白、外皮蛋白、兜甲蛋白等标记的表达的皮肤保湿用物质，由此防止皮肤老化，并从外部环境变化的大气干燥、紫外线以及各种有害物质保持皮肤健康。

专利文献1：韩国授权专利第10-1709734号(公告日：2017年2月23 日)

发明内容

要解决的技术问题

为此，本发明人在表皮细胞处理被报告为大豆、绿茶、人参等多种天然物质的标志物的多种物质，筛选增加丝聚蛋白的基因表达的物质之后，通过兜甲蛋白、外皮蛋白等的表达，确认保湿标记是否有增加，并确认到 1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖不仅增加丝聚蛋白的基因表达，还显示增加兜甲蛋白以及外皮蛋白的表达的结果。另外，确认到将1,2,3,4,6- 五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖与氢化植物油一同使用时，更能提高该功效，由此完成了本发明。

因此，本发明的目的在于，提供通过含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基- β-D-葡萄糖以及氢化植物油，促进正常的角质层的形成，从而能够提高皮肤保湿力的皮肤外用剂组合物、其用途以及利用其的皮肤保湿方法。

技术方案

为了达成所述目的，本发明提供作为有效成分含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油的用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物、其用途以及利用其的皮肤保湿方法。更加具体地，本发明提供在用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物的制造中，1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D- 葡萄糖以及氢化植物油的混合物的用途。另外，本发明提供利用作为有效成分含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油的皮肤外用剂组合物的皮肤保湿方法。

有益效果

本发明通过含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油，促进正常的角质层的形成，从而强化皮肤屏障功能，最终能够提供优秀的皮肤保湿力改善效果。

附图说明

图1是按照浓度处理PGG来确认细胞的生存力的结果的示意图。

图2是在角质形成细胞处理0.2ppm的PGG或者1ppm的PGG之后，分离出mRNA，测定基于PGG的外皮蛋白(IVL)以及兜甲蛋白(LOR)的基因表达量的结果的示意图。

图3是含PGG的剂型的皮肤水分含量增加程度的示意图。

图4是对含PGG的剂型的皮肤保湿度程度进行感官评价的结果的示意图。

最佳实施方式

本发明的皮肤外用剂组合物作为有效成分含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油。

1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖(1,2,3,4,6-penta-O-galloyl-β -D-glucose；PGG)为作用于生物体的单宁酸(tannin)，公知存在于多种药剂植物中并具有抗炎症、抗氧化作用、抗癌作用、抗病毒作用等多种生物学活性(参考：B.M.Choi,et al.,Neurosci.Lett,328:185-189,2002；L.L.Ho,et al.,Eur. J.Pharmacol.,453:149-158,2002；D.G.Kang,et al.,Eur.J.Pharmacol., 524:111-119,2005；S.J.Lee,et al.,Biol.Pharm.Bull.,29:2131-2134,2006)，存在于芍药根、姜黄叶在内的地上部分、核桃楸(Juglans mandshurica)等多种植物中，是具有以下化学式1的结构的化合物。

【化学式1】

本发明中使用的PGG可以是从多种植物通过本技术领域中公知的方法直接提取来使用，还可以是购买商业市售的商品来使用。

本发明中使用的氢化植物油为选自由氢化棕榈油、氢化油菜籽油、氢化芥花油、氢化橄榄油以及其混合物而成的群中的一种以上。

本发明的皮肤外用剂组合物相对于组合物总重量，可以含有0.01-1.0重量％、优选为0.05-0.2重量％的量的PGG。当PGG的含量不足0.01重量％时，无法获得充分的皮肤保湿效果，当超过1.0重量％时，安全性以及剂型稳定性可能会变低。

另外，本发明的皮肤外用剂组合物相对于组合物总重量，可以含有 0.001-2.0重量％、优选为1.2-1.7重量％的量的氢化植物油。当含有上述范围时，不仅适合显示本发明所意图的效果，还能满足组合物的安全性以及剂型稳定性全部，而且相对于费用，在效果方面也适合含有上述范围。具体地，当PGG和氢化植物油的混合物不足0.011重量％时，无法获得充分的皮肤保湿效果，当超过3.0重量％时，安全性以及剂型稳定性可能会变低。

本发明的组合物可以作为保湿用皮肤外用剂组合物来使用，其不仅提高丝聚蛋白的基因表达，还提高兜甲蛋白以及外皮蛋白的表达，从而能够引导皮肤角质形成细胞的分化，促进正常的角质层的形成，强化皮肤屏障功能。因此，可以作为预防或者改善因表皮分化不完全导致的干皮病、特应性皮炎、接触性皮肤病或者牛皮癣等的皮肤外用剂组合物来活用。

