CN110973342B - 一种刺参低聚肽及其制备方法和应用 - Google Patents

一种刺参低聚肽及其制备方法和应用 Download PDF

Info

Publication number
CN110973342B
CN110973342B CN202010145329.2A CN202010145329A CN110973342B CN 110973342 B CN110973342 B CN 110973342B CN 202010145329 A CN202010145329 A CN 202010145329A CN 110973342 B CN110973342 B CN 110973342B
Authority
CN
China
Prior art keywords
stichopus japonicus
oligopeptide
fermentation
preparation
enzymolysis
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN202010145329.2A
Other languages
English (en)
Other versions
CN110973342A (zh
Inventor
彭健
方素云
胡晓珂
闵军
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhongke Marine Microbial Industry Technology Research Institute Shandong Co ltd
Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS
Original Assignee
Zhongke Marine Microbial Industry Technology Research Institute Shandong Co ltd
Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Zhongke Marine Microbial Industry Technology Research Institute Shandong Co ltd, Yantai Institute of Coastal Zone Research of CAS filed Critical Zhongke Marine Microbial Industry Technology Research Institute Shandong Co ltd
Priority to CN202010145329.2A priority Critical patent/CN110973342B/zh
Publication of CN110973342A publication Critical patent/CN110973342A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN110973342B publication Critical patent/CN110973342B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/04—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from fish or other sea animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/001—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from waste materials, e.g. kitchen waste
    • A23J1/002—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from waste materials, e.g. kitchen waste from animal waste materials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/04—Animal proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/30—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis
    • A23J3/32—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents
    • A23J3/34—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes
    • A23J3/341—Working-up of proteins for foodstuffs by hydrolysis using chemical agents using enzymes of animal proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/17—Amino acids, peptides or proteins
    • A23L33/18—Peptides; Protein hydrolysates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A23L5/27—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification by chemical treatment, by adsorption or by absorption
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L5/00—Preparation or treatment of foods or foodstuffs, in general; Food or foodstuffs obtained thereby; Materials therefor
    • A23L5/20—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification
    • A23L5/28—Removal of unwanted matter, e.g. deodorisation or detoxification using microorganisms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Marine Sciences & Fisheries (AREA)
  • Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)

Abstract

本发明涉及一种刺参低聚肽及其制备方法和应用。制备方法包括原料前处理、复合酶解、分离过滤、脱色除腥、微生物发酵、无机纳滤膜过滤、冷冻干燥本发明通过酶酵膜耦合技术制得刺参低聚肽，提升刺参肽功能制品附加值及刺参副产物利用率，并有效彻底除腥。采用复合生物酶制剂温和转化的方法，使大分子刺参蛋白分解为低分子肽，便于人体更好地吸收。

