CN111057127A

CN111057127A - Psma激活式抗肿瘤前药cpt-x及其制备方法和应用

Info

Publication number: CN111057127A
Application number: CN201811195751.8A
Authority: CN
Inventors: 徐冰; 王鹏龙; 郭文博
Original assignee: Xinhuozhiyao Beijing Technology Co ltd
Current assignee: Xinhuozhiyao Beijing Technology Co ltd
Priority date: 2018-10-15
Filing date: 2018-10-15
Publication date: 2020-04-24

Abstract

本发明提供了一类具有结构通式1的化合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明PSMA激活前药CPT‑HT‑J‑ZLn对PSMA阳性表达和PSMA阴性表达的肿瘤细胞表现出很强的细胞毒选择性，其对PSMA阳性表达的肿瘤细胞LNCaP‑FGC的活性要强于PSMA阴性表达的肿瘤细胞PC‑3、DU145、HepG2、Hela、MCF‑7。其中，化合物CPT‑HT‑J‑ZL₁₂对于LNCaP‑FGC(IC₅₀＝1.00±0.20μM)(PSMA⁺)的活性分别是PSMA阴性性表达的细胞HepG2(IC₅₀＞40.00μM)，Hela(IC₅₀＞40.00μM)，MCF‑7(IC₅₀＝21.68±4.96μM)，DU145(IC₅₀＝5.40±1.22μM)和PC‑3(IC₅₀＝42.96±3.69μM)的40，40，21，5和40倍。

Description

PSMA激活式抗肿瘤前药CPT-X及其制备方法和应用

技术领域

本发明涉及一种化合物及其制备方法和应用，具体一种具有靶向抗肿瘤活性的化合物及其制备方法和应用，属于药物化学领域。

背景技术

癌症仍是严重威胁人类健康和生命的重大疾病之一，尤其是在中国，形势更加不容乐观。据中国国家癌症中心2018年2月发布的最新数据表明，在中国每天约1万人被确诊为癌症，平均每分钟就有7人，给个人、家庭和社会带来了沉重的经济负担。目前治疗癌症最常用和最有效的手段就是通过手术来切除癌变组织，并以化疗、放疗作为辅助。对不能手术的癌症患者或者癌症转移的晚期患者，放疗和化疗仍然是最有效的方法。然而，常规的化疗药物不具有选择性，不可避免地对正常细胞造成损伤，引发较大毒副作用，严重降低了癌症患者的生存质量和对后续治疗的依从性；因此，开发针对癌症的特定靶向药物或提高化疗药物对癌细胞的靶向特异性，毫无疑问将大大提高对癌症的治疗效果。

前列腺特异性膜抗原(Prostate specific membrane antigen，PSMA)是位于前列腺上皮细胞表面的II型跨膜糖蛋白。研究发现PSMA在前列腺肿瘤组织和肝癌、胰腺癌、乳腺癌等多种恶性非前列腺实体肿瘤的肿瘤相关新生血管内皮细胞中呈现高表达，但其在肿瘤组织相邻正常组织的血管中则不表达，且PSMA具有叶酸水解酶及N-乙酰基化α-连接的酸性二肽酶(NAALADa-se)活性，能特异性水解由Asp、Glu组成寡肽底物。基于PSMA在肿瘤新生血管内皮细胞中高表达的特点和其羧肽酶的活性，PSMA成为了肿瘤抗血管靶向治疗的良好靶点和研究热点。

喜树碱(Camptothecin，CPT)是从中药喜树(Camptotheca acuminateDecne.var.acuminata)中分离得到的一种单体有效成分，其目前是世界上第三大植物抗癌药，以喜树碱为基础研制的喜树碱类药物是临床上常用的广谱抗癌药，经久不衰。虽然喜树碱及其衍生物在体内外实验中均表现出较好的抗肿瘤活性，但这些化合物多存在靶向性差、毒副作用大的缺陷，其对消化系统及泌尿系统具有强烈的毒副作用，易引发腹泻，出血性膀胱炎，严重的骨髓抑制等，此外该类化合物还存在水溶性差，稳定性差，其内酯环在人体血浆中易开裂而导致失活或者活性降低的缺陷，这限制了其进一步的开发和临床应用，因此开发新一代高效低毒水溶性好的喜树碱衍生物意义重大。

本发明借鉴药物化学的拼合原理，将抗肿瘤药物喜树碱(CPT)与PSMA特异性酶解寡肽底物X(Glu*Glu*Glu*Asp-Glu)通过化学方法进行拼合，合成PSMA酶激活式靶向抗肿瘤前药CPT-X；对该类化合物的活性评价主要围绕抗肿瘤方面展开，分别测试了类似物对PSMA阳性表达(PSMA⁺)肿瘤细胞系LNCap-FGC，PSMA阴性表达(PSMA^-)肿瘤细胞系HepG2，Hela，MCF-7，DU145，PC-3细胞毒选择性。

发明内容

本发明的目的之一是提供一种具有结构通式1的化合物及其制备方法。

本发明的目的之二是提供通式化合物1在制备抗肿瘤药物中的应用。

本发明的目的之三是提供一种具有抗肿瘤作用的药物组合物。

本发明的目的是通过如下技术方案实现的：

具有通式1结构的化合物或其药学上可接受的盐，

L为-[Cm(O)(Z)n(NH)q]-，其中m，q分别为0或1，n为0～11，p为0～8；其中Z可为烷烃(-CH₂-)；可为烯烃(-CH＝CH-)；可为氨基酸或者多肽；可为腙(-NH-N＝C-)；可为醚(-CH₂-O-CH₂-)，可为单个或多个醚，且可在Z中任意位置；可为二硫醚(-S-S-)，可为单个或多个二硫醚，且可在Z中任意位置；还可为烷烃(-CH₂-)和烯烃(-CH＝CH-)的任意组合；还可为烷烃(-CH₂-)和氨基酸或者多肽的任意组合；还可为烯烃(-CH＝CH-)和氨基酸或者多肽的任意组合；还可为烷烃(-CH₂-)和腙(-NH-N＝C-)的任意组合；还可为烷烃(-CH₂-)和醚(-CH₂-O-CH₂-)的任意组合；还可为或烷烃(-CH₂-)和二硫醚(-S-S-)的任意组合；还可为烯烃(-CH＝CH-)和二硫醚(-S-S-)的任意组合；还可为或烷烃(-CH₂-)、烯烃(-CH＝CH-)、二硫醚(-S-S-)和二硫醚(-S-S-)的任意组合。

R₁选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R₂选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R₃选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R₄选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R₅选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷。

进一步，本发明化合物编号及结构式如下：

进一步，所述化合物可加入制剂领域常规辅料制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液、注射剂等常规剂型。

本发明所述化合物的制备方法包括如下步骤：

本发明化合物按如下方法制备：

化合物CPT-A-L₂的制备方法：将喜树碱溶于有机溶剂，与Boc-L-甘氨酸在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-A-L₂；

化合物CPT-A-L₄的制备方法：将喜树碱溶于有机溶剂，与N-Boc-γ-氨基丁酸在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-A-L₄；

化合物CPT-A-L₆的制备方法：将喜树碱溶于有机溶剂，与叔丁氧羰酰基6-氨基己酸在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-A-L₆；

化合物CPT-A-L₁₂的制备方法：将喜树碱溶于有机溶剂，与12-(Boc-氨基)十二烷酸在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-A-L₁₂；

化合物CPT-B-L₂的制备方法：将CPT-A-L₂溶于有机溶剂，在TFA作用下生成CPT-B-L₂；

化合物CPT-B-L₄的制备方法：将CPT-A-L₄溶于有机溶剂，在TFA作用下生成CPT-B-L₄；

化合物CPT-B-L₆的制备方法：将CPT-A-L₆溶于有机溶剂，在TFA作用下生成CPT-B-L₆；

化合物CPT-B-L₁₂的制备方法：将CPT-A-L₁₂溶于有机溶剂，在TFA作用下生成CPT-B-L₁₂；

化合物CPT-HT-J-L₂的制备方法：将CPT-B-L₂溶于有机溶剂，与HT-J在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-HT-J-L₂；

化合物CPT-HT-J-L₄的制备方法：将CPT-B-L₄溶于有机溶剂，与HT-J在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-HT-J-L₄；

化合物CPT-HT-J-L₆的制备方法：将CPT-B-L₆溶于有机溶剂，与HT-J在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-HT-J-L₆；

化合物CPT-HT-J-L₁₂的制备方法：将CPT-B-L₁₂溶于有机溶剂，与HT-J在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-HT-J-L₁₂；

化合物CPT-HT-J-ZL₂的制备方法：将CPT-HT-J-L₂溶于有机溶剂，在TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％作用下生成CPT-HT-J-ZL₂；

化合物CPT-HT-J-ZL₄的制备方法：将CPT-HT-J-L₄溶于有机溶剂，在TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％作用下生成CPT-HT-J-ZL₄；

化合物CPT-HT-J-ZL₆的制备方法：将CPT-HT-J-L₆溶于有机溶剂，在TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％作用下生成CPT-HT-J-ZL₆；

化合物CPT-HT-J-ZL₁₂的制备方法：将CPT-HT-J-L₁₂溶于有机溶剂，在TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％作用下生成CPT-HT-J-ZL₁₂；

化合物CPT-C-GL₂的制备方法：将CPT-B-L₂溶于有机溶剂，与N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-C-GL₂；

化合物CPT-C-GL₄的制备方法：将CPT-B-L₄溶于有机溶剂，与N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-C-GL₄；

化合物CPT-C-GL₆的制备方法：将CPT-B-L₆溶于有机溶剂，与N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-C-GL₆；

化合物CPT-C-GL₁₂的制备方法：将CPT-B-L₁₂溶于有机溶剂，与N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-C-GL₁₂；

