CN110882222A - 颗粒组合物及制备方法和应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开一种颗粒组合物及制备方法和应用。本发明的颗粒组合物采用发泡和气流粉碎工艺得到，其包含第一颗粒和第二颗粒，第一颗粒为内部包埋醋酸亮丙瑞林的多孔性聚合物颗粒，第二颗粒为甘露醇颗粒。通过实验验证本发明的颗粒组合物的稳定性良好，理化性质基本稳定，外观形态、粒径分布等均没有受到影响，并且载药量保持稳定，醋酸亮丙瑞林的含量没有太大改变，有关物质均符合限度要求。

Description

颗粒组合物及制备方法和应用

技术领域

本发明涉及药物缓释领域，具体地涉及亲水性药物，特别是醋酸亮丙瑞林的缓释颗粒组合物及其制备方法和应用。

背景技术

亮丙瑞林是一种人工合成的亲水性促性腺素释放激素类似物。常规的亮丙瑞林制剂生物半衰期较短、制剂稳定性差，口服给药难以吸收，且服药后副作用大。

生物可降解聚合物是指一些能够在水、酶作用下降解的高分子材料，它们被用作微球、纳米粒的主要骨架材料，在多肽非经脉注射药物传递系统和长效注射剂领域都得到广泛的研究和应用。常用的生物可降解聚合物包括白蛋白、明胶、葡聚糖、淀粉、聚乳酸、聚内酯、聚邻酯和聚酐等。利用生物可降解材料高分子聚合物作为骨架材料，可将亮丙瑞林药物包裹成微球，作为一种缓控释制剂，其常见的制备技术有乳化液中干燥法、喷雾干燥法、相分离法等。由此制备的亮丙瑞林微球实现了可持续释药。

例如，在中国专利公布CN106038492 A中公开了一种制备缓释醋酸亮丙瑞林微球的方法，具体步骤为(1)将醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成醋酸亮丙瑞林注射用水溶液，醋酸亮丙瑞林浓度为1g/ml-2.5g/ml；(2)将PLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液，所述PLA二氯甲烷溶液中PLA浓度为280mg/ml-350mg/ml；(3)将所述步骤(1)和所述步骤(2)的醋酸亮丙瑞林注射用水溶液和PLA二氯甲烷溶液混合，超声形成初乳；(4)将步骤(3)所述初乳加入到PVA溶液中，搅拌形成复乳；(5)复乳搅拌，过滤，往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，即得缓释醋酸亮丙瑞林微球。

虽然现有技术制备的微球能够实现多肽药物缓释，但是微球及载药均一性差，载药量与包封率较低。另外，仍需进一步改善，特别是需进一步提升缓释药物的包封率，减小在释药过程中的突释现象。

发明内容

针对现有技术中存在的至少部分技术问题，发明人进行了深入研究，实现了在无需水溶的情况下直接将亲水性的亮丙瑞林分散于多孔性聚合物中，制备得到具有优异缓释效果的颗粒组合物的方案。至少部分地基于此完成了本发明。具体地，本发明包括以下内容。