Description

一种刺参低聚肽及其制备方法和应用
技术领域
本发明属于海参肽领域，特别涉及一种刺参低聚肽及其制备方法和应用。
背景技术
随着社会的发展，健康问题也越发明显，而目前我国有将近70%的人处于亚健康状态，特别是由工作及生活压力大引发的免疫力低下等问题，其健康受到极大的潜伏威胁，而大部分人群是通过摄取特定食品以维系健康状态。
特殊医学用途配方食品是指针对某些进食受限、代谢紊乱、消化吸收障碍或特定疾病患者对营养素或膳食的特殊需求，专门配置加工而成的配方食品，其原料的稳定性与功效精确性要求远高于一般食品。作为人体营养支持的崭新形式，特医食品正逐渐被大众熟知，而特医食品的功能组分显的尤为重要。
生物活性肽是指参与机体生命活动的、具有生物活性的肽类分子，而低聚肽是由3-9个的氨基酸残基组成的短链肽，具有抗高血压、抗氧化、提高人体免疫力、降胆固醇、提高记忆力、改善元素吸收和矿物质运输等功效。刺参作为一种营养与药用价值极高的海洋棘皮动物，从中提取的活性肽--刺参低聚肽的生物学功能逐渐引起人们的重视，是医用食品配方的优质来源。
海参以海底藻类和浮游生物为食，全身长满肉刺，同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。海参花及其体腔液含有对人体有特殊功效的酸性粘多糖、脂质、内脏色素，以及比海参体壁含量更高的钒、核酸、精氨酸等活性物质，然而对于海参花及其体腔液人们很少注意到，经常将其弃掉。
海参的蛋白分子量大，不易被人体直接吸收，在经精深加工工艺制备后，产品分子量小，可被人体更好的吸收，但制备的产品含有严重腥味使其精深加工受到影响，并且在此过程中，海参花及体腔液无法得到有效利用。因此开发一种应用于特医食品的能被高效吸收利用的除腥全质海参低聚肽尤为重要。
发明内容
针对上述现有技术的不足，本发明提供一种刺参低聚肽及其制备方法。该方法制备得到能被高效吸收利用的除腥全质海参低聚肽。
为实现上述目的，本发明提供技术方案如下：
一种刺参低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤如下：
（1）原料前处理：刺参清洗剖开，将刺参体壁、刺参花及体腔液清洗处理，再添加纯净水打碎匀浆，得匀浆液；
（2）复合酶解：向步骤（1）所得匀浆液加水调成20~40%浓度，加热升温至54~56℃，向所述匀浆液中加入复合酶制剂，控温并间断搅拌酶解2~4h，升温至85~95℃，维持10~15min，得酶解液；
（3）分离过滤：步骤（2）酶解液降至室温，用300目滤网过滤，得滤液；
（4）脱色除腥：向步骤（3）所得滤液中添加沸石脱色除腥处理，离心取上清液；
（5）微生物发酵：将步骤（4）所得上清液转移至发酵罐中，按1-5%添加重量接入发酵菌株，调节温度至28-35℃，每1-2d无菌通气一次，连续发酵5-7d；终止发酵过滤去除杂质，得发酵溶液；
（6）无机纳滤膜过滤：将步骤（5）所得发酵溶液采用截流分子量为500Da的无机纳滤陶瓷膜过滤，得透过液；
（7）冷冻干燥：采用冷冻干燥机将所得透过液真空浓缩至固含量为25%-30%，冷冻干燥得到所述刺参低聚肽。
进一步的，所述复合酶制剂用量为占所述匀浆液重量的0.1~0.3%。
进一步的，所述复合酶制剂由20~30wt%木瓜蛋白酶、15~25wt%碱性蛋白酶、18~25wt%胰蛋白酶、15~28 wt%风味蛋白酶和1~3wt%酶激活剂组成。
进一步的，所述脱色除腥步骤中，向酶解液中加入酶解液重量的2-5%的沸石，100r/min搅拌30-45min，随后以4000r/min离心15min，取上清液。
进一步的，所述微生物发酵步骤中，所用菌株为安琪复合功能酵母菌和双歧杆菌，以5%无菌蔗糖水37℃活化培养30min。
本发明还提供一种刺参低聚肽，如上述的制备方法制备得到。
本发明还提供一种如上述的刺参低聚肽在特医食品中的应用。
有益效果：
