CN110885771A - 用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂 - Google Patents

用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂 Download PDF

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Abstract

本申请公开了一种用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，包括：解淀粉芽胞杆菌、荧光假单胞菌和短小芽孢杆菌，其中，所述解淀粉芽胞杆菌为保藏编号为CGMCC No.6598的菌株。该菌剂能改善对长期植烟土壤的酸化、有机质含量；同时能高效的发挥作用改善土壤环境。

Description

用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂
技术领域
本申请涉及一种用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，属于 生物菌剂配方领域。
背景技术
一段时间种植单一品种植物，土壤易出现酸化、营养失衡、微生物失 调、保水保肥能力下降、连作障碍土传病害严重等一系列问题。如何消除 上述问题，保证土壤使用的稳定性和重复性是一个需要解决的技术问题。
对于常年连续种植烟叶植物的土壤，易出现土壤酸化、有机质含量低、 问题；现有生物菌剂无法有效高效改变土壤存在的上述问题。
发明内容
本申请提供了一种用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，该 菌剂用于解决上述技术问题。
本申请的提供了一种用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂， 包括：解淀粉芽胞杆菌、荧光假单胞菌和短小芽孢杆菌，其中，解淀粉芽 胞杆菌(拉丁名：Bacillusamyloliquefaciens)为保藏编号为CGMCC No.6598 的菌株。
优选地，荧光假单胞菌(拉丁名：Pseudomonas fluorescens)为保藏 编号为CGMCCNo.6597的菌株。
优选地，短小芽孢杆菌(拉丁名：Bacillus pumilus)为保藏编号为 CGMCCNo.6595的菌株。
优选地，由解淀粉芽胞杆菌、荧光假单胞菌和短小芽孢杆菌组成。
优选地，包含：解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂 10～50重量份；荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂15～50重量 份；短小芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂10～30重量份。
优选地，包含：解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂 20～50重量份；荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂15～30重量 份；短小芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂10～20重量份。
优选地，包含：解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂20～30 重量份；荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂25～40重量份；短小 芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂20～30重量份。
优选地，包含：解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂10～20 重量份；荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂30～50重量份；短小 芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂20～30重量份。
本申请能产生的有益效果包括：
1)本申请所提供的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，在 烟株的后期生长中发挥明显的增收作用，能有效提高施用土壤中烟株的株 高、有效叶片数、叶长、茎围、鲜重和干重，尤其是株高、有效叶片数、 叶长、单株鲜重与干重增长效果明显。改善对长期植烟土壤的酸化、有机 质含量；同时能高效的发挥作用改善土壤环境。
