CN111100942B - 与水稻光温敏核雄性不育表型相关的分子标记和应用 - Google Patents

Abstract

本发明提供了与水稻光温敏核雄性不育表型相关的分子标记和应用，属于基因工程技术领域。通过图位克隆的方法，TMS3193被精细定位在1号染色体上，位于分子标记M3193‑2和Indel14430之间28.76Kb的区段内，该区段的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。该基因与标记Indel14420共分离，与标记M3193‑2和Indel14430紧密连锁。TMS3193的突变使水稻表现出长日高温不育，短日低温可育的光温敏感表型。tms3193的精细定位及共分离或紧密连锁标记的开发为水稻光温敏两系不育系的选育提供了新的不育基因源和分子辅助选择手段，在两系不育系选育中应用潜力巨大。

Description

与水稻光温敏核雄性不育表型相关的分子标记和应用

技术领域

本发明属于植物分子生物学领域，具体涉及与水稻光温敏核雄性不育表型相关的分子标记和应用。

背景技术

水稻是全球一半以上人口的主粮，提高水稻产量有助于帮助人类彻底摆脱饥饿问题。杂交水稻利用了水稻的杂种优势现象，使水稻的产量、抗性和适应性都有了较大提高。从上世纪60年代袁隆平先生提出利用水稻的雄性不育性生产杂交水稻开始，中国的杂交水稻经历了从三系到两系杂交稻的发展。三系杂交稻利用核质互作不育系进行杂交稻育制种，而两系杂交稻利用光温敏不育系进行杂交稻育制种。相对于三系不育系，两系不育系恢复系广、配组更为自由，大大简化了生产和繁殖过程，应用潜力巨大。

光温敏雄性不育系，其育性受到温度和光照长度的影响。按照对光温条件反应的不同，光温敏不育系可以分为四类：1)光敏不育系，在长日照下不育，短日照下可育；2)反光敏不育系，在短日照下不育，长日照下可育；3)温敏不育系，在高温下不育，低温下可育；4)反温敏不育系，在低温下不育，高温下可育。一般而言，光敏不育系的育性也受到温度的影响，而温敏不育系的育性并不受光照的影响。粳稻品种农垦58S和籼稻品种安农S-1是研究和应用最广泛的光温敏雄性不育系，目前生产上应用的光温敏不育系大部分都是这两个品种的衍生系。

为了更好地利用两系不育系，有必要分离控制光温敏雄性不育性的基因并阐明其分子作用机理。据不完全统计，目前己鉴定了20多个光温敏感型不育基因，其中，有pms3、tms5、CSA、tms9-1、Ugp1和Ugp2等6个基因已被克隆，tms-1、rpms-1和rtms-1等15个基因已完成了定位。虽然众多的水稻光温敏核不育基因被定位或克隆，但对于调控水稻光温敏核不育性状的分子基础依然知之甚少。目前生产上使用的光温敏不育系多带有tms5和pms3基因。

发明内容

本发明的目的是丰富现有技术中的光温敏核不育基因数量，提供一种含有水稻光温敏核雄性不育基因的分离的核苷酸片段，以及提供与水稻光温敏核雄性不育表型相关的分子标记。

本发明提供的分离的核苷酸片段中含有的水稻光温敏核雄性不育基因命名为tms3193。本发明在前期研究工作中，用钴60辐射10公斤93-11种子得到M0代。辐射后的种子种植于海南省临高县试验田，成熟后分单株收种，共获得M1代材料约6500份。选种子量较多的3617个M1代材料种植成株系，每个株系种50个单株。分别在分蘖期、孕穗期、抽穗期、开花期、灌浆期筛选株型、穗型、育性、产量等各种类型突变体，并收种保存。在其中3193号家系中发现一种突变体表现为雄性不育，被命名为tms3193。该突变体呈现长日高温不育，短日低温可育的光温敏雄性不育表型，该表型由突变后的TMS3193单基因控制。

本发明通过图位克隆的方法，将基因TMS3193精细定位在第1染色体短臂上的两个标记M3193-2和Indel14430之间28.76Kb的染色体片段内，并且本发明还发现该片段与标记Indel14420共分离，与标记M3193-2和Indel14430紧密连锁。

因此本发明首先提供了一种分离的核苷酸片段，其定位在水稻1号染色体上，对应于分子标记M3193-2和Indel14430之间28.76Kb的区段，所述片段的核苷酸序列如SEQ IDNO.8所示。所述的分离的核苷酸片段含有水稻光温敏核雄性育性调控基因TMS3193，该基因突变后导致水稻出现光温敏雄性不育表型。

本发明述及的水稻光温敏核雄性不育基因tms3193对应的野生型基因TMS3193定位在水稻1号染色体上，位于分子标记M3193-2和Indel14430之间28.76Kb的区段内，该区段的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示。

本发明提供了含有所述分离的核苷酸片段的生物材料，所示生物材料为表达盒、表达载体、宿主细胞。

本发明提供了与SEQ ID NO.8所示区段共分离的分子标记，其为Indel14420，本领域技术人员能够理解分子标记Indel14420与所述水稻光温敏核雄性不育基因tms3193共分离，以及基于本发明的贡献，了解分子标记Indel14420、M3193-2、Indel14430与水稻光温敏核雄性不育表型共分离或紧密连锁。

在Indel14420序列覆盖的范围内，93-11和明恢63基因组序列存在一个CT的插入缺失。

所述共分离标记Indel14420的序列由如SEQ ID No.1所示正向引物和如SEQ IDNo.2所示反向引物扩增得到。共分离标记Indel14420的引物在以93-11基因组DNA为模板时能扩增出一条61bp的条带，在以明恢63基因组DNA为模板时能扩增出一条63bp的条带。

本发明提供了与SEQ ID NO.8所示区段紧密连锁的分子标记，其为M3193-2或Indel14430，本领域技术人员能够理解分子标记M3193-2或Indel14430与所述水稻光温敏核雄性不育基因tms3193紧密连锁。

本发明发现在M3193-2序列覆盖的范围内，93-11和明恢63基因组序列存在一个G/C的SNP差异。所述紧密连锁标记M3193-2可由如SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示两条正向引物与如SEQ ID No.5所示反向引物共同扩增得到。扩增M3193-2的引物在以93-11基因组DNA为模板时能扩增出一条105bp的条带，在以明恢63基因组DNA为模板时能扩增出一条111bp的条带。