本发明的第一方面，提供一种颗粒组合物，其包含第一颗粒和第二颗粒，且所述第一颗粒为内部包埋醋酸亮丙瑞林的多孔性聚合物颗粒，所述第二颗粒为甘露醇颗粒。

根据本发明的颗粒组合物，优选地，所述第一颗粒为78-95重量份，所述第二颗粒为10-22重量份。

根据本发明的颗粒组合物，优选地，所述第一颗粒中所述多孔性聚合物为70-85重量份，所述醋酸亮丙瑞林为8-10重量份。

根据本发明的颗粒组合物，优选地，所述第一颗粒和所述第二颗粒的粒径分别在30-90μm之间，且所述第一颗粒中的多孔性聚合物为PLGA/PLA。

根据本发明的颗粒组合物，优选地，所述颗粒组合物为缓释颗粒组合物。

本发明的第二方面，提供颗粒组合物的制备方法，其包括以下步骤：

(1)使醋酸亮丙瑞林干燥粉分散于高分子聚合物的溶液中得到分散液，其中所述溶液中溶剂的浓度为60重量％-80重量％；

(2)使所述溶剂在所述分散液中的浓度降至10重量％-20重量％，然后在-0.01至-0.1Mpa下发泡进一步除去溶剂，得到发泡凝固物；

(3)将所述发泡凝固物进行初步粉碎得到粒径100-200μm的粗粉，然后使用气流粉碎进行二次粉碎形成粒径20-90μm的细粉；和

(4)使所述细粉与甘露醇粉末按比例混合后冻干，得到所述颗粒组合物。

根据本发明的颗粒组合物的制备方法，优选地，所述醋酸亮丙瑞林干燥粉为冻干粉且平均粒径在0.5-10μm之间。

根据本发明的颗粒组合物的制备方法，优选地，所述溶剂选自氯化物溶剂、四氢呋喃、丙酮和乙酸乙酯组成的组中的至少之一。

根据本发明的颗粒组合物的制备方法，优选地，所述步骤(1)中，在震荡和超声条件下进行分散；所述步骤(3)中，气流粉碎时的气压为0.2-0.6Mpa。

本发明的第三方面，提供上述的颗粒组合物在治疗性激素相关疾病中的应用。

本发明的制备方法无需溶解亲水性药物而直接将其分散于多孔性聚合物，通过控制具体的步骤得到性能优异的颗粒组合物。颗粒类药物由于其多是蛋白质类大分子，易发生降解产生杂质，影响微球质量。通过实验证明了本发明的颗粒组合物的稳定性良好，理化性质基本稳定，外观形态、粒径分布等均没有受到影响，并且载药量保持稳定，醋酸亮丙瑞林含量没有太大改变，有关物质均符合限度要求。

本发明的颗粒组合物在30天时累积释放度高于90％，符合释放度要求。由此可实现通过控制高分子聚合物的结构及甘露醇共同来控制药物的释放速率的目的，从而可在长达一个月的时间内都能维持血药浓度达到治疗目的，同时降低患者的顺应性，减轻治疗时的经济负担。

附图说明

图1本发明一种示例性颗粒组合物的制备流程图。

图2本发明一种示例性颗粒组合物的释放曲线。

图3本发明一种示例性醋酸亮丙瑞林缓释颗粒组合物粗粉的电镜图。

图4为SD大鼠体内释放睾酮含量的曲线图。

具体实施方式

现详细说明本发明的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本发明的限制，而应理解为是对本发明的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。

应理解本发明中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本发明。另外，对于本发明中的数值范围，应理解为具体公开了该范围的上限和下限以及它们之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本发明内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。

除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本发明所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本发明仅描述了优选的方法和材料，但是在本发明的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。除非另有说明，否则“％”为基于重量的百分数。

[颗粒组合物]

本发明的第一方面，提供一种颗粒组合物。本文也可简称为“本发明的组合物”，其为用于亲水性多肽的非肠道缓释给药的组合物。

本发明的组合物一般为固体颗粒，例如微球形式，特别是粉末形式。在需要时本发明的组合物还可以其他形式存在，例如溶液、液体或悬浮液的形式存在。本发明的组合物中颗粒的平均粒径范围为一般为20-100μm，优选30-90μm，更优选平均粒径范围为48-65μm。本发明的粒径是指通过粒度仪测定的D₅₀值。

本发明的颗粒组合物包含第一颗粒和第二颗粒，且第一颗粒为内部包埋醋酸亮丙瑞林的多孔性聚合物颗粒，第二颗粒为甘露醇颗粒。本发明的组合物中含有更低量的亲水性非活性成分(例如，水)，并且多孔性聚合物具有多孔结构和更高的孔隙率。

本发明的组合物中，基于重量，第一颗粒的含量一般为78-95重量份，优选70-90，更优选为70-85重量份。包埋在第一颗粒内部的醋酸亮丙瑞林一般为8-10重量份，优选7-10重量份，更优选7-9重量份，第一颗粒中多孔性聚合物一般为70-85重量份，优选为72-80重量份，更优选75-80重量份。本发明的组合物中，基于重量，第二颗粒的含量一般为10-22重量份，优选10-20重量份，更优选15-20重量份。需要说明的是，本发明各组分的含量范围对于本发明而言是重要的，并且各组分的含量之间存在相互作用关系，影响药物的缓释效果。例如，甘露醇的含量过低或过高时均倾向于引起副作用，例如在注射时引起溶血、水肿或疼痛感等。再例如，内部包埋的醋酸亮丙瑞林含量过高时，会引起药物释放过快，特别是在释药早期更容易引起不良反应。