化合物CPT-D-GL₂的制备方法：将CPT-C-GL₂溶于有机溶剂，在脱保护剂作用下生成CPT-D-GL₂；

化合物CPT-D-GL₄的制备方法：将CPT-C-GL₂溶于有机溶剂，在脱保护剂作用下生成CPT-D-GL₄；

化合物CPT-D-GL₆的制备方法：将CPT-C-GL₆溶于有机溶剂，在脱保护剂作用下生成CPT-D-GL₆；

化合物CPT-D-GL₁₂的制备方法：将CPT-C-GL₁₂溶于有机溶剂，与N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯在脱保护剂作用下生成CPT-D-GL₁₂；

其中，上述反应在-20℃至250℃下进行；所述有机溶剂是含有1-20个碳原子的醚、醇、烷烃、芳香烃、酮、卤代烷、酰胺、腈、酯或者它们各种比例的混合物；所述催化剂为4-二甲氨基吡啶(DMAP)；所述缩合剂为1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、1，3-二环己基碳二亚胺(DCC)、N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)；所用的脱保护剂为三氟乙酸(TFA)、钯碳(Pd/C)、氢氧化钯碳(Pd(OH)₂/C)、哌啶(Piperidine)和四丁基氟化铵(TBAF)；此外，所用碱中，无机碱为碳酸钾。

进一步，上述制备方法中，相应的原料与HT-J的摩尔比为1∶0.1～1∶10；相应的原料与缩合剂的摩尔比为1∶0.1～1∶10；相应的原料与催化剂的摩尔比为1∶0.1～1∶10。

本发明反应路线：

路线1中间体HT-J的合成

反应条件和试剂：(a)EDCI，HOBt，DIPEA，DCM，25℃，3h；(b)Piperidine，DMF，1h；(c)Wet Pd/C(5％)，MeOH，12h.

路线2、PSMA激活前药CPT-HT-J-ZLn的合成

反应条件和试剂：(d)EDCI，DMAP，DCM，25℃，12h；(e)TFA，DCM，25℃，2h；(f)EDCI，HOBt，DIPEA，DCM，25℃，3h；(g)TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95∶2.5∶2.5，25℃，3h；

路线3、PSMA代谢产物CPT-D-GLn的合成

反应条件和试剂：(h)EDCI，HOBt，DIPEA，DCM，25℃，3h；(i)Wet Pd/C(5％)，MeOH，12h.

本发明还提供式1化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。

进一步，所述肿瘤为肺癌、肝癌、胃癌、结肠癌、宫颈癌细胞系。

本发明还提供一种药物组合物，该组合物包含以治疗有效量存在的式1化合物或其药学可接受的盐与至少一种药学可接受的赋形剂的混合物。

进一步，所述组合物还包含至少一种常规抗癌药。

更进一步，所述抗癌药选自环磷酰胺、5-氟尿嘧啶、紫杉醇、阿霉素、依托泊苷、伊立替康、奥沙利铂、顺铂或健择。

本发明还提供治疗癌症的方法，包括给予患者给药有效量的式1化合物或其药学上可接受的盐。

为使上述剂型能够实现，需在制备这些剂型时加入药学可接受的赋形剂，例如填充剂、崩解剂、润滑剂、助悬剂、粘合剂、甜味剂、矫味剂、防腐剂等，填充剂包括：淀粉、预胶化淀粉、乳糖、甘露醇、甲壳素、微晶纤维素、蔗糖等，崩解剂包括：淀粉、预胶化淀粉、微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙纤维素、交联羧甲基纤维素钠等，润滑剂包括：硬脂酸镁、十二烷基硫酸钠、滑石粉、二氧化硅等，助悬剂包括：聚乙烯吡咯烷酮、微晶纤维素、蔗糖、琼脂、羟丙基甲基纤维素等，粘合剂包括，淀粉浆、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素等，甜味剂包括：糖精钠、阿斯帕坦、蔗糖、甜蜜素、甘草次酸等，矫味剂包括：甜味剂及各种香精，防腐剂包括：尼泊金类、苯甲酸、苯甲酸钠、山梨酸及其盐类、苯扎溴铵、醋酸氯乙定、桉叶油等。

本发明所述“药学可接受的”表示化合物或组合物必须在化学上和/或毒理学上与制剂中包含的其他成分相容。

所述“治疗有效量”表示本发明化合物治疗或预防特定疾病或症状；减弱、改善或消除特定疾病的一种或多种症状；或预防或延迟特定疾病或症状的发作的量。

本发明PSMA激活前药CPT-HT-J-ZLn对各种肿瘤细胞均表现出一定的抑制增殖的作用，但这种抗肿瘤活性显著低于母体药物CPT；同时大部分前药CPT-HT-J-ZLn对LNCaP-FGC这种文献报道的PSMA高表达的肿瘤细胞的活性要强于PC-3、DU145、HepG2、Hela、MCF-7这五种PSMA阴性表达的肿瘤细胞，表现出一定的细胞毒选择性，例如化合物CPT-HT-J-ZL₁₂对对于PSMA阳性表达的细胞LNCap-FGC(IC₅₀＝1.00±0.20μM)的活性分别是PSMA阳性表达的细胞HepG2(IC₅₀＞40.00μM)，Hela(IC₅₀＞40.00μM)，MCF-7(IC₅₀＝21.68±4.96μM)，DU145(IC₅₀＝5.40±1.22μM)和PC-3(IC₅₀＝42.96±3.69μM)的40，40，21，5和40倍。

实验例1 MTT法观察本发明组合物CPT-X对PSMA阳性和阴性表达的肿瘤细胞增殖影响

1.仪器与材料

Thermo 3111型CO₂培养箱；HFsafe生物安全柜；Multiskan GO酶标仪；京立牌LD5-2B型台式低速离心机；Olympus IX71倒置荧光显微镜改良型RPMI-1640培养基、胎牛血清、0.25％胰蛋白酶溶液、噻唑蓝、磷酸盐缓冲液(赛默飞世尔生物化学制品北京有限公司)；二甲基亚砜(DMSO)；

人肝癌细胞系HepG2；人宫颈癌细胞系Hela；人乳腺癌细胞系MCF-7；人前列腺癌细胞系DU145；人前列腺细胞系PC-3；人前列腺细胞系LNCaP-FGC。

实验药物；本发明化合物CPT-X(分别按实施例1-32制备)；阳性药物喜树碱(上海毕得医药科技有限公司)；

2.方法

2.1 不同细胞株的培养

DU145、HepG2、MCF-7、LNCaP-FGC细胞培养在含10％胎牛血清的1640培养液中，放置于37℃、5％的CO₂培养箱中温育。细胞均呈贴壁状态生长，在倒置显微镜下观察生长状况，待细胞数量适量时传代培养。

PC-3和Hela细胞培养在含10％胎牛血清的DMEM培养液中，放置于37℃、5％的CO₂培养箱中温育。细胞均呈贴壁状态生长，在倒置显微镜下观察生长状况，待细胞数量适量时传代培养。

2.2 细胞抑制作用

取对数生长期的DU145、HepG2、MCF-7、LNCaP-FGC、PC-3和Hela细胞，以3×10³/孔的数量接种于96孔培养板中，在含5％CO₂的湿化培养箱中37℃培养24h；每孔分别加入100μL梯度浓度的待测化合物。设置细胞对照组及空白对照组，药物组每浓度重复4孔，细胞对照组和空白对照组重复3孔。培养箱中继续培养72h后，每孔加20μL MTT孵育4h，弃去上清，再加100μL DMSO，振荡10min，酶标仪490nm波长测得吸光度值，记录结果，并计算化合物的IC₅₀值，细胞抑制率(％)＝[1-(A给药-A空白)/(A正常-A空白)]×100％。

3.结果

3.1 前药CPT-HT-J-ZLn和PSMA代谢产物CPT-D-GLn对7种肿瘤细胞系(DU145、HepG2、MCF-7、NCaP-FGC、PC-3、Hela)的IC₅₀值(n＝3)如表1所示

表1前药CPT-HT-J-ZLn和PSMA代谢产物CPT-D-GLn对不同肿瘤细胞株的IC₅₀值

由表1可以看出，大部分前药CPT-HT-J-ZLn对各种肿瘤细胞均表现出一定的抑制增殖的作用，但这种抗肿瘤活性显著低于母体药物CPT；同时大部分前药CPT-HT-J-ZLn对LNCaP-FGC这种文献报道的PSMA高表达的肿瘤细胞的活性要强于PC-3、DU145、HepG2、Hela、MCF-7这五种PSMA阴性表达的肿瘤细胞，表现出一定的细胞毒选择性，例如化合物CPT-HT-J-ZL₁₂对于LNCaP-FGC(IC₅₀＝1.00±0.20μM)(PSMA⁺)的活性分别是HepG2(IC₅₀＞40.00μM)，Hela(IC₅₀＞40.00μM)，MCF-7(IC₅₀＝21.68±4.96μM)，DU145(IC₅₀＝5.40±1.22μM)和PC-3(IC₅₀＝42.96±3.69μM)(PSMA^-)的40，40，21，5和40倍。同时在PC-3、DU145、HepG2、Hela和MCF-7这五种PSMA阴性表达的肿瘤细胞中，大部分前药CPT-HT-J-ZLn对人乳腺癌细胞系MCF-7、人前列腺细胞系PC-3和人前列腺细胞系DU145细胞系的活性要显著优于人肝癌细胞系HepG2和人卵巢癌细胞系Hela，呈现出不同的细胞敏感性，同时进一步的构效关系分析表明，linker的碳链长短也会影响其抗肿瘤活性，随着碳链的增长其抗肿瘤活性降低，例如对MCF-7和PC-3细胞的抗肿瘤活性CPT-HT-J-ZL₂＞CPT-HT-J-ZL₄＞CPT-HT-J-ZL₆＞CPT-HT-J-ZL₁₂；大部分代谢产物CPT-D-GLn对各种肿瘤细胞也表现出一定的增值抑制活性，其中对MCF-7、PC-3和DU145的活性比较好，对Hela和HepG2增值抑制活性较差；同样构效关系表明linker的碳链长短也会影响其抗肿瘤活性，随着碳链的增长抗肿瘤活性降低；例如对MCF-7和PC-3细胞的抗肿瘤活性CPT-D-GL₂，CPT-D-GL₄＞CPT-D-GL₆，CPT-D-GL₁₂。

