CN110882278B - 五谷虫或其提取物在制备降低肾毒性的药物中的用途 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及五谷虫或其提取物用于制备降低肾毒性的药物的用途。本发明还提供了一种用于降低肾毒性的药物组合物,包含五谷虫或其提取物和核黄素。
Description
技术领域
本发明涉及五谷虫的新用途,具体地,是五谷虫或其提取物用于制备降低肾毒性的药物的用途。
背景技术
现有药物很多具有肾毒性,其通过各种机制引起肾衰竭,包括对肾小管的直接毒性、过敏性间质肾炎以及可能导致少尿型肾衰竭(oliguric renal failure)的药物在肾小管内发生结晶等。能够引起肾毒性的药物包括抗癌剂,例如顺铂(cisplatin)、甲氨蝶呤和阿霉素;非固醇类抗炎药(nonsteroidal antiinflammatories,NSAIDs),例如COX-2抑制剂;抗生素,例如氨基糖苷类、两性霉素;抗病毒剂,例如阿昔洛韦(acyclovir)、茚地那韦(indinivir);乙酰胆碱酯酶抑制剂;血管紧张素II受体阻断剂(ARBs);锂和射线造影剂等。
用于治疗肿瘤疾病的常规方法,对许多脏器都有一定的毒性作用,特别是表现出来的肾脏毒性,越来越得到人们重视。研究表明在放射治疗肿瘤疾病时,放射剂量为1000-2000拉德,肾脏在2-3周内并不会产生持久性病理异常;剂量为2300-2500拉德时,在4-5周后可见肾脏早期的组织病理学上的改变,多表现为肾小球内皮细胞增殖,小动脉内层及中层有玻璃样沉积,从而导致肾小球毛细血管肿胀。持续的放射治疗则能对肾单位造成持久性的损害,导致肾毒性。另有报道,放射剂量大于400拉德时肾小球滤过率会暂时性下降,剂量为400-700拉德时,肾血浆流量有持续下降。有些经过放射治疗后的肿瘤患者,开始未表现出肾脏的症状,但是6-18月后开始出现慢性放射性肾炎,并引发其他疾病。肿瘤患者长时间服用抗肿瘤药物会产生肾脏毒性,在临床应用过程中,剂量的选择受到限制。因此,现有技术急需一种能够有效降低肾毒性的药物。
本申请发明人经过多年研究,发现五谷虫或其提取物具有降低肾毒性的良好作用。特别是再加入核黄素,会取得出人预料的协同作用。
发明内容
本发明的一个方面,提供了一种用于降低肾毒性的药物组合物,包含五谷虫或其提取物。
本发明的另一个方面,所述药物组合物,其中五谷虫提取物按照如下方法制备:
(1)人工养殖五谷虫冷冻干燥,粉碎后过筛,用二氧化碳流体超临界萃取,得到粗产物;
(2)向步骤1得到的粗产物中加入3%的蒸馏水,搅拌混合;离心分离,去除沉淀物,得到脱胶油脂;
(3)向步骤2得到的脱胶油脂中加入氢氧化钠,搅拌,凝结,离心分离;向上清液中加入蒸馏水,搅拌,静置,分离,重复1-3次,直到下层水加酚酞不变色即可;取上清液备用;
(4)对上清液用活性炭吸附剂脱色:活性炭添加量为4%,脱色温度为90℃,脱色时间为90分钟,反复三次,即得五谷虫提取物。
本发明的另一个方面,所述药物组合物还包含能够引起肾毒性的药物。
本发明的另一个方面,所述能够引起肾毒性的药物包括但不限于抗癌药物例如顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、紫杉醇等,非固醇类抗炎药例如COX-2抑制剂,抗生素例如氨基糖苷类、两性霉素,抗病毒剂例如阿昔洛韦、茚地那韦,乙酰胆碱酯酶抑制剂,血管紧张素II受体阻断剂,锂和射线造影剂等。
本发明的另一个方面,所述药物组合物,其包含药学上可接受的载体。
本发明的另一个方面,所述药物组合物,其为片剂、胶囊、颗粒剂、注射剂、滴鼻剂、吸入剂、缓释剂、气雾剂或膜剂。