本发明通过酶酵膜耦合技术制得刺参低聚肽，提升刺参肽功能制品附加值及刺参副产物利用率，并有效彻底除腥。采用复合生物酶制剂温和转化的方法，使大分子刺参蛋白分解为低分子肽，便于人体更好地吸收；所制备的刺参低聚肽含有刺参花及其体腔液功能营养因子，对副产物高值化应用的同时，提升了肽制品功能品质；所制备的刺参低聚肽经复合酶解中的风味酶酶解、活性碳脱色除腥、微生物发酵三步彻底除去腥味，进一步的，刺参低聚肽经微生物发酵后更好地转化并释放功能物质，从而提升刺参低聚肽的品质。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明的技术方案做进一步阐述，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，但本发明所保护范围不限于此，基于本发明所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。
试验材料介绍：
实施例中的海参由乳山市广源水产技术服务部提供。
实施例中的木瓜蛋白酶购于南宁东恒化道生物科技有限责任公司，酶活力60万u/g。
实施例中的碱性蛋白酶购于浙江绿洲生物技术有限公司，酶活力4万u/g。
实施例中的胰蛋白酶购于南宁东恒化道生物科技有限责任公司，酶活力4000u/g。
实施例中的风味蛋白酶购于南宁东恒化道生物科技有限责任公司，酶活力3万u/g。
实施例中的活性炭购于江苏瑞晨炭业科技有限公司，粒径50-100目，食品级。
实施例中的安琪复合功能酵母菌购于安琪酵母股份有限公司。
实施例中的双歧杆菌，购于北京川秀科技有限公司。
实施例中的还原型谷胱甘肽购于河北鹏宇生物科技有限公司。
实施例中的二价铁离子来源于食品级硫酸亚铁，购于连云港龙泰威食品配料有限公司。
实施例1
一种刺参低聚肽的制备工艺，包括以下步骤：
（1）原料前处理：刺参清洗剖开，分别将刺参体壁、刺参花及体腔液清洗处理，添加1-2倍纯净水打碎匀浆。
（2）复合酶解：向步骤（1）所得匀浆液加水调成25%浓度，加热升温至55℃，向所述匀浆溶液中加入用量为原料重量0.1%的复合酶制剂，控温并间断搅拌酶解2h，升温至90℃，维持15min。
所述复合酶制剂由20wt%木瓜蛋白酶、25%碱性蛋白酶、20wt%胰蛋白酶、24wt%风味蛋白酶和1%酶激活剂组成，所述酶激活剂含有还原型谷胱甘肽和二价铁离子。
（3）分离过滤：步骤（2）酶解液降至室温，用300目滤网过滤，将滤液保存备用。
（4）脱色除腥：向步骤（3）所得滤液添加沸石脱色除腥处理，离心取上清液。
所述脱色除腥步骤中，向酶解液中加入酶解液质量的3%的沸石，100r/min搅拌40min，随后以4000r/min离心15min，取上清液。
（5）微生物发酵：将步骤（4）所得上清液转移至发酵罐中，按安琪复合功能酵母菌1%、双歧杆菌1%添加量分别接入发酵菌株，调节温度至28℃，每1d无菌通气一次，连续发酵5d。终止发酵过滤去除杂质。
所述微生物发酵步骤中，所用菌株为安琪复合功能酵母菌和双歧杆菌，以5%无菌蔗糖水37℃活化培养30min。
（6）无机纳滤膜过滤：将步骤（5）所得发酵溶液采用截流分子量为500Da的无机纳滤陶瓷膜过滤，所得透过液即为高纯度刺参低聚肽溶液。
（7）冷冻干燥：采用冷冻干燥机将所得刺参低聚肽溶液真空浓缩至固含量为25%-30%，冷冻干燥得到所述刺参低聚肽。
采用上述方法得到的无腥刺参低聚肽得率为原料干重的45%以上，制备过程温和有益成分保护较好，肽的活性较高，其分子量在300~1000Da之间。
本发明的关键手段是采用酶酵膜耦合技术方法制备无腥刺参低聚肽，所述复合生物酶制剂由由30~35wt%木瓜蛋白酶、20~25wt%碱性蛋白酶、20~ 25wt%胰蛋白酶、25~30%风味蛋白酶和1~3wt%酶激活剂组成。这种特定的复合生物酶制剂协同配合能高效专一性酶解刺参胶原蛋白，使分子量为1000Da以下且相对集中，介于200~1000Da的刺参低聚肽比例能够达到95%以上。所述的微生物发酵为安琪复合功能酵母菌和双歧杆菌混合发酵，发酵后的刺参低聚肽溶液将进一步去除腥味，并且经微生物发酵后转化释放产生更多有益营养分子，提升海参低聚肽的品质。
采用复合生物酶制剂分解刺参胶原蛋白，使分子量为1000Da以下且相对集中，介于200~1000Da的刺参低聚肽比例能够达到95%以上。
采用三步去腥法彻底除腥。酶解过程中额外采用风味蛋白酶，极大改善酶解原液腥味问题；在使用活性碳脱色后，进一步去除了肽溶液腥味；经微生物发酵后，使腥味彻底去除。
采用微生物发酵法对酶解液进行发酵，转化释放产生更多有益营养分子，提升肽的品质。
采用无机纳滤陶瓷膜过滤的技术手段，在高效控制筛选低分子量肽透过同时，去除混合液中不易溶解的物质和易吸潮糖类成分，提高刺参低聚肽成品的水复溶性。
实施例2
