CN111077241A - 一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量或有关物质的方法 - Google Patents

一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量或有关物质的方法 Download PDF

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Abstract

本申请公开一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量或有关物质的方法，本发明方法检测盐酸达克罗宁胶浆含量时，在相当于供试品浓度10%~200%的浓度范围内，浓度与峰面积之间的线性相关系数R2大于0.9990，重复性良好，盐酸达克罗宁的定量限为0.0510μg/ml，平均回收率在98～101%之间，RSD小于2.0%；检测有关杂质时，杂质I与盐酸达克罗宁峰之间的分离度为29.6，杂质I在定量限浓度~1.734μg/ml，杂质I线性方程为A=2×107C‑220161，相关系数为0.9993，杂质I峰面积RSD为0.6%，平均回收率为97.9%，RSD为3.5%，检测限为0.0041μg/ml。

Description

一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量或有关物质的方法
技术领域
本发明属于药物分析领域，具体涉及一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量或有关物质的方法。
背景技术
盐酸达克罗宁是一种局部麻醉药，已有报道显示可显著降低患者上消化道内窥镜检查的不适感。其结构式为：
Figure BDA0002302422500000011
化学名为4-丁氧基-β-哌啶基苯丙酮盐酸盐，分子式为C18H27NO2·HCl，合成该化合物的过程中，会产生副产物，即杂质I，其结构式为：
Figure BDA0002302422500000012
化学名为1-(4-丁氧基苯基)-2-丙烯-1-酮，分子式为C13H16O2，分子量为204.26。
根据文献报道，测定盐酸达克罗宁胶浆含量的方法有：
宋洪涛，胡晓芳等.HPLC法测定盐酸达克罗宁胶浆剂中盐酸达克罗宁的含量.福州总医院学报，2005年12月第12卷第4、5期。
色谱条件：Hyperisl ODS2 C18(200mm×4.6mm，5μm，大连依利特科学仪器有限公司)；流动相：甲醇-0.5％三乙胺(磷酸调pH至3.9，V：V＝60:40)；流速：1.0mL·min-1，检测波长：282nm；柱温：室温；进样量：20μL。在此色谱条件下，盐酸达克罗宁的保留时间约为6.7min，样品中其他成分对测定没有干扰。
对照品储备溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁对照品10.3mg，置100mL量瓶中，加0.01mol·L-1盐酸溶解并稀释至刻度，摇匀，作为盐酸达克罗宁对照品储备溶液。
供试品溶液的制备：精密量取盐酸达克罗宁胶浆剂2.0mL，置100mL量瓶中，用0.01mol·L-1盐酸洗涤移液管3次，洗液合并，再加0.01mol·L-1盐酸至刻度，摇匀，用0.45μm微孔滤膜过滤。精密量取续滤液2.0mL，置10mL量瓶中，加0.01mol·L-1盐酸至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
张小瑞，王金波等.1％盐酸达克罗宁凝胶的制备及质量控制.实用药物与临床2015年第18卷第1期
色谱条件：Diamonsil TM C18(200mm×4.6mm，5μm)；流动相：乙腈-KH2PO4(0.015mol/L)＝55:45(V:V)，磷酸调节pH至3.0；流速：0.6mL/min；柱温：25℃；检测波长：282nm；进样量：20μL。
对照品溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁对照品0.1g，置100mL容量瓶中，加流动相定容，摇匀并超声10min，作为对照品储备液。精密量取对照品储备液4mL，置100mL容量瓶中，加流动相定容，摇匀并超声10min，作为对照品溶液。
供试品溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁凝胶0.4g，置于小烧杯中，用0.05mol·L-1的硫酸溶液溶解，超声10min后过滤；将滤液转移至100mL容量瓶中并洗涤小烧杯3次，加0.05mol·L-1的硫酸溶液定容，摇匀并超声10min，作为供试品溶液。
以上检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法中，流动相多采用不同体积比的缓冲盐与甲醇或乙腈的混合溶液，缓冲盐对柱子的损伤较大，造成柱压升高，寿命缩短，且所得到的盐酸达克罗宁色谱峰拖尾现象严重；此外，盐酸达克罗宁在水中不易溶解，只有在某些助溶剂中能很好的溶解。
同时，目前尚没有已公开的盐酸达克罗宁胶浆有关物质的检测方法，为严格控制药物的质量，提高药物的安全性，减少对人体和环境造成的危害，摸索出一套适合盐酸达克罗宁胶浆有关物质的检测方法。
发明内容
本发明的目的在于提供一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量或有关物质的方法。
基于上述目的，本发明采取如下技术方案：
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，色谱条件如下：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
检测波长：282nm；
流动相：水相(pH调节剂调节pH值为2.5～4.0)：50～70v％
有机相：30～50v％；
流速：1.0ml/min；
柱温：25℃～40℃；
pH调节剂：磷酸、冰醋酸、三氟乙酸中的一种或多种；
溶剂：水相(pH调节剂调节pH值为2.5～4.0)：50～80v％
助溶剂：20～50v％；
进样量：10μl；
理论板数：按盐酸达克罗宁峰计算不低于2000；