本发明发现在Indel14430序列覆盖的范围内，93-11和明恢63基因组序列存在一个GGGTGAATCA的插入缺失。该紧密连锁标记Indel14430由如SEQ ID No.6所示正向引物和如SEQ ID No.7所示反向引物扩增得到。Indel14430的引物在以93-11基因组DNA为模板时能扩增出一条231bp的条带，在以明恢63基因组DNA为模板时能扩增出一条241bp的条带。

基于本发明的发现，本发明提供了用于检测所述水稻光温敏核雄性不育基因tms3193的分子标记，其为以下任一分子标记：Indel14420、M3193-2和/或Indel14430。

进一步地，本发明提供了与水稻光温敏核不育性状相关的分子标记组合，该组合含有分子标记：Indel14420、M3193-2、Indel14430。

所述Indel14420由SEQ ID NO.1-2所示引物扩增得到；所述M3193-2由SEQ IDNO.3-5所示引物扩增得到；所述Indel14430由SEQ ID NO.6-7所示引物扩增得到。

本发明还提供了一种试剂盒，该试剂盒含有以下任一或多个引物组：

引物组1：SEQ ID NO.1-2所示引物、引物组2：SEQ ID NO.3-5所示引物、引物组3：SEQ ID NO.6-7所示引物。

本发明提供了上述分子标记、分子标记组合或试剂盒在检测水稻光温敏核雄性不育基因tms3193、或该基因的基因型中的应用。

当使用Indel14420标记引物进行扩增时，如果只出现61bp的条带，说明被检测材料含有tms3193纯合基因型；如果只出现63bp的条带，说明被检测材料是TMS3193纯合基因型；如果同时出现61bp和63bp条带，说明被检测材料是tms3193杂合基因型；

当使用M3193-2标记引物进行扩增时，如果只出现105bp的条带，说明被检测材料带是tms3193纯合基因型；如果只出现111bp的条带，说明被检测材料是TMS3193纯合基因型；如果同时出现105bp和111bp条带，说明被检测材料是tms3193杂合基因型；

当使用Indel14430标记引物进行扩增时，如果只出现231bp的条带，说明被检测材料带是tms3193纯合基因型；如果只出现241bp的条带，说明被检测材料是TMS3193纯合基因型；如果同时出现231bp和241bp的条带，说明被检测材料是tms3193杂合基因型。

本发明进一步提供了上述分离的核苷酸片段、生物材料、或上述分子标记Indel14420、M3193-2和/或Indel14430、或上述试剂盒在筛选或检测具有光温敏核不育表型的水稻中的应用。

本发明进一步提供了上述分离的核苷酸片段、生物材料、或上述分子标记Indel14420、M3193-2和/或Indel14430、或上述试剂盒在制备转基因植物、或作物改良育种、制种中的应用。

本发明提供的上述应用中，具体操作时，当使用Indel14420标记引物进行扩增时，如果只出现61bp的条带，说明被检测材料具有光温敏雄性不育表型；如果只出现63bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现61bp和63bp条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；

当使用M3193-2标记引物进行扩增时，如果只出现105bp的条带，说明被检测材料具有光温敏雄性不育表型；如果只出现111bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现105bp和111bp条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；

当使用Indel14430标记引物进行扩增时，如果只出现231bp的条带，说明被检测材料具有光温敏雄性不育表型；如果只出现241bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现231bp和241bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型。

本发明还提供了所述tms3193基因及与tms3193紧密连锁的分子标记在筛选水稻光温敏不育系中的应用。在tms3193突变体与其它水稻品种或材料的杂交、回交或自交后代中，当使用Indel14420、M3193-2或Indel14430标记引物进行扩增时，如果只出现61bp、105bp或231bp的条带，说明被检测材料带是tms3193纯合基因型，具有光温敏雄性不育表型；如果只出现63bp、111bp或241bp的条带，说明被检测材料是TMS3193纯合基因型，不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现61bp和63bp，或105bp和111bp，或231bp和241bp的条带，说明被检测材料是tms3193杂合基因型，不具有光温敏雄性不育表型。

本发明将一个新的水稻光温敏核雄性不育基因tms3193定位在一个28.76Kb的染色体片段内，并与分子标记Indel14420共分离，与分子标记M3193-2、Indel14430紧密连锁。tms3193的鉴定为两系不育系的选育提供了新的基因资源，M3193-2、Indel14420和Indel14430等标记的开发可以高效准确的对光温敏核雄性不育表型的水稻进行筛选和检测，从而提高以tms3193为不育基因的两系不育系的选育效率。

附图说明

图1的A显示3193家系中可育植株的花粉碘-碘化钾溶液染色结果；图1的B显示海南临高早造长日高温条件下tms3193突变体的花粉碘-碘化钾溶液染色结果；图1的C显示海南陵水冬季短日低温条件下tms3193突变体的花粉碘-碘化钾溶液染色结果。

图2的A显示TMS3193基因在染色体上的位置；图2的B显示TMS3193基因的粗定位结果；图2的C显示TMS3193基因精细定位的结果及紧密连锁标记的位置。

图3是用紧密连锁标记M3193-2检测tms3193和明恢63的F3群体中不育株的基因型。泳道1、2分别为亲本tms3193和明恢63；29个样本为tms3193和明恢63的F3群体分离出来的不育单株。

图4是用紧密连锁标记Indel14430检测tms3193和明恢63的F3群体中不育株的基因型。泳道1、2分别为亲本tms3193和明恢63；11个样本为tms3193和明恢63的F3群体分离出来的不育单株。

图5是用共分离标记Indel14420检测tms3193和明恢63的F3群体中不育株的基因型。泳道1、2分别为亲本tms3193和明恢63；37个样本为tms3193和明恢63的F3群体分离出来的不育单株。

图6是用标记Indel14420检测不同品种和这些品种与tms3193的F1杂交种的基因型。图6的A中，泳道1-12分别为亲本tms3193、野香B、9311、明恢63、中花11、GD-7S、隆科638S、宜香B、特B、博II B、H28B、R51084；图6的B中泳道1-3为F1杂交种tms3193/野香B的3个不同单株、泳道4-6为F1杂交种tms3193/明恢63的3个不同单株、泳道7-11为F1杂交种tms3193/中花11的5个不同单株、泳道12为亲本tms3193、泳道13野香B、泳道14为9311。