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别仅在于：复合酶解方法不同。
实施例2的复合酶解步骤为：向步骤（1）所得匀浆液加水调成30%浓度，加热升温至54℃，向所述匀浆溶液中加入用量为原料重量0.2%的复合酶制剂，控温并间断搅拌酶解3h，升温至90℃，维持12min。
所述复合酶制剂由25wt%木瓜蛋白酶、20%碱性蛋白酶、25wt%胰蛋白酶、28wt%风味蛋白酶和2%酶激活剂组成，所述酶激活剂含有还原型谷胱甘肽和二价铁离子。
实施例3
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：复合酶解方法不同。
实施例3的复合酶解步骤为：向步骤（1）所得匀浆液加水调成30%浓度，加热升温至54℃，向所述匀浆溶液中加入用量为原料重量0.3%的复合酶制剂，控温并间断搅拌酶解3h，升温至90℃，维持12min。
所述复合酶制剂由30wt%木瓜蛋白酶、25%碱性蛋白酶、25wt%胰蛋白酶、17wt%风味蛋白酶和3%酶激活剂组成，所述酶激活剂含有还原型谷胱甘肽和二价铁离子。
实施例4
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在脱色除腥步骤中，向酶解液中加入酶解液质量的2%的沸石，100r/min搅拌30min，随后以4000r/min离心15min，取上清液。
实施例5
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在脱色除腥步骤中，向酶解液中加入酶解液质量的5%的沸石，100r/min搅拌45min，随后以4000r/min离心15min，取上清液。
实施例6
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：微生物发酵方法不同。
实施例6的微生物发酵步骤为：将步骤（4）所得上清液转移至发酵罐中，按安琪复合功能酵母菌3%、双歧杆菌1%添加量分别接入发酵菌株，调节温度至30℃，每2d无菌通气一次，连续发酵6d。终止发酵过滤去除杂质。
所述微生物发酵步骤中，所用菌株为安琪酵母菌和双歧杆菌，以5%无菌蔗糖水37℃活化培养30min。
实施例7
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：微生物发酵方法不同。
实施例7的微生物发酵步骤为：将步骤（4）所得上清液转移至发酵罐中，按安琪复合功能酵母菌1%、双歧杆菌3%添加量分别接入发酵菌株，调节温度至35℃，每2d无菌通气一次，连续发酵7d。终止发酵过滤去除杂质。
所述微生物发酵步骤中，所用菌株为安琪复合功能酵母菌和双歧杆菌，以5%无菌蔗糖水37℃活化培养30min。
对比例1
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：只采用刺参的刺参体壁作为低聚肽的制备原料。而不使用刺参花及体腔液。
对比例2
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在复合生物酶制剂酶解步骤中，采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和酶激活剂进行酶解。而不使用风味蛋白酶。
对比例3
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在酶解步骤中，分别采用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和胰蛋白酶各单一蛋白酶进行酶解。而不使用酶激活剂和风味蛋白酶。
对比例4
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在活性炭脱色除腥步骤中，向酶解液中加入酶解液质量的2%的活性炭，充分搅拌，活性炭粒径为50目，100r/min搅拌40min，随后以4000r/min离心15min，取上清液。
对比例5
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在活性炭脱色除腥步骤中，向酶解液中加入酶解液质量的5%的活性炭，充分搅拌，活性炭粒径为100目，100r/min搅拌45min，随后以4000r/min离心15min，取上清液。