本发明的另一个方面,提供了所述药物组合物在制备降低肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了五谷虫或其提取物在制备降低肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了五谷虫或其提取物在制备降低抗癌药引起的肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,所述抗癌药包括顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、紫杉醇等。
发明详述
本申请发明人通过多年研究,发现五谷虫或其提取物对于降低各种原因导致的肾毒性具有有效的药理活性。进一步地,将五谷虫或其提取物与核黄素以特定比例组合,能够进一步增强降低肾毒性的活性,具有协同作用。
如非特殊说明,本申请所述计量单位为质量。
本发明的一个方面,提供了一种用于降低肾毒性的药物组合物,包含五谷虫或其提取物。
本发明的另一个方面,所述药物组合物,其中五谷虫提取物按照如下方法制备:
(1)人工养殖五谷虫冷冻干燥,粉碎后过筛,用二氧化碳流体超临界萃取,得到粗产物;
(2)向步骤1得到的粗产物中加入3%的蒸馏水,搅拌混合;离心分离,去除沉淀物,得到脱胶油脂;
(3)向步骤2得到的脱胶油脂中加入氢氧化钠,搅拌,凝结,离心分离;向上清液中加入蒸馏水,搅拌,静置,分离,重复1-3次,直到下层水加酚酞不变色即可;取上清液备用;
(4)对上清液用活性炭吸附剂脱色:活性炭添加量为4%,脱色温度为90℃,脱色时间为90分钟,反复三次,即得五谷虫提取物。
本发明的另一个方面,所述药物组合物还包含能够引起肾毒性的药物。
本发明的另一个方面,所述能够引起肾毒性的药物包括但不限于抗癌药物例如顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、紫杉醇等,非固醇类抗炎药例如COX-2抑制剂,抗生素例如氨基糖苷类、两性霉素,抗病毒剂例如阿昔洛韦、茚地那韦,乙酰胆碱酯酶抑制剂,血管紧张素II受体阻断剂,锂和射线造影剂等。
本发明的另一个方面,所述药物组合物,其包含药学上可接受的载体。
本发明的另一个方面,所述药物组合物,其为片剂、胶囊、颗粒剂、注射剂、滴鼻剂、吸入剂、缓释剂、气雾剂或膜剂。
本发明的另一个方面,提供了所述药物组合物在制备降低肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了五谷虫或其提取物在制备降低肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了五谷虫或其提取物在制备降低抗癌药引起的肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了所述药物组合物在制备预防或治疗肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了五谷虫或其提取物在制备预防或治疗肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,提供了五谷虫或其提取物在制备预防或治疗由抗癌药或放射引起的肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,所述抗癌药包括顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、紫杉醇等。
本发明的另一个方面,所述五谷虫或其提取物在药物中的含量为0.1-99.9%。
本发明的另一个方面,所述药物包含五谷虫或其提取物和药学上可接收的载体。
本发明的另一个方面,提供了一种能够降低肾毒性的药物组合物,其中包含五谷虫或其提取物和核黄素。
本发明的另一个方面,提供了包含五谷虫或其提取物和核黄素的药物组合物在制备预防或治疗肾毒性的药物中的用途。
