CN117653562A - 一种具有抗衰老及提高免疫力功效的胶原蛋白肽组合物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种具有抗衰老及提高免疫力功效的胶原蛋白肽组合物及其制备方法。该组合物是由胶原蛋白肽和1,2,3,4,6‑五没食子酰葡萄糖按质量比为1:(0.1～0.4)组成。本发明研究发现，将胶原蛋白肽与1,2,3,4,6‑五没食子酰葡萄糖按一定质量比进行复配，不仅对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型具有优异的修复作用，还能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力，两者在抗衰老及提高免疫力方面具有协同的效果。此外，相较于市售普通胶原蛋白肽，本发明提供的胶原蛋白肽与1,2,3,4,6‑五没食子酰葡萄糖协同性更佳，其在抗衰老及提高免疫力方面具有更好的效果。
Description
技术领域
本发明属于化妆品技术领域，具体涉及一种具有抗衰老及提高免疫力功效的胶原蛋白肽组合物及其制备方法。
背景技术
胶原蛋白肽是胶原蛋白经酶解和热水解处理后制成的一种具有三螺旋结构、由2～20个氨基酸残基短序列组成的功能性肽类。其因为具有较低分子量、优异的水溶性、生物相容性及可降解性，近年来渐渐成为医药、生物材料和美容护肤等领域的一个研究热点。已有大量研究证实，胶原蛋白肽具有延缓皮肤衰老，防治骨质疏松、糖尿病，抗氧化，缓解肝功能损伤，促进伤口愈合，增强免疫力，改善学习记忆等多种功能，应用潜力巨大。
目前将胶原蛋白肽应用于制备抗衰老的产品较多，如CN 113520900A、CN116491615A，这些组合物除了添加胶原蛋白肽外，还复配多种活性成分，虽然具有良好的抗衰老效果，但是成本较大，并且其功效单一，并不具备提高免疫力的功效。
1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖(1,2,3,4,6-Pentagalloylglucose，PGG)是一种可水解单宁，属于没食子单宁或鞣花单宁类，具有多种的生物活性，包括抗氧化、抗癌、抗病毒、抗菌、抗炎、降糖等。
发明内容
本发明首次发现胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖在抗衰老及提高免疫力方面具有协同的效果，两者复配不仅对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型具有优异的修复作用，还能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力。
因此，本发明的第一个目的是提供一种具有抗衰老及提高免疫力功效的胶原蛋白肽组合物，其包括胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖，所述的胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的质量比为1:(0.1～0.4)。
优选的，所述的胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的质量比为1:(0.15～0.3)。
优选的，所述的胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的质量比为1:0.25。
优选的，所述的胶原蛋白肽是通过以下方法制备得到：
(1)将新鲜的鱼皮洗净，匀浆搅碎后，依次用氯化钠溶液、乙醇溶液进行浸泡，过滤，用蒸馏水反复清洗固体物后，备用；
(2)将固体物分散于乙酸溶液中，用胶体磨混匀后以流速8～10mL/min泵入高压脉冲电场处理室，在电场强度15～30kV/cm，脉冲数6～10个的条件下处理，处理结束后调节pH值至中性，加入蛋白酶，在45～55℃下进行酶解3～5h，灭酶后离心取上清液，将上清液超滤，滤液冻干，得到胶原蛋白肽。
优选的，步骤(1)中，所述的氯化钠溶液的浓度为质量分数5～10％，所述的乙醇溶液的浓度为质量分数20～50％，所述浸泡的时间为6～12h。
优选的，步骤(2)中，所述的固体物和乙酸溶液混合的料液比为1g:5～10mL，所述的乙酸溶液的浓度为0.5～1M，所述的蛋白酶的用量为3000～4000U/g底物。
优选的，步骤(2)中，所述的蛋白酶为枯草芽孢杆菌中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶中的至少一种。
优选的，步骤(2)中，所述的超滤是用截留分子量100kD的超滤膜超滤。
本发明的第二个目的是提供上述的胶原蛋白肽组合物在制备具有抗衰老及提高免疫力功效的产品中的应用。
优选的，所述的产品包括化妆品或护肤品。
优选的，所述的化妆品或护肤品包括膏霜、乳液和精华。
本发明的第三个目的是提供一种化妆品或护肤品，其包含上述的胶原蛋白肽组合物。
优选的，所述的胶原蛋白肽组合物在化妆品或护肤品中的添加量为质量分数2～10％。
本发明研究发现，将胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖按一定质量比进行复配，不仅对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型具有优异的修复作用，还能增强巨噬细胞吞噬中性红的能力，该结果表明，胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖在抗衰老及提高免疫力方面具有协同的效果。此外，相较于市售普通胶原蛋白肽，本发明提供的胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖协同性更佳，其在抗衰老及提高免疫力方面具有更好的效果。
具体实施方式