根据本发明的组合物并不局限于此，可以剂型化为化妆品组合物或者医药组合物。

根据本发明的组合物可以含有化妆品学或者皮肤科学上可允许的介质或者基剂而成为剂型化。其作为适合用于局部的所有剂型，例如可以提供为溶液、凝胶、固体、糊剂无水生成物、在水相分散油相获得的乳剂、悬浊液、微型乳剂、微胶囊、微细颗粒球或者离子型(脂质体)以及非离子型的嗉囊分散剂的形态，或者霜、护肤水、乳液、散粉、软膏、喷雾或者遮瑕棒的形态。另外，还可以作为泡沫形态或者进一步含有压缩的推进剂的气溶胶组合物形态使用。该类组合物可以根据本技术领域的通常的方法来制造。

另外，本发明的组合物可以含有脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、凝胶剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂(foaming agent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子型或者非离子型乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂、螯合剂、保存剂、维生素、阻隔剂、润湿剂、基础油、染料、颜料、亲水性或者亲油性活性剂、脂囊泡或者与化妆品中通常使用的任意其他成分相同的化妆品学或者皮肤科学领域中通常使用的助剂。所述助剂的导入量为在化妆品学或者皮肤科学领域通常所使用的量。

另外，为了增加皮肤保湿改善效果，本发明的组合物可以含有皮肤吸收促进物质。

另外，本发明可以提供用于改善皮肤保湿效果的根据本发明的皮肤外用剂组合物的用途。具体地，本发明在用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物、优选为化妆品组合物的制造中，可以将1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油的混合物作为有效保湿成分来使用。

另外，本发明可以提供在需要皮肤保湿的被检体的局部使用作为有效成分含有本发明的1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油的混合物的皮肤外用剂组合物，从而维持或者改善皮肤的保湿力的方法。

以下，举出试验例以及剂型例更加具体说明本发明的结构以及效果。然而，该试验例以及剂型例是为了有助于理解本发明而仅作为示例的目的提供的，本发明的范畴以及范围并不由以下例进行限定。

具体实施方式

【参考例1】PGG的准备

以下使用的PGG是从SIGMA-ALDRICH(西格玛-奥德里奇)得到的。

【参考例2】氢化植物油的准备

以下的氢化植物油是使用了从AAK Sweden AB得到的Akogel Plus。

【试验例1】PGG的细胞毒性的评价

将新生儿的角质形成细胞(keratinocyte)(从Lonza得到)使用KGM培养基(角化细胞培养基)在60mm细胞培养皿(cell culure dish)以1.25×10⁶细胞/皿的密度进行分株之后，在37℃、5％CO₂培养器中培养到80％程度的汇合(confluency)。然后，将PGG以0ppm、1ppm、2ppm以及4ppm的浓度处理细胞，培养4日之后，确认细胞的生存力。图1中示出确认结果。

观察图1，则可以确认到随着PGG的浓度差，在细胞生存力上没有显著差异，因此PGG为没有细胞毒性的物质。

【试验例2】丝聚蛋白基因表达量的测定(RNA分离以及RT-PCR)

将新生儿的角质形成细胞(keratinocyte)(从Lonza得到)使用KGM培养基在60mm细胞培养皿(cell culure dish)以1.25×10⁶细胞/皿的密度进行分株之后，在37℃、5％CO₂培养器中培养到80％程度的融合。然后，从大豆、绿茶、人参、其他天然物质中选择包含PGG的8种化合物作为试验对象(表 1)，各自用1ppm的该化合物处理细胞，培养2日。培养之后，去除培养基，添加1ml的试剂盒(Trizol；Invitrogen)，根据英杰(Invitrogen)公司的RNA分离法，分离出mRNA。利用紫外线检测仪(HEWLETT PACKARD；惠普公司)在260nm下对mRNA进行定量之后，实施RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction；逆转录-聚合酶链反应)。为了对各个样品进行基因分析，以作为互补基因的RPL13A为基准进行了修补，在以下表1中示出对各个样品的丝聚蛋白表达量。

【表1】

由天然物质获得的试验对象物质的丝聚蛋白表达增加率

化合物	丝聚蛋白增加(％)
		媒介物(对照群)	-
6,7,4`-三羟基异黄酮	103
		7,3`,4`-三羟基异黄酮	110
丁香脂素	103
		紫云英苷	105
(-)-表儿茶素(EC)	108
		芍药苷	116
芍药内酯苷	107
		PGG	229