图7是用标记Indel14430检测不同品种和这些品种与tms3193的F1杂交种的基因型。图7的A中，泳道1-12分别为亲本tms3193、野香B、9311、明恢63、中花11、GD-7S、隆科638S、宜香B、特B、博II B、H28B、R51084；图7的B中泳道1-3为F1杂交种tms3193/野香B的3个不同单株、泳道4-6为F1杂交种tms3193/明恢63的3个不同单株、泳道7-8为F1杂交种tms3193/中花11的2个不同单株。

图8是用标记M3193-2检测不同品种和这些品种与tms3193的F1杂交种的基因型。图8的A中，泳道1-9分别为亲本tms3193、野香B、9311、明恢63、GD-7S、隆科638S、博II B、H28B、R51084；图8的B中，泳道1-3为F1杂交种tms3193/野香B的3个不同单株、泳道4-6为F1杂交种tms3193/明恢63的3个不同单株、泳道7-8为F1杂交种tms3193/中花11的2个不同单株。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。

若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。

实施例1水稻光温敏核雄性不育突变体tms3193的表型和遗传分析

1)tms3193突变体的筛选

2013年6月用钴60辐射10公斤93-11种子得到M0代。辐射后的种子种植于海南省临高县试验田，成熟后分单株收种，共获得M1代材料约6500份。2014年春，选种子量较多的3617个M1代材料种植成株系，每个株系种50个单株。分别在分蘖期、孕穗期、抽穗期、开花期、灌浆期筛选株型、穗型、育性、产量等各种类型突变体，并收种保存。在其中3193号家系中发现一种突变体表现为雄性不育，被命名为tms3193。

2)tms3193突变体的表型分析

在临高正季栽培条件下，用碘-碘化钾溶液(0.6％KI，0.3％I₂，w/w)对3193家系不同植株的花粉进行染色分析。如图1的A所示，可育植株的花粉粒绝大部分大而圆，并且被染成蓝黑色。而tms3193突变体的花粉粒小而皱缩，并且不能被染色(如图1的B)。此外，可育植株套袋自交后正常结实，而tms3193突变体套袋自交后不结实。而以水稻品种93-11为父本给tms3193突变体授粉则可以结实。这些结果表明该tms3193突变体在长日高温条件下表现出雄性不育表型。将tms3193突变体的稻兜在2015年冬季种植于海南省陵水县提蒙镇，安排稻蔸在1-2月抽穗(经查询当时平均温度为17-24℃)。对抽穗后的花粉粒进行碘-碘化钾溶液(0.6％KI，0.3％I₂，w/w)染色，结果表明花粉粒大而饱满，并被染成蓝黑色(图1的C)，说明tms3193突变体的雄性育性在短日低温条件下发生了转育，是一个光温敏雄性不育突变体。

3)tms3193突变体的遗传分析

在长日高温条件下种植tms3193的M6代分离群体67株，其中48株育性正常，19株表现雄性不育，可育与不育株分离比符合3:1(χ²＝0.19，P>0.05)。用tms3193突变体与93-11回交，在回交后代一个90株的F3分离群体中，68株育性正常，22株不育，可育与不育株分离比也符合3:1(χ²＝0.01，P>0.05)。上述结果表明tms3193的雄性不育性状受由一对隐性单基因控制。

实施例2光温敏雄性不育基因TMS3193的初步定位

使用极端性状混合池分析法(bulked segregant analysis)和隐性群体分析法(recessive-class analysis)对TMS3193基因进行定位。以明恢63为父本与tms3193突变体杂交构建了一个F2群体，分离出了205个不育株。利用301对均匀分布于12条染色体上的SSR标记筛选93-11与明恢63之间具有多态性的标记，筛选得到64对具有多态性的SSR标记，多态性较低，表明明恢63与93-11在基因组序列上差异较小。分别构建所述F2群体的可育株和不育株的混合基因池，利用所述64对多态性标记对所述可育基因池与不育基因池进行分析。结果表明1号染色体上的SSR标记RM243和RM023与tms3193的突变表型存在连锁关系。进一步利用上述连锁标记逐个分析明恢63和tms3193的F2群体中的不育株的基因型，最终确定目标基因初步定位于SSR标记RM243和RM023之间，由此将TMS3193粗定位于1号染色体上(图2的A)，通过在SSR标记RM243和RM023之间继续筛选多态性标记，得到RM10526、RM10544。TMS3193基因与RM243、RM10526和RM10544标记之间的交换单株分别为1个，4个，5个(图2的B)。

实施例3水稻光温敏雄性不育基因TMS3193的精细定位

在上述粗定位结果的基础上，使用隐性群体分析法(recessive-class analysis)进行精细定位。利用连锁标记挑选F2群体中的tms3193杂合单株发展了一个F3群体，包含3322个单株，其中分离出不育株904株。同时，在标记RM243和RM10526之间进一步开发了5个多态性标记。其中，用于检测分子标记Indel14420的引物如SEQ ID NO.1-2所示；用于检测分子标记M3193-2的引物如SEQ ID NO.3-5所示；用于检测Indel14430的引物如SEQ IDNO.6-7所示。利用这些标记逐个检测F3群体中分离出不育株的基因型，发现在M3193-2标记处只有1个不育株扩出了105bp和111bp的条带，而其它不育株都只扩出了105bp的条带(图3)。这说明在904个不育单株中，有903个单株只扩增出了105bp条带，即具有105bp纯合带型时，有99.9％(903/904)的植株都表现出光温敏雄性不育表型。而在Indel14430标记处也只有1个不育株扩出了231bp和241bp的条带，而其它不育株都只扩出了231bp的条带(图4)。这也说明在具有231bp纯合带型时，有99.9％(903/904)的植株都表现出光温敏雄性不育表型。

标记Indel14420在标记M3193-2和Indel14430之间(图2的C)，在标记Indel14420处所有不育株都只扩增出了一条61bp的带型(图5)。这些结果说明TMS3193基因定位在标记M3193-2和Indel14430之间28.76Kb的染色体片段内，该28.76Kb片段的核苷酸序列如SEQID NO.8所示，并且与标记Indel14420共分离(图2的C)。

实施例4M3193-2、Indel14430和Indel14420在不同品种中的多态性

为了验证M3193-2、Indel14430和Indel14420三个标记在指示tms3193突变体光温敏雄性不育表型上的特异性，本发明分析了在多个品种中三个标记的多态性。这些品种包括两系不育系GD-7S、隆科638S，三系保持系野香B、宜香B、特B、博II B、H28B，恢复系9311、明恢63、R51084，常规品种中花11。tms3193与这些品种的杂种F1均没有光温敏不育表型。图6的A显示，Indel14420除了在tms3193和9311中扩增出61bp条带外，在其它亲本中只扩增出了63bp条带，图6的B显示在tms3193与其它亲本的F1杂种中同时扩增出了61bp和63bp条带，说明Indel14420可以在不同品种中特异性标记tms3193的光温敏雄性不育表型。图7的A显示，Indel14430除了在tms3193和9311中扩增出231bp条带外，在其它亲本中只扩增出了241bp条带，图7的B显示在tms3193与其它亲本的F1杂种中同时扩增出了231bp和241bp条带，说明Indel14430可以在不同品种中特异性标记tms3193的光温敏雄性不育表型。图8的A显示，M3193-2除了在tms3193和9311中扩增出105bp条带外，在其它亲本中只扩增出了111bp条带，图8的B显示在tms3193与其它亲本的F1杂种中同时扩增出了105bp和111bp条带，说明M3193-2可以在不同品种中特异性标记tms3193的光温敏雄性不育表型。

实施例5利用tms3193基因转育新的光温敏不育系

用tms3193突变体与育性正常的受体，如博IIB和野香B，进行杂交、回交和自交，并在此过程中用分子标记进行tms3193基因和遗传背景选择，最终获得博IIB和野香B背景下带有纯合tms3193突变基因的隐性核不育系。具体实施步骤如下：

1、以受体亲本，如博IIB和野香B，为父本与母本tms3193杂交获得F1。

2、以F1为母本与受体亲本，如博IIB和野香B，回交获得BC1F1。

3、种植BC1F1，分别使用引物序列如SEQ ID No.1-2、或SEQ ID No.3-5、或SEQ IDNo.6-7的引物对检测tms3193基因型，选择tms3193杂合基因型，即PCR扩增产物的条带同时出现61bp和63bp条带，或同时出现111bp和105bp条带，或同时出现231bp和241bp条带。

4、使用一组基因型(例如200个)在tms3193突变体和轮回亲本之间存在多态性，且分布均匀的分子标记(包括但不限于SSR、SNP、INDEL、EST、RFLP、AFLP、RAPD、SCAR类型标记)，对步骤3中选出的单株进行遗传背景鉴定，选取与轮回亲本基因型相似度高(如大于88％相似度，或2％中选率等)的植株。

5、用步骤4中选出的植株与受体亲本，如博IIB和野香B，回交获得BC2F1。

6、种植BC2F1，重复步骤3和步骤4，选出tms3193基因型杂合，遗传背景回复率高(如大于98％，或2％中选率等)的植株，收自交种BC2F2。

7、种植BC2F2，重复步骤3和步骤4，选出tms3193基因型杂合，遗传背景纯合率最高的植株，收自交种BC2F3。BC2F3后代中分离的tms3193纯合株即tms3193基因的光温敏不育系。

以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明技术原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。

序列表

<110> 海南波莲水稻基因科技有限公司

<120> 与水稻光温敏核雄性不育表型相关的分子标记和应用

<130> KHP191116325.9

<160> 8

<170> SIPOSequenceListing 1.0

<210> 1

<211> 17

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 1

taccaaccca atgtccc 17

<210> 2

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 2

ctactgacca tccgctgt 18

<210> 3

<211> 24

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 3

aaaaaattcc caggccgccg cacg 24

<210> 4

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 4

attcccaggc cgccgctcc 19

<210> 5

<211> 18

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 5

cgacggcatg caactgcg 18

<210> 6

<211> 19

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 6

taagcatttg gcatgaacc 19

<210> 7

<211> 20

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 7

ttttcctgaa gaagggatat 20

<210> 8

<211> 28768

<212> DNA

<213> 人工序列(Artificial Sequence)