以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。下述实施例中配方的组分，若无特别说明，均为常规市售产品。
下述实施例2-3中的胶原蛋白肽为本发明实施例1制得，市售普通胶原蛋白肽购自西安瑞尔丽生物工程有限公司。
实施例1：胶原蛋白肽的制备
一种胶原蛋白肽的制备方法，包括以下步骤：
(1)将新鲜的鱼皮洗净，匀浆搅碎后，加入质量分数为10％的氯化钠溶液浸泡6h，过滤，往固体物中加入质量分数为40％的乙醇溶液浸泡12h，过滤，用蒸馏水反复清洗固体物后，备用；
(2)将固体物按料液比为1g:10mL分散于浓度为0.5M的乙酸溶液中，用胶体磨混匀后以流速10mL/min泵入高压脉冲电场处理室，在电场强度25kV/cm，脉冲数8个的条件下处理，处理结束后调节pH值至中性，加入酶用量为3000U/g底物的枯草芽孢杆菌中性蛋白酶，在50℃下进行酶解4h，灭酶后，4℃、12000×g离心10min，取上清液，将上清液用截留分子量100kD的超滤膜超滤，滤液冻干，得到胶原蛋白肽。
实施例2：胶原蛋白肽联合1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型的修复作用
(1)细胞培养
将人皮肤成纤维细胞(HSF细胞，购自赛默飞)用含10％小牛血清、1％青霉素和1％链霉素的DMEM培养基，于37℃、5％CO2培养箱中培养，取对数生长期细胞进行试验。
(2)给药组制备
以DMEM为溶剂配制以下浓度的胶原蛋白肽组合物：
A组：胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.01mg/mL；
B组：胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.015mg/mL；
C组：胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.025mg/mL；
D组：胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.03mg/mL；
E组：胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.04mg/mL；
F组：市售普通胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.025mg/mL；
G组：胶原蛋白肽0.1mg/mL；
H组：1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.025mg/mL。
(3)胶原蛋白肽组合物对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型的修复作用
取对数生长期的HSF细胞，调整细胞密度为4.5×104个/mL，接种于96孔板，孵育24h后，移除孔中溶液。每孔加入100μL以DMEM为溶剂配制的浓度为1.4mmol/L H2O2溶液孵育1h，制备氧化损伤细胞模型。以100μL DMEM代替H2O2作为对照组。移除孔中溶液并使用PBS冲洗2次，每孔加入100μL以DMEM为溶剂配制的给药组A-H组的溶液，置于培养箱中孵育24h，移除孔中溶液，使用PBS冲洗2次，根据MTT测定细胞活力方法进行操作，使用酶标仪测定其在490nm处的吸光度值OD。计算细胞活力。每组3个重复，取平均值。
结果显示，1.4mmol/L H2O2作用的HSF细胞活力为72.48％。加入A-E组制得的溶液孵育24h后，细胞活力分别为93.25％、95.67％、98.53％、97.40％、96.08％，该结果表明将胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖按一定质量比进行复配，对H2O2诱导的细胞损伤具有修复作用，能提升细胞活力，尤其是当两者按质量比1:0.25复配时提升细胞活力的效果最佳。而加入F-H组制得的溶液进行相同处理，细胞活力分别为91.22％、84.75％、80.16％，该结果表明，相较于市售普通胶原蛋白肽，本发明提供的胶原蛋白肽提升细胞活力的效果更佳，并且胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖复配后对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型的修复效果优于以上两组分单独使用的效果。综上所述，本发明提供的胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对H2O2诱导的HSF细胞衰老模型具有优异的修复作用，两者相互作用发挥协同的抗衰老效果。
实施例3：胶原蛋白肽联合1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖对巨噬细胞吞噬能力的影响
(1)细胞培养
将小鼠单核巨噬细胞(Raw264.7，购自美国ATCC公司)用含10％胎牛血清、1％青霉素和1％链霉素的DMEM培养基，于37℃、5％CO2培养箱中培养，取对数生长期细胞进行试验。
(2)胶原蛋白肽组合物对巨噬细胞吞噬能力的影响
取对数生长期的Raw264.7细胞，调整细胞浓度，将其接种于96孔板中，使得细胞浓度为2×104个/孔，然后加入不同浓度的胶原蛋白肽组合物(表1)进行处理。以加入脂多糖(LPS)为阳性对照，以加入PBS缓冲液为阴性对照(表1)。培养24h后吸去培养基，用PBS洗涤多余的培养基，加入0.33％中性红，37℃下，5％ CO2孵育30min，PBS洗净多余中性红，加细胞裂解液(无水乙醇:冰醋酸＝1:1，体积比)，震荡10～15mim后，在酶标仪上540nm处测吸光度值，通过吸光值的大小评价样品促进巨噬细胞吞噬中性红能力。每组3个重复，取平均值，结果见表1。
表1胶原蛋白肽组合物对巨噬细胞Raw264.7吞噬中性红能力的影响
| 组别 | 剂量 | OD540nm |