2)本申请所提供的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，该 菌剂能提高土壤微生物数量，有利于土壤有机质的分解和腐殖质的形成， 处理后土壤的真菌/细菌比得到明显提高，能提高土壤肥力及活性。采用该 菌剂后，土壤中放线菌数量得到有效增加，有利于改善土壤情况；该菌剂 可有效降低酚酸类物质含量，提高土壤活性。
生物保藏说明：
生物材料：菌株KMXU1，建议分类命名为：解淀粉芽胞杆菌(拉丁 名：Bacillusamyloliquefaciens)，于2012年09月21日保藏于中国微生物 菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为：北京市朝 阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.6598。
生物材料：菌株KMXU22，建议分类命名为：荧光假单胞菌(拉丁 名：Pseudomonasfluorescens)，于2012年09月21日保藏于中国微生 物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为：北京 市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为 CGMCC No.6597。
生物材料：菌株KMXU56，建议分类命名为：短小芽孢杆菌(拉丁名： Bacilluspumilus)，于2012年09月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理 委员会普通微生物中心(CGMCC)，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路 1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC No.6595。
具体实施方式
下面结合实施例详述本申请，但本申请并不局限于这些实施例。
实施例
以下实施例中所用试剂及菌种，如无特殊说明均为通过商业途径获取。
菌株KMXU1：从云南省曲靖市富源县蓝莓种植区蓝莓根际土壤中分离得到 KMXU1，对其鉴定结果表明该细菌属于解淀粉芽孢杆菌，该菌株名为解淀粉芽孢杆菌 (Bacillusamyloliquefaciens)KMXU1。
该菌株已经保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地址：中国.北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2012年9月21；保藏号：CGMCC NO. 6598。
平板拮抗试验筛选：按照方中达所著《植病研究方法》中的平板对持培养试验方法，对KMXU1菌对真菌性的抑制效果进行评价，灭菌蒸馏水对照处理组病菌菌丝长 满平板时统计结果如下，KMXU1对植物病原真菌(如：烟草镰刀型枯萎病菌)生长抑 制率为86.67～90.00％(表1所示)。
表1KMXU1对蓝莓枯萎病菌及相关病菌的抑制作用
Figure BDA0002285522200000031
由表1可知，说明KMXU1菌株对植物病原真菌具有显著的抑制作 用。
本发明的菌体特征及菌落特征：菌体呈短杆状，染色均匀，具运动性， 兼性厌氧，可形成内生芽孢，芽孢囊膨大，呈椭圆形，游离芽孢表面着色 弱，革兰氏染色阳性。在LB培养基上呈白色不透明菌落，表面粗糙，菌 落边缘不规则，在多种培养基上均不产色素。
菌株KMXU22：从健康魔芋植株中分离得到了一株具有防治细菌性病 害的菌株KMXU22，对其鉴定结果表明该细菌属于荧光假单孢菌，该菌株 命名为荧光假单孢菌(Psdeuomnoda fluorescens)KMXU22。
该菌株已经保存在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；地 址：中国.北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2012年9月21 日；保藏号为CGMCCNO.6597。
平板拮抗试验筛选：采用打孔法对细菌性病原菌的抑制效果进行评价。 将细菌性植物病原菌悬液均匀涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上(牛肉膏 3.0g，NaCl 5.0g，蛋白胨10.0g，水1000ml，琼脂10.0g，pH7.0，下同)，用 无菌打孔器均匀打4个6mm孔，向孔内加入50μl的KMXU22发酵液。 32℃培养一天后，抑菌圈直径平均达到30.2mm。说明KMXU22菌株对细菌性植物病原菌具有显著的抑制作用。
CGMCC NO.6597菌株的菌体特征及菌落特征：菌株为杆状，大小 为0.4μm～0.7μm×1.0μm～1.2μm，革兰氏染色阴性，无芽孢，单极生鞭毛， 能运动。在KB培养基上培养24h后形成1.2mm菌落，菌落产生橙色或褐 黄色素，圆形，表面凸起，光滑，较粘稠，易挑起，边缘整齐；LB培养基 配方为：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L，酵母提取物(Yeast extract)5g/L，氯化钠(NaCl)5g/L，pH7.0，琼脂17g/L。