其中，所述水相为0.5％三乙胺溶液、0.015mol/L磷酸二氢钾溶液、0.015mol/L无水乙酸钠溶液中的一种或多种；有机相为甲醇、乙醇、乙腈中的一种或多种；助溶剂为甲醇、乙醇、聚山梨酯80中的一种或多种。
具体测试过程如下：取本品10支，摇匀，超声使混匀，倒入烧杯中，机械搅拌，使混匀，用内容量移液管精密量取1ml至100ml量瓶中，用溶剂30ml清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。另取盐酸达克罗宁对照品，用溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部0512)试验。记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，色谱条件如下：
固定相：辛烷基硅烷键合硅胶；
流动相：水相和有机相组成的混合溶剂；其中，水相：10～80v％，有机相：20～90v％；
稀释溶剂：水相和有机相组成的混合溶剂；其中，水相：10～40v％，有机相：60～90v％；
流速：1.0ml/min；
柱温：25℃～40℃；
检测波长：277nm；
pH调节剂：磷酸、冰醋酸、三氟乙酸中的一种或多种；
校正因子：0.8～1.8；
盐酸达克罗宁峰与杂质I峰的分离度应符合要求
其中，所述水相为0.5％三乙胺溶液、0.015mol/L磷酸二氢钾溶液、0.015mol/L无水乙酸钠溶液中的一种或多种，水相pH值在2.5～4.0范围内；有机相为甲醇、乙醇、乙腈中的一种或多种；
具体检测过程如下：
(1)取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用稀释溶剂稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；
(2)精密量取适量，用稀释溶剂将供试品溶液稀释制成每1ml含5μg的溶液，作为对照溶液；
(3)精密量取空白辅料(不含主药的各辅料的混合物)1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀，作为空白辅料溶液；
(4)精密量取对照溶液1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀，作为灵敏度溶液；
(5)另取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每lml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液，作为系统适用性溶液；
(6)照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定，按下表进行线性梯度洗脱，流动相A为水相，流动相B为有机相。取灵敏度溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图，主成分峰高的信噪比应大于10。取系统适用性试验溶液10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，盐酸达克罗宁峰与杂质I峰的分离度应符合要求。另取供试品溶液和对照溶液各10μl分别注入液相色谱仪，记录色谱图，除辅料峰以外，供试品溶液色谱图中如有杂质I峰，峰面积乘以校正因子，不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍(2.0％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积0.2倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4.0倍(4.0％)。
Figure BDA0002302422500000041
本发明方法检测盐酸达克罗宁胶浆含量时，在相当于供试品浓度10％～200％的浓度范围内，浓度与峰面积之间的线性相关系数R2大于0.9990，重复性良好，盐酸达克罗宁的定量限为0.0510μg/ml，平均回收率在98～101％之间，RSD小于2.0％；检测有关杂质时，杂质I与盐酸达克罗宁峰之间的分离度为29.6，杂质I在定量限浓度～1.734μg/ml，杂质I线性方程为A＝2×107C-220161，相关系数为0.9993，杂质I峰面积RSD为0.6％，平均回收率为97.9％，RSD为3.5％，检测限为0.0041μg/ml。
附图说明
图1为检测盐酸达克罗宁胶浆含量时样品的色谱图；
图2为检测盐酸达克罗宁胶浆含量时样品的标准曲线；
图3为检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质时色谱条件下空白辅料溶液色谱图；
图4为检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质时色谱条件下灵敏度溶液色谱图；
图5为检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质时色谱条件下系统适用性溶液色谱图；
图6为检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质时色谱条件下供试品溶液色谱图；
图7为检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质时色谱条件下对照溶液色谱图；
图8为检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质时的标准曲线。
具体实施方式
以下通过几个具体实施例的方式对本发明做进一步详述，但本发明的保护范围并不局限于此。
实施例1
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，色谱条件如下：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱(4.6mm×150mm，5μm)；
流动相：0.5v％三乙胺(磷酸调节pH至4.0)：甲醇＝60:40；0.5v％三乙胺配制时以水为溶剂，下同；
流速：1.0ml/min；
柱温：25℃；
溶剂：0.5％三乙胺(磷酸调节pH至4.0)：甲醇＝50:50；
理论板数：按盐酸达克罗宁峰计算不低于2000；
实施步骤：