本发明的组合物中，第一颗粒和第二颗粒的粒径分别在10-100μm之间，优选为20-90μm，还优选为30-90μm，更优选为48-65μm。

本发明的颗粒组合物为缓释颗粒组合物，与传统药物不同，本发明的组合物中多孔性聚合物具有更高的孔隙率。传统缓释微球制备时需将亲水药物溶于水相，然后将水相与有机相混合来制备。此时制备的微球中含有微量的亲水物质(相对而言亲水性非活性物质的量更多)，这些亲水性非活性物质的存在影响药物在脂溶性基质中的释放。与之不同，本发明的组合物由于未使用亲水相来制备颗粒，所以亲水性非活性物质的含量相对更少。因此通过本发明的方法得到的颗粒具有改变的药物释放特性。但发明人发现实际并非如此，本发明的颗粒仍然具有优异的缓释特性。其原因可能在于多孔性聚合物为多孔结构，在将醋酸亮丙瑞林直接包埋于多孔性聚合物时，由于两者之间互不相溶，影响了药物从颗粒内部的释放，但由于存在孔隙，增大了醋酸亮丙瑞林暴露于多孔性聚合物外的面积，从而增强了醋酸亮丙瑞林药物的释放速率。

本发明中，作为多孔性聚合物的成分不特别限定，只要其能够包埋药物，并且具有特定的孔隙和良好的生物相容性即可，其实例包括白蛋白、明胶、葡聚糖、淀粉、聚乳酸、聚内酯、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚乳酸、聚邻酯和聚酐。本发明可以使用上述物质中的一种或多种的组合。

本发明的多孔性聚合物为聚乳酸-羟基乙酸(polylactic-co-glycolicacid，PLGA)或聚乳酸(ploylacticacid，PLA)，即PLGA/PLA。乳酸-羟基乙酸共聚物在体内能完全降解为乳酸和乙酸，再经过三羧酸循环转化为水和二氧化碳排至体外，其无毒且能在体内缓慢降解，大大改进了药物的输送方式，延长了药物释放时间，使药物达到了可控释放，因而提高了药效，保证了机体的安全。

本发明中，药物的释放速率与多孔性聚合物的组成、粘度、降解速度和孔隙率相关。一般而言，在聚合物组成方面，羟基乙酸为柔性段，其含量越高，则亲水性越强，降解速度越大，从而更有利于亲水性药物的释放。另一方面，本发明的PLGA中乳酸和羟基乙酸的摩尔比一般为90:10至50:50。在本发明的发明构思范围内，本领域技术人员可根据需要在考虑其他因素的基础上在该范围进行调整。

本发明中，多孔性聚合物的粘度不特别限定。可选地，多孔性聚合物的特性粘度在0.1g/dL-4g/dL，更优选在1g/dL-3g/dL范围内。在本发明的发明构思范围内，本领域技术人员可根据需要在考虑其他因素的基础上在该范围进行调整。

本发明中，多孔性聚合物的孔隙不特别限定，只要其具有孔隙即可。本发明的孔隙特征包括孔隙率和孔隙大小。孔隙特征可通过制备方法中的条件控制来得到。具体地制备方法可参见下文所述。

本发明中，多孔性聚合物的降解速度可以通过调节PLGA分子量(Mw)、乳酸(LA)和羟基乙酸(GA)的比例来实现。PLGA通过材料的表面融蚀和内部蚀解两种机制控制药物释放。本发明的药物组合物通过颗粒内部的孔道及高分子材料自身的融蚀降解使药物通过扩散等方式在一定时间内，以恒定速率释放到环境中来控制蛋白质在体内外的释放，达到缓慢释放的效果。由于PLGA无毒、无刺激、无致癌性，同时又具有生物相容性和生物降解性，因此在本发明中是优选的。