菌株KMXU56：菌株KMXU56是从采自昆明神瑞农业有限公司堆肥 发酵车间腐熟的水葫芦堆肥样品中分离筛选得到的一株具有较好的分解 纤维素能力，能够在中高温范围(40℃～70℃)条件下生存的短小芽孢杆菌 菌株。
该菌株已于2012年9月21日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员 会普通微生物中心(简称CGMCC，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院 3号，中国科学院微生物研究所，邮编100101)，分类命名为短小芽孢杆 菌(Bacillus pumilus)，保藏号CGMCC No.6595。
短小芽孢杆菌KMXU56的分离与纯化筛选：称取堆肥发酵车间的水 葫芦渣堆肥腐熟的样品有机肥0.5g,加入20mL无菌水,混匀，使样品悬 浮,取悬浮液1mL接种到含100mL液体种子培养基的250mL摇瓶 中,45℃、180r/min培养5d。取1mL培养液梯度稀释至102、104、106、 108涂布于固体培养基上47℃培养2d。挑取平板上菌落饱满、透明圈明 显的单个菌落接种于液体培养基中,47℃、180r/min再培养2d。重复液 体培养和固体平板分离3次)，挑取生长旺盛的单菌落，在细菌培养基上， 反复划线分离纯化3次，再将形态一致的菌落制片，进行简单染色，在油 镜下观察菌体形态，多视野下观察菌体细胞形态，确认菌体形态一致后， 接种至细菌斜面培养至丰厚，在4℃下保存，备用。
将初筛得到的单菌株进行纤维素分解鉴定和不同温度活性实验，最终 筛选出一株在40℃～70℃生存生长，并有效分解纤维素的菌株KMXU56。
菌株KMXU56的鉴定筛选：生理生化特征:菌株的生理和生化特征 实验测定方法及鉴定，革兰氏染色结果表明,菌株KMXU56为革兰氏阳 性。菌株KMXU56知接触酶、葡萄糖产酸、淀粉水解试验、丙二酸盐利 用、硝酸盐还原、柠檬酸盐利用均为阳性；葡萄糖产气、甲基红实验、V- P测定、吲哚反应、H2S实验均为阴性；根据《伯杰细菌鉴定手册》,其 特征与短小芽孢杆菌(Bacillus pumilus)特性相吻合。菌株KMXU56的 16S rRNA基因序列分析采用PCR技术,成功扩增出菌株KMXU56的 16SrRNA基因,然后克隆和测序。测定的序列长度为1458bp，获得的16S rRNA基因序列通过GENBANK数据库 (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/genbank/)进行比对，结果显示相似性在99％ 以上的菌株均为短小芽孢杆菌(Bacilluspumilus)的菌株，把该菌株编号 命名为KMXU56，并于2012年9月21日保藏在中国微生物菌种保藏管 理委员会普通微生物中心(地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中 国科学院微生物研究所，邮编100101)保藏，分类命名为短小芽孢杆菌Bacillus pumilus，保藏号CGMCC No.6595。
短小芽孢杆菌KMXU56分解纤维素活性测定筛选：将实菌株短小芽 孢杆菌KMXU56菌株在无菌环境中接种至LB培养基(胰蛋白胨10g/L， 酵母萃取物5g/L，NaCl 10g/L,pH7.0)上，在37℃下培活化养3天，然后 在无菌环境中，用接种针挑取一环KMXU56，接种至装有600ml已灭菌 的LB培养基中，在180rpm，37℃下振荡培养3天，得发酵液。发酵液经4000r/min离心10min,上清液作为粗酶液。用0.5mL适当稀释的酶液 于70℃恒温水浴预热2min后,加入1.5mL用醋酸缓冲液pH 4.8配制 的1％羧甲基纤维素钠溶液,70℃恒温水浴酶解30min,加入1mL浓度为 1mol/L的氢氧化钠摇匀以终止反应。然后加入2mL的DNS于沸水浴中5min,用流动的冷水终止反应,冷却后在540nm下测定其吸光值,并 对照标准曲线后测算酶活力。结果显示产酶的菌株KMXU56所产生的纤 维素酶40℃～70℃下,相对酶活力较高,达到95％～89％。在此温度范围之 外,相对酶活力较低。
菌株KMXU56具有如下特性：KMXU56菌株菌体呈杆状，圆末端， 单个或呈短链排列，1.2～1.5×2.0～4.0微米。能运动，革兰氏阳性，芽孢 1.0～1.2×1.5～2.0微米，椭圆形，中生或次端生。该菌能水解淀粉，降解 甘露聚糖、木聚糖、纤维素。
实施例1～5生物菌剂1～5的制备
解淀粉芽胞杆菌、荧光假单胞菌、短小芽孢杆菌的菌株分别按以下步 骤制得生防菌剂：
a.将菌株移植到含有LB培养基的试管进行一环活化，32℃培养48 小时；