供试品溶液的制备：取本品10支，摇匀，超声使混匀，倒入烧杯中，机械搅拌，使混匀，用内容量移液管精密量取1ml至100ml量瓶中，用溶剂30ml清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁对照品，用溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
检测方法：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
实施例2
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，色谱条件如下：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
流动相：0.015mol/L KH2PO4(冰醋酸调节pH至3.5)：乙腈＝55:45；
流速：1.0ml/min；
柱温：35℃；
溶剂：0.015mol/L KH2PO4(冰醋酸调节pH至3.5)：乙腈＝60:40；
理论板数：按盐酸达克罗宁峰计算不低于2000；
实施步骤：
供试品溶液的制备：取本品10支，摇匀，超声使混匀，倒入烧杯中，机械搅拌，使混匀，用内容量移液管精密量取1ml至100ml量瓶中，用溶剂30ml清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁对照品，用溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
检测方法：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
实施例3
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，色谱条件如下：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
流动相：0.015mol/L无水乙酸钠(三氟乙酸调节pH至3.0)：乙醇＝70:30；
流速：1.0ml/min；
柱温：40℃；
溶剂：0.015mol/L无水乙酸钠(三氟乙酸调节pH至3.0)：乙醇＝70:30；
理论板数：按盐酸达克罗宁峰计算不低于2000；
实施步骤：
供试品溶液的制备：取本品10支，摇匀，超声使混匀，倒入烧杯中，机械搅拌，使混匀，用内容量移液管精密量取1ml至100ml量瓶中，用溶剂30ml清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁对照品，用溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
检测方法：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
实施例4
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，色谱条件如下：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
流动相：0.015mol/L无水乙酸钠(三氟乙酸调节pH至2.5)：乙醇＝65:35；
流速：1.0ml/min；
柱温：35℃；
溶剂：0.015mol/L无水乙酸钠(三氟乙酸调节pH至2.5)：聚山梨酯80＝70:30；
理论板数：按盐酸达克罗宁峰计算不低于2000；
实施步骤：
供试品溶液的制备：取本品10支，摇匀，超声使混匀，倒入烧杯中，机械搅拌，使混匀，用内容量移液管精密量取1ml至100ml量瓶中，用溶剂30ml清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。
对照品溶液的制备：精密称取盐酸达克罗宁对照品，用溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
检测方法：分别精密量取供试品溶液和对照品溶液10μl注入液相色谱仪，记录色谱图。
用确定的含量检测方法进行了相关的方法学验证内容，具体验证总结见下表。
Figure BDA0002302422500000071
线性试验
精密称取盐酸达克罗宁对照品20.36mg，加稀释剂制成浓度为0.2036mg/ml的对照品贮备液；加稀释剂逐步稀释制成0.1527mg/ml、0.1018mg/ml、0.0509mg/ml、0.0204mg/ml、0.0102mg/ml线性试验系列浓度溶液，按实施例3方法操作，记录色谱图，以峰面积对浓度进行线性回归。结果见下表：
Figure BDA0002302422500000081
试验结果表明：在相当于供试品浓度10％～200％的浓度范围内，浓度与峰面积之间的线性相关系数R2大于0.9990，符合规定。
重复性试验
浓度为0.1018mg/ml的对照品溶液连续测定6次，按照实施例3进行检测，记录色谱图。结果见下表：
Figure BDA0002302422500000082
试验结果表明：平行测定6份样品，盐酸达克罗宁峰面积RSD≦2.0％，本法重复性良好。
定量限试验
将浓度为0.0102mg/ml的盐酸达克罗宁对照品溶液逐步稀释记录色谱图(按照实施例3进行检测)，以信噪比S/N＝10:1的浓度为盐酸达克罗宁的定量限。结果见下表：
浓度(μg/ml) S/N
0.0510 12.1
0.0255 5.3
试验结果表明：盐酸达克罗宁的定量限为0.0510μg/ml。
准确度试验
精密称定的盐酸达克罗宁对照品适量，加入稀释剂配制成80％、100％、120％的回收率样品溶液，按实施例3方法操作，进行回收率测定。结果见下表：
Figure BDA0002302422500000083
Figure BDA0002302422500000091
试验结果表明：9份回收率样品溶液的平均回收率在98～101％之间，RSD小于2.0％，符合规定。
自制3批检测结果(按实施例3方法操作)：
Figure BDA0002302422500000092
实施例5
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，色谱条件如下：
固定相：辛烷基硅烷键合硅胶柱(4.6mm×250mm，5μm)；
流动相：0.5v％三乙胺溶液(用磷酸调节pH至2.5)和乙醇组成的混合溶剂；
稀释溶剂：0.5v％三乙胺溶液(用磷酸调节pH至2.5)：乙醇＝90:10；
流速：1.0ml/min；
柱温：30℃；