对比例6
一种刺参低聚肽的制备工艺，采用实施例1所述方法进行制备，区别在于：在脱色除腥步骤后，直接无机纳滤膜过滤并冷冻干燥，不进行微生物发酵步骤。
上述实施例1-7，对比例1-6所得刺参低聚肽腥味值、脱色率及分子量分布如下：
腥味值的感官评定方法：无腥味10分，微腥味8分，腥味较弱6分，腥味一般为4分，腥味较重为2分，腥味很重为0分。以20人小组评分，取其平均值。脱腥率的计 算公式为:脱腥率(%)=（步骤（2）所得酶解液腥味值-步骤（5）所得滤液的腥味值）/步骤（2）所得酶解液腥味值×100%。
脱色率的测定方法:用722分光光度计测定实施例当中步骤（3）所得滤液与步骤（4）所得上清液的吸光度值OD0、OD1 (波长为458nm)，并计算脱色率。脱色率的计算公式为:脱色率(%)= (OD0-OD1)/OD0×100%
分子量分布测定方法：采用TSK-GEL G2000SWXL 色谱柱(300 mm×7.8 mm，5 μm)高效凝胶排阻色谱法进行测定，流动相为乙腈-0.1%三氟乙酸溶液(15∶85)，流速0.6 mL/min，检测波长220nm；供试品溶液制备：步骤（6）所得滤10 mL，于9000 r/min离心10 min，取上清液经0.22μm微孔滤膜过滤；对照溶液制备：分别称取氨基酸寡肽 (Mr 2495Da)、成骨生长肽(Mr 1523Da)、胸腺5肽(Mr 680 Da)、氨基酸寡肽 (Mr 317Da)、L-甲硫氨基酸(Mr149Da)对照品各2 mg配成浓度各为1mg/mL混合对照品溶液。
除腥率，脱色率，分子量分布的统计结果表见表1。
表1:除腥率，脱色率，分子量统计表
除腥率(%) 脱色率(%) 分子量分布(Mr/Da)
实施例1 56.37 79.33 615
实施例2 58.43 — 484
实施例3 46.16 — 295
实施例4 44.68. 72.15 —
实施例5 57.13 79.48 —
实施例6 58.85 — —
实施例7 57.42 — —
对比例1 60.81 — —
对比例2 43.25 — 594
对比例3 42.27 — 815
对比例4 58.6 76.53 —
对比例5 60.43 81.37 —
对比例6 40.28 — —
（“—”为未检测项，无变量干扰试验结果，故不进行检测）
从表1可以看出，在除腥率测试项当中，结合实施例1、2、3和对比例2、3发现，变量因素为复合微生物酶制剂，通过分析数据发现，风味蛋白酶在低聚肽的除腥过程中起重要作用；结合实施例1、4、5与对比例4、5发现，在比较活性炭和沸石时，沸石的除腥效果稍好于活性炭；结合实施例1、6、7和对比例6数据发现，微生物发酵在除腥过程中起到至关重要的作用，原因是安琪复合功能酵母菌和双歧杆菌在发酵过程中极大的改善了低聚肽溶液的风味特性。其中最突出的效果为实施例6。在脱色测试项当中，结合实施例1、4、5和对比例4、5发现，活性炭和沸石的脱色效果接近，其中沸石的效果稍好一些，并且活性炭对酶解液中含氮化合物的吸附比较大，这将对海参肽的制备造成较大的损失。分子量分布测试项，试验过程中挑选每一项的测试数据中峰面积最大的代表数据，结合实施例1、2、3和对比例2、3发现，酶解过程中各生物酶的搭配比例不同导致酶解液的分量分布不同，最适搭配为实施例3，将刺参酶解至分子含量分布于295Da左右的低聚肽。
本发明还提供上述无腥刺参低聚肽在特医食品中的应用。
本发明的特医食品，具有降三高作用，其含有上述无腥刺参低聚肽。特医食品的加工工艺，包括上述无腥刺参低聚肽与辅料的混合配伍，包装即得。其中，所述的辅料包括：人参、银杏叶、葛根、茯苓、枸杞、三七。所述无腥刺参低聚肽与人参、银杏叶、葛根、茯苓、枸杞、三七的重量比为(10-20): (15-25): (10-15): (5-10): (10-15): (4-8): (8-13)比例进行混合，优选为15：20：12：8：13：6：11。
本发明的上述实施例仅仅是为清楚地说明本发明所作的举例，而并非是对本发明的实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无法对所有的实施方式予以穷举。凡是属于本发明的技术方案所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明的保护范围之列。