| 阴性对照 | PBS | 0.54±0.05 |
| 阳性对照 | LPS 0.01mg/mL | 0.69±0.07* |
| A组 | 胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.01mg/mL | 1.03±0.11*** |
| B组 | 胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.015mg/mL | 1.09±0.08*** |
| C组 | 胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.025mg/mL | 1.18±0.15*** |
| D组 | 胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.03mg/mL | 1.14±0.17*** |
| E组 | 胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.04mg/mL | 1.12±0.20*** |
| F组 | 市售普通胶原蛋白肽0.1mg/mL+1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.025mg/mL | 1.05±0.09*** |
| G组 | 胶原蛋白肽0.1mg/mL | 0.91±0.14** |
| H组 | 1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖0.025mg/mL | 0.57±0.08 |
注：与阴性对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01，***P＜0.001。
由表1可知，胶原蛋白肽单独给药能显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力，活性比阳性对照LPS强，而1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖单独给药几乎没有影响，与阴性对照组相当。胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖联合给药具有协同的效果，能进一步显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力，尤其当两者以质量比1:0.25复配时，协同效果最佳。此外，相较于市售普通胶原蛋白肽，本发明提供的胶原蛋白肽增强巨噬细胞吞噬中性红的能力更佳。综上所述，本发明提供的胶原蛋白肽与1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖复配使用能显著增强巨噬细胞吞噬中性红的能力，两者相互作用发挥协同的提高免疫力的效果。
以上仅是本发明的优选实施方式，应当指出的是，上述优选实施方式不应视为对本发明的限制，本发明的保护范围应当以权利要求所限定的范围为准。对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明的精神和范围内，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种具有抗衰老及提高免疫力功效的胶原蛋白肽组合物，其特征在于，包括胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖，所述的胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的质量比为1:(0.1～0.4)。
2.根据权利要求1所述的胶原蛋白肽组合物，其特征在于，所述的胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的质量比为1:(0.15～0.3)。
3.根据权利要求2所述的胶原蛋白肽组合物，其特征在于，所述的胶原蛋白肽和1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖的质量比为1:0.25。
4.根据权利要求1所述的胶原蛋白肽组合物，其特征在于，所述的胶原蛋白肽是通过以下方法制备得到：
(1)将新鲜的鱼皮洗净，匀浆搅碎后，依次用氯化钠溶液、乙醇溶液进行浸泡，过滤，用蒸馏水反复清洗固体物后，备用；
(2)将固体物分散于乙酸溶液中，用胶体磨混匀后以流速8～10mL/min泵入高压脉冲电场处理室，在电场强度15～30kV/cm，脉冲数6～10个的条件下处理，处理结束后调节pH值至中性，加入蛋白酶，在45～55℃下进行酶解3～5h，灭酶后离心取上清液，将上清液超滤，滤液冻干，得到胶原蛋白肽。
5.根据权利要求4所述的胶原蛋白肽组合物，其特征在于，步骤(1)中，所述的氯化钠溶液的浓度为质量分数5～10％，所述的乙醇溶液的浓度为质量分数20～50％，所述浸泡的时间为6～12h；步骤(2)中，所述的固体物和乙酸溶液混合的料液比为1g:5～10mL，所述的乙酸溶液的浓度为0.5～1M，所述的蛋白酶的用量为3000～4000U/g底物。
6.权利要求1-5任一项所述的胶原蛋白肽组合物在制备具有抗衰老及提高免疫力功效的产品中的应用。
7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述的产品包括化妆品或护肤品。
8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述的化妆品或护肤品包括膏霜、乳液和精华。
9.一种化妆品或护肤品，其特征在于，包含权利要求1-5任一项所述的胶原蛋白肽组合物。
10.根据权利要求9所述的化妆品或护肤品，其特征在于，所述的胶原蛋白肽组合物在化妆品或护肤品中的添加量为质量分数2～10％。
