CN110934837B - 黄精多肽复合片及其制备方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种黄精多肽复合片，包括以下重量份原料：40～55份黄精多肽、20～30份卵清蛋白、7～15份酵母提取物、1～3份硬脂酸锌、10～20份麦芽糖醇。本发明还提供了上述黄精多肽复合片的制备方法。本发明通过特定蛋白酶酶解得到黄精多肽，再将卵清蛋白通过特定酶酶解得到依附于卵清蛋白上的糖苷链，将黄精多肽和糖苷链通过生物酶催化作用复合形成具有降血脂功效的黄精多肽复合片，由于多肽分子量小极容易被人体吸收，因此本发明提供的黄精多肽复合片的效果较好，另外通过设计特殊的片剂结构，使得片剂崩解速度加快，加上多肽易吸收，能迅速达到血药浓度。

Description

黄精多肽复合片及其制备方法
技术领域
本发明涉及。更具体地说，本发明涉及一种黄精多肽复合片及其制备方法。
背景技术
黄精又名：鸡头黄精、黄鸡菜、笔管菜、爪子参、老虎姜、鸡爪参，黄精为黄精属植物，根茎横走，圆柱状，结节膨大，叶轮生，无柄，为药食同源性植物，具有补脾、润肺生津的作用。然而市场上的黄精大多是炮制后的产品，一般采用煎煮的方法提取黄精中的药效成分，这种方法对药效成分中的植物蛋白提取能力有限，会造成大量药效成分的流失。而目前市场上常见的黄精产品主要是通过浸提制作出来的黄精饮片、黄精丸、黄精酒等，以黄精为主要原料制成的黄精多肽复合片及其加工工艺尚未见报道。
发明内容
本发明的一个目的是解决至少上述问题，并提供至少后面将说明的优点。
本发明还有一个目的是提供一种黄精多肽复合片及其制备方法，可以有效提取黄精中的药效成分，对治疗高血脂有较好效果。
为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种黄精多肽复合片，包括以下重量份原料：40～55份黄精多肽、20～30份卵清蛋白、7～15份酵母提取物、1～3份硬脂酸锌、10～20份麦芽糖醇。
优选的是，所述黄精多肽复合片包括以下重量份原料：48份黄精多肽、26份卵清蛋白、11份酵母提取物、2份硬脂酸锌、14份麦芽糖醇。
优选的是，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:45～50g/ml加入体积分数为40～50％的乙醇溶液，水浴加热回流提取35～45min，水浴温度为50～60℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压1.5～2.5MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取20～25min，超声频率为30～35kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液。
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为5～7，在50℃下进行保温酶解1～1.5h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解2～3h，最后升温至85～95℃，保持8～12min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:(1.3～1.6)，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:(3～4)；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为500～2000D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-15～-30℃，真空度为10～20Pa。
本发明还提供上述黄精多肽复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、将上述重量份的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为5～6h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至85～95℃，保持8～12min，进行高温灭酶；
S2、将上述重量份的黄精多肽加入S1制得的第三酶解液，再加入含1.75mg/ml糖链转移酶的PH缓冲溶液，调节PH值为6并进行水浴加热，水浴温度为35～40℃，水浴时长为2～3h，得复合液，将复合液通过低温真空喷雾干燥制得复合粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为0～10Pa，温度为60℃；
S3、将上述重量份的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与S2制得的复合粉混合均匀后用压片机制成黄精多肽复合片。
优选的是，含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
优选的是，S3中将酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与复合粉混合均匀后还包括：将40重量份蔗糖溶于120重量份去离子水中，搅拌均匀后加热至70～80℃维持2～3h，制得糖浆，将糖浆置于密闭容器中并通入CO2气体至密闭容器内压力为4～5MPa，维持40～60min后以8～10℃/min的降温速度将密闭容器内温度降至-10～0℃，保持20～30min，卸压至常压，制得糖块，将糖块破碎为粒径1～2mm的糖粒，再用压片机将糖粒压制成片芯，最后将酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇、复合粉混合后的混合粉体与片芯压合制成黄精多肽复合片；