4.结论

本发明PSMA激活前药CPT-HT-J-ZLn对PSMA阳性表达和PSMA阴性表达的肿瘤细胞表现出很强的细胞毒选择性，其对对LNCaP-FGC这种文献报道的PSMA高表达的肿瘤细胞的活性要强于PC-3、DU145、HepG2、Hela、MCF-7这五种PSMA阴性表达的肿瘤细胞。其中，化合物CPT-HT-J-ZL₁₂对于LNCap-FGC(IC₅₀＝1.00±0.20μM)(PSMA⁺)的活性分别是PSMA阴性性表达的细胞HepG2(IC₅₀＞40.00μM)，Hela(IC₅₀＞40.00μM)，MCF-7(IC₅₀＝21.68±4.96μM)，DU145(IC₅₀＝5.40±1.22μM)和PC-3(IC₅₀＝42.96±3.69μM)的40，40，21，5和40倍。表明该类化合物可用于抗肿瘤药物的研究。

具体实施方式

实施例1 HT-A的制备

依次称取500mg(1.215mmol)Fmoc-L-天冬氨酸-4-叔丁酯、349.37mg(1.8225mmol)EDCI和246.26mg(1.8225mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入395.48mg(1.337mmol)L-谷氨酸二叔丁酯盐酸盐和392.57mg(3.0375mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝2∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml 1M的盐酸溶液洗涤三次，再用25ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(PE/EA＝10/1至3/1)，得到680mg白色固体HT-A。mp 116.6-116.9℃；Yield：85.8％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.44(m，27H，9×-CH₃)，1.90(m，1H)，2.16(m，1H)，2.31(m，2H)，2.60(m，1H)，2.99(m，1H)，4.24(t，J＝7.1Hz，1H)，4.42(m，2H)，4.45(m，1H)，4.56(m，1H)，5.99(d，J＝8.5Hz，1H)，7.14(d，J＝7.6Hz，1H)，7.32(t，J＝7.5Hz，2H)，7.40(t，J＝7.5Hz，2H)，7.60(m，2H)，7.76(d，J＝7.6Hz，2H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ27.8，28.1，28.2，31.4，37.7，47.2，51.2，52.6，67.4，80.7，82.0，82.4，120.1，125.2，127.2，127.9，141.4，144.0，156.1，170.4，170.6，171.5，172.3；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺653.3429，calcd.for C₃₆H₄₈N₂O₉ 652.33598.

实施例2 中间体HT-B的制备

称取588mg(0.900mmol)HT-A置于50mL单口瓶中，加入20ml无水DMF超声使其溶解，随后加入229mg(2.7mmol)哌啶，室温下搅拌反应0.5h，TLC[V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝2∶1]监测反应完全，反应液直接隔膜泵旋干，随后加入50ml乙酸乙酯溶解，有机层每次用30ml蒸馏水洗涤3次，饱和食盐水脱水，无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(PE/EA＝3/1至0/1)，得到340mg无色油状物HT-B。Yield：87.9％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.43(s，9H，3×-CH₃)，1.44(s，9H，3×-CH₃)，1.46(s，9H，3×-CH₃)，1.89(m，2H)，2.29(m，2H)，2.58(dd，J＝16.7，8.0Hz，1H)，2.79(dd，J＝16.7，3.7Hz，1H)，3.66(dd，J＝8.0，3.7Hz，1H)，4.45(td，J＝8.4，4.9Hz，1H)，7.89(d，J＝8.4Hz，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ28.1，28.2，28.3，29.8，31.6，40.6，52.1，52.2，80.7，81.4，82.3，171.2，171.3，172.3，173.5；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺431.2751，calcd.for C₂₁H₃₈N₂O₇ 430.26790.

实施例3 中间体HT-C的制备

依次称取255mg(0.6mmol)芴甲氧羰基-L-谷氨酸1-叔丁酯、172mg(0.9mmol)EDCI和122mg(0.9mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入10ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入284mg(0.66mmol)HT-B和194mg(1.5mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝1∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml 1M的盐酸溶液洗涤三次，再用25ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(PE/EA＝5/1至2/1)，得到450mg白色固体HT-C。mp 106.3-107.3℃；Yield：88.1％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.41(s，9H，3×-CH₃)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，1.43(s，9H，3×-CH₃)，1.47(s，9H，3×-CH₃)，1.91(m，3H)，2.12(m，1H)，2.28(m，5H)，2.60(dd，J＝17.1，6.3Hz，1H)，2.91(dd，J＝17.2，3.8Hz，1H)，4.22(dd，1H)，4.40(m，3H)，4.78(d，J＝4.3Hz，1H)，5.63(d，J＝7.7Hz，1H)，6.94(d，J＝7.4Hz，1H)，7.17(d，J＝7.7Hz，1H)，7.31(t，J＝7.3Hz，2H)，7.39(t，J＝7.3Hz，2H)，7.61(d，J＝7.3Hz，2H)，7.75(d，J＝7.4Hz，2H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ27.7，28.1，28.2，28.8，31.5，32.4，37.2，47.3，49.4，52.5，53.9，67.1，80.7，81.9，82.3，82.6，120.1，125.3，127.2，127.8，141.4，143.9，144.0，156.3，170.5，171.2，171.6，171.9，172.2.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺838.4416，calcd.for C₄₅H₆₃N₃O₁₂ 837.44117.

实施例4 中间体HT-D的制备

称取427mg(0.5mmol)HT-C置于50mL单口瓶中，加入20ml无水DMF超声使其溶解，随后加入127.7mg(1.5mmol)哌啶，室温下搅拌反应0.5h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液直接隔膜泵旋干，随后加入50ml乙酸乙酯溶解，有机层每次用30ml蒸馏水洗涤3次，饱和食盐水脱水，无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至20/1)，得到285mg无色油状物HT-D。Yield：90.4％；¹H-NMR(500MHz，CDCl3)：δ1.43(d，36H，12×-CH₃)，1.82(m，2H)，1.91(m，2H)，2.08(m，2H)，2.28(m，2H)，2.42(m，1H)，2.51(m，1H)，2.98(m，1H)，3.30(m，1H)，4.44(d，J＝4.5Hz，1H)，4.80(d，J＝3.7Hz，1H)，7.06(d，J＝8.5Hz，1H)，7.49(d，J＝8.0Hz，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ28.0，28.1，28.2，29.7，29.8，31.5，33.9，37.1，49.1，52.4，55.4，80.6，81.4，81.8，82.2，170.7，170.8，171.8，172.3，172.7，174.9.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺616.3830，calcd.for C₃₀H₅₃N₃O₁₀615.37309.

实施例5 中间体HT-E的制备

依次称取170mg(0.4mmol)芴甲氧羰基-L-谷氨酸1-叔丁酯、115mg(0.6mmol)EDCI和81mg(0.6mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入10ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入278mg(0.44mmol)HT-D和129mg(1.0mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)＝1∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml 1M的盐酸溶液洗涤三次，再用25ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到360mg白色固体HT-E。mp 91.6-92.2℃；Yield：86.7％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.40(s，9H，3×-CH₃)，1.41(s，9H，3×-CH₃)，1.43(s，9H，3×-CH₃)，1.45(s，9H，3×-CH₃)，1.46(s，9H，3×-CH₃)，1.89(m，4H)，2.25(m，10H)，2.62(dd，J＝17.2，6.8Hz，1H)，2.84(dd，J＝17.2，4.7Hz，1H)，4.23(m，1H)，4.40(m，2H)，4.48(m，1H)，4.76(m，1H)，5.62(d，J＝8.2Hz，1H)，6.58(d，J＝7.6Hz，1H)，7.13(d，J＝7.7Hz，1H)，7.18(d，J＝7.7Hz，1H)，7.30(m，2H)，7.38(m，2H)，7.62(d，J＝7.4Hz，2H)，7.75(d，J＝7.5Hz，2H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ27.7，28.0，28.1，28.2，28.6，28.8，31.5，32.1，32.3，37.2，42.1，47.3，49.5，52.3，52.5，53.9，67.1，80.7，81.8，82.2，82.5，82.6，120.1，125.3，127.2，127.8，141.4，141.5，143.8，144.1，156.5，170.5，170.6，171.2，171.3，171.3，172.0，172.2，172.2.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1023.5528，calcd.for C₅₄H₇₈N₄O₁₅ 1022.54637.

