CN110804556B

CN110804556B - 新种内生真菌lz3及其应用

Info

Publication number: CN110804556B
Application number: CN201911188968.0A
Authority: CN
Inventors: 龙艳艳; 农倩; 谢玲; 覃丽萍; 张艳; 陈艳露; 廖仕同; 张雯龙
Original assignee: INSTITUTE OF MICROBIOLOGY GUANGXI ZHUANG AUTONOMOUS ACADEMY OF AGRICULTURAL SCIENCES
Current assignee: Guangxi Zhuang Nationality Autonomous Region Academy of Agricultural Sciences
Priority date: 2019-11-28
Filing date: 2019-11-28
Publication date: 2020-10-16
Anticipated expiration: 2039-11-28
Also published as: CN110804556A

Abstract

本发明涉及生物技术领域，特别涉及新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3及其应用。新菌株LZ3从甘蔗根围土壤分离而得，保藏编号为CGMCC NO.18805，根据分类学方法，该菌株是Acidomelania属的一个新种，该菌株的分类地位是Acidomelania sp.，依照国际细菌系统分类委员会的命名方法，将该种命名为Acidomelania saccharicola sp.nov.并选菌株LZ3为该种的模式菌株。该新种的发现和利用丰富了内生真菌的可利用微生物资源，该菌种具有防治香蕉枯萎病，和促进作物生长的作用，能在生物促生、抗病害的农业应用领域提供优异的菌种资源。

Description

新种内生真菌LZ3及其应用

【技术领域】

本发明涉及生物技术领域，特别涉及新种菌株LZ3及其应用。

【背景技术】

近几十年来，化肥和农药的使用对于保障粮食增产稳产起到了巨大的推动作用，但由于抗病、高产和品质在育种中难以兼顾和突破，加上化学化肥、农药的长期不合理使用，严重威胁了环境和农产品安全。因此，寻找经济高效、与环境相容性好的农业新方法、新技术是解决当前环境污染、食品安全危机的迫切需求。而充分利用和发挥生态系统中微生物对农作物的促生和抗病虫功能，对提高农作物的生产能力，保护和改善农业生态环境，促进农业的可持续发展具有重要的生态和经济意义。

内生真菌(Endophytic fungi)广泛存在于健康植物组织器官中，具有极其丰富的物种多样性和功能多样性。作为一类未被充分研究的微生物资源，内生真菌资源种类繁多，包括不少稀有、特殊(或新的分类单元)的菌株，其生态功能也逐渐被人们所发现和揭示。申请人在内生真菌研究领域取得了较好的成果，例如申请号为201410220964.7发明名称为《一种DSE菌株及其在甘蔗生产上的应用》的内生真菌，该真菌由申请人从广西北部湾红树植物分离而得，属于Devriesiasp属，具有促进铁皮石斛生长的作用；申请号为201610652927.2发明名称为《防治香蕉枯萎病的内生真菌L-14及其应用》的内生真菌，该真菌由申请人从土壤中诱捕分离获得，属于Schizothecium属，具有防治香蕉枯萎病的作用；申请号为201410220965.1发明名称为《DSE菌株24L-4及其在铁皮石斛生产上的应用》的内生真菌，该真菌由申请人从茶花叶部组织分离获得，属于Devriesiasp属；可见，内生真菌在农业自然环境保护中具有广阔的开发利用前景。为了充分发掘内生真菌的生态功能，有必要进一步在丰富多样的内生真菌种质资源中筛选获得更多更优异的优良菌株，为其开发利用提供资源保障。

【发明内容】

鉴于上述发掘更多性状优良促生内生真菌，促进内生真菌种质资源的开发利用，本发明目的在于提供新种菌株LZ3及其在促进被子植物生长、防治香蕉枯萎病上的应用。

本发明筛选出的新种菌株LZ3属于真菌界，为Acidomelania属的一个新种，该菌株的分类地位是Acidomelania sp.，依照国际细菌系统分类委员会的命名方法，将该种命名为Acidomelania saccharicola sp.nov.并选菌株LZ3为该种的模式菌株，其保藏编号为CGMCC NO.18805。保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.18805，保藏日期为2019年10月25日。