其中，所述片芯包括圆柱状的芯部和同轴连接于所述芯部圆周面中心的环板状的边部，所述边部上沿周向均匀设置有多个通孔，所述混合粉体压制成环形块体且紧贴于所述片芯的边部和芯部的圆周面，所述片芯的边部两侧的环形块体间通过填充于多个通孔中由混合粉体压缩成的圆柱连接，且所述片芯的边部两侧的环形块体与所述片芯刚好组成圆柱形。
优选的是，S3后还采用喷雾包衣机在黄精多肽复合片表面喷覆糖衣膜。
本发明至少包括以下有益效果：本发明将黄精通过特定蛋白酶酶解得到黄精多肽，再将卵清蛋白通过特定酶酶解得到依附于卵清蛋白上的糖苷链，将黄精多肽和糖苷链通过生物酶催化作用复合形成具有降血脂功效的黄精多肽复合片，由于多肽分子量小极容易被人体吸收，因此本发明提供的黄精多肽复合片的药效较好，另外通过设计特殊的片剂结构，使其崩解速度加快，加上多肽易吸收，能迅速达到血药浓度。
本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。
附图说明
图1为本发明其中一实施例所述黄精复合片的侧面结构示意图；
图2为本发明其中一实施例压制所述黄精复合片的片芯模具的侧面结构示意图。
具体实施方式
下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。
需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得；在本发明的描述中，术语“横向”、“纵向”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，并不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
<实施例1>
一种黄精多肽复合片，包括以下原料：40g黄精多肽、20g卵清蛋白、7g酵母提取物、1g硬脂酸锌、10g麦芽糖醇。
其中，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:45g/ml加入体积分数为40％的乙醇溶液，水浴加热回流提取35min，水浴温度为50℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压1.5MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取20min，超声频率为30kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液。
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为5，在50℃下进行保温酶解1h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解2h，最后升温至85℃，保持8min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:1.3，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:3；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为500D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-30℃，真空度为10Pa。
所述黄精多肽复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、将上述重量的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为5h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至85℃，保持8min，进行高温灭酶；
S2、将上述重量的黄精多肽加入S1制得的第三酶解液，再加入含1.75mg/ml糖链转移酶的PH缓冲溶液，调节PH值为6并进行水浴加热，水浴温度为35℃，水浴时长为2h，得复合液，将复合液通过低温真空喷雾干燥制得复合粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为0Pa，温度为60℃；
S3、将上述重量的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与S2制得的复合粉混合均匀后用压片机制成每片重量为4g的黄精多肽复合片。
其中，含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
<实施例2>
一种黄精多肽复合片，包括以下原料：55g黄精多肽、30g卵清蛋白、15g酵母提取物、3g硬脂酸锌、20g麦芽糖醇。
其中，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:50g/ml加入体积分数为50％的乙醇溶液，水浴加热回流提取45min，水浴温度为60℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压2.5MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取25min，超声频率为35kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液。
