CN111772195B - 一种大鲵胶原蛋白肽、其制备方法及其制剂 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及大鲵深加工技术领域,具体涉及一种大鲵胶原蛋白肽、其制备方法及其制剂。本发明通过将去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵原料依次经碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的三段式酶解,再将酶解物经过滤精制得到大鲵胶原蛋白肽。该大鲵胶原蛋白肽的平均分子量在1000Da以下,蛋白质含量在95%以上,灰分含量在2%以下,且具有提高皮肤细胞增殖功能小分子活性肽的含量高,具有优异的促进皮肤细胞增殖活性。本发明还提供含有该大鲵胶原蛋白肽和维生素C或富含维生素C的动植物提取物的组合物及其制剂,该组合物及其制剂可增强皮肤细胞活性和增殖能力,有效缓解皮肤衰老、萎缩等问题。
Description
技术领域
本发明涉及大鲵深加工技术领域,具体涉及一种大鲵胶原蛋白肽、其制备方法、应用以及含该大鲵胶原蛋白肽的组合物和制剂。
背景技术
大鲵(Andrias davidianus)是隐腮鲵科、大鲵属有尾两栖动物,又称娃娃鱼,是一种高营养价值两栖类动物,被誉为“水中人参”。胶原蛋白是一种纤维性蛋白质,其主要组成物质是氨基酸,经水解后生成胶原蛋白肽以及副产品氨基酸。近年来,胶原蛋白肽因其显著的生物功能活性,被越来越多地应用于各种护肤品、保健品、药物及食品。大鲵的皮和肉中均含有丰富的胶原蛋白。除一般的胶原蛋白肽具有的补水、锁水,抗氧化,抗衰老,抗肿瘤,降血压,修复胃粘膜、骨骼和韧带保健,护发防脱、促生发等多种生理活性功能外,大鲵胶原蛋白肽还具有修复上皮细胞、促进伤口愈合、保护肝脏损伤、增强免疫力的特殊功效。
大鲵胶原蛋白肽的制备方法主要包括酸水解、碱水解和酶解法。目前对于大鲵胶原蛋白肽的制备更多的是关注水解产物肽的分子量大小,以期获得分子量更小、利于机体的吸收的胶原蛋白肽,而对于特定功能活性肽的含量则少有关注。专利申请CN105018555A公开了一种大鲵皮胶原蛋白肽的制备方法,以大鲵皮为原料,经脱脂、去黑皮和杂蛋白以及高压处理后加入碱性蛋白酶进行酶解,经活性炭脱色,离心、滤膜微滤、超滤膜超滤、纳滤膜纳滤得滤液,将滤液浓缩冻干后得到大鲵皮胶原蛋白肽粉,其制备的胶原蛋白肽分子量小,90%以上分子量小于1000道尔顿。专利申请CN111172226A公开了用于肠道吸收的胶原蛋白肽及其提取方法和应用。将大鲵鱼皮清洗干净并进行脱腥处理,然后将其放入NaOH溶液中浸泡后,用水冲洗;将处理过的大鲵鱼皮进行酶解后,再进行灭酶处理,然后离心过滤并收集滤渣;将滤渣依次进行微滤、超滤和钠滤后浓缩,然后冻干并粉碎,得到用于肠道吸收的胶原蛋白肽。
大鲵胶原蛋白经酶解后的多肽产物组成十分复杂,其中包含已知或未知序列的功能活性肽,但也包含大量不具有目标功效、甚至不具有任何实质功效的肽,这些肽的存在会与功能活性肽的吸收利用形成竞争关系,不利于功能活性肽的吸收利用。另一方面,具有特定功能的活性肽往往包含具有不同氨基酸组成、不同分子量大小的多种肽,较难通过某些共性特征将其区分。本发明发现,通过适宜的单一酶解或复合酶解虽然能够获得分子量较小的胶原蛋白肽,但是却往往很难保证具有特定功能肽的含量以及活性。
发明内容
本发明的目的之一是提供一种具有优异的促进皮肤细胞增殖活性的大鲵胶原蛋白肽及其制备方法;本发明的另一目的是提供含所述大鲵胶原蛋白肽的组合物和口服制剂。
为实现上述目的,本发明对大鲵胶原蛋白的深加工方法和加工产物的功能进行了长期、深入的研究,以促进皮肤细胞增殖的功能活性肽为目标产物,开发了促进皮肤细胞增殖的功能活性肽的含量和活性显著提高的大鲵胶原蛋白肽的制备方法。
具体地,本发明提供以下技术方案:
本发明提供一种大鲵胶原蛋白肽的制备方法,包括如下步骤:将去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉依次经碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的三段式酶解制得酶解物。
以大鲵的皮和/或肉为原料,采用上述酶解顺序的三段式酶解法不仅能够保证大鲵原料充分酶解,获得高含量的小分子胶原蛋白肽(小于1000Da),而且还能够保证酶解得到的胶原蛋白肽具有优异的促进皮肤细胞增殖的活性。
以上所述的三段式酶解中,各段酶解的反应温度均不高于60℃。
在酶解过程中,一般会根据酶的最适反应条件选择酶解温度等反应条件,然而,本发明意外地发现,即便碱性蛋白酶可在高于60℃的温度条件下发挥优异的酶解活性,但是,在高于60℃条件下酶解,不利于获得高含量的促进皮肤细胞增殖的活性肽。
综合考虑碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的活性,各段酶解温度优选控制在40~60℃。
同样地,在所述三段式酶解过程中,优选控制各段酶解的pH为6~9,更有利于获得高含量的促进皮肤细胞增殖的小分子活性肽。
具体地,所述三段式酶解包括如下步骤:
(1)碱性蛋白酶酶解:添加碱性蛋白酶与去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉的质量比为0.1~0.5%,酶解温度为55~60℃,酶解时间为0.5~1.5h;
(2)中性蛋白酶酶解:添加中性蛋白酶与去除非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉的质量比为0.1~0.5%,酶解温度为45~50℃,酶解时间为1~2.5h;
(3)风味蛋白酶酶解:添加风味蛋白酶与去除非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉的质量比为0.1~0.5%,酶解温度为45~55℃,酶解时间为0.3~3h。
在以上所述的三段式酶解过程中,在上一段酶解结束并降温后,可直接加入下一段酶解的蛋白酶进行酶解。
为更有利于酶解作用,在进行碱性蛋白酶的酶解前,优选将去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉在90~100℃处理0.5~1h。高温处理可使大鲵原料中的胶原蛋白适度变性,有利于酶解反应的进行。
大鲵原料去除非胶原蛋白可采用常规的方法进行,例如:碱液浸泡法。优选将去除脂肪的大鲵皮和/或肉经0.05~0.1M的碱液浸泡3.5~4.5h,去除非胶原蛋白,得到去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉。
具体地,在三段式酶解前,大鲵原料的预处理方法包括:将大鲵整鱼经切块和皮、肉、脂肪分离处理后,将大鲵的皮和/或肉用0.05~0.1M的NaOH溶液浸泡3.5~4.5h以去除非胶原蛋白,料液比(质量体积比g:ml)为1:(5~10);后用去离子水洗涤至中性,沥水,按料液比(质量体积比g:ml)为1:(1~3)加水,升温至90~100℃,保温0.5~1h。
经上述预处理后,大鲵原料能够更充分地被酶解并且获得的大鲵胶原蛋白肽的促进皮肤细胞增殖活性更高。
本发明所提供的方法,将大鲵原料经预处理及三段式酶解结束后,加适量酸将酶解物的pH调节至中性,而后进行灭酶处理。
以上所述的灭酶处理可采用本领域常规方法,例如:在85~90℃保温4~8min。
本发明使用的碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶均为本领域常用的蛋白酶,可通过市售购买获得。
针对以上三段式酶解获得的酶解物的肽的组成和灰分等杂质特点,本发明开发了酶解物的过滤精制方法,具体而言:
将酶解物经灭酶处理后,再依次经初滤、活性炭吸附、精滤和干燥处理。
其中,初滤包括以珍珠岩为过滤助剂的板框过滤机过滤。珍珠岩配合板框过滤机过滤能够很好地去除酶解物中的大分子杂质,同时不会对酶解物的肽活性产生不利影响。
其中,珍珠岩的用量优选为与酶解物的质量比为0.1~2%,板框过滤机的压力为1.5~2Mpa。
进一步地,在初滤后进行活性炭吸附处理,将活性炭吸附处理后的酶解物浓缩后再进行精滤处理。
其中,所述精滤依次包括以孔体积为0.3~1.0cm3/g,孔径为1~2μm的硅藻土过滤器过滤、以0.4~0.8μm过滤精度的纸板过滤机过滤、以0.22/0.22μm聚丙烯微孔折叠滤芯过滤。
采用以上初滤、活性炭吸附、精滤的过滤精制方法能够有效降低大鲵胶原蛋白肽的灰分含量,保证了大鲵胶原蛋白肽的蛋白质含量和纯度,同时不会对肽的活性产生不利影响。
本发明所述的干燥处理可为喷雾干燥或冷冻干燥,经喷雾干燥或冷冻干燥制备得到大鲵胶原蛋白肽粉。
本发明还提供由以上制备方法制备得到的一种大鲵胶原蛋白肽。
本发明进一步提供所述制备方法或所述大鲵胶原蛋白肽在制备具有如下任一功能的产品中的应用:
(1)提高皮肤细胞活力;
(2)促进皮肤细胞增殖;
(3)缓解皮肤衰老或萎缩。
在以上所述的大鲵胶原蛋白肽的基础上,本发明通过将该大鲵胶原蛋白肽与维生素C复配提供一种促进皮肤细胞增殖的组合物。本发明发现,将大鲵胶原蛋白肽与维生素C以(2~6):1的比例复配使用,两者能够产生优异的协同作用,显著提高促进皮肤细胞增殖功能。
本发明所述的促进皮肤细胞增殖的组合物包含以上所述的大鲵胶原蛋白肽以及选自维生素C、富含维生素C的动物或植物提取物中的一种或多种;其中,大鲵胶原蛋白肽与维生素C的质量比为(2~6):1。
以上所述的富含维生素C的动物或植物提取物可选自针叶樱桃提取物、沙棘提取物、番石榴提取物、卡姆梅提取物中的一种或多种。
本发明提供一种促进皮肤细胞增殖的组合物,其包含质量比为(2~6):1的所述大鲵胶原蛋白肽和维生素C。
本发明还提供一种促进皮肤细胞增殖的组合物,其包含所述大鲵胶原蛋白肽和针叶樱桃提取物,针叶樱桃提取物的用量为以大鲵胶原蛋白肽与维生素C的质量比为(0.5~6):1计。
本发明提供的促进皮肤细胞增殖的组合物还可包含其他促进皮肤增殖和修复功能的成分,优选透明质酸、葡萄籽提取物、黑生姜提取物中的一种或多种。
本发明提供一种促进皮肤细胞增殖的组合物,其包含如下重量份的组分:大鲵胶原蛋白肽,10~50份;维生素C或富含维生素C的动物或植物提取物,以维生素C计2~20份;透明质酸,0.1~2份;葡萄籽提取物,0.5~2.5份;黑生姜提取物,0.2~3份。该组合物中,透明质酸、葡萄籽提取物和黑生姜提取物的加入能够更好地提升组合物促进皮肤细胞增殖的功效。该组合物可制备为口服或外用制剂。
具体地,本发明还提供一种促进皮肤细胞增殖的组合物,其包含如下重量份的组分:大鲵胶原蛋白肽,10~50份;维生素C或富含维生素C的动物或植物提取物,以维生素C计2~20份;透明质酸,0.1~2份;葡萄籽提取物,0.5~2.5份;黑生姜提取物,0.2~3份;植物性膳食纤维,1~20份;生物素,0.0003~0.001份;牛磺酸,1~15份;叶酸,0.0005~0.004份;辅酶Q10,0.2~0.5份;β-烟酰胺单核苷酸(NMN),0.5-4份;锰0.005-0.05份;铁0.01~0.15份;硒0.0001~0.0011份;铜0.0005-0.015份。该组合物具有较高的促进皮肤细胞增殖功效,同时还能够为机体补充皮肤增殖所需的其他营养物质。该组合物可制备为口服制剂。
其中,所述植物性膳食纤维可为菊粉或果蔬粉,可改善胃肠道功能。
此外,上述锰、铁、硒、铜的提供形式为硫酸锰、硫酸亚铁、亚硒酸钠和硫酸铜。上述用量的计算方式为以锰、铁、硒、铜的元素质量计。
本发明提供一种含大鲵胶原蛋白肽制剂,其以所述促进皮肤细胞增殖的组合物为活性成分。
以上所述含大鲵胶原蛋白肽制剂可为液体制剂(口服液、水剂、外用液体制剂等)或固体制剂(粉剂、冲剂、片剂等)。
以上所述含大鲵胶原蛋白肽制剂还包含辅料。
当所述制剂为口服制剂时,所述辅料包含调味辅料。
所述调味辅料包含如下重量份的组分:酸味调节剂2~7份,甜味调节剂0.1~50份,天然调味剂0.5~3份。
其中,所述酸味调味剂优选柠檬酸和苹果酸中的一种或多种。所述甜味调味剂优选木糖醇、甜菊糖和赤藓糖醇中的一种或多种。以代糖成分替换糖成分作为制剂的甜味调味剂,可使口服制剂达到低糖、无糖化的目的。所述天然调味剂为优选鲜花精油(如:玫瑰精油、茉莉精油)、水果精油、水果香精和浓缩果汁中的一种或多种。
所述制剂的辅料还可包含制备为相应剂型所需的辅料。例如:当所述制剂为粉剂或冲剂时,所述辅料还包含抗结块剂(如:二氧化硅);当所述制剂为片剂时,所述辅料还包含压片助流剂(如:硬脂酸镁)。当所述制剂为口服液或水剂时,所述辅料还包含蒸馏纯水。
本发明还提供以上所述制剂的制备方法,该制备方法为针对液体制剂的制备方法,包括:将各组分混匀后,采用聚醚砜滤膜和/或常温纳滤膜过滤。
相比于高温杀菌以及添加人工防腐剂(如:山梨酸盐、苯甲酸盐等)的杀菌防腐方法,本发明采用以上过滤方法去除微生物,防腐效果优异且对活性成分的活性影响更小,无需加入人工防腐剂,液体制剂的防腐保鲜性能可从15-30天提升至365天以上。
本发明的有益效果在于:
(1)本发明提供的大鲵胶原蛋白肽中富含分子量在1000Da以下的小分子活性肽,平均分子量在1000Da以下,其中具有促进皮肤细胞增殖活性的小分子肽含量较高,具有优异的促进皮肤细胞增殖活性,增强皮肤细胞活性和增殖能力,有效缓解因氧化、辐射、年龄等因素导致的皮肤细胞活性降低,皮肤衰老、萎缩等。
(2)本发明提供的组合物中大鲵胶原蛋白肽与维生素C具有显著的协同作用,有效提高了组合物促进皮肤细胞增殖的作用,该组合物可显著增强皮肤细胞活性和增殖能力,有效缓解因氧化、辐射、年龄等因素导致的皮肤细胞活性降低,皮肤衰老、萎缩等。
(3)本发明提供的含大鲵胶原蛋白肽制剂中不含人工色素、香精、增溶剂、去味剂和稳定剂等添加剂,以代糖成分替换糖作为甜味调节剂,更有利于机体健康;且无需加入人工防腐剂也能够保证长时间的防腐保鲜性能。
具体实施方式
以下实施例用于说明本发明,但不用来限制本发明的范围。
以下实施例中所使用的实验方法如无特殊说明,均为常规方法。
以下实施例中所用的材料、试剂等,如无特殊说明,均可从商业途径得到。其中,碱性蛋白酶(Alcalase)为枯草芽孢杆菌来源的碱性蛋白酶,CAS号为9014-01-1,酶活为2.4AU/g;中性蛋白酶为枯草芽孢杆菌来源的中性蛋白酶,CAS号为9014-01-1,酶活为10万U/g;风味蛋白酶(Flavourzyme)为利用米曲霉发酵再添加风味物质筛选复配而成,CAS号为9014-01-1,酶活为500LAPU/g。维生素C为购买自Sigma Aldrich公司的分析纯维生素C。
实施例1
本实施例提供一种大鲵胶原蛋白肽,由以下方法制备得到:
1、大鲵原料预处理:大鲵整鱼经切块和皮、肉、脂肪分离处理后,将皮和肉用0.1mol/L的氢氧化钠溶液浸泡4h,以去除非胶原蛋白,浸泡的料液比(g:ml)为1:8,浸泡期间更换一次NaOH溶液;浸泡后用去离子水洗涤至中性,沥水待用;
2、酶解:在酶解罐中投入步骤1经预处理的大鲵鱼原料,按照料液比为1:1.5(g:ml)加入去离子水,开启搅拌,升温至100℃,微沸保温60min。
1)降温至60℃,用氢氧化钙调节pH 8.0,按物料质量的3‰加入碱性蛋白酶,酶解1h,酶解过程中维持pH 8.0-9.0;
2)降温至50℃,在自然pH下,添加物料质量3‰的中性蛋白酶,继续酶解2h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0;
3)添加物料质量5‰的风味蛋白酶,在50℃继续酶解1h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0,酶解结束后用磷酸调节pH至中性。
3、灭酶:酶解结束后,升温至90℃保温5min;加入酶解物质量0.5%的珍珠岩,降温至60℃;
4、初滤:将步骤3的物料经板框过滤机过滤至脱色罐,板框过滤机的压力为2Mpa。
5、脱色:用磷酸调节pH至4.0-4.8(60℃测量),按物料比的1%添加活性炭,搅拌并保温30min;待脱色完毕,用氢氧化钙将pH调节至6.0(pH需在15分钟内无变化,防止反应不充分或者不均匀导致的虚假pH值),过滤。
6、浓缩:将物料浓缩至浓度为45±1%(以浓缩塔出料口浓度计)。
7、精滤:浓缩液经硅藻土过滤器(孔体积为0.3~1.0cm3/g,过滤精度1~2μm)、纸板过滤机(0.4μm过滤精度)、微孔折叠滤芯(0.22/0.22μm聚丙烯过滤精度)进入无菌罐。
8、喷雾干燥:进风温度210℃,出风温度85℃,雾化器频率50Hz,密度要求:0.23-0.27g/ml。
实施例2
本实施例提供一种大鲵胶原蛋白肽,其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤2,步骤2具体如下:
酶解:在酶解罐中投入步骤1经预处理的大鲵鱼原料,按照料液比为1:1.5(g:ml)加入去离子水,开启搅拌,升温至100℃,微沸保温60min。
1)降温至60℃,用氢氧化钙调节pH 6.5,按物料质量的1‰加入碱性蛋白酶,酶解1.5h,酶解过程中维持pH 6.0-9.0;
2)降温至50℃,在自然pH下,添加物料质量1‰的中性蛋白酶,继续酶解2.5h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0;
3)添加物料质量1‰的风味蛋白酶,在50℃继续酶解3h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0,酶解结束后用磷酸调节pH至中性。
实施例3
本实施例提供一种组合物,其由如下重量份的组分组成:实施例1的大鲵胶原蛋白肽4份,维生素C1份。
实施例4
本实施例提供一种组合物,其包含如下重量份的组分:实施例1的大鲵胶原蛋白肽4份,针叶樱桃提取物(维生素含量为25%)4份。
实施例5
本实施例提供一种组合物,其由如下重量份的组分组成:实施例1的大鲵胶原蛋白肽50份,维生素C12.5份,透明质酸0.5份,葡萄籽提取物1.5份,黑生姜提取物0.6份。
实施例6
本实施例提供一种口服液,其由如下重量份的组分组成:实施例1的大鲵胶原蛋白肽50份,维生素C12.5份,透明质酸0.5份;葡萄籽提取物1.5份,黑生姜提取物0.6份,生物素0.0005份;菊粉5份,牛磺酸5份,叶酸0.001份,辅酶Q1 0.3份,β-烟酰胺单核苷酸0.6份,锰0.01份,铁0.02份,硒0.0002份,铜0.0015份,蒸馏水500份,柠檬酸5份,甜菊糖0.2份,天然玫瑰精油1.5份。
本实施例还提供以上口服液的制备方法:将各组分按用量比混匀后,采用聚醚砜滤膜过滤,即得。
本实施例的口服液中未加入人工防腐剂,常温条件下的保质期可达365天以上。
对比例1
本对比例提供一种大鲵胶原蛋白肽,其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤2,步骤2具体如下:
酶解:在酶解罐中投入步骤1经预处理的大鲵鱼原料,按照料液比为1:1.5(g:ml)加入去离子水,开启搅拌,升温至100℃,微沸保温60min。
1)降温至50℃,添加物料质量3‰的中性蛋白酶,酶解2h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0;
2)升温至60℃,用氢氧化钙调节pH 8.0,按物料质量的3‰加入碱性蛋白酶,继续酶解1h,酶解过程中维持pH 8.0-9.0;
3)添加物料质量5‰的风味蛋白酶,在50℃继续酶解1h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0,酶解结束后用磷酸调节pH至中性。
对比例2
本对比例提供一种大鲵胶原蛋白肽,其制备方法与实施例1的区别仅在于步骤2,步骤2具体如下:
酶解:在酶解罐中投入步骤1经预处理的大鲵鱼原料,按照料液比为1:1.5(g:ml)加入去离子水,开启搅拌,升温至100℃,微沸保温60min。
1)降温至60℃,用氢氧化钙调节pH 8.0,按物料质量的3‰加入碱性蛋白酶,酶解1h,酶解过程中维持pH 8.0-9.0;
2)降温至50℃,在自然pH下,添加物料质量3‰的木瓜蛋白酶,继续酶解2h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0;
3)添加物料质量5‰的风味蛋白酶,在50℃继续酶解1h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0,酶解结束后用磷酸调节pH至中性。
对比例3
本对比例提供一种组合物,其由如下重量份的组分组成:对比例1的大鲵胶原蛋白肽4份,维生素C1份。
对比例4
本对比例提供一种组合物,其由如下重量份的组分组成:对比例2的大鲵胶原蛋白肽4份,维生素C1份。
实验例1大鲵胶原蛋白肽的质量检测
分别对实施例1和2以及对比例1和2的大鲵胶原蛋白肽进行质量分析。大鲵胶原蛋白肽的平均分子量、蛋白质含量和灰分含量检测结果如表1所示,结果表明,实施例1和2的大鲵胶原蛋白肽的平均分子量均在1000Da以下,蛋白质含量均在95%以上,灰分含量均在2%以下。
表1大鲵胶原蛋白肽的质量检测
检测指标 | 实施例1 | 实施例2 | 对比例1 | 对比例2 |
平均分子量(DAL) | 720 | 960 | 1500 | 880 |
蛋白质(干基,%) | ≥95 | ≥95 | ≥95 | ≥95 |
灰分(%) | ≤2 | ≤2 | ≤2 | ≤2 |
实验例2大鲵胶原蛋白肽对皮肤细胞增殖的影响
对实施例1和2以及对比例1和2的大鲵胶原蛋白肽对人皮肤细胞的增殖活性的影响进行分析。以人皮肤成纤维细胞为实验对象,将细胞分别在DMEM培养基(对照组)、添加实施例1、实施例2、对比例1、对比例2的大鲵胶原蛋白肽的DMEM培养基中进行培养,大鲵胶原蛋白肽的添加量为25mg/ml培养基,培养48h后测定450nm处吸光值,计算细胞增殖活力。
细胞增殖活力的计算公式为:(OD样品-OD空白)/(OD对照-OD空白)×100%。
检测结果如表2所示,结果表明,添加实施例1和2的大鲵胶原蛋白肽的培养基培养的人皮肤细胞的增殖活力显著高于对照组以及对比例1和2。
表2细胞增殖活力检测
实施例1 | 实施例2 | 对比例1 | 对比例2 | |
人皮肤成纤维细胞 | 360% | 340% | 146% | 180% |
实验例3含大鲵胶原蛋白肽的组合物对皮肤增殖的影响
1、实验方法:实验动物选用10月龄清洁级昆明种小鼠,体重59g左右。36只小鼠分六组,单独饲养,并用剃毛器将小鼠背部毛发剔除干净。对照组小鼠投喂正常饲料,另外五组小鼠在均投喂正常饲料的基础上,分别用0.2g/kg/天的实施例1大鲵水解胶原蛋白肽(试验组1)、50mg/kg/天的维生素C(试验组2)、实施例3的组合物(试验组3,组合物用量为使得大鲵水解胶原蛋白肽0.2g/kg/天,维生素C 50mg/kg/天)、对比例3的组合物(试验组4,组合物用量为使得大鲵水解胶原蛋白肽0.2g/kg/天,维生素C 50mg/kg/天)、对比例4的组合物(试验组5,组合物用量为使得大鲵水解胶原蛋白肽0.2g/kg/天,维生素C50mg/kg/天)以正常饮水的方式喂养八周。
八周后所有组小鼠均从背部相同区域取7.5mm×7.5mm大小的皮肤组织制作石蜡组织标本,并进行显微皮肤形态结构观察。取各组皮肤标本切片分别放入二甲苯进行15分钟脱蜡,重复两次后,再用酒精梯度脱蜡至水。后对标本进行HE染色,将标本切片放入苏木素中染色15分钟,并用蒸馏水冲洗5分钟,1%盐酸酒精液开始分化,约30秒钟,待切片变红后放入0.5%伊红酒精溶液3分钟。之后蒸馏水冲洗30秒,并用酒精梯度脱水,二甲苯分两次各浸泡3分钟,并用中性树胶封片。置于显微镜下观察组织形态学,着重观察表皮层与真皮层,并应用显微镜附带图像软件分析标本显微图像。显微镜为Leica DM3000,显微图像分析软件为Leica QWin V3。
2、实验结果:HE染色后,各组小鼠皮肤组织显微结构数据分析结果如表3所示。
表3小鼠皮层厚度结果
由小鼠皮肤组织显微结构对比结果可以看出,经过八周时间,在饲喂实施例1的大鲵胶原蛋白肽后,小鼠的表皮层和真皮层平均有5%的厚度增加。与仅饲喂大鲵胶原蛋白肽的小鼠相比,在饲喂大鲵胶原蛋白肽的同时配合饲喂维生素C后,小鼠的各皮肤组织有更加显著的厚度增加。对比正常饲料饲养的小鼠,同时饲喂大鲵胶原蛋白肽和维生素C的小鼠表皮层厚度平均增加了20%,真皮层厚度平均增加了16%。结果表明,大鲵胶原蛋白肽和维生素C能够协同作用,能够有效促进小鼠皮肤增殖,可用于改善由于氧化、辐射、年龄等原因所造成的皮肤萎缩等问题。
虽然,上文中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述,但在本发明基础上,可以对之作一些修改或改进,这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此,在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进,均属于本发明要求保护的范围。
Claims (15)
1.一种大鲵胶原蛋白肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:将去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉依次经碱性蛋白酶、中性蛋白酶和风味蛋白酶的三段式酶解制得酶解物;
所述三段式酶解的方法如下:
在酶解罐中投入经预处理的大鲵鱼原料,按照料液比为1g:1.5 ml加入去离子水,开启搅拌,升温至100℃,微沸保温60min;
降温至60℃,用氢氧化钙调节pH 8.0,按物料质量的3‰加入碱性蛋白酶,酶解1 h,酶解过程中维持pH 8.0-9.0;
降温至50℃,在自然pH下,添加物料质量3‰的中性蛋白酶,继续酶解2 h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0;
添加物料质量5‰的风味蛋白酶,在50℃继续酶解1 h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0,酶解结束后用磷酸调节pH至中性;
或者,所述三段式酶解的方法如下:
在酶解罐中投入经预处理的大鲵鱼原料,按照料液比为1g:1.5ml加入去离子水,开启搅拌,升温至100℃,微沸保温60min;
降温至60℃,用氢氧化钙调节pH 6.5,按物料质量的1‰加入碱性蛋白酶,酶解1.5h,酶解过程中维持pH 6.0-9.0;
降温至50℃,在自然pH下,添加物料质量1‰的中性蛋白酶,继续酶解2.5 h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0;
添加物料质量1‰的风味蛋白酶,在50℃继续酶解3 h,酶解过程中维持pH 6.0-8.0,酶解结束后用磷酸调节pH至中性。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,在所述碱性蛋白酶的酶解前,将去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉在90~100℃处理0.5~1 h。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,将去除脂肪的大鲵皮和/或肉经0.05~0.1 M的碱液浸泡3.5~4.5 h,去除非胶原蛋白,得到去除脂肪和非胶原蛋白的大鲵皮和/或肉。
4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,将所述酶解物经灭酶处理后,再依次经初滤、活性炭吸附、精滤和干燥处理;
所述初滤包括以珍珠岩为过滤助剂的板框过滤机过滤;
所述精滤依次包括以孔体积为0.3~1.0cm3/g,孔径为1~2μm的硅藻土过滤器过滤、以0.4~0.8μm过滤精度的纸板过滤机过滤、以0.22/0.22μm聚丙烯微孔折叠滤芯过滤。
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述初滤中,所述珍珠岩的用量为与所述酶解物的质量比为0.1%~2%,所述板框过滤机的压力为1.5~2Mpa。
6.一种大鲵胶原蛋白肽,其特征在于,由权利要求1~5任一项所述的制备方法制备得到。
7.权利要求6所述的大鲵胶原蛋白肽在制备具有如下任一功能的产品中的应用:
(1)提高皮肤细胞活力;
(2)促进皮肤细胞增殖;
(3)缓解皮肤衰老或萎缩。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述产品为药品或化妆品。
9.一种促进皮肤细胞增殖的组合物,其特征在于,包含权利要求6所述的大鲵胶原蛋白肽,还包含选自维生素C、富含维生素C的动物或植物提取物中的一种或多种;
所述组合物中,大鲵胶原蛋白肽与维生素C的质量比为0.5~6:1。
10.根据权利要求9所述的组合物,其特征在于,所述组合物包含如下重量份的组分:大鲵胶原蛋白肽,10~50份;维生素C或富含维生素C的动物或植物提取物,以维生素C计 2~20份;透明质酸,0.1~2份;葡萄籽提取物,0.5~2.5份;黑生姜提取物,0.2~3份。
11.根据权利要求10所述的组合物,其特征在于,所述组合物包含如下重量份的组分:大鲵胶原蛋白肽,10~50份;维生素C或富含维生素C的动物或植物提取物,以维生素C计 2~20份;透明质酸,0.1~2份;葡萄籽提取物,0.5~2.5份;黑生姜提取物,0.2~3份;生物素,0.0003~0.001份;植物性膳食纤维,1~20份;牛磺酸,1~15份;叶酸,0.0005~0.004份;辅酶Q10,0.2~0.5份;β-烟酰胺单核苷酸,0.5-4份;锰0.005-0.05份;铁0.01~0.15份;硒0.0001~0.0011份;铜0.0005-0.015份。
12.一种含大鲵胶原蛋白肽制剂,其特征在于,其以权利要求9~11任一项所述的组合物为活性成分。
13.根据权利要求12所述的制剂,其特征在于,所述制剂为口服制剂,所述制剂还包含调味辅料,所述调味辅料包含如下重量份的组分:酸味调节剂2~7份,甜味调节剂0.1~50份,天然调味剂0.5~3份。
14.根据权利要求13所述的制剂,其特征在于,所述酸味调味剂为选自柠檬酸和苹果酸中的一种或多种;所述甜味调味剂为选自木糖醇、甜菊糖和赤藓糖醇中的一种或多种;所述天然调味剂为选自鲜花精油、水果精油、水果香精和浓缩果汁中的一种或多种。
15.权利要求12~14任一项所述的制剂的制备方法,其特征在于,所述制剂为液体制剂,所述制备方法包括:将各组分混匀后,再采用聚醚砜滤膜和/或常温纳滤膜过滤。
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102533914A (zh) * | 2011-12-27 | 2012-07-04 | 广州合诚实业有限公司 | 一种高纯度无腥异味的鱼胶原蛋白肽及其制备方法 |
CN103609832A (zh) * | 2013-11-27 | 2014-03-05 | 张家界金鲵生物工程股份有限公司 | 一种大鲵活性蛋白粉及其制备方法 |
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WO2019072219A1 (zh) * | 2017-10-11 | 2019-04-18 | 倪少伟 | 基于结缔组织的蛋白肽制备方法与所制备蛋白肽及其用途 |
CN110623860A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-12-31 | 深圳润朗医药科技有限公司 | 有效促进纤维原细胞增殖的大鲵活性肽与玻尿酸组合物 |
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN102533914A (zh) * | 2011-12-27 | 2012-07-04 | 广州合诚实业有限公司 | 一种高纯度无腥异味的鱼胶原蛋白肽及其制备方法 |
CN103609832A (zh) * | 2013-11-27 | 2014-03-05 | 张家界金鲵生物工程股份有限公司 | 一种大鲵活性蛋白粉及其制备方法 |
CN105018555A (zh) * | 2015-08-06 | 2015-11-04 | 重庆馗丰食品有限公司 | 一种大鲵皮胶原蛋白肽的制备方法 |
CN107259582A (zh) * | 2017-07-06 | 2017-10-20 | 长沙爱扬医药科技有限公司 | 大鲵蛋白肽粉产品及其制备方法 |
WO2019072219A1 (zh) * | 2017-10-11 | 2019-04-18 | 倪少伟 | 基于结缔组织的蛋白肽制备方法与所制备蛋白肽及其用途 |
CN110623860A (zh) * | 2019-09-24 | 2019-12-31 | 深圳润朗医药科技有限公司 | 有效促进纤维原细胞增殖的大鲵活性肽与玻尿酸组合物 |
CN111172226A (zh) * | 2020-03-09 | 2020-05-19 | 中健智诊(重庆)生物研究院 | 用于肠道吸收的胶原蛋白肽及其提取方法和应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
"Nutritional and medicinal characteristics of Chinese giant salamander(Andrias davidianus) for applications in healthcare industry by artificial cultivation: A review";Dong He et al.;《Food Science and Human Wellness》;20180325;第7卷(第01期);全文 * |
"人工饲养大鲵皮胶原蛋白肽提取工艺研究";叶欣等;《肉类工业》;20141231(第4期);全文 * |
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