实施例6 中间体HT-F的制备

称取350mg(0.337mmol)HT-E置于50mL单口瓶中，加入20ml无水DMF超声使其溶解，随后加入86.1mg(1.01mmol)哌啶，室温下搅拌反应0.5h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液直接隔膜泵旋干，随后加入50ml乙酸乙酯溶解，有机层每次用30ml蒸馏水洗涤3次，饱和食盐水脱水，无水硫酸钠干燥，过滤，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至20/1)，得到240mg无色油状物HT-F。Yield：87.3％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.41(s，9H，3×-CH₃)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，1.43(s，9H，3×-CH₃)，1.44(s，9H，3×-CH₃)，1.45(s，9H，3×-CH₃)，1.89(m，4H)，2.09(m，2H)，2.22(m，2H)，2.31(t，J＝7.3Hz，2H)，2.38(t，J＝7.0Hz，2H)，2.61(dd，J＝17.2，6.6Hz，1H)，2.86(m，1H)，3.36(m，J＝8.4，4.8Hz，1H)，4.42(m，2H)，4.76(m，1H)，6.89(d，J＝7.6Hz，1H)，7.13(d，J＝7.8Hz，1H)，7.22(d，J＝7.8Hz，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ27.7，28.1，28.2，28.5，30.2，31.5，32.5，32.9，37.2，49.5，52.3，52.5，54.5，80.7，81.5，81.8，82.3，82.4，170.5，170.6，171.2，171.4，172.2，172.3，172.8，174.8.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺801.4883，calcd.for C₃₉H₆₈N₄O₁₃800.47829.

实施例7 中间体HT-I的制备

依次称取80mg(0.248mmol)N-(叔丁氧羰基)-L-谷氨酸1-苄酯、71.2mg(0.371mmol)EDCI和50.1mg(0.371mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入10ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入223mg(0.273mmol)HT-F和80mg(0.62mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml 1M的盐酸溶液洗涤三次，再用25ml的饱和碳酸氢钠溶液洗涤，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到230mg白色固体HT-I。mp107.0-107.7℃；Yield：83.6％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.39(s，27H，9×-CH₃)，1.41(s，18H，6×-CH₃)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，1.74(m，2H)，2.13(s，6H)，2.14(s，2H)，2.22(m，2H)，2.27(m，4H)，2.62(dd，J＝17.1，6.9Hz，1H)，2.78(m，J＝17.0，4.8Hz，1H)，4.41(m，3H)，4.75(dd，J＝12.8，6.8Hz，1H)，5.14(m，2H)，5.57(d，J＝8.3Hz，1H)，6.52(m，1H)，6.86(d，J＝7.5Hz，1H)，7.21(d，J＝7.8Hz，1H)，7.32(m，5H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ27.7，28.0，28.1，28.4，31.0，31.5，31.6，32.0，32.2，37.3，49.5，52.0，52.2，52.4，53.1，67.2，80.1，80.6，81.6，82.1，82.4，128.4，128.5，128.7，135.5，156.0，170.6，170.6，171.0，171.1，171.3，171.9，172.1，172.2，172.3.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1120.6292，calcd.for C₅₆H₈₉N₅O₁₈ 1119.62026.

实施例8 中间体HT-J的制备

称取221mg(0.2mmol)HT-I置于50mL单口瓶中，加入20ml无水甲醇加入5mg 10％wet Pd/C，氢气催化下室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝10∶1]监测反应完全，反应液过滤除去Pd/C，滤液减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝40/0至20/1)，得到190mg白色固体HT-J。mp 94.3-95.0℃；Yield：92.2％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ1.41(s，9H，3×-CH₃)，1.42(s，27H，9×-CH₃)，1.44(s，9H，3×-CH₃)，1.45(s，9H，3×-CH₃)，1.87(m，3H)，2.08(m，1H)，2.24(m，4H)，2.33(m，4H)，2.40(m，4H)，2.73(m，2H)，4.29(m，1H)，4.43(m，2H)，4.54(t，J＝7.3Hz，1H)，4.79(dd，J＝12.7，7.2Hz，1H)，5.56(d，J＝7.3Hz，1H)，6.57(s，1H)，7.10(d，J＝7.8Hz，1H)，7.34(d，J＝7.9Hz，1H)，7.53(d，J＝7.8Hz，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ27.7，28.1，28.2，28.3，28.5，31.2，31.5，32.0，32.4，37.3，49.5，51.7，52.5，52.6，52.8，80.3，81.2，81.8，82.1，82.3，82.6，156.2，170.7，170.8，171.2，171.4，172.2，172.3，172.8，173.0，174.0.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1130.5793，calcd.for C₄₉H₈₃N₅O₁₈1029.57331.

实施例9 化合物CPT-A-L₂的制备

依次称取2g(5.6mmol)Camptothecin、1.18g(6.72mmol)N-Boc-甘氨酸、1.61g(8.4mmol)EDCI和0.068g(0.56mmol)DMAP置于100mL单口瓶中，加入50ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至150ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到1.84g淡黄色固体CPT-A-L₂。mp＞220℃；Yield：65.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.98(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，2.16(m，2H)，4.06(dd，J＝18.0，4.8Hz，1H)，4.21(dd，J＝18.4，6.1Hz，1H)，5.07(s，1H)，5.25(m，2H)，5.38(d，J＝17.1Hz，1H)，5.67(d，J＝17.1Hz，1H)，7.30(s，1H)，7.65(t，J＝7.4Hz，1H)，7.81(t，J＝7.5Hz，1H)，7.91(d，J＝8.1Hz，1H)，8.23(d，J＝8.4Hz，1H)，8.37(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，28.4，31.8，42.5，50.1，67.2，80.3，96.5，120.2，128.2，128.3，128.5，129.8，130.8，131.3，145.7，146.5，148.9，152.3，155.7，157.4，167.3，169.7.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺506.1917，calcd.for C₂₇H₂₇N₃O₇ 505.18490.

实施例10 化合物CPT-B-L₂的制备

称取1.8g(3.64mmol)CPT-A-L₂置于100mL单口瓶中，加入30ml无水二氯甲烷使其溶解，冰浴下加入9ml TFA，室温下继续搅拌1小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝10∶1]监测反应完全，反应液在低温下采用隔膜泵旋干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝20/1至8/1)，得到0.9g淡黄色固体CPT-B-L₂。mp 194.8-195.2℃；Yield：61.2％；1H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ1.08(t，J＝7.5Hz，3H，-CH3)，2.27(m，2H)，4.18(m，1H)，4.29(m，1H)，5.35(m，2H)，5.50(d，J＝16.7Hz，1H)，5.64(d，J＝16.7Hz，1H)，7.44(s，1H)，7.1(t，J＝7.3Hz，1H)，7.88(t，J＝7.5Hz，1H)，8.07(d，J＝8.0Hz，1H)，8.15(d，J＝8.0Hz，1H)，8.64(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CD₃OD)：δ8.0，31.9，41.0，51.6，67.7，79.6，97.7，120.6，129.3，129.8，130.0，130.9，132.1，133.1，133.5，147.4，147.9，149.6，153.4，159.0，168.1，168.6.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺406.1397，calcd.for C₂₂H₁₉N₃O₅ 405.13247.

实施例11 化合物CPT-HT-J-L₂的制备

依次称取618.0mg(0.60mmol)HT-J、159.0mg(0.83mmol)EDCI和112.1mg(0.83mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入223mg(0.55mmol)CPT-B-L₂和178.0mg(1.38mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至50/1)，得到240mg淡黄色固体CPT-HT-J-L₂。mp 167.4-168.1℃；Yield：30.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.97(t，J＝7.5Hz，3H，-CH₃)，1.26(s，2H)，1.35(s，9H，3×-CH₃)，1.37(s，9H，3×-CH₃)，1.42(s，36H，12×-CH₃)，1.90(m，2H)，2.19(m，14H)，2.64(m，1H)，2.83(m，1H)，4.16(m，2H)，4.42(m，4H)，4.18(s，1H)，5.29(s，2H)，5.38(d，J＝17.4Hz，1H)，5.67(d，J＝17.4Hz，1H)，6.67(m，1H)，7.11(m，1H)，7.33(m，4H)，7.67(t，J＝6.9Hz，1H)，7.83(t，J＝7.7Hz，1H)，7.94(d，J＝7.9Hz，1H)，8.24(d，J＝8.3Hz，1H)，8.40(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，27.7，28.0，28.1，28.2，28.4，29.4，31.6，31.9，32.5，37.4，41.4，49.4，50.2，51.8，52.3，52.5，53.9，67.2，79.9，80.7，81.6，82.0，82.3，82.5，82.6，96.5，120.3，128.2，128.3，128.6，129.7，130.8，131.4，145.6，146.4，148.8，152.3，156.0，157.4，167.2，169.5，170.9，171.0，171.7，172.3，172.6，172.7，172.9.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1417.7008，calcd.forC₇₁H₁₀₀N₈O₂₂ 1416.69522.

实施例12 化合物CPT-HT-J-ZL₂的制备

称取220mg(0.155mmol)CPT-HT-J-L₂置于50mL单口瓶中，加入10ml水解液(TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％)，室温下搅拌反应3h，反应液用在低温下减压蒸干，然后加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀，继续加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀即得CPT-HT-J-ZL₂粗品，粗品加适量甲醇溶解后，制备液相分离，冷冻干燥后的56mg CPT-HT-J-ZL₂。mp 179.0-179.5℃；Yield：19.9％；¹H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.93(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.52(d，J＝6.6Hz，2H)，1.76(s，3H)，1.96(s，6H)，2.16(s，6H)，2.26(m，5H)，4.15(m，4H)，4.58(m，2H)，5.27(s，1H)，5.35(s，1H)，7.18(s，1H)，7.73(t，J＝7.5Hz，1H)，7.88(t，J＝7.5Hz，1H)，8.06(d，J＝7.1Hz，1H)，8.16(m，6H)，8.27(d，J＝6.6Hz，1H)，8.71(s，1H)，8.93(s，1H).¹³C-NMR(101MHz，DMSO)：δ7.6，26.2，27.1，29.9，30.4，31.5，31.7，36.2，36.5，49.3，51.3，51.5，51.7，66.3，76.6，95.1，119.0，127.8，128.0，128.7，128.9，129.8，130.5，131.7，145.0，146.1，147.9，152.4，156.5，167.0，168.6，169.0，171.0，171.2，171.4，171.7，173.1，173.3，173.4，173.8；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1037.3386，calcd.for C₄₆H₅₂N₈O₂₀1036.32979.