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为7，在50℃下进行保温酶解1.5h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解3h，最后升温至95℃，保持12min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:1.6，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:4；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为2000D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-15℃，真空度为20Pa。
所述黄精多肽复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、将上述重量的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为6h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至95℃，保持12min，进行高温灭酶；
S2、将上述重量的黄精多肽加入S1制得的第三酶解液，再加入含1.75mg/ml糖链转移酶的PH缓冲溶液，调节PH值为6并进行水浴加热，水浴温度为40℃，水浴时长为3h，得复合液，将复合液通过低温真空喷雾干燥制得复合粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为10Pa，温度为60℃；
S3、将上述重量的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与S2制得的复合粉混合均匀后用压片机制成每片重量为4g的黄精多肽复合片。
其中，含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
<实施例3>
一种黄精多肽复合片，包括以下原料：48g黄精多肽、26g卵清蛋白、11g酵母提取物、2g硬脂酸锌、14g麦芽糖醇。
其中，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:47g/ml加入体积分数为45％的乙醇溶液，水浴加热回流提取40min，水浴温度为55℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压2MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取23min，超声频率为33kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液。
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为6，在50℃下进行保温酶解1.3h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解2.5h，最后升温至90℃，保持10min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:1.5，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:3.5；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为1500D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-25℃，真空度为15Pa。
所述黄精多肽复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、将上述重量的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为5.5h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至90℃，保持10min，进行高温灭酶；
S2、将上述重量的黄精多肽加入S1制得的第三酶解液，再加入含1.75mg/ml糖链转移酶的PH缓冲溶液，调节PH值为6并进行水浴加热，水浴温度为37℃，水浴时长为2.5h，得复合液，将复合液通过低温真空喷雾干燥制得复合粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为5Pa，温度为60℃；
S3、将上述重量的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与S2制得的复合粉混合均匀后用压片机制成每片重量为4g的黄精多肽复合片。
其中，含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
<实施例4>
一种黄精多肽复合片，包括以下原料：48g黄精多肽、26g卵清蛋白、11g酵母提取物、2g硬脂酸锌、14g麦芽糖醇。
其中，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:47g/ml加入体积分数为45％的乙醇溶液，水浴加热回流提取40min，水浴温度为55℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压2MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取23min，超声频率为33kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液。