Claims (3)

1.一种刺参低聚肽的制备方法，其特征在于，步骤如下：
（1）原料前处理：刺参清洗剖开，将刺参体壁、刺参花及体腔液清洗处理，再添加纯净水打碎匀浆，得匀浆液；
（2）复合酶解：向步骤（1）所得匀浆液加水调成30%浓度，加热升温至54℃，向所述匀浆溶液中加入用量为原料重量0.3%的复合酶制剂，控温并间断搅拌酶解3h，升温至90℃，维持12min，得酶解液；
所述复合酶制剂由30wt%木瓜蛋白酶、25%碱性蛋白酶、25wt%胰蛋白酶、17wt%风味蛋白酶和3%酶激活剂组成，所述酶激活剂含有还原型谷胱甘肽0.03%和二价铁离子0.02%；
（3）分离过滤：步骤（2）酶解液降至室温，用300目滤网过滤，得滤液；
（4）脱色除腥：向滤液中加入滤液重量的2-5%的沸石，100r/min搅拌30-45min，随后以4000r/min离心15min，取上清液；
（5）微生物发酵：将步骤（4）所得上清液转移至发酵罐中，按1-5%添加重量接入发酵菌株，调节温度至28-35℃，每1-2d无菌通气一次，连续发酵5-7d；终止发酵过滤去除杂质，得发酵溶液；
所述微生物发酵步骤中，所用菌株为安琪复合功能酵母菌和双歧杆菌，以5%无菌蔗糖水37℃活化培养30min；
（6）无机纳滤膜过滤：将步骤（5）所得发酵溶液采用截流分子量为500Da的无机纳滤陶瓷膜过滤，得透过液；
（7）冷冻干燥：采用冷冻干燥机将所得透过液真空浓缩至固含量为25%-30%，冷冻干燥得到所述刺参低聚肽。
2.一种刺参低聚肽，其特征在于，如权利要求1所述的制备方法制备得到。
3.一种如权利要求2所述的刺参低聚肽在特医食品中的应用。
CN202010145329.2A 2020-03-05 2020-03-05 一种刺参低聚肽及其制备方法和应用 Active CN110973342B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010145329.2A CN110973342B (zh) 2020-03-05 2020-03-05 一种刺参低聚肽及其制备方法和应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202010145329.2A CN110973342B (zh) 2020-03-05 2020-03-05 一种刺参低聚肽及其制备方法和应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN110973342A CN110973342A (zh) 2020-04-10
CN110973342B true CN110973342B (zh) 2020-06-23