<400> 8

ttgttcaatt atacaagtgg aatttcaatt taatgtttac tccctccgtt tcaggttata 60

agatgttttg actttacttc gagtttgacc aagttataga aaaaaaatag taatattttt 120

tacccaagat aaatttatta taaaaatata ttgaattatt aatttaatta aactaatttg 180

ataatgtaaa tattactata tttgtttata aacttagtca aacttaaagc attttaactt 240

tgaccaaagt caaaatatct tataatctga aatggagggg tacaagtatt catgataaaa 300

tcaaaactct attgctagta cgtatatttc taatcctaat cctagtagaa tgcgattaga 360

gtcaacacac ggtatctcgg atgggagagt cgcttatttg gttcatcgat ctttccgtgt 420

gttctcgacg tgttccccgg acaggacgta ccgtattctc atcaatatac tatacaggcg 480

aaaatctgca ggtgagagag gttgtcaaat ttcttttctg cttttctttt actattctct 540

ctctctcttt cgcttgatat tcccaaacta tatatataca caacataatg acatgcatct 600

aggaccaaat taaactcatc gcatggaggg gcaacatgaa aacgagttac aggaaagaca 660

agcaaatcgc cccaagcgga ggagacggcg gctgccgtgg tggtactcgg ttcagatcga 720

cacgaaacgg cgaataggca gaagaaccag gctactcctg agagaaaact gcggcctcta 780

ctcgatatgc cagggtaggt acttaaaatt cacacgcctg ggctcccatc gctctctcgt 840

cattcgagcg aaggaactgc aatcctccta ctaccaccgc gtcctcgagg ctgggatgga 900

gagctgggag gagtacaccg tgcaggacag ggaggaggtc cgggcgctga tagacgagat 960

cgtcgagctc taccggagat cgattcccag gccgccgcac gacgtggttc gcgaacgtcg 1020

acgacgtggg catcgtcgga tcgtcgttgt cgacgacgac gttcgccgcc gcagttgcat 1080

gccgtcgtcg tcgtcctgcg tgtttgtggg gggcgctgtg tttctcattg ttcttatggg 1140

gtggatcttt gggcatgtgt ttcttcttgt ttttttctcg tggatcttaa gctttgtttg 1200

tttcaactca aggtttcact aggttattgt aatctaatat aaaccagatt actataagct 1260

ggattataat aagttatgag ttttttctct agattattgg gtttgaaaag ctaatgtcta 1320

taatacccta agctattgcg gagtgggagg aggatgagag acggcggcgg catggcttgg 1380

gaaggagccg gagtgtaggg tgggagctta gggaaggatt tgcacgcgac tagggagaga 1440

gaaagcagat gcacgtgcgg ccgagggaga ttcgcgcgcg actggagaga gaggaagcgg 1500

atgcgctcaa cctgataggt tcgatggtag tggtggataa tttgcataaa atttttaagg 1560

gtagtgggtc tttagccgga caataatatg aaaaaaaaac gtttagatga gactaccaga 1620

ttatactaat ctggtttata aattataata atctatcata ataatccact tatttgcttc 1680

atattattac taataatcca aatcctatct tattatatag ttgatgtcca ctaactacta 1740

aagcttaaca tgtaactgtt ccacgtcatc atccactagc aattattatc tagagtattt 1800

taaatcacat gcaagtgtac catatcatca cccattagca attattattt agagtatttt 1860

aaatatcatg caaacatgac atatcaatta taattttgtt gtatttttag aactcaatat 1920

gcaagcaata ttaaatcgtt atatatctct acaccatttt tacattattg aaacatatac 1980

atctaccatt tcactccata aatcatggga ttagctaaaa agctgtcgag tattttttag 2040

gaaaaacttt cgaatctaac tacattatat aatttcatta gaactatact ataataataa 2100

taacttgtat atatgtatta aaacaatata tgcaacttta tatcttatat agagataaca 2160

atttagttat agtgtagtta cactatactt acaatataag tatataacaa tagtataact 2220

acaatgtagt tagcatgtaa ctagaatgta acttagatgt aacttgaaca aatctgccat 2280

aaacatgtga tgatgagact agcttgtgaa aaagagggtt tagatctgat agcaaaatat 2340

ctcagcacaa atcttagcgc ggaatcaacg accaaaaaat tgacagtttt caggattgaa 2400

aactatcgac agttagctag caaaaccgta aatcatatat acatgcatta atccacatat 2460

cccgcaacaa aacgcggggt atcaactaat aattataata attctaagct gaaacaaata 2520

gagcatcagt ctttgtcaac tattgtttcg gtgatcctaa aacaaaagtt gtatgtgttc 2580

cttaaacgac ggtgttcagg gttttttttt ggcttgatgc gacctatcat ggcacaaatt 2640

aaaatatgag gtggtttatt ttatatccgg agatcataaa atgtttgtca cgctaggtca 2700

tttaaggggt gtttgggaga gaggggctaa atttgagatc agggactttt ggttttgagc 2760

aagtttaata gtatagccaa ctactagctt taattcattt atagtcaatc taatagcttt 2820

tttttcgggg aatctaatag cttattcata caatagttac atactacact aataatacct 2880

ggccccacct gtcatacaca cactgcgtct tggagtccgt gctatagctg gctataaatc 2940

tgtagcccgc tgctcttctc tctgctcatt tatctgttta aaatatattt gcagctggct 3000

tatagcatgc tattgtacct gctcttacgg tcgcttggct ggcatgtttt gagggggaaa 3060

accgttacga ggttgggccg cgcgcggccg gcgtaccggc gtctggaagc cgctgtgtgc 3120

ttttaccgta caacaatcgc cgcgcagcca cacaagcacg ctttttagct agtacaccgg 3180

cccgtgcgaa cgaatcgctc tgtaaactcg catacacgaa aacatggaca cattttccag 3240

gtgcagacaa gttaggctga gccttttggg ctagaaaaaa aaaaaaggac atcccggcac 3300

aaaccgtgcc ttctcagccg ctcacgacgc ggccacgccc aagcgttttc acccgagccg 3360

gaccaacctg gctctggctg gtataatacg cggtttcaga tcctgatgag gcagcgacga 3420

cggcgacgca ggaggtgcac acaggctcct cgactcgtga ggcgaactct ccctcggcat 3480

cgctacgtga aggtaattaa cacgcgcgct ggggctccct cccacgcgca tcgccctcac 3540

cgtgcgcgcc gatgagctat ggctaccgcg acgtacgtcc cgtcctcgtg gacaaaggcc 3600

gggatcgagg agtacacacc gagcgggaca ggggagtaca caccgagcgg gacaggggag 3660

gaggtgcagc atcgtacgtg gagatcatcg tctgtggtcc gactcggaga tcgtccatgg 3720

ccaaagccac cgccggacgc cgtcgttcgc gaacgtacgt cgtcgacgtg agcagcgtcg 3780

ggttgccgac gttcgaggga gctcctccgt gtggtctcgc gtgtttgggg ggggtgggtg 3840

ctcttaattc gacttcaata taatcgtaga cggtggtgtt gcgagtgaaa ttcgaattta 3900