进一步的，上述菌株从甘蔗根围土壤分离而得。

本发明还包括上述新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3在防治枯萎病上的应用。

进一步的，所述枯萎病为香蕉枯萎病。

本发明还包括上述新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3在促进被子植物生长上的应用。

进一步的，所述被子植物为甘蔗、香蕉和/或铁皮石斛。

本发明还包括一种应用上述新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3对香蕉枯萎病进行防治的方法，所述方法为：将菌株LZ3接种到香蕉组培苗和/或植株中；所述接种方法为将香蕉组培苗直接接种于培养LZ3菌株的培养基中和/或将活化后的LZ3菌液浇灌到香蕉组培苗和/或植株的根系。

本发明还包括一种应用上述新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3促进被子植物生长的方法，所述方法为：将菌株LZ3接种到被子植物的组培苗和/或植株中；所述接种方法为将被子植物的组培苗直接接种于培养LZ3菌株的培养基中。

本发明具有以下有益效果：

本申请的新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3能够有效防治香蕉枯萎病，在香蕉枯萎病的抗性实验中，平皿共生实验中防治效果达73.48±3.52％，盆栽实验防治效果达52.82±8.17％，田间试验防治效果达53.27％；同时该菌株具有广谱的促生效果，将菌株LZ3接种于甘蔗苗和铁皮石斛苗后，可有效促进甘蔗(禾本科植物)、铁皮石斛(兰科植物)和香蕉(芭蕉科植物)的生长。

【附图说明】

图1为本发明菌株LZ3的形态图；图1中A为菌株在燕麦培养基生长的菌落形态图；图B-L均为厚垣孢子形态图；

图2为本发明LZ3的ITS系统发育树图；

图3为菌株LZ3对香蕉枯萎病的培养皿防治作用图；图中，A为接种了LZ3再接种病原菌的处理组，B为未接种LZ3接种病原菌的CK组，C为未接种空白对照组；

图4为菌株LZ3对香蕉枯萎病的盆栽防治作用图；图中，A为未接种LZ3接种病原菌的CK组，B为接种了LZ3再接种病原菌的处理组，C为未接种空白对照组；

图5为香蕉幼苗的根茎解剖图；图中，A为接种了LZ3再接种病原菌的处理组，B为未接种LZ3接种病原菌的CK组；

图6为2019年4月10日现场考察菌株LZ3对香蕉枯萎病的田间防治的现场试验场地总体图作用图；

图7为图6的近景图，图中，A为接种了LZ3的处理组的植株生长情况的近景图，B为未接种LZ3的CK组植株生长情况的近景图；

图8为2019年6月18日现场考察菌株LZ3对香蕉枯萎病田间防治作用的现场试验场地总体图；

图9为图8的近景图，图中，A为接种了LZ3的处理组的植株生长情况的近景图，B为未接种LZ3的CK组植株生长情况的近景图；

图10为本发明LZ3菌株对甘蔗苗的促生作用图；图中A为接种了LZ3的处理组；B为未接种LJ1的CK组；

图11为本发明LZ3菌株对铁皮石斛苗的促生作用图；图中A的两皿为未接种LZ3的CK组；B的两皿为接种了LZ3的处理组。

【具体实施方式】

下面结合附图和实施例和试验对本发明作进一步说明。

实施例1：

本实施例的新种菌株Acidomelania saccharicola LZ3，其保藏编号为CGMCCNO.18805。属于真菌界，Acidomelania属。保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCC NO.18805，保藏日期为2019年10月25日。

上述新种菌株在广西柳州市柳北区石碑坪镇石碑坪村甘蔗地甘蔗根围土壤(N24°32′12.92″，E109°20′43.32″，海拔99.2米)进行土壤采集并采用诱捕法进行分离。

将上述分离得到的作物促生内生真菌进行如下检测：

1、菌株的形态特征

该菌株在燕麦(OA)28℃下培养两周后菌落直径28mm左右，菌落白色，气生菌丝少/薄，贴着培养基表面生长，接种点气生菌丝较多，成小簇生长，灰色至深灰色；菌落背面白色。菌株LZ3在燕麦培养基上培养两周后放入4℃冰箱诱导产孢，约一年后产生厚垣孢子，显微镜下观察如图1所示，发现，该菌株菌丝有隔，黄褐色至褐色，可形成串珠状菌丝和菌丝圈，菌丝直径1.1-4.3μm(2.7±0.7μm,n＝40)μm。厚垣孢子黄褐色至褐色，由多个近圆形或不规则形状的单个孢子聚集形成大孢子团，孢子团大小为12.3-36.8×8.8-23.8μm(20.3±4.1×16.0±2.7μm,n＝110)；单个小孢子直径为4.2-9.3μm(6.5±1.0μm,n＝100)。

2、菌株的分子生物学鉴定

用测序得到的ITS和28S序列在GenBank数据库中进行DNA序列BLAST，结果显示与菌株LZ3亲缘关系最近的是Helotiales目下的Acidomelania panicicola。在Helotiales目下选择代表科的ITS+28S序列与菌株LZ3的相关序列一起构建系统发育树(如图2所示)，结果显示，菌株LZ3与Helotiales目下Acidomelania属的唯一已知种以100％的支持率聚在一起，但是菌株LZ3形成一个独立于Acidomelania panicicola的分枝。菌株LZ3与其近缘种Acidomelania panicicola的ITS的最高相似率仅为97.3％。从形态特征上来看，菌株LZ3只能产生厚垣孢子，Acidomelania panicicola除了产生厚垣孢子外，还能产生无性型孢子。而且LZ3产生的厚垣孢子的形态比较复杂，形成多个细胞组成的复合体有别于Acidomelania panicicola产生的常规的厚垣孢子。此外LZ3与Acidomelania panicicola的分离生境也不一样，前者是从甘蔗根际土壤分离到，后者是从松树林下的柳枝稷根部分离到的。

从分子、形态和生境上都能证明菌株LZ3为Acidomelania属的一个新菌种，该菌株的分类地位是Acidomelania sp.，依照国际细菌系统分类委员会的命名方法，将该种命名为Acidomelania saccharicola sp.nov..并选菌株LZ3为该种的模式菌株。

实施例2：

对香蕉枯萎病的防治作用：

供试植物：桂蕉1号组培苗(广西植物组培苗有限公司提供)；供试菌株：菌株LZ3，2016年从广西柳州甘蔗根围土壤通过诱捕分离获得；香蕉枯萎病病原菌：镰刀菌4号生理小种(FOC4)强致病力菌株。

1、平皿防治效果：

(1)LZ3与香蕉组培苗的共培养：

将菌株LZ3活化后接种于燕麦培养基上(燕麦粉10g/L，琼脂18g/L，MgSO₄·7H₂O1g/L，KH₂PO₄ 1.5g/L，NaNO₃ 1g/L)，每皿接3个菌块，培养10d后，选择长势一致香蕉组培苗移栽至菌落上，根系平铺于菌落表面，每个菌落移栽一株组培苗，每皿移栽3个，并命名为处理组(LZ3组)；同时，将香蕉组培苗移栽至不接种LZ3的培养平皿上(每皿3个)，并命名为对照组(CK组)。移栽后处理组和CK组的培养皿放至组培瓶在相同条件下进行共培养，培养条件为：温度为25℃、光照强度为180μmol m^-2s^-2、光周期为16h：8h、培养时间为15d。

(2)致病培养基制备：

将镰刀菌(病原菌)活化后接于水琼脂培养基上，每皿接种3个菌块，28℃培养4d获得治病培养基待用。

(3)平皿防效实验：

将步骤(1)获得的LZ3-香蕉组培苗(处理组)和不含LZ3的香蕉组培苗(CK组)一同移栽至步骤(2)的致病培养基中，并将不含LZ3的香蕉组培苗移栽至不含致病菌的水琼脂培养基上作为空白对照组，然后将三者放入培养箱中，于28℃，光强180μmol/m²·s²，湿度80％条件下培养15d。对照直接接入带有镰刀菌的水琼脂平板上。观察并记录CK组和处理组处理的病级情况，计算病情指数和防治效果。同时观察CK组、处理组和空白对照组的香蕉组培苗的生长情况，解剖CK组、处理组的香蕉植株球茎观察球茎的健康状况。

对平皿苗的病情分级标准如下：

0级-外观无可见症状；

1级-香蕉植株长势无明显受阻，全株黄萎面积不超35％；

2级-香蕉植株弱小，全株黄萎面积达35-80％；

3级-香蕉植株全株黄萎面积达80％以上，甚至全株枯死。

2、盆栽温室防治效果：

(1)LZ3菌液的制备

将活化后的LZ3接种于PDB液体培养基中，25℃下120rpm震荡培养14d，用灭菌纱布过滤收集菌丝，灭菌水洗涤菌丝数次后，将菌丝打碎配制成5×10⁵cfu·mL^-1的菌液。