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为6，在50℃下进行保温酶解1.3h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解2.5h，最后升温至90℃，保持10min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:1.5，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:3.5；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为1500D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-25℃，真空度为15Pa。
所述黄精多肽复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、将上述重量的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为5.5h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至90℃，保持10min，进行高温灭酶；
S2、将上述重量的黄精多肽加入S1制得的第三酶解液，再加入含1.75mg/ml糖链转移酶的PH缓冲溶液，调节PH值为6并进行水浴加热，水浴温度为37℃，水浴时长为2.5h，得复合液，将复合液通过低温真空喷雾干燥制得复合粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为5Pa，温度为60℃；
S3、将上述重量的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与S2制得的复合粉混合均匀制成混合粉体，将40重量份蔗糖溶于120重量份去离子水中，搅拌均匀后加热至70～80℃维持2～3h，制得糖浆，将糖浆置于密闭容器中并通入CO2气体至密闭容器内压力为4～5MPa，维持40～60min后以8～10℃/min的降温速度将密闭容器内温度降至-10～0℃，保持20～30min，卸压至常压，制得糖块，将糖块破碎为粒径1～2mm的糖粒，再用压片机将糖粒压制成每片2g的片芯，最后混合粉体与片芯压合制成每片6g的黄精多肽复合片；
其中，含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
如图1所示，所述片芯1包括圆柱状的芯部101和同轴连接于所述芯部圆周面中心的环板状的边部102，所述边部102上沿周向均匀设置有多个通孔，所述混合粉体压制成环形块体2且紧贴于所述片芯1的边部102和芯部101的圆周面，所述片芯1的边部102两侧的环形块体2间通过填充于多个通孔中由混合粉体压缩成的圆柱连接，且所述片芯1的边部102两侧的环形块体2与所述片芯1刚好组成圆柱形。
上述片芯1通过如图2所示的片芯模具压制成型，所述片芯模具包括环套3、上模4和下模5，所述上模4下表面中心设置有圆形的第一凹槽6，且在所述上模4的下表面沿所述第一凹槽6周向还均匀间隔的设置有多个沉孔7，所述下模5的上表面设置有与所述第一凹槽6位置相对，直径和深度相同的第二凹槽8，且在所述下模5的上表面沿所述第二凹槽8周向还均匀间隔的设置有多个导柱9，每根导柱9对应一个沉孔7，且导柱9的高度略小于所述沉孔7的深度，上模4与上模座固定，下模5与液压缸的活塞杆固定。使用时将制备好的糖粒导入到片芯模具内后，以50kN的压力合模。片芯1制好后再用常规的片剂模具在片芯1两面分别压制以混合粉体为原料的环形块体2，最终在制好的黄精多肽复合片表面喷覆糖衣膜。
<对比例1>
一种复合片，包括以下原料：48g黄精多肽、11g酵母提取物、2g硬脂酸锌、14g麦芽糖醇。
其中，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:47g/ml加入体积分数为45％的乙醇溶液，水浴加热回流提取40min，水浴温度为55℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压2MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取23min，超声频率为33kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液。
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为6，在50℃下进行保温酶解1.3h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解2.5h，最后升温至90℃，保持10min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:1.5，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:3.5；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为1500D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-25℃，真空度为15Pa。
所述复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、称取48g黄精多肽、11g酵母提取物、2g硬脂酸锌、14g麦芽糖醇混合均匀后用压片机制成每片重量为4g的复合片。
<对比例2>
一种复合片，包括以下原料：26g卵清蛋白、11g酵母提取物、2g硬脂酸锌、14g麦芽糖醇。
