CN111134114A - 一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂及其制备方法和应用 - Google Patents

一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂及其制备方法和应用 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种2,6‑二叔丁基对甲酚微乳剂，所述2,6‑二叔丁基对甲酚微乳剂按100质量份数计，由以下质量份数的成分制成：2,6‑二叔丁基对甲酚2.2‑3.3份、溶剂6‑8份、助溶剂0‑4份、乳化剂12‑20份，余量为水。本发明研制了一种2,6‑二叔丁基对甲酚微乳剂，研究发现2,6‑二叔丁基对甲酚微乳剂对果蔬病害，如轮纹病、灰霉病、炭疽叶枯病具有显著防治效果，且持效期较长；本发明研制的2,6‑二叔丁基对甲酚微乳剂具备微乳剂分散度极高、对靶标渗透性强、附着力好等优势，显著提高了药剂的利用率。

Description

一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂及其制备方法和应用
技术领域
本发明涉及农药技术领域，特别涉及一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂及其制备方法和应用。
背景技术
我国是世界上第一大果蔬生产与消费大国，果树和蔬菜种植面积和产量均居世界首位，但病害是制约果蔬生产的主要限制因素，严重影响果蔬品质和产量，限制了我国果蔬产业的健康可持续发展。目前，果蔬病害防治主要依靠化学药剂，但杀菌剂的药剂残留、病原菌抗药性、对环境污染严重等问题不断加剧，寻求可替代化学杀菌剂的安全有效防治措施，已成为果蔬病害防治中亟待解决的问题。
2015年，农业部提出了化肥农药零增长计划，开发绿色生态农药是农药减量增效的有效途径之一。近年来，国家提出绿色发展理念，绿色农业和作物健康是我国农业发展的主旋律。免疫诱抗剂又称植物疫苗，是继人疫苗、动物疫苗后，疫苗工程技术的新领域，也是国际上绿色农药创制最为热门的研究方向，对于保障植物健康具有重要意义。
植物具有类似于高等动物的免疫防御系统，其对植物抵抗病虫危害、逆境胁迫等具有重要调控作用，且植物具有可识别病原菌入侵的免疫传感器。利用免疫诱抗剂控制植物病害具有抗性持续时间长、抗病谱广及不污染环境等优点，被认为是植物病害防治的一种新策略和可行途径，受到广大科研工作者的广泛关注。
2,6-二叔丁基对甲酚是生防菌娄彻氏链霉菌(Streptomyces rochei)A-1的代谢产物，其具有耐热、稳定性好、无特异气味，且价格低廉等优点。目前，尚未有研究将2,6-二叔丁基对甲酚做成微乳剂，作为免疫诱抗剂，用于果蔬病害的防治，如何解决上述技术问题，是目前农药技术领域需要解决的技术问题。
发明内容
本发明针对上述技术问题，提出一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂及其制备方法和应用。
本发明采用技术方案为：一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂按100质量份数计，由以下质量份数的成分制成：2,6-二叔丁基对甲酚2.2-3.3份、溶剂6-8份、助溶剂0-4份、乳化剂12-20份，余量为水。
在上述方案的基础上，根据权利要求1所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，其特征是：所述溶剂为石油醚、玉米油、大豆油中的一种，所述助溶剂为乙醇或甲醇，所述乳化剂为农乳500和乳化剂OP-10的混合物。
一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂制备方法，其特征是：包括以下步骤：
(1)按成分配比，称取配制2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的各成分；
(2)将2,6-二叔丁基对甲酚通过助溶剂溶于溶剂中，然后添加乳化剂，混合搅拌均匀，制备成均匀溶液A，
(3)在搅拌条件下，向均匀溶液A中缓慢加入水，最后形成水包油类型的透明溶液B，所述水包油类型的透明溶液B即为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂。
在上述方案的基础上，所述搅拌在磁力搅拌器中进行，所述搅拌转速为300-400rpm。
一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的应用，所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂用于果蔬病害的防治。
在上述方案的基础上，所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂用于苹果果实轮纹病、番茄灰霉病、苹果炭疽叶枯病的防治。
在上述方案的基础上，所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂用量为1.1-5.5mg·kg-1,施药方式为喷雾或浸果。
本发明的有益效果是：本发明研制了一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，研究发现2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对果蔬病害，如轮纹病、灰霉病、炭疽叶枯病具有显著防治效果，且持效期较长；本发明研制的的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂具备微乳剂分散度极高、对靶标渗透性强、附着力好等优势，显著提高了药剂的利用率。
附图说明
图1为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对苹果果实轮纹病的防治效果，
其中，图中A为无菌水处理后再接种轮纹病菌的对照，图中B、C、D分别为配方1、配方2和配方3微乳剂对苹果果实轮纹病的防治效果；
图2为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂番茄灰霉病的防治效果，
其中，图中A为无菌水处理后再接种灰霉病菌的对照，图中B、C、D分别为配方1、配方2和配方3微乳剂对番茄灰霉病的防治效果；
图3为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对苹果炭疽叶枯病的防治效果，
其中，A为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对苹果炭疽叶枯病病情指数的影响，B为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对苹果炭疽叶枯病的防效。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。
下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。
下列实施例中所有实验均在25～35℃下进行。
实施例1
2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的制备
1.1配方1
各组分按100质量份数计，按成分配比，分别称取配制2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的各成分：2,6-二叔丁基对甲酚2.2份，玉米油6份，乙醇3份，乳化剂(农乳500和乳化剂OP-10混合物)12份,水补充至100份。
2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的制备的方法：称取2,6-二叔丁基对甲酚(含量≥99.8份，Sigma)2.204g置于洁净干燥的容器中，称取6g玉米油和3g无水乙醇倒入容器中，充分搅拌均匀，待2,6-二叔丁基对甲酚充分溶解后，加入混合乳化剂(农乳500和乳化剂OP-10混合物)12g，用搅拌器搅拌均匀。在搅拌条件下，向上述体系中慢慢加入自来水76.8mL，继续不断搅拌，直至形成透明溶液，即为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂。
1.2配方2
各组分按100质量份数计，按成分配比，称取配制2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的各成分：2,6-二叔丁基对甲酚3.3份，大豆油8份，甲醇4份，乳化剂(农乳500和乳化剂OP-10混合物)15份,水补充至100份。
2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的制备的方法：称取2,6-二叔丁基对甲酚(含量≥99.8份，Sigma)3.307g置于洁净干燥的容器中，称取8g大豆油和4g甲醇倒入容器中，充分搅拌均匀，待2,6-二叔丁基对甲酚充分溶解后，加入混合乳化剂(农乳500和乳化剂OP-10混合物)15g，用搅拌器搅拌均匀。在搅拌条件下，向上述体系中慢慢加入自来水69.7mL，继续不断搅拌，直至形成透明溶液，即为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂。
1.2配方3
各组分按100质量份数计，按成分配比，称取配制2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的各成分：2,6-二叔丁基对甲酚3.3份，石油醚8份，乳化剂(农乳500+乳化剂OP-10)20份,水补充至100份。
2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的制备的方法：称取2,6-二叔丁基对甲酚(含量≥99.8份，Sigma)3.307g置于洁净干燥的容器中，称取8g石油醚倒入容器中，充分搅拌均匀，待2,6-二叔丁基对甲酚充分溶解后，加入混合乳化剂(农乳500和乳化剂OP-10混合物)20g，用搅拌器搅拌均匀。在搅拌条件下，向上述体系中慢慢加入自来水68.7mL，继续不断搅拌，直至形成透明溶液，即为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂。
实施例2
2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂质量分析
2.1外观检测
根据农药剂型名称及代码GB/T19378-2017国家标准，溶液呈现澄清均一透明或半透明为合格。实施例1中制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂样品，常温下，呈现淡黄色澄清透明状，可与自来水以任意比例混溶。
2.2乳液的稳定性
参照农药乳液稳定性测定方法GB/T1603-2001，分别称取1g实施例中所制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，分别加入100mL标准硬水，不断搅拌配成乳状液，置于30℃±1℃恒温水浴中，静置1h，观察3种样品的表观现象。结果表明，3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂样品均上无浮油，下无沉淀，说明所制备的乳液合格。
2.3热贮和低温稳定性
参照农药热贮稳定性(GB-T19136-2003)和低温稳定性(GB-T19137-2003)测定方法，将实施例1中所制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂样品，分别于54±2℃条件下放置14d，于0±1℃条件下放置7d，恢复至室温，分别观察3种样品的表观现象。结果表明，3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂样品均没有分层，无浮油、结晶或沉淀等产生，说明所制备的3种微乳剂稳定性合格。
实施例3
2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对果蔬病害的防治效果
3.1对苹果果实轮纹病的防治效果
实施例1中所制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，分别稀释500倍，苹果轮纹病菌(Botryosphaeria dothidea)在PDA培养基上活化培养3d，在菌落边缘打取直径5mm的菌饼备用。
挑选大小均匀健康的富士苹果，流水洗净后75份酒精进行表面消毒，室温晾干，在苹果赤道处刺伤，每伤口直径约5mm，深约3mm，每果实3处伤口，将上述稀释后的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂均匀喷雾到果实上，直到有水滴滴下，室温晾干后，在刺伤处接种轮纹病菌菌饼。以喷雾无菌水再接种轮纹病菌的处理作对照组，接种后5d观察并测量病斑直径，根据发病病斑面积计算防治效果。