检测波长：277nm；
校正因子：1.3～1.6；
盐酸达克罗宁峰与杂质I峰的分离度应符合要求；
梯度洗脱程序为：
Figure BDA0002302422500000101
注：流动相A为水相，流动相B为有机相。
实施步骤：
供试品溶液：取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用稀释溶剂稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液；
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用稀释溶剂稀释制成每1ml含5μg的溶液；
空白辅料溶液：精密量取空白辅料1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
灵敏度溶液：精密量取对照溶液1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
系统适用性溶液：精密称取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每1ml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液；
检测方法：分别精密量取空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
计算方式：除辅料峰以外，供试品溶液色谱图中如有杂质I峰，峰面积乘以校正因子(1.56)，不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍(2.0％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积0.2倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4.0倍(4.0％)。
实施例6
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，色谱条件如下：
固定相：辛烷基硅烷键合硅胶；
流动相：0.015mol/L磷酸二氢钾溶液(用冰醋酸调节pH至3.0)和甲醇组成的混合溶剂，洗脱程序按照实施例5进行；
稀释溶剂：0.015mol/L磷酸二氢钾溶液(用冰醋酸调节pH至3.0)：甲醇＝90:10；
流速：1.0ml/min；
柱温：35℃；
检测波长：277nm；
校正因子：1.3～1.6；
盐酸达克罗宁峰与杂质I峰的分离度应符合要求；
实施步骤：
供试品溶液：取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用稀释溶剂稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液；
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用稀释溶剂稀释制成每1ml含5μg的溶液；
空白辅料溶液：精密量取空白辅料1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
灵敏度溶液：精密量取对照溶液1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
系统适用性溶液：精密称取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每1ml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液；
检测方法：分别精密量取空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
计算方式：除辅料峰以外，供试品溶液色谱图中如有杂质I峰，峰面积乘以校正因子(1.56)，不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍(2.0％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积0.2倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4.0倍(4.0％)。
实施例7
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，色谱条件如下：
固定相：辛烷基硅烷键合硅胶；
流动相：0.015mol/L无水乙酸钠溶液(用冰醋酸调节pH至3.5)和乙腈组成的混合溶剂，洗脱程序按照实施例5进行；
稀释溶剂：0.015mol/L无水乙酸钠溶液(用冰醋酸调节pH至3.5)：乙腈＝90:10；
流速：1.0ml/min；
柱温：35℃；
检测波长：277nm；
校正因子：1.3～1.6；
盐酸达克罗宁峰与杂质I峰的分离度应符合要求；
实施步骤：
供试品溶液：取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用稀释溶剂稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液；
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用稀释溶剂稀释制成每1ml含5μg的溶液；
空白辅料溶液：精密量取空白辅料1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
灵敏度溶液：精密量取对照溶液1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
系统适用性溶液：精密称取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每1ml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液；
检测方法：分别精密量取空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