如上述表1结果所示，可以确认到当为处理其他化合物的样品时，丝聚蛋白的表达增加率不高，当为处理PGG的样品时，相比对照群，确认到2倍以上的丝聚蛋白表达增加率。

【试验例3】外皮蛋白(IVL)、兜甲蛋白(LOR)基因增加实验(RNA 分离以及RT-PCR)

将新生儿的角质形成细胞使用KGM培养基在60mm细胞培养皿(cell culure dish)以1.25×10⁶细胞/皿的密度进行分株之后，在37℃、5％CO₂培养器中培养到80％程度的融合。然后，以0.2ppm或者1ppm的PPG处理所述角质形成细胞，并培养4日。培养之后，去除培养基，添加1ml的试剂盒(Trizol； Invitrogen)，根据英杰(Invitrogen)公司的RNA分离法，分离出mRNA。利用紫外线检测仪(HEWLETT PACKARD；惠普公司)在260nm下对mRNA 进行定量之后，使用LOR和IVL的引物(分别为LOR-Hs01894962_s1， IVL-Hs00846307_s1；其全部由LifeTechnologies(美国生命科技公司)得到)，实施RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction)。为了对各个样品进行基因分析，以作为互补基因的RPLP0为基准进行了修补，图2中示出结果。

观察图2，则可以确认到以0.2ppm浓度的PGG进行处理时，兜甲蛋白基因的表达量相比对照群几乎没有差异，而外皮蛋白基因相比对照群增加3 倍以上的表达量。

另外，可以确认到以1ppm浓度的PGG进行处理时，与对照群相比，外皮蛋白基因增加5倍，兜甲蛋白基因增加2倍以上。

【参考例3】实施例以及比较例的制造

按照以下表2的组分，通过通常的方法制造出柔软性化妆水(单位：重量％)。

【表2】

【试验例4】皮肤水分量以及皮肤保湿度的评价

为了观察上述参考例3的比较例1-5以及实施例1-3的皮肤保湿力，如下进行了评价。

将80名30-40几岁的女性分为8组，每组各10名，然后每日早晚两次分别在脸部涂抹比较例1-5或者实施例1-3的柔软性化妆水，涂抹8周。在涂抹开始之前、涂抹后经过四周、涂抹后经过8周的时刻，在恒温、恒湿条件(24℃、相对湿度40％)下利用皮肤水分测试仪(Corneometer CM825，C+K Electronic Co.,德国)测定皮肤的水分含量，在图3中示出该结果。图3 的结果值表示皮肤水分含量。

观察图3，则可以确认到当为不含有PGG和氢化植物油全部的比较例1 以及仅含有氢化植物油的比较例2时，皮肤水分含量几乎没有增加，而单独含有PGG的比较例3至5的情况相比比较例1，在第四周和第八周皮肤水分含量以浓度依赖方式发生增加。

另外，可以确认到一同含有PGG和氢化植物油的实施例1至3的情况相比比较例3，皮肤水分含量进一步增加。

另外，为了进行感官评价，使使用所述比较例1-5或者实施例1-3的柔软性化妆水的使用者对于使用前和使用后(涂抹后第四周)皮肤的保湿程度从1分到5分进行评分(1分：非常不好，5分：非常好)，并在图4中示出其结果。

观察图4，则可以确认到当为不含有PGG和氢化植物油全部的比较例1 以及仅含有氢化植物油的比较例2时，皮肤保湿程度几乎没有变化，而单独含有PGG的比较例3至5的情况相比比较例1，在涂抹后第四周皮肤保湿度发生增加，另外，一同含有PGG和氢化植物油的实施例1至3的情况相比比较例3至5，皮肤保湿度进一步增加。

Claims

1.一种用于皮肤保湿的化妆品组合物，其特征在于，作为有效成分含有由以下化学式1表示的1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖以及氢化植物油，

所述1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的含量相对于组合物总重量为0.1-1.0重量％，所述氢化植物油的含量相对于组合物总重量为1.2-1.7重量％：

【化学式1】

所述氢化植物油为选自由氢化棕榈油、氢化油菜籽油、氢化芥花油、氢化橄榄油以及其混合物而成的群中的一种以上。

2.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的含量相对于组合物总重量为0.1-0.2重量％，所述氢化植物油的含量相对于组合物总重量为1.2-1.7重量％。

3.根据权利要求1所述的化妆品组合物，其特征在于，所述组合物增加丝聚蛋白的基因表达。