aggattgcac gtttgcaccc ttcgattagc ttgcctccat ttttacagat ttacagggtc 3960

atttttatca ggaaaatatc cggttctata aaggtcagtg tatagataca gtcagagatt 4020

ggtctcataa actaagacat gtcgatcgac aagggagtaa atatacacat tcattgaatt 4080

tggacttttg ccacggcaca gaaacactga acaaaatgtg cctttgttca atacaatcaa 4140

gaaaaggaat aataaaaagg aatgaaaatc ctctatccta ttaatctagc tataataagg 4200

aactatacag gtatttacgg gaacatgtca gattgcctac gtaaggtttt tgctatgcct 4260

ccatcgaaag tcgaaatagg cgattcaaga aaatacgagg ataaagttga tccccaaacc 4320

accaccatct gcatgccttc atgcaaatac tggggaaacc agcgaaacta tgctgctatt 4380

gccactactg tgccacttac tatggtcaac accagcttat tgcatctcta gcaacaaatt 4440

gtattgtcta acaaaacttc tacaagttca catgaagctc atccagatat actaaggtct 4500

gtcatgcttc tgtcagcaat atatgccttt atatccctga aaagatttaa aagggaaaaa 4560

gataattaac aagccaattg gaaaaaataa aattgtgaaa attatttcac aactccggaa 4620

ggcagatcaa tattgcgggt gatgcacact ttacctgcat ctgggagctg aacagtctgc 4680

attgtcacaa agcagtgagt gcgtgaacag cagtttccac atgaatacac acatatggca 4740

acctcctcca ccacgggcac gggtatgaca tcgtacacca tggaagaaca gtttctttaa 4800

cgtcaaacaa agtttggaag tgcaacttcg atcaaaacat cttgatgcat gcaccaagcc 4860

ttcaaggtag tcctgctttg aaagcatcca attcattagc aagaggcacc gtaaatatca 4920

ctagcagaaa ataatatttg ggatgaaacc acataattac cacattagaa tctaaaagct 4980

catagaatat ttttcatcct gattgaaaat ttggatatgc agtcacaaaa tactgggaca 5040

aaacataaca tgaagcaaca cataagaata gtgaagcata cacttcacac atatgctcaa 5100

gattaaacca aaaggataaa attatggaac aaataataat agtgcaactc acttatattc 5160

tacagtttat gccaaatata atcatgcgaa gagcaaacaa ccaaaaaaaa atcagatccc 5220

cagagttgtt cccaaaaaat cagaagatgt taatttcgag tgcataataa acattcatga 5280

aaaacacaaa taggagatga aaaagattca gctaccaatt taaggatacc tgtagagtgt 5340

acttctgcaa tacgtgatgg tcttttttct gcctcaactt atgaatatgc aaactttcac 5400

cgtcttgttt atagcatgaa tcacaaaagt tgcagcctag gcaaaccaag caccgccatg 5460

ccaagcattg atccatggca cggtgacaag aagaacaagt tgaatcatgt agatgataaa 5520

gaatcatcat tgtggaatgt tttgccctcc ggagagtatc aaactggtat tgattgtctt 5580

gacaatgctt caggaaatct attctgctgt caaagtactt gctttccatt gttggatcta 5640

catcatccgt ttctggaaga ggttcttcct ctatctgtca gaggagatta gtaatctggt 5700

tagtatttcc atgcaggcag attgtagcta ccttaaatag atgaattcat atacgtactc 5760

tttcaaatgc atgcttttgt tttgttgtag ctgggtgcct gtccttcaga ggggtattca 5820

gctcctcagc ataacaacta cgaggacaaa taagaatggc atcataaata atgggtgcct 5880

taacgacaaa gagtaattga ataacaacaa aagagtagga atgtagattc attttgcaat 5940

ttgacaggca aacggtcact gtataagcta gaatggttga actatgcaag tgccatgtgc 6000

aattatatat ttttaccaac agcagacatt tcccctagtg ctgttccaga aagttcttca 6060

gtatgggaaa tgcattctat atggtcacaa aagtttacat gactgaatgc ttaccgttca 6120

caaagaaaga agtttttgca gctggtgcaa acccaactac taccagatac aataggatgg 6180

tggcaatgct tgcaaaattg ctgcagacaa agcattaaaa aatcttcttt catggttcgc 6240

aacctttctc caagctgcca acaatgaaaa ttaaggggtc aagtgcctaa aatactgaag 6300

aaggcccggc gaaaaaaaat tctgaagaaa gggagcacca tgatttaaac aaccaacctt 6360

atgcacaagt aaaatatcct cgaggtttcc tttccggtca tcacgtttgg caacccgtag 6420

aagccttcct agttgagttt ctttcttctg tgaggtgtca tcatctttct tttcaaggag 6480

cctctctgct tccccaggcc agaaatcatt atcacagtat ggcaaccatg cagctgagat 6540

attggtcttg cattcattgg tgggctgaag gaagaagtca tagagtgtat tccgttccac 6600

aactaccccc tccttaacag ccttctttac caaattctgg tacctaaata tattgaaaag 6660

attatcaaat gaaggcccat aaataatttt aggattgact gtaaaagatg atgaagacca 6720

accagctccg aagcttgtca gactttggca tcttctgtat tgtaggatga caatataaaa 6780

cataatcgtc acgctttgta gatgggcaag tccatatgga acagcttaca aaccctcgtt 6840

tcttgcagaa atccaagtag ccaatctggg ggaaaacaga ttggaagata atcagaccaa 6900

catgagatcc ataaactgaa atcaagatca agaacactaa gtgtttaatg attatgcatt 6960

ctcataccaa aatttcatga tacacaaagg tacggagagc ttctccactg gccgacttga 7020

tttccggtct gaagtacttg acagaatcaa tatatgcaag ataaacgtgc ctttgatttg 7080

gtgatgggca ggctgaacca tactcttgca catacatggc gaacaggcat acatctacac 7140

cttcattctt ttgaaacaag agaatggcct gcacaagcac aaaacacgga aatggtaacc 7200

cacattatcc actaaataat gaaagcataa tttaaatgga tgttataata atagcattag 7260

taaagtataa gtatcacata atcacctttg atttgtacgg aaattcccca ggatattgtt 7320

cttttttaaa aaaatccttg aaacgtggtt ggacttgcag tgttctatca gctgaagata 7380

ccactctaac agtaagacct tcaactcctg gtacctaata attggaccat aaaagttcgc 7440

ccaataagtt tctccagtat attacagtgt aataaaaatc ctagaggcag aaaaataaca 7500

ttaagatcag catagatgat cagataagac taagcaaagc atccacaagt ttatgttcca 7560

agtttgacca tgaattgtaa tatgacatct tggtcagcta aatcagatga atatgcagaa 7620

ccaactttta tcggaatcca ataaaatgca aggaaaaaga agaaaaaagt agtttcacta 7680

aaaaggatac tgaaacgcaa caaatatatg gtcatcaaca tgtgttccaa agatgaattc 7740