防治效果＝(对照组病斑面积-处理组病斑面积)/对照组病斑面积×100份。
图1结果显示，所制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，均对苹果果实轮纹病有显著的防治效果，其中配方1防效为80.65％；配方2防效为76.89％；配方3防效为75.05％。
3.2对番茄灰霉病的防治效果
果蔬灰霉病菌(Botrytis cinerea)在PDA培养基上活化培养2d，转接于新的PDA培养基中，于25℃恒温避光诱导产孢；7d后用0.05份吐温20将菌丝上的分生孢子冲洗下来，把分生孢子浓度调整为106个·mL-1备用。
实施例1中所制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，分别稀释500倍，挑选大小均匀健康的樱桃番茄，经上述稀释后的微乳剂中浸泡处理3～5min，室温下自然晾干，于4℃，相对湿度95份条件下，黑暗贮藏。贮藏30d后，刺伤接种果蔬灰霉病菌孢子悬浮液，以无菌水浸泡再接种灰霉病菌的处理作对照组，接种后2d测量病斑直径，按照椭圆形公式计算病斑面积。防治效果＝(对照组病斑面积-处理组病斑面积)/对照组病斑面积×100％。
图2结果显示，3种稀释后的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂浸泡处理番茄后，对灰霉病均具有显著的防效，其中配方1、配方2和配方3的防效分别为75.30％、76.58％、56.75％。
3.3对苹果炭疽叶枯病的防治效果
制备苹果炭疽叶枯病菌的孢子悬浮液，将病原菌在PDA上恒温暗培养，待菌丝长至2/3平皿时，用接种环刮除气生菌丝，2～3d后可见橘黄色的分生孢子角产生，配置分生孢子悬浮液调节浓度至5×104个·mL-1。
选取长势一致的一至二年生完全展开叶的嘎啦苹果枝条，分别均匀喷雾实施例1中所制备的3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂(稀释1 000倍)，直到叶片有水滴滴下，以喷雾无菌水和吡唑醚菌酯的枝条作对照。上述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂喷雾后3d，接种上述制备的苹果炭疽叶枯病菌孢子悬浮液，田间接种后用塑料袋进行保湿24h，定期观察记录叶片发病情况。
按GB/T17980.124-2004《农药田间药效试验准则(二)》分级，并计算病情指数。
0级：无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积的10％以下；3级：病斑面积占叶面积的11％～30％；5级：病斑面积占叶面积的30％～50％；7级：病斑面积占叶面积的51％；9级：落叶。
按以下公式计算:病情指数＝100×∑(各级病叶数×该病级值)/(调查总叶片数×最高级值)；防治效果＝(对照病情指数-菌株B-1菌悬液处理病情指数)/对照病情指数×100％
所述3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂对苹果炭疽叶枯病的防治效果见图3，各药剂处理后，苹果炭疽叶枯病病斑数和病情指数均显著降低，3种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的防治效果均在70％以上，与吡唑醚菌酯防效相当。
以上所述仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (7)

1.一种2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，其特征是：所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂按100质量份数计，由以下质量份数的成分制成：2,6-二叔丁基对甲酚2.2-3.3份、溶剂6-8份、助溶剂0-4份、乳化剂12-20份，余量为水。
2.根据权利要求1所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂，其特征是：所述溶剂为石油醚、玉米油、大豆油中的一种，所述助溶剂为乙醇或甲醇，所述乳化剂为农乳500和乳化剂OP-10的混合物。
3.一种权利要求1所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂制备方法，其特征是：包括以下步骤：
(1)按成分配比，称取配制2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的各成分；
(2)将2,6-二叔丁基对甲酚通过助溶剂溶于溶剂中，然后添加乳化剂，混合搅拌均匀，制备成均匀溶液A，
(3)在搅拌条件下，向均匀溶液A中缓慢加入水，最后形成水包油类型的透明溶液B，所述水包油类型的透明溶液B即为2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂。
4.根据权利要求3所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂制备方法，其特征是：所述搅拌在磁力搅拌器中进行，所述搅拌转速为300-400rpm。
5.一种权利要求1或2所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的应用，其特征是：所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂用于果蔬病害的防治。
6.根据权利要求5所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的应用，其特征是：所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂用于苹果果实轮纹病、番茄灰霉病、苹果炭疽叶枯病的防治。
7.根据权利要求6所述的2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂的应用，其特征是：所述2,6-二叔丁基对甲酚微乳剂用量为1.1-5.5mg·kg-1,施药方式为喷雾或浸果。
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