实施例13 化合物CPT-A-L₄的制备

依次称取2.0g(5.6mmol)Camptothecin、1.36g(6.72mmol)57294-38-9、1.61g(8.4mmol)EDCI和0.068g(0.56mmol)DMAP置于100mL单口瓶中，加入50ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至150ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到1.37g淡黄色固体CPT-A-L₄。mp 167.8-170.2℃；Yield：46.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.98(t，J＝7.5Hz，3H，-CH₃)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，1.86(m，2H)，2.14(m，2H)，2.54(m，2H)，3.14(m，2H)，5.28(m，1H)，5.38(m，1H)，5.66(m，1H)，7.23(m，1H)，7.66(m，1H)，7.82(m，1H)，7.93(m，1H)，8.25(m，1H)，8.40(m，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，25.1，28.5，31.1，31.8，39.6，50.1，67.2，76.0，79.3，96.1，120.3，128.2，128.3，128.6，129.6，130.9，131.5，146.1，146.3，148.8，152.3，156.2，157.5，167.7，172.3；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺534.2231，calcd.for C₂₉H₃₁N₃O₇ 533.21620.

实施例15 化合物CPT-B-L₄的制备

称取1.3g(2.44mmol)CPT-A-L₄置于100mL单口瓶中，加入30ml无水二氯甲烷使其溶解，冰浴下加入9ml TFA，室温下继续搅拌1小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝10∶1]监测反应完全，反应液在低温下采用隔膜泵旋干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝20/1至8/1)，得到0.69g淡黄色固体CPT-B-L₄。mp＞220℃；Yield：65.3％；¹H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.93(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.84(m，2H)，2.16(m，2H)，2.70(m，2H)，2.83(m，2H)，5.28(s，2H)，5.53(m，2H)，7.06(s，1H)，7.71(t，J＝6.0Hz，1H)，7.86(d，J＝6.7Hz，1H)，8.13(d，J＝7.5Hz，1H)，8.16(d，J＝7.5Hz，1H)，8.69(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ7.7，22.5，30.33，38.0，50.3，66.4，76.1，94.8，118.9，127.8，128.1，128.7，129.0，129.9，130.5，131.7，145.4，146.2，148.0，152.4，156.6，167.4，171.6；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺434.1715，calcd.for C₂₄H₂₃N₃O₅ 433.16377.

实施例16 化合物CPT-HT-J-L₄的制备

依次称取618.0mg(0.60mmol)HT-J、159.0mg(0.83mmol)EDCI和112.1mg(0.83mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入238.2mg(0.55mmol)CPT-B-L₄和178.0mg(1.38mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至50/1)，得到400mg淡黄色固体CPT-HT-J-L₄。mp 129.0-129.6℃；Yield：49.3％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.95(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.39(s，9H，3×-CH₃)，1.40(s，18H，6×-CH₃)，1.41(s，18H，6×-CH₃)，1.44(s，9H，3×-CH₃)，1.72(m，2H)，1.84(m，4H)，2.15(m，2H)，2.26(m，4H)，2.37(m，8H)，2.56(m，2H)，2.83(m，1H)，3.30(m，2H)，3.64(m，1H)，4.11(m，1H)，4.43(m，4H)，4.79(m，1H)，5.29(s，2H)，5.39(d，J＝17.2Hz，1H)，5.65(d，J＝17.2Hz，1H)，5.79(m，1H)，6.38(d，J＝8.4Hz，1H)，7.20(d，J＝7.7Hz，1H)，7.33(m，2H)，7.53(s，1H)，7.66(t，J＝7.4Hz，1H)，7.83(t，J＝7.4Hz，1H)，7.93(d，J＝8.0Hz，1H)，8.23(d，J＝8.0Hz，1H)，8.40(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.5，24.8，27.6，28.1，28.2，28.4，28.5，29.0，31.3，31.4，31.6，31.9，32.5，37.4，38.7，49.4，50.1，51.7，52.3，52.5，53.2，53.4，67.2，76.0，79.9，80.6，81.6，81.9，82.2，82.4，96.4，120.5，128.2，128.3，128.7，129.7，130.9，131.5，145.9，146.2，148.8，152.4，156.2，157.5，167.7，170.9，171.0，171.1，171.5，172.0，172.1，172.2，172.5，172.6，172.7；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1445.7339，calcd.for C₇₃H₁₀₄N₈O₂₂1444.72652.

实施例17 化合物CPT-HT-J-ZL₄的制备

称取380mg(0.258mmol)CPT-HT-J-L₄置于50mL单口瓶中，加入10ml水解液(TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％)，室温下搅拌反应3h，反应液用在低温下减压蒸干，然后加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀，继续加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀即得CPT-HT-J-ZL₄粗品，粗品加适量甲醇溶解后，制备液相分离，冷冻干燥后的56mg CPT-HT-J-ZL₄。mp 189.0-189.5℃；Yield：19.9％；¹H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.92(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.73(m，4H)，1.92(s，6H)，2.16(s，6H)，2.22(m，12H)，2.63(m，2H)，4.11(m，3H)，4.55(s，1H)，5.31(s，2H)，5.48(d，J＝16.9Hz，1H)，5.52(d，J＝17.1Hz，1H)，7.07(s，1H)，7.72(t，J＝7.4Hz，1H)，7.87(t，J＝7.6Hz，1H)，7.93(s，1H)，8.09(s，1H)，8.15(m，4H)，8.24(s，2H)，8.48(s，1H)，8.70(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ7.6，24.3，27.1，27.2，27.6，29.6，30.3，30.6，30.8，31.5，31.7，36.3，38.1，50.3，51.3，51.4，51.7，51.9，52.1，66.4，75.9，94.7，118.9，127.8，128.0，128.6，129.0，129.9，130.5，131.7，145.4，146.1，147.9，152.4，156.6，167.4，168.5，170.7，171.1，171.5，171.8，172.4，172.9，173.6.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1065.3690，calcd.for C₄₈H₅₆N₈O₂₀ 1064.36109.

实施例18 化合物CPT-A-L₆的制备

依次称取2g(5.6mmol)Camptothecin、1.55g(6.72mmol)叔丁氧羰酰基6-氨基己酸、1.61g(8.4mmol)EDCI和0.068g(0.56mmol)DMAP置于100mL单口瓶中，加入50ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至150ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到1.73g淡黄色固体CPT-A-L₆。mp 152.0-152.5℃；Yield：55.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.97(t，J＝7.5Hz，3H，-CH₃)，1.39(s，9H，3×-CH₃)，1.50(m，2H)，1.66(m，4H)，2.14(m，2H)，2.49(m，2H)，3.07(m，2H)，5.29(s，2H)，5.39(d，J＝17.0Hz，1H)，5.67(d，J＝17.0Hz，1H)，7.23(s，1H)，7.67(m，1H)，7.83(m，1H)，7.94(d，J＝8.0Hz，1H)，8.22(d，J＝8.0Hz，1H)，8.40(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.4，26.2，28.5，29.9，32.0，33.8，40.4，50.1，67.2，75.9，96.3，120.5，128.2，128.3，128.4，128.6，129.6，130.9，131.5，146.2，146.2，148.9，152.4，157.5，167.7，172.7；HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺562.2548，calcd.for C₃₁H₃₅N₃O₇ 561.24750.

实施例19 化合物CPT-B-L₆的制备

称取1.7g(3.03mmol)CPT-A-L₆置于100mL单口瓶中，加入30ml无水二氯甲烷使其溶解，冰浴下加入9ml TFA，室温下继续搅拌1小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝10∶1]监测反应完全，反应液在低温下采用隔膜泵旋干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝20/1至8/1)，得到0.9g淡黄色固体CPT-B-L₆。mp 207.5-208.0℃；Yield：65.0％；¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ1.05(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.48(m，2H)，1.70(m，4H)，2.23(m，2H)，2.62(m，2H)，2.91(m，2H)，5.27(s，2H)，5.47(d，J＝16.7Hz，1H)，5.61(d，J＝16.7Hz，1H)，7.35(s，1H)，7.70(m，1H)，7.87(t，J＝7.0Hz，1H)，8.04(d，J＝8.0Hz，1H)，8.15(d，J＝8.0Hz，1H)，8.60(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CD₃OD)：δ8.1，25.1，26.6，28.2，32.1，34.2，40.5，51.5，67.7，77.5，97.8，120.6，129.2，129.7，129.7，130.0，130.9，132.0，133.4，147.5，148.4，149.5，153.4，159.0，169.6，173.9.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺462.2030，calcd.for C₂₆H₂₇N₃O₅461.19507.

实施例20 化合物CPT-HT-J-L₆的制备

依次称取618.0mg(0.60mmol)HT-J、159.0mg(0.83mmol)EDCI和112.1mg(0.83mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入254mg(0.55mmol)CPT-B-L₆和178.0mg(1.38mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至50/1)，得到400mg淡黄色固体CPT-HT-J-L₆。mp 138.5-139.0℃；Yield：45.2％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.96(t，J＝7.5Hz，3H，-CH₃)，1.41(s，27H，9×-CH₃)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，1.43(s，9H，3×-CH₃)，1.45(s，9H，3×-CH₃)，1.52(m，2H)，1.76(m，6H)，2.12(m，4H)，2.32(m，12H)，2.48(m，2H)，2.61(m，1H)，2.86(m，1H)，3.21(m，2H)，4.11(s，1H)，4.45(m，3H)，4.80(m，1H)，5.30(s，2H)，5.40(d，J＝17.2Hz，1H)，5.66(d，J＝17.2Hz，1H)，5.84(d，J＝7.0Hz，1H)，6.34(d，J＝8.3Hz，1H)，7.23(d，J＝7.4Hz，1H)，7.27(s，1H)，7.34(t，J＝8.3Hz，1H)，7.67(t，J＝7.4Hz，1H)，7.84(t，J＝7.2Hz，H)，7.94(d，J＝8.0Hz，1H)，8.25(d，J＝8.5Hz，1H)，8.41(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.4，26.3，27.6，27.9，28.1，28.2，28.6，29.0，29.2，31.6，32.0，32.1，32.5，33.7，37.4，39.4，49.4，50.1，51.7，52.3，52.6，53.3，67.2，75.8，79.9，80.6，81.6，81.9，82.2，82.5，96.5，120.6，128.3，128.4，128.7，129.5，131.0，131.7，146.1，148.6，152.3，156.2，157.5，167.7，170.9，171.1，171.5，171.7，172.2，172.5，172.7，172.8.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1473.7646，calcd.for C₇₅H₁₀₈N₈O₂₂ 1472.75782.