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Citations (16)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006342107A (ja) * | 2005-06-09 | 2006-12-21 | Nitta Gelatin Inc | コラーゲンペプチド含有化粧料組成物とその製造方法 |
| CN101091789A (zh) * | 2006-06-19 | 2007-12-26 | 李勇 | 海洋胶原肽在制备免疫调节药物或食品中的用途 |
| US20090170788A1 (en) * | 2006-01-16 | 2009-07-02 | Dong-Heon Shin | Novel use of 1, 2, 3, 4, 6-penta-o-galloyl-beta-d-glucose |
| CN101480407A (zh) * | 2009-01-23 | 2009-07-15 | 中国科学院昆明植物研究所 | 透明质酸酶抑制剂及其制备方法和应用 |
| CN101683350A (zh) * | 2008-09-24 | 2010-03-31 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 没食子酰基葡萄糖类化合物的制备方法与用途 |
| JP2011006341A (ja) * | 2009-06-24 | 2011-01-13 | Hiroshima Univ | アトピー性皮膚炎用皮膚外用剤 |
| CN101962394A (zh) * | 2009-01-23 | 2011-02-02 | 中国科学院昆明植物研究所 | 1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的制备方法 |
| CN102228479A (zh) * | 2011-06-14 | 2011-11-02 | 斯拉甫·艾白 | 一种治疗口腔疾病的药物及其制备方法 |
| AU2013203785A1 (en) * | 2006-11-06 | 2013-05-02 | Immunexcite, Inc. | Immunomodulating compositions and methods of use thereof |
| KR20190010472A (ko) * | 2017-07-21 | 2019-01-30 | 주식회사 다인소재 | 섬기린초 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 탄력 증진용 조성물 및 여드름 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
| CN111148504A (zh) * | 2017-09-26 | 2020-05-12 | 株式会社爱茉莉太平洋 | 含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物 |
| CN113151387A (zh) * | 2021-04-16 | 2021-07-23 | 安徽国肽生物科技有限公司 | 一种具有抗氧化和增强免疫功能的鳕鱼皮胶原蛋白肽及其制备方法 |
| US20220117879A1 (en) * | 2019-02-07 | 2022-04-21 | Ariel Scientific Innovations Ltd. | Photo-protective plant-derived composition |
| US20230112887A1 (en) * | 2020-02-28 | 2023-04-13 | Emory University | Pentagalloyl Glucose Derived from Schinus Plants and Methods of Use |
| CN116284341A (zh) * | 2023-02-20 | 2023-06-23 | 中国石油大学(华东) | 一种低免疫原性、降血压、抗氧化的深海鱼皮胶原蛋白肽制备及应用 |
| CN116606369A (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-18 | 齐鲁工业大学(山东省科学院) | 螺旋藻免疫调节肽及其制备方法与应用 |
-
2023
- 2023-11-27 CN CN202311593245.5A patent/CN117653562A/zh active Pending
Patent Citations (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2006342107A (ja) * | 2005-06-09 | 2006-12-21 | Nitta Gelatin Inc | コラーゲンペプチド含有化粧料組成物とその製造方法 |
| US20090170788A1 (en) * | 2006-01-16 | 2009-07-02 | Dong-Heon Shin | Novel use of 1, 2, 3, 4, 6-penta-o-galloyl-beta-d-glucose |
| CN101091789A (zh) * | 2006-06-19 | 2007-12-26 | 李勇 | 海洋胶原肽在制备免疫调节药物或食品中的用途 |
| AU2013203785A1 (en) * | 2006-11-06 | 2013-05-02 | Immunexcite, Inc. | Immunomodulating compositions and methods of use thereof |
| CN101683350A (zh) * | 2008-09-24 | 2010-03-31 | 中国人民解放军军事医学科学院毒物药物研究所 | 没食子酰基葡萄糖类化合物的制备方法与用途 |