本发明的另一个方面,所述药物组合物中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为0.1-150:1。
本发明的另一个方面,所述药物组合物中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为1-120:1。
本发明的另一个方面,所述药物组合物中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为2-100:1。
本发明的另一个方面,所述药物组合物中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为80:1。
本发明的另一个方面,所述药物组合物中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为50:1。
本发明的另一个方面,所述药物组合物中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为40:1。
本发明的另一个方面,所述药物组合物还包含能够引起肾毒性的物质。
本发明的另一个方面,所述能够引起肾毒性的物质包括但不限于抗癌药物例如顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、紫杉醇等,非固醇类抗炎药例如COX-2抑制剂,抗生素例如氨基糖苷类、两性霉素,抗病毒剂例如阿昔洛韦、茚地那韦,乙酰胆碱酯酶抑制剂,血管紧张素II受体阻断剂,锂和射线造影剂等。
本发明的另一个方面,五谷虫或其提取物和核黄素的组合是“用于同时、分别或依次使用的联合剂或药物组合物”,尤其指的是一种“组分包”,意思是五谷虫或其提取物和核黄素可各自独立地施用或通过具有不同组分含量的不同固定组合施用,即在不同时间点或同时施用。组分包的组分可例如同时施用或按时间顺序间隔施用,即在不同时间点且以相同或不同的时间间隔施用组分包的任意组分。优选地,所选择的时间间隔应使联合使用组分对所治疗疾病或病症的效果高于仅使用任何单独的组分所获得效果。
术语“预防”指的是向健康患者预防性地施用所述组合以防止此处所述的疾病和病症发生。此外,术语“预防”还可以指向处于待治疗疾病前期的患者预防性施用所述组合。
治疗有效量的本发明组合中每种组分可以同时或以任何依次使用,并且所述组分可分别施用或作为固定组合施用。组合中的单个组分可以在治疗期间的不同时间分别施用或者以分开的或单一的组合形式并施用。此外,术语“使用”还包括使用可在体内转化为所选择的药物的任何药物的前药。因此,应将本发明理解为包括所有这些同时或交替治疗的方案,并应相应地对术语“使用”进行解释。
本发明剂量形式的优选施用途径为经肠内或优选口服途径。由于施用方便,片剂和胶囊代表了最佳的口服剂量单位形式。
组合治疗中所使用的每种活性成分的有效剂量可以随所使用的具体的药物组合物、使用方式或所治疗病症的严重程度而变化。
本发明药物所使用的药学上可接收的载体包括填充剂、稀释剂、赋形剂、稳定剂、抗氧剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、防腐剂、着色剂等。
优选地,填充剂选自淀粉、预交化淀粉、糊精、壳聚糖、甘露糖、微晶纤维素、聚酸酐类、聚磷酸酯类、聚氨酯类、纤维蛋白、脂质体、聚乙二醇、半乳糖、聚维酮中的至少一种。
优选地,稀释剂选自甘露醇、微晶纤维素、乳糖、淀粉、糖精中的至少一种。
优选地,稳定剂选自环糊精及其衍生物、聚乙二醇、吐温、司盘、右旋糖苷、甘露醇中的至少一种。
优选地,抗氧剂选自维生素C、焦亚硫酸钠、安息香酸、枸橼酸盐、山梨酸、亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠中的至少一种。