实施例21 化合物CPT-HT-J-ZL₆的制备

称取380mg(0.258mmol)CPT-HT-J-L₆置于50mL单口瓶中，加入10ml水解液(TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％)，室温下搅拌反应3h，反应液用在低温下减压蒸干，然后加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀，继续加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀即得CPT-HT-J-ZL₆粗品，粗品加适量甲醇溶解后，制备液相分离，冷冻干燥后的56mg CPT-HT-J-ZL₆。mp 190.0-190.4℃；Yield：25.0％；1H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.93(t，J＝7.5Hz，3H，-CH₃)，1.36(m，4H)，1.48(m，2H)，1.60(m，2H)，1.79(m，3H)，1.94(m，5H)，2.21(m，9H)，2.36(m，1H)，2.66(m，1H)，3.11(m，2H)，3.62(m，1H)，3.72(s，1H)，4.20(m，3H)，4.60(m，1H)，5.31(s，2H)，5.49(m，2H)，7.06(s，1H)，7.72(t，J＝7.1Hz，1H)，7.87(t，J＝7.7Hz，1H)，8.07(d，J＝6.8Hz，1H)，8.15(m，5H)，8.33(m，2H)，8.70(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ7.6，24.0，25.7，27.0，27.7，28.5，29.7，30.0，30.3，30.4，31.6，31.7，33.1，36.2，38.6，49.3，50.3，51.3，51.5，51.7，51.8，54.9，66.4，75.7，94.7，118.9，127.8，128.1，128.6，129.0，129.9，130.5，131.7，145.5，146.0，147.9，152.3，156.6，163.1，167.4，167.9，170.9，171.0，171.2，171.5，171.7，172.1，172.8，172.9，173.1，173.4，173.8.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1093.4007，calcd.for C₅₀H₆₀N₈O₂₀ 1092.39239.

实施例22 化合物CPT-A-L₁₂的制备

依次称取2g(5.6mmol)Camptothecin、2.18g(6.72mmol)12-(Boc-氨基)十二烷酸、1.61g(8.4mmol)EDCI和0.068g(0.56mmol)DMAP置于100mL单口瓶中，加入50ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至150ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到2.42g淡黄色固体CPT-A-L₁₂。mp 134.6-140.0℃；Yield：67.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.96(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.15(m，8H)，1.26(m，6H)，1.42(s，9H，3×-CH₃)，1.62(m，2H)，2.16(m，1H)，2.27(m，1H)，2.47(m，2H)，3.06(s，2H)，5.26(m，2H)，5.40(d，J＝17.1Hz，1H)，5.66(d，J＝17.1Hz，1H)，7.22(s，1H)，7.66(t，J＝7.3Hz，1H)，7.82(t，J＝7.3Hz，1H)，7.93(d，J＝8.1Hz，1H)，8.20(d，J＝8.5Hz，1H)，8.39(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.7，26.9，28.5，29.1，29.3，29.5，29.5，30.1，32.0，33.9，40.7，50.0，67.2，75.7，79.1，96.2，120.5，128.2，128.3，128.3，128.6，129.6，130.8，131.4，146.1，146.2，148.9，152.4，156.1，157.5，167.7，172.9.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺646.3484，calcd.forC₃₇H₄₇N₃O₇ 645.34140.

实施例23 化合物CPT-B-L₁₂的制备

取2.2g(3.41mmol)CPT-A-L₁₂置于100mL单口瓶中，加入30ml无水二氯甲烷使其溶解，冰浴下加入9ml TFA，室温下继续搅拌1小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝10∶1]监测反应完全，反应液在低温下采用隔膜泵旋干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝20/1至8/1)，得到1.34g淡黄色固体CPT-B-L₁₂。mp 215.5-216.0℃；Yield：72.0％；¹H-NMR(500MHz，CD₃OD)：δ1.04(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.23(m，8H)，1.33(m，6H)，1.63(m，4H)，2.23(m，2H)，2.54(m，2H)，2.89(m，2H)，5.27(s，2H)，5.47(d，J＝16.8Hz，1H)，5.60(d，J＝16.8Hz，1H)，7.35(s，1H)，7.69(dd，J＝8.0，7.1Hz，1H)，7.86(t，J＝7.7Hz，1H)，8.04(d，J＝8.2Hz，1H)，8.14(d，J＝8.5Hz，1H)，8.58(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CD₃OD)：δ8.0，25.8，27.4，28.6，30.0，30.1，30.3，30.4，30.5，32.2，34.6，40.8，51.5，67.7，77.3，97.9，120.7，129.2，129.7，129.8，130.0，130.8，131.9，133.3，147.5，148.4，149.6，153.4，159.0，169.6，174.1.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺546.2972，calcd.for C₃₂H₃₉N₃O₅ 545.28897.

实施例24 化合物CPT-HT-J-L₁₂的制备

依次称取618.0mg(0.60mmol)HT-J、159.0mg(0.83mmol)EDCI和112.1mg(0.83mmol)HOBT置于50mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应0.5h，继续加入300mg(0.55mmol)CPT-B-L₁₂和178.0mg(1.38mmol)DIPEA，室温搅拌反应4小时，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至50ml，每次用25ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至50/1)，得到360mg淡黄色固体CPT-HT-J-L₁₂。mp 121.5-121.9℃；Yield：42.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.96(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.14(m，10H)，1.24(s，4H)，1.30(m，4H)，1.41(s，27H，9×-CH₃)，1.42(s，15H，5×-CH₃)，1.44(s，12H，4×-CH₃)，1.62(m，4H)，1.86(m，2H)，2.07(m，4H)，2.26(m，6H)，2.37(m，4H)，2.48(m，4H)，2.60(m，1H)，2.87(m，1H)，3.10(m，1H)，3.22(m，1H)，4.13(s，1H)，4.42(m，2H)，4.52(m，1H)，4.80(s，1H)，5.28(m，2H)，5.40(d，J＝17.0Hz，1H)，5.66(d，J＝17.0Hz，1H)，5.87(d，J＝7.1Hz，1H)，6.31(d，J＝8.1Hz，1H)，7.21(s，1H)，7.28(d，J＝7.5Hz，1H)，7.37(t，J＝8.6Hz，1H)，7.44(s，1H)，7.66(t，J＝7.4Hz，1H)，7.82(t，J＝7.6Hz，1H)，7.94(d，J＝8.1Hz，1H)，8.20(d，J＝8.5Hz，1H)，8.40(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.8，27.0，27.6，27.8，28.1，28.2，28.5，29.0，29.2，29.4，29.5，29.6，29.6，31.5，32.0，32.1，32.5，33.9，37.4，39.8，49.3，50.1，51.7，52.2，52.5，53.3，67.2，75.7，80.0，80.6，81.6，81.9，82.2，82.5，96.2，120.5，128.2，128.3，128.4，128.6，129.7，130.8，131.4，146.1，146.3，149.0，152.5，156.3，157.5，167.7，170.9，171.1，171.5，171.7，172.2，172.5，172.9，172.9.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1557.8584，calcd.for C₈₁H₁₂₀N₈O₂₂1556.85172.

实施例25 化合物CPT-HT-J-ZL₁₂的制备

称取320mg(0.206mmol)CPT-HT-J-L₁₂置于50mL单口瓶中，加入10ml水解液(TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％)，室温下搅拌反应3h，反应液用在低温下减压蒸干，然后加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀，继续加入10ml冰乙醚沉淀，离心收集沉淀即得CPT-HT-J-ZL₁₂粗品，粗品加适量甲醇溶解后，制备液相分离，冷冻干燥后的60mg CPT-HT-J-ZL₁₂。mp 183.9-184.3℃；Yield：24.8％；¹H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.93(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.12(m，10H)，1.26(m，5H)，1.37(m，4H)，1.45(m，1H)，1.54(m，3H)，1.80(m，2H)，1.93(m，4H)，2.22(m，7H)，2.35(m，2H)，3.10(m，2H)，3.30(m，1H)，3.40(m，1H)，3.59(s，1H)，3.62(s，1H)，3.72(s，1H)，4.17(m，3H)，4.57(m，1H)，5.31(s，2H)，5.50(m，2H)，7.05(s，1H)，7.73(t，J＝7.5Hz，1H)，7.87(t，J＝7.5Hz，1H)，8.15(m，6H)，8.32(m，2H)，8.71(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ7.6，24.0，24.5，25.3，26.0，26.4，26.7，27.0，27.6，28.4，28.7，28.8，28.9，29.7，30.3，30.4，33.2，38.8，42.0，45.8，50.3，51.4，51.6，52.0，66.3，75.6，94.7，119.0，127.8，128.1，128.6，129.0，129.8，130.4，131.6，145.4，146.0，147.9，152.3，156.6，163.1，167.3，167.9，169.3，171.5，171.7，172.1，172.9，172.8，173.4，173.6，173.8.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺1177.4963，calcd.for C₈₁H₁₂₀N₈O₂₂ 1176.48629.