所述复合片的制备方法，包括以下步骤：
S1、将上述重量的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为5.5h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至90℃，保持10min，进行高温灭酶；
S2、将S1制得的第三酶解液通过低温真空喷雾干燥制得卵清蛋白酶解粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为5Pa，温度为60℃；
S3、将S1制得的卵清蛋白酶解粉与上述重量的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇混合均匀后用压片机制成每片重量为4g的复合片。
其中，含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
<降血脂试验>
实验动物取80只Wister大鼠，每只大鼠体重为160～190g，适应7d后，随机分组，分为空白对照组、模型组、阳性药组、实施例1实验组、实施例2实验组、实施例3实验组、实施例4实验组、对比例1实验组和对比例2实验组，每组10只。其中空白对照组给予普通饲料，其余组给予高脂饲料。将上述各组大鼠饲养两周后，空白对照组和模型组每天灌胃给予等量生理盐水，阳性药组每天灌胃给予辛伐他汀1mg/kg，实施例1实验组每天灌胃给予实施例1制备的黄精多肽复合片4g/kg，实施例2实验组每天灌胃给予实施例2制备的黄精多肽复合片4g/kg，实施例3实验组每天灌胃给予实施例3制备的黄精多肽复合片4g/kg，对比例1实验组每天灌胃给予对比例1制备的复合片4g/kg，对比例2实验组每天灌胃给予对比例2制备的复合片4g/kg，3天、6天、9天后分别不禁食眼眶取血，将血液以3000r/min离心处理10min，获得血清。在全自动生化分析仪上测定测定每组的血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量，结果见表1～3。
表1、3d后TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量
Figure BDA0002320363380000101
数据以Mean±SE表示，每组n＝10；##P<0.01，模型组与空白对照组相比；*P<0.05，**P<0.01，给药组与模型组相比。(下面的表格均以此表示)
表2、6d后TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量
Figure BDA0002320363380000102
Figure BDA0002320363380000111
表3、9d后TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量
Figure BDA0002320363380000112
从表1～3可以看出，模型组较空白对照组组TC、TG、LDL-C水平显著提高，HDL-C显著降低，提示高脂血症大鼠造模成功。本发明提供的实施例1～3给药后，可显著降低低TC、TG、LDLC水平，提高HDL-C水平，实验结果提示本发明提供的黄精多肽复合片具有明显的降血脂作用。而对比例1使用黄精多肽为原料制备的复合片，虽然也能在一定程度上降低血脂，但是药效明显不如实施例1～3提供的黄精多肽复合片，对比例2使用的卵清蛋白为原料制备的复合片，则完全不具备降血脂的功效。这说明黄精多肽和以卵清蛋白为原料提取的糖苷链配伍产生了协同增效作用。
<片剂崩解试验>
采用崩解试验，取实施例3和实施例4制备的黄精多肽复合片各6片，分别置于升降式崩解仪中采用检查法进行测试，由于本发明提供的片剂属于薄膜衣片，故在升降式崩解仪内采用体积分数为0.9％的盐酸溶液进行溶解，盐酸溶液温度为37±1℃，分别记录实施例3和实施例4制备的黄精多肽复合片水中完全崩解的时间，每一实施例的崩解时长取6个样品的平均值，结果见表4。
表4、完全崩解时长
实施例3崩解时长(min) 实施例4崩解时长(min)
1 15 11
2 16 10
3 14 10
4 15 12
5 15 11
6 14 11
平均时长 14.8 10.8
从表4不难看出，实施例3和实施例4虽然含有相同量的黄精多肽与以卵清蛋白提取出来的糖苷链制成的复合粉，但是实施例4提供的黄精多肽复合片的崩解时长更短，这说明实施例4提供的黄精多肽复合片的的结构更有利于片剂的崩解。
为了进一步说明实施例4的片剂结构有利于药物有效成分的崩解溶出，下面还是通过降血脂试验进行证明。实验动物取50只Wister大鼠，每只大鼠体重为160～190g，适应7d后，随机分组，分为空白对照组、模型组、阳性药组、实施例3实验组和实施例4实验组，每组10只。其中空白对照组给予普通饲料，其余组给予高脂饲料。将上述各组大鼠饲养两周，最后一次饲喂后，隔1h空白对照组和模型组灌胃给予等量生理盐水，阳性药组灌胃给予辛伐他汀1mg/kg，实施例3实验组灌胃给予实施例3制备的黄精多肽复合片4g/kg，实施例4实验组灌胃给予实施例4制备的黄精多肽复合片6g/kg，6h、12h、24h后分别不禁食眼眶取血，将血液以3000r/min离心处理10min，获得血清。在全自动生化分析仪上测定测定每组的血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量，结果见表5～7。
表5、6h后TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量
Figure BDA0002320363380000121
Figure BDA0002320363380000131