LB液体培养基的配方为：胰蛋白胨(Tryptone)10g/L，酵母提取物 (Yeastextract)5g/L，氯化钠(NaCl)5g/L，pH7.0；
b.取一环活化后的菌苔移入用1000ml锥形瓶装的600ml所述LB培养 液中，在120转/min、32℃下培养72小时，获得发酵菌液；
c.将发酵菌液按接种量1：200倍的比例接种于所述LB培养液中，并 在种子罐中进行发酵培养，种子罐的温度为32℃，发酵18小时后获得发 酵种子菌种；
d.将发酵种子菌种按接种量1：20倍的比例接种于所述LB培养液中， 在发酵罐中32℃下进行发酵培养，接种发酵菌液菌体5小时后，每隔2小 时对发酵罐进行发酵质量检测，观察含菌量、测定发酵液的酸碱度，发酵 72小时，当菌含量大于1×1010～1×1011CFU/ml以上，酸碱度为7.0或7.6 时，储存作为生防菌剂。
将各菌株的生防菌剂按表2所列组成，执行GB20287-2006标准制成 液体或粉剂的混合菌剂，得到生物菌剂样品1～5。
表2
Figure BDA0002285522200000071
实施例6生物菌剂1～3的土壤实验
使用实施例1～3的方法所生产的复合微生物菌剂进行田间试验，试验 地点:云南省临沧市耿马县县勐撒镇云烟87烤烟的植烟区(99°23'22”E, 23°33'40”N)。
试验种植品种是烤烟，供试试验田为连续单一种植烤烟12年，土壤 平均pH值为5.30，土壤有机质含量高于30g/kg，烤烟发病率较高的地块， 且经过有机肥施撒。
试验设置4个处理，分别为：
1、实施例1所得菌剂1(50倍液蘸根/灌根)；
2、实施例2所得菌剂2(50倍液蘸根/灌根)；
3、实施例3所得菌剂3(50倍液蘸根/灌根)；
4、对照(同期等量清水蘸根/灌根)
施用方法：作物全生育期内使用1次：烤烟移栽时用该菌剂1︰50 倍液蘸根，边蘸根边移栽，作物移栽当天内灌根，每株用量为400毫 升。在常规栽培管理措施如耕作、排灌、密度、防治病虫害等一致的前 提下，采用随机区组排列试验设计。
烟株农艺性状测量方法：分别于移栽后30天和打顶后采烤前，选定 各处理代表性烟株3棵，测定不同处理烤烟株高、茎围、有效叶片数、叶 面积指数等农艺性状指标。
烤烟生物量测量方法：分别于移栽后30天和打顶后采烤前，选定各 处理代表性烟株3棵，挖掘法测定烟株地上部(茎、叶)、地下部(根)生 物量鲜重和干重
根际土壤酚酸测定方法：
1样品处理
1.1混合标准品溶液制备
分别精密称定标准品阔马酸0.0102g，对羟基苯甲酸0.0101g，香草酸 0.0102g，丁香酸0.0102g，4-香豆酸0.0102g，阿魏酸0.0102g，用99.9％的 色谱级甲醇精确定容到100mL，配制为100ppm浓度的混合标液，4℃避 光保存，待用。
1.2土壤样品前处理
供试根际土壤风干，除去须根等杂物，过40目筛，称取50g置于250ml 具塞三角瓶中，加入150ml 2molL-1NaOH，120rmin-1振荡提取3h，静置 3h，用滤纸过滤。取上清液用5molL-l HCl调至pH为2.5。然后用乙酸乙 酯萃取三次，合并乙酸乙酯萃取液，45℃蒸干，残渣用5ml色谱纯甲醇 溶解，4℃避光保存。过0.22μm滤膜，待测。
2高效液相色谱条件
色谱柱：ACQUITY UPLC BEH C18(2.1mm×50mm,1.7μm,美国 WATERS公司)；流动相A：0.3％乙酸水溶液；流动相B：甲醇；流速为 0.3ml/min；柱温35℃；进样量10μL。UPLC梯度洗脱程序参见表3。
表3UPLC梯度洗脱程序
Figure BDA0002285522200000081
Figure BDA0002285522200000091
3线性关系考察
取“1.3.1”中的混合对照品溶液过0.22μm滤膜，分别精密吸取0.5、 1、3、5、8、10μL注入HPLC色谱仪。以对照品的含量(μg)为横坐 标，以峰面积为纵坐标，制作标准曲线，R为0.999以上(表4)。
表4.酚酸类对照品的线性关系
酚酸类物质 线性方程 R
阔马酸 Y＝7.23×10<sup>5</sup>X+2.19×10<sup>4</sup> R＝0.9996
对羟基苯甲酸 Y＝7.68×10<sup>6</sup>X R＝1.0000
香草酸 Y＝3.86×10<sup>6</sup>X R＝1.0000
丁香酸 Y＝1.33×10<sup>6</sup>X R＝1.0000
4-香豆酸 Y＝9.51×10<sup>5</sup>X+5.25×10<sup>3</sup> R＝0.9992
阿魏酸 Y＝1.49×10<sup>6</sup>X R＝1.0000
肉桂酸 Y＝1.21×10<sup>6</sup>X R＝1.0000
4精密度及重复性试验
取同一供试对照品，连续5次进样，所得结果RSD值均小于1.8％， 表明仪器精密度良好。
5稳定性试验
取同一供试样品，分别于制样后0、4、8、12、16、24h后，按上述 色谱条件进样10μL，对阔马酸、对羟基苯甲酸、香草酸、丁香酸、4-香豆 酸和阿魏酸含量的RSD值均小于3％。
土壤微生物多样性测定方法：
1、细菌：采用牛肉膏蛋白胨培养基，平板稀释分离计数法，培养温度 27～30℃。
2、真菌：采用孟加拉红培养基，平板稀释分离计数法，培养温度27～ 30℃。
3、放线菌：采用高氏一号培养基，平板稀释分离计数法，培养温度 27～30℃。
对土壤处理样品中所含各类菌种数量进行琼脂培养基上平板接种培 养，长出菌落后计数。
菌落计数方法每毫升中菌数﹦平板上菌落数×稀释倍数/平板上加菌 液的量(ml)
结果：
1、烟株农艺性状
测量结果列于下表中：
表5.采烤前各处理农艺性状测定(2018年7月)
Figure BDA0002285522200000101
注：不同字母表示差异显著(P<0.05)
由上表可知，与对照相比，施用微生物菌剂后在采烤前已明显影响 烟株的生长，各微生物菌剂处理烟株的株高、有效叶片数、叶长、茎 围、鲜重和干重等参数值都较对照(即不施用微生物菌剂)均有一定程 度的提高，尤其是株高、有效叶片数、叶长、单株鲜重与干重，均与对 照间达到显著差异。上述结果初步表明：施用微生物菌剂在土壤中定制 并产生作用需要一定的时间过程，可以在烟株的后期生长中产生作用， 一定程度上促进烟株的生长。
2、旺长期、采烤前期土壤微生物数量测定结果
旺长期结果列于下表中：
表6各微生物菌剂处理旺长期微生物数量比较
处理设置 细菌(cfu/g) 真菌(cfu/g) 放线菌(cfu/g) 真菌/细菌
处理一(菌剂1) 1.31*10<sup>7</sup> 1.80*10<sup>5</sup> 1.60*10<sup>5</sup> 0.0137
处理二(菌剂2) 2.84*10<sup>7</sup> 1.53*10<sup>5</sup> 0.50*10<sup>5</sup> 0.0054
处理三(菌剂3) 2.20*10<sup>7</sup> 2.33*10<sup>5</sup> 0.40*10<sup>5</sup> 0.0106
CK 1.29*10<sup>7</sup> 1.10*10<sup>5</sup> 0.50*10<sup>5</sup> 0.0085
微生物菌剂处理对植烟土壤微生物有一定影响，在刚处理20天后， 各微生物菌剂处理后土壤微生物数量均高于对照(清水处理)，有利于土壤 有机质的分解和腐殖质的形成。真菌/细菌比是评价土壤肥力和健康程度的 重要指标之一，土壤真菌/细菌比越高代表土壤肥力越高、土壤生态系统稳 定程度也越高，在处理20天后，菌剂1和菌剂3处理后土壤的真菌/细菌 比明显高于对照，说明微生物菌剂对土壤肥力及活性有一定的影响。
参见上表，在旺长期，不同处理对土壤微生物数量有一定影响，细菌 表现为处理二＞处理三＞处理一＞CK，其中处理二的细菌数量最多；真菌 表现为处理三＞处理一＞处理二＞CK，其中处理三的真菌数量最多；放线 菌表现为处理一＞处理二＝CK＞处理三，其中处理一的放线菌数量最多， 但其余三个处理间无显著性差异。
采烤前期结果列于下表中：
表7各微生物菌剂处理采烤前微生物数量比较
处理设置 细菌(cfu/g) 真菌(cfu/g) 放线菌(cfu/g) 真菌/细菌
处理一(菌剂1) 7.19*10<sup>7</sup> 1.26*10<sup>5</sup> 1.23*10<sup>5</sup> 0.0018
处理二(菌剂2) 7.29*10<sup>7</sup> 1.63*10<sup>5</sup> 3.00*10<sup>5</sup> 0.0022
处理三(菌剂3) 11.51*10<sup>7</sup> 1.25*10<sup>5</sup> 2.55*10<sup>5</sup> 0.0011
CK 7.27*10<sup>7</sup> 1.38*10<sup>5</sup> 2.26*10<sup>5</sup> 0.0019
在采烤前期不同处理对土壤微生物数量有影响不同，细菌表现为处理 三＞处理二＞CK＞处理一，其中处理三的细菌数量最多，呈显著性差异； 真菌表现为处理二＞CK＞处理一＞处理三，但四个处理间无显著性差异； 放线菌表现为处理二＞处理三＞CK＞处理一，其中处理二的放线菌数量 最多，但其余三个处理间无显著性差异。
采烤后期结果列于下表中：
表8各微生物菌剂处理采烤后微生物数量比较
Figure BDA0002285522200000111
Figure BDA0002285522200000121
通过对比表4～6可知，处理二的细菌数量在旺长期最低，采烤前达到 峰值，采烤后急剧下降至与旺长期持平；处理一、二与CK处理组的细菌 数量变化近似，处理三的细菌数量在旺长期最低，采烤前达到峰值，采烤 后急剧下降，处理3在采烤前期细菌数量最高。
处理一的真菌数量在采烤前期达到低谷，并在采烤后期达到4个处理 的最高值；处理二的真菌数量在3个时期差异较小，在采烤后期达到峰值； 处理三的真菌数量在采烤前期达到低谷，并在采烤后期达到最高值；采烤 后期的最高值依序为处理一>处理三>处理二。CK处理全期均较低。
处理一的放线菌数量直线下滑，并在采烤后期达到4个处理的最低值； 处理二的放线菌数量在旺长期最低，采烤前达到峰值，采烤后急剧下降并 高于旺长期；处理三、CK与处理2类似，峰值均低于处理2。
3、处理1～3及CK处理在烤烟生长的旺长期、采烤前期时期植烟土 壤的酚酸类物质测定
结果列于下表：
表9
Figure BDA0002285522200000122
Figure BDA0002285522200000131
上表结果表明，处理1～3与CK组相比可在一定程度降低酚酸类物质 含量，提高土壤活性。
在本说明书中所谈到的“一个实施例”、“另一个实施例”、“实施例”、 “优选实施例”等，指的是结合该实施例描述的具体特征、结构或者特点包 括在本申请概括性描述的至少一个实施例中。在说明书中多个地方出现同 种表述不是一定指的是同一个实施例。进一步来说，结合任一实施例描述 一个具体特征、结构或者特点时，所要主张的是结合其他实施例来实现这 种特征、结构或者特点也落在本申请的范围内。
尽管这里参照本申请的多个解释性实施例对本申请进行了描述，但是， 应该理解，本领域技术人员可以设计出很多其他的修改和实施方式，这些 修改和实施方式将落在本申请公开的原则范围和精神之内。更具体地说， 在本申请公开和权利要求的范围内，可以对主题组合布局的组成部件和/ 或布局进行多种变型和改进。除了对组成部件和/或布局进行的变形和改进 外，对于本领域技术人员来说，其他的用途也将是明显的。

Claims (8)

1.一种用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，包括：解淀粉芽胞杆菌、荧光假单胞菌和短小芽孢杆菌，其中，所述解淀粉芽胞杆菌(拉丁名：Bacillusamyloliquefaciens)的保藏编号为CGMCC No.6598的菌株。
2.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，所述荧光假单胞菌(拉丁名：Pseudomonas fluorescens)为保藏编号为CGMCC No.6597的菌株。
3.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，所述短小芽孢杆菌(拉丁名：Bacillus pumilus)为保藏编号为CGMCC No.6595的菌株。
4.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，由解淀粉芽胞杆菌、荧光假单胞菌和短小芽孢杆菌组成。
5.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，包含：所述解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂10～50重量份；所述荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂15～50重量份；所述短小芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂10～30重量份。
6.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，包含：所述解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂20～50重量份；所述荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂15～30重量份；所述短小芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂10～20重量份。
7.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，包含：所述解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂20～30重量份；所述荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂25～40重量份；所述短小芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂20～30重量份。
8.根据权利要求1所述的用于提升植烟土壤微生态环境水平的生物菌剂，其特征在于，包含：所述解淀粉芽胞杆菌含量不低于1×1010cfu/g的菌剂10～20重量份；所述荧光假单胞菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂30～50重量份；所述短小芽孢杆菌含量不低于1×1011cfu/g的菌剂20～30重量份。
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