计算方式：除辅料峰以外，供试品溶液色谱图中如有杂质I峰，峰面积乘以校正因子(1.56)，不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍(2.0％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积0.2倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4.0倍(4.0％)。
实施例8
一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，色谱条件如下：
固定相：辛烷基硅烷键合硅胶；
流动相：0.015mol/L无水乙酸钠溶液(用三氟乙酸调节pH至4.0)和乙腈组成的混合溶剂，洗脱程序按照实施例5进行；
稀释溶剂：0.015mol/L无水乙酸钠溶液(用冰醋酸调节pH至4.0)：甲醇＝90:10；
流速：1.0ml/min；
柱温：40℃；
检测波长：277nm；
校正因子：1.5～1.8；
盐酸达克罗宁峰与杂质I峰的分离度应符合要求；
实施步骤：
供试品溶液：取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用稀释溶剂稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液；
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用稀释溶剂稀释制成每1ml含5μg的溶液；
空白辅料溶液：精密量取空白辅料1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
灵敏度溶液：精密量取对照溶液1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
系统适用性溶液：精密称取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每1ml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液；
检测方法：分别精密量取空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
计算方式：除辅料峰以外，供试品溶液色谱图中如有杂质I峰，峰面积乘以校正因子(1.56)，不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍(2.0％)，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积0.2倍(0.2％)，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4.0倍(4.0％)。
自制3批检测结果(按照实施例7方法进行)：
Figure BDA0002302422500000131
Figure BDA0002302422500000141
用确定的有关物质检测方法进行了相关的方法学验证内容，具体验证总结见下表。
Figure BDA0002302422500000142
专属性及系统适用性试验
精密称取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每1ml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液。按照实施例7方法检测，测定结果见下表：
Figure BDA0002302422500000143
试验结果表明：系统适用性溶液中盐酸达克罗宁与杂质I峰之间的分离度大于6.0，符合规定。
线性试验
精密称取杂质I对照品10.16mg，加稀释剂制成浓度为40.64μg/ml的对照品贮备液；加稀释剂逐步稀释制成30.48μg/ml、20.32μg/ml、10.16μg/ml、4.064μg/ml、2.032μg/ml线性试验系列浓度溶液，按实施例7方法操作，记录色谱图，以峰面积对浓度进行线性回归。结果见下表：
Figure BDA0002302422500000151
试验结果表明：杂质I在2.032～40.64μg/ml的浓度范围内，浓度与峰面积之间的线性相关系数R2大于0.9990，线性关系良好，符合规定。
重复性试验
浓度为20.32μg/ml的系统适用性试验溶液连续测定6次，按实施例7方法操作，记录色谱图。结果见下表：
Figure BDA0002302422500000152
试验结果表明：平行测定6份样品，杂质I峰面积RSD≦2.0％，本法重复性良好。
定量限与检测限试验
将浓度为2.032μg/ml的系统适用性试验溶液逐步稀释记录色谱图(按实施例7方法操作)，以信噪比S/N＝10:1的浓度为杂质I的定量限，信噪比S/N＝3:1的浓度为杂质I的检测限。结果见下表：
浓度(μg/ml) S/N
0.2032 20.9
0.0203 9.3
0.0041 3.6
试验结果表明：杂质I的定量限为0.0203μg/ml，检测限为0.0041μg/ml。
准确度试验
精密称取杂质I对照品适量，用稀释剂分别制成约0.2mg/ml、0.4mg/ml、0.6mg/ml浓度的杂质I对照品贮备液，每个浓度平行配制3份；
回收率样品溶液：取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂稀释制成每1ml中约含0.5mg的溶液，平行配制9份，分别加入杂质I对照品贮备液，制成50％、100％、150％的回收率样品溶液，按实施例7方法操作，进行回收率测定。结果见下表：
Figure BDA0002302422500000161
试验结果表明：杂质I三个浓度水平的平均回收率在90～108％之间，RSD小于5.0％，符合规定。

Claims (9)

1.一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，其特征在于，色谱条件为：
色谱柱：十八烷基硅烷键合硅胶柱；
检测波长：282nm；
流动相：水相-有机相；
流速：1.0ml/min；
柱温：25℃~40℃；
溶剂：水相-助溶剂；
进样量：10μl；
检测方法为：
取本品10支，摇匀，超声使混匀，倒入烧杯中，机械搅拌，使混匀，用内容量移液管精密量取1ml至100ml量瓶中，用溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用溶剂稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液；