实施例26 化合物CPT-C-GL₂的制备

依次称取222.6mg(0.60mmol)N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯、59.0mg(0.83mmol)EDCI和112.0mg(0.83mmol)HOBT置于100mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应10min，继续加入223mg(0.55mmol)CPT-B-L₂和178mg(1.38mmol)DIPEA，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至100ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到210mg淡黄色固体CPT-C-GL₂。收率：50.4％。mp 213.9-214.2℃；Yield：50.4％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.97(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.97(dd，J＝14.3，7.4Hz，1H)，2.14(m，2H)，2.26(dd，J＝14.3，7.4Hz，1H)，2.48(m，2H)，4.12(m，1H)，4.31(m，1H)，4.37(dd，J＝18.2，6.1Hz，1H)，4.93(t，J＝14.5Hz，2H)，5.02(t，J＝14.5Hz，2H)，5.13(d，J＝18.9Hz，1H)，5.22(d，J＝18.9Hz，1H)，5.37(d，J＝17.1Hz，1H)，5.66(d，J＝17.1Hz，1H)，6.99(s，1H)，7.18(m，2H)，7.24(m，2H)，7.28(m，6H)，7.63(t，J＝7.5Hz，1H)，7.78(t，J＝7.6Hz，1H)，7.89(d，J＝8.2Hz，1H)，8.22(d，J＝8.5Hz，1H)，8.30(d，J＝8.5Hz，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：7.7，28.1，30.5，31.8，41.4，50.1，54.1，66.7，67.1，67.2，96.4，120.2，128.1，128.2，128.3，128.4，128.6，128.7，129.7，130.8，131.4，135.7，136.1，145.6，146.4，148.8，152.3，156.4，157.4，167.2，168.9，171.7，173.2.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺759.2653，calcd.forC₄₂H₃₈N₄O₁₀ 758.25879.

实施例27 化合物CPT-D-GL₂的制备

称取180mg(0.237mmol)CPT-C-GL₂置于100mL单口瓶中，加入50ml无水甲醇使其溶解，加入适量5％的Pd/C，在氢气保护下室温搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液过滤，滤液减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝30/1至10/1)，得到50mg淡黄色固体CPT-D-GL₂。Yield：39.5％；¹H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.92(s，3H)，2.16(d，J＝6.3Hz，2H)，2.42(dd，J＝16.1，7.8Hz，1H)，2.82(d，J＝16.1Hz，1H)，3.47(s，1H)，4.08(d，J＝17.6Hz，1H)，4.19(d，J＝16.9Hz，1H)，5.27(s，2H)，5.50(s，2H)，7.19(s，1H)，7.71(t，J＝6.5Hz，1H)，7.85(d，J＝6.7Hz，1H)，8.11(d，J＝7.5Hz，1H)，8.20(d，J＝8.1Hz，1H)，8.67(s，1H)，9.02(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ8.0，28.0，30.8，36.4，40.9，50.7，51.2，66.8，76.7，95.9，119.4，128.2，128.4，129.0，129.5，130.2，130.9，132.1，145.6，146.4，148.4，152.8，157.0，167.6，169.4，171.7.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺535.1800，calcd.for C₂₇H₂₆N₄O₈ 534.17506.

实施例28 化合物CPT-C-GL₄的制备

依次称取222.6mg(0.60mmol)N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯、59.0mg(0.83mmol)EDCI和112.0mg(0.83mmol)HOBT置于100mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应10min，继续加入238mg(0.55mmol)CPT-B-L₄和178mg(1.38mmol)DIPEA，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至100ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到260mg淡黄色固体CPT-C-GL₄。mp 118.0-118.7℃；Yield：60.0％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.96(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.82(m，2H)，1.93(m，1H)，2.13(m，2H)，2.25(m，1H)，2.47(m，4H)，3.28(m，2H)，4.22(d，J＝4.8Hz，1H)，5.04(s，2H)，5.09(s，2H)，5.22(d，J＝18.9Hz，1H)，5.27(d，J＝18.9Hz，1H)，5.38(d，J＝17.1Hz，1H)，5.68(d，J＝17.1Hz，1H)，5.76(d，J＝7.5Hz，1H)，6.58(s，1H)，7.23(s，1H)，7.30(m，10H)，7.65(d，J＝7.5Hz，1H)，7.81(dd，J＝11.3，4.1Hz，1H)，7.92(d，J＝8.1Hz，1H)，8.22(d，J＝8.5Hz，1H)，8.36(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.2，28.2，30.6，31.2，31.9，38.7，50.1，54.4，66.6，67.1，67.3，76.2，96.2，120.2，128.1，128.2，128.3，128.4，128.6，128.7，129.6，130.9，131.5，135.8，136.3，146.0，146.3，148.8，152.4，156.4，157.4，168.0，171.5，172.3，173.2.HRMS(ESI)m/z：[2M+H]⁺1573.7668，calcd.for C₄₄H₄₂N₄O₁₀ 786.29009.

实施例29 化合物CPT-D-GL₄的制备

称取230mg(0.293mmol)CPT-C-GL₄置于100mL单口瓶中，加入50ml无水甲醇使其溶解，加入适量5％的Pd/C，在氢气保护下室温搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液过滤，滤液减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝30/1至10/1)，得到70mg淡黄色固体CPT-D-GL₄。mp 127.5-128.1℃；Yield：42.6％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.93(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.69(m，2H)，1.74(m，1H)，1.88(m，1H)，2.16(m，2H)，2.23(t，J＝7.7Hz，2H)，2.24(m，2H)，3.12(d，J＝7.1Hz，2H)，3.33(s，1H)，3.95(dd，J＝13.9，8.3Hz，1H)，5.02(s，1H)，5.03(s，1H)，5.31(m，2H)，5.48(d，J＝16.8Hz，1H)，5.52(d，J＝16.8Hz，1H)，7.09(s，1H)，7.31(dd，J＝8.5，4.2Hz，1H)，7.36(s，1H)，7.73(t，J＝7.1Hz，1H)，7.87(t，J＝7.1Hz，1H)，7.98(t，J＝5.6Hz，1H)，8.16(dd，J＝18.4，8.2Hz，2H)，8.70(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ7.6，24.4，27.2，30.2，30.3，30.7，37.8，50.3，54.1，65.4，75.8，94.8，118.9，127.7，128.0，128.3，128.6，129.0，129.8，130.4，131.6，145.4，146.1，147.9，152.4，156.6，167.3，171.4，171.9，173.9.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺563.2149，calcd.for C₂₉H₃₀N₄O₈ 562.20636.

实施例30 化合物CPT-C-GL₆的制备

依次称取222.6mg(0.60mmol)N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯、59.0mg(0.83mmol)EDCI和112.0mg(0.83mmol)HOBT置于100mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应10min，继续加入254mg(0.55mmol)CPT-B-L₆和178mg(1.38mmol)DIPEA，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至100ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到280mg淡黄色固体CPT-C-GL₆。mp 106.3-107.3℃；Yield：62.6％；¹H-NMR(400MHz，CDCl₃)：δ0.90(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.27(m，2H)，1.42(m，2H)，1.50(m，2H)，1.83(m，2H)，2.14(m，6H)，3.04(m，2H)，3.63(s，1H)，3.67(s，1H)，4.19(m，1H)，4.33(m，2H)，5.30(d，J＝17.5Hz，1H)，5.49(d，J＝17.5Hz，1H)，7.32(dd，J＝17.0，9.6Hz，1H)，7.48(d，J＝7.5Hz，1H)，7.71(m，1H)，7.88(dd，J＝17.0，9.6Hz，1H)，8.15(m，1H)，8.69(s，1H).¹³C-NMR(101MHz，CDCl₃)：7.7，24.3，25.9，27.8，28.9，30.6，31.9，33.7，39.2，50.1，52.7，54.3，66.6，67.1，67.3，75.9，96.3，120.4，128.1，128.3，128.4，128.7，129.4，131.0，131.6，135.9，136.4，146.1，146.2，148.7，152.4，157.4，168.0，171.1，172.7，173.2.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺815.3279，calcd.for C₄₆H₄₆N₄O₁₀ 814.32139.

实施例31 化合物CPT-D-GL₆的制备

称取250mg(0.307mmol)CPT-C-GL₆置于100mL单口瓶中，加入50ml无水甲醇使其溶解，加入适量5％的Pd/C，在氢气保护下室温搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液过滤，滤液减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝30/1至10/1)，得到65mg淡黄色固体CPT-D-GL₆。Yield：35.9％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.93(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.69(m，2H)，1.74(m，1H)，1.88(m，1H)，2.16(m，2H)，2.23(t，J＝7.7Hz，2H)，2.24(m，2H)，3.12(d，J＝7.1Hz，2H)，3.33(s，1H)，3.95(dd，J＝13.9，8.3Hz，1H)，5.02(s，1H)，5.03(s，1H)，5.31(m，2H)，5.48(d，J＝16.8Hz，1H)，5.52(d，J＝16.8Hz，1H)，7.09(s，1H)，7.31(dd，J＝8.5，4.2Hz，1H)，7.36(s，1H)，7.73(t，J＝7.1Hz，1H)，7.87(t，J＝7.1Hz，1H)，7.98(t，J＝5.6Hz，1H)，8.16(dd，J＝18.4，8.2Hz，2H)，8.70(s，1H).¹³C-NMR(101MHz，DMSO)：7.6，24.5，25.4，25.6，28.7，29.3，30.3，33.1，38.3，53.1，54.7，55.9，65.5，75.7，94.8，118.9，127.3，127.8，128.1，129.4，129.9，130.5，131.7，145.5，146.0，147.9，152.3，156.6，167.3，172.1，173.4，177.1，177.4.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺591.2467，calcd.for C₃₁H₃₄N₄O₈ 590.23766.