表6、12h后TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量
Figure BDA0002320363380000132
表7、24h后TC、TG、LDL-C和HDL-C的含量
Figure BDA0002320363380000133
由于实施例3和实施例4中混合粉体的量相同，因此，混合粉体的溶出量与吸收量间接反应在血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量上，溶出和吸收多，则血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量低，溶出和吸收少，则血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的含量高。从表5～7不难看出，模型组较空白对照组组TC、TG、LDL-C水平显著提高，HDL-C显著降低，提示高脂血症大鼠造模成功。给药6h后，实施例4实验组的TC、TG、LDL-C含量低于实施例3实验组的，HDL-C含量高于实施例3实验组的，同时随着时间延长，虽然大鼠体内的TC、TG、LDL-C含量又开始上升，HDL-C含量又开始下降，但是实施例4实验组的数据始终优于实施例3实验组的，这说明，同样的混合粉体的量，实施例4实验组的崩解后溶出量以及血药浓度均高于实施例3实验组的。
尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (4)

1.一种黄精多肽复合片，其特征在于，包括以下重量份原料：40～55份黄精多肽、20～30份卵清蛋白、7～15份酵母提取物、1～3份硬脂酸锌、10～20份麦芽糖醇；
其中，所述黄精多肽的制备方法包括：
步骤一、将黄精切片干燥后制成粉末，按料液比为1:45～50g/ml加入体积分数为40～50％的乙醇溶液，水浴加热回流提取35～45min，水浴温度为50～60℃，再将乙醇溶液过滤得滤液和滤渣，将滤渣加入到由CO2和乙醇组成的膨胀溶剂中，加压1.5～2.5MPa形成膨胀体系，在室温下超声提取20～25min，超声频率为30～35kHz，提取完后卸压，过滤，得提取液，将滤液和提取液合并，再进行减压旋蒸以排出乙醇，得原液；
步骤二、向原液中加入纤维素酶和复合蛋白酶，搅拌均匀后调节pH值为5～7，在50℃下进行保温酶解1～1.5h，再加入葡聚糖酶和内切酶，保温酶解2～3h，最后升温至85～95℃，保持8～12min，进行高温灭酶，得第一酶解液，其中，纤维素酶和复合蛋白酶的质量比为1:(1.3～1.6)，葡聚糖酶和内切酶的质量比为1:(3～4)；
步骤三、将酶解液通过截留分子量为500～2000D半透膜，再进行真空冷冻干燥，真空冷冻干燥的温度为-15～-30℃，真空度为10～20Pa；
其中，黄精多肽复合片的制备方法包括以下步骤：
S1、将上述重量份的卵清蛋白加入含2mg/ml胰蛋白酶的PH缓冲溶液进行初次酶解，得第二酶解液，初次酶解温度控制在37℃，初次酶解时长为5～6h，卵清蛋白和含胰蛋白酶的PH缓冲溶液的料液比为1:40g/ml，再向第二酶解液中加入含5mg/ml内切糖苷酶的PH缓冲溶液进行二次酶解，得第三酶解液，二次酶解温度控制在37℃，二次酶解时长为50min，第二酶解液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液的体积比为1:1，将第三酶解液升温至85～95℃，保持8～12min，进行高温灭酶；
S2、将上述重量份的黄精多肽加入S1制得的第三酶解液，再加入含1.75mg/ml糖链转移酶的PH缓冲溶液，调节PH值为6并进行水浴加热，水浴温度为35～40℃，水浴时长为2～3h，得复合液，将复合液通过低温真空喷雾干燥制得复合粉，低温真空喷雾干燥的进料速度为700ml/h，真空度为0～10Pa，温度为60℃；
S3、将上述重量份的酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与S2制得的复合粉混合均匀后用压片机制成黄精多肽复合片；
含胰蛋白酶的PH缓冲溶液和含内切糖苷酶的PH缓冲溶液均为磷酸缓冲液，PH值为5.8，浓度为0.1M。
2.如权利要求1所述的黄精多肽复合片，其特征在于，包括以下重量份原料：48份黄精多肽、26份卵清蛋白、11份酵母提取物、2份硬脂酸锌、14份麦芽糖醇。
3.如权利要求1所述的黄精多肽复合片的制备方法，其特征在于，S3中将酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇与复合粉混合均匀后还包括：将40重量份蔗糖溶于120重量份去离子水中，搅拌均匀后加热至70～80℃维持2～3h，制得糖浆，将糖浆置于密闭容器中并通入CO2气体至密闭容器内压力为4～5MPa，维持40～60min后以8～10℃/min的降温速度将密闭容器内温度降至-10～0℃，保持20～30min，卸压至常压，制得糖块，将糖块破碎为粒径1～2mm的糖粒，再用压片机将糖粒压制成片芯，最后将酵母提取物、硬脂酸锌、麦芽糖醇、复合粉混合后的混合粉体与片芯压合制成黄精多肽复合片；
其中，所述片芯包括圆柱状的芯部和同轴连接于所述芯部圆周面中心的环板状的边部，所述边部上沿周向均匀设置有多个通孔，所述混合粉体压制成环形块体且紧贴于所述片芯的边部和芯部的圆周面，所述片芯的边部两侧的环形块体间通过填充于多个通孔中由混合粉体压缩成的圆柱连接，且所述片芯的边部两侧的环形块体与所述片芯刚好组成圆柱形。
4.如权利要求1所述的黄精多肽复合片的制备方法，其特征在于，S3后还采用喷雾包衣机在黄精多肽复合片表面喷覆糖衣膜。
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