Family

ID=70081472

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202010145329.2A Active CN110973342B (zh) 2020-03-05 2020-03-05 一种刺参低聚肽及其制备方法和应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN110973342B (zh)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112956655A (zh) * 2021-03-10 2021-06-15 烟台市万船口海洋生物科技有限公司 一种酶解鱼溶浆生产工艺
CN113558200B (zh) * 2021-09-26 2021-12-21 渤海水产育苗(山东)有限公司 海参花悬浮方法、海参花悬浮液及应用
CN114517168B (zh) * 2022-02-16 2022-11-15 黑龙江美丽石岛科技开发有限公司 一种抗肿瘤的乳酸菌发酵海参肽制剂及其制备方法和用途
CN115606811B (zh) * 2022-04-19 2023-06-09 中国科学院烟台海岸带研究所 一种刺参内脏寡肽微胶囊的制备方法及微胶囊

Family Cites Families (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2011030531A (ja) * 2009-08-05 2011-02-17 Intekku Kk 乾燥「なまこ」を粉末にする方法と酵素分解しエキスにする方法。
CN105325801B (zh) * 2014-08-15 2020-05-22 中国海洋大学 一种海参肠肽的制备方法
CN104651435A (zh) * 2015-02-16 2015-05-27 江南大学 一种利用益生菌发酵海洋生物制备降血压肽的方法
CN109222074A (zh) * 2018-09-10 2019-01-18 长春健康未来医药科技有限公司 一种提高肝脏排毒、解酒护肝的提取物及其制备方法
CN110192623A (zh) * 2019-07-05 2019-09-03 福建冠丰生物科技有限公司 一种海参牡蛎复合型营养低聚肽粉及其制备方法
CN110269250A (zh) * 2019-07-19 2019-09-24 蓬莱深奥生物科技研究所 一种海参体壁酵素及其制备方法
CN110495611A (zh) * 2019-08-02 2019-11-26 青岛浩大生物科技工程有限责任公司 一种提高海参营养保健功效的工艺
CN110279047A (zh) * 2019-08-05 2019-09-27 山东省科学院生物研究所 一种海参果味饮料及其加工方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN110973342A (zh) 2020-04-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110973342B (zh) 一种刺参低聚肽及其制备方法和应用
KR101059482B1 (ko) 해조류의 발효에 의한 ｇａｂａ의 제조방법
WO2020177390A1 (zh) 一种猴头菌发酵制备含麦角硫因的化妆品原液的方法
CN110623860B (zh) 有效促进纤维原细胞增殖的大鲵活性肽与玻尿酸组合物
CN111772195B (zh) 一种大鲵胶原蛋白肽、其制备方法及其制剂
KR101207899B1 (ko) 굴을 이용한 다량의 타우린 및 ｇａｂａ을 함유하는 기능성 발효소재 및 그의 제조방법
KR101158448B1 (ko) 효모 엑기스를 이용한 고농도의 천연 ｇａｂａ를 함유하는 기능성 발효소재 및 그의 제조방법
CN111758967B (zh) 一种大鲵胶原蛋白肽组合物及其应用
CN107488693A (zh) 马尾藻活性多肽的制备方法
CN114557927B (zh) 一种酵母精华水组合物、酵母精华水及其制备方法和应用
CN106036610A (zh) 富硒蓝莓果粉产品及其制备方法
CN114642260A (zh) 荔枝酵素、其制备方法和用途
KR101114495B1 (ko) 2단계 방식에 의한 기능성 강화 가공발효녹용 및 그 제조방법
KR20100027618A (ko) 효모에 의한 다시마 추출액의 기능성 천연 발효조미료 및 이의 제조방법
CN111000022A (zh) 一种螺旋藻多肽粉制备方法及螺旋藻多肽片
JP4671450B1 (ja) ダイエット食品
CN110656151A (zh) 一种提高海参补肾壮阳功效的方法
CN110499351A (zh) 一种具有高ace抑制活性的大豆肽及其制备方法与应用
CN113999884A (zh) 一种甲鱼生物活性肽的制备方法
CN111718857B (zh) 一种绣球菌的培养方法，绣球菌干燥粉末，及其溶媒提取物和应用
CN114836505B (zh) 一种小分子解酒肽及其制备方法与应用
KR102397841B1 (ko) S-gag 및 시알산 함량이 증진된 녹용 추출물의 제조방법
CN114921510B (zh) 珊瑚拟青霉在白首乌多糖提取上的应用
CN115381077B (zh) 一种提升酱油有机硒浓度的方法
CN106544388B (zh) 一种鲣鱼抗氧化复合物及其制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant