CN110964760A - 一种高产γ-氨基丁酸菌株的诱变选育方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种通过二次诱变选育高产γ‑氨基丁酸(γ‑aminobutyric acid，GABA)的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)的方法，包括短乳杆菌的常压室温等离子体诱变(ARTP)和高产菌株的筛选方法。本发明的特征是在前期经过多功能等离子体诱变系统(MPMS)(载体为氮气)诱变获得的高产菌种的基础上，通过ARTP(载体为氦气)再次进行诱变获得更高的γ‑氨基丁酸产量，并对此高产菌株进行了5L发酵罐放大实验，证明了二次ARTP的诱变方法，可以使菌株的目的产物的产量更高。本发明中菌株诱变方法比常规诱变方法效率高，筛选过程简单迅速，得到的诱变菌株γ‑氨基丁酸产量更高，得到的突变株最终产量为115.72g/L，比出发菌株提高9.80％，摩尔转化率为93.95％，比出发菌株提高3.93％，为产业化的提高提供了坚实的理论基础和数据参考。

Description

一种高产γ-氨基丁酸菌株的诱变选育方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，特别涉及ARTP诱变技术，是一种高产γ-氨基丁酸菌株的诱变选育方法。
背景技术
γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)是一种普遍存在于动植物和微生物体内的非蛋白质天然氨基酸。在哺乳动物体内GABA几乎只作用于神经系统，是中枢神经系统内最重要的抑制性氨基酸递质，大约有30％的中枢神经突触以它为介质。GABA具有多种生理功能，主要有调节血压与心率、改善肝脏、肾脏功能、抗衰老、调节激素分泌等，因此，它既可以作为一种药效良好的药物，又可以被视为具有保健功能的新型功能因子，广泛应用于食品和医疗卫生行业。
GABA的制备方法主要有三种，它们各有优缺点，分别是化学合成法、植物富集法和微生物发酵法。化学合成法成本高，副反应多，环境污染严重；植物富集发产量太低，不适合工业化生产；而微生物发酵法成本低，安全性高，环保，具有很好的开发前景，因此成为GABA生产的首选方法。微生物发酵法是以L-谷氨酸(L-Glu)或者其钠盐，还包括富含谷氨酸的其他物质为原料，利用微生物体内的谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase，GAD，EC4.1.1.15)将原料转化产生GABA。在早期的研究中，发酵法生产GABA以大肠杆菌为生产菌，然而若要进行食品开发，使用大肠杆菌无疑存在安全性方面的种种问题。短乳杆菌(Lactobacillus brevis)被美国FDA认为是“GRAS(generally recognized as safe)”级食品添加剂，而短乳杆菌早已被证实具有合成GABA的能力，但是菌株的产量一直限制GABA的发酵生产，因此获得一株高产GABA的菌株尤为重要。
常压室温等离子体诱变系统(atmospheric and room temperature plasma，ARTP)，能够在大气压下产生一些高活性粒子浓度的等离子体射流，温度在25～40℃之间，高浓度活性粒子能够作用于微生物的遗传物质，使其在短时间内产生突变。由于其设备简单，操作简易，能够在短时间内获得大量突变菌株，因此已成为获得高得率菌株的有效方法。本文以在MPMS诱变系统诱变短乳杆菌(Lactobacillus brevis)TCCC 13007的基础上，利用ARTP诱变系统进行再次诱变，筛选得到一株GABA产率高的突变株，为GABA的工业化生产提供了获得优良菌种的方法。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，在本发明人前期利用MPMS诱变短乳杆菌获得的GABA高产菌株的基础上再次进行ARTP诱变，获得更高的GABA产量。
本发明的另一个目的是提供一种利用等离子体处理短乳杆菌的方法以及高通量筛选高产菌株的方法
本发明的另一个目的是公开了采用短乳杆菌作为菌种使用发酵罐生产GABA的方法，它是在培养过程中分为两个不同的阶段，即细胞生长和转化，进而采取控制不同的pH和通氧量，并且补充底物谷氨酸钠，进而使产量达到最高。
本发明的技术方案如下：一种使用ARTP诱变筛选高产GABA的短乳杆菌突变株的方法，包括如下步骤：
1)菌体前培养：从平板挑取一环活化后的菌种接于液体种子培养基中，30℃静置培养8～10h，使菌体处于对数生长期。
2)菌悬液的制备：取1mL对数生长期菌液测其OD600nm，根据OD600nm与菌落数的大体关系估算菌体浓度，取1mL菌液12000r/min离心2min，收集菌体并用无菌生理盐水洗涤2～3次，将其稀释至106CFU/mL的菌悬液。
3)利用常压室温等离子体(ARTP)诱变系统对短乳杆菌进行诱变，参数设定为：输出功率120W，照射距离2mm，气体流速10L·min-1，样品量10μL，通入气体为氦气，处理时间分别为0s、10s、30s、50s、70s、90s、110s，对诱变后的菌株悬浮液进行稀释后，进行平板计数，确定致死率随诱变时间的变化数值关系。
4)以处理时间为90s利用ARTP进行诱变，将诱变过的载片置于装有1mL无菌生理盐水的1mL离心管中，用漩涡振荡仪进行振荡洗脱，制成菌悬液，稀释到1×10-4梯度后，取100μL均匀涂到CaCO3筛选培养基表面，30℃培养1d，挑选透明圈/菌落直径比较大的菌株。
5)将通过筛选平板得到的菌株通过试管发酵进一步筛选，将得到的产量高的菌株进行摇瓶发酵复筛，在30℃静置培养发酵12h后补加100～150g/L谷氨酸钠，继续发酵60h。
6)将复筛所得突变株连续10代传代培养，并将各代分别进行发酵培养，通过HPLC检测发酵液中GABA含量的变化，测定突变株的遗传稳定性。
7)利用5L发酵罐进行小规模放大培养生产GABA时，在发酵过程中分为两个不同的阶段，即细胞生长和转化，因此在这两个阶段控制不同的pH和通氧量，并且补充底物谷氨酸钠，进而使产量达到最高。培养温度为30℃，前8h通风2L/min，搅拌转速100r/min，后期兼性厌氧，关闭通风培养64h。在发酵过程中，控制底物谷氨酸钠浓度不低于10g/L，发酵液初始pH为6.0，前12h不控制pH，12h后控制pH为4.5。通过HPLC检测发酵液中的GABA含量。
附图说明
图1不同ARTP照射时间下的致死率曲线
图2突变株和出发菌株试管发酵培养72h GABA产量
图3出发菌株和突变株摇瓶发酵72h GABA的产量
图4突变株的遗传稳定性检测
图5出发菌株5L发酵罐放大实验
图6筛选得到的突变菌株5L发酵罐放大实验
具体实施方式
下面对本发明的实施例做详细说明，这里所述实施例的方案，不限制本发明，本领域的专业人员按照本发明的精神可以对其进行改进和变化，所述的这些改进和变化都应视为在本发明的范围内，本发明的范围和实质由权利要求来限定。
实施例1
利用常压室温等离子体诱变仪对短乳杆菌进行诱变，包括以下步骤：
(1)从平板挑取一环活化后的菌种接于装有40mL液体种子培养基的250mL三角瓶中，30℃静置培养8～10h，使菌体处于对数生长期。取1mL对数生长期菌液测其OD600nm，根据OD600nm及菌落数的大体关系估算菌体浓度，取1mL菌液12000r/min离心2min，收集菌体并用无菌生理盐水洗涤2～3次，将其稀释至106CFU/mL的菌悬液。
(2)吸取10μL菌液均匀涂在灭菌冷却后的载片上，以He为工作气体，射频功率为100W，照射距离2mm，气体流速10L·min-1，照射距离2mm，气体流速10L·min-1，样品量10μL，通入气体为氦气，诱变时间分别为0s、10s、30s、50s、70s、90s、110s。
(3)将诱变过的载片置于装有1mL无菌生理盐水的1mL离心管中，用漩涡振荡仪进行振荡洗脱，制成菌悬液，稀释到1×10-4梯度后，取100μL均匀涂到平板上，30℃培养1d，制作致死率曲线，确定致死率随诱变时间的变化数值关系。如图1所示，在处理时间在90s时以上，致死率达到了90％以上，由现代育种理论可知，菌体致死率在90％～95％时正突变率最高，因此选择90s为最佳诱变时间，致死率为92.94％。
Figure BSA0000171408780000031
实施例2
诱变后高产GABA的突变菌株的筛选
以处理时间为90s利用ARTP进行诱变，将诱变过的载片置于装有1mL无菌生理盐水的1mL离心管中，用漩涡振荡仪进行振荡洗脱，制成菌悬液，稀释到1×10-4梯度后，取100μL均匀涂到CaCO3筛选培养基表面，30℃培养1d，挑选透明圈/菌落直径比较大的菌株，转接到液体种子培养基中，30℃静置培养12h进行活化，于20％(V/V)甘油管中-20℃保存。
对从筛选平板上得到的菌株进行3轮活化，将活化后的菌液以10％(V/V)的接种量接种到装有5mL发酵培养基的试管中，30℃静置培养72h后，利用HPLC对发酵液中的GABA含量进行检测。由图2可以得到7株产量产量最高的突变株。
分别将产量最高的7株突变菌进行3轮活化，将活化后的菌液以10％的接种量接种到装有40mL发酵培养基的250mL三角瓶中，30℃静置培养发酵12h后补加100g/L谷氨酸钠，继续发酵60h后，利用HPLC对发酵液中的GABA含量进行检测。由图2知其中产量最高的两株菌为D1、G2，产量分别为59.41g/L、59.25g/L，分别比出发菌株产量提高11.1％、10.89％。
对产量最高的2株突变菌进行10次传代，以检测突变株的遗传稳定性，并且在每次传代后，对突变菌进行活化，将活化后的菌液以10％的接种量接种到装有40mL发酵培养基的250mL三角瓶中，30℃静置培养发酵12h后补加100g/L谷氨酸钠，继续发酵60h后，利用HPLC对发酵液中的GABA含量进行检测。由图3可知，得到的两株突变菌株连续传代10代以后产量均比较稳定，D1和G2的平均产量分别为56.56g/L和55.15g/L，分别比出发菌株产量提高9.02％和6.30％，因此选择产量最高且遗传稳定的突变株D1进行后续实验。
实施例3
利用5L发酵罐进行小规模放大培养生产GABA
以实施例2中最终得到的高产菌株进行5L发酵罐进行小规模放大培养，以未进行ARTP处理的出发菌株作为对照。培养温度30℃，前8h通风2L/min，搅拌转速100r/min，后期兼性厌氧，关闭通风培养64h。在发酵过程中，通过流加600g/L的谷氨酸钠，控制底物谷氨酸钠浓度不低于10g/L，发酵液初始pH为6.0，前12h不控制pH，12h后通过流加稀盐酸控制pH为4.5。在整个发酵过程中，每隔6h检测出发菌株与突变株的生长、消耗谷氨酸钠情况，从第30h起检测产酸情况。发酵结束后，用HPLC进行产量检测。
由图5和图6可知，相比较出发菌株，在5L发酵罐中，突变株D1表现出良好的GABA生产性能以及更快的生长速度，且底物谷氨酸钠的消耗速度也更快。在发酵培养72h后，突变株D1的最终产量为115.72g/L，比出发菌株提高9.80％，摩尔转化率为93.95％，比出发菌株提高3.93％。

Claims (8)

1.一种利用常压室温等离子体制备高产γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid，GABA)的短乳杆菌(Lactobacillus brevis)的方法，其特征在于按如下步骤进行：
(1)菌体前培养；
(2)菌悬液的制备；
(3)利用常压室温等离子体(ARTP)诱变系统对短乳杆菌进行诱变，将诱变后的菌株悬浮液进行稀释后，进行平板计数，确定致死率随诱变时间的变化数值关系；
(4)以适当时间诱变后，将得到的菌液涂布于碳酸钙筛选培养基上，在正常条件下进行培养，同时以未处理的菌液为对照；
(5)待诱变菌落长出后观察透明圈大小，挑取菌落小透明圈大的很可能为高产GABA的菌株进行初筛；缩小筛选范围后，进行试管发酵和摇瓶发酵复筛，进一步筛选GABA高产菌株；
(6)将复筛所得诱变株连续10代传代培养，测定突变株的遗传稳定性；
(7)在对筛选得到的突变株进行摇瓶发酵验证后，利用5L发酵罐进行小规模放大培养生产GABA，验证高产菌株的产量。
2.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(1)中菌体前培养为：从平板挑取一环活化后的菌种接于液体种子培养基中，30℃静置培养8～10h，使菌体处于对数生长期，其中的种子培养基为：蛋白胨5～15g/L，酵母浸粉2～10g/L，葡萄糖5～15g/L，乙酸钠1～5g/L，柠檬酸铵1～5g/L，硫酸锰0.01～0.05g/L，硫酸镁0.1～0.5g/L，吐温-80 1～5mL，pH自然。
3.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(2)中菌悬液的制备为：取1mL对数生长期菌液测其OD600nm值，根据OD600nm值与菌落数的大体关系估算菌体浓度，取1mL菌液12000r/min离心2min，收集菌体并用无菌生理盐水洗涤2～3次，将其稀释至106CFU/mL的菌悬液。
4.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(3)中利用常压室温等离子体(ARTP)诱变系统的参数设定为：输出功率120W，照射距离2mm，气体流速10L·min-1，样品量10μL，通入气体为氦气，处理时间分别为0s、10s、30s、50s、70s、90s、110s。
5.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(4)中：以处理时间为90s利用ARTP进行诱变，将诱变过的载片置于装有1mL无菌生理盐水的1mL离心管中，用漩涡振荡仪进行振荡洗脱，制成菌悬液，稀释到1×10-4梯度后，取100μL均匀涂到碳酸钙筛选培养基表面，30℃培养1d，挑选透明圈/菌落直径比较大的菌株，其中碳酸钙筛选培养基为：葡萄糖5～15g/L，酵母浸粉5～20g/L，蛋白胨2～10g/L，硫酸铵1～5g/L，氯化钠0.1～0.5g/L，硫酸亚铁0.01～0.1g/L，硫酸镁0.1～0.5g/L，碳酸钙1～10g/L，谷氨酸钠10～100g/L，琼脂15～20g/L，pH自然。
6.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(5)中将通过筛选平板得到的菌株通过试管发酵进一步筛选，在30℃静置培养发酵72h后，通过高效液相色谱(highperformance liquid chromatography，HPLC)仪进行GABA产量检测，将得到的高产菌株进行摇瓶发酵复筛，在30℃静置培养发酵12h后补加80～150g/L谷氨酸钠，继续发酵60h。其中发酵培养基为蔗糖10～50g/L，酵母浸粉20～50g/L，谷氨酸钠10～100g/L，乙酸钠1～10g/L，磷酸氢二钾1～10g/L，硫酸镁0.1～0.5g/L，硫酸铵0.1～0.5g/L，柠檬酸1～10g/L，精氨酸0.01～0.1g/L，硫酸锌0.1～1g/L，维生素B1 1～10mg/L，维生素B5 1～10mg/L，维生素B61～10mg/L，pH4.5。
7.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(6)中将复筛所得突变株连续10代传代培养，并将各代分别进行发酵培养，通过HPLC检测发酵液中GABA含量的变化，测定突变株的遗传稳定性。
8.根据权利要求1的方法，其特征在于，所述步骤(7)中在利用5L发酵罐进行小规模放大培养生产GABA时，在发酵过程中分为两个不同的阶段，即细胞生长和转化，因此在这两个阶段控制不同的pH和通氧量，并且补充底物谷氨酸钠，进而使产量达到最高。其中培养温度为30℃，前8h通风1～3L/min，搅拌转速100r/min，后期兼性厌氧，关闭通风培养64h。在发酵过程中，控制底物谷氨酸钠浓度不低于10g/L，发酵液初始pH为6.0，前12h不控制pH，12h后控制pH为4.5。通过HPLC检测发酵液中的GABA含量。
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Cited By (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111560367A (zh) * 2020-05-25 2020-08-21 华东理工大学 一种高通量筛选高产槐糖脂菌株的方法
CN111778191A (zh) * 2020-07-17 2020-10-16 鲁东大学 短乳杆菌菌株及其培养方法和用途
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Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN111560367A (zh) * 2020-05-25 2020-08-21 华东理工大学 一种高通量筛选高产槐糖脂菌株的方法
CN111778191A (zh) * 2020-07-17 2020-10-16 鲁东大学 短乳杆菌菌株及其培养方法和用途
CN111778191B (zh) * 2020-07-17 2021-05-14 鲁东大学 短乳杆菌菌株及其培养方法和用途
CN112826076A (zh) * 2020-12-31 2021-05-25 国投中鲁果汁股份有限公司 健体型糖心苹果风味酵素

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