atgtgtaatc agctgcaatc ctgaagccat aaatacacat tgctagatgc accaagagaa 7800

gtattaagaa catgattaag tgaaatgcca tcagtacatt gtaaaaaata aaaagaaacg 7860

tatgacagta aagatgcatt catgtaatga attatctaag tcaacttaga agactataat 7920

ataaggacta acatgttact tgtaaccttc aatccagcac atagagcaag aagcacaaaa 7980

atgcaattgg aaagacgtat gtaacttttg gctgtggttc aataggttaa cagtgaggta 8040

gcctgttcaa cggtagcaga atgcaacacc agcatattct gtacacggga caaggtataa 8100

aagaaaagca taacacaact acctcatcaa cactttttcc agaagcaatt gccctctgtt 8160

gccgctcctg cacaagccgc tcagaaagcc tttgctcaat atgatcactt agtctagttc 8220

ttggtaactc gcgtgctccc agaatagtag atggctcaag tgaatcaaca tcttcattat 8280

ccttttcctt caagaaacat tttgcacaag tatattcagc ctctggatcc acgattttgg 8340

ggttaaaaag tgcgcagatt tgatgctgcc aagctttgca cttatcgcac tggacccact 8400

gaaaaggcat aattaaacaa aaaatgagta attcgtatat gattccaaat gactagagag 8460

aaataagaga agcatatgtt acccattctg cctcagcatc tgtctctgca tagctgaatc 8520

tcttctgata tttggctttg gcactactaa gatggtggca tctgccacat attgaagatt 8580

tgtcatttcc attttccact tcaacataat aggatcctgt agaattaatt attttaaaac 8640

agagcgcgca aaatcgtgga gggggctcaa agaggagtct ttccatccca cataaattgc 8700

atgtgttctg atcaggcaag ccttcaactg atagcagctc ttcagtcggc actttgctct 8760

acaaaaaata agttaatcat gttaagagat ataaactttg cttaaaacaa gcacacactc 8820

tgtacaatat aatcaagaaa gcttgagtga caacaaaacc caaaatctta gtaccaaatg 8880

aaaatcaatt gaaagtacat aatatttagt taattttgca gctgctcagt ttgaaaattt 8940

ctctagacta catcaaccaa taataatcaa gtgctttaca atactagata aatcatacaa 9000

gatccaacag gttattcact cacctgagaa gtatcatggt tcagagtaca caagtgatct 9060

ttaagctcct cagaagttaa tgcataaagt actgaggccc ctcttctctt ccttgccctc 9120

aggctgtccc ctgacaatgt ttggtccaat aaatcaacct ttgcatcctt catctcaatg 9180

tcactatttt cacgacgaaa ttcttcttca gtttgtacag cactccccga caatctgacc 9240

atatccattc catgtacatt atcggtgcaa gcaatgttgt cccccaagga agtacaacat 9300

ggtgattttg ttggtgaatt agtgacttca gattgtactg tttcagcaga tgcataagtc 9360

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ggaacatcaa ctttcaagcg ttttgctgga taatgcttgc cagaagatcc atctgaagca 9480

ggtgaagtcg gctttgatac agtactattt gatgtctgtt cagctctatc cactgtcttg 9540

cttacagggc tacaagcacc ataattagtc atgaagccct gctgatgatg cataaagtgg 9600

ttgcttaaat ttgagctttt ctccctggag aaaccttcat gatcagaagt atgcccaagt 9660

ttttctttca tttgaatgca tcgatcccgt ttgtgctctc cattgatgta cggatgaatt 9720

tgagcatgat acaagtcacg gtttccagtg gtaatgtttg actgatctga ttgctctagt 9780

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tgaccggttg tgggatacaa acttttattg tttgtggaaa ggttttgtcc gttcactgtt 9900

gagaaagaat ccatcggaag tgttctcatt gcactagaac atgttgtttg atcccacact 9960

gctgacaaag aactagaact cccagaggtt gatggttgtg aactatcatt ttgatacgca 10020

tcacctggca aaatttgacc atagtgttta tgatgccaaa taacttcagc tcaactctgt 10080

ttcagacata agaaagggga tgtaaactca cctgagaaat gttcttttat atggccaata 10140

tgcagtacat caatactagg gctacatttc ggtagagttg atgcacatga ggtaaaaatg 10200

gtgtttgcta atctttcagg catctgcttg ggtttatcag ccaacgaatg agcaaagtta 10260

gcagcaccca tacagttttc atattggtta tatcctgcca aaatcaagcc aataaagaat 10320

taaaaaaatt aaggtgtatt gtgaggttaa aataggtaac tcatcatctc aactcaccct 10380

gagtggagga tacattatat gcacaggagg gcagattatt aggtccagga gtaactctat 10440

catggtagat gggcacctcc atcacaggca gctgttgtga gtttagtttg gatgaagctg 10500

ctgaagcact ccaatgaaac atactacccc gaaatgatgc agaattgacg atagcattca 10560

acctggttct taaagtttca agatccatat acttaatctg agagagaatc agatgttagc 10620

aagtgactga gaactattta gataaatgaa tccaaataat caacttctaa gtacaccaaa 10680

ctgttcagca gtaacaattc tgtttaagga ttacaagaat atgctgaatt ttgtatttat 10740

tcaataaagc atgtagataa gttcaatatt gtccaatatt agagtagaaa ccacaccaaa 10800

ttaaagcacc ataggtgatc atatatccta taatagttct aatgcagcaa gagacaacac 10860

aaacctttga atcagctttc tcaaaaagat gtcggtcaat acattttcca atttccataa 10920

gaaaggatag gtcaaagttg cagaattcct tccgctcatt taggtactct acactggata 10980

agaaaaaaga atcaggatat agttgaacaa gagataataa ctgcaataag ttatcggttt 11040

gctacaactt aagttgcaac aagccaccaa aagcacgtga tgttatcaga cagactggtc 11100

actagcagtc acagatttta gataaaatcg tgccagtagc attgcagttt ttgaaatgtt 11160

caactaaagt tgcagaaaac atatgtacag tgtatacttt gttggtacgg catgctagta 11220

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cattttacgg tgaataatat tgcgaactac ggatgtatct tgatccatat tatccaactg 11340

aagaatttca gctgcagatt gtgtccagcc acttgtgggg tattgctggg taggaaatcc 11400

acttgctgca tattgctgtt gagtcccttg cagggtcttt gccatcatgc ttctatctcg 11460

cctggaattc gcagaataaa cccattacga gcttgatcag tagcttacat gcagccaaca 11520

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cattcacccg aaagcgattt tgctaacgat cactcgcgtg atttttttct gacatttcac 12660