在某些实施方案中，本发明的组合物中，多孔性聚合物为PLGA/PLA，且基于重量醋酸亮丙瑞林含量为10％、PLGA/PLA为90％和甘露醇15％。物料比直接影响微球成型和微球释放度。例如，当醋酸亮丙瑞林投料量少时，载药量低。当醋酸亮丙瑞林投料量过高，载药量达峰值后不再增加，包封率开始降低。

在某一实施方案中，本发明的组合物中，多孔性聚合物为PLGA7525，且基于重量醋酸亮丙瑞林8％-9％、PLGA7525为75％-80％和甘露醇10-22％，制备得到的药物缓释颗粒的载药量和包封率高，药物释放适宜。

本发明的药物组合物中，甘露醇为粉末状，其与作为固体颗粒状的多孔性聚合物混合，从而组成本发明的组合物。甘露醇的颗粒大小不特别限定，可自由调整。一般而言，甘露醇粉末的平均粒径在90-190μm之间。优选在20-90μm之间。

[制备方法]

本发明的第二方面，提供颗粒组合物的制备方法，本文有时也简称作“本发明的制备方法”，其为采用发泡和气流粉碎工艺的方法。具体地，本发明的制备方法至少包括以下步骤：

(1)使醋酸亮丙瑞林干燥粉末分散于高分子聚合物的溶液中得到分散液，其中溶液中溶剂的浓度为60重量％-80重量％；

(2)使溶剂在分散液中的浓度降至10重量％-20重量％，然后在-0.01至-0.1Mpa下发泡，从而进一步除去溶剂，得到发泡凝固物；

(3)将发泡凝固物进行初步粉碎得到粒径100-200μm的粗粉，然后使用气流粉碎进行二次粉碎形成径20-90μm的细粉；和

(4)使细粉与甘露醇粉末按比例混合后冻干，得到颗粒组合物。

本发明的步骤(1)为使用醋酸亮丙瑞林干燥粉末直接分散于高分子聚合物的溶液中的步骤。该步骤与传统方法中使用醋酸亮丙瑞林溶液的方法完全不同。需要说明的是，由于以粉末形式分散，所以容易引起醋酸亮丙瑞林分散性差的问题。为避免这种情况，本发明优选地对醋酸亮丙瑞林进行增强分散性的精细化处理手段。

在示例性实施方案中，本发明的精细化处理手段包括使醋酸亮丙瑞林的水溶液在低温下迅速冷却冻干后得到颗粒。本发明发现通过该方法进行精细化处理后得到的颗粒粒径在0.5-10微米之间，优选1-5μm，例如1-4μm的颗粒，此类粒径的颗粒能够很好地达到本发明所需的分散程度。本方法中，基于重量，醋酸亮丙瑞林在水溶液中的浓度一般在15-35％，优选16-26％，例如20％。低温一般是指-50℃以下，优选-55℃以下，更优选-70℃以下，例如-78℃。在某些实施方案中，迅速冷却冻干是通过液氮直接降温迅速冷冻进行的。

本发明中，在分散醋酸亮丙瑞林干燥粉末之前，高分子聚合物溶液中溶剂的浓度需控制在60重量％-80重量％，优选65-80重量％，更优选65-75重量％。本发明发现该溶剂浓度是重要的，在该浓度下醋酸亮丙瑞林干燥粉末处于悬浮状态，从而更有利于醋酸亮丙瑞林充分良好的分散。

本发明的制备方法中，用于溶解高分子聚合物的溶剂不特别限定，可使用已知的溶剂。优选地，本发明使用的溶剂的实例包括氯化溶剂、四氢呋喃、丙酮和乙酸乙酯。本发明可使用上述溶剂中的一种，也可以使用上述溶剂中的两种以上的组合。优选地，本发明使用氯化物溶剂。溶剂的实例包括但不限于二氯甲烷、乙酸乙酯和丙酮。