优选地,崩解剂选自交联羧甲纤维素钠、交联聚维酮、羟丙基纤维素、羟丙基淀粉、聚山梨酯80、十二烷基硫酸钠等。
优选地,粘合剂选自羟丙基甲基纤维素、聚维酮、淀粉、糊精、微晶纤维素、海藻酸钠、甲基纤维素等。
优选地,润滑剂选自硬脂酸、硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇、十二烷基硫酸钠等。
优选地,防腐剂选自苯甲酸、尼泊金、山梨酸、乙醇等。
具体实施方式
实施例1:五谷虫提取物的制备
按照下述方法制备得到五谷虫提取物:
1.人工养殖五谷虫冷冻干燥,粉碎后过60目筛,用二氧化碳流体超临界萃取,萃取参数为压力25MPA,温度50℃,CO2流量25L/h,萃取2小时,得到粗产物。
2.将步骤1得到的粗产物加热至80℃,加入粗产物体积3%的80℃的蒸馏水,搅拌30分钟,充分混合;5000r/min离心分离,去除沉淀物,得到脱胶油脂。
3.取步骤2得到的脱胶油脂,加热至60℃,加入0.3%(w/w)的氢氧化钠,搅拌1小时,出现细小的皂化物,升温至80℃,出现絮状物,凝结,5000r/min离心分离。取上清液,加热至80℃,加入上清液体积30%的80-85℃的蒸馏水,搅拌30分钟,静置,用分液漏斗分离,上清液再次加热加水搅拌静置,测分离出的下层水的pH值,重复3次,下层水加酚酞不变色即可。取上清液备用。
4.吸附剂脱色:添加上清液体积4%的活性炭,脱色温度为90℃,脱色时间为90分钟,反复三次,即得五谷虫提取物。
实施例2:五谷虫粉末的制备
人工养殖五谷虫冷冻干燥,粉碎后过100目筛,备用。
实施例3:包含五谷虫或其提取物和核黄素的药物组合物的制备
药物组合物1:活性成分中五谷虫提取物:核黄素为120:1(质量比)。
药物组合物2:活性成分中五谷虫提取物:核黄素为100:1(质量比)。
药物组合物3:活性成分中五谷虫提取物:核黄素为80:1(质量比)。
药物组合物4:活性成分中五谷虫提取物:核黄素为50:1(质量比)。
药物组合物5:活性成分中五谷虫粉末:核黄素为100:1(质量比)。
药物组合物6:活性成分中五谷虫粉末:核黄素为80:1(质量比)。
药物组合物7:活性成分中五谷虫粉末:核黄素为50:1(质量比)。
药物组合物8:活性成分中五谷虫粉末:核黄素为20:1(质量比)。
实施例4:降低肾毒性药理试验
1.试验方法
ICR小鼠70只,雄性,重量18~22g,6-8周龄。动物置于室温(22±1)℃,相对湿度65%及正常昼夜节律调节光照时间环境下,食用标准饲料,自由饮水。
取70只ICR纯系小鼠适应性喂养3天后,随机分为7组,每组10只,即空白组,单纯放射组和放射合并本发明1-5组。除空白组正常喂养外,其他6组用医学直线加速器,6MeV射线,进行全身照射,剂量为2.5Gy/次,隔一天照射1次,共3次。放射合并本发明1-5组在进行照射的同时,每天口服本发明药物0.3g/10g,连续给药2周。每天观察各组小鼠的活动状况,末次给药后,摘眼球取血,测定肌酐和尿素氮。
2.试验结果:
1、各组小鼠行为状况:
空白组活动自如,精神正常,毛发整齐有光泽;
单纯放射组精神萎靡,毛糙,无光泽,饮食减少;
放射合并本发明药物1-4组活动基本正常,毛发有光泽;
放射合并本发明药物5组精神萎靡,毛糙,无光泽,饮食减少,状同单纯放射组。
2、本发明对放射后小鼠肌酐和尿素氮的影响,见表1。
表1本发明对放射后小鼠肌酐和尿素氮的影响
结果表明:单纯放射组动物肌酐和尿素氮均高于空白组(p<0.01或p<0.05),说明小鼠经多次放射后,血液中肌酐和尿素氮含量上升,对小鼠造成了肾脏损伤。放射合并本发明药物1-4组肌酐和尿素氮的含量低于单纯放射组(p<0.05或p<0.01),表明本发明可以降低放射后肌酐和尿素氮的含量,放射合并本发明药物5组肌酐和尿素氮的含量与单纯放射组相似,表明核黄素并不能降低放射后肌酐和尿素氮的含量。特别是药物3、4组,加入核黄素后的药物组合物的药理活性明显强于五谷虫粉末或其提取物,具有协同作用。