(2)致病菌悬浮液制备

将镰刀菌活化后，配制成浓度为1×10⁶cfu·mL^-1的孢子液。

(3)盆栽防效实验：

本实验在广西农业科学院微生物研究所网室内进行；取长势一致的香蕉幼苗(3-4叶)统一栽种于营养杯中(直径×高＝19cm×20cm)，采用无病自然土种植；将香蕉幼苗均分为两组，一组为处理组(LZ3组)，一组为对照组(CK组)；然后向处理组中的香蕉苗根部浇灌步骤(1)的LZ3菌液50mL；同步向对照组(CK)组浇灌蒸馏水50mL；之后按照同样处理方法每隔15d浇灌一次，共灌根三次。于最后一次灌根结束10d后，随机选取各处理及重复的6株香蕉苗，测量其株高和鲜重，检验其促生效果，其余植株留作抗病试验；抗病试验方法为：对LZ3组和CK组的香蕉苗同时进行伤根接种步骤(2)中的镰刀菌孢子悬浮液；在同等培养条件下观察香蕉苗植株发病情况，接种约后25d解剖香蕉植株球茎，观察记录香蕉苗病级，并计算防效，每个处理3个重复，每个重复8株香蕉苗。

对盆栽苗的病情分级标准如下：

0级：球茎健康无变色；

1级：球茎变色面积占球茎面积的20％以下；

2级：球茎变色面积占球茎面积的20-40％；

3级：球茎变色面积占球茎面积的40-60％；

4级：球茎变色面积占球茎面积的60-80％；

5级：球茎变色面积占球茎面积80％以上，甚至全部球茎变色坏死。

上述平皿防治效果与盆栽防治效果的防效计算公式均相同，具体如下：

通过上述公式的计算，本申请实验菌株LZ3对香蕉枯萎病的防治效果如表1所示：

表1菌株LZ3对香蕉枯萎病的防治效果

由表1可见，在香蕉中接种LZ3菌株能提高香蕉对香蕉枯萎病的抗病性，平皿共生实验中防治效果达73.48±3.52％，盆栽实验防治效果达52.82±8.17％。

香蕉苗的生长情况如图3-5所示，图3为菌株LZ3对香蕉枯萎病的培养皿防治作用图；图中，A为接种了LZ3在接种病原菌的处理组，B为未接种LZ3接种病原菌的CK组，C为无接种空白对照组；图4为菌株LZ3对香蕉枯萎病的盆栽防治作用图；图中，A为未接种LZ3接种病原菌的CK组，B为接种了LZ3再接种病原菌的处理组，C为未接种空白对照组；图5为香蕉幼苗的根茎解剖图；图中，A为接种了LZ3再接种病原菌的处理组，B为未接种LZ3接种病原菌的CK组；从图中可知，对香蕉的根部接种菌株LZ3后，能有效提高香蕉对香蕉枯萎病的抗病性；CK组的香蕉植株叶片枯黄严重，接种菌株LZ3再接种病原菌的香蕉植株则表现正常，其长势与空白对照的香蕉植株一致；将感病植株的球茎剖开可见大部分组织已褐变坏死，而接种菌株LZ3处理球茎只呈轻微褐变。说明在香蕉中接种LZ3菌株能提高香蕉对香蕉枯萎病的抗性。

3、大田防治效果

(1)试验田的选择及处理

以广西南宁市那桐镇廷罗村香蕉连作地块作为试验田，试验前对该地块香蕉枯萎病的发病情况进行调查，调查结果为：发病率为100％，病死率为85％，结实率为0。将病蕉移除后，适当进行整地。

(2)LZ3菌液的制备

将菌株LZ3配制成浓度为5×10⁵cfu·mL^-1的菌液。

(3)大田防效实验

取无菌桂蕉1号组培苗充分练苗后，移栽至无菌育苗土中生长，待香蕉生长稳定并长至3叶期时采用菌液浇灌根系的方法接种菌株LZ3菌液，每株香蕉幼苗浇菌20mL菌液，每隔15天浇菌一次，共浇菌三次；于最后一次浇菌完毕后30天，将接菌香蕉苗移栽至已表现为全园发病的种植地(移栽时间2018年8月9日)，并进行常规田间栽培管理；移栽病田3个月后，对接菌香蕉植株再进行田间浇灌菌株LZ3菌液，每株香蕉根系浇菌500毫升菌液，每隔30天浇灌一次，共浇灌4次。移栽前后的两次接菌均以浇灌等量的无菌水作为空白对照。接菌处理设3个重复，每重复9株香蕉苗；香蕉苗田间移栽后分别共进行了4次香蕉枯萎病发病情况的调查，调查日期为2019.11.7、2019.12.25、2019.4.10、2019.6.18；并计算病情指数与防治效果。