在步骤(1)中，优选地，在震荡和超声条件下进行分散，从而提高分散效果。震荡和超声的具体条件不特别限定，可由本领域技术人员自由设定，但优选地，进行间歇性超声，从而防止温度过高。在示例性实施方案中，本发明使用超声波细胞粉碎机对混悬液进行粉碎操作，功率200瓦，超声20s间歇20s，工作10min。在另外的示例性实施方案中，使用混悬仪进行震荡，例如在混悬仪上进行高速混选20min，转速2500rpm，冷却30min，重复混选3次后25℃振摇过夜。还优选地，在密封条件下进行步骤(1)，从而防止溶剂的过度挥发。

本发明的步骤(2)为使溶剂在分散液中的浓度降至10重量％-20重量％，然后发泡的步骤。优选地，在震荡或搅拌的条件下降低溶剂浓度。在示例性实施方案中，在超声条件下进行溶剂的挥发从而逐渐降低溶剂浓度。此时还优选使用降温手段，例如冰水混合物控制二氯甲烷的挥发速度。本发明中控制溶剂的含量在10重量％-20重量％，优选15-20重量％，更优选15-18重量％是重要的。如果溶剂含量过大，则容易引起药物在分散不均。另一方面，如果溶剂含量过低，则不利于高分子材料孔隙的产生，进而影响药物的释放。

本发明的步骤(2)中在负压下进行发泡从而除去溶剂。其中负压一般为-0.01至-0.1Mpa，优选为-0.04至-0.08Mpa。具体压强不特别限定，可由本领域技术人员根据浓缩液的情况，特别是浓缩液中溶剂的含量情况而自由设定。在示例性实施方案中，使用冻干机对浓缩液进行减压干燥处理，使样品中溶剂，例如二氯甲烷挥发，从而使其呈发泡状态，减压发泡一段时间，一般为15-35小时，优选15-25小时，例如24小时。

本发明的步骤(3)为两级粉碎得到细粉的步骤。其中第一级粉碎或初步粉碎后颗粒的平均粒径在100-200μm之间，优选120-170μm，更优选140-160μm。经第二级粉碎后得到的细粉的平均粒径在20-90μm之间，优选在20-70μm，更优选30-60μm。第一级粉碎的方式不特别限定，例如，可使用粉碎机以转速10000rpm处理时间30s进行初步粉碎。第二级粉碎需使用气流粉碎进行粉碎。气流粉碎时气流高速释放的吸热和物料撞击的产热抵消，粉碎过程不升温，保护药物免受高温的影响。同时气流粉碎还能很好地产生所需粒径的超微粉。气液粉碎的条件不特别限定，并且可使用已知的仪器进行。

本发明的步骤(4)为将所得细粉与甘露醇按比例混合后冻干的步骤。该步骤中，使用粉末状甘露醇。需要说明的是，混合时细粉一般为78-95重量份，甘露醇一般为10-22重量份，优选15-20重量份。本发明的组合物中甘露醇粉末的含量范围是重要的，该含量范围有利于使制备出的颗粒形态良好，体外药物释放良好。

本领域技术人员应理解，只要能够实现本发明的目的，上述步骤的顺序并不特别限定，所述步骤的顺序可以是(1)、(2)、(3)和(4)；还可以是其他顺序。此外，两个以上的上述步骤可合并同时进行，例如步骤(1)和(2)可同时进行。本领域技术人员还应理解的是，在上述步骤(1)-(4)前后，或这些任意步骤之间还可包含其他步骤或操作，例如进一步优化和/或改善本发明所述的方法。

[应用]

本发明的第三方面，提供颗粒组合物的应用。具体地，本发明的颗粒组合物可用于治疗或减缓性激素相关疾病。此类疾病包括前列腺癌、子宫内膜异位和性早熟等疾病。

经试验发现，本发明制备得到的醋酸亮丙瑞林颗粒在30天时累计释放可超过90％，在组合物中增加较大量甘露醇，例如33％甘露醇，可以促进释放后期醋酸亮丙瑞林的释放。与以复乳法制备出醋酸亮丙瑞林高分子聚合物微球相比，极大地改善了药物的突释效应。这些特性使得本发明的醋酸亮丙瑞林缓释颗粒组合物特别适合于治疗子宫内膜异位等性激素有关疾病，此类病症正好预期一个周期释放时间为30天左右。