另取盐酸达克罗宁对照品，用溶剂溶解并定量稀释制成每1ml中含0.1mg的溶液，作为对照品溶液；
采用高效液相色谱法检测，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，即得。
2.根据权利要求1所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，其特征在于，采用水相为0.5%三乙胺溶液、0.015mol/L磷酸二氢钾溶液、0.015mol/L无水乙酸钠溶液中的一种或多种，水相用pH调节剂调节pH2.5~4.0，pH调节剂为磷酸、冰醋酸、三氟乙酸中的一种或多种。
3.根据权利要求1所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，其特征在于，有机相为甲醇、乙醇、乙腈中的一种或多种。
4.根据权利要求1所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，其特征在于，所述助溶剂为甲醇、乙醇、聚山梨酯80中的一种或多种。
5.根据权利要求1所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，其特征在于，所述流动相中水相比例为50~70v%，有机相比例为30~50v%。
6.根据权利要求1所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆含量的方法，其特征在于，所述溶剂水相比例为50~80v%，助溶剂比例为20~50v%。
7.一种高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，其特征在于，包括如下步骤：
供试品溶液：取本品，摇匀，用内容量移液管精密量取适量，用稀释溶剂清洗移液管内壁，洗液并入量瓶中，用稀释溶剂稀释制成每1ml中含0.5mg的溶液，摇匀，滤过，取续滤液；
对照溶液：精密量取供试品溶液适量，用稀释溶剂稀释制成每1ml含5μg的溶液；
空白辅料溶液：精密量取空白辅料1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
灵敏度溶液：精密量取对照溶液1ml，置20ml量瓶中，用稀释溶剂稀释至刻度，摇匀；
系统适用性溶液：精密称取盐酸达克罗宁、杂质I各适量，加甲醇使溶解并稀释制成每lml中分别含盐酸达克罗宁、杂质I各20μg的混合溶液；
检测方法：分别精密量取空白辅料溶液、灵敏度溶液、系统适用性溶液、供试品溶液和对照溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；
计算方式：除辅料峰以外，供试品溶液色谱图中如有杂质I峰，峰面积乘以校正因子，不得大于对照溶液主峰面积的2.0倍，其他单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积0.2倍，各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积的4.0倍；
色谱条件为：
固定相：辛烷基硅烷键合硅胶；
流动相：水相和有机相组成的混合溶剂；其中，组成流动相的各溶剂的体积百分比为：水相：10%~80%，有机相：20%~90%；
稀释溶剂：水相和有机相组成的混合溶剂；其中，组成稀释溶剂的各溶剂的体积百分比为：水相：10%~40%，有机相：60%~90%；
流速：1.0ml/min；
柱温：25℃~40℃；
检测波长：277nm；
进样量：10μl；
校正因子：0.8~1.8。
8.根据权利要求7所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，其特征在于，所述稀释溶剂含有机相的比例范围为60%~90%，含水相的比例为10%~40%。
9.根据权利要求7或8所述高效液相检测盐酸达克罗宁胶浆有关物质的方法，其特征在于，所述有机相为甲醇、乙醇、乙腈中的一种或多种；所述水相为0.5%三乙胺溶液、0.015mol/L磷酸二氢钾溶液、0.015mol/L无水乙酸钠溶液中的一种或多种，水相用pH调节剂调节pH为2.5~4.0，pH调节剂：磷酸、冰醋酸、三氟乙酸中的一种或多种。
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Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104237408A (zh) * 2014-09-12 2014-12-24 贵州金桥药业有限公司 复方氯己定达克罗宁乳膏的检测方法
CN106491516A (zh) * 2016-11-15 2017-03-15 遂成药业股份有限公司 一种温敏型盐酸达克罗宁凝胶及其制备方法

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104237408A (zh) * 2014-09-12 2014-12-24 贵州金桥药业有限公司 复方氯己定达克罗宁乳膏的检测方法
CN106491516A (zh) * 2016-11-15 2017-03-15 遂成药业股份有限公司 一种温敏型盐酸达克罗宁凝胶及其制备方法

Non-Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
PHILIP J. PALERMO: "High pressure liquid chromatographic determination of dyclonine hydrochloride and its degradation products in cough lozenges and liquids", 《JOURNAL OF PHARMACEUTICAL & BIOMEDICAL ANALYSIS》 *
原永芳 等: "HPLC法测定盐酸达克罗宁胶浆中盐酸达克罗宁的含量", 《第二军医大学学报》 *
宋洪涛 等: "盐酸达克罗宁胶浆剂的制备和处方筛选", 《解放军药学学报》 *
张小瑞 等: "1%盐酸达克罗宁凝胶的制备及质量控制", 《实用药物与临床》 *

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