对盆栽苗的病情分级标准如下：

0级-全株无致病黄化，假茎完好；

1级：5％以下的叶片黄化；

2级：5-25％的叶片黄化，假茎轻微开裂；

3级：25-50％叶片黄化；

4级：50-75％叶片黄化，假茎中度开裂；

5级：75-95％叶片黄化；

6级：100％叶片黄化，整株枯死，或假茎严重开裂。

上述大田防治效果的防效计算公式为：

通过上述公式的计算，本申请实验菌株LZ3对香蕉枯萎病的防治效果如表2所示：

表2菌株LZ3对田间香蕉枯萎病的防治效果

由表2可见，在香蕉中接种LZ3菌株能提高香蕉对香蕉枯萎病的抗病性，2018年11月7日和2018年12月25日进行调查发现，菌株LZ3处理的香蕉苗的病死率为0，无接种对照的病死率为13.89％，防治效果为93.33％。抽蕾期前，接菌处理的防治效果达68.75％，随着香蕉抽蕾期的到来，香蕉植株免疫力下降，香蕉枯萎病的发生迅猛；2019年6月18日调查发现，菌株LZ3的平均防治效果下降至53.27％，发病率为25.93，病死率为11.11％，接种处理的植株发病率与病死率较对照低；表明接种了菌株LZ3提高了香蕉植株的抗耐病能力。

将带菌香蕉幼苗移栽至香蕉连作病田后香蕉的生长情况如图6-9所示，图6为2019年4月10日现场考察菌株LZ3对香蕉枯萎病田间防治的现场试验场地总体图，图7为图6的近景图，图中，A为接种了LZ3的处理组的植株生长情况的近景图，B为未接种LZ3的CK组植株生长情况的近景图；图8为2019年6月18日现场考察菌株LZ3对香蕉枯萎病田间防治的现场试验场地总体图；图9为图8的近景图，图中，A为接种了LZ3的处理组的植株生长情况的近景图，B为未接种LZ3的CK组植株生长情况的近景图；由图6-9可知，经LZ3处理的植株表现出更健康的状态，叶片和茎部没有或仅有轻微的外部病害症状，而CK组均出现叶片变黄等枯萎症状。说明在香蕉中接种LZ3菌株能提高香蕉对香蕉枯萎病的抗性。

实施例3：

对甘蔗的促生作用：

供试植物：甘蔗桂糖49号品种组培苗(广西农业科学院甘蔗研究所提供)；供试菌株：菌株LZ3，2016年从广西柳州甘蔗根围土壤通过诱捕分离获得。

具体方法包括如下步骤：

(1)将活化后的LZ3接种于PDB培养基中，于28℃转速为120rpm摇床中振荡培养10-17d后，用灭菌纱布过滤收集菌丝团，用灭菌水冲洗数次后，将菌丝团打碎配制成浓度为5×10⁵cfu/ml的菌液；

(2)将甘蔗组培苗在沙地中炼苗长至5-7叶后，选取长势一致的甘蔗苗，修剪叶片待种；将甘蔗苗移栽至规格为12cm×12cm(高×直径)的育苗杯中，每杯种植1株甘蔗苗，每个处理4杯苗，设3个重复共12株苗；培养基质为1:2(v/v)的食用菌废弃栽培料和稻田土，浇定根水后用塑料膜覆盖保湿7天；

(3)将甘蔗组培苗从沙地中移栽至育苗杯，并分为对照组和CK组，移栽30d后对照组和CK组分别浇50mL的菌液和水，每隔15-20d灌根一次，总共灌根3次，对照组全部采用菌液灌根，CK组全部采用水灌根灌根；3个月采收甘蔗，测量株高，称量鲜重，并在50℃烘箱中烘烤3d以上称量干重。

经实验表明，3个月后甘蔗苗的生长情况如图10所示，图10中左边为接种了LZ3的处理组，右边为未接种LZ3的CK组，明显的左图甘蔗苗的长势明显优于右图，说明LZ3能有效促进甘蔗苗生长。