实施例1

称取醋酸亮丙瑞林200mg(10％)至30ml西林瓶中，加纯化水2ml充分溶解，在液氮中迅速冷却结冰，至冻干机中冷冻干燥。向西林瓶中加入高分子聚合物(PLGA/PLA)1.8g(90％)(高分子聚合物(PLGA/PLA)型号见表1，不同的型号表示不同的乳酸和羟基乙酸的质量比，后面数字加字母越大表示分子量越大，聚合物粘度越大)、二氯甲烷5ml，密封塞封口，至混悬仪上高速混选20min，转速2500rpm，冷却30min，重复混选3次后25℃振摇过夜。

使用超声波细胞粉碎机对混悬液进行粉碎操作，功率200瓦，超声20s间歇20s，工作10min，使用冰水混合物对瓶壁进行降温处理控制二氯甲烷的挥发速度，确保二氯甲烷剩余量在10％-20％之间。使用冻干机对样品进行减压干燥处理，使样品中二氯甲烷挥发，样品呈发泡状态，减压干燥24小时后将样品取出至粉碎机上初步粉碎，转速10000rpm，时间30s。再送至气流粉碎机上精细化粉碎，洗涤样品后加甘露醇1000mg(33％)，混合均匀后分装冻干。检测结果如下表2所示。

实施例2-13

除了如表1所示改变各成分组成以外，以与实施例1相似的方法制备颗粒组合物。

表1 不同类型高分子聚合物制备的组合物

测试例

1.含量测定

按照高效液相色谱法(中国药典2010年版二部附录ⅤD)测定。

1.1色谱条件与系统适用性试验

用十八烷基硅烷键合硅胶(Wakosil-Ⅱ3C₁₈AR,50×4.6mm,3μm)为填充剂；以三乙胺溶液(取三乙胺15.2g，溶解于800ml水中，用磷酸调节pH至3.0，加水稀释至1000ml，摇匀)-[乙腈-正丙醇(3:2)](17:3)为流动相；调节流速使醋酸亮丙瑞林峰的保留时间约为22分钟，检测波长为220nm，理论板数按醋酸亮丙瑞林峰计算应不低于4000。取醋酸亮丙瑞林对照品50mg，置50ml量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀；量取5ml，置50ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀；取5ml加1mol/L氢氧化钠溶液100μl，强烈振摇，置100℃烘箱中加热60分钟，迅速冷却，加稀磷酸50μl，强烈振摇，放至室温后，量取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图，出峰顺序为(2-D-组氨酸)亮丙瑞林(约19分钟)和醋酸亮丙瑞林(约22分钟)，二者的分离度应不小于1.2。

1.2测定法

取装量差异项下混合均匀的内容物约0.1g，精密称定，置100ml量瓶中，加入二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图；另取醋酸亮丙瑞林对照品，同法测定，按外标法以峰面积计算即可。

1.3二氯甲烷残留

取本品约45mg，精密称定，置5ml量瓶中，用二甲基亚砜溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。取二氯甲烷适量，精密称定，用二甲基亚砜稀释制成每1ml中含3.25μg的溶液，作为对照品溶液。照残留溶剂测定法(中国药典2010年版二部附录VIIIP第三法)测定。用聚乙二醇600为固定相，涂布浓度为20％，柱温为40℃，理论板数按二氯甲烷峰计算应不低于600。精密量取供试品溶液和对照品溶液各5μl，分别注入气相色谱仪中，记录色谱图，按外标法以峰面积计算，含二氯甲烷不得过0.0033％。

2.释放方法及检测方法

分别取本品0.1g，精密称定，分别置于内容量为120ml的6个玻璃容器中，精密加入(使用经校正后的分注器)预先加热至48℃的溶出介质(取聚乙烯醇20g，加入800ml热水中，加热并搅拌使聚乙烯醇溶解后，加水至1000ml，作为溶液A。