实施例5:对顺铂诱导的肾毒性模型小鼠中的肾损害保护效果
1、试验方法
向ICR小鼠(10只/组)以10mg/10g的剂量单次口服顺铂或顺铂+本发明药物(质量比为1:1),其中各组使用的顺铂量相同。24小时后处死该动物。用光学显微镜通过肾组织学的方法来评估发生的肾小球和肾小管间质性损伤。4小时和18小时后加入亚叶酸。尿液未发生碱化。
切下5μM的石蜡切片,并用苏木精和曙红以及过碘酸希夫(PAS)进行染色。通过光学显微镜对它们进行测定,并以盲法进行打分。根据以下所述参数对各个切片中在40倍放大下的5个任意视野进行评价,并根据所提及的标准进行评分。
扩张的肾小管
0=正常,无扩张的肾小管
1=轻度,1-2个扩张的肾小管
2=中度,3-5个扩张的肾小管
3=严重,6-8个扩张的肾小管
4=非常严重,超过8个扩张的肾小管
空泡
0=正常,无空泡
1=轻度,1-4个空泡
2=中度,5-8个空泡
3=严重,9-12个空泡
4=非常严重,13-16个空泡
炎症
0=无,没有发现炎症细胞
1=轻度,高达25%的视野被炎症细胞覆盖
2=中度,高达50%的视野被炎症细胞覆盖
3=严重,高达75%的视野被炎症细胞覆盖
4=非常严重,超过75%的视野被炎症细胞覆盖
肾小管细胞数量的增加
0=无
1=轻度,高达25%的肾小管细胞数增加或具有重叠的细胞
2=中度,高达50%的肾小管细胞数增加或具有重叠的细胞
3=严重,高达75%的肾小管细胞数增加或具有重叠的细胞
4=非常严重,超过75%的肾小管细胞数增加或具有重叠的细胞
2、试验结果
表2、各试验组评分情况
由表2数据可见,单次静脉注射顺铂对肾产生了肾小球轻度萎缩、肾小管变性、管型的形成、单核细胞的扩张和浸润的形式的组织病理学改变。单纯使用核黄素(药物5组)对于顺铂引起的肾毒性无明显改善。在用本发明药物1-4组进行处理的小鼠中,发现肾小管的病理发生了显著的降低,肾小球的结构得到了更好的保持。特别是包含五谷虫或其提取物和核黄素的药物组合物(药物3、4组)相对于单个活性成分更有效,具有协同作用。
Claims (8)
1.一种用于降低肾毒性的药物组合物,包含五谷虫或其提取物和核黄素;其中五谷虫或其提取物和核黄素的质量比例为0.1-150:1;
其中五谷虫提取物按照如下方法制备:
(1)人工养殖五谷虫冷冻干燥,粉碎后过筛,用二氧化碳流体超临界萃取,得到粗产物;
(2)向步骤1得到的粗产物中加入3%的蒸馏水,搅拌混合;离心分离,去除沉淀物,得到脱胶油脂;
(3)向步骤2得到的脱胶油脂中加入氢氧化钠,搅拌,凝结,离心分离;向上清液中加入蒸馏水,搅拌,静置,分离,重复1-3次,直到下层水加酚酞不变色即可;取上清液备用;
(4)对上清液用活性炭吸附剂脱色:活性炭添加量为4%,脱色温度为90℃,脱色时间为90分钟,反复三次,即得五谷虫提取物。
2.如权利要求1所述的药物组合物,还包含能够引起肾毒性的物质。
3.如权利要求1所述的药物组合物,其包含药学上可接受的载体。
4.如权利要求3所述的药物组合物,其为片剂、胶囊、颗粒剂、注射剂、滴鼻剂、吸入剂、缓释剂、气雾剂或膜剂。
5.如权利要求1所述的药物组合物在制备降低肾毒性的药物中的用途。
6.如权利要求1所述的药物组合物在制备预防或治疗由抗癌药或放射引起的肾毒性的药物中的用途。
7.如权利要求6所述的用途,所述抗癌药包括顺铂、甲氨蝶呤、阿霉素、紫杉醇。
8.如权利要求6所述的用途,其中药物组合物为片剂、胶囊、颗粒剂、注射剂、滴鼻剂、吸入剂、缓释剂、气雾剂或膜剂。
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