上述干重称量结果如表3所示：

表3菌株LZ3对甘蔗苗生长的影响

说明：*表示接种处理与对照之间的显著差异。

由表3可知，甘蔗苗接种菌株LZ3后生长指标均高于CK组，其中株高、鲜重及干重值分别较CK组增长了16.83％、32.15％、19.24％，且差异达显著水平；说明，本申请的LZ3菌株可有效提高甘蔗的干重，促进甘蔗生长。

实施例4：

对铁皮石斛的促生作用：

供试植物：铁皮石斛784品种组培苗(广西农业科学院花卉研究所提供)；供试菌株：菌株LZ3，2016年从广西柳州甘蔗根围土壤通过诱捕分离获得。

(1)将供试菌株活化后接种于燕麦培养基上(燕麦粉10g/L，琼脂18g/L，MgSO₄·7H₂O 1g/L，KH₂PO₄ 1.5g/L，NaNO₃ 1g/L)，每皿接种3个菌块，培养10d待菌落长大后备用；

(2)选择长势一致的无菌铁皮石斛组培苗移栽至菌落上，在每皿的每个菌落上分别移栽1株组培苗，并将接种了LZ3菌株的培养皿命名为处理组；同时，同步将无菌苗接种到不接种LZ3的空白燕麦培养基上(培养基成分与步骤(1)完全一致)，并命名为CK组；

(3)将步骤(2)的处理组和CK组一起放入培养箱中进行共培养，培养条件为：温度为25℃，光照强度为180μmol/m²·s²，光照时间为16h/d。

(4)上述步骤(2)进行3个重复的处理，培养60d后，测量株高、茎宽、鲜重和干重，并将根部培养基洗净后在50℃烘箱中烘烤3d以上称量干重。

经实验表明，60d后铁皮石斛苗的生长情况如图11所示，图11中左边为未接种LZ3的CK组，右边为接种了LZ3的处理组，明显的右图铁皮石斛苗的长势明显优于左图，说明LZ3能有效促进铁皮石斛的生长。

本实施例还对铁皮石斛的株高、茎径、鲜重和干重进行测量或计算；并采用Excel2007和DPS7.05数据统计分析软件进行统计及方差分析，采用Duncan’s新复极差法进行比较，试验数据用平均值±标准差表示。得到的实验结果如表4所示：

表4菌株LZ3对铁皮石斛幼苗生长的影响

说明：*表示接种处理与对照组的显著性差异(*p<0.05，**p<0.01)。

由表4可知，菌株LZ3处理的各项生长指标均高于CK组，增幅在12.93％-50.0％之间，其中株高较CK组增长12.93％，差异达显著；茎径增幅则为38.94％，差异达极显著；鲜重较CK组增长50.0％，差异达极显著；干重值较对照增长37.5％；说明本申请的新种菌株LZ3能有效促进铁皮石斛生长。

综上所述，本申请的LZ3菌株属于新种菌株，能起到防治香蕉枯萎病的作用，同时，还能有效促进甘蔗和铁皮石斛等被子植物的生长，是一种性能良好的植物有益内生真菌，兼具抗病和促生的功能。

上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。

Claims

1.内生真菌菌株Acidomelania saccharicola LZ3，其于2019年10月25日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO.18805。

2.根据权利要求1所述的内生真菌菌株Acidomelania saccharicola LZ3，其特征在于，所述菌株从甘蔗根围土壤分离而得。

3.如权利要求1-2任意一项所述的内生真菌菌株Acidomelania saccharicola LZ3在防治枯萎病上的应用。

4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述枯萎病为香蕉枯萎病。

5.如权利要求1-2任意一项所述的内生真菌菌株Acidomelania saccharicola LZ3在促进甘蔗、香蕉或铁皮石斛生长上的应用。

6.一种应用如权利要求1-2任意一项所述的内生真菌菌株Acidomelania saccharicola LZ3对香蕉枯萎病进行防治的方法，所述方法为：将菌株 LZ3接种到香蕉组培苗和/或植株中；接种方法为将香蕉组培苗直接接种于培养LZ3菌株的培养基中和/或将活化后的LZ3菌液浇灌到香蕉组培苗和/或植株的根系。

7.一种应用如权利要求1-2任意一项所述的内生真菌菌株Acidomelania saccharicola LZ3促进甘蔗、香蕉或铁皮石斛生长的方法，所述方法为：将菌株 LZ3接种到甘蔗、香蕉或铁皮石斛的组培苗和/或植株中；接种方法为将甘蔗、香蕉或铁皮石斛的组培苗直接接种于培养 LZ3菌株的培养基中。