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ctgatcgacg agagacaccg tctctcttgt cgttgtcgtg aaatataaaa ttacaatcct 12840

atataactaa atttacattt gtaaattcag ttgatttgac atgtaagtgc actgtaattt 12900

tgataaaaaa taatgtttaa gtaaatatgt acatattatt ttctttaaaa tataaaatta 12960

cagtcatata taactaaaat tacatttgta aatttagttg atttgatatg taagtgcact 13020

gtaattttga taaaaataat gtgtaagtaa atatgtactt attattttct ttaaaatata 13080

aaattacagt cttatataac taaaattaca tatgtaaatt tagttgatat aacatgtaag 13140

tgcactataa ttttgataaa aatattgtgt aagtaaattt gcattagtta ttttatttca 13200

aatataaaat tacagtctta tataactaaa attacatatg taaatttagt tgatatgaca 13260

tgtaagtgca ctgtaatttt gataaaaata ttgtgtaagt aaatttgcat tagttatttt 13320

atttcaaata taaaattaca gtcctatata actaaaatta catatgtaaa tttagttgat 13380

ataacatgta agtgcactgt aattttgata aaaatgttgt gtaagtaaat ttgtattaat 13440

tattttattt tgtagtccgt tggatgcaaa tccaaggaaa gaaaaaatct caaaaatcac 13500

ccgagtgatg cataggcggc cccctcgaaa gaggggaaaa gaaaaacatc gaaccgacaa 13560

ggaataagtc cattttgcct ccctcaattc ttcccctttg tcgaattata tccctcaacc 13620

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tggtttttga cagtggtttt gctggcgtgg catcctagtc atcgaaaaaa acttaaaaat 13740

atgtgagggc ccacatgtaa gtggcatttc tattcttcct ctcctccacc actctcctct 13800

ctcctccccc ttctctctcc ccaaacagag cacggccagg agaggggccg gaggcgcggg 13860

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ttggaatttg aaaaaggaat tcaaattttg aaactcgcaa aatattcgtg ggaaatttgg 19560

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gcggcggctg agcaccgcac cgccggcgtc tggtgacgcc atgcacgtcg cacccttccg 27900

aattcgcggt ctcttccccc ttcaggagcg gcagccggtc gaacgccgcc gcgacgaacg 27960

tggccagcac caccaccacc ggcccggcgg cgacgagccc tcccggcgcg acgccgccgc 28020

cgagcacgcc gccgcgcggc ccggccagga acaccgccgc ggaagcgcct ccgcctccgg 28080

gggcgccctc tgccgccgca tgcggcggtg gggacgggaa gaagcacccc gccaggccca 28140

gtatctccat ggtgccgcgg agcaccaccg ccgcgggctc ccggagcacc acgtccgcga 28200

cgcgcccgga cgcgcccagc accagcgcgc cgcgccgcgc gcggcgcgcc actgcggcga 28260

cgcacgacac cacgtctcgc cccgcgggga cctccacgac gagggcgcgc atcgcgctgg 28320

ggcactcgtg cgcgatcacg gccaccggcg gcggcttcgg cgccccgcgg cccttgcagg 28380

ggcacagcgc cgccgccgcc gccctgctcg gccgccggag cttgcccggc gcggccgccg 28440

ccgcgtcgtt cgcggtgacc acgcccatgt tcgcgtcaaa gattttgccc gcgtcgtcac 28500

gtacttgtgg atgcttaatt actgtgattt ttagagcgtt ttaaagggca gatgcccgtg 28560

ttcttcgaag tagctcagct gttaagaggg aaaataagcg tgatgcgttt ttaattgtta 28620

agtactcgaa catcctaaca agcacccaac tgtcacggtg ctcatgtcct gcaaaaacat 28680

taaaaaacaa ggacccaact gtcacggtgc tcatgtcctg caaaaacatt ttctgcaaca 28740

tgcaagtagg taaagtacat gttgaact 28768

Claims (7)

1.与核苷酸片段共分离或紧密连锁的分子标记，其特征在于，所述核苷酸片段定位在水稻1号染色体上，对应于分子标记M3193-2和Indel14430之间28.76Kb的区段内；所述核苷酸片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示；所述分子标记为Indel14420、M3193-2或Indel14430；

所述Indel14420由SEQ ID NO.1-2所示引物扩增得到；

所述M3193-2由SEQ ID NO.3-5所示引物扩增得到；

所述Indel14430由SEQ ID NO.6-7所示引物扩增得到。

2.与水稻光温敏核不育表型相关的分子标记组合，其特征在于，含有以下分子标记：Indel14420、M3193-2、Indel14430。

3.一种试剂盒，其特征在于，含有以下任一或多个引物组：

引物组1：SEQ ID NO.1-2所示引物、引物组2：SEQ ID NO.3-5所示引物、引物组3：SEQID NO.6-7所示引物。

4.权利要求1所述的分子标记、或权利要求2所述的分子标记组合或权利要求3所述的试剂盒在检测水稻光温敏核雄性不育基因、或该基因的基因型中的应用。

5.权利要求1所述的分子标记、或权利要求2所述的分子标记组合或权利要求3所述的试剂盒在筛选或检测具有光温敏核不育表型的水稻中的应用。

6.权利要求1所述的分子标记、或权利要求2所述的分子标记组合或权利要求3所述的试剂盒在制备转基因植物、或作物改良育种、制种中的应用。

7.如权利要求5-6任一所述的应用，其特征在于，

当使用Indel14420标记引物进行扩增时，如果只出现61bp的条带，说明被检测材料具有光温敏雄性不育表型；如果只出现63bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现61bp和63bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；

当使用M3193-2标记引物进行扩增时，如果只出现105bp的条带，说明被检测材料具有光温敏雄性不育表型；如果只出现111bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现105bp和111bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；

当使用Indel14430标记引物进行扩增时，如果只出现231bp的条带，说明被检测材料具有光温敏雄性不育表型；如果只出现241bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型；如果同时出现231bp和241bp的条带，说明被检测材料不具有光温敏雄性不育表型。

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