| CN101962394A (zh) * | 2009-01-23 | 2011-02-02 | 中国科学院昆明植物研究所 | 1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的制备方法 |
| CN101480407A (zh) * | 2009-01-23 | 2009-07-15 | 中国科学院昆明植物研究所 | 透明质酸酶抑制剂及其制备方法和应用 |
| JP2011006341A (ja) * | 2009-06-24 | 2011-01-13 | Hiroshima Univ | アトピー性皮膚炎用皮膚外用剤 |
| CN102228479A (zh) * | 2011-06-14 | 2011-11-02 | 斯拉甫·艾白 | 一种治疗口腔疾病的药物及其制备方法 |
| KR20190010472A (ko) * | 2017-07-21 | 2019-01-30 | 주식회사 다인소재 | 섬기린초 추출물 또는 이로부터 분리한 화합물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선 또는 피부 탄력 증진용 조성물 및 여드름 예방, 개선 또는 치료용 조성물 |
| CN111148504A (zh) * | 2017-09-26 | 2020-05-12 | 株式会社爱茉莉太平洋 | 含有1,2,3,4,6-五-O-没食子酰基-β-D-葡萄糖的用于皮肤保湿的皮肤外用剂组合物 |
| US20200230044A1 (en) * | 2017-09-26 | 2020-07-23 | Amorepacific Corporation | SKIN EXTERNAL PREPARATION COMPOSITION FOR MOISTURIZING SKIN CONTAINING 1,2,3,4,6-PENTA-O-GALLOYL-ß-D-GLUCOSE |
| US20220117879A1 (en) * | 2019-02-07 | 2022-04-21 | Ariel Scientific Innovations Ltd. | Photo-protective plant-derived composition |
| US20230112887A1 (en) * | 2020-02-28 | 2023-04-13 | Emory University | Pentagalloyl Glucose Derived from Schinus Plants and Methods of Use |
| CN113151387A (zh) * | 2021-04-16 | 2021-07-23 | 安徽国肽生物科技有限公司 | 一种具有抗氧化和增强免疫功能的鳕鱼皮胶原蛋白肽及其制备方法 |
| CN116284341A (zh) * | 2023-02-20 | 2023-06-23 | 中国石油大学(华东) | 一种低免疫原性、降血压、抗氧化的深海鱼皮胶原蛋白肽制备及应用 |
| CN116606369A (zh) * | 2023-06-14 | 2023-08-18 | 齐鲁工业大学(山东省科学院) | 螺旋藻免疫调节肽及其制备方法与应用 |
Non-Patent Citations (7)
| Title |
|---|
| BYUNG-HAK KIM等: ""Photoprotective Potential of Penta-O-Galloyl-β β-D- Glucose by Targeting NF-κ κB and MAPK Signaling in UVB Radiation-Induced Human Dermal Fibroblasts and Mouse Skin"", 《MOLECULES AND CELLS》, vol. 38, no. 11, 4 November 2015 (2015-11-04), pages 982 - 990 * |
| KIM PHUONG TO等: ""The extract of Elaeocarpus sylvestris inhibits human cytomegalovirus immediate early gene expression and replication in vitro"", 《MOLECULAR MEDICINE REPORTS》, vol. 9, 31 December 2014 (2014-12-31), pages 744 - 748, XP055473944, DOI: 10.3892/mmr.2013.1824 * |
| 尹翠元 等: ""胶原蛋白肽修复光老化皮肤作用研究进展"", 《生物学杂志》, vol. 40, no. 1, 28 February 2023 (2023-02-28), pages 14 - 20 * |
| 戚文彬 等: "《分析化学》", vol. 1, 31 October 1983, 上海科学技术出版社, pages: 41 - 45 * |
| 林炜 等: "《海洋生物活性肽的研究与产业化》", vol. 1, 31 December 2020, 四川大学出版社, pages: 21 - 22 * |
| 王振宇: "《生物活性成分分离技术》", vol. 1, 31 May 2015, 哈尔滨工业大学出版社, pages: 188 - 189 * |
| 邵茜;付雪媛;徐慧;潘松浩;邹鹏飞;王长伟;刘楚怡;: "不同来源胶原肽对光老化皮肤成纤维细胞的影响研究", 日用化学品科学, vol. 40, no. 05, 31 May 2017 (2017-05-31), pages 26 - 29 * |
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