实施例32 化合物CPT-C-GL₁₂的制备

依次称取222.6mg(0.60mmol)N-Cbz-L-谷氨酸-5-苄基酯、59.0mg(0.83mmol)EDCI和112.0mg(0.83mmol)HOBT置于100mL单口瓶中，加入20ml无水二氯甲烷使其溶解，室温下搅拌反应10min，继续加入300mg(0.55mmol)CPT-B-L₁₂和178mg(1.38mmol)DIPEA，室温下搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液用二氯甲烷稀释至100ml，每次用50ml蒸馏水洗涤三次，随后用饱和食盐水脱水，收集有机层，有机层适量无水硫酸钠干燥，过滤，减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝1/0至30/1)，得到240mg淡黄色固体CPT-C-GL₁₂。mp 90.7-91.5℃；Yield：48.6％；¹H-NMR(500MHz，CDCl₃)：δ0.97(t，J＝7.5Hz，3H，-CH₃)，1.16(s，10H)，1.25(s，2H)，1.30(m，2H)，1.40(m，2H)，1.63(m，2H)，1.95(m，1H)，2.14(m，1H)，2.28(m，1H)，2.46(m，4H)，3.17(m，2H)，4.20(m，1H)，5.07(m，2H)，5.11(m，2H)，5.24(d，J＝19.0Hz，1H)，5.29(d，J＝19.0Hz，1H)，5.40(d，J＝17.0Hz，1H)，5.66(d，J＝17.0Hz，1H)，5.71(s，1H)，6.24(s，1H)，7.23(s，1H)，7.32(s，6H)，7.32(s，4H)，7.66(t，J＝7.4Hz，1H)，7.82(t，J＝7.4Hz，1H)，7.93(d，J＝8.1Hz，1H)，8.21(d，J＝8.5Hz，1H)，8.38(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，CDCl₃)：δ7.7，24.7，26.9，28.4，29.1，29.3，29.3，29.4，29.5，29.5，30.5，32.0，33.9，39.7，50.0，54.3，66.7，67.1，67.2，75.7，96.2，120.5，128.1，128.2，128.3，128.3，128.4，128.6，128.6，128.7，129.6，130.8，131.4，135.8，136.3，146.1，146.2，148.9，152.4，156.4，157.5，167.7，171.0，172.9，173.3.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺899.4223，calcd.for C₅₂H₅₈N₄O₁₀ 898.41529.

实施例33 化合物CPT-D-GL₁₂的制备

称取220mg(0.245mmol)CPT-C-GL₁₂置于100mL单口瓶中，加入50ml无水甲醇使其溶解，加入适量5％的Pd/C，在氢气保护下室温搅拌反应12h，TLC[V(二氯甲烷)∶V(甲醇)＝20∶1]监测反应完全，反应液过滤，滤液减压蒸干，硅胶拌样，Flash硅胶柱层析(DCM/MeOH＝30/1至10/1)，得到40mg淡黄色固体CPT-D-GL₁₂。mp＞220℃；Yield：24.2％；¹H-NMR(500MHz，DMSO)：δ0.91(t，J＝7.4Hz，3H，-CH₃)，1.26(m，16H)，1.54(m，2H)，1.65(m，2H)，1.78(m，2H)，2.13(m，4H)，2.24(m，2H)，3.03(m，2H)，3.31(s，1H)，5.26(d，2H)，5.44(m，1H)，5.49(s，1H)，6.82(s，1H)，7.04(s，1H)，7.31(dd，J＝14.7，7.1Hz，1H)，7.46(d，J＝7.1Hz，1H)，7.71(t，J＝7.5Hz，1H)，7.86(t，J＝7.6Hz，1H)，8.04(s，1H)，8.13(m，2H)，8.69(s，1H).¹³C-NMR(126MHz，DMSO)：δ7.5，24.5，26.3，26.4，28.4，28.7，28.7，28.828.9，29.0，29.4，30.3，32.3，33.2，38.4，39.0，39.2，39.3，39.5，39.7，39.8，40.0，50.2，53.6，66.3，75.6，94.7，119.0，127.7，128.0，128.6，128.9，129.8，130.4，131.6，145.4，146.0，147.9，152.3，156.6，165.1，167.3，172.1，172.4，174.7.HRMS(ESI)m/z：[M+H]⁺675.3390，calcd.forC₃₇H₄₆N₄O₈ 674.33156.

实施例34

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入注射剂(包括冻干粉针剂和无菌分装干粉针剂)适当辅料，按注射剂(包括冻干粉针剂和无菌分装干粉针剂)工艺制备成抗肿瘤药注射剂。

实施例35

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入片剂(包括缓控释片、骨架片、包衣片、分散片等)适当辅料，按片剂(包括缓控释片、骨架片、包衣片、分散片等)工艺制备成抗肿瘤药片剂。

实施例36

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入胶囊剂适当辅料，按胶囊剂工艺制备成抗肿瘤药胶囊剂。

实施例37

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入乳剂(包括微乳、纳米乳等)适当辅料，按乳剂(包括微乳、纳米乳等)工艺制备成抗肿瘤药乳剂。

实施例38

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入颗粒剂适当辅料，按颗粒剂工艺制备成抗肿瘤药颗粒剂。

实施例39

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入缓释控释剂适当辅料，按缓释控释剂工艺制成抗肿瘤药缓释控释剂。

实施例40

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入口服液适当辅料，按口服液工艺制备成抗肿瘤药口服液。

实施例41

取实施例9～33任一制备的化合物10g，加入脂质体剂型适当辅料，按脂质体工艺制备成抗肿瘤药脂质体剂型。

Claims

1.具有抗肿瘤作用的通式1化合物，

L为-[Cm(O)(Z)n(NH)q]-，其中m，q分别为0或1，n为0～11，p为0～8；其中Z可为烷烃(-CH₂-)；可为烯烃(-CH＝CH-)；可为氨基酸或者多肽；可为腙(-NH-N＝C-)；可为醚(-CH₂--O-CH₂-)，可为单个或多个醚，且可在Z中任意位置；可为二硫醚(-S-S-)，可为单个或多个二硫醚，且可在Z中任意位置；还可为烷烃(-CH₂-)和烯烃(-CH＝CH-)的任意组合；还可为烷烃(-CH₂-)和氨基酸或者多肽的任意组合；还可为烯烃(-CH＝CH-)和氨基酸或者多肽的任意组合；还可为烷烃(-CH₂-)和腙(-NH-N＝C-)的任意组合；还可为烷烃(-CH₂-)和醚(-CH₂--O-CH₂-)的任意组合；还可为或烷烃(-CH₂-)和二硫醚(-S-S-)的任意组合；还可为烯烃(-CH＝CH-)和二硫醚(-S-S-)的任意组合；还可为或烷烃(-CH₂-)、烯烃(-CH＝CH-)、二硫醚(-S-S-)和二硫醚(-S-S-)的任意组合。

R1选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R2选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R3选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R4选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷；

R5选自氢、羟基，氨基，烯基、炔基，烷氧基，烷胺基，烷氧基烷基、烷基、烷氧基羰基、芳基、杂环基烷。

2.具有抗肿瘤作用的化合物CPT-HT-J-ZL₁₂

3.如权利要求2所述的所述化合物或其药学上可接受的盐，其特征在于，加入制剂领域常规辅料制成片剂、胶囊剂、颗粒剂、散剂、口服液、注射剂等常规剂型。

4.如权利要求2所述的化合物的制备方法，其特征在于，该方法为：

包括如下步骤：

步骤1，将喜树碱溶于有机溶剂，与12-(Boc-氨基)十二烷酸在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-A-L₁₂；

步骤2，化合物CPT-B-L₁₂的制备方法：将CPT-A-L₁₂溶于有机溶剂，在TFA作用下生成CPT-B-L₁₂；

步骤3，化合物CPT-HT-J-L₁₂的制备方法：将CPT-B-L₁₂溶于有机溶剂，与HT-J在缩合剂、催化剂作用下生成CPT-HT-J-L₁₂；

步骤4，化合物CPT-HT-J-ZL₁₂的制备方法：将CPT-HT-J-L₁₂溶于有机溶剂，在TFA∶Thioanisole∶H₂O＝95％∶2.5％∶2.5％作用下生成CPT-HT-J-ZL₁₂。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，反应在-20℃至250℃下进行；其中，所述有机溶剂为含有1-20个碳原子的醚、醇、烷烃、芳香烃、酮、卤代烷、酰胺、腈、酯或者其混合物；所述催化剂为4-二甲氨基吡啶(DMAP)；所述缩合剂为1-乙基-3-(3-二甲胺丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDCI)、1，3-二环己基碳二亚胺(DCC)、N，N′-二异丙基碳二亚胺(DIC)和1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)；所用的脱保护剂为三氟乙酸(TFA)、钯碳(Pd/C)、氢氧化钯碳(Pd(OH)₂/C)、哌啶(Piperidine)和四丁基氟化铵(TBAF)；此外，所用碱中，无机碱为碳酸钾。

6.如权利要求1、2任一所述化合物或其药学上可接受的盐在制备抗癌药物中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述癌症为肝癌、肺癌、结肠癌、宫颈癌或胃癌。

8.药物组合物，其特征在于，所述组合物包含以治疗有效量存在的权利要求1和2 化合物或其药学可接受的盐与至少一种药学可接受的赋形剂的混合物。

9.如权利要求8所述的组合物，其特征在于，所述组合物还包含至少一种常规抗癌药。

10.如权利要求9所述的组合物，其特征在于，所述抗癌药选自环磷酰胺、5-氟尿嘧啶、紫杉醇、阿霉素、依托泊苷、伊立替康、奥沙利铂、顺铂或健择。