取聚山梨酯8010g，加水溶解使成1000ml，作为溶液B。取乳酸9g，加水溶解使成1000ml，作为溶液C。量取溶液A200ml、溶液B100ml和溶液C200ml，充分混匀后，加水至1000ml，摇匀)100ml，用胶栓密塞，用铝盖封盖，立即振摇使混悬，各容器以横倒状态固定，将其浸于48℃±1℃的水浴中，水平方向的振荡幅度约4cm，以每分钟125次振荡速度进行振荡，在振荡后的1小时、4小时、9小时、24小时、48小时、72小时、96小时、120小时，用附有注射针(0.65×25mm)的注射器通过胶栓由各容器抽取混悬液1ml(如混悬液中的内容物沉降时，振荡均匀分散后抽取)，将混悬液立即离心(转速为3000转/分)10分钟，取上清液作为供试品溶液，照含量测定项下的方法，同法测定，计算释放量。

表2 测试结果

3.动物实验

3.1动物与给药

选6只雄性成年鼠(Wistar或Sprague-Dawley)，分为两组，每组3只，按给药体积为0.05mL/100g，分别肌内注射给药1瓶，各组应在5分钟之内完成给药，以避免悬浮液中有沉淀生成。

3.2样品的采集与储存

于注射后24小时采血，然后每周采血2次，连续1个月(30天)。将动物轻度麻醉后，取静脉血0.5mL，制备血清待测(血清样品使用前冷冻保存)。

3.3放射免疫测定法

使用放射免疫分析法测定每个时间点血清样品中睾酮的浓度(ng/mL)。最后三个时间点，每个时间点的平均值均不得过1ng/mL。结果如表3所示。

表3 动物实验结果

尽管本发明已经参考示例性实施方案进行了描述，但应理解本发明不限于公开的示例性实施方案。在不背离本发明的范围或精神的情况下，可对本发明说明书的示例性实施方案做多种调整或变化。权利要求的范围应基于最宽的解释以涵盖所有修改和等同结构与功能。

Claims (10)

1.一种颗粒组合物，其特征在于，包含第一颗粒和第二颗粒，且所述第一颗粒为内部包埋醋酸亮丙瑞林的多孔性聚合物颗粒，所述第二颗粒为甘露醇颗粒。

2.根据权利要求1所述的颗粒组合物，其特征在于，所述第一颗粒为78-95重量份，所述第二颗粒为10-22重量份。

3.根据权利要求2所述的颗粒组合物，其特征在于，所述第一颗粒中所述多孔性聚合物为70-85重量份，所述醋酸亮丙瑞林为8-10重量份。

4.根据权利要求1所述的颗粒组合物，其特征在于，所述第一颗粒和所述第二颗粒的粒径分别在30-90μm之间，且所述第一颗粒中的多孔性聚合物为PLGA/PLA。

5.根据权利要求1所述的颗粒组合物，其特征在于，其为缓释颗粒组合物。

6.一种颗粒组合物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)使醋酸亮丙瑞林干燥粉分散于高分子聚合物的溶液中得到分散液，其中，所述溶液中溶剂的浓度为60重量％-80重量％；

(2)使所述溶剂在所述分散液中的浓度降至10重量％-20重量％，然后在-0.01至-0.1Mpa下发泡，从而进一步除去溶剂，得到发泡凝固物；

(3)将所述发泡凝固物进行初步粉碎得到粒径100-200μm的粗粉，然后使用气流粉碎进行二次粉碎形成粒径20-90μm的细粉；和

(4)使所述细粉与颗粒状甘露醇粉末按比例混合后冻干，得到所述颗粒组合物。

7.根据权利要求6所述的颗粒组合物的制备方法，其特征在于，所述醋酸亮丙瑞林干燥粉为冻干粉且平均粒径在0.5-10μm之间。

8.根据权利要求6所述的颗粒组合物的制备方法，其特征在于，所述溶剂选自氯化物溶剂、四氢呋喃、丙酮和乙酸乙酯组成的组中的至少之一。

9.根据权利要求6所述的颗粒组合物的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中，在震荡和超声条件下进行分散；所述步骤(3)中，气流粉碎时的气压为0.2-0.6Mpa。

10.根据权利要求1-5任一项所述的颗粒组合物在治疗性激素